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Bolet%C3%ADn-63-Julio-2016

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Menten para el CO 2 , f actor específ ico y k cat c ) de los<br />

20 cultivos estudiados mostraron v ariabilidad<br />

interespecíf ica a las tres temperaturas de ensay o<br />

(15, 25 y 35 °C). La v ariabilidad en la ΔH a de los<br />

parámetros cinéticos fue significativ a entre todas las<br />

especies de cultivo y tipos f otosintéticos, si bien<br />

dicha v ariabilidad no se relacionó con el clima en la<br />

región de domesticación, posiblemente debido a<br />

procesos posteriores de selección artif icial. La<br />

aplicación de datos específ icos en los modelos<br />

matemáticos de fotosíntesis cuantificó la importancia<br />

de mejora de la Rubisco en los dif erentes cultivos<br />

según condiciones cambiantes de temperatura y<br />

disponibilidad de CO 2 .<br />

Bajo un trasf ondo ev olutivo, esta tesis<br />

presenta información relev ante para procesos de<br />

bioingeniería direccionados a la mejora de la<br />

Rubisco. Los análisis combinados de selección<br />

positiv a y coev olución resultan útiles para resolv er<br />

interacciones entre aminoácidos que deberían<br />

tenerse en cuenta a la hora de diseñar mejores<br />

Rubiscos. Además, la aplicación de los DT ay uda a<br />

generar relaciones entre la variabilidad aminoacídica<br />

y el ambiente en el que ev olucionan las especies.<br />

Por otra parte, esta tesis supone la evidencia más<br />

conv incente de que Rubiscos de dif erentes especies<br />

no sólo presentan diferencias en las constantes<br />

catalíticas a 25 ºC, sino que también presentan<br />

dif erente respuesta al rango fisiológico de<br />

temperaturas. Los datos aquí publicados of recen la<br />

posibilidad de aumentar la precisión de los modelos<br />

de f otosíntesis en hoja, y direccionan la mejora de<br />

Rubisco en especies de alto interés agrícola.<br />

Gene expression reprogramming during the<br />

formation of feeding sites induced by plant<br />

endoparasitic nematodes<br />

Javier Cabrera Chaves<br />

Directora: Carolina Escobar Lucas<br />

Univ ersidad de Castilla- La Mancha, Departamento<br />

de Ciencias Ambientales, Grupo de Biotecnología y<br />

Biología Molecular de Plantas.<br />

RESUMEN<br />

Los nematodos parásitos de plantas constituyen una<br />

de las principales plagas para la agricultura,<br />

causando pérdidas en la producción estimadas en<br />

un 12-15% a niv el mundial cada año. Entre ellos, los<br />

nematodos endoparásitos sedentarios, establecen<br />

una relación altamente sofisticada con la planta,<br />

induciendo sus propias células de alimentación en el<br />

interior de las raíces, las células gigantes (CGs) y<br />

los sincitios en el caso de los nematodos f ormadores<br />

de agallas o f ormadores de quistes,<br />

respectivamente. En el caso de los nematodos<br />

f ormadores de agallas del género Meloidogyne spp.,<br />

el estadio de v ida libre, juv eniles (J2), penetran en<br />

la raíz por la zona subapical y migran<br />

intercelularmente hacia el ápice radicular donde<br />

giran para introducirse en el cilindro v ascular. Una<br />

v ez en el cilindrov ascular, el nematodo se establece<br />

y selecciona entre 5 y 8 células para dif erenciarlas<br />

en sus células alimentación, las CGs (Figura 1). Las<br />

CGs son de un tamaño alrededor de cien v eces<br />

may or a sus células vecinas del cilindro vascular.<br />

Son células de transferencia que actúan como<br />

sumidero de nutrientes de la planta para alimentar al<br />

nematodo, causando síntomas como enanismo o<br />

marchitamiento en la parte aérea de las plantas.<br />

Figura 1. Imagen de las células gigantes induci das por<br />

Meloidogyne javanica en la línea usada como sensor de<br />

respuesta a auxinas, DR5::GUS en Arabidopsis a los 4<br />

días post- infección. La acti vidad GUS es muy fuerte en las<br />

células gigantes y en las células vecinas en el cilindro<br />

vascular. El nematodo ha sido col oreado en rosa para<br />

facilitar su visualización.<br />

El objetiv o general de esta tesis f ue el de entender<br />

los cambios en las expresión génica que permiten la<br />

dif erenciación de células vasculares de la raíz en<br />

células altamente especializadas como las CGs.<br />

Con este objetivo, en nuestro grupo de investigación<br />

se obtuv ieron previamente los transcriptomas de los<br />

sitios de alimentación (las CGs microdiseccionadas<br />

por láser y las agallas) inducidas por M. javanica en<br />

dos plantas modelos como Arabidopsis thaliana y<br />

tomate. Durante la realización de esta tesis se<br />

realizó el estudio comparativ o de estos<br />

transcriptomas. En primer lugar, pudimos observ ar<br />

en ambas especies que los transcriptomas de las<br />

CGs y de las agallas son muy diferentes y a que la<br />

may oría de los genes dif erencialmente expresados<br />

en CGs no se encuentran diferencialmente<br />

expresados en las agallas que contienen estas CGs,<br />

ref orzando la idea de la necesidad del estudio de<br />

estas células de alimentación aisladas del resto de<br />

tejidos para conocer sus marcas moleculares.<br />

Cuando realizamos un estudio de expresión<br />

dif erencial de los transcriptomas de CGs en un<br />

estadio temprano de desarrollo, 3 días post-<br />

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