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436 CULTURE DES MICROORGANISMES.
des cas spéciaux. Souvent on lui préfère le bouillon de peptone
additionné d'urée.
138. Stérilisation.—Les impuretés d'une culture proviennent
du milieu où se développent les microorganismes, de l'air qui peut
contaminer la culture par son contact, ou de la matière qui
a servi à l'ensemencement. Avec les liquides purs de tout germe,
il suffit d'observer les précautions nécessaires pour n'en introduire
aucun, on peut alors les employer tels quels. Mais, en général, le
vase qui renferme le milieu de culture garde des impuretés sur ses
parois, germes déposés par l'eau de lavage ou apportés par l'air.
Il faut se débarrasser des cellules ou spores étrangères si l'on veut
n'obtenir que la multiplication d'une seule espèce.
L'importance extrême de la stérilisation a été signalée pour la
première fois par Pasteur (1862), et c'est à lui qu'on doit les principales
méthodes employées aujourd'hui.
STÉRILISATION PAR LES AGENTS CHIMIQUES. — On ne se sert que
rarement d'agents chimiques, parce qu'en général ces agents
altèrent les milieux soumis à leur action ; mais, en principe,
tout réactif qui tue les microorganismes est un stérilisateur.
Les liquides employés pour désinfecter les vases et instruments,
sont : le sublimé en solution à 1 p. 100 ; l'alcool à 95° ou l'acide
sulfurique.
Leur emploi, comme nous venons de le dire, est assez restreint,
et on leur substitue un agent physique, simple et facile à manier,
la chaleur.
STÉRILISATION PAR ÉBULLITION. — L'ébullition simple suffit quelquefois,
mais on n'en doit faire usage que pour les milieux de
petit volume, qu'on promène dans la flamme de manière à les
soumettre complètement à la température de 100°. C'est un procédé
qu'on ne doit employer qu'à défaut d'autres, car beaucoup
de spores de microorganismes supportent des températures supérieures
à 100° sans perdre leur faculté germinative.
STÉRILISATION PAR CHAUFFAGE AU BAIN-MARIE — Ce procédé, quoique
ne donnant pas une température supérieure à 100°, est préférable
au précédent, parce qu'on peut faire durer l'action de la chaleur
pendant tout le temps nécessaire à la destruction des germes.
On doit maintenir dans l'eau bouillante les tubes et ballons de
manière que leur plus grande partie plonge dans le liquide, et
de façon aussi que les bouchons ou tampons d'ouate qui les ferment
soient préservés des projections du liquide bouillant.
La facilité avec laquelle un milieu de culture est stérilisé, est en
raison inverse de sa puissance nutritive.
Dans un grand nombre de cas, la température de 100° est nuisible:
le sucre et les composés ammoniacaux se décomposent, les