TYÖN NIMI - Theseus
TYÖN NIMI - Theseus
TYÖN NIMI - Theseus
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
kosteusvauriomikrobille (7-paneeli). Paneeleihin sisältyvät mikrobit on lueteltu<br />
taulukossa 1.<br />
4.2 Kuvaus vasta-ainemäärityksiä edeltävistä työvaiheista<br />
4.2.1 Puhdaskantojen viljely<br />
Antigeenin valmistamiseen tarvitaan mikrobien puhdaskantoja. Puhdasviljelmä on<br />
elatusalustalla viljelty sieni- tai bakteerikanta. Kantoja eristetään tutkittavana olleista<br />
seka- ja puhdasviljelmistä. Työterveyslaitoksen Kuopion aluetoimipisteen<br />
ympäristömikrobiologian laboratoriossa viljellään ja säilytetään mikrobien<br />
puhdaskantoja.<br />
Viljely tehdään etanolilla puhdistetussa suojakaapissa. Puhdaskantaa kasvatetaan<br />
alustalla, jolla kyseinen mikrobi parhaiten kasvaa. Sienille käytetään M2-agaria ja<br />
bakteereille THG-agaria. Tarvittaessa käytetään myös muita agareita. Jokaiselle<br />
uudelle kannalle annetaan tunnus. Kannat viljellään agarille levitystekniikalla tai<br />
kolmen pisteen viljelmänä. Rihmasienet viljellään kolmipistetekniikalla, jolloin<br />
alkuperäisestä pesäkkeestä otetaan pala viljelysauvaan ja painetaan agarin pintaan<br />
kolmeen pisteeseen. Levitysviljelmässä alkuperäisestä pesäkkeestä otetaan pala<br />
viljelysauvaan ja viljellään koko agarpinnalle. Kannat viljellään myös koeputkiin<br />
valetuille agarpinnoille. Sienet viljellään M2-agar-vinopinnoille ja bakteerit THG-<br />
agar-vinopinnoille.<br />
Mesofiilisia kantoja kasvatetaan seitsemän vuorokautta +25 ± 5 ºC:ssa.<br />
Gramnegatiivisia bakteereita kasvatetaan +25 ± 5 ºC:ssa tai +37 ± 3 ºC:ssa kaksi<br />
vuorokautta. Termotolerantteja eli tavallista lämpimämpiä olosuhteita kestäviä<br />
sienikantoja kasvatetaan +40 ± 3 ºC:ssa viisi vuorokautta ja termofiilisia eli kuumien<br />
lähteiden bakteerikantoja +55 ± 3 ºC:ssa kolme vuorokautta. Kasvatuksen jälkeen<br />
kannan puhtaus tarkistetaan ja tarvittaessa tehdään uusi eristäminen. Kantoja<br />
säilytetään kylmiössä +7 ± 3 ºC:ssa.<br />
30