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Influence de facteurs biotiques et abiotiques, induits et ... - IRD

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2.7 MISE EN CONTACT POUR L'ETUDE DE L'INGESTION DE B.<br />

SPHAERICUS<br />

Le comportement alimentaire <strong>de</strong> plusieurs espèces vis-à-vis <strong>de</strong> B.<br />

sphaericus a été étudié selon un protocole double :<br />

• contact continu : les organismes sont maintenus dans la<br />

suspension <strong>de</strong> B. sphaericus tout au long <strong>de</strong> la pério<strong>de</strong> d'expérimentation.<br />

• contact interrompu au bout d'un temps donné, les<br />

organismes sont rincés <strong>et</strong> placés en eau bipermutée stérile.<br />

Selon le comportement alimentaire <strong>et</strong> la sensibilité <strong>de</strong> l'espèce<br />

(déterminés par <strong>de</strong>s essais préalables) le contact a été interrompu à <strong>de</strong>s<br />

temps différents : 2 heures pour C. pipiens, Daphnia pulex <strong>et</strong> Cypris<br />

r<strong>et</strong>iculata, 1 heure pour Culis<strong>et</strong>a annulata <strong>et</strong> 24 h pour Chironomus<br />

plumosus. Les concentrations utilisées sont 1 mg/l pour Culis<strong>et</strong>a annulata<br />

<strong>et</strong> Chironomus plumosus ; 0,1 mg/l pour les autres espèces.<br />

Le dénombrement <strong>de</strong> toutes les cellules ou <strong>de</strong>s seules spores <strong>de</strong> B.<br />

sphaericus présentes dans le tube digestif <strong>de</strong> ces divers organismes est<br />

effectué au cours du temps par broyage en eau stétile <strong>de</strong>s 10 individus<br />

d'un lot préparé comme décrit ci-<strong>de</strong>ssus. L'échantillon est toujours scindé<br />

en <strong>de</strong>ux pour détermination du nombre total <strong>et</strong> du nombre <strong>de</strong> spores<br />

(après pasteurisation <strong>de</strong> l'aliquote correspondante).

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