O papel modulador do gene AIRE - capes

MATERIAL E MÉTODOS4. MATERIAL E MÉTODOS4.1. Linhagem celular mTEC 3.10 (células tímicas epiteliais medulares)No presente trabalho utilizou-se a linhagem de células tímicasmedulares primárias (mTEC 3.10), gentilmente cedida pelo Prof. Dr.Wilson Savino, coordenador do Laboratório de Pesquisas sobre o Timo daFundação Instituto Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) do Rio de Janeiro.As células da linhagem 3.10 foram estabelecidas a partir do timo decamundongos da linhagem C57Bl/6 e o fenótipo de células medulares foideterminado por imunofenotipagem com anticorpo anti Th-4 (Mizuochiet al., 1992). Elas foram avaliadas usando um painel de anticorposmonoclonais anti-citoqueratina, confirmando o fenótipo medular distinto(Nihei et al., 2003). Além disso, confirmou-se pela técnica de FACS queestas células são CD80 + e, portanto, aptas a PGE (figura 6).As células da linhagem 3.10 são aderentes e foram cultivadas emgarrafas de cultura de 75 cm 3 contendo 20 ml de meio RPMI 1640 e 10%de soro bovino fetal (SBF) a 37°C, em estufa com atmosfera de 5% CO2.36