TYÖN NIMI - Theseus

kosteusvauriomikrobille (7-paneeli). Paneeleihin sisältyvät mikrobit on lueteltu
taulukossa 1.
4.2 Kuvaus vasta-ainemäärityksiä edeltävistä työvaiheista
4.2.1 Puhdaskantojen viljely
Antigeenin valmistamiseen tarvitaan mikrobien puhdaskantoja. Puhdasviljelmä on
elatusalustalla viljelty sieni- tai bakteerikanta. Kantoja eristetään tutkittavana olleista
seka- ja puhdasviljelmistä. Työterveyslaitoksen Kuopion aluetoimipisteen
ympäristömikrobiologian laboratoriossa viljellään ja säilytetään mikrobien
puhdaskantoja.
Viljely tehdään etanolilla puhdistetussa suojakaapissa. Puhdaskantaa kasvatetaan
alustalla, jolla kyseinen mikrobi parhaiten kasvaa. Sienille käytetään M2-agaria ja
bakteereille THG-agaria. Tarvittaessa käytetään myös muita agareita. Jokaiselle
uudelle kannalle annetaan tunnus. Kannat viljellään agarille levitystekniikalla tai
kolmen pisteen viljelmänä. Rihmasienet viljellään kolmipistetekniikalla, jolloin
alkuperäisestä pesäkkeestä otetaan pala viljelysauvaan ja painetaan agarin pintaan
kolmeen pisteeseen. Levitysviljelmässä alkuperäisestä pesäkkeestä otetaan pala
viljelysauvaan ja viljellään koko agarpinnalle. Kannat viljellään myös koeputkiin
valetuille agarpinnoille. Sienet viljellään M2-agar-vinopinnoille ja bakteerit THG-
agar-vinopinnoille.
Mesofiilisia kantoja kasvatetaan seitsemän vuorokautta +25 ± 5 ºC:ssa.
Gramnegatiivisia bakteereita kasvatetaan +25 ± 5 ºC:ssa tai +37 ± 3 ºC:ssa kaksi
vuorokautta. Termotolerantteja eli tavallista lämpimämpiä olosuhteita kestäviä
sienikantoja kasvatetaan +40 ± 3 ºC:ssa viisi vuorokautta ja termofiilisia eli kuumien
lähteiden bakteerikantoja +55 ± 3 ºC:ssa kolme vuorokautta. Kasvatuksen jälkeen
kannan puhtaus tarkistetaan ja tarvittaessa tehdään uusi eristäminen. Kantoja
säilytetään kylmiössä +7 ± 3 ºC:ssa.
30