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Tecno Pan Diciembre 2017

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saron como μmol equivalente de trolox (TE) por g muestra.<br />

Análisis de la digestión de carbohidratos In Vitro<br />

(Equivlente glucemico de glucosa-GGE)<br />

El proceso de digestión in vitro se llevó a cabo con el método desarrollado por Foschia, Peressini,<br />

Sensidoni, Brennan y Brennan, 2015 [28] y utilizado por Gao, J.R. et al., 2016 [29]. El método estima la<br />

glucosa liberada de las muestras de galletas durante la hidrólisis enzimática durante 120 minutos<br />

para predecir la respuesta glucémica. En resumen: las digestiones se realizaron en macetas de<br />

plástico de 60 ml colocadas sobre una placa caliente de agitación a temperatura controlada (IKA<br />

RT 15, IKA Werke GmbH & Co. KG, Mendelheim, Alemania).<br />

Las muestras (0.5 g) se mezclaron con 30 ml de agua de ósmosis inversa y se mantuvieron a 37 ◦C<br />

durante 10 minutos con agitación constante en un astrónomo magnético. Se añadió una solución<br />

de pepsina (1 ml de pepsina 1 g en 10 ml de cloruro de hidrógeno 0,05 M (HCl) y se incubó durante 30<br />

min a 37 ° C. Se recogieron alícuotas (1 ml) de la mezcla de digestión y se añadieron a 4 mL de<br />

alcohol para detener la reacción enzimática. Se añadió Amiloglucosidasa (0.1 mL) a la mezcla de<br />

digestión para evitar la inhibición del producto final de α-amilasa pancreática.<br />

A continuación, se añadió a la mezcla una solución de pancreatina (5 ml de pancreatina al 2.5% en<br />

tampón de malato 0.1 M, pH 6.0). Se recogieron alícuotas de 1 ml adicionales a los 20, 60 y 120 min y<br />

se trataron como antes, luego se almacenaron a 4 ◦C hasta que se llevó a cabo el análisis de azúcares<br />

reductores. Se siguió el método del ácido 3.5 dinitrosalicílico (DNS) para medir el contenido de<br />

azúcar reductor de las muestras durante la digestión in vitro. La liberación de glucosa se calculó en<br />

mg de glucosa / g de muestra y se representó frente al tiempo y el área bajo la curva (AUC) se calculó<br />

dividiendo el gráfico en trapezoides.<br />

Análisis estadístico<br />

Todos los datos se analizaron mediante el software de análisis de datos, Minitab (versión 17, Minitab<br />

Inc., State College, PA, EE. UU.) para establecer diferencias significativas. El análisis de la varianza<br />

(unidireccional) se empleó con la prueba de Tukey con un intervalo de confianza del 95% (p

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