O papel modulador do gene AIRE - capes

RESULTADOSFigura 19. Eletroforese de produtos de rt-PCR semiquantitativa para o gene Airerealizada com as seguintes amostras: mTEC; mTEC + lipofectamina; mTEC + RNAiirrelevante (Cneg); mTEC + RNAi anti-HPRT (Cpos); mTEC + RNAi anti-Aire (RNAi).** É possível observar uma diminuição maior do gene Aire na amostra submetida àpresença de RNAi anti-Aire.6.4. Amplificação de cDNA para a confecção de microarraysA primeira etapa para a construção dos microarrays consistiu naamplificação por PCR dos insertos de cDNA (biblioteca IMAGE)diretamente dos clones em cultura bacteriana.Dos 624 clones selecionados da biblioteca murina e humana, 82,5%foram corretamente amplificados (uma única banda em gel), 6,5% nãoamplificaram e 11% apresentaram bandas múltiplas (Figura 20). Oresultado típico destas amplificações pode ser observado na figura 21.O microarray utilizado neste trabalho foi preparado comseqüências de cDNA de genes cujas funções são relacionadas ao sistemaimune e também algumas ESTs (Expressed Sequence Tags) com funçãodesconhecida.76