O papel modulador do gene AIRE - capes

INDICE DE FIGURASFigura 1. Desenvolvimento do microambiente epitelial do timo........................... 5Figura 2. Esquema representativo da estrutura do timo e de todos os seuscomponentes celulares.................................................................................................. 6Figura 3. Estrutura e função do timo........................................................................ 12Figura 4. Diferenciação das células epiteliais tímicas............................................ 16Figura 5. Representação de diversos tecidos e órgãos parenquimais no timomurino........................................................................................................................... 21Figura 6. Padrão de expressão de CD80 em mTEC 3.10........................................ 37Figura 7. Esquema dos principais tipos de delineamento experimental paramicroarrays..................................................................................................................... 50Figura 8. Preparação da fita simples de cDNA incorporada com amino alil..... 53Figura 9. Preparação do cDNA marcado com CyDye............................................ 54Figura 10. “Pipeline” utilizado na análise de dados de microarrays em lâminas devidro............................................................................................................................... 61Figura 11: Comparação entre a distância relativa observada d(i) e esperadadE(i).............................................................................................................................. 63Figura 12. Fluxograma do trabalho mostrando o sistema modelo experimentalutilizando células tímicas epiteliais medulares (mTEC 3.10).............................. 69Figura 13. Células mTEC 3.10 após 24 h em cultura em presença de RNAiirrelevante marcado com Cy3.................................................................................... 72Figura 14. Sequência do RNA interferente para o transcrito do gene Aire........ 72Figura 15. Eletroforese em gel de agarose de produtos de rt-PCRsemiquantitativa para a detecção do transcrito do gene Aire............................... 73Figura 16. Eletroforese em gel de agarose de seis amostras de RNA totalprovenientes de timos de camundongos C57Bl/6 adultos................................... 74Figura 17. Eletroforese em gel de agarose de amostras de RNA totalprovenientes de células mTEC.................................................................................. 74Figura 18. Eletroforese de produtos de rt-PCR semiquantitativa para o geneHPRT............................................................................................................................. 75Figura 19. Eletroforese de produtos de rt-PCR semiquantitativa para o geneAire............................................................................................................................... 76Figura 20. Eficiência das amplificações por PCR dos clones de cDNA IMAGEutilizados no preparo do microarray...................................................................... 77