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16. Sciacquare i vetrini.17. Controcolorare con ematossilina.18. Disidratare, pulire e montare le sezioni.E. Modifiche alla pubblicazione precedenteSono state apportate correzioni solo al layout. Il testo non ha subito alcuna variazione rispetto alla versione precedente.F. Data di pubblicazione23rd June 2004 (CEprotocol/HTAUT).NCL-CD31-1A10Page 15
Novocastra TM Lyophilisierter Monoklonaler Maus-AntikörperCD31 (PECAM-1)Produkt-Nr.: NCL-CD31-1A10VerwendungszweckFür in-vitro-Diagnostik.NCL-CD31-1A10 ist für den qualitativen Nachweis der CD31 (PECAM-1)-Moleküle in Paraffinschnitten mittels Lichtmikroskopie gedacht.Die klinische Bewertung einer vorliegenden bzw. fehlenden Färbung sollte durch morphologische Studien mit entsprechenden Kontrollenergänzt und im Kontext der Krankengeschichte des Patienten und anderer diagnostischer Tests von einem qualifizierten Pathologenvorgenommen werden.VerfahrensgrundlageImmunhistochemische (IHC) Färbetechniken gestatten die optische Darstellung von Antigenen mittels sequentieller Anwendungeines spezifischen Antikörpers zum Antigen (primärer Antikörper), eines sekundären Antikörpers zum primären Antikörper und einesEnzymkomplexes mit einem chromogenen Substrat, jeweils getrennt durch dazwischen liegende Waschschritte. Die enzymatischeAktivierung des Chromogens führt zu einem sichtbaren Reaktionsprodukt am Ort des Antigens. Die Probe kann dann gegengefärbtund mit einem Deckglas versehen werden. Die Ergebnisse werden mithilfe eines Lichtmikroskops interpretiert und unterstützen dieDifferentialdiagnose pathophysiologischer Prozesse, die mit einem bestimmten Antigen assoziiert sein könnten.Klon1A10ImmunogenProkaryortisches rekombinantes Fusionsprotein, das einem Teil der extrazellulären Domäne hinter der Signalsequenz des CD31(PECAM-1) Moleküls entspricht.SpezifitätHumanes CD31 (PECAM-1) Molekül.ReagenzzusammensetzungNCL-CD31-1A10 ist ein lyophilisierter Gewebekulturüberstand, der 15 mmol/l Natriumazid als Konservierungsmittel enthält. DerBenutzer muss den Inhalt des Fläschchens mit dem korrekten Volumen sterilen, destillierten Wassers entsprechend den Angaben aufdem Produktetikett rekonstituieren.Ig-KlasseIgG1Total ProteinGesamtproteinkonzentration1,0–8,0 g/l. Siehe Angaben auf dem Produktetikett bezüglich der chargenspezifischen Gesamtproteinkonzentration.AntikörperkonzentrationGrößer als oder gleich 57 mg/l laut ELISA-Bestimmung. Hinsichtlich der chargenspezifischen Ig-Konzentration siehe Angaben auf demProduktetikett.GebrauchsempfehlungenImmunhistochemie (siehe D. Vorgehensweise) auf Paraffinschnitten. Empfohlene Verdünnung: 1:50–1:100 über einen Zeitraum von60 minuten bei 25 o C. Es wird empfohlen, das Hochtemperatur-Antigen-Retrieval mit 0,01 mol/l Citrat-Retrieval-Lösung (pH-Wert 6,0) zuverwenden. Dies ist nur eine Empfehlung, und die Benutzer sollten ihre eigenen optimalen Arbeitsverdünnungen bestimmen.Lagerung und StabilitätUngeöffneten Antikörper bei 2–8 o C lagern. Unter diesen Bedingungen kommt es bis zum Ablauf des auf dem Produktetikettangegebenen Verfallsdatums zu keiner bedeutenden Verschlechterung der Produktleistung. Nach Ablauf des Verfallsdatums (auf demBehälteretikett) darf das Produkt nicht mehr verwendet werden. Der rekonstituierte Antikörper bleibt bei einer Lagertemperatur von2–8 o C mindestens zwei Monate lang stabil. Für eine langfristige Lagerung wird empfohlen, Aliquoten des rekonstituierten Antikörpersbei -20 o C einzufrieren (frostfreie Gefrierschränke werden nicht empfohlen). Wiederholtes Einfrieren und Auftauen muss vermiedenwerden. Die Arbeitsverdünnungen müssen am Tag ihrer Verwendung angesetzt werden. Nach Gebrauch sofort wieder bei 2–8 o C lagern.Lagerbedingungen, die von den oben genannten Bedingungen abweichen, müssen vom Benutzer verifiziert werden.ProbenvorbereitungFür paraffineingebettete Gewebeschnitte ist das empfohlene Fixativ 10% neutral gepuffertes Formalin.Warnhinweise und SicherheitsmaßnahmenDieses Reagenz wurde aus Zellkulturüberstand zubereitet. Das Reagenz ist ein biologisches Produkt und sollte mit entsprechenderVorsicht gehandhabt werden.Die Molarität des Natriumazids in diesem Reagenz beträgt 15 mmol/l. Ein Sicherheitsdatenblatt (MSDS) für Natriumazid ist auf Anfrageerhältlich.Die entsprechenden nationalen und lokalen Bestimmungen und Vorschriften zur Entsorgung potentiell giftiger Komponenten sindeinzuhalten.NCL-CD31-1A10Page 16
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