1 - Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal

ContenidoDIAGNÓSTICO FITOSANITARIOAspectos de la biología de Colletotrichum musae (Berk. & Curt.) v. Arx y Fusarium pallidoroseum (Cooke)Saccardo, agentes causales de la pudrición de la corona de los bananos (Musa sp.) en Cuba 3Luis Pérez e Ibis VidalNuevos registros fúngicos en leguminosas de la Estación de Pastos y Forrajes de Niña Bonita 11Giselle Estrada, Danay López y Maria Ofelia LópezDeterminación del medio de cultivo para el crecimiento y esporulación de Sarocladium oryzae (Sawada) Gams & Hawks 15Tania Bonilla Bernal, Ileana Sandoval Ramírez, María Ofelia López y Ángela PorrasMANEJO INTEGRADO DE PLAGASEvaluación de diferentes atrayentes e insecticidas para cebo formicida 19Luis L. Vázquez, Eliel Peña y Dinorah LópezEfecto de Verticillium lecanii y Beauveria bassiana sobre Cotesia americanus (Lepeletier) (Hymenoptera: Braconidae),parasitoide de larvas de la primavera de la yuca (Erinnyis ello L.) 25Luis L. VázquezImpacto del manejo integrado de plagas en la recuperación de los enemigos naturales en el cultivode la papa (Solanum tuberosum L.) 29Ana Ibis Elizondo, Carlos A. Murguido, Emilio Fernández, Máximo Martínez, Lázaro Licor,Leonides Castellanos y Roquelina JiménezEstrategias de lucha para evitar epidemias provocadas por la enfermedad pata prieta del tabaco en Cuba 35Ana Fernández Morales, Berta Lina Muiño, Verónica Toledo, María L. Martínez, Wendy Wong, Raquel Arévalo,María D. Ariosa y Adriana HernándezCONTROL QUÍMICOMovimientos de algunos plaguicidas en el suelo 43G. Dierksmeier, R. Hernández, Caridad Ricardo, Maria Nela Llanes, Ana Cecilia Linares y Zortan CárdenasUtilización de la resina XAD-2 en el análisis de plaguicidas en agua 51Maribel García, Cecilia Linares y Caridad RicardoControl químico de Thrips palmi Karny en el cultivo de la papa (Solanum tuberosum L.) 55Carlos A. Murguido Morales, Ana Ibis Elizondo y Eliel PeñaCOMUNICACIÓN PARA LA FITOPROTECCIÓNHistoria de la cuarentena de plantas en Cuba (período 1900-1980) 61José Joaquín Torrent Molina

ContentsPHYTOSANITARY DIAGNOSISBiology aspects of Colletotrichum musae (Berk. & Curt.) v. Arx and Fusarium pallidoroseum (Cooke) Saccardo, causal agentsof rot crown of banana (Musa sp.) in Cuba 3Luis Pérez and Ibis VidalNew fungi records in legume of Pasture and Forages Station of Niña Bonita 11Giselle Estrada, Danay López and Maria Ofelia LópezDetermination of culture media for growth and sporulation of Sarocladium oryzae (Sawada) Gams & Hawks 15Tania Bonilla Bernal, Ileana Sandoval Ramírez, María Ofelia López and Ángela PorrasINTEGRATED PEST MANAGEMENTEvaluation of different attractive and insecticides for formicidal bait 19Luis L. Vázquez, Eliel Peña and Dinorah LópezEffect of Verticillium lecanii and Beauveria bassiana over Cotesia americanus (Lepeletier) (Hymenoptera: Braconidae),parasitoid of larvae of Erinnyis ello L. 25Luis L. VázquezImpact of Integrated Pest Management in recovery of natural enemies in potato (Solanum tuberosum L.) 29Ana Ibis Elizondo, Carlos A. Murguido, Emilio Fernández, Máximo Martínez, Lázaro Licor,Leonides Castellanos and Roquelina JiménezFight strategies to avoid epidemies caused by disease tobacco black shank in Cuba 35Ana Fernández Morales, Berta Lina Muiño, Verónica Toledo, Maria L. Martínez, Wendy Wong, Raquel Arévalo,María D. Ariosa and Adriana HernándezUse of XAD-2 resin in pesticides analysis in water 43Maribel García, Cecilia Linares and Caridad RicardoCHEMICAL CONTROLMovement of some pesticides in soil 51G. Dierksmeier, R. Hernández, Caridad Ricardo, Maria Nela Llanes, Ana Cecilia Linares and Zortan CárdenasChemical control of Thrips palmi Karny in potato (Solanum tuberosum L.) 55Carlos A. Murguido Morales, Ana Ibis Elizondo and Eliel PeñaCOMUNICATION FOR PHYTOPROTECTIONHistory of plant quarantine in Cuba (1900-1980) 61José Joaquín Torrent Molina

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002DiagnósticofitosanitarioASPECTOS DE LA BIOLOGÍA DE COLLETOTRICHUMMUSAE (BERK. & CURT.) V. ARX Y FUSARIUMPALLIDOROSEUM (COOKE) SACCARDO, AGENTESCAUSALES DE LA PUDRICIÓN DE LA CORONADE LOS BANANOS (MUSA SP.) EN CUBALuis Pérez e Ibis VidalInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600, c.e.: inisav@ceniai.inf.cuRESUMENABSTRACTSe estudió el efecto de la temperatura sobre la germinación de los conidios,el desarrollo de las colonias, la esporulación en cultivo in vitro,el período de incubación y el desarrollo de las necrosis en coronas debananos del clon Cavendish gigante artificialmente inoculadas. Se obtuvieronecuaciones de regresión cuadráticas para ajustar los valoresde germinación de los conidios y de crecimiento de las colonias enfunción de la temperatura. La temperatura óptima para la germinaciónde los conidios y el crecimiento de las colonias de F. pallidoroseum yC. musae fue 27C. En temperaturas inferiores a 15 C, la germinacióny el crecimiento de las colonias fue muy inhibida. La evolución dela pudrición de la corona en frutos inoculados artificialmente fue retrasadaa temperaturas debajo de 15 C en relación con las incubadas a25-27 C. Los conidios de ambas especies requieren de la presenciade una lámina de agua libre para la germinación. C. musae crece bienen agar Saboreaud, PDA y agar malta; en donde la esporulación fuemás intensa. C. musae crece y esporula abundantemente a temperaturade 25-30 C en un pH comprendido entre 5-6. Los resultados demuestranla importancia de someter la fruta tan pronto como seaposible posterior a la cosecha a temperaturas entre 13-14 C.Palabras claves: bananos, pudrición de la corona, Colletotrichum musae,Fusarium pallidoroseum, biología, medios de cultivo, incubaciónen diferentes temperaturasThe effect of temperature on conidial germination, colony growth, sporulationin vitro, incubation period and development of crown rot on artificiallyinoculated Giant Cavendish banana fruits was studied. It wasobtained quadratic regression equations to fit the values of germinationand colony growth as a function of temperature and to determinethe optimal temperature for germination and colony growth. The optimaltemperature for F. pallidoroseum and C. musae conidial germinationand colony growth was 27C. At temperatures below 15 C,germination and colony growth were strongly inhibited. Crown rot developmenton artificially inoculated fruits, was strongly delayed at temperaturesbelow 15 C with regard to development on fruits incubatedat 25-27 C. Conidia of both species requires the presence of free waterlaminae for germination. C. musae growth abundantly on Saboreaudagar, PDA y and malt agar; but on malt agar the sporulation washigher. C. musae growths and sporulates optimally at temperatures inthe range de 25-30 C in pH on the range of 5-6. The results show theimportance of fruit refrigeration at temperature between 13-14C asshort as possible after harvesting and boxing.Key words:banana, rot crown, Colletotrichum musae, Fusarium pallidoroseum,biology, culture media, incubation at different temperaturesINTRODUCCIÓNEn la década del sesenta, el clon Gros Michel tuvoque ser remplazado por clones del subgrupo Cavendishdebido a su susceptibilidad al mal de Panamá causadopor Fusarium oxysporum f.sp. cubense (E. F. Smith)Snyder y Hansen, lo que hizo también necesario cambiarel procedimiento de empaquetamiento de la frutade racimos enteros a manos aisladas y racimos dispuestosen cajas, debido a la alta susceptibilidad de los frutosCavendish a los daños por manipulación y laspudriciones de poscosecha [Simmonds, 1966; Stover,1972; Slabaugh y Grove, 1982; Snowdon, 1990; Slabaugh,1994].Se han informado muchas especies de hongos asociadasa la enfermedad de la pudrición de la corona de losbananos en diferentes partes del mundo [Greene yGoos, 1963; Lukezic et al., 1967; Burden, 1974; Slabaughy Grove, 1982; Slabaugh, 1994; Marin et al.,1997]. En un estudio conducido entre 1986 y 1989 enCuba, Pérez et al. (1990) determinaron las especies dehongos asociadas a este desorden en las dos mayoresplantaciones de bananos Cavendish de Cuba. Las dosespecies más frecuentemente aisladas resultaron serFusarium pallidoroseum (Cooke) Saccardo y Colletotrichummusae (Berk. & Curt.) v. Arx, con una frecuenciade más del 60 % de los aislados realizados. Colletotri-fitosanidad/3

Pérez y Vidalchum musae es además el agente causal de la antracnosisde los bananos y plátanos [Stover 1972; Snowdon,1990; Slabaugh, 1994; Lapeyre de Bellaire y Mourichon,1997]. El efecto de los factores ambientales sobreel ciclo de C. musae fue estudiado por Al-Zaemey et al.(1994).En el presente informe se brindan los resultados del estudiodel efecto de la temperatura y humedad relativasobre la germinación de los conidios, el crecimiento delas colonias, la esporulación de F. pallidoroseum y C. musaey el desarrollo de las necrosis, así como del crecimientode C. musae, en diferentes medios de cultivo.MATERIALES Y MÉTODOS1. Efecto de la temperatura y humedad relativa (Hr) en lagerminación de los conidios, el crecimiento de las colonias, laesporulación y el desarrollo de la pudrición de la corona causadopor Fusarium pallidoroseum (Cooke) Saccardo y Colletotrichummusae (Berk. y Curt.) v. Arx.Fueron obtenidas suspensiones conidiales en agua destiladaestéril de cultivos de 7-10 días de edad de F. pallidoroseumy C. musae cultivados en agar de papadextrosa (PDA) y agar de extracto de malta al 2%, respectivamente.Se pusieron gotas de las suspensiones deconidios en portaobjetos (cuatro placas/temperatura),y se incubaron en cámaras húmedas a temperaturas de5, 10, 15, 20, 25, 27, 30, 35 y 40°C. Después de veinticuatrohoras de incubación se evaluó la germinacióntomando cincuenta esporas/réplica.Para determinar la humedad relativa (Hr) mínima yóptima para la germinación de los conidios, se utilizaronlos provenientes de cultivos, que fueron colocadosen portaobjetos secos,yasuvezensoportes en el interiorde placas de Petri que tenían en el fondo solucionessalinas saturadas [Anónimo, 1985], que posteriormentese sellaron e incubaron a 25°C. Las variantesde Hr estudiadas fueron 61, 81, 88, 90 99 y 100%.Para obtener la Hr del ciento por ciento, se utilizó aguabidestilada en el fondo de la placa. Se incluyó ademásun testigo con dos gotas de agua.Para determinar el efecto de la temperatura sobre elcrecimiento de las colonias, se sembraron placas dePetri de 90 mm de diámetro (que contenían 12 mLde PDA y de agar malta, para Fusarium pallidoroseum yC. musae, respectivamente), con discos micelio de 4 mmde diámetro provenientes de cultivos puros. Se incubaroncinco placas/temperatura en incubadoras a 10, 15,20, 25, 27, 30, 35 y 40 °C. Se midió el diámetro de lascolonias diariamente, hasta que cubrieron por completola superficie del medio.Para determinar el efecto de la temperatura sobre laformación de fructificaciones de C. musae después desiete días de incubadas las colonias, se procedió a4/fitosanidadcontar el número de acérvulos en un área de 1cm 2 ,encuatro zonas de la placa Petri escogidas al azar, calculándosea partir de este dato la cantidad total de acérvulosen la superficie de la placa. Para determinar elefecto de la temperatura sobre la intensidad de la esporulaciónde C. musae y F. pallidoroseum, se procedió a tomardiariamente un disco de micelio de cada placa(cinco por temperatura), los que se suspendieron en5 mL de agua en un tubo de ensayo, agitando fuertementepara lograr suspender los conidios. Se colocaronen portaobjetos cinco gotas (0,02 mL) de las suspensionesobtenidas de cada hongo, en las que se contó lacantidad de conidios en 10 campos del microscopio tomadosal azar.Racimos del clon Cavendish gigante fueron cuidadosamentedesmanados, divididos en fragmentos (clusters)de 4-5 dedos. Las coronas se lavaron con agua corrientey fueron desinfectadas superficialmente con una soluciónde hipoclorito de sodio al 1% por tres minutos; seenjuagaron con agua estéril, se inocularon aplicandouna suspensión conidial de ambos hongos (10 conidios/campomicroscópico de 160 x) en el tejido de lacorona expuesto y se pusieron en bolsas plásticas selladascon papel de filtro humedecido. Cuatro clusters/temperaturay patógeno inoculado fueron entoncesincubados a 10, 15, 20, 25, 30, 35, y 40 °C. Un clustersin inocular fue incubado a cada temperatura para determinarel efecto de la infección natural sobre los resultados.Se realizaron observaciones diarias para determinar laprimera aparición de los síntomas y el desarrollo posteriorde la pudrición de la corona usando la escala de severidadmostrada en la Tabla 1. Las observacionesfueron realizadas hasta que se alcanzó la completa pudriciónde las coronas y los pedúnculos de todas lasfrutas.Tabla 1. Escala de severidad para evaluarel desarrollo de la pudrición de la corona en frutasEscalaGrado Descripción0 Sana1 Evidencia de los primeros síntomas2 1/3 tejido de la corona podrido3 1/2 tejido de la corona podrido4 2/3 tejido de la corona podrido5 Pudrición del tejido de la corona pero lospedúnculos parecen sanos.6 Principio de necrosis de los pedúnculos7 1/2 de los pedúnculos podridos8 Todos los pedúnculos de la fruta podridos.2. Crecimiento y esporulación de Colletotrichum musae endiferentes medios de cultivo y pH.Para determinar el medio de cultivo más idóneo para elcrecimiento y la esporulación de C. musae, se prepararonlos cultivos en placas de Petri de forma similar a la

Aspectos de la biología de Colletotrichum musae...explicada en el punto 1, pero todas las placas se incubarona 27 °C. Los medios de cultivo utilizados fueronPDA, agar avena de maíz, agar Leonian, agar Saboreaudy agar malta. Se sembraron cinco placas de cadamedio de cultivo. Las observaciones del crecimiento delas colonias y la esporulación se realizaron de forma similara la explicada en el punto 1.RESULTADOSEfecto de temperatura en germinación de conidios, crecimientode las colonias y el desarrollo de la pudrición de la corona causadapor F. pallidoroseum y C. musaeLa acción de la temperatura sobre la germinación de losconidios de F. pallidoroseum y C. musae después de la incubacióna diferentes temperaturas se muestran en laFig. 1. Las temperaturas en el rango de 20 a 30°C sonmuy favorables a la germinación de los conidios. Lastemperaturas óptimas para la germinación son 27 y30°C para C. musae y F. pallidoroseum, respectivamente.A temperaturas inferiores a 20 °C se inhibe fuertementela germinación; en el rango de 10-14°C la germinaciónde los conidios de ambas especies es inferior al20%. La germinación de los conidios de C. musae comenzóantes de ocho horas en las temperaturas de 20 y35°C, y después de diez horas y media a 15 y 35°C.En la Tabla 2 aparece la germinación de los conidios deF. pallidoroseum y C. musae en diferentes condiciones dehumedad relativa. F. pallidoroseum requiere de la presenciade agua libre para germinar. C musae germinósólo en presencia de agua libre yaHrdeciento porciento. En general ambos patógenos requieren de lapresencia de agua libre para su germinación.El crecimiento de las colonias de F. pallidoroseum y C. musaeen diferentes temperaturas se muestra en la Fig. 2. Latemperatura óptima para el crecimiento de ambas especiefue 27°C. A temperaturas en el rango de 20-30 °Cel crecimiento de los dos hongos fue intenso. En temperaturasinferiores a 20°C, ocurre una marcada reducciónen la intensidad de crecimiento del micelio, másfuerte en el caso de C. musae;a15°C el crecimiento micelialde C. musae era menor del 15% del crecimientomáximo a temperatura óptima, mientras que el de F. pallidoroseumalcanzó el 40%.Figura 1. Efecto de la temperatura sobre la germinación de los conidios de F. pallidorioseum y C. musaeTabla 2. Efecto de la humedad relativa (Hr) sobre la intensidadde la germinación de los conidios de F. pallidoroseum y C. musaeHumedad relativaPorcentaje de conidios germinadosF. pallidoroseum C. musaeAgua libre 100 61,5100 0 7,597 0 095 0 091 0 0fitosanidad/5

Pérez y VidalFigura 2. Crecimiento de las colonias de Fusarium pallidoroseum y Colletotrichum musaeen diferentes temperaturasEn la Tabla 3 aparece la producción de acérvulos en lascolonias de C. musae incubadas a diferentes temperaturas.Como puede apreciarse, la mayor producción deacérvulos ocurrió en el rango de 15-35 o C. La producciónde acérvulos fue significativamente superior a latemperatura de 20 °C en relación con el resto de lastemperaturas.Tabla 3. Efecto de la temperaturasobre la formación de acérvulosde Colletotrichum musaeoCCantidad deacérvulos/cm 2 Signif. 5%10 44,6 c15 60,9 b20 82,2 a25 58,6 bc30 57,4 bc35 1,3 dES x 0,052La esporulación del patógeno (Fig. 3), comenzó a partirde tres días a las temperaturas de 20, 25, 27 y 30 °C. A15y35°C comenzó a partir de seis y cinco días respectivamente.La máxima formación de conidios ocurrióa 25 y 27 °C a los seis y siete días de incubación.Posteriormente a este período se observó una declinaciónen la producción de conidios. La máxima producciónde conidios a 15 °C fue inferior al 12% de losproducidos a 25 °C.En la Tabla 4 aparece la duración de la incubación delos frutos inoculados con C. musae y F. pallidoroseum endiferentes temperaturas. Como puede apreciarse en latabla, la temperatura tiene un efecto marcado en la duraciónde la incubación de la enfermedad. En ambospatógenos, a 10 °C la duración de la incubación fue entretres y seis veces más larga que a 25 y 30°C.La evolución de la pudrición de la corona a diferentestemperaturas en frutas inoculadas con F. pallidoroseumy C. musae, se muestra en las Figs. 4 y 5, respectivamente.Hubo una inhibición fuerte del desarrollo de la pudricióna temperaturas por debajo de 15 °C, que seexpresó en días de retraso de la aparición de los síntomasy su desarrollo. La rapidez del desarrollo de la pudriciónde la corona en diferentes temperaturas en lasfrutas inoculadas se correlacionó con el efecto de temperaturaen el crecimiento de las colonias. A 15 °C latasa de desarrollo de la pudrición de la corona fue aproximadamentela mitad de la tasa de desarrollo a 25-30 °C.En las frutas incubadas a 10 °C se observó un retrasode la primera aparición de los síntomas de doce y ochodías para F. pallidoroseum y C. musae, respectivamente,en relación con las incubadas a 25- 30 °C.Tabla 4. Efecto de la temperatura sobre la duraciónde la incubación de frutos inoculados con F. pallidoroseumy Colletotrichum musaeTemperaturaoCDuración de la incubación (días)C. muae F. pallidoroseum10 9 1315 5 320 5 –22 – 325 3 227 – 230 2 235 7 26/fitosanidad

Aspectos de la biología de Colletotrichum musae...Figura 3. Efecto de la temperatuira en la esporulación de C. musaeFigura 4. Efecto de la temperatura de incubación en la velocidad de desarrollo de la pudriciónde la corona en clusters de bananos Cavendish gigante inoculados con Fusarium pallidoroseumFigura 5. Efecto de la temperatura de incubación en la velocidad de desarrollo de la pudrición de la corona enclusters de bananos Cavendish gigante inoculados con Colletotrichum musaefitosanidad/7

Pérez y Vidal38 sin síntomas sin síntomas2. Crecimiento y esporulación de Colletotrichum musaeen diferentes medios de cultivos y pHEn la Fig. 6, aparecen las curvas del crecimiento de lascolonias de C. musae en diferentes medios de cultivo. Elhongo creció bien en los medios agar de papa dextrosa(PDA), Saboreaud, avena y malta, sin diferencias entreellos después de una semana de incubación. Sin embargo,la mejor esporulación (Fig. 7), fue obtenida en elmedio malta y seguidamente en agar Saboreaud. Apartir de los ocho días puede observarse una abundantecantidad de conidios en medio malta, y el máximo a los 13 días.En el resto de los medios la esporulación fue muy pobre.Las colonias de C. musae crecen óptimamente en el rangode pH de 5-7. Sin embargo, la mayor producción deconidios se obtuvo a pH 5 después de nueve días de incubación(Figs. 8 y 9). Se observó una disminución deFigura 6. Crecimiento de las colonias de Colletotrichum musae en diferentes medios de cultivoFigura 7. Esporulación de Colletotrichum musae en diferentes medios de cultivo8/fitosanidad

Aspectos de la biología de Colletotrichum musae...Figura 8. Efecto del pH sobre el cumplimiento de las colonias de Colletotrichum musae en el medioagar maltaFigura 9. Efecto del pH en la esporulación de Colletotrichum musae en medio agar maltala esporulación a partir del noveno día de incubación,que puede deberse al cambio de pH del medio.DISCUSIÓNLa temperatura tiene un efecto marcado en la germinación,esporulación, la velocidad e intensidad de crecimientode las colonias de C. musae y F. pallidoroseum, asícomo en la velocidad de desarrollo de pudrición de lacorona causado por estos hongos en las frutas inoculadas.Ambos crecen óptimamente en el rango de 25-30 °Cy se inhiben fuertemente por temperaturas inferiores a15 °C. Estos datos están en concordancia con informesde Goos y Tshirsch (1962), sobre el efecto de temperaturaen C. musae y Lukesic et al. (1967), sobre F. roseum(sinónimo F. pallidoroseum; Booth y Sutton, 1984). Eldesarrollo de la pudrición de la corona está bien correlacionadocon el crecimiento de estos patógenos a lasmismas temperaturas. Los datos indican que un factorimportante que ha de tenerse en cuenta en el manejode la enfermedad es el tiempo transcurrido entre la cosechade la fruta y su refrigeración. El período de la incubacióna temperaturas inferiores a 15 °C esdemásde cinco días, por lo que es muy importante refrigerarla fruta lo más pronto posible. Los resultados con losdiferentes fungicidas en los ensayos con refrigeración ysin ella, apoyan esta sugerencia.Tanto F. pallidoroseum como C. musae requieren para lagerminación de las esporas de la presencia de una películade agua. Esto explica la mayor frecuencia de aislamientode ambas especies en los meses más lluviosos ycalientes del año [Pérez et al. 1990]. No obstante, Bad-fitosanidad/9

Pérez y Vidalger (1965) planteó que tanto C. musae como F. pallidoroseumson resistentes a condiciones de baja humedad,y concluyó que pueden permanecer por largos períodosen el campo en condiciones de sequía extrema.Las colonias de C. musae crecen bien en un amplio rangode medios de cultivo a pH entre 5-7. No obstante, laesporulación fue más intensa en medio malta. La formaciónde conidios fue obtenida a temperatura de27°C en medio malta a partir de los cinco días, y fuemáxima a partir de los nueve en pH de 5-6. Tanto elPDA como el medio malta permiten obtener un abundantecrecimiento micelial y producción de esporas.CONCLUSIONES• Los conidios de Fusarium pallidoroseum germinan enagua en el rango de temperaturas comprendido entre16y38°C y óptimamente a 27 °C. Las colonias crecenen el rango de 10 a 38 °C, y óptimamente a 27 °C. Entemperaturas inferiores a 15 °C se inhibe el crecimientode las colonias. La esporulación de las coloniasocurre entre 10-35 °C, y más intensamente a 27 °C.• Los conidios de Colletotrichum musae y F. pallidoroseumgerminan en agua en el rango de temperaturas comprendidoentre 10-38 °C y óptimamente en 27 °C. Latemperatura mínima para el crecimiento de lascolonias es de 10 °C, la óptima de 27 y la máxima de38-40 °C. A temperaturas inferiores a 15 °C se inhibela germinación de los conidios, el crecimiento de las colonias,la esporulación, la incubación de la enfermedady el crecimiento de las lesiones. La esporulación de lascolonias ocurre a temperaturas entre 15-35 °C, y óptimamentea 27 °C.• La velocidad de desarrollo de la pudrición de la coronaen frutos inoculados con F. pallidoroseum y C. musaedepende de la temperatura de incubación, y está correlacionadacon su efecto sobre el desarrollo de los patógenos.A temperaturas por debajo de 15 °C el desarrollode las necrosis de las coronas es lento.• Colletotrichum musae puede ser eficientemente cultivadoen los medios agar malta, agar Saboreaud y agarde papa dextrosa, en los que produce una abundantecantidad de micelio y conidios.• El pH 5 resultó óptimo para el crecimiento y formaciónde conidios de C. musae. La máxima producción deconidios fue obtenida en agar malta a 27 °C enunpHde 5 después de nueve y diez días de incubación.• Los datos obtenidos indican que es imprescindiblerefrigerar la fruta tan pronto como sea posible posteriora la cosecha y beneficio para reducir la incidencia ydesarrollo de la pudrición de la corona.REFERENCIASAl -Zaemey, A. B., N. Magan; A. K. Thompson: «In vitro Studies of theEffect of Environmental Conditions on the Anthracnose Pathogen ofBananas, Colletotrichum musae», International Biodeterioration andBiodegradation 33 (4): 369-381, 1994.Anónimo: «Plant Pathologist’s pocketbook», CMI-FAO, 1985.Badger, A. M.: «Influence of Relative Humidity on Fungi CausingCrown Rot of Boxed Bananas», Phytopathology 55: 688-692, 1965.Booth, C.; B. C. Sutton: «Fusarium pallidoroseum the Correct Namefor Fusarium semitectum Auct», Transaction of the British MycologicalSociety 83 (4): 702 -704, 1984.Burden, O. J.: «Report on Banana Fruit Quality Research Project»,Windward Island Banana Research Scheme. 1970-1973. TropicalProducts Institute. Ministry of Overseas Development, Londres,1974.Goos, R. D.; M.Tschirsch: «Effects of Environmental Factors on SporeGermination Spore Survival and Growth of Gloeosporium musarum»,Mycology 54: 353-367, 1962.Greene, C. L.; R. D. Goos: «Fungi Associated with Crown Rot of BoxedBananas», Phytopathology 53: 271-275, 1963.Griffee, P. J.; O. J. Burden: «Incidence and Control of Colletotrichummusae on Bananas in the Windward Islands», Annals of Applied Biology,77 (1): 1-16, 1974.Lapeyre de Bellaire, L.; X. Mourichon: «The Pattern of Fungal Contaminationof the Banana Bunch During its Development and PotentialInfluence on Incidence of Crown Rot and Anthracnose Diseases»,Plant Pathology, 46 (4): 481-489, Inglaterra, 1997.Lukesic, F. L.; W. J. Kaiser; M. Martínez: «The Incidence of Crown Rotof Bananas in Relation to Microbial Populations of the Crown Tissue»,Canadian Journal of Botany 45: 413-421, 1967.Marín, D. H.; T. B. Sutton; S. M. Blakenship; W. H. Swallow: «Pathogenicityof Fungi Associated With Crown Rot of Bananas in LatinAmerica», Plant Disease 80 (5) 525-528, 1995.Pérez, L., M. Sáenz; M. Milanés; M. O. López: «Pudrición de la coronade los bananos en Cuba. Etiología y dinámica de las especies dehongos asociadas», informe final de Proyecto, INISAV, 1990.Slabaugh, W. R.: «Crown Mold, Crown Rot and Pedicel Rot», Compendiumof tropical fruit diseases, APS Press, St. Paul, MN, EstadosUnidos, 1994, pp. 8- 9.Slabaugh, W. R.; M. D. Grove: «Postharvest Diseases of Bananasand their Control», Plant Disease 66 (8): 747-750, 1982.10/fitosanidad

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002NUEVOS REGISTROS FÚNGICOS EN LEGUMINOSASDE LA ESTACIÓN DE PASTOS Y FORRAJESDE NIÑA BONITAGiselle Estrada, Danay López y María Ofelia LópezInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600RESUMENDentro de los organismos plagas que inciden en los pastos, se señalanlos hongos, los cuales poseen un mayor peso no sólo por los dañosque producen en los rendimientos, sino porque también provocanalteraciones importantes sobre los parámetros del producto cosechado.Las micotoxinas son otro de los daños que ocasionan estos organismos,y son producidas por el patógeno durante el proceso deparasitismo. El objetivo de este trabajo fue determinar especies dehongos presentes en algunos pastos de la Estación de Pastos yForrajes de Niña Bonita. Se tomaron y analizaron por métodos convencionalesmuestras de 11 especies de leguminosas a partir de marzode 2000 hasta febrero de 2001. Las muestras colectadaspresentaban síntomas de manchas foliares principalmente. Se determinaron20 especies de hongos, de los cuales 15 son nuevos registrospara el país. El género Cercospora fue el más observado,siguiéndole en importancia especies de Alternaria y Colletotrichum.Hay que destacar que en muchas de las muestras se observó Fusariumincarnatum que aunque tiene poca importancia como fitopatógeno,es un oportunista con gran capacidad de pudrición y ademáspuede resultar toxicogénico.ABSTRACTFungi are pathogens organisms that occur in grass. They have a bigimportance because of damages that produce in yields and also provokeimportant alterations on parameters of harvested product. Micotoxinsare another kind of damages and they are produced bypathogen during the parasitism process. Determinate fungal speciespresent in some grass of Grass and Forages Station Niña Bonita wasthe objective of that work. Samples of 11 leguminous species wereanalyzed by conventional methods from onward march 2000 to February2001. Collected samples presented mainly leaf spot symptoms.20 fungal species were determinate. From those, 15 are new registriesfor Cuba. Genus Cercospora was most observed, following in importanceAlternaria and Colletotrichum species. Is remarkable that in themajority of the samples was observed Fusarium incarnatum, althoughhas low importance as phytopatogen, is opportunist with a big rottingcapability and besides can be toxicogenous.Key words: Phytopathogens fungus, grass, hostsPalabras claves: Hongos fitopatógenos, pastos, hospederosINTRODUCCIÓNEn Cuba existen diferentes factores que afectan el establecimientode los pastos, entre los que se destacan:adaptación al clima, resistencia al pisoteo del ganado yel ataque de diferentes patógenos. Las principales enfermedadesque inciden en los pastos son las bacterianasy fúngicas, y por estas últimas se estiman pérdidasque fluctúan del 50-100% de la producción total [ICA,1979]. Dentro de los organismos plagas se señalan loshongos como uno de los que poseen un mayor peso, nosólo por los daños que producen sobre los rendimientos,sino porque también provocan alteraciones importantessobre los parámetros del producto cosechado[Abe y Okumura, 1972; Hodges y Robinson, 1977].Las micotoxinas son otro de los daños que ocasionanestos organismos, y son producidas por el patógeno duranteel proceso de parasitismo [Delgado y Alonso,1994]. En Cuba las especies de hongos más frecuentementeencontradas en leguminosas son las pertenecientesa los géneros Cercospora, Colletotrichum, Rhizoctoniay Fusarium [Bernal y Díaz, 1988]El objetivo de este trabajo fue determinar especies dehongos presentes en algunas leguminosas de la Estaciónde Pastos y Forrajes de Niña Bonita, provincia deLa Habana.MATERIALES Y MÉTODOSFueron colectadas muestras de 11 especies de leguminosasde la Estación de Pastos y Forrajes de Niña Bonitadesde marzo de 2000 hasta febrero de 2001, confitosanidad/11

Estrada y otrosdiferentes síntomas de manchas en hojas y en algunostallos.Se tomaron porciones de las áreas afectadas en cadamuestra, se lavaron con abundante agua corriente durantecinco minutos, se desinfectaron en una soluciónde hipoclorito de sodio al 2% y se colocaron en cámarahúmeda y en placas que contenían agar-agua.Se incubaron a 25 °C con alternancia de luz-oscuridad,y se estudiaron a partir de las 48-72 horas según fueronesporulando los hongos. Se observaron al microscopioy se determinaron las especies de hongos en cada muestrasegún Ellis (1971 y 1976), Domsh et al. (1980),Nelson et al. (1983) y Mercado et al. (1997).RESULTADOS Y DISCUSIÓNEn la siguiente tabla se muestran los hongos encontradosy la especie de pasto en que se hallaban. Las especiesde hongos marcadas con un asterisco se considerannuevos registros para el cultivo en el país.Especies fúngicas Planta hospedante PatógenoAlternaria alternata * Lablab purpureus XAlternaria tenuissima *Cercospora canescens *Cercospora zebrina*Cladosporium oxysporum*Centrosema macrocarpa, Puerariaphaseoloides, Lablab purpureusArachis pintoi, Lablab purpureus, PuerariaphaseoloidesLablab purpureus, Medicago sp., PuerariaphaseoloidesCentrosema pubescens, Lablab purpureus,Medicago sp., Pueraria phaseoloidesXXColletotrichum dematium * Lablab purpureus, Centrosema plumieri XColletotrichum gloeosporioidesCorynespora cassiicolaCurvularia brachyspora *Curvularia eragrostidis *Dischloridium laense *Lablab purpureus, Centrosema macrocarpa,Clitoria ternateaCentrosema macrocarpa, CentrosemaplumieriArachis pintoi, Centrosema pubescensPueraria faseoloidesCanavalia sp.XXErysiphe polygoni * Lablab purpureus XExserohilum rostratum *Fusarium incarnatum *Centrosema macrocarpaLablab purpureus, Centrosema macrocarpaOidium sp. Neonotonia wix XPericonia byssoides *Periconia cookei *Phomopsis sp.Stilbella sp. *Canavalia sp.Centrosema macrocarpa, Centrosemapubescens, Arachis pintoiCentrosema macrocarpaLablab purpureusUromyces sp. Medicago sp. X12/fitosanidad

Nuevos registros fúngicos en leguminosas de la...Breve comentario sobre los hongosmás importantesAlternaria alternata: Es una especie extremadamente comúny cosmopolita que aparece en muchas clases deplantas y sustratos incluyendo suelo, alimentos y textiles;su patogenicidad en diferentes plantas no pareceestar correlacionada con aspectos morfológicos [Ellis,1971 y Domsh et al., 1980]. En este trabajo se aisló depequeñas manchas pardo oscuro con un fino haloamarillento. Aunque este hongo es considerado depoca importancia en los cultivos que afecta, en lasplantas en que se encontró provocó abundantes síntomasademás de estar muy bien distribuido. Existen registrosde toxicidad a animales de sangre caliente quehan ingerido alimentos contaminados con este hongo[Domsch et al., 1980.Cercospora canescens: Muy frecuente sobre hojas de diferentesleguminosas en trópicos y subtrópicos [Ellis,1976]. Fue observada en las hojas provocando manchasredondeadas pardas con el centro grisáceo, margenpardo rojizo oscuro y halo amarillo. En el caso dePueraria también se encontró en los tallos, y causómanchas alargadas pardo oscuro con el centro más claro.Esta especie ha sido considerada de poca importanciasegún Mulder & Holliday (1975).Cercospora zebrina: Se ha registrado en las hojas de Medicago,Trifolium y otras plantas en el hemisferio norte,África y Sudamérica [Farr et al., 1995], pero no se hanencontrado registros ni de Centroamérica ni de Cuba.En este trabajo fue encontrada en Medicago causandomanchas pardo grisáceo muy oscuras con el centromás claro y en algunas un halo amarillento no muymarcado.Colletotrichum dematium: Es un saprófito común de tejidovegetal en descomposición, pero también causantede pudriciones en frutos, manchas foliares y damping-offen varias especies de plantas especialmente en leguminosas[Domsch et al., 1980]. Se encontró sobre las hojasen síntomas típicos de antracnosis. Estaba presentetambién la fase teleomórfica Glomerella cingulata.Corynespora cassiicola: Común y cosmopolita sobre ampliorango de plantas hospedantes, generalmente asociadoa manchas foliares y sobre ramas y tallosherbáceos, muy común en los trópicos [Mercado et al.,1997]. Se encontró en manchas pardas y secas.Erysiphe polygoni: Se halló causando mildiu pulverulento(oidio), el cual puede ocasionar grandes daños [Farret al., 1995].Fusarium incarnatum: Es una especie cosmopolita. Sumayor importancia económica radica como agente causalde pudriciones poscosecha en varios cultivos tropicales.Puede causar damping-off en posturas de tomate.En Cuba este hongo es frecuente sobre restos vegetalesde numerosas plantas, de acción saprofítica fundamentalmente[Gerlach & Nirenberg, 1982; López., 1999].Algunas cepas de esta especie son toxicogénicas[Domsch et al., 1980].Uromyces sp.: Esta especie se presentó con gran frecuenciaen Medicago, causando grandes daños. Hay queespecificar que es una especie distinta a Uromyces appendiculatus,ya que las teliosporas no tienen ni la forma, nilas dimensiones de la mencionada especie.CONCLUSIONES• En las 11 especies de leguminosas se encontraron 20especies de hongos, de los cuales 15 son nuevos registrospara pastos en el país.• El género Cercospora fue el más observado, siguiéndoleen importancia especies de Alternaria y Colletotrichum.• Hay que destacar que en muchas de las muestras seobservó Fusarium incarnatum, que aunque tiene pocaimportancia como fitopatógeno, es un oportunista congran capacidad de pudrición y además puede resultartoxicogénico.REFERENCIASAbe, A.; T. Okumura:«Influence of Aphid Infestation on the ChemicalComposition and Nutritive Value of Lucerne», Bull. Nat. Inst. Anim.Husb. 25:19, 1972.Bernal, B.; J. A. Díaz: «Incidencia y distribución de las principales enfermedadesfungosas de pastos y forrajes en dos estaciones de LaHabana», Ciencia Técnica Agricultura. 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FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002DETERMINACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVOPARA EL CRECIMIENTO Y ESPORULACIÓNDE SAROCLADIUM ORYZAE (SAWADA)GAMS & HAWKSTania Bonilla Bernal, Ileana Sandoval Ramírez, María Ofelia López y Ángela PorrasInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600RESUMENLa enfermedad conocida como pudrición de la vaina del arroz es producidapor Sarocladium oryzae, el cual se detectó por primera vez ennuestro país a finales de 1997. Este hongo, conjuntamente con el ácaroSteneotarsonemus spinki, provocó serias afectaciones en el cultivodel arroz en La Habana y Pinar del Río. Sobre la biología y epidemiologíade este patógeno es muy poco lo que se conoce hasta el momento,por lo que se hace necesario realizar diferentes estudiosbiológicos de nuestros aislamientos. En este trabajo se evaluó el crecimientoy esporulación de S. oryzae en cinco medios de cultivo, conel objetivo de seleccionar el más adecuado para el desarrollo de estehongo. Los medios estudiados fueron Agar de Czapeck Dox (modificado),Agar arroz, Agar de Sabouraud, Agar extracto de malta y Agarpapa dextrosa. A los tres, seis, nueve, doce y quince días se midió elcrecimiento micelial del hongo y se determinó la esporulación por conteosde conidios en la cámara de Neubauer. Se describieron las coloniasen cada medio de cultivo, observando diferencia en cuanto a laforma de la colonia, coloración y aspecto en cada sustrato. A losquince días se pudo apreciar que el hongo creció más en agar extracto demalta, donde alcanzó 51 mm, seguido de agar de Czapeck, con 45 mm, y41 mm en agar de Sabouraud. Para la esporulación se alcanzaron concentracionesde 1,4 x 10 7 con/mL en el sustrato antes mencionado yen los restantes los valores oscilaron entre 1,1 x 10 6 a4,4x10 6 con/mL.El medio agar de Czapeck fue seleccionado como el adecuado para elcrecimiento, esporulación y carácter diagnóstico de S.oryzae, fundamentalmentepor la pigmentación naranja del reverso de la colonia.ABSTRACTSheath rot diseases is caused by S. oryzae detected for the first time inCuba by the end of 1997. This fungus and the mite Steneotarsonemusspinki produced serious damage in Pinar del Río and La Habana provinces.Biological and epidemiological studies on this pathogen arevery scarce so it is necessary to carry out different biological studies toour S. oryzae isolates. Growth and sporulation were assessed on fiveculture media in order to select the best one. The media studied were:modified Czapek-Dox Agar, Rice Agar, Sabouraud’s Agar, MaltExtract Agar and Patato Dextrose Agar. The micelial growth and sporulationwere measured at 3, 6, 9 and 15 days. Colonies were describedfor every culture media having differences in relation to their color,shape and texture. The best media when assessed at 15 days wereMalt Extract Agar reading 51 mm the colony diameter, followed byCzapek-Dox reading 45 mm and on Sabouraud’s Agar colonies reached41 mm mycelial growth. The sporulation value reached on Sabouraud’sAgar was 1.4 x 10 7 conidio/ml. For the rest of media thesporulation ranged from 1.1-1.4 x 10 6 conidia/ml. Czapek-Dox culturemedium was selected as the proper one for growth, sporulation and fordiagnostic purpose since orange pigment in colony reverse, appearedwhen cultured on it.Key words: Sarocladium oryzae, culture media, growth, sporulationPalabras claves: Sarocladium oryzae, medio de cultivo, crecimiento,esporulaciónINTRODUCCIÓNLa pudrición de la vaina del arroz causada por el hongoSarocladium oryzae se ha convertido en los últimosaños en una enfermedad de gran importancia en diferentespaíses de Asia, África y América, sobre todo debidoa la introducción de variedades semienanas ycultivares de alta producción [Gill y Bonman, 1994].En Taiwán la presencia de este hongo ha provocado laesterilidad, vaneado y decoloración de la semilla, conpérdidas estimadas entre un 20-60% [Tschen et al.,1997].En nuestro país se detecta por primera vez en septiembrede 1997, al ocurrir una explosión epidémica de laenfermedad y al mismo tiempo del ácaro S. spinki; losque provocaron considerables pérdidas de las cosechasen las provincias de La Habana y Pinar del Río [Sandovalet al. 1999].Los síntomas de la enfermedad aparecen en la fase demaduración y comienzo de la formación de la panícula.Principalmente la infección se observa en la partesuperior de la vaina de la hoja que envuelve la panícu-fitosanidad/15

Bonilla y otrosla, y se presentan pequeñas manchas oblongas en lavaina de la hoja bandera, las cuales se alargan hasta formargrandes manchas irregulares, que pueden provocarnecrosis de la vaina y el posterior bloqueo en la emergenciade la panícula [Anuradha y Madhiazagan, 2000].El agente causal presenta conidióforos abundantes,con tres o cuatro fiálides verticiladas, conidios hialinos,lisos, unicelulares, cilíndricos y con extremos redondeados[Brady, 1980; Ou,1985].Sobre la biología de este patógeno no se tiene suficienteinformación, especialmente en nuestro país. Por talmotivo el objetivo fundamental de este trabajo fue seleccionarel medio de cultivo adecuado para el crecimiento,esporulación y conservación de este hongo, yasí poder realizar estudios posteriores sobre la biologíay epidemiología con nuestros aislamientos.MATERIALES Y MÉTODOSSe estudió el efecto de cinco medios de cultivo sobre elcrecimiento y esporulación de S. oryzae. Los sustratosevaluados fueron agar papa dextrosa, agar dextrosa deSabouraud, agar de Czapek-Dox (modificado), agarextracto de malta y agar arroz.Todos los medios fueron esterilizados en autoclave durante20 minutos a 1,5 atm, y posteriormente se extendieronen placas petri Anumbra de 9 cm de diámetro.Para conocer el crecimiento micelial se prepararon placasmadres a partir de aislamientos monospóricos delpatógeno, las cuales se incubaron a temperatura ambientedurante siete días. Posteriormente se depositóun disco de agar con micelio de 0,5 cm de este cultivoen el centro de cada una de las placas con los cinco medios,sembrando tres placas por cada sustrato. Se determinóel crecimiento radial del patógeno a los tres, seis,nueve, doce y quince días después de la siembra a latemperatura de incubación de 30°C. Se describieronlas características morfológicas de las colonias paracada uno de los sustratos.Para el caso de la esporulación se prepararon erlenmeyerscon 40 mL de cada medio de cultivo previamentelicuado, y a una temperatura menor de 40°C se le añadióa cada uno 0,1 mL de una suspensión de S. oryzae ala concentración de 5x10 6 con/mL. Los erlenmeyerscon cada sustrato y la suspensión del patógeno se extendieronen tres placas y se incubaron a 30°C. Lafrecuencia de evaluación fue la misma que para el crecimiento,determinando la esporulación en el microscopioóptico, mediante conteo de conidios en la cámarade Neuvauer.Con los datos obtenidos a los quince días, se realizóun análisis de varianza utilizando el test de significaciónde Newman Keuls.RESULTADOS Y DISCUSIÓNDe manera general se observó que S. oryzae es capaz decrecer satisfactoriamente en los diferentes sustratosprobados, aunque se caracteriza por tener un crecimientolento, el cual varía en dependencia de los nutrientespresentes en ellos.Las características de las colonias se comportan de lasiguiente manera en cada medio utilizado:Agar papa dextrosa: A los tres días las colonias son algodonosascon una coloración blanquecina y ligeramentenaranja en el reverso. Pasados seis días se observaronaterciopeladas, con bordes regulares bien definidos yuna coloración rosada pálida por ambas partes de la colonia,manteniéndose de esta manera hasta el final dela evaluación.Agar dextrosa de Sabouraud: Se observaron colonias detextura aterciopelada de color amarillo muy claro conel borde más pálido casi blanco y por el reverso pardo aocre tostado. Los bordes eran irregulares en forma deconcha y se formaron surcos alrededor del centro de lacolonia.Agar Czapek-Dox (modificado): En este medio el hongodesarrolla colonias afieltradas con una coloración rosadaque se va intensificando a medida que pasan losdías, tomando un color rosado intenso casi naranja porel reverso de la colonia, con bordes filamentosos.Agar extracto de malta: Las colonias son algodonosas,aunque un poco más ralas en el crecimiento alrededordel ponchete. La coloración por arriba es blanco suciocasi amarillo y por debajo color crema. Los bordes sonligeramente irregulares. En los trabajos realizados porBrady (1980) y Ou (1985) plantean que las colonias deS. oryzae en este medio son blancas con un tono azafranadoclaro, compactas, algodonosas y con el reversoocre naranja.Agar arroz: Colonias de apariencia aterciopeladas,muy ralas. Coloración blanco sucio por encima y porel reverso, con los bordes ligeramente amarillos y angulosos.En la evaluación realizada a los quince días se comprobóque S. oryzae creció más en agar extracto de maltadonde alcanzó 51 mm, seguido de agar Czapeck con 45 mm,y 41 mm en agar de Sabouraud (Fig. 1).El menor crecimiento se obtuvo con el medio agar papadextrosa con 35 mm, el cual no presentó diferenciassignificativas con el agar arroz, que alcanzó 39 mm.Estos resultados coinciden con las descripciones realizadaspor Shahjaban et al. (1977), donde se planteaque el crecimiento de este patógeno es lento en el sustratode agar papa dextrosa y llega a alcanzar entre 30 a35 mm de diámetro a los 10 días de incubación a 28°Ccon textura algodonosa de sus colonias, color blanco anaranja rosado muy claro en el reverso. Este hongo fue16/fitosanidad

Determinación del medio de cultivo para el crecimiento...cultivado también en frijol de lima agar; levadura glucosaagar; agar de maíz y levadura-malta agar con buenosregistros de esporulación en papa dextrosa agar, sinembargo no describen las características de las coloniassobre estos sustratos.Debido a estas características de S. oryzae en agar papadextrosa, consideramos que este medio puede ser utilizadopara su conservación durante determinados períodosde tiempo, además de ser menos costoso queotros sustratos evaluados y de utilizarse comúnmente,según López (1999), como un medio de rutina para eltrabajo en el laboratorio.En los estudios realizados sobre la variabilidad de aislamientosde Colletotrichum gloeosporioides llevados a cabopor Rivas y Orihuela (1988) el medio papa dextrosaagar resultó óptimo para el crecimiento y la esporulacióndel hongo a los siete días, en comparación conagar de Czapeck que fue el menos eficiente.Figura 1. Crecimiento micelial de S. oryzae en los cinco medios de cultivoSandoval y Méndez (1987) estudiaron la influencia de diferentessustratos en el crecimiento y esporulación de Corynesporacassiicola determinando un crecimiento favorable enagar Saboraoud, papa dextrosa agar y Czapeck y la esporulaciónosciló entre 7-9 x 10 6 esporas/mL en estos medios.En lo referente a la esporulación de S. oryzae se obtuvo unamayor concentración en agar de Sabouraud con 1,4 x10 7 con/mL, siendo el único medio que difirió significativamentede los restantes, en los cuales los valores oscilaronentre 1,1 x 10 6 y 4,4x10 6 con/ mL.Tabla 1. Esporulación de S. oryzae en diferentes medios de cultivoMedios de cultivoEvaluaciones (días)3 6 9 12 15PDA 2,5 X 10 5 4,7X10 5 1,6X10 6 2X10 6 2,6X10 6 bSABOURAUD 0,8 X 10 5 7,3X10 5 4X10 6 8,7X10 6 1,4X10 7 aARROZ 2 X 10 4 2,2X10 5 5,8X10 5 7,8X10 5 1,1X10 6 bMALTA 1 X 10 5 7,2X10 5 1,9X10 6 2X10 6 3X10 6 bCZAPECK 1,5 X 10 5 2,7X10 5 1,6X10 6 2,4X10 6 4,4X10 6 bSegún Lukens (1963) ciertos medios de cultivo sonmás favorables para la esporulación de los hongos portener carbohidratos complejos que frecuentemente sonmenos adecuados para la producción de hifas vegetativasy más adecuados para la producción de esporas y/oconidios. Los hongos generalmente crecen mejor en unmedio rico en carbohidratos, pero si se conservan durantelargos períodos de tiempo, la esporulación puededisminuir [CAB, 1983].En muchas ocasiones la esporulación depende en granmedida del medio empleado. Por ejemplo, para el casode Fusarium oxysporum en agar de arroz, tiene una bajaproducción de conidios, siendo superior en medio deharina de trigo y papa dextrosa agar [Berton, 1981].El-Magied et al. (1991) utilizó diferentes medios selectivos(agar papa dextrosa, rosa bengala, AFPA y agarCzapeck) para el aislamiento e identificación de hongosen arroz y maíz, determinando que agar Czapeckfitosanidad/17

Bonilla y otrosfue el más adecuado para el crecimiento de estos hongos,incluyendo S. oryzae.Brady et al. (1989) en los estudios realizados sobre lasobre la fisiología de S. oryzae comentan que los aislamientosde diferentes países y hospedantes como arrozy bambú presentan patrones de isoenzimas semejantes,pero existían diferencias en cuanto a la pigmentacióndel reverso de sus colonias, como son el color amarillobrillante al cultivar los aislamientos en nitrito agar, yotros exhibían color carmelita en nitrato Czapeck.En nuestro caso particular la presencia del pigmentonaranja brillante en este sustrato, tal y como se presentaen las cepas cultivadas en nuestro estudio, constituyeun carácter diagnóstico, y por tales razones, a pesarde que el hongo creció más en agar extracto de malta yesporuló en agar de Sabouraud, el medio agar Czapeckfue seleccionado como el adecuado para el crecimiento,esporulación y sobre todo por el carácter diagnóstico,al destacarse la pigmentación naranja en el reverso dela colonia, lo cual facilita la identificación de S. oryzae.Esto coincide con López (1999) al plantear que el sustratoutilizado tiene gran influencia en la morfología delos caracteres útiles para el diagnóstico de hongos.CONCLUSIONES• El crecimiento de S. oryzae resultó lento en los cincomedios de cultivo evaluados.• El crecimiento micelial fue mayor en agar de maltacon 51 mm y la esporulación en agar de Sabouraud conuna concentración de 4,4 x 10 con/mL.• De todos los sustratos evaluados el más adecuadopara el desarrollo del hongo fue agar de Czapeck porser representativo de las características de esta especie,además de que el crecimiento y la esporulación fueronaceptables.REFERENCIASAnuradha, R.; K. Madhiazagan: «Sheath Rot in Rice», The Hindu.Online edition of India’s National Newspaper on indiaserver.com.Thursday, January 27, 2000.Berton, O.: Etiologia da «mancha em reboleira» da soja (Glycine max(L.) Memil), Porto Alegre, Mestrado-Facultad de Agronomia/UFRGS,1981.Brady, B. L. K.: «Sarocladium oryzae», CMI Descriptions No. 673,1980.C.A.B. Commonwealth Mycological Institute: Plant Pathologist’s Pocketbook,Second Edition, 393, 1983.El-Magried, M. A.; A. M. Alian; E. A. Abo-Alla; E. M. Hegazy: «Studieson the Isolation and Identification of Fungi from Corn and Rice Grainson Some Selective Media». Annals of Agricultural Science (Moshtohor)29(4): 1521-1535, 1991.Gill, M. A.; J. M. Bonman: «An Efficiency Inoculation Technique for Sarocladiumoryzae Causing Sheath Rot and Its Effect on Rice Plant», Journalof Agricultural Research (Pakistan) 32 (3): 325-332, Aug., 1994.López, M. O.: «Contribución al estudio y diagnóstico de la micobiotapatógena de la caña de azúcar (Saccharum sp. híbrida) en Cuba»,tesis presentada en opción al grado científico de Doctor en CienciasAgrícolas, MINAGRI, INISAV, 1999.Lukens, R. J.: «Photo Inhibition of Sporulation in Alternaria porri»,American Journal of Botany (Cambridge) 50 (1-6): 720-724, 1963.Ou, S. R.: Rice Disease, CAB. International Mycological Institute, KewSurrey, UK, 1985.Rivas, E.; R. Orihuela: «Variabilidad de aislamientos de Colletotrichumgloeosporioides», Protección Vegetal 1: 19-25, 1998.Sandoval, Ileana; M. Méndez: «Influencia de diferentes sustratos en elcrecimiento y esporulación de Corynespora cassiicola», Cienc. Téc.Agric. Protección de Plantas 10 (1): 115-120, 1987.Sandoval, Ileana; M. O. López; T. Bonilla; Y. Tómas: «Primer registroen Cuba de la pudrición de la vaina del arroz por Sarocladium oryzae(Sawada) Gams & Hawks», Fitosanidad 3(4): 7-12, 1999.Shajaban, A. K; Z. Harahap; M. C. Rush: «Sheath Rot of Rice Causedby Acrocylindrium oryzae in Louisiana», Plant Diseases Reporter.61(4):307-310, 1977.Tschen, S-M.J.; L. L. Chen; S-T Hsich; T-S Wu: «Isolation and PhytotoxicEffects of Helvolic Acid from Plant Pathogenic Fungus Sarocladiumoryzae», Bot. Bull. Acad. Sin. 38:251-256, 1997.18/fitosanidad

Vázquez y otrosDebido a la alta ocurrencia de estos insectos en jardines,campos de golf y el ambiente urbano en general, seiniciaron estudios conducentes a obtener un cebo insecticidapara la lucha contra estas dos especies, resultadosque se ofrecen en el presente artículo.MATERIALES Y MÉTODOSLos ensayos se realizaron en el campo de golf de Varadero,Matanzas, donde se manifestaban altas poblacionesde Solenopsis geminata y Paratrechina fulva,favorecidas por las características del sustrato del césped,su tecnología de manejo y la ocurrencia de otrosinsectos (Homoptera).Para seleccionar el lugar donde se realizarían los ensayos,se colocaron trampas de azúcar (porciones de azúcarsobre fondos de placas de Petri) en diferentespartes del campo de golf, buscando diferencias en suscaracterísticas ecológicas. Paralelamente se realizaronobservaciones directas en el césped para detectar nidosde estos insectos.Tanto los trampeos como las observaciones se realizarondurante el día y la noche. Esto nos permitió localizarlugares donde se presentaban poblaciones de ambasespecies, en los cuales se realizaron los ensayos, ycomprobar que las hormigas tenían actividad duranteel día y la noche, lo que nos condujo a realizar los ensayosen dos horarios (9:00-12:00 m. y 8:00-10:00 p.m.).Se evaluaron como atrayentes azucarados solucionesde azúcar y de melaza a diferentes concentraciones(25, 50 y 75%). Como atrayente proteínico de origenvegetal se ensayó con harina de pescado, por su fáciladquisición, y como soporte sólido el salvado de trigo,que además de ser de fácil adquisición es recomendadopor otros autores como Zenner de Polania y Ruiz(1982).20/fitosanidadPara la evaluación de los atrayentes azucarados se realizóun ensayo que consistió en preparar pedacitos de algodonesde aproximadamente 1 cm de diámetro, quese colocaban cada uno sobre una tarjeta de cartulina de3 cm², luego de haberlos introducido en un recipientecon las soluciones azucaradas. Estos se colocaban dispersosy al azar en sitios diferentes, empleándose tresréplicas por cada solución azucarada. El ensayo se repitióen tres lugares diferentes del campo de golf. Con losresultados se seleccionó la mejor concentración para lamezcla con los demás componentes del cebo.El ensayo siguiente se realizó para comprobar la aceptaciónde los demás componentes del cebo por separadoy mezclados, incluyéndose las mejores concentracionesde las soluciones azucaradas del ensayoanterior. Así, las variantes fueron: I, salvado de trigo;II, harina de pescado; III, salvado de trigo + harina depescado en la proporción 3:1; IV, salvado de trigo + harinade pescado + melaza 25%; V, salvado de trigo + harinade pescado + azúcar 25 %. Para cada variante seevaluaron tres réplicas, y el ensayo se repitió en tresmomentos.Las mezclas de los componentes sólidos, y posteriormenteel líquido, se realizaron dentro de una bolsa denylon, la que se agitaba en diferentes direcciones parafacilitar la homogeneidad del producto. Luego se le adicionabala solución azucarada en cantidad tal que mantuvierala concentración y facilitara la adhesión de laharina de pescado al salvado de trigo, de forma tal queel cebo quedase con todos sus componentes adheridosal soporte sólido.Para realizar la evaluación de la aceptación de cada unade estas variantes se colocaron porciones de aproximadamente1 g sobre las tarjetas de cartulina, las que seubicaron igualmente en diferentes sitios y al azar.Para evaluar la afluencia de las hormigas sobre cadauna de las variantes ensayadas, a los 45-60 minutos dehaber colocado las tarjetas se revisó visualmente cadauna de ellas, y se anotó el porcentaje del volumen retirado(forrajeado) por las hormigas, y con el auxilio deun aspirador se colectaron muestras de las poblacionesde hormigas que estaban realizando el forrajeo. En losensayos nocturnos esta operación resultó más difícil,por lo que además del auxilio de linternas hubo querealizarla entre mayor número de personas, a fin de garantizarque toda la evaluación no se realizara durantemás de 15 minutos.La aceptación además se comparó con un cebo estándar(Clarion), en un ensayo que se replicó en horariodiurno y nocturno, siguiendo los mismos procedimientos.Finalmente, el nuevo cebo insecticida se elaboró mezclandola mejor variante de composición con el insecticidaCarbaryl PH 80 (1%), por su alta eficacia contralas hormigas [Registro Central de Plaguicidas, 2000].Los resultados de las evaluaciones de atrayentes azucaradosse transformaron en x + 1y los de los componentessólidos y cebos en %. Se analizaron estadísticamentepor la prueba de Newman Keuls para p < 0,05.RESULTADOS Y DISCUSIÓNDe los atrayentes azucarados evaluados, los mejores resultadosse obtuvieron con la solución azucarada (Tabla1), y no existió diferencias significativas para lasconcentraciones de 50 y 75% para S. geminata y paraninguna de las concentraciones para P. fulva. En cambio,la variante de melaza no mostró diferencias significativaspara las concentraciones ni las especies dehormigas (p < 0,05).Esto nos permitió sugerir que en los ensayos con loscomponentes sólidos se evaluara el azúcar y la melaza,ambos a la menor concentración (25%), debido a queen el caso de P. fulva no hubo diferencias entre los tiposde atrayentes y sus concentraciones, y particularmenteS. geminata fue bastante atraída por esta concentración,lo que nos permitiría economizar azúcar.

Evaluación de diferentes atrayentes e insecticidas...Tabla 1. Resultados de las evaluaciones realizadascon diferentes concentraciones de atrayentesazucarados respecto a la afluencia de S. geminata y P. fulvaTipode atrayenteConcentraciones(%)Especiesde hormigaPromediodeindividuosatraídosAzúcar 25 S. geminata 6,52 bP. fulva 2,27 c50 S. geminata 7,69 aP. fulva 2,61 c75 S. geminata 8,67 aP. fulva 1,65 cMelaza 25 S. geminata 2,40 cP. fulva 1,47 c50 S. geminata 1,69 cP. fulva 1,31 c75 S. geminata 1,56 cP. fulva 1,19 cCV (%) 19,1DE 0,62De hecho decidimos entonces incluir también la melazapor su fácil adquisición y por los buenos resultadosque se habían obtenido en los ensayos de Zenner dePolania y Ruiz (1982) en Colombia con este atrayenteazucarado.De las variantes de composición del cebo ensayadas,la V (ST + HP + A 25), fue la que se mostró con mayorpreferencia por ambas especies de hormigas (Tabla2) y difirió significativamente de las restantes(p< 0,05).Tabla 2. Forrajeo de los diferentes componentesdel cebo (solos y mezclados) por S. geminata y P. fulvaVariantes Componentes Forrajeo(%)I Salvado de trigo (ST) 8,68 cII Harina de pescado (HP) 42,50 bIII ST + HP (3: 1) 45,53 bIV ST + HP + M 25% 53,90 bV ST + HP + A 25% 69,33 aCV (%) 25,4DE 11,19fitosanidad/21

Vázquez y otrosNo mostraron diferencias entre sí el resto de las variantes,excepto el salvado de trigo solo, que fue el menosforrajeado y solamente por S. geminata. Resulta interesantete líquida, que obtiene de las secreciones azucaradas deotros insectos (homópteros) y otra sólida, constituidapor proteína animal, todo lo cual le confiere caracterís-apuntar la gran atracción que ejerce la harina de ticas peculiares y determina sus hábitos alimenticios enpescado sola, principalmente sobre P. fulva, loque el ecosistema.corrobora los resultados de Zenner de Polania y Ruiz(1982), quienes además de la harina de pescado hallaronEl ensayo previo para comparar ambas variantes dea la harina de sangre y de hueso como buenos com-ponentes proteínicos.Estudios conducidos por Zenner de Polania y Ruiz(1985) permitieron comprobar que Paratrechina fulvarequiere una dieta alimenticia compuesta por una par-composición del cebo con un cebo insecticida estándar,corroboró los resultados anteriores, con resultadosmuy similares entre la variante V y el cebo estándar(Tabla 3), con un mayor forrajeo en el ensayo nocturnoy para ambas especies de hormigas.Tabla 3. Comprobación de la actividad de forrajeo 1 de los componentes sólidosy atrayentes alimenticios. S. geminata (Sg) y P. fulva (Pf)Ensayo nocturno 2 Ensayo diurno 2Variantes de cebos1 (Sg) 3 2 (Sg + Pf) 3 (Pf) 1 (Sg) 2 (Sg + Pf) 3 (Pf)V- ST+HP+A25 + +++ + – ++ +IV- ST+HP+M25 ++ + – – – –Estándar + +++ + – ++ +1 Forrajeo: – (nulo); + (< 25%); ++ (25-50%); +++ ( > 50%).2 Ensayos realizados: nocturno (noche húmeda), diurno (día soleado).3 Réplicas: sitios donde predominaba una o ambas especies de hormigas. En cada sitio se colocaban las tres variantes.Los resultados obtenidos con la variante Vyelhecho sultados interesantes, pues a los cinco días de realizadade que sus componentes son de fácil adquisición en el la aplicación mostró una capacidad de reducción de lospaís, la convirtieron en un buen candidato para los ensayoscon la incorporación de insecticidas al cebo.hormigueros del 50 %, inferior al estándar, que logróun 84,6 %; sin embargo, a los 15 días la capacidad deLos ensayos de campo para evaluar la efectividad delcebo insecticida (variante V + Carbaryl) mostraron re-reducción del cebo estándar disminuyó al 11,5 %, y ladel cebo nuevo al cero por ciento (Tabla 4).Tabla 4. Efectividad del nuevo cebo insecticida contra la hormiga Paratrechina fulvaInfestación inicial 1 Infestación después de aplicar el cebo 1Variantes5 días 15 díasde cebosViejos NuevosEfectividadEfectividadViejos NuevosViejos Nuevos(%) 2 (%) 2V+Carbaryl5 29 0 17 50 0 37 0Estándar 2 24 0 4 84,6 0 23 11,5Testigo 3 26 3 28 – 3 33 –1 Número de hormigueros: viejos (>12 cm diámetro); nuevos (1-12 cm diámetro).22/fitosanidad

Evaluación de diferentes atrayentes e insecticidas...Desde luego, hubo un efecto sobre ambos cebos de lascondiciones del sitio de ensayo, pues el riego por aspersióna que está sometido el césped (de dos a tres vecespor día) ocasiona un «lavado» de ellos, lo que sugiereque las precipitaciones contribuyen a disminuir la efectividadde estos productos.Por supuesto, aunque las hormigas forrajean los cebos,en el caso de P. fulva influye el hábito de desplazamientode esta hormiga [Zenner de Polania y Ruiz, 1995];de cualquier manera, un 50 % de efectividad se considerapromisorio para el cebo nuevo que se propone,por lo que resulta necesario realizar ensayos bajo diferentescondiciones.Las perspectivas de estos cebos fueron señaladas porHaines y Haines (1978), quienes argumentan que seaplica una cantidad mínima de tóxico al ambiente, selogra cierto grado de especificidad y a menudo su usoes más económico, por lo que la eficiencia en general esmejorada.CONCLUSIONES• La evaluación de los componentes azucarados paracebos formicidas permitió determinar que las solucionescon azúcar fueron las más aceptadas por las hormigas,principalmente por Solenopsis geminata, sindiferencias (p < 0,05) para las concentraciones probadas.• El estudio de preferencia por los componentes sólidosdel cebo permitió concluir que el mayor por cientode cebo forrajeado por estas hormigas se produjo parala variante V, compuesta por una mezcla de salvado de trigo(ST) + harina de pescado (HP) y azúcar al 25% (A25),resultado que difirió significativamente (p < 0,05) con elresto de las variantes ensayadas.• El cebo nuevo (variante V + Carbaryl 80 PH) mostróuna capacidad de reducción de hormigueros del 50%,inferior al estándar, que logró un 84,6%.REFERENCIASFontenla, J. L.; L. L. Vázquez; L. R. Hernández: «Un comentario sobrelas hormigas locas (Paratrechina) cubanas, con énfasis en P. fulva»,Cocuyo, La Habana, 2: 6-7, 1995.Haines, I.; J. B. Haines. «Toxic Bait for the Control of Anoplolepsis longipes(Jerdon) (Hymenoptera: Formicidae). I-The Basic AttractantCarrier, Its Production and Weathering Properties», Bull. Entomol.Res, Inglaterra, 69 (1): 65-75. 1979.Jeanne, R. L.; D. W. Davidson: «Population Regulation in SocialInsects», Ecological Entomology, ed. B. Huffaker and L. Raabb. Berkeley,California, pp. 559-587,1984.Mendoza, F.; J. Gómez: Principales insectos que atacan a las plantaseconómicas de Cuba, Ed. Pueblo y Educación, La Habana, 1982.Registro Central de Plaguicidas. «Lista Oficial de Plaguicidas Autorizados»,Centro Nacional de Sanidad Vegetal, Ministerio de la Agricultura,La Habana, 2000.Wilson, E. O.: The Insect Societies, Cambridge, The Belknap Press ofHarvard University, 1971.Zenner de Polania, I.; N. Ruiz: «Uso de cebos contra la hormiga locaNylanderia fulva (Mayr) (Hymenoptera:Formicidae)», Revista Colombianade Entomología 8 (1-2): 24-31, 1982.––––: «Hábitos alimenticios y relaciones simbióticas de la hormigaloca (Nylanderia fulva Mayr.) con otros artrópodos», Revista Colombianade Entomología 1: 3-10, 1985.fitosanidad/23

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002EFECTO DE VERTICILLIUM LECANII Y BEAUVERIABASSIANA SOBRE COTESIA AMERICANUS(LEPELETIER) (HYMENOPTERA:BRACONIDAE),PARASITOIDE DE LARVAS DE LA PRIMAVERADE LA YUCA (ERINNYIS ELLO L.)Luis L.VázquezInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600, c.e.:lvazquez@inisav.cuRESUMENPara determinar el efecto bioplaguicida de los hongos entomopatógenosVerticillium lecanii y Beauveria bassiana sobre adultos de Cotesiaamericanus (Lepeletier) (Hymenoptera:Braconidae), parasitoide de laprimavera de la yuca (Erinnyis ello L.), se realizaron ensayos de laboratoriopor dos métodos indirectos: aspersión al «algodón» y aspersiónal papel de filtro. Se demuestra que ambos hongos causaronmortalidad del 95,1 y 84,5% al parasitoide, respectivamente. Se pudocomprobar además una alta virulencia de los hongos sobre los adultosdel parasitoide (98,6 y 92,9%, respectivamente) y respuestas diferentesde estos insectos en función de los métodos y los entomopatógenosempleados (p < 0,05). La muerte del parasitoide se produjo entrelos 3-5 días posteriores al contacto con las superficies asperjadas, y laesporulación del hongo en las cámaras húmedas se manifestó entrelos 7-8 días. Los resultados sugieren la no conveniencia de utilizar estosbioplaguicidas en cultivos asociados o colindantes con la yuca(Manihot esculenta) protegida por programas de conservación o manejode enemigos naturales.Palabras claves: Cotesia americanus, hongos entomopatógenos, bioplaguicidas,Erinnyis ello, Manihot esculentaABSTRACTIn order to determine the biopesticide effect of entomopathogenousfungi, Verticillium lecanii and Beauveria bassiana on adults of Cotesiaamericanus (Hymenoptera:Braconidae), parasitoid of the cassavamoth (Erinnyis ello), laboratory tests were made by indirect methods:«cotton» spraying and filter paper spraying. It is shown that both fungicaused a 95,1% and 84,5% mortality to the parasitoid, respectively.Additionally, a high virulence of the fungi on the adult parasitoid couldbe proved (98,6% and 92,9%, respectively) and also different responsesof these insects according to the methods and the entomopathogensused (p < 0,05). The parasitoid death occurred within 3-5 daysafter the contact with the sprayed surfaces and the fungus sporulationappeared in the humid chambers after 7-8 days. The results suggestedthat it is inconvenient to use these biopesticides in crops associatedor adjacent to cassava protected with natural enemy conservationand management.Key words: Cotesia americanus, entomopathogenous fungi, biopesticides,Erinnyis ello, Manihot esculentaINTRODUCCIÓNEn los últimos años se ha incrementado la exigenciarespecto a la evaluación toxicológica de los plaguicidassobre la fauna benéfica [Izquierdo y Fortuny, 1997];sin embargo, poco se ha hecho en relación con el efectode los bioplaguicidas sobre estos insectos.Debido a que por lo general estos biopreparados sonmenos nocivos al ambiente, muchas veces se minimizasu posible afectación a los insectos útiles, y no seincluye su estudio toxicológico. Por ello, según Burkovay Krasavina (1997), es necesario realizar estudios alrespecto, ya que incluso una parte de la informacióndisponible es contradictoria.Particularmente en Cuba los bioplaguicidas tienen unamplio uso [Vázquez y Castellanos, 1997], especialmenteen cultivos agrícolas anuales (hortalizas, viandas,granos, etc.), por lo que su impacto ambiental enlos agroecosistemas requiere ser estudiado.Entre los cultivos agrícolas, la yuca puede ser uno delos más perjudicados por los insecticidas en general, yaque su principal plaga, Erinnyis ello L., es regulada porlos idiobiontes-endoparasitoides Trichogramma spp.(huevo) y Cotesia americanus (Lepeletier) (larva). A veceses necesario liberar masivamente el primero debidoa que aparecen brotes de la plaga por el efecto nocivode insecticidas que se aplican en áreas cercanas.Precisamente, debido a que la yuca por lo general se desarrollaen policultivos, donde se realizan aplicacionesde bioplaguicidas contra moscas blancas, áfidos, trips yfitosanidad/25

Luis L. Vázquezotras plagas, se evaluó el efecto toxicológico de biopreparadosde acción por contacto sobre los adultosde C. americanus, todo lo cual se informa en el presenteartículo.MATERIALES Y MÉTODOSEl ensayo se realizó en el laboratorio (A: 170 msnm,T: 26 o C; HR: 85-90%).Se utilizaron biopreparados obtenidos por cultivo superficial,según tecnología empleada en los CentrosReproductores de Entomófagos y Entomopatógenos(CREE), basados en los hongos entomopatógenos Verticilliumlecanii (Zimm) Viegas y Beauveria bassiana (Balsamo)Vuillemin (Hyphomycetes: Miniliales). Lascepas y concentración de las esporas de los biopreparadosse indican en la Tabla 1, en ambos casos con másdel 95% de viabilidad de las esporas.Tabla 1. Porcentaje de mortalidad de adultos de Cotesia americanus causada por biopreparadosde los hongos Verticillium lecanii y Beauveria bassiana en condiciones de laboratorioVariantesCepaConcentración(esp/mL)nMétodosMortalidad(%)Virulencia(%)45V. lecanii Y-57 6,2-– 0 8 45AB90,6 b95,1 a98,6 a70,5 dB. bassiana 1 7,9–10 8 4548AB84,5 c82,3 c80,1 c92,9 bTestigo ADE –4848AB3,4 d2,9 d0e0eLetras iguales no difieren significativamente (p < 0,05)Se colectaron «algodones» de Cotesia americanus que habíanparasitado larvas de la primavera de la yuca(Erinnyis ello) en un área cultivada de yuca (Manihot esculentaCreutz) existente en la localidad, que se encontrabaen fase de cosecha y no había recibido ningúntipo de tratamiento con plaguicidas químicos ni biológicos.Previamente se realizó una prueba para determinar lalongevidad de los adultos de los parasitoides en frascosde vidrio, alimentándolos con solución azucarada en latapa. Se obtuvo una duración entre 8-10 días, bajo lascondiciones de laboratorio antes referidas.Las pruebas con los micoinsecticidas se realizaron porel método de Folegatti et al. (1990) modificado, en dosvariantes: a) mediante la aspersión directa al «algodón»,luego dejarlos secar en el laboratorio y posteriormenteintroducirlos en frascos de vidrio (altura: 4 cm;diámetro: 1,5 cm) y esperar a la emergencia de los adultosdel parasitoide; b) la aspersión de rectángulos depapel de filtro (2,5 x 1,5 cm), dejarlos secar al aire en ellaboratorio y luego colocarlos en los frascos de vidrio;posteriormente introducir en estos frascos adultos delparasitoide recién emergidos de «algodones» no tratadoscon plaguicidas.Para cada variante se realizaron tres réplicas de 15 insectoscada una, incluyendo los testigos que se asperjaroncon agua destilada estéril (ADE).Diariamente se anotó el número de parasitoides muertos,los que se separaron y luego se desinfectaron conhipoclorito de sodio (0,5%) y agua destilada estéril y secolocaron en cámara húmeda previamente esterilizada.Estos se mantuvieron en el laboratorio para garantizarla manifestación de los hongos sobre los insectos. Así sedeterminó los que fallecieron por la acción del entomopatógeno(virulencia).Los valores porcentuales de mortalidad se corrigieroncon el testigo según la fórmula de Schneider-Orelli[Anónimo, 1981], esto es:% de eficacia = b − k ⋅100 − k 100donde: b es el por ciento de individuos muertos en lavariante tratada, y k es el por ciento de individuosmuertos en el testigo.Los resultados se comprobaron mediante un ANOVA,previamente transformados los valores porcentuales decada réplica en 2 arc. sen p.RESULTADOS Y DISCUSIÓNLos biopreparados de los hongos V. lecanii y B. bassianademostraron ser altamente patogénicos a Cotesia americanus(Tabla 1), con mortalidades mayores del 80% yalta virulencia.Por el método de aspersión al «algodón» antes de laemergencia de los parasitoides, la mayor mortalidad yvirulencia fue ocasionada por V. lecanii, con valores de90,6% y 98,6%, respectivamente, y por el método del26/fitosanidad

Efecto de Verticillium lecanii y Beauveria bassiana...papel de filtro asperjado, la mayor mortalidad fue ocasionadatambién por este hongo (95,1%), mientras queB. bassiana mostró mayor virulencia (92,9%).Estos resultados coinciden en parte con Burkova y Krasavina(1997), quienes atribuyen toxicidad variada deestos hongos sobre otros himenópteros parasitoides.El análisis de varianza de los porcentajes de mortalidaddel parasitoide y la virulencia de los patógenos indicóque pueden ocurrir diferentes respuestas del insecto enfunción de los métodos de exposición y el patógenoempleado, ya que existen diferencias entre los dos métodos(p < 0,05).A partir de que los adultos de los parasitoides se pusieronen contacto con el biopreparado, la muerte se inicióa los 3-5 días, y la esporulación del hongo en lascámaras húmedas se manifestó a los 7-8 días. El miceliode los hongos emergió a través de los intersegmentosdel cuerpo del adulto de C. americanus y luego locubrió totalmente. El método de exposición no influyóen el tiempo en que se produjo la muerte de los insectos.De acuerdo con la alta mortalidad obtenida a causa deestos bioplaguicidas y según la escala de la OILB [Viñuelaet al., 1993, su acción se clasifica como de categoría3 (moderadamente tóxico), ya que en pruebas delaboratorio superan el 80% de reducción de la capacidadbeneficiosa. Desde luego, las dosis de campo deestos bioplaguicidas generalmente están a concentracionesentre 10 6 –10 7 esporas/mL, por lo que bajo estascondiciones la mortalidad debe ser menor.Estos resultados sugieren la conveniencia de no utilizarestos bioplaguicidas en cultivos asociados con yuca, yen el caso de los cultivos colindantes, realizar los tratamientosen las horas de poco o ningún viento para evitarque el producto llegue al follaje de la yuca, dondepuede afectar a C. americanus, aunque no se descarta quepueda tener efecto también sobre otros parasitoides.REFERENCIASAnónimo: Manual para ensayos de campo en protección vegetal, DocumentaCIBA-GEIGY, Basilea, Suiza, 1981, pp.33-34.Burkova, L. A.; L. P. Krasavina: «Toxicidad de los biopreparados paralos insectos útiles», Phytoma 85: 9-10, España, 1987.Folegatti, M. E.; S. B. Alves; P. S. Machado: «Patogenicidad do fungoMetarhizium anisopliae (Metsch) Sorok para pupas e adultos deApanteles flavipes (Cam.)», Pesquisa Agropecuaria Brasileira. 24(2): 247-251, 1990.Izquierdo, J.; J. Fortuny: «Validación de metodologías en la evaluacióntoxicológica de plaguicidas sobre fauna benéfica», Phytoma92: 42-44, España, 1997.Vázquez, L. L.; J. A. Castellanos: «Desarrollo del control biológico deplagas en la agricultura cubana», AgroEnfoque, 91: 14-15, Lima,Perú, 1997.Viñuela, E.; J. A. Jacas; V. Marco; A. Adan; F. Budia: «Los efectos delos plaguicidas sobre los organismos beneficiosos en agricultura y elgrupo de trabajo de OILB plaguicidas y organismos beneficiosos.Insecticidas y acaricidas», Phytoma 55: 18-25, España, 1993.fitosanidad/27

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002IMPACTO DEL MANEJO INTEGRADO DE PLAGASEN LA RECUPERACIÓN DE LOS ENEMIGOSNATURALES EN EL CULTIVO DE LA PAPA(SOLANUM TUBEROSUM L.)Ana Ibis Elizondo, 1 Carlos A. Murguido, 1 Emilio Fernández, 1 Máximo Martínez, 2Lázaro Licor, 3 Leonides Castellanos 4 y Roquelina Jiménez 41 Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 116002 Centro Nacional de Sanidad Vegetal. Ayuntamiento no. 231, Nuevo Vedado3 Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Carretera Central, Ciego de Ávila4 Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Carretera de Palmira km 4, CienfuegosRESUMENDurante las campañas 1993-94, 1994-95 y 1995-96 se validó un sistemaflexible de manejo integrado de plagas en el cultivo de la papa envarios sitios pilotos en las provincias de La Habana, Cienfuegos y Ciegode Ávila. Los resultados demostraron la factibilidad de la aplicacióndel sistema en las diferentes regiones. Los componentes insectos yácaros nocivos admitieron con eficacia la aplicación de tácticas de luchabiológica, lo que permitió disminuir la carga química al cultivo y lamanifestación y preservación de importantes enemigos naturales totalmentediezmados en los sistemas convencionales como son loscoccinélidos depredadores (Cycloneda limbifer Csy., Coleomegillacubensis Csy.), y los parasitoides himenópteros (Lysiphlebus testaceipes(Cress.), Encarsia spp. Heteroschema spp., Opius sp.).Palabras claves: manejo integrado de plagas, enemigos naturales,papaABSTRACTDuring the campaigns 1993-94, 1994-95 and 1995-96 were validateda flexible system of integrated handling of plagues in the cultivation ofthe potato in several places pilots in Havana, Cienfuegos and Ciegode Ávila province. The results demonstrated the feasibility of the applicationof the system in the different regions. The component insectsand noxious acari admitted with effectiveness the application of tacticalof biological fight, what allowed to diminish the chemical load to thecultivation and the manifestation and important natural enemies’ preservationcompletely decimated in the conventional systems as theyare the coccinélidos depredadores (Cycloneda limbifer Csy., Coleomegillacubensis Csy.) and the parasitoides himenópteros (Lysiphlebustestaceipes (Cress.), Encarsia spp., Heteroschema spp., Opius sp.).Key words: integrated pest management, natural enemies, potatoINTRODUCCIÓNLa papa (Solanum tuberosum L.) es un cultivo de ampliaaceptación para el consumo de la población enCuba; es considerado de alta tecnología por los grandesrecursos que se destinan a su producción anualmente,los cuales van desde semillas de alta calidad hasta laadopción de sistemas complejos de riego, fertilizaciónquímica, gran utilización de maquinaria agrícola, plaguicidasquímicos de alta calidad que se aplican bajosistema de señalización y pronóstico, etc.Los métodos de monitoreo y señalización de las plagasoptimiza el uso de los plaguicidas químicos, pero maximizala eficacia de las aplicaciones y no valora integralmentelos efectos nocivos consecutivos, como son laafectación de los enemigos naturales, la contaminacióndel ambiente, las afectaciones a la salud humana...Estos efectos nocivos han sido reconocidos a nivelmundial, y las pérdidas de los cultivos antes de la cosecha,debidas a los insectos, se incrementaron del 7 al13% en el período en que más aumentó el uso de losplaguicidas [Pimentel et al., 1978].En la actualidad se lucha por el alcance de una agriculturasostenible, la cual presupone la utilización óptimade diversos métodos, técnicamente efectivos, económicamenteviables y compatibles con el ambiente [Fernándezet al., 1996].A escala mundial este cambio no se debe precisamentea los efectos adversos del uso indiscriminado de plaguicidas,sino más bien al fracaso cada vez mayor de los insecticidaspara lograr un control eficiente [Hansen,1990]. Por ello la aplicación de los sistemas de manejointegrado de plagas ha ido ganando cada vez mayoraceptación entre los productores, no sólo por los beneficioseconómicos que aporta, sino también por su impactoen el agroecosistema.fitosanidad/29

Elizondo y otrosEn Cuba han sido reportadas varias especies de depredadoresy parasitoides de especies plagas comunes enla papa [Alayo, 1970; Alayo y Hernández, 1978; Jiménez,1980 y La Rosa, 1993], los cuales pueden jugar unpapel importante en la regulación de estos insectos nocivos.La presencia y actividad de estos insectos benéficosen los agroecosistemas paperos ha sido muyafectada por la influencia negativa de varios factoresrelativos a la tecnología del cultivo yalatoxicidad delos diversos plaguicidas químicos utilizados en el combatede las plagas [Murguido, 1998].El impacto de las tácticas de manejo integrado de plagas(MIP) puede ser valorado, entre otras, a través dela reducción de la carga química que recibe el cultivo yla influencia que esto produce en la recuperación de laactividad de los reguladores biológicos o la manifestaciónde nuevos enemigos naturales.Por ello, durante tres campañas de siembra se validó unsistema flexible de manejo integrado de plagas en elcultivo de la papa en varios sitios pilotos en las provinciasde La Habana, Cienfuegos y Ciego de Ávila. En elpresente trabajo se presenta la influencia de la aplicaciónde este sistema sobre la recuperación de importantesbiorreguladores de las principales plagas de la papa.MATERIALES Y MÉTODOSDurante las campañas de siembra de papa de 1993-94,1994-95 y 1995-96 se evaluó el comportamiento de losenemigos naturales de las principales plagas de la papaen las provincias de La Habana, Cienfuegos y Ciego deÁvila dentro de un sistema de manejo integrado queabarcó 890,3 ha de diferentes variedades distribuidasen sistemas de riego de pivote central y DDA-100 fundamentalmente.El programa MIP consta de un esquema flexible de manejopara la toma de decisiones sobre la base de un conjuntode medidas preventivas y curativas [Murguido,1995] previamente elaboradas. Las medidas de luchase aplicaron según las metodologías de monitoreo yumbrales de acción establecidas para los áfidos Myzuspersicae (Sulzer) y Aphis gossypii Glover. [Jiménez,1985], el minador de las hojas Liriomyza trifolii (Burgess)[Murguido y Pla, 1992], varias especies de lepidópterosdefoliadores de los géneros Spodoptera yTrichoplusia y el ácaro blanco Poliphagotarsonemus latusBanks [Pérez et al., 1990] que establecen los niveles deplagas permisibles para la realización de los tratamientosde insecticidas y acaricidas.Las áreas de manejo integrado fueron tratadas con losBacillus thuringiensis Berlinier a la dosis de 4-5 L/ha parael control de minadores de las hojas (L. trifolii) y larvasde lepidópteros (Spodoptera spp.), con un biopreparadoa base de la cepa LBT-24, y contra el ácaro blanco(P. latus), con la cepa LBT-13. Se utilizó también Verticilliumlecanii (Zimm.) (cepa Y-57) a 1 kg/ha o 10 L/ha(sólido o líquido, respectivamente) para el control delos áfidos (M. persicae y A. gossypii). Los insecticidasquímicos se aplicaron dirigidos a los focos de infestacióncuando no se dispuso de los productos biológicoso cuando ocurrieron altos brotes de plaga.Las áreas testigo se asperjaron con los insecticidas químicosmetamidofos CS 60 a 0,6 kg i.a./ha, lambdacyhalotrin CE 5,0 a 12,5 g i.a./ha contra los insectosplagas, y el acaricida dicofol CE 18,5 a 0,27 kg. i.a./hacontra el ácaro blanco, pero también según los índicesde las metodologías de señalización.Para el combate de las enfermedades se utilizaron lasrecomendaciones elaboradas por la Dirección deSanidad Vegetal de cada provincia para ambos procedimientosde lucha (sistema MIP y método convencional),que consiste fundamentalmente en la aplicaciónde fungicidas de contacto de forma preventiva y sistémicoscuando se dan condiciones favorables para el tizóntardío (PhithopPhytophthora infestans (Mont.) deBary).En las dos variantes se evaluó la presencia de los enemigosnaturales (depredadores y parasitoides) en el mismotamaño de muestra que las plagas, y se determinóla cantidad por unidad de muestreo y porcentaje de parasitismo.RESULTADOS Y DISCUSIÓNEn el primer año de trabajo no se logró una reducciónapreciable en la cantidad de plaguicidas químicos utilizadopor los agricultores; sin embargo, como resultadode la estrategia trazada para el combate de las plagas,en los períodos de siembra de 1994-95 y 1995-96 seredujeron los tratamientos de insecticidas acaricidasquímicos en las áreas MIP en 63,19% y 43,67% respectivamente(Tabla 1) en relación con el total de aplicacionesquímicas y biológicas.El promedio de aspersiones con los productos biológicosB. thuringiensis cepas LBT-24 y LBT-13 y V. lecaniicepa Y-57 fue menor en el último período de siembra(1995-96); no obstante, es necesario destacar que tuvieronmayor generalización en su aplicación, ya quehubo incremento en las áreas MIP en este año. Además,el plagueo optimizó el uso de los insecticidas químicosy biológicos, aunque esta táctica por sí sola noconllevó una reducción en el número de tratamientos.La tendencia de los productores a aceptar los bioplaguicidasy a la reducción de los insecticidas químicos seincrementó de un período a otro, lo que unido al aumentode las áreas MIP manifestó la confianza de losagricultores hacia el nuevo sistema de MIP.30/fitosanidad

Impacto del manejo integrado de plagas en la...Tabla 1. Promedio de aplicaciones químicas y biológicas en las áreas MIP y testigo durante los períodos de1994-1995 y 1995-1996 y porcentaje de reducción de la carga químico tóxica de insecticidas y acaricidasPeríodo de 1994-95 Período de 1995-96ÁreasPromedio de aspersionesPor ciento Promedio de aspersionesTotal deQuímica Biológicas reducción Químicas BiológicasTotalPor cientodereducciónMIP 1,52 2,61 4,13 63,19 1,38 1,07 2,45 43,67Testigo 2,64 0,00 2,64 0,00 2,82 0,06 2,88 2,08Los fungicidas no pueden someterse a este análisisporque su aplicación se ajustó fundamentalmente arazones técnico-operativas condicionadas por el sistemade riego. Aunque el inicio de los tratamientos serealizó a partir de la aparición de los primeros síntomasen caso del tizón temprano (Alternaria solani, Sor.)y según los índices de pronóstico para el tizón tardío(P. infestans), el número de aplicaciones en general tantopara las áreas MIP como testigo resultó alto, y portanto su impacto ambiental resultó negativo a los propósitosde preservar el agroecosistema.El resultado del impacto ambiental del MIP fue la recuperaciónde algunos enemigos naturales y su preservaciónen estas áreas. Sobre este particular, Izquierdo yLongley (1994) plantean que el efecto negativo másevidente de la aplicación de un plaguicida sobre los organismosútiles es el de poder generar un incrementode la mortalidad.En las áreas estudiadas se encontraron diferentes enemigosnaturales, entre los cuales están tres especies deinsectos depredadores, cuatro parasitoides y un hongoentomopatógeno. Las plagas presentaron más de unbiorregulador asociado, excepto en el caso de Bemisia tabaci(Gen.), donde sólo se detectó Encarsia spp. (Tabla 2).También otros enemigos naturales en el cultivo dela papa han sido informados por Jiménez (1980) yLa Rosa (1993), especies como Chilocorus cacti, (L.)(Coleoptera: Coccinellidae), Aphidius sp., Ephedrus sp.,Apanteles sp. (Himenoptera:Braconidae), Eretmocerus sp.(Hymenoptera:Aphelinidae), Trichogramma sp. (Himenoptera:Chalcidae)para áreas sin aplicaciones químicas.Tabla 2. Enemigos naturales de las plagas de la papaTipo Orden: Familia Género/especie PlagasDepredadoresColeoptera:CoccinellidaeCycloneda limbifer, Csy.Hippodamia convergens, Guér.Coleomegilla cubensis, Csy.M. persicaeA. gossypiiA. gossypiiParasitoidesHymenoptera:BraconidaeAphelinidaePteromalidaeSpaconidaeLysiphlebus testaceipes (Cress.)Encarsia spp.Heteroschema sp.Opius sp.A. gossypiiB. tabaciL. trifoliiL. trifoliiEntomopatógenos Entomophtorales Entomophthora aphidis M. persicaeLos áfidos (M. persicae y A. gossypii) fueron los fitófagosque presentaron mayor número de enemigos naturales,entre los que se destacaron los coccinélidos C. limbifer,H. convergens y C. cubensis, que aparecieron en todas lasáreas MIP en diferentes momentos del ciclo del cultivo.Estos resultados coinciden con Mendoza y Gómez(1982), quienes señalaron la influencia de los parasitoidesy depredadores en las poblaciones de M. persicae,además de especies de hongos entomopatógenos quecausan epizootias en las poblaciones de este áfido. Gómezy Liens (1977) reportaron, para esta misma plaga,entre los parasitoides internos L. testaceipes (Hymenoptera:Braconidae), y entre los depredadores C. cubensisCsy. (Coleoptera:Coccinellidae).En la provincia de La Habana, aunque los enemigos naturalesde los áfidos no lograron mantener la poblaciónde la plaga por debajo de sus umbrales de daño, en laúltima etapa del cultivo se presentaron importantes incrementosde la población de coccinélidos depredadoresy del parasitoide L. testaceipes.fitosanidad/31

Elizondo y otrosCuando el cultivo tenía entre 82 y 98 días de la siembra,el porcentaje de parasitismo por L. testaceipes en lasáreas MIP fluctuó entre 14,5 y 25,92, mientras que enlas testigos en un solo campo se presentó 7,43 %.La relación presa-depredador entre los coccinélidos ylos áfidos de manera general resultó muy baja; no obstante,también en las áreas MIP fue superior a las testigos.En la Empresa de Cultivos Varios de Batabanó losindicadores de porcentaje de parasitismo y relaciónpresa-depredador fueron superiores a los observadosen la Empresa de Cultivos Varios de Güira de Melena(Tabla 3).Tabla 3. Relaciones de los áfidos con sus enemigos naturales en las áreas MIP y testigos en los sitiosde La Habana (campaña 1995-96)LocalidadUbicaciónEdad delcultivoen días*Por cientode parasitismode A. gossypii porL. testaceipesRelaciónpresa-depredadorpor coccinélidosEmpresa de CultivosVarios de BatabanóFregat 6 (MIP) 98 25,92 0,172Fregat 2A (Testigo) 93 7,43 0,025Fregat Cunda 2 (MIP) 98 16,5 0,056Empresa de CultivosVarios de Güira deMelenaFregat Cunda 4 (Testigo) 93 00,0 0,001Fregat Pacios (MIP) 87 14,5 0,04Fregat La Jacuma(Testigo)82 00,0 0,00* A partir de la fecha de siembra.La importancia de los parasitoides como control biológicode los áfidos ha sido reconocida para cultivos alaire libre [Hughes, 1989], así como el efecto de la aplicaciónde plaguicidas sobre L. testaceipes [Garrido et al.,1986; Harde et al., 1990].En los sitios de Ciego de Ávila, además de los depredadoresantes mencionados, ejercieron también una fuertepresión de reducción un grupo de especies dearácnidos, sírfidos, crisópidos y redúvidos. Igualmentesobre M. persicae se detectaron afectaciones por unhongo entomopatógeno (Entomophthora sp.) y deLysiphlebus sp. sobre A. gossypii en la mayoría de los sitiosde esta provincia.En Cienfuegos la presencia de enemigos naturales enlas áreas MIP estuvo representada por los coccinélidosC. sanguinea y C. cubensis. Las intersecciones en el áreaMIP fueron superiores a las áreas testigos. Así, del totalde los coccinélidos detectados el 64% correspondió alas áreas MIP, mientras que en los testigos sólo alcanzóel 36% (Tabla 4).Tabla 4. Detección de enemigos naturales de los áfidos en las áreas MIPde CienfuegosÁrea Ubicación Muestreos (%) Especie de depredadorMIP Kuban 9 64 C. sanguinea, C. cubensisTestigo Kuban 15 y 16 36 C. sanguineaEstos resultados se correspondieron con el procedimientollevado a cabo en las áreas de manejo integradodonde las aplicaciones químicas realizadas estuvierondirigidas a los focos de infestación de las plagas.Otras plagas importantes de la papa como el minadorde las hojas L. trifolii, el ácaro blanco P. latus y las prodeniaso polillas Spodoptera spp. también fueron reguladaspor sus enemigos naturales en las áreas MIP delas distintas provincias.En La Habana el parasitismo de L. trifolii por sus enemigosnaturales, Heteroschema sp. Opius sp., se32/fitosanidadmantuvo superior al 40% en todas las campañas, loque se corresponde con la baja incidencia del fitófagoen el campo (Tabla 5).En Ciego de Ávila se pudo comprobar también un balancefavorable entre los minadores y sus controles naturalesen las áreas donde se utilizó el B. thuringiensis.La reducción de la carga químico-tóxica pudo ser lacausa de la recuperación de los enemigos naturales enlas áreas MIP respecto a los testigos. Sin embargo, lacomplejidad de la interacción entre plaguicidas yorganismos nocivos útiles hace que existan muchos

Impacto del manejo integrado de plagas en la...interrogantes sin respuestas, sobre todo al nivel de aplicacionesreales en campo [Izquierdo y Longley, 1994].El efecto regulador de estos sería mejorado con métodosinundativos de alguna de las especies de depredadoreso parásitos más promisorias, como son los coccinélidoso crisópas, y el parasitoide L. testaceipes respectivamente,contra el áfido negro (A. gossypii), querequiere actualmente para su control mezclas de insecticidasquímicos altamente tóxicos, con riesgos para lasalud de los operarios y contaminación del ambiente.Por ello, según Hoy (1990), esto hace prever que losavances más significativos en los programas de controlintegrado se basarán en mejoras en la utilización coordinadade plaguicidas y organismos útiles.Los efectos contrarios de los fungicidas que se utilizanen el combate de las enfermedades foliares presentadasen la papa, sobre la aplicación masiva de bioplaguicidasde hongos entomopatógenos, serían reducidos con lageneralización de la liberación de depredadores y parasitoides.Tabla 5. Parasitismo de L. trifolii en las áreas MIP de La HabanaLocalidad Ubicación CampañaEdad delcultivo en díasPorcentaje deparasitismoGüira de Melena Fregat Etiopía 3 1994-95 35 42Fregat 16 1993-94 50 56Batabanó Fregat 16 1994-95 48 48Fregat 2ª 1995-96 39 40CONCLUSIONES• Asociadas a las plagas de la papa se halló mayor númerode controles naturales en las áreas MIP que en lasque recibieron solamente tratamientos químicos, auncuando en estas últimas las aplicaciones se realizaronbajo sistema de señalización o aviso.• Las áreas en el sistema MIP recibieron un promediosemejante de aplicaciones a las tratadas por el métodoconvencional; sin embargo, la incorporación de bioplaguicidascomo complemento en la estrategia de luchafavoreció la recuperación de los enemigos naturales.• Los enemigos naturales por sí solos no fueron capacesde mantener las plagas por debajo de los umbrales dedaños, por lo que la estrategia de lucha se debe complementarcon la reproducción masiva y liberación de especiesprometedoras que pueden constituir una valiosaalternativa para los programas MIP en el cultivo de lapapa.REFERENCIASAlayo, P.: Catálogo de los Himenópteros de Cuba, Dirección de Publicacionesde la ACC, La Habana, 1970.Alayo, P.; L. R. Hernández: Introducción al estudio de los Himenópterosde Cuba, Dirección de Publicaciones de la ACC, La Habana,1978.Fernández, E.; C. Murguido; E. Candanedo: «Manejo integrado de plagas»,Primer Seminario de Refrescamiento del Curso Internacional dePapa para Alumnos de América Latina y El Caribe, IAC-Holanda yMINAGRI,19 de febrero al 1 de marzo, La Habana, 1996.Garrido, A.; J. Tarancon; T. del Busto: «Toxicidad de algunos plaguicidasen laboratorio sobre el parásito de áfidos Lysiphlebus testaceipes(Cresson) (Hym.: Aphididae)», Cong. N. SECH, Córdoba, 21- 25de abril, 973-981, 1986.Gómez, J.; R. Liens: «Fluctuación poblacional de Myzus persicaeSulz. (Homoptera, Aphidiidae) Durante una cosecha de papas en laregión de Remedios, Cuba», Centro Agrícola 4 (2), 1977.Hansen, M.: Escape del círculo vicioso de los plaguicidas. El reemplazode los plaguicidas en los países en vías de desarrollo, ConsumerPolicy Institute, Consumers Union, New York, 1990.Hardee, D. P., P. J. O’Brien; G. W. Elsen; G. L. Snodgrass: «Emergenceand Survival of the Parasitoid Lysiphlebus testaceipes fromAphis gossypii Exposed to Aphicides». Southwestern Entomol., 15:211- 216, 1990.Hoy, M. A.: «Commentary: the Importance of Biological Control in USAgriculture», J. Sust. Agric., 1: 59-79, 1990.Hughes, R. D.: «Biological Control in the Open Field», Aphis, Theirbiology, Natural Enemies and Control, vol, C (Eds. Minks, A. K. IHarrewijn, P.) Elsevier, Amsterdam, 167-198, 1989.Izquierdo, J. I.; M. Longley: «Efecto de los plaguicidas sobre parasitoidesde áfidos (Himenoptera: Aphidiidae)», Phytoma España 55: 34-41, 1994.Jiménez, S.: «Estudio bioecológico de Myzus persicae (Sulzer) enpapa», Informe al Problema Principal Estatal 04, Instituto de Investigacionesde Sanidad Vegetal, Ministerio de la Agricultura, Cuba,1980.Jiménez, S. «Metodología para la señalización de los áfidos de lapapa». Centro Nacional de Sanidad Vegetal, Ministerio de la Agricultura,La Habana, 1985.La Rosa, Julia: «Abundancia poblacional y distribución en las plantasde papa de Aphis gossypii y Myzus persicae y sus enemigos naturales»,IV Taller sobre Diagnóstico de Plagas, Sociedad Cubana deZoología, Academia de Ciencias de Cuba, 1993.Mendoza, F.; J. Gómez: Principales insectos que atacan a las plantaseconómicas de Cuba, Ed. Pueblo y Educación, La Habana, 1982.Murguido, C.; D. Pla: «Metodología para la señalización de los minadoresde las hojas de la papa», Centro Nacional de Sanidad Vegetal,Ministerio de la Agricultura, La Habana, 1992.fitosanidad/33

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FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002ESTRATEGIAS DE LUCHA PARA EVITAR EPIDEMIASPROVOCADAS POR LA ENFERMEDAD PATA PRIETADEL TABACO EN CUBAAna Fernández Morales, 1 Berta Lina Muiño, 1 Verónica Toledo, 2 María L. Martínez, 3 WendyWong, 1 Raquel Arévalo, 4 María D. Ariosa 5 y Adriana Hernández 61 Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 116002 Instituto de Investigaciones del Tabaco. Carretera del Tumbadero km 1 ½, San Antonio delos Baños. Cuba3 Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Km 22½. Carretera a San Juan. Vivero.San Juan y Martínez. Pinar del Río4 Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Carretera Central vía Holguín no. 371, Bayamo, Granma5 Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Carretera del Jíbaro km 2½. Deleg. Prov. MINAG.Sancti Spiritus6 Instituto de Ecología y Sistemática. Carretera de Varona km 3½. Capdevila, Ministerio deCiencia, Tecnología y Medio Ambiente, CubaRESUMENLa pata prieta causada por el hongo Phytophthora nicotianae, es unade las principales enfermedades que aún afecta al cultivo del tabacoen diferentes regiones del mundo, en las cuales se han reportado pérdidashasta de 18 908 000 dólares. Cuba no escapa a esta realidad ydesde principios de siglo esto constituye un problema vital dentro de laagricultura tabacalera. Para evitar el riesgo de epidemias con sus consecuentespérdidas económicas, se realizaron estudios sobre alternativasde control que permitieran establecer un manejo de laenfermedad y disminuir los riesgos de epidemias fundamentalmenteen los semilleros. Se elaboró un método sencillo con hojas de tabacopara la detección y cuantificación del patógeno en el suelo, se determinóel papel de los factores bióticos y abióticos en el desarrollo de lasepidemias y se estudió la efectividad de diferentes métodos de luchaque incluyeron, la selección de campos, la solarización, la rotación decultivos, el uso de Trichoderma harzianum en función del nivel de infestacióndel suelo y el uso de Glomus spp. Se determinó que la selecciónde áreas para semilleros y la rotación de cultivo contribuyerona disminuir las afectaciones en el cultivo. La solarización del suelo por30 días y el empleo de Glomus spp. resultaron eficaces para el controlde la enfermedad. El método de cebo fue óptimo para cuantificar el nivelde infestación de los suelos antes de la siembra y establecer lasestrategias de lucha, en las que se incluyeron el empleo de Trichodermay aplicaciones de fungicidas. Estos resultados han permitido establecerel manejo de la enfermedad, disminuir los riesgos de epidemiasy las pérdidas en el cultivo.ABSTRACTThe black shank disease caused by the Phytophthora nicotianae fungus,is one of the main disease that still affects tobacco cultivation indifferent areas of the world, in which loss of UDS 18 908 000 havebeen reported. Cuba is also involved in this problem, and from the beginningof this last century, this is a vital problem for tobacco’s agriculture.In order to avoid the risk of epidemics with their consistenteconomic lost, different studies about control alternatives were donethat could allow establish a management of the disease, and diminishthe risk of epidemics mainly in the seedbeds. A simple method, usingtobacco leafs to the detection and quantification of the pathogen in soilwas made. The role of the biotic and abiotic factors in the developmentof the epidemics was determined. The effectiveness of the differentcontrol methods was studied, such as field selection, solarization, croprotation, the use of Trichoderma harzianum according to the level ofsoil infestation and Glomus spp. It was determined that the selection ofareas for the seedbeds, and the crops rotation, contributed to reducethe affectation in the cultivation. Soil solarization for 30 days and theuse of Glomus spp. were efficient to control the disease. The bait methodwas optimal to quantificate the soil infestation level before culturebegan, and to establish strategies in which the use of Trichoderma andfungicides applications were included. These results have allowed toestablish the management of the disease, the reduction of the risk ofepidemics, and lost in cultivation.Keys Words: Risk, epidemic, Phytophthora nicotianae, tobaccoPalabras claves: Riesgo, epidemias, Phytophthora nicotianae, tabacoINTRODUCCIÓNEl tabaco (Nicotiana tabacum L.) fue introducido enCuba antes de 1492 desde el continente americano, yes en la segunda mitad del siglo XVII que se inicia su cultivocon destino al comercio. A principios del siglo XX,seinició la recuperación del tabaco negro original deCuba, y posteriormente, en 1959, se inicia el programade mejoramiento genético dirigido a la obtención denuevas variedades cubanas de tabaco negro, cuyos criteriosde selección comprendían el potencial de rendimiento,la calidad y la resistencia a la enfermedad pataprieta. El tabaco representa una de las fuentes más importantesde entrada de divisas para nuestro país, poreso requiere una atención priorizada durante todo elciclo del cultivo, no sólo con el objetivo de obtener cosechasabundantes, sino de mantener la exquisita calidady la fama que ha distinguido al tabaco cubano en elfitosanidad/35

Fernández y otrosmundo por más de cuatrocientos años [Espino,1996].Debido a la importancia que tiene el tabaco para la economíacubana, en la campaña tabacalera de 1996-97,la siembra se ha extendido a las 14 provincias del país,sembrándose 56 364 ha [Cuba,1997].En 1896 Breda de Haan informa por primera vez lapresencia de la enfermedad en semilleros de tabaco enJava, cuyo organismo causal denominó Phytophthora nicotianaeBreda de Haan [Lucas,1965]. Con posterioridadsu presencia se ha reportado en más de veinticincopaíses productores de este cultivo, en los cuales causagraves pérdidas en todos los tipos de tabaco [Shew yLucas, 1991]. Sólo en Carolina del Sur (E. U.) las pérdidasascendieron en años a cerca de ciento treinta millonesde dólares [Fortnum, 1996].A pesar del desarrollo de métodos de control, entreellos los fungicidas, aún en la actualidad P. nicotianae sesigue considerando como uno de los patógenos del suelomás dañino del tabaco, debido a la falta de fungicidasefectivos a nivel de suelo y raíces, a la resistencia alos fungicidas sistémicos yalaaparición de nuevas razasfisiológicas del hongo [Blancard, 1995].En Cuba la enfermedad fue notificada por primera vezen 1905 en la región oriental, y posteriormente se detectóen otras zonas del país. Es una de las enfermedadesde mayor repercusión económica en la produccióntabacalera nacional por las cuantiosas pérdidas quepuede ocasionar, tanto en semillero como en las plantaciones[Espino, 1996]. En las campañas desde 1980hasta 1982 no se observaron afectaciones en semilleros,pero a partir de 1982-83 su incremento fue en ascenso(259,47 ha afectadas) y provocó epidemias deconsideración en la campaña de 1985-86, principalmenteen las regiones de Pinar del Río y La Habana,con una afectación de 1 918,09 ha [Cuba, 1995]. Durantevarios años, para el control de la enfermedad seutilizó la eliminación de plantas, la demolición de áreasafectadas y los fungicidas de contacto. En 1980 se introdujoel uso del metalaxyl, pero en un tiempo brevese detectaron cepas resistentes del patógeno en lasprincipales regiones tabacaleras del país, que unido a lasiembra continua de tabaco en los campos tradicionales,motivó el incremento del inóculo en el suelo y afectacionesde consideración en el cultivo. En la campaña1986-87 se perdieron más de veintidós mil canteros y1 334,22 ha de plantación.El incremento continuo de las afectaciones en el cultivo,el control deficiente de la enfermedad con los métodosde lucha establecidos en el país y la pocainformación disponible de este patógeno en nuestrascondiciones, indicó la necesidad de abordar diferentesinvestigaciones, desarrollar métodos cuantitativos parasu detección en suelo y determinar la efectividad de alternativasde control. Estos aspectos permitirían adquirirlos conocimientos básicos, para aplicar nuevasestrategias de lucha, disminuir la incidencia de la enfermedad,evitar el riesgo de epidemias y las pérdidas fundamentalmenteen semilleros de tabaco.MATERIALES Y MÉTODOSDetección de P. nicotianae en el suelo y determinacióndel potencial infeccioso de los suelosPara la detección del patógeno en suelo se utilizó el métodoy medio selectivo de Kannwischer y Mitchell(1978), el cual fue modificado (disminución de lasconcentraciones de pimaricina a5mgydehymezaxola 25 mg), con el propósito de ahorrar producto, sinafectar su efectividad en el recobrado del patógeno.Para contar con otro método de detección del patógenoen suelo más fácil y masivo, se elaboró una técnicade cebo, estandarizándose los parámetros óptimos (variedadesde tabaco; suspensión de suelo-agua; tipo deagua y condiciones de incubación) para la infección dela trampa (hojas de tabaco). Se comprobó la eficaciadel medio selectivo modificado (P 5 ARPH 25 ) y la técnicade cebo para la cuantificación del hongo en el suelode campos de producción. Posteriormente se verificó laincidencia de pata prieta en los campos analizados y surelación con la densidad de inóculo inicial. La afectaciónpor pata prieta se realizó en base a su diferenciaciónen ataque ligero (0-2 %), moderado (>2-5 %) ysevero (> 5 ≥ 10%) del área afectada en el semillero.Prácticas culturales, físicas y biológicas para el controlde P. nicotianaeDurante la campaña 1987-88 se realizó una encuestapara evaluar la incidencia de la enfermedad en todoslos semilleros de tabaco en Pinar del Río y Sancti Spíritus,así como sus posibles causas. Se valoró la selecciónde áreas nuevas para semilleros; el uso común de losequipos, la siembra en zonas onduladas o llanas, ladensidad de plantas/cantero y la desinfección o no delsuelo. La efectividad de la rotación de cultivo en la disminuciónde la incidencia de pata prieta se verificó enplantaciones de tabaco en la principal región del tabacoen Cuba.Se estudió el efecto de la solarización, empleando tiemposde exposición de 30, 45 y 60 días para la desinfeccióndel suelo contaminado con 100 mL de 2 × 10 6clamidosporas/mL por parcela en los meses de julio yagosto. Las parcelas solarizadas fueron cubiertas conpolietileno transparente (90 micrones de espesor) y seusó un testigo sin cubrir. El suelo fue humedecido y losextremos del polietileno sellados. Posterior a la exposicióndel suelo a la solarización, se determinó la presenciadel patógeno en el suelo y la infección en lasplantas.Se estableció el efecto de Trichoderma harzianum (cepa 53)sobre tres niveles de infestación (1, 10, 20 propágulos/gsuelo) del patógeno en suelo. El suelo se inoculócon1gdeT. harzianum 72 horas antes de la inoculacióncon P. nicotianae (1 g de inóculo). Se trasplantaronposturas (variedad Corojo), se incubaron a 28 ± 2ºCyse observaron diariamente para detectar las plantas enfermasPara conocer el efecto de las micorrizas sobre la resistenciadel tabaco al patógeno se emplearon las cepas deMA Glomus clarum (Colombia); Glomus etunicatum36/fitosanidad

Estrategias de lucha para evitar epidemias...(Cuba), Glomus mosseae (Cuba), Glomus intraradices(México). Las variantes fueron: 1) plantas micorrizadas;2) plantas micorrizadas e inoculadas con P. nicotianae;3) plantas sin micorriza e inoculadas con elpatógeno; 4) plantas sin micorriza y sin P. nicotianae.Se determinó la afectación por pata prieta en todas lasvariantes estudiadas.Efectividad de diferentes estrategias de lucha empleadas parael control de la enfermedad pata prieta en semilleros de tabacoEn condiciones de producción (Pinar del Río) se valoróla efectividad de diferentes estrategias de lucha contrapata prieta en semilleros de tabaco. Los semilleros seestablecieron en campos con diferentes niveles de incidenciade la enfermedad, catalogados como bajo(0-2%), medio (>2-5%) y alto (>5-10%), según el nivelde afectación en la última campaña tabacalera. Lasestrategias utilizadas incluyeron: la selección de áreassometidas a la rotación de cultivos; la desinfección delsuelo con bromuro de metilo [Cuba, 1983], la aplicacióndel fungicida propamocarb al suelo (1,08 g/L, 2 L/ha)o foliar (3 L/ha, tres aplicaciones) junto a la aplicaciónde ditiocarbamatos y el empleo del biopreparado Trichodermaaplicado al suelo (40 L/ha) en el momento dela siembra, así como la aplicación de metalaxyl foliar(0,125 kg/ha) [Cuba, 1983; 1988, Cuba, 1995]. Se determinóla afectación por pata prieta en cada semilleroevaluado.En los estudios realizados, todos los valores expresadosen por ciento fueron transformados a arc sen x y a losdatos se les realizó análisis de varianza simple con testde significación de Newman Keulls al 5% de probabilidadde error, para lo cual se utilizó el programa estadísticoStatitcf versión 4.RESULTADOS Y DISCUSIÓNDetección de P. nicotianae en el suelo y determinacióndel potencial infeccioso de los suelosEl medio selectivo modificado y la técnica de cebo fueroneficaces para la cuantificación del patógeno en suelosnaturalmente infestados. La incidencia de laenfermedad fue nula o de intensidad ligera en aquelloscampos donde la densidad de inóculo inicial fue baja;pero el ataque de pata prieta fue severo en presencia dedensidades iniciales de inóculo altas (Tabla 1). La deteccióndel patógeno en suelo antes de la siembra permitela selección de campos con menor riesgo deincidencia de la enfermedad, aspecto corroborado porBouhot (1975) y Camporota (1980) con las especiesde Pythium y Rhizoctonia solani respectivamente.Prácticas culturales, físicas y biológicaspara el control de P. nicotianaeLa encuesta permitió valorar la situación de la enfermedaden las dos regiones más importantes de este cultivoy la posible influencia de algunos factores. Sancti Spíritusfue la menos afectada, y de 32 semilleros sólo un15,62% presentaron la enfermedad con un número mínimode canteros dañados (4,76%). En Pinar del Río laafectación fue alta (64,28%) y se dañó el 16,25% de loscanteros (Tabla 2). Las medidas practicadas en SanctiSpíritus tales como el uso de campos de barbecho o derotación con otros cultivos (96,88 %), no empleo comúnde la maquinaria; siembra en zonas con topografíaelevada, buen drenaje y uso de densidades de plantaóptimas en los canteros, posibilitaron que la incidenciade pata prieta fuera mínima (Tabla 3).Tabla 1. Detección e incidencia de P. nicotianae en suelos de campos de tabaco dela provincia de Pinar del Río (municipio de San Luis, campaña 1995-96)Semillero o campoDeteccióndel patógeno en sueloPropágulos/ gramode sueloAfectaciónpata prietaCCS Pedro Ortiz No 0,0 NoCCS Mariana Grajales No 0,0 NoCampo 228 No 0,0 NoJosé A. Echeverria Sí 13,5 SeveraBuena Aroma Sí 5,5 SeveraNiceto Pérez Sí 3,5 SeveraCCS 26 de Julio Sí 2,5 LigeraCPA 17 de Mayo Sí 1 LigeraCCS Francisco Blanco Sí 1 LigeraCCS Jesús Menéndez Sí 1 LigeraCampo 248 Sí 4,5 SeveraFrancisco Vilar Sí 1 NoHnos. Vena No 0,0 LigeraLeopoldo Troche No 0,0 Ligerafitosanidad/37

Fernández y otrosTabla 2. Incidencia de la enfermedad pata prieta en semillerosde tabaco (campaña 1987-88)Provincia No. de semilleros Sa (%) Ca (%)Pinar del Río 28 64,28 16,25Sancti Spíritus 32 15,62 4,76Leyenda:Sa: Semilleros afectadosCa: Canteros afectadosTabla 3. Resultados de la encuesta realizada a semilleros de tabaco,valoración de factores en condiciones de producción y su posibleinfluencia en la aparición e incidencia de la enfermedad pata prietaen semilleros de tabaco (campaña 1987-88)Factor (%)Pinar del RíoProvinciaSancti SpíritusTerrenos nuevos 28,57 96,87Uso común de maquinaria 78,57 0,00Topografía llana 67,86 0,00Topografía ondulada 28,57 100,0Densidad de plantas · Media NormalFecha de apariciónOctubre 61,11 –Noviembre 22,22 80,00Diciembre 5,55 20,00Desinfección del suelo Bromuro de metilo NingunaNormal (3 000-5 000) posturas/canteroMedia (6 000-10 000) posturas/canteroLa rotación de cultivo por tres años consecutivos fueeficaz para disminuir la incidencia de la enfermedad enlas plantaciones de tabaco (Tabla 4). Según Todd(1981), Kucharek (1995) y Fortnum (1996), el empleode áreas nuevas o de rotación debe ser incorporadodentro de cualquier sistema de lucha para el controlde la pata prieta. Estos resultados demuestran quecuando los niveles de inóculo del patógeno en el suelono son detectables o bajos, el riesgo de afectaciones severasen el cultivo disminuye, por lo que esta prácticaes fundamental para evitar el desarrollo de epidemiasen semilleros y de afectaciones cuantiosas en las plantaciones.La solarización fue efectiva para la desinfección de sueloscontaminados, con resultados satisfactorios en todoslos tiempos de exposición (30, 45 y 60 días) delsuelo infestado en los meses de julio-agosto, no se detectóel patógeno en el suelo, ni se afectaron las plantasdel bioensayo, contrario a lo sucedido con el testigo(Tabla 5). El período de exposición del suelo en los mesesde julio-agosto, es recomendado para países similaresal nuestro [Katan et al. 1989]. Se han registradoresultados positivos con Verticillium spp.; Rhizoctonia solani,Sclerotium rolfsii, Pythium, Sclerotium y Thielaviopsis[Stapleton y De Vay, 1986; Jiang y Erwin, 1993; Juárez-Palacioset al. 1991]. La solarización puede favorecerel efecto de ciertos biocontroles de los organismospatógenos [De Vay, 1990].T. harzianum (A-53) redujo la enfermedad para los tresniveles de infección del suelo, cuando fueron comparadoscon el testigo (Fig. 1), lo que muestra la efectividaddel biocontrol, aun con poblaciones altas del patógeno.Con niveles de inóculo muy bajo la reducción fue másefectiva, por lo que es más adecuado su aplicación en38/fitosanidad

Estrategias de lucha para evitar epidemias...suelo con niveles de infección baja del patógeno. Enplantas micorrizadas, la reducción de la enfermedadvarió con la cepa de MA empleada. Glomus mosseae (Habana)fue la más efectiva con un 70% de reducción ycon el resto de las cepas los valores de decrecimiento dela infección fueron entre un 20 y un 50 %, pero en eltestigo se afectó el ciento por ciento de las plantas (Fig. 2).Se ha demostrado la efectividad de las micorrizas comoinhibidores de la acción de estos organismos nocivos delsuelo [Grahan y Menge, 1982; Vidhyasekaran 1990].Tabla 4 . Efectividad de la rotación de cultivo en la reducción de la incidencia de pata prietaen campos de tabaco (Pinar del Río, Empresa Tabacalera Hermanos Saíz)Granja UBPC Vega CampoCultivos a rotarFechas de siembraIncidencia pata prieta (%)1 6 23 90 90/91 91/92 92 92/93 89/90 93/94229B M – H Y Y 40,3 0,0230 M – H A M 15,0 0,033 236 Y – M A H 14,0 0,2330 233A H M H A M 31,2 0,02 8 95 163 T T T T T 4,2 20,098 145 T T T T T 1,0 6,099 148 T T T T T 1,5 11,0Leyenda: T: Tabaco M: Malanga H: Habichuela Y: Yuca A: AjoTabla 5. Efectividad del método de solarización en la desinfección de suelocontaminado con Phytophthora nicotianaeTiempo de exposición(días)Presencia de hongo en sueloP. nicotianaeRespuesta en bioensayo(plantas enfermas)T S T30 – + – +45 – + – +60 – + – +Leyenda:S: Parcelas solarizadasT: Parcelas descubiertas (testigo)fitosanidad/39

Fernández y otrosFigura 1: Efectividad de Trichoderma sp. en función del nivel de infestaciónde P. nicotianae en sueloFigura 2. Comportamiento de la enfermedad pata prieta en plantas de tabaco con microrrizas ysin microrrizasEfectividad de diferentes estrategias de lucha empleadaspara el control de la enfermedad pata prietaen semilleros de tabacoPara la disminución de las afectaciones por pata prietaen semilleros de tabaco, la medida más eficaz fue el establecimientode los semilleros en campos con nivelesbajos de infección del patógeno en suelo o con antecedentesde baja incidencia por pata prieta, lo que evitóel desarrollo de epidemias y afectaciones de consideraciónen el cultivo. Todas las estrategias aplicadas en estoscampos resultaron efectivas, pero la menos costosay perjudicial al ambiente fueron las establecidas enSancti Spíritus, donde prevaleció la selección de áreaslibres del patógeno sometidas a la rotación de cultivo,el uso del biopreparado de T. harzianum al suelo antesde la siembra y la aplicación foliar de ditiocarbamatosde forma preventiva (Tabla 6), siendo una opción parala sustitución del bromuro de metilo, medida ecológicaque es necesaria para la conservación del medio ambiente.Se evidenció que en los semilleros con antecedentesde elevada incidencia de pata prieta no resultóeficaz ninguna de las estrategias utilizadas como propamocarbal suelo, o en tratamientos foliares la aplicaciónde T. harzianum al suelo, e incluso con el empleode bromuro de metilo no se logró un control eficaz debidoa reinfecciones del patógeno, resultando tambiénla más costosa. De acuerdo con nuestros resultadospara el manejo de la pata prieta, deben tenerse en cuentaestas medidas en semilleros (Fig. 3).40/fitosanidad

Estrategias de lucha para evitar epidemias...Tabla 6. Estrategias de lucha empleadas en semilleros de tabaco para disminuirla incidencia y evitar el riesgo de epidemias de la enfermedad pata prieta en producción(Pinar del Río, campaña 1992-93)SemillerosAntecedentesenfermedadMétodos de control Afectación (%)Costode la estrategia(pesos/ha)TeránSan JuanAlto Trichoderma(suelo) +Propamocarb(foliar) +Ditiocarbamatos (5-7 días)Bromuro de metilo+propamocarb (foliar)+Ditiocarbamatos (5-7 días)100 385,0458,4 2 172,73VirginiaMedioPropamocarb (foliar)+Ditiocarbamatos (5-7 días)85,0 240,54VirginiaTrichoderma(suelo)+Propamocarb (foliar) +Ditiocarbamatos (5-7 días)39,8 385,04VerbenaBajoRotación+Trichoderma(suelo)+propamocarb(foliar)Ditiocarbamatos (5-7 días)0 385,04La PullaPropamocarb (suelo) +propamocarb(foliar)+ditiocarbamatos (5-7 días)0 873,84CONCLUSIONES• El medio selectivo modificado (P 5 ARP c H 25 ) y la técnicade cebo elaborada fueron eficaces para detectar,aislar y cuantificar el patógeno en suelos naturalmenteinfestados de campos de tabaco.• La selección de campos libres del patógeno para semillerosy la rotación de cultivos fueron muy eficacespara la disminución de la incidencia de la enfermedaden los semilleros y las plantaciones de tabaco.• El uso de Trichoderma harzianum (A-53) es más efectivapara el control de P. nicotianae cuando se aplica ensuelos con niveles bajos de infección y se evidenció laefectividad de los hongos micorrizógenos en la proteccióndel tabaco contra pata prieta, y Glomus mosseae fuela especie más adecuada para la simbiosis.• La estrategia principal para el manejo de la enfermedadpata prieta, es el empleo de campos para semilleroscon un nivel de infección bajo del patógeno ensuelo, combinado con tratamientos del biopreparadode T. harzianum al suelo en el momento de la siembra ytratamientos foliares con fungicidas.REFERENCIASBlancard, D.: «Integrated Control and Tobacco Cultivation», Coresta.2: 12-15,1995.Bouhot, D.: «Recherches sur l’ecologie des champignons parasitesdans le sol. V. Une technique selective d’estimation du potentiel infectieuxdes sols, terreaux et subtrats infestes par Pythium spp. Etudesqualitatives», Ann. Phytopathologie 7, 1975.Camporota, P.: «Recherches sur l’ecologie des champignons parasitesdans le sol. XV. Choix d’ une plante piege et caracterisation dessouches de Rhizoctonia solani pour la mesure du potentiel infectieuxdes sols et substrats», Ann. Phytopathol 12:31-44. 1980.CNSV: «Registro e información estadística fitosanitaria de los cultivos»,Modelo 20-04. MINAGRI, La Habana, 1995.Cuba. MINAGRI: «Instructivo técnico del cultivo del tabaco», La Habana,1983.––––: «Informe del grupo cultivo del tabaco», La Habana,1988.––––: «Informe del grupo cultivo del tabaco», La Habana, 1997.De Vay, J. E.: «Historical Review and Principles of Soil Solarization»,Abstracts of First International Conference on Solarization,Amman-Jordan, (s.n.), 1990.Espino, M. E.: Cuban’s Cigar Tobacco, T.F.H. Publication, Inc., EstadosUnidos, 1996.Fortnum, B. A.: Black Shank Control, South Carolina Tobacco GrowersGuide, South Carolina: Alemson Extension, 1996.Graham, J. H.; J. A. Menge: «Influence of Vesicular-ArbuscularMycorrhizae and soil Phosphorus on Take-All Disease of Wheat»,Plant Pathology 72 (1): 95-98, Inglaterra, 1982.Jiang, J.; D. C. Erwin. «The Effects of Nutrients on Germination ofCold-Treated Oospores of Phytophthora cactorum in Vitro», Mycol.97: 239-298, 1993.Juárez-Palacios, C. et al.: «Thermal Sensitivity of Three Species ofPhytophthora and the Effect of Soil Solarization on their Survival»,Plant Disease 75: 1160-1164, Estados Unidos, 1991.fitosanidad/41

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FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002Control químicoMOVIMIENTO DE ALGUNOS PLAGUICIDASEN EL SUELOG. Dierksmeier, R. Hernández, Caridad Ricardo, Maria Nela Llanes, Ana Cecilia Linares yZortan CárdenasInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600RESUMENABSTRACTSe determinó la lixiviación y el ascenso capilar de un grupo de plaguicidasde uso directo al suelo. Los compuestos investigados fueronatrazina, ametrina, bromacil, propiconazol, disulfoton y metalaxil. Lalixiviación se investigó en el suelo ferralítico rojo para los plaguicidasametrina, atrazina, bromacil, propiconazol y metalaxil mientras queeste último y el disulfoton se investigaron además en el suelo ferralíticocuarcítico. El ascenso capilar se determinó exclusivamente en elsuelo ferralítico rojo para los herbicidas bromacil, ametrina y atrazina,y a estos dos últimos, además del diuron, se les investigó el arrastreen el mismo suelo. Las características fundamentales del suelo ferralíticorojo fueron: materia orgánica 1,95-2,1%; pH 6,6; ferralítico cuarcítico:1,98% de materia orgánica y pH 7,3. Las determinacionesanalíticas se realizaron por los métodos cromatográficos normalizadosy/o recomendados para cada plaguicida. La lixiviación de la ametrinafue moderada, mientras que la de la atrazina fue más fuerteaunque la magnitud del fenómeno no implica un riesgo significativo decontaminación del manto freático. El disulfoton lixivió moderadamentea la vez que sufrió una fuerte degradación en el lapso que duró el experimento.El propiconazol prácticamente no se movió del suelo,mientras que el metalaxil y el bromacil lixiviaron fuertemente en lossuelos investigados. El ascenso capilar fue débil en la ametrina y muyfuerte en la atrazina y el bromacil. Por último la atrazina se arrastró enel suelo ferralítico rojo más fuertemente que la ametrina y el diuron sinque el fenómeno fuera significativo.It was assessed the leaching and capillary upward movement of somepesticides directly applied to the soil. These compounds were: atrazine,ametryn, bromacil, propiconazole, disulfoton and metalaxyl. Theleaching behaviour was investigated for ametryn, atrazine, bromacil,propiconazole and metalaxyl in the Red Ferralitic soil, while the lastone and disulfoton were investigated likewise in the Ferralitic Cuarciticsoil. The upward capillary movement was assessed only in the RedFerralitic soil for bromacil, ametryn and atrazine, while these last twopesticides and diuron were used to investigate the run-off in the samesoil. The fundamental features of the Red Ferralitic soil were: organicmatter content: 1,95%-2,1%; pH 6,6. The corresponding values for theFerralitic Cuarcitic soil were: 1,98% and 7,3. The analytical determinationswere carried out by reliable chromatographic methods for eachpesticide. The leaching of ametryn was moderate while that of atrazinewas strong, though this movement does not pose a significant threat ofcontamination to the underground water. Disulfoton leached moderatelywhile suffered a strong degradation during the experiment. Propiconazoledid not move in the soil, while metalaxyl and bromacilleached strongly in both investigated soils. The upward capillary movementwas weak for ametryn and strong for both atrazine and bromacil.Finally the run-off for atrazine was stronger than for ametryn anddiuron, but in general the behaviour was not significant.Key words: pesticides, leaching, capillary upward, soilPalabras claves: plaguicidas, lixiviacion, ascenso capilar, sueloINTRODUCCIÓNEn la protección contemporánea de plantas tienen unuso importante los plaguicidas químicos, los cuales contribuyendecisivamente a lograr cosechas acorde con losrendimientos potenciales de los cultivos [FAO, 1998].Sin embargo, no son pocos los efectos no deseados deesta práctica agrícola, tales como los residuos en las cosechasy la contaminación del medio [Codees Alimentarius,1994]. Este último aspecto tiene cada vezmayor importancia si se tiene en cuenta que una parteconsiderable de los plaguicidas se aplica directamenteal suelo y/o llega a este por diversas vías, con la posibilidadde contaminar las fuentes de agua [Williams etal., 1995]. Por estas razones, es de mucha importanciala investigación del movimiento de los plaguicidas en elsuelo, especialmente la lixiviación, el arrastre y el ascensocapilar, fenómeno poco conocido este último, peroque sin duda contribuye al equilibrio en el medio. Enlos párrafos siguientes se expondrán los resultados delmovimiento de algunos de los principales plaguicidasde uso agrícola, en suelos de importancia económica.fitosanidad/43

Dierksmeier y otrosMATERIALES Y MÉTODOSPara realizar los experimentos de lixiviación en columnase utilizaron tubos plásticos de 5 cm de diámetro internoy 40 cm de longitud, a los cuales se les practicóuna abertura lateral de 1 cm de sector y 30 cm de longitud[Dierksmeier, 2001]. En condiciones de trabajose coloca esta cerrando el cilindro y se mantiene en suposición mediante cinta adhesiva. La parte inferior deltubo se cierra con tela o gasa.El suelo objeto de investigación se secó al aire, a la sombray se tamizó a través de una malla de 2 mm. Se llenaronentonces los tubos (dos por cada plaguicida paracada nivel de precipitación por investigar).El contenido de cada tubo se compactó mediante vibraciónmecánica. Después de esto se fijaron los tubosen posición vertical y se les pasó agua destilada en cantidadsuficiente para que esta drenara libremente. Sesuspendió el paso de agua y se dejaron los tubos en esaposición durante 24 horas.La aplicación de los plaguicidas se realizó tubo portubo, usando como máximo 5 mL de caldo de cadacompuesto. Este volumen, aunque sustancialmentesuperior al que resultaría de una práctica agrícola convencional,es apenas significativo, pues representa solamenteel 5% de la cantidad de agua del nivel deprecipitación inferior investigado (50 mm) [Jarczyk,1972; B.B.A., 1973].Las características fundamentales desde el punto devista lixiviativo de los suelos investigados fueron:Ferralítico rojo: 1,95-2,10% de materia orgánica;pH 6,6 de su suspensión acuosa 1/10 [Pequeño y López,1965].Ferralítico cuarcítico: 1,98% de materia orgánica y pH7,3 de su suspensión acuosa.La adición de agua se realizó de forma controlada demodo de no sobrepasar la cantidad correspondiente a10 mm de precipitación en una hora. Además, la sumade todas las adiciones de agua de un día no superó elequivalente a una precipitación de 50 mm.El rango de precipitaciones investigado se encontró entre25 mm y 400 mm. Terminada la última adición deagua correspondiente a un nivel investigado, se esperó24 horas. Se tomaron entonces los tubos, se les retiró lalista lateral, y se separó con una espátula el contenidoen perfiles de 2,5 cm, 5 cm y 10 cm según el experimento,analizándose el contenido de plaguicida en cadauno de ellos.Los análisis se realizaron mediante métodos cromatográficos.Así las triazinas se analizaron por cromatografíagaseosa usando un detector termoiónico[MINAGRI, 1979], el bromacil también por cromatografíagaseosa pero con detector de captura electrónica[Jarczyk, 1975], mientras que el propiconazol, disulfotony metalaxil se analizaron por métodos selectivoscon determinación final vía cromatografía gaseosa, condetector termoiónico [Min. Public. Health, 1996] [Ricardo,2001; MINAGRI, 1988].Los resultados de las réplicas analíticas y de los perfileshomólogos correspondientes al mismo plaguicida eigual nivel de precipitación se promediaron, y se reportóel porcentaje del plaguicida total en cada perfil.Para la realización de los experimentos de ascenso capilarse utilizaron los mismos tubos descritos en la determinaciónde la lixiviación. A estos tubos, con la gasaatada en su extremo inferior y con la lista lateral cerrandoel cilindro, se le añadió suelo (seco y tamizado a travésde una malla de 2 mm) hasta alcanzar una altura de9 cm. Encima de esa columna de suelo se colocó unamalla plástica circular que ajusta exactamente en el interiordel tubo. Sobre esta se añadió una pequeña cantidadde suelo contaminado con el plaguicida objeto deinvestigación. Esta cantidad fue tal que la altura queella originó dentro del tuvo fue de 2,5 mm aproximadamente.Encima de ese suelo contaminado se colocó otra mallaplástica y a continuación se adicionó suelo hasta 2 cmdel borde superior.El contenido de cada tubo se compactó mecánicamente(golpes laterales suaves) y se añadió suelo nuevamentehasta alcanzar la altura indicada. Para cadaplaguicida se utilizaron seis de los tubos así preparados,los que se colocaron verticalmente una bandejacon agua destilada, con el extremo cerrado por la gasasumergido hasta la altura de 1 cm. El nivel de agua señaladose mantuvo por reposición durante el tiempo dedesarrollo de cada experimento.A los dos días de iniciado el ascenso capilar, se tomarondos tubos y se analizó el contenido del plaguicida en losperfiles 0-6; 6-12 y 12-18 cm, donde 0 representa la superficiedel suelo y 18 la zona entre las mallas plásticas.Otros dos tubos se tomaron a los cuatro días y finalmentelos últimos dos, siete días después del inicio delensayo. Se analizaron por separado los perfiles de suelo,y se promediaron después los valores correspondientesa los de ambos tubos del mismo muestreo.Cada experimento se repitió dos veces para promediarsefinalmente los resultados. Con estos valores se calculóel porcentaje de cada plaguicida en cada perfil,para cada muestreo o momento a partir del inicio delascenso capilar.Estos valores dan una medida del poder ascendente decada plaguicida y de la velocidad a la cual ocurre el fenómeno.Estos experimentos se complementaron conla determinación del ascenso capilar de la atrazina bajocondiciones de campo. Para ello, los tubos preparadosde la forma descrita contaminados con atrazina, se introdujeronverticalmente en una abertura practicada44/fitosanidad

Movimientos de algunos plaguicidas en el sueloen el suelo, en un área desprovista de malezas. Los tubosse cubrieron con el suelo del lugar dejando sobresalir2-3 cm de cada tubo. Posteriormente se humedecióel área a saturación, incluido el contenido de los tubos.A los siete días se tomaron dos para el análisis y se llenóel espacio ocupado por ellos con suelo. Después sehumedeció de nuevo toda el área a saturación. Losmuestreos y el procedimiento posterior ya descrito serepitieron a los 14 y 21 días. La evaluación del ascensocapilar se realizó de la forma ya indicada.Los experimentos de arrastre se realizaron bajo condicionesambientales. Con tal finalidad se cavó una zanjade6mdelongitud, 0,5 m de ancho y 0,4 m de profundidad,en un área con una pendiente de 12,8 %,expuesta a las condiciones ambientales. Esta zanja secubrió con una lámina plástica y se llenó con sueloferralítico rojo (1,8 % de materia orgánica y pH 6,8 desu suspensión acuosa 1/10).En el extremo más bajo de la canal se excavó el suelohasta poder colocar un recipiente colector de 30 L decapacidad. El suelo de la canal fue sometido a un procesogradual, espontáneo, de compactación durante dosmeses. En ese tiempo la suma de las precipitaciones superólos 200 mm. Con posterioridad se aplicaron losherbicidas objeto de investigación. Estos fueron ametrina,atrazina y diuron, a dosis equivalente a4kgi.a./ha decada uno, dispersos en agua. La aplicación se realizócon un asperjador manual. La concentración del caldode cada herbicida fue de 0,6 g (producto comercial) porlitro, y de este se aplicó 3 L. Después de la aplicación seesperó 24 horas antes de comenzar a regar el área medianteaspersores microjet. Para ello fueron colocadosseis aspersores separados 1 m entre dos consecutivos, a0,5 m de uno de los costados de la canal. Para medir lalluvia y/o el regadío que cae sobre el suelo de la canal sesituaron encima de esta seis vasos de precipitado de250 mL, esparcidos convenientemente.En total se realizaron seis simulaciones de lluvia y duranteel ensayo llovió ligeramente (3 mm).El agua no retenida por la masa de suelo y que se colectóseparadamente para cada simulación de lluvia seanalizó para determinar la cantidad de herbicidasarrastrados. Los análisis de las triazinas se realizaronpor el método indicado, mientras que el diuron se determinópor HPLC con detector UV, previa extraccióndel herbicida con diclorometano.RESULTADOS Y DISCUSIÓNEn las Tablas 1 y 2 se presentan los resultados de la lixiviaciónde la ametrina y la atrazina, respectivamente.Es evidente que la atrazina lixivia mucho más fuertementeque la ametrina, no solamente debido a la concentracióndetectada por debajo de 25 cm sinotambién por la reducción sustancial en el perfil 0-5 cmpara todos los niveles de precipitación investigados.Estos resultados están acorde con la interacción de estosherbicidas con el suelo ferralítico rojo, que a su vezdepende de las propiedades físico-químicas de ambos.En la Tabla 3 se resumen los resultados de los experimentosde la lixiviación del bromacil. Este herbicida semovió muy fuertemente, aún para un nivel de precipitaciónmoderado, no se detectó en el perfil de 0-5 cmmientras que más del 82 % de la dosis aplicada sobrepasóel perfil de 20 cm. Este comportamiento conllevaun riesgo de contaminación de las aguas subterráneas.Tabla 1. Lixiviación de ametrinaPerfil(cm)Porcentaje de ametrina en cada perfil para los niveles deprecipitación indicados (mm)50 100 150 2000-5 64,46 50,43 39,82 29,685-10 15,70 40,34 36,23 38,1810-15 8,26 7,47 20,61 22,1915-20 8,26 – 2,43 7,6320-25 2,95 – 0,5 1,72>25 0,35 1,73 0,3 0,5fitosanidad/45

Dierksmeier y otrosTabla 2. Lixiviación de la atrazinaPerfil(cm)Porcentaje de atrazina en cada perfil para los niveles deprecipitación indicados (mm)50 100 150 2000-5 50,8 36,43 13,54 7,565-10 23,06 31,93 29,45 23,9110-15 9,98 23,80 40,79 29,1615-20 10,80 6,96 12,66 27,6220-25 4,08 0,87 2,06 10,64>25 1,31 – 1,47 1,08Tabla 3. Lixiviación de bromacil en suelo ferralítico rojoPerfil(cm)Porcentaje de bromacil en cada perfil para los nivelesde precipitación indicados (mm)25 50 75 1000-5 38 4,6 3,9 ND5-10 37 15,1 6,2 3,610-15 22 19,7 13,7 5,415-20 3 18,6 15,6 8,4>20 ND 42 60,6 82,6Por el contrario, el propiconazol apenas se movió delperfil 0-10 cm, aun bajo condiciones muy drásticas(400 mm de lluvia en sólo ocho días, algo que solamenteocurre bajo condiciones climáticas extremas), Tabla 4.La lixiviación del metalaxil fue fuerte y muy similar enlos suelos ferralítico rojo y ferralítico cuarcítico (Tablas 5y 6, respectivamente), a pesar del contenido menor demateria orgánica de este último suelo que es un factorque influye mucho sobre el fenómeno investigado.La magnitud de la lixiviación es tal que la aplicación deeste fungicida lleva asociado un riesgo elevado de contaminacióndel manto freático.La investigación de la lixiviación se completó con elmovimiento del disulfoton en el suelo ferralítico cuarcítico(Tabla 7). En este y a pesar de las condicionesdrásticas impuestas, el insecticida no fue detectado pordebajo de los 20 cm, resultando además que en el lapsoque duró el experimento, ese organofosforado sufrióuna degradación muy fuerte, y se redujo su concentracióna la mitad en solo ocho días. Por ambas razones laaplicación del disulfoton no crea un riesgo para el mantofreático.46/fitosanidadEn la Tabla 8 se resumen los resultados del ascenso capilarpara la ametrina, atrazina y bromacil, a escala delaboratorio. Como era de esperar, estos dos últimosherbicidas ascendieron fuertemente, con valores muysimilares del porcentaje de desplazamiento hacia lasuperficie. Este fenómeno tiende a compensar el de la lixiviación,y ha sido investigado también con otros compuestos,incluso inorgánicos.La Tabla 9 muestra, al menos para la atrazina, que bajocondiciones naturales el ascenso capilar no es tan fuerte.En efecto, aunque el experimento duró tres vecesmás que el realizado en el laboratorio, el porcentaje deatrazina al finalizar el ensayo fue del orden de sólo 1%respecto a la dosis inicial. En parte esto pudo deberse aque la atrazina durante el ensayo se degrada especialmenteen los perfiles próximos a la superficie del suelo,donde la actividad microbiana es más intensa, y quebajo nuestras condiciones ocurre con un tiempo devida media de 40 días. Además, dada la forma de realizarel experimento, con el fin de mantener húmedo elsuelo, se introduce un componente lixiviativo impor-

Movimientos de algunos plaguicidas en el suelotante, que contrarresta el fenómeno investigado, aspectoeste que se presenta en la naturaleza cuando llueve.Los resultados de los experimentos de arrastre se hanresumido en la Tabla 10. Aunque la suma total de lasprecipitaciones más el regadío fue solamente de 64 mmen un lapso de 12 días, se puso de manifiesto el arrastremayor de la atrazina respecto a la ametrina, mientrasque el diuron tuvo un comportamiento intermedio.Los valores de arrastre respecto a la cantidad aplicada(900 mg) fueron: 1, 24 %; 0,14% y 0,09% para la atrazina,diuron y ametrina respectivamente, que aunquepequeños contribuyen a la contaminación del medio.Tabla 4. Lixiviación del propiconazolPerfil(cm)Porcentaje del fungicida en cada perfil para los nivelesde lluvia indicados (mm)50 100 200 4000-5 84,0 85,9 80,0 53,15-10 16,0 14,1 18,5 44,010-15 ND ND 1,1 1,715-20 ND ND 0,8 0,620-25 ND ND ND 0,6Tabla 5. Lixiviación del metalaxyl en el suelo ferralítico rojoPerfil(cm)Porcentaje del fungicida en cada perfil para losniveles indicados de lluvia (mm)25 50 75 1000-2,5 76,6 19,3 19,6 7,52,5-5 4,9 30,0 33,1 13,85-7,5 4,5 30,4 18,4 11,37,5-10 2,6 11,0 4,6 9,810-15 4,5 5,2 6,1 22,7Tabla 6. Lixiviación del melalaxyl en el suelo ferralítico rojoPerfil(cm)Porcentaje de metalaxyl en cada perfil para los nivelesde lluvia indicados (mm)25 50 75 1000-2,5 74,7 43,7 8,2 2,32,5-5 11,5 35,4 11,9 4,45-7,5 2,4 8,2 27,5 8,27,5-10 2,8 2,7 22,0 17,410-15 2,9 4,8 24,1 35,015-20 3,3 2,4 6,3 18,820-25 2,3 2,9 – 11,3fitosanidad/47

Dierksmeier y otrosTabla 7. Lixiviación del disulfoton en suelo ferralítico rojoPerfil(cm)Porcentaje del insecticida en cada perfil para los nivelesde lluvia indicados y cantidad total (µg) al finalizarcada experimento100 (mm) 200 (mm) 400 (mm)0-5 57,3 (16,149 µg) 74,6 (10,074µg) 70,97 (8,241µg)5-10 42,3 13,10 18,9710-15 0,22 4,70 5,0315-20 0,21 7,80 5,02>25 ND ND NDTabla 8. Ascenso capilar de la ametrina, prometrina, simazina, atrazinay bromacil en el suelo ferralítico rojoHerbicidasDías transcurridosdesde el inicio delexperimentoPorcentaje de herbicida en las profundidadesindicadas (cm)0-6 6-12 12-18Ametrina 2 0,8 22 77,14 3,04 17 79,87 4,83 22,4 72,6Atrazina 2 17,7 40,5 41,84 25,7 33,5 40,87 48,3 22,2 31,8Bromacil 2 9,8 42,1 48,04 56,0 23,8 20,07 48,1 42,5 9,29Tabla 9. Ascenso capilar de la atrazina en el suelo ferralítico rojo bajocondiciones de campoDías transcurridosdesde el iniciodel experimentoPorcentaje de herbicida en las profundidades indicadas (cm)0-6 6-12 12-187 1,69 5,20 93,1114 1,26 2,47 96,2721 0,87 1,18 97,9448/fitosanidad

Movimientos de algunos plaguicidas en el sueloTabla 10. Arrastre de los herbicidas aplicados al suelo ferralítico rojo (mg)Tiempo (d) 1 2 5 6 7 9 12HerbicidasLluvia (mm) 20 10 10 5 3* 10 6Ametrina 0,594 0,164 0,068 0,058 – – –Atrazina 5,076 3,80 3,00 0,024 – – –Diuron 1,44 0,03 – – – – –* LluviaCONCLUSIONES• La ametrina lixivió moderadamente en el suelo ferralíticorojo para un nivel de precipitación de 200 mm,mientras que la atrazina, bajo las mismas condicionesse movió fuertemente, aunque sólo el 2%deladosissuperficial aplicada sobrepasó el perfil de 25 cm, por loque en este tipo de suelo el riesgo de contaminación esmoderado.• El bromacil y el metalaxil lixiviaron muy fuertementeaun bajo condiciones moderadas de precipitación, porlo que ambos plaguicidas pueden considerarse contaminantespotenciales del manto freático.• El propiconazol y el disulfoton lixivian poco, ademásde que este último se degrada rápidamente en el suelo,por lo que el riesgo de contaminación del agua subterráneaes pequeño por ambos plaguicidas.• El ascenso capilar de la ametrina a escala de laboratoriofue moderado, mientras que la atrazina y el bromacilse movieron fuertemente hacia la superficie delsuelo, alcanzando allí concentraciones del orden de48% de la dosis aplicada en sólo siete días desde el iniciodel movimiento. Sin embargo el mismo fenómenobajo condiciones ambientales fue moderado para laatrazina, aunque de significación como tendenciaopuesta a la lixiviación.• El arrastre en el suelo ferralítico rojo mostró la mismatendencia de movimiento observada para la atrazina yla ametrina en los fenómenos de lixiviación y ascensocapilar, mientras que el diuron ocupó una posición intermediaentre ambas triazinas.REFERENCIASB.B.A.: «Prüfung der Versickerungverhalten von Pflanzenschutzmitte»,Merkblatt. 37 (1), Auflage, RFA, 1973.Comisión del Codex Alimentarius: Residuos de plaguicidas en los alimentos,vol. 2, 2a. ed., 1994.Dierksmeier, G.: Plaguicidas, residuos, efectos y presencia en el medio,Ed. Científico-Técnica, La Habana, 2001.––––: «Desorción de plaguicidas en el suelo», Fitosanidad 3 (4):49-52, La Habana, 1999.Dierksmeier G.; A. Sisinno; Pura Moreno: «Ascenso capilar de la atrazinaen suelo ferralítico rojo», Resúmenes, Jornada Científico-Técnicade Sanidad Vegetal, Sancti Spíritus, 1986.FAO: Anuario Estadístico, Roma, 1998.Führ F.; W. Mittelstaedt; T. Pütz; A. Stork; M. Dust: «Use of lysimetersfor determining Pesticide Fate in Agroecosystems», Proc. Int. Symposiumon the Use of Nuclear and Related Techniques for StudyingEnvironmental Behaviour of Crop Protection Chemicals, Vienna.1996.Jarczyk, H. J.: «Migration of Herbicides in Different Soil Types», Pflanzenschutz-NachrichtenBayer 25 (1) Bayer A.G. Leverkusen, RFA,1972.––––: «Method for Gas Chromatographic Determination of BromacilResidues in Plant Materials, Soil and Water Using a Nitrogen SpecificDetector», Pflanzenschutz Nachrichten Bayer 28 (3) 319, 1975.Jury W. A.; A. M. Winer; W. F. Spencer; D. D. Focht: «Transport andTransformation of Organic Chemicals in the Soil-Air-Water System»,Reviews of Environ. Contam. Toxicol. 99: 119-164, 1987.MINAGRI. NRAG 275: «Triazinas. Método de análisis para determinarresiduos en suelo por cromatografía gaseosa», 1979.––––: «Metalaxil. Determinación de residuos por cromatografía gaseosa»,1988.Mynistry of Public Health The Netherlands: Analytical Methods forPesticide Residues in Foodstuffs», 6 th edition, Ministry of PublicHealth Welfare and Sport, The Netherlands, 1996.Moreno, Pura; G. Dierksmeier; A. Bécquer; Caridad Ricardo; LidiaFerrer; Dania Álvarez; Rafaela Batista; A. Lazo: «Degradación aceleradade Carbofuran en suelo por aplicaciones repetidas», Fitosanidad.2 (1/2): 19-21, 1998.Norma Cubana 29-03: «Diuron. Métodos de Análisis», 1983.Pequeño J.; A. López: Agroquímica t. 2, La Habana, 1965.Peter, C. J.; J. P. Weber: «Adsorption, Mobility and Efficiency of Alachlorand Metolachlor Influenced by Soil Properties», Weed Sci. 33,874-881, 1985.Ricardo, Caridad: Método de análisis de residuos de plaguicidas,INISAV, MINAGRI, La Habana, 2001.Wauchope, R. D.: «Pesticide Report No. 34. Pesticide Run-off: Methodsand Interpretation of Field Studies», Pure Appl. Chem. 67:2089-2108, 1995.Williams R. J.; D. Brooke; P. Mathiesen; M. Mills; A. Turnbull; R. Harrison:«Pesticide Transport to Surface Waters Within an AgriculturalCatchments», J. Inst. Water Environ. Man, 9, 72-81, 1995.fitosanidad/49

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002UTILIZACIÓN DE LA RESINA XAD-2 EN EL ANÁLISISDE PLAGUICIDAS EN AGUAMaribel García , Cecilia Linares y Caridad RicardoInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600RESUMENSe empleó la extracción en fase sólida utilizando la resina XAD-2 paraconcentrar los plaguicidas presentes en muestras de agua. Se trabajócon plaguicidas que pueden constituir un riesgo de contaminación delas aguas. Los niveles de residuos se determinaron usando un cromatógrafogaseoso provisto de un detecctor NPD y por cromatografía decapa delgada, para obtenerse buenas recuperaciones y reproducibilidades.Se demostró ser un método alternativo con el cual se logra unahorro considerable de solventes.Palabras claves: Plaguicidas, resina XAD-2, extracción en fase sólidaABSTRACTSolid phase extraction usingSolid-phase extraction using XAD-2 resinto concentrate pesticides present in water samples was used. Thework was done with pesticides, which can constitute a contaminationrisk for water. Residues level were determinate using gas chromatographywith a NPD detector and for thin layer chromatography, to obtaingood recovery and reproducibility. Was demonstrating to be analternative method and permit considerable economy of solvent.Key words: Pesticides, solid-phase extraction, XAD-2 resinINTRODUCCIÓNLa presencia de plaguicidas en el medio está dada porcausas directas e indirectas. La forma directa más importantees la relacionada con la entrada de plaguicidasa través de aplicaciones para el control de malezas, algase insectos presentes en agua y que es necesario sueliminación.Generalmente los niveles de plaguicidas en agua sonmuy bajos, debido fundamentalmente a la gran diluciónque tiene lugar, por lo que se necesitan técnicasanalíticas que permiten la determinación de cantidadesdel orden de los µg/L, ya que existem restriccionesen las aguas de consumo humano que no permiten suuso si se sobrepasan los niveles establecidos.La contaminación ambiental es un tema muy debatidoen los últimos años, y no se escatiman esfuerzos porparte de gobiernos, investigadores y hombres de diferentesesferas por conocer la situación que existe en elmundo en relación con esta problemática, para podertomar medidas que contribuyan a la disminución delos efectos adversos que se producen por la entrada alambiente de sustancias tóxicas que pueden afectar directao indirectamente la salud del hombre.Las investigaciones sobre la contaminación de lasaguas es uno de los aspectos que más interés se le haconferido en los últimos años, ya que en ella son vertidosinnumerables desechos provenientes principalmentede la industria y la agricultura, que provocan eldeterioro de su calidad, sin considerar que se han detectadotambién concentraciones significativas de plaguicidasen la atmósfera y en las aguas subterráneassegún Lode et al. (1995) y Chiron et al.(1995).Esto no ha constituido una tarea fácil si se tiene encuenta la variedad de plaguicidas investigados que presentanen general características diferentes. Desde elpunto de vista analítico es necesario disponer de unmétodo que nos permita el aislamiento y purificaciónde un compuesto en un medio dado, y disponer de unequipamiento lo suficientemente sensible que nos posibilitela identificación y cuantificación de estos compuestostóxicos.El uso de los adsorbentes poliméricos como mediopara concentrar compuestos orgánicos en las aguas hasido muy extendido en los últimos años, pues presen-fitosanidad/51

García y otrostan las características de adsorber los plaguicidas quese encuentren presentes en el medio estudiado y no seha comprobado en la mayoría de los casos una descomposiciónde los compuestos ni adsorción irreversible.El objetivo de nuestro trabajo es probar la extracciónde los plaguicidas en agua utilizando la resina XAD-2como un método sencillo, poco costoso y rápido, quegarantice la determinación de residuos de plaguicidasen agua acorde con las exigencias actuales.MATERIALES Y MÉTODOSPurificación de la resinaLa purificación de la resina previo a su uso se llevó acabo tomando 40 mL de ella, la que se trasvasó a unvaso de precipitado de 250 mL, se incorporó agua destiladay se dejó en reposo toda la noche. A continuaciónse lavó con abundante agua destilada de forma talque las partículas finas formadas durante el proceso defabricación se acumularan en la superficie del vaso deprecipitado para su posterior eliminación por decantación.En medio acuoso, la resina fue trasvasada hacia una columnade vidrio de 30 cm de longitud por 2,5 cm dediámetro interno provista de lana de vidrio. A continuaciónse lavó con 50 mL de metanol, acetonitrilo yacetona respectivamente, con el fin de eliminar algunoscomponentes utilizados como preservantes de laresina.El extracto de acetona se pasó a través de sulfato de sodioanhídro hacia un balón de 250 mL y se llevó a sequedaden evaporador rotatorio a una temperatura delbaño de 40ºC. Posteriormente se procedió a la determinacióndel residuo de la evaporación de solvente enel cromatógrafo gaseoso, bajo las condiciones en que seanalizarán los diferentes plaguicidas.Etapa analíticaPara llevar a cabo el proceso se tomaron 40 mL de la resinapurificada y se pasaron a una columna de vidrio dediámetro 2,5 cm y longitud 150 cm para garantizar lasalida del agua por gravedad a un flujo de 300 mL/min.Se prepararon los patrones concentrados a partir depatrones analíticos con una pureza de 99% en acetatode etilo, y los de contaminar en acetonitrilo.En la investigación se contaminaron 2,5 y4Ldeaguacon 10 µg de los plaguicidas diazinon, metil-paration,malation y clorpirifos, con 20 µg atrazina y 100 µg diuron.Las muestras se pasaron a través de la resina a unflujo de 300 mL/min.Una vez drenada toda el agua de la resina, esta se pasóhacia un dedal y se sometió a una extracción en soxhletcon 200 mL de acetona por seis horas. Posteriormenteesta acetona es llevada a residuo acuoso (aproximadamente60 mL) en evaporador rotatorio a (40 º C). Despuésse trasvasa a un embudo separador de 250 mL y sele adiciona 6gdeNaCl; se agita hasta total disolucióny es extraído tres veces con 75, 50 y 25 mL de cloroformo.El extracto orgánico se pasa a través de sulfato desodio anhídro y se lleva a casi sequedad en evaporadorrotatorio a una temperatura del baño de 40 º C para suposterior determinación final.Para la determinación de los plaguicidas organofosforados,los extractos secos fueron diluidos e inyectadosen un cromatógrafo gaseoso dotado de un detectortermoiónico bajo las siguientes condiciones cromatográficas:• Columna de vidrio empaquetada con 5% de OV-101sobre Gas CHROM Q 100/120 meshTemperatura de la columna: 210 ºCTemperatura del detector: 220 ºCTemperatura del inyector: 260 ºCGas portador: N 2, 0,5 kg/cm 2Gases auxiliares: H 2 : 0,9 kg/cm 2Aire: 1,5 Kg/cm 2En el caso de la triazina se determinó con un cromatógrafogaseoso provisto de un detector termoiónico conlas siguientes condiciones cromatográficas:• Columna capilar DB-5, longitud 30 metros, 0,53 mm di• Temperatura del inyector: 250 º C• Temperatura del horno programada:Isoterma durante 3 min a 190 º CAscenso a 3 º C/min hasta 230 º C• Temperatura del detector: 250 º CPor cromatografía de capa delgada se determinaron losresiduos de diurón, con el siguiente procedimientoanalítico:Se utilizan placas de sílica-gel G 0,25 mm de espesor,previamente activada a 130 ºC, durante 30 min. Secorre en el sistema de solvente n-hexano:acetona(70:30). Cuando el frente de solvente haya alcanzado12 cm se saca la placa y se seca al aire.Revelado químico: Disolver1gdeP-dimetil amino benzaldehídoen 30 mL de etanol, añadir 3 mL de ácidoclorhídrico concentrado y 180 mL de butanol.La placa se atomiza después de la separación cromatográfica.Seguidamente a la atomización, las placas se llevan aestufa 120 º C durante 30 min, con lo cual surgen lasmanchas de color amarillo sobre un fondo blanco.RESULTADOS Y DISCUSIÓNLa eficiencia del procedimiento analítico está dado porel recobrado de las muestras de agua contaminadas concantidades conocidas de los plaguicidas seleccionados,los cuales representan en general compuestos de diferentesfamilias, que son muy utilizados en la agricultu-52/fitosanidad

Utilización de la resina XAD-2 en el análisis...ra o que por su gran persistencia en agua los hacen degran interés en nuestro estudio.La gran cantidad de agua que es adsorbida en la resinanos lleva al uso de un solvente (acetona) que sea misciblecon esta para extraer los plaguicidas de ella. Es preferibleun solvente con un bajo punto de ebullición, yaque es más fácil evaporarlo antes de la extracción finalcon cloroformo.Después de haber realizado todo el procedimiento experimentalmostramos los siguientes resultados:Tabla 1: Recobrados (%) de los plaguicidaspara 2,5 L, con números de ensayosigual a (n) y sus respectivas desviacionesestándar (%)Plaguicidas Desv St % (n)Diazinón 12 43 (4)Metil-paration 7 90 (4)Malation 11 66 (4)Clorpirifos 6 91 (4)Diuron 0 100 (3)Atrazina 9 84 (3)Límite de determinación: 0,4 ppb.Como se observa en la Tabla 1 el diazinón presentó bajarecuperación. Esto se debe a que no es completamentedesorbido de la resina XAD-2, y en el proceso de extracciónen Soxhlet puede que ocurra una descomposicióndel compuesto. Los resultados obtenidos de los demásplaguicidas son similares a los reportados en la literatura.Tabla 2: Recobrados de los plaguicidas para 4 Lde agua, con números de ensayos igual a (n)y sus respectivas desviaciones estándar (%)Plaguicida Desv St % (n)Metil-paration 10 81 (3)Clorpirifos 8 89 (4)Diuron 7 85 (2)Atrazina 6 65 (2)Límite de determinación: 0,025 ppb.En líneas generales las recuperaciones para 4Ldeaguason buenas para los plaguicidas investigados. Cuandose comparan con los resultados para 2,5 L, vemos un ligerodecrecimiento, debido a que no tenemos encuenta el factor temperatura, ya que se trabajó a temperaturaambiente, y como se sabe la adsorción es un fenómenoque depende en gran medida de ella.De los resultados de las Tablas 1 y 2 se deduce que eluso de la resina XAD-2 para analizar plaguicidas enagua es un método alternativo que nos brinda buenasrecuperaciones (>70%) en la mayoría de los compuestoscon buenas reproducibilidades (

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002CONTROL QUÍMICO DE THRIPS PALMI KARNYEN EL CULTIVO DE LA PAPA (SOLANUMTUBEROSUM L.)Carlos A. Murguido Morales, Ana Ibis Elizondo y Eliel PeñaInstituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a. B y 5a. F, Playa,Ciudad de La Habana, CP 11600RESUMENThrips palmi Karny es un serio problema de plaga en muchos cultivos,especialmente en la papa (Solanum tuberosum L.). Para el control deeste insecto los agricultores han utilizado generalmente diferentes insecticidas,sin información acerca de su efectividad en el control de laplaga. Para conocer la efectividad de algunos insecticidas nuevos yconvencionales, y poder seleccionar los más efectivos para el controlde T. palmi, se realizaron tres experimentos de campo. Los compuestosevaluados fueron: diafentiuron CE 50, profenofos CE 72, acetamipridPH 20, imidacloprid WG 70, imidacloprid PH 10, metomilo CE 20,oxamilo CS 24 y abamectina CE 1,8, metomilo 90 PH y abamectina3,0 CE. Los resultados indicaron que los compuestos más efectivosfueron: diafentiuron CE 50 a 1,5 L/ha (i.a.), profenofos CE 72 a 1,5lLha (i.a.), imidacloprid WG 70 a 0,35 kg/ha (i.a.).Palabras claves: control químico, Thrips palmi Karny, papa, insecticidas.ABSTRACTThrips palmi Karny is a serious pest problem in many crops, especiallyin potato (Solanum tuberosum L.). The farmers in order to the controlthe pest has been usually different insecticide, usually lacking pesticidesany information about their efficiency to control this pest. In orderto know the efficacy of some of conventional and new insecticides, andto able to select the most promising ones for the control of T. palmi,were carried out tree fields experiments. The compounds evaluatedwere: diafentiuron CE 50, profenofos CE 72, acetamiprid PH 20, imidaclopridWG 70, imidacloprid PH 10, metomilo CE 20, oxamilo CS 24y abamectina CE 1,8, metomilo 90 PH y abamectina 3,0 CE. The resultsindicated the compounds with greater percentage of efficiencywere diafentiuron CE 50 a 1,5 l/ha (i.a.), profenofos CE 72 a 1,5 l/ha(i.a.), imidacloprid WG 70 a 0,35 kg/ha (i.a.).Key words: chemical control, Thrips palmi Karny, potato, insecticides.INTRODUCCIÓNT. palmi produce daños por las picaduras que causadurante su alimentación y por las perforaciones paracolocar los huevos, lo que repercute directamente enlos rendimientos cuando ocurren en las flores [Bournier,1976]. Por otra parte, T. palmi es capaz de transmitirel virus del bronceado del tomate (TSWV)[Kameya-Iwaki et al., 1988; Honda et al., 1989], queestá presente en numerosos países.Debido a su alta y rápida capacidad reproductiva, a lagran variedad de plantas hospederas cultivadas y silvestres,a las condiciones climáticas cálidas que favorecensu reproducción, así como a sus hábitos de vida, se originanaltas poblaciones que causan daños de importanciaeconómica, por lo que afectan el normal desarrollode las plantas así como la calidad del producto por cosechar[Salas y Cermeli, 1995].El insecto ha sido reportado en pepino, melón, papa,pimiento, ají, berenjena, frijol y otros cultivos de importanciaeconómica [FAO, 1981; Kawai, 1983; Kawai,1985; Kawai, 1986; Kawai, 1987].En nuestro país esta plaga ha ocasionado daños directosseveros en plantaciones de papa, frijol, pimiento ypepino, pero su presencia se ha señalado en un gran númerode plantas hospedantes que incluye malezas yotros cultivos de gran importancia [Murguido et al.,1999].En el cultivo de la papa su incidencia ha resultado muynociva, lo que motivó que los productores recurrieran adrásticas medidas de combate mediante el uso de insecticidasquímicos. Sin embargo, los resultados enmuchas ocasiones no ofrecieron los resultados esperados.Sobre este particular se ha planteado que T. palmipresenta una tolerancia natural a los insecticidas químicos[Salas y Cermeli, 1995] que hace difícil su control.Por las razones antes expuestas la evaluación de los insecticidasen ensayos de campo reviste particular importanciapara conocer la efectividad de las sustanciasy poder seleccionar aquellas que mejores cualidadesofrezcan.fitosanidad/55

Murguido y otrosMATERIALES Y MÉTODOSPara evaluar la efectividad de varios insecticidas de diferentesingredientes activos y mecanismos de acciónen el control de T. palmi en el cultivo de la papa, se realizarontres experimentos en el municipio de Güira deMelena en la provincia de La Habana durante la campañade siembra de 1997-98. Fueron desarrollados enla finca Virgilio Leal, la Cooperativa de ProducciónAgropecuaria Países Nórdicos y en la finca Felipe Rodríguez.En el primer y segundo experimento se utilizó la variedadRed Pontiac, y como diseño el bloque al azar conparcelas de 36 m 2 , constituida por cuatro surcos de10 m de largo espaciados a 0,9 m y replicado cuatro veces.El tercer experimento, en la variedad Desiree nacional,fue un trabajo de ampliación de los productosmás prometedores en una superficie de una hectárea divididaen cuatro bloques de 0,24 ha para cada variante.Para las aplicaciones en los ensayos de parcelas se utilizóuna mochila Matabi, con boquillas de cono y chapillasde orificios de 1 mm de diámetro, y en la ampliaciónuna máquina de arrastre con bomba P-11 y unvolumen de solución final de 400-500 L/ha.Los insecticidas y las dosis en ingrediente activo ensayadosfueron:a) En el primer ensayo: diafentiuron CE 50 a 1,5L/ha (i.a.), profenofos CE 72 a 1,5 L/ha (i.a.), acetamipridPH 20 a 0,4 kg/ha (i.a.), imidacloprid WG70 a 0,35 kg/ha (i.a.), imidacloprid PH 10 a 0,08 kg/ha (i.a.)y 0,35 kg/ha (i.a.), metomilo CE 20 a 0,6 L/ha (i.a.),oxamilo CS 24 a 0,72 l/ha (i.a.) y abamectina CE 1,8 a0,0054 l/ha (i.a.).b) En el segundo experimento: diafentiuron 50 CE a0,5 L/ha (i.a.), metomilo 90 PH a 0,45 kg/ha (i.a.),profenofos CE 72 a 0,72 L/ha (i.a.), oxamilo 24 CS a0,48 L/ha (i.a.), imidacloprid 70 WG a 0,14 L/ha (i.a.),abamectina CE 1,8 a 0,0027 L/ha (i.a.) y abamectina3,0 CE a 0,003 L/ha (i.a.).c) En el tercer ensayo: diafentiuron 50 CS a 0,5 L/ha(i.a.) e imidacloprid 70 WG a 0,35 kg/ha (i.a.).En todos los experimentos los tratamientos se iniciarona partir de alta infestación de la plaga, determinada porun conteo previo a la aplicación.La plaga se evaluó mediante el conteo de la cantidad detrips adultos y larvas por hoja en una muestra de 25hojas por parcela (100 por variante). Los datos fuerontransformados a x = x + 1 o x = x, y posteriormentesometidos a análisis de varianza, y se establecieronlas diferencias según la prueba de Neuman (1939),Keuls (1952) al 5%.La efectividad de los tratamientos se calculó según lafórmula de Abbott (1925) citado por Unterstenhoefer(1963).RESULTADOS Y DISCUSIÓNA las 24 horas de la aplicación en el primer experimentose manifestó reducción de la población de larvas sindiferencias significativas en los tratamientos entre losinsecticidas profenofos CE 72 a 0,72 L/ha, acetamipridPH 20 a 0,4 kg/ha, imidacloprid WG 70 a 0,35 kg/ha.Le siguieron en orden los insecticidas diafentiuron 50 CEa 0,75 L/ha imidacloprid 10 PH a 0,15 kg/ha y 0,3 kg/ha,que resultaron también semejantes entre sí. Fueron semejantesal testigo sin aplicar y diferentes a los anterioreslas variantes tratadas con los insecticidas metomiloCE 20 a 0,35 L/ha, oxamilo CS 24 a 0,6 L/ha y abamectina1,8 a 0,0027 L/ha. También los insecticidas acetamiprid20 PH a 0,4 kg/ha e imidacloprid 70 WG a0,35 kg/ha presentaron la menor población de adultoscon diferencias estadísticas al resto de los tratamientos.El efecto inicial en diafentiuron CE 50 fue bajo respectoa los insecticidas profenofos CE 72, acetamiprid PH20 e imidacloprid WG 70 y PH 10 a la dosis mayor,tanto para las larvas como para los adultos. La efectividadmás baja contra adultos se observó en los insecticidasmetomilo CE 20, oxamilo CS 24 y abamectina CE 1,8y contra las larvas metomilo CE 20 a abamectina CE 1,8(Tabla 1).En el segundo experimento la población de larvas en eltestigo presentó una tendencia a incrementarse con losdías transcurridos, mientras que los adultos se presentaronsin variaciones notables en el tiempo. La actividadinicial sobre adultos y larvas de profenofos CE 72 a0,72 L/ha fue enérgica manteniendo bajo nivel de infestacióndurante los 10 días posteriores al tratamientocon diferencia significativa. En la variante tratada condiafentiuron CE 50 a 0,5 l/ha la población inicial fuealta; entre los 3-6 días se redujo para a los 10 días mostrarrecuperación. Oxamilo CS 24 presentó un comportamientosemejante a diafentiuron CE 50 a las 24horas y tres días, pero a diferencia de este se incrementóla población a los seis días. Imidacloprid WG 70 presentómayor población debido a la dosis muy baja(Tabla 2).De manera general las efectividades más altas sobreadultos y larvas se registraron en las variantes tratadascon profenofos 72 CS entre 1-10, diafentiuron 50 CE yoxamilo 24 CS entre 3-6 días (Tabla 3).El efecto de imidacloprid sobre T. palmi fue señaladopor Kawai (1990) en Japón, y Cermeli et al. (1993) enVenezuela. Sin embargo, estos resultados no coincidenen relación con la efectividad de los insecticidas oxamiloy abamectina señalada por estos mismos autores.Jonhson (1986), citado por Díaz et al. (1989), señalóque las aplicaciones de oxamilo parecen reducir la poblaciónde inmaduros, pero no los adultos.56/fitosanidad

Control químico de Thrips palmi Karny en el...Tabla 1. Efecto inmediato de los tratamientos contra T. palmi en el primer experimento en papa(edad del cultivo: 65 días de la siembra)VariantesDosis enkg o L/haConteo tres díasantes del tratamiento(promedio de tripspor hoja)Conteo un díadespués del tratamiento(promedio de tripspor hoja)Efectividad enporcentajeLarvas Adultos Larvas Adultos Larvas AdultosDiafentiuron 50 CE 0,75 4,6 5,4 7,0 cd 27,8 bc 84 66Profenofos 72 CS 0,72 5,0 5,3 3,0 d 14,2 cd 93 82Acetamiprid 20 PH 0,4 4,0 3,5 3,2 d 6,2 d 92 92Imidacloprid 70 WG 0,35 3,13 3,1 2,2 d 6,0 d 95 92Imidacloprid 10 PH 0,15 8,0 4,6 12,4 cd 29,8 bc 72 63Metomilo 20 CE 0,35 5,5 4,1 40,6 ab 62,8 a 8 23Oxamilo 24 CS 0,6 5,4 4,0 32,8 ab 20 bc 26 75Abamectina 1,8 CE 0,72 4,2 3,5 22,6 bc 35,6 b 49 56Imidacloprid 10 PH 0,3 4,5 4,3 7,4 cd 6,2 d 83 92Testigo – 3,5 4,4 44,6 a 82,2 a – –CV % 34,73 21,40Dms 1,2383 1,0150Los valores con las mismas letras no tienen diferencias significativas según la prueba de Neuman-Keuls, parta p=0,05.Tabla 2. Variación de la cantidad de T. palmi después del tratamiento en el segundo experimentoen papa (edad del cultivo: 47 días de la siembra. Variedad: Red Pontiac)VariantesDosisen kgo L/haDías después del tratamiento y cantidad promedio de trips por hojaConteo previo1 día 3 días 6 días 10 díasAd. Lar. Ad. Lar. Ad. Lar. Ad. Lar. Ad. Lar.Diafentiuron 50 CE 0,5 6 26 7 ab 21 bc 5 bc 1 d 3 de 2 ef 26 14Metomilo 90 PH 0,45 5 15 9 ab 23 bc 18 a 34 b 15 a 41 a - -Profenofos 72 CS 0,72 4 12 1 d 2 d 1 bc 1 d 4 de 1 f 9 2Oxamilo 24 CS 0,48 8 5 3 cd 21 bc 3 c 2 cd 2 e 8 de 12 15Imidacloprid 70 0,14 7 11 9 ab 30 c 8 bc 16 c 19 ab 24 cd - -Abamectina 1,8 CE 1,5 6 15 8 ab 36 ab 6 b 23 ab 6 cd 18 cd - -Abamectina 3,0 CE 1,0 8 4 6 bc 27 ab 7 b 18 b 10 bc 20 bc - -Testigo – 6 16 11 a 25 a 21 a 37 a 14 ab 33 ab 17 9623,70 29,0 35,23 31,15 26,48 30,14 – –0,752 1,316 1,163 1,226 0,951 1,433 – –Los valores con las misma letras no tienen diferencias significativas según la prueba de Neuman-Keuls, para p=0,05.fitosanidad/57

Murguido y otrosTabla 3. Período de protección según la efectividad biológica de los insecticidas contrade T. palmi en papa. Segundo experimento (edad del cultivo: 47 días de la siembra.Variedad: Red Pontiac)VariantesDosisen kg oL/haEfectividad en porcentaje1 día 3 días 6 días 10 díasAdultos Larvas Adultos Larvas Adultos Larvas Adultos LarvasDiafentiuron 50 CE 0,5 35 16 76 97 78 93 0 85Metomilo 90 PH 0,45 18 8 14 2 0 0 – –Profenofos 72 CS 0,72 90 92 95 97 71 96 47 97Oxamilo 24 CS 0,48 72 16 85 94 85 75 29 84Imidacloprid 70 WG 0,14 18 0 61 56 0 27 – –Abamectina 1,8 CE 1,5 27 0 71 37 57 45 – –Abamectina 3,0 CE 1,0 45 0 66 51 28 39 – –La dificultad del control químico de T. palmi ha sido señaladapor varios autores [Yoshihara, 1982; Sakimuraet al., 1986; Guyot, 1988; Kawai, 1990; Cermeli et al.,1993; Salas y Cermeli, 1995], por lo que también se haseñalado como requerimiento la implementación demétodos suplementarios de control [Díaz, et al., 1989].En el tercer experimento se seleccionaron dos insecticidaspor la efectividad mostrada en los ensayos y porsus características en relación con su posible inclusiónen programas de manejo. Los resultados de este ensayodemostraron que imidacloprid WG 70 o diafentiuronCE 50 en una aplicación puede reducir la población deadultos y larvas de trips hasta los ocho días después dela aplicación (Tabla 4); no obstante, por la alta tasa decrecimiento poblacional y sus hábitos de vida los resultadosmás estables se lograron en un ciclo de dos aplicaciones.De esta forma la efectividad de estos dosinsecticidas se prolongó hasta los 24 días (Figs. 1 y 2).Esto confirma lo señalado anteriormente sobre la convenienciade recurrir a otros métodos que contribuyana regular las poblaciones desde el inicio del establecimientode la papa, además de los beneficios que se puedenalcanzar desde el punto de vista económico.Tabla 4. Cantidad promedio de T. palmi en los tratamientos del tercer experimentopara el control de T. palmi en papa (edad del cultivo: 39 días de la siembra)Primera aplicación:VariantesDosisen kgoL/hgConteoprevioCantidad promedio de trips por hoja1 día 2 días 6 días 8 díasAd. Lar. Ad. Lar. Ad. Lar. Ad. Lar. Ad. Lar.Diafentiuron 50 CE (una aplicación) 0,5 93 602 34 165 30 160 16 96 2 108Diafentiuron 50 CE (dos aplicaciones)0,5-0,7528 208 7 29 10 62 10 58 3 109Imidacloprid 70 WG (una aplicación) 0,35 24 114 3 6 0 2 2 4 8 49Imidacloprid70 WG (dos aplicaciones) 0,35 28 150 5 3 8 18 10 12 8 134Ad.: adulto; Lar.: larva58/fitosanidad

Control químico de Thrips palmi Karny en el...Segunda aplicación:VariantesDosisen kgo L/haCantidad promedio de trips por hoja10 días 16 días 20 días 24 díasAdulto Larva Adulto Larva Adulto Larva Adulto LarvaDiafentiuron 50 CE (dos aplicaciones) 0,75 1 0 0 1 2 1 3 24Imidacloprid 70 WG(dos aplicaciones) 0,35 0 1 0 2 0 5 5 32Figura 1. Porcentaje de efectividad de los tratamientos sobre los adultos de T. palmiFigura 2. Porcentaje de efectividad de los tratamientos sobre las larvas de T. palmifitosanidad/59

Murguido y otrosCONCLUSIONES• Los insecticidas más efectivos para el control de T. palmien la papa fueron imidacloprid 70 WG a la dosis de0,350 kg/ha, diafentiuron 50 CE a 0,5 – 0,75 L/ha yprofenofos CE 72 CE 72 a 0,72 L/ha.• Los insecticidas acetamiprid 20 PH, oxamilo 24 CS yabamectina 1,8 CE deben continuar evaluándose parafijar sus posibilidades de uso contra T. palmi en papa.• Se logró prolongar el efecto de estos insecticidas hasta24 días cuando se realizaron dos tratamientos en unintervalo de seis días.REFERENCIASAbbott, W. S.: «A Methods of Computing the Effectiveness of an Insecticide(1925)», Unterstenhoefer. «Las bases para ensayos fitosanitariosde campo», Pflanzewnschutz-Nachvrichten. Bayer 16-3,1963.Bournier. A.: «Les Thrips nuisibles aux arbres fruitiers a noyacix», LaPomologie Francaise 17 (10): 175-182, 1976.Cermeli, M.; A. Montagne; F. Godoy: «Resultados preliminares en elcontrol químico de Thrips palmi (Thysanoptera:Tripidae) en caraotas(Phaseolus vulgaris L.)», Bol. Entomol. Venez. N. S. 8 (1): 63-73.1993.Díaz, F.; J. J. Espinal; J. De la Rosa: «Propuesta de estrategia de manejode Thrips palmi (Karny) en la República Dominicana», SeminarioTaller Estrategia para el Control del Thrips palmi, ISA, Santiago,Rep. Dominicana, 1989.FAO: «First Record of Thrips palmi in Continental United States»,Plant Protection Bulletin 39 (4):188, 1981.Guyot, J.: «Revue bibliographique et premières observations en Guadelupesur Thrips palmi Karny», Agronomie 8 (7) : 565-575, 1988.Honda, Y.; M. Kameya-Iwaki; H. Tochihara; I. Tokashiki: «Occurrenceof Tomato Spotted Wilt Virus in Watermelon in Japan», TechnicalBulletin-SSPAC, Food and Fertilizer Technology Center, 114: 14-19,1989.Kameya-Iwaki, M.; Y.Honda; H. Tochihara: «A Watermelon Strain ofPotato Spotted Wilt Virus (TSWV-W) and Some Properties of Its Nucleocapsid»,Proceedings of 5 th International Congress of Plant Pathology,20-27 August 1988, Kyoto, Japan, 1988, p. 65.Kawai, A.: «Studies on Population Ecology of Thrips palmi. I. PopulationGrowth and Distribution Pattern on Cucumber in the Greenhouse»,Japanese Journal of Applied Entomology and Zoology, 27 (4):261-262, 1983.––––: «Studies on Population Ecology of Thrips palmi Karny. 9. InterSpecific Competition with Aphis gossypii Glover», Proceedings ofthe Association for Plant Protection of Kyushu 31, 156-159, 1985.––––: «Studies on Population Ecology of Thrips palmi Karny. X. Differencesin Population Growth on Various Crops», Japanese Journalof Applied Entomology y Zoology. 30(1): 7-11, 1986.––––: «Studies on the Population Ecology of Thrips palmi Karny. XIV.Relationship Between the Density and Rate of Copulation», JapaneseJournal of Applied Entomology and Zoology 31(1): 85-87, 1987.––––: «Control of Thrips palmi Karny in Japan», JARQ 24: 43-48,1990.Murguido, C.; Ana Ibis Elizondo; E. Pérez; E. Peña: «Thrips palmiKarny en la agricultura cubana», V Congreso Internacional de Desastres.Defensa Civil, República de Cuba. 7-10 de septiembre de1999, Palacio de Convenciones, La Habana, 1999.Dagnelie, P.: «Theorie et metodes statisques», Les Presses Agronomiquesde Gembloux, vol. 2 : 242-250, 1984.Sakimura, K.; L. M. Nakahara; H. A. Denmark: «A Thrips, Thrips palmiKarny (Thysanoptera:Thripidae)», Entomology Circular 280, Fla.Dept. Agric. & Consumer Serv. Division of Plant Industry, 1986.Salas, J.; M. Cermeli: «Manejo integrado del trips o piojito amarillo dela caraota Thrips palmi Karny en Venezuela», Fondo Nacional deInvestigaciones Agropecuarias (FONAIAP), Ministerio de Agriculturay Cría, Venezuela, 1995.60/fitosanidad

FITOSANIDAD vol. 6, no. 1, marzo 2002Comunicaciónpara la fitoprotecciónHISTORIA DE LA CUARENTENA DE PLANTASEN CUBA (PERÍODO 1900-1980)José Joaquín Torrent MolinaDepartamento Provincial de Sanidad Vegetal. Carretera Vía Blanca km 5, Canímar,MatanzasINTRODUCCIÓNCuba, por su condición insular, posee condicionesexcepcionales para la implantación exitosa de medidasde cuarentena. Sin embargo, desde su descubrimientoen 1492 y hasta 1906, no contó con una sola medidade protección fitosanitaria, a pesar de mantener un activointercambio comercial, primero con España, suprincipal suministrador hasta finales de la década delnoventa del siglo XIX, cuando perdió esta condición porla penetración que sufrió nuestra economía por el mercadode Estados Unidos, lo que trajo como consecuenciauna total dependencia, que duró hasta el triunfo dela revolución el 1 de enero de 1959.Esta dependencia también se refleja en toda la legislaciónfitosanitaria prerrevolucionaria, lo que provocóque las medidas de cuarentena estuvieran dirigidas máshacia la protección de intereses políticos y económicos,que hacia la protección de nuestro país de la introducciónde plagas exóticas.A partir del triunfo de la revolución esto cambió, comocambiaron todas las esferas del país, tanto política, culturalcomo económica. Por eso esta historia estará divididaen dos partes: etapa republicana (1900-1958) yetapa revolucionaria (1959-1980).La segunda se extiende sólo hasta 1980 por considerarla década del setenta como la más importante del serviciode cuarentena para nuestro país, por lo que representósu fortalecimiento y extensión en la protecciónfitosanitaria de los cultivos. No quiere esto decir quelas décadas del ochenta y noventa no sean importantes,pero su desarrollo está sustentado sobre la base delo hecho en la década precedente.Espero que esta obra constituya un reconocimiento aaquellos que se dedicaron durante muchos años al serviciode cuarentena, y muy especialmente a los que yano están y contribuyeron con dedicación y honestidada proteger la producción agropecuaria de la introducciónde plagas exóticas.ETAPA REPUBLICANAMás de 400 años estuvo nuestro país expuesto a la introducciónsin límites de organismos nocivos para laagricultura. Desde finales del siglo XIX Cuba había pasadoa ser económicamente colonia yanqui, desplazandoa España como primer suministrador del mercadocubano. Ya en 1902 el 50% del comercio de importaciónse realizaba con los Estados Unidos, y el otro 50%con el resto del mundo.El 2 de mayo de 1902 nace la República de Cuba mediatizadabajo el poder imperial que, entre otras condiciones,nos imponía la Enmienda Platt. Una vezestablecida la República y sus cuerpos legislativos y judiciales,comenzó la organización del sistema de leyes yde gobierno que garantizarían el orden y la disciplinainterna. A esta organización no podían faltar las medidasque ordenaran el comercio y su influencia en el desarrolloeconómico del país, principalmente agrícola,teniendo en cuenta que en este período nuestra economíaera básicamente agropecuaria, basada fundamentalmenteen la producción azucarera. Se imponía laadopción de medidas que garantizaran la protección delos cultivos de la introducción de plagas y enfermedades.El 16 de julio de 1906 se promulga por el presidenteTomás Estrada Palma la que se considera como primeraley sobre sanidad vegetal en Cuba, la cual prohibíalas importaciones de frutas cítricas desde México, hastaque se instalaran estufas en los puntos de controladuanal del país [Dpto. Cuarentena Exterior, 1989].El 31 de diciembre de 1913, mediante el Decreto1428, se crea el Servicio de Policía Sanitaria y de SupervisiónFitopatológica para la protección y defensafitosanidad/61

Torrent Molinade las plantas indígenas y aclimatadas. Este órgano estabaadscrito a la Secretaría de Agricultura, Comercio yTrabajo, y constituyó el primer servicio de sanidadvegetal en nuestro país.El 3 de julio de 1916, mediante el Decreto Ley 838, secrea en la Secretaría de Agricultura, Comercio y Trabajouna comisión que se llamaría de Sanidad Vegetalpara que atendiera los problemas de plagas y enfermedadesy la emisión de certificados fitosanitarios para laexportación [Dpto. Cuarentena Exterior, 1989]. El 12de septiembre de 1917, a través del Decreto 1337, seestableció ya con categoría de Oficina en la Secretaríade Agricultura, Comercio y Trabajo, la cual contabacon una estructura formada básicamente por un jefe,tres inspectores, capataces y obreros, con un presupuestode 10 000 pesos, con funciones y responsabilidadescon la cuarentena vegetal y la certificación de losproductos de exportación [Dpto. Cuarentena Exterior,1989]. Esta es la primera ocasión que se menciona eltérmino cuarentena vegetal.Las primeras regulaciones para las importaciones enCuba, aparecen el 17 de mayo de 1917, mediante elDecreto 175, en el cual se recogen las siguientes prohibiciones[Dpto. Cuarentena Exterior, 1989]:• Frutas y semillas de aguacate, debido al peligro de introducirel picudo de las semillas Heilipus lana.• Semillas, cápsulas y plantas de algodón debido a laoruga rosada del capullo Gelechia gossypiella.• Hijos y vástagos, cormos de plátano debido al picudonegro Cosmopolites sordidus.• Granos, mazorcas, plantas de maíz debido al Mildiudel maíz (Mildiu pisoderma).• Cualquier fruta, fruto o material que pueda contenerla mosca del Mediterráneo (Ceratitis capitata).El 16 de julio de 1919 aparece la primera medida de exclusiónen relación con la caña de azúcar, al emitirse unEdicto prohibiendo la importación de caña de azúcarde cualquier país, para evitar introducciones del mosaicode la caña de azúcar [Dpto. Cuarentena Exterior,1989].Este período de 21 años (1900-1920) resultó de granimportancia, pues se sentaron las bases para el posteriordesarrollo del servicio fitosanitario y principalmentedel servicio de cuarentena.Período 1921-1940El 18 de mayo de 1923, mediante el Decreto 736, seprohibió la importación de papa de semilla de variospaíses [Dpto. Cuarentena Exterior, 1989]. En ese mismoaño, el 12 de noviembre, se precisaba aún más lamedida contenida en el Decreto 736, debido al peligrode introducir en las semillas de papa el Sinchytrium endobioticum.Sólo permitía la importación cuando procedíade Canadá, Estados Unidos, Bermudas e IslasCanarias, siempre debidamente autorizada por PermisoFitosanitario de Importación y la consignación yarribaría amparada por Certificado Fitosanitario visadopor el cónsul de Cuba [Dpto. Cuarentena Exterior,1989].El 20 aparece la primera medida de cuarentena interior,recogida en el Decreto 421, el que dictaba normaspara combatir la enfermedad Panamá, en los platanalesexistentes en la zona de Baracoa [Dpto. CuarentenaExterior, 1989]. En esta época el plátano fruta llegó atener cierta importancia económica para Cuba.El Decreto 1314, de fecha 11 de agosto de 1926, estableciómedidas de cuarentena interna, al regular lasiembra, cultivo y desinfección de las habas limas quese destinaban a la exportación en estado verde haciaEstados Unidos, a causa del ataque de Maruca testulalis[Dpto. Cuarentena Exterior, 1989].En el año 1928 aparece en el estado norteamericano deConnecticut, el insecto Popillia japonica, lo que motivóla adopción de medidas que disponían con carácterobligatorio la fumigación de la tela de tabaco que se importabadesde esta zona. Estas importaciones arribaríanal país amparadas por Certificado Fitosanitariocon la siguiente declaración adicional: «Libre de Popilliajaponica y de insectos nocivos a la agricultura».Estas importaciones sólo se autorizaban por el puertode La Habana. Estas medidas estaban recogidas en elDecreto 1752 de fecha 22 de octubre [Dpto. CuarentenaExterior, 1989].En ese mismo año la estructura del Servicio de SanidadVegetal se perfecciona y adopta nuevas formas organizativasy estructural, contando ya con alrededor de 70empleados en todo el país. La estructura adoptada fuela siguiente:• Dirección o jefatura• Departamento de Inspección CuarentenariaSección inspectores en puertosSección inspectores de exportación• Departamento de Inspección a Cultivos• Departamento de Inspección a Jardines y Viveros• Departamento de Contabilidad ,Transporte yServicios VariosUn jefe y tres empleados.Un jefe y cinco inspectores.17 inspectores12 inspectoresUn jefe y cuatro inspectoresUn jefe y dos inspectoresUn jefe y 18 empleados62/fitosanidad

Historia de la cuarentena de plantas en CubaEl 3 agosto de 1933, exactamente nueve días antes dela caída del gobierno del tirano Machado, se crea por elDecreto 1135 la Junta Asesora de Cuarentena de Plantascon el objeto de que estudie los proyectos de leyes,decretos y resoluciones que deben ser aplicadas por elServicio de Sanidad Vegetal; se regulaban los miembrosoficiales de esta junta y se nombraban los mismos[Dpto. Cuarentena Exterior, 1989].El reglamento para la exportación aparece por primeravez en 1935, legalizado por el Decreto 46, y en él se regulabantodos los productos vegetales de exportaciónen función de la inspección y certificación fitosanitaria,así como otros aspectos de calidad, beneficio, envases,etiquetado y otros [Dpto. Cuarentena Exterior,1989].Este decreto fue modificado por los 3272 y 2037 del 1de diciembre de 1936 y 23 de septiembre de 1938, respectivamente[Dpto. Cuarentena Exterior, 1989].La presencia del picudo orlado de blanco Graphognatusleucoloma en los estados de Alabama, Florida, Mississippiy la Louisiana, con los cuales se mantenía un activointercambio comercial, motivó la promulgación de laResolución 523 del 27 de marzo de 1939, que prohibíalas importaciones desde esas áreas de papa, boniato,chícharos, maní, algodón y tierra y turba.De otros estados de Estados Unidos sólo se importaríanproductos por el puerto de La Habana, y sujetos alos resultados de las inspecciones de Cuarentena Vegetal[Dpto. Cuarentena Exterior, 1989]. Como se nota,el puerto de La Habana era el único que contaba contodas las garantías de inspección y otras facilidadespara la adopción de medidas en estos primeros años deexistencia de la república.El 4 de octubre, en virtud del Decreto 2745, y siendoministro de Agricultura Fidel Barreto Martínez, se creala Junta Asesora de Cuarentena de Plantas, y se unificaen un solo documento todos los decretos y resolucionesrelativos a la importación que se habían promulgadocon anterioridad [Revista Agricultura, 1956]. Estedecreto estuvo en constante modificación según lo exigíanlas circunstancias. La Junta Asesora estaba integradapor:Ministerio de AgriculturaIng. Osvaldo Pereira CalzadillaIng. Virgilio LasagaIng. Jorge DeschapelleIng. Julión AcuñaIng. Francisco Valdés BarryDirector de Agricultura (presidente)Jefe Negociado Cuarentena de Plantas(secretario)Jefe de Sección Sanidad Vegetal (vocal)Jefe Departamento Botánica (E. Exp. Agr.)(vocal)Jefe Departamento Fitopatología(E.Exp.Agr.) (vocal)Universidad de La HabanaIng. Jorge NavarroIng. José M . OsorioCatedrático de Fitopatología (vocal)Catedrático de Entomología (vocal)Asociación de CosecherosIng. Julio C. GómezVocalSociedad de Historia Natural Felipe PoeyIng. Fernando de Zayas MuñozVocalColegio Nacional de IngenierosAgrónomos y AzucarerosIng. José C. García TuduríVocalfitosanidad/63

Torrent MolinaEn este período, la cuarentena vegetal perfeccionó yamplió las medidas preventivas y de control en correspondenciacon el desarrollo y diversificación de la producciónagrícola y el intercambio comercial que de ellase derivaba. Otro elemento que influyó en este perfeccionamientofue la aparición en el continente de plagasque hasta el momento no se habían reportado y que noestaban reportadas en Cuba. Algunas de ellas aún no sehan detectado en nuestro país.Período 1941-1959Comienza 1941 con la emisión de la Resolución 178de fecha 31 de marzo, que manifestaba, en aplicacióndel Decreto 2745 del 4 de octubre del año anterior, laprohibición absoluta de importar frutas, viandas, hortalizasy plantas, incluyendo estacas, semillas, vástagos,etc., que no estén previamente autorizados por elServicio de Sanidad Vegetal sin excepción alguna. Seaplica el Permiso Fitosanitario de Importación, con independenciadel país, y se exige que todos los productoscon permiso estarán libres de tierra y restos decosecha. Se reitera la obligación de que el material arribeamparado por certificado fitosanitario de autoridadcompetente del país de origen y se mantienen otras regulacionesen cuanto a tipos de productos y origen establecidosen el Decreto 2745 [Dpto. CuarentenaExterior, 1989].La aparición del picudo negro del plátano –Cosmopolitessordidus–, detectado en la Estación Agronómica de Santiagode las Vegas, motivó que el 25 de enero de 1945se dictara el Decreto 249, que entre otras prohibía eltraslado de material de siembra infestado y sin la inspecciónde Cuarentena. Intereses políticos y de índolemercantilistas de los gobernantes de turno echaron portierra los esfuerzos de aquellos que, conocedores de lagravedad de la plaga, trabajaron para controlarla ymantenerla en las áreas en que fue detectada inicialmente,esfuerzo finalmente baldío y estéril [Dpto.Cuarentena Exterior, 1989]. El 24 de noviembre de1945 se actualizan los requisitos de importación parala papa de semilla. Se admite sólo de Canadá y EstadosUnidos, y se precisa que los puertos de arribo seríanLa Habana, Cárdenas, Caibarién, Nuevitas y Santiagode Cuba.En materia de cuarentena exterior se da un importantepaso de avance organizativo con la promulgación delDecreto 4206 de fecha 21 de noviembre de 1947, quemodificaba los decretos 740 de 1929 y 2745 de 1940.Fue considerado un documento básico en las actividadesde cuarentena exterior en cuanto a las importaciones,ya que precisa los objetivos y funciones de lainspección, tanto en buques, como en oficinas postales,aviones y otros; regulaba las relaciones con la aduanay otros organismos, así como las medidas de controlcon intercepciones y objetos bajo regulaciones, y otrasrelacionadas con deberes y derechos de los inspectores,disciplina laboral y responsabilidad en el desempeñode sus funciones [Dpto. Cuarentena Exterior, 1989].El 19 de abril de 1950, en un intento por evitar la diseminacióndel Cosmopolites sordidus, picudo negro delplátano, se emite el Decreto 1195, que prohibía el trasladoo transporte de semilla agámica de plátano desdeáreas infestadas de las provincias La Habana y Pinardel Río, hacia otras provincias del país [Dpto. CuarentenaExterior, 1989]. Esta medida tampoco fue cumplidadebido a que no existía control sobre las áreasdeclaradas bajo cuarentena, y por tanto se extraía materialde siembra de cualquier lugar.En 1951 Cuba firmó el Convenio Internacional de Protecciónde Plantas, que ha jugado un importante papelen prevenir e informar oportunamente a todos lospaíses sobre la aparición y diseminación de plagas y enfermedades.La aparición de la tristeza de los cítricos en EstadosUnidos provocó la emisión el 29 de junio de 1955 de laResolución 17, que prohíbe la importación de frutas cítricasdesde ese país, modificando el artículo sexto delDecreto 2745 que sí admitía estas importaciones.El 13 de abril de 1956 se detecta en una naranja de unpatio de una casa de la Florida la mosca del Mediterráneo,lo que se consideró como la primera intercepcióndel brote de ese año. Ante el peligro potencial que representapara nuestro país la presencia tan cercana deesta plaga, se dicta la Resolución 748 del 9 de mayo,siendo ministro de Agricultura Fidel Barreto Martínez,quien creó la Junta Previsora contra la MOSCAMED.Esta resolución contemplaba además un grupo de medidaspreventivas y divulgativas en relación con estaimportante plaga [Revista Agricultura, 1956].A partir de 1956 se hace sistemática la inspección enorigen de la papa de semilla procedente de Canadá,práctica que se mantiene hasta nuestros días. Los inspectoreseran designados por resolución, y la primerafue la 220 del 2 de septiembre [Dpto. CuarentenaExterior, 1989].Pocos meses después el país se estremecería por la ejecuciónde un grupo de acciones revolucionarias. Lasmás importantes fueron el levantamiento de Santiagode Cuba el 30 de noviembre de 1956, dirigido y organizadopor Frank País, y el desembarco del Granma, encabezadopor Fidel y protagonizado por 81expedicionarios más. Estos hechos marcarían el iniciodel fin de una época de sumisión y dependencia delimperialismo, a lo cual no escapa el Servicio de CuarentenaVegetal, que a pesar de tener una extensa base legalera incoherente y estaba al servicio de intereses delimperialismo norteamericano. En la práctica era incapaze ineficiente. Concentraba sus acciones en las importacionesy exportaciones, que en su mayoría seefectuaban por el puerto de La Habana y el aeropuertoJosé Martí.Categóricamente no existía una legislación básica queordenara y favoreciera una política realmente dirigida ala protección fitocuarentenaria del país.64/fitosanidad

Historia de la cuarentena de plantas en CubaLos funcionarios de Cuarentena eran en su inmensamayoría trabajadores prácticos, carentes de calificacióntécnica. Grupos políticos a través de funcionariosvenales por ellos ubicados estaban en posibilidad demanejar las medidas de control legal para favorecer operjudicar determinados intereses. En este campo tambiénla revolución triunfante tendría que crear un sistemaal servicio del pueblo.ETAPA REVOLUCIONARIA (1959-1980)Con el triunfo de la revolución el 1 de enero de 1959 yla aplicación inmediata de leyes revolucionarias, la estructurasocioeconómica del país dio un vuelco total yabsoluto. La Ley de Reforma Agraria, firmada el 17 demayo de ese mismo año, trajo consigo no sólo la entregade tierra a quien verdaderamente la trabajaba, sinoque por otro lado el estado organizaba grandes empresasagrícolas para desarrollar aún más la producciónagropecuaria, lo cual demandaba un fortalecimientodel servicio fitosanitario heredado por la revolución.Las medidas adoptadas por la revolución provocaronuna pronta respuesta del imperialismo yanki que caside inmediato impuso su criminal bloqueo, que dura yamás de cuarenta años. Esta arbitraria medida obligó anuestro país a buscar otras fuentes de suministradores,al perder su mercado tradicional, encontrándolos sóloen Europa, Asia y Canadá, y en México como excepciónen América Latina. El comercio con Europa seconcentró básicamente con el campo socialista, lo quehizo que las medidas de Cuarentena se reanalizaran yadecuaran a las condiciones fitosanitarias existentes enesos países, de los cuales se tenían muy pocos conocimientos.No se puede soslayar la agresión biológica aque nuestro país ha estado sometido y que desde fechatan temprana como 1964 Fidel denunció y en la cual lacuarentena ha jugado un papel importante en esta lucha.Cuando se produjo la deserción de técnicos y personalcalificado, estimulada por el imperialismo, en los primerosaños de la década del sesenta el ya débil serviciofitosanitario, se afectó aún más. Por otra parte, el ritmode desarrollo que impuso el cambio de poder hizo quelas instituciones científicas aumentaran el intercambiode semillas y otros elementos capaces de introducir ypropagar objetivos cuarentenados para el país.El uso de las más modernas técnicas en el transporte demercancías, como por ejemplo los contenedores, asícomo el incremento de las actividades en diferentespuertos del país reclamaban una estructura adecuadacapaz de proteger eficientemente a nuestro país, de la introduccióny posterior diseminación de plagas exóticas.En 1960 se inician los esfuerzos por fortalecer esta actividad.El 26 de noviembre de 1962 se dicta la Resolución256 que dispuso que ningún funcionario delestado revolucionario cubano podía evadir, mediantealegatos de razones de seguridad o de otra índole, elcumplimiento y la observancia de los requisitos desanidad vegetal.En 1963 se confeccionó el primer proyecto de Ley Básicade Cuarentena Vegetal que se esforzaba en ordenarlas normas existentes de una forma correcta yatemperada a los profundos cambios políticos, económicosy sociales que se estaban operando en Cuba[Dpto. Cuarentena Exterior, 1956]. También en 1963,el 11 de mayo, se emite la Resolución 428, estableciendoregulaciones para evitar la mayor diseminación delpicudo negro del plátano, que estaba diseminado portodo el occidente del país.A partir de 1964 se cuenta con el apoyo científico deun Laboratorio Central de Diagnóstico, eslabón fundamentalen la cadena fitosanitaria. En este período sóloexistían inspectores de cuarentena exterior en los puertosde La Habana y Santiago de Cuba. Las escasas entradasde buques que ocurrían por otros puertos eranatendidas desde el nivel central con su correspondienteriesgo. El otro punto de entrada al país era el aeropuertointernacional José Martí de La Habana, donde sólocuatro funcionarios atendían el Servicio de Cuarentena[Dirección General de Sanidad Vegetal, 1976].Era necesario cambiar de inmediato esta situación y lograruna mayor protección fitocuarentenaria paranuestros cultivos.A finales de 1968 se deciden seleccionar 30 alumnosdel Instituto Tecnológico Agropecuario Álvaro Reynosode Matanzas, para fortalecer el servicio de cuarentenay extenderlo a todo el país.Los criterios de selección utilizados, según nos contóFélix Manso Acosta, participante y que posteriormenteestuviera al frente del grupo fueron:• Indice académico no inferior a 90 puntos.• Condiciones morales y políticas.• Combatividad y actitud ante las tareas asignadas.• Disciplina.No obstante, el criterio que prevaleció fue el de la integralidad;por tanto, todos los alumnos estábamos enigualdad de condiciones. Para conformar este grupo sehizo una consulta personal con casi todos los profesoresy organizaciones del instituto. Una vez conformadala primera lista se procedió a la consulta con cada unode los preseleccionados, y este paso quizás fue, sin nadieproponérselo, una comprobación del cumplimientode los requisitos de selección. Del grupo inicialmenteseleccionado, no más de tres dijeron que no estaban deacuerdo con participar en esta tarea, lo que motivó susustitución con compañeros de la reserva que se habíacreado al efecto. Una vez confeccionado el grupo, vicon placer mi nombre entre los seleccionados.Pero, ¿qué sabíamos nosotros sobre cuarentena? Nada.O para ser justos: casi nada. Sólo conocíamos que existíauna Estación de Cuarentena para la Caña de Azúcaren Isla de Pinos.fitosanidad/65

Torrent MolinaEste desconocimiento pudo ser la causa de la negaciónde los tres alumnos. Por eso dijimos que la primera consultasirvió de comprobación práctica de la calidad yjusteza de la selección, si tenemos en cuenta que el90% de la primera propuesta dijo que sí, por el sólo hechode asumir una tarea que nos asignaba la revolucióny así cumplir nuestro compromiso de que, una vez graduados,iríamos al lugar que más lo necesitara.El 3 de enero de 1969 regresamos al instituto despuésde las festividades de fin de año. Aún no sabíamos cuálsería nuestro futuro inmediato. A los pocos días sabríamosque la selección de este grupo obedecía a una necesidadurgente que tenía el país de reforzar el serviciofitosanitario y específicamente el de cuarentena, queen ese momento era muy limitado.La primera tarea sería la superación dirigida hacia lasmaterias que posteriormente fueron objeto de trabajopara nosotros: entomología, fitopatología y nematología,impartidas con una frecuencia semanal por los especialistasdel laboratorio que existía en las oficinas deCuarentena, en Oficios 104 8o. piso, entre Lamparillay Amargura, La Habana, donde radicaba además la Direcciónde Cuarentena Nacional, con el compañeroJulio Guemes como director y el grupo de trabajoque atendía el Servicio de Cuarentena en el Puertode La Habana, y la Cuarentena Interior. Las asignaturasseñaladas serían impartidas por el ingeniero JulioSegura (entomología), M. A. Claro Guerrero (fitopatología)y M. A. José Ortega (nematología).Paralelamente, continuaríamos nuestro curso docentehasta completar nuestro curriculum como Técnicos Mediosen Agronomía. El 18 de agosto de 1969 concluimosnuestra estancia en el Instituto con los estudiosvencidos y empleo garantizado, como ha sido políticade la revolución. Sólo faltaba el licenciamiento del ServicioMilitar Obligatorio (SMO), trámite que seríacumplido el 5 de septiembre de ese mismo año.Según lo acordado, el 8 de septiembre debíamos presentarnosen la Dirección de Cuarentena para iniciarun adiestramiento que complementaría la parte teóricaya recibida, lo que nos pondría en mejores condicionespara enfrentar la tarea definitivamente. En reuniónrealizada ese mismo día conocimos el plan de trabajopor desarrollar, dónde pararíamos y quiénes seríannuestros entrenadores. Nombres como McGraw, Manolo,Virgilio Prudón, Sandalio, Felipe, Ramito, Piñera,Calixto y otros, comenzaron a ser familiares, y seconvirtieron en fuente de conocimientos y consejerosexcepcionales para nosotros, que éramos neófitos en lamateria y que teníamos la misión de continuar la tareaque ellos venían realizando, algunos desde antes deltriunfo de la revolución. Ese mismo día comenzamos eladiestramiento. El plan consistía en completar los conocimientosteóricos sobre las materias básicas y comenzarlas prácticas, tanto de cuarentena exteriorcomo interior. Esta fase duró aproximadamente cuarentay cinco días.A mediados de octubre estábamos en condiciones deextender el servicio de cuarentena a todo el país, o porlo menos así lo consideró el ingeniero Pedro Luis BernalGarcía, en aquel momento director del CentroNacional Fitosanitario y la Dirección Nacional de Cuarentena.No todos viajaríamos a nuestras provincias. Dos o tresirían por cada una, con excepción de Pinar del Río,donde sólo se envió un compañero. A reforzar el LaboratorioCentral de Diagnóstico fueron cinco compañeros.El resto se quedó en la Dirección de Cuarentena,tres en cuarentena interior con el ingeniero EméridoRodríguez, responsable de este frente, tres en la partemetodológica para los tratamientos especializados defumigación, que atendía el ingeniero Calixto Roselló,uno a reforzar la plantilla en el aeropuerto internacionalJosé Martí. Los cinco se incorporaron al cuerpo deinspectores del puerto de La Habana, todos dirigidosmetodológica y administrativamente por el Centro NacionalFitosanitario. El compañero Félix Manso se incorporódesde el primer momento a la Empresa deSemillas.A los que fuimos para las provincias se nos entregó unacarta de presentación para la Sanidad Vegetal y otrapara la aduana, esta última a fin de facilitar los trámitesde acreditación de la Cuarentena Exterior.A partir de octubre de 1969 comenzaría el verdaderoaprendizaje de una actividad que requiere de muchadisciplina y autopreparación, que permita alcanzar laautoridad necesaria para imponer las medidas preventivasde erradicación o control que sean necesarias contraun objetivo cuarentenado. Así fue cómo Cubacontó por primera vez con un servicio de cuarentenaen todo el país.El 21 de diciembre de ese año se efectuó la graduaciónde nuestro curso como Técnicos Medios en Agronomía.Nos quedaba por cumplir el compromiso de lamatrícula de estudios superiores, lo cual se hizo efectivoen enero de 1970.La materialización de la idea de reforzar la cuarentenapronto quedó demostrada.La década del setenta fue de gran importancia para elservicio de cuarentena, pues se sentaron las bases parasu desarrollo futuro. Además se reforzó la base legalexistente con la Ley 1249 de fecha 23 de junio de 1973en referencia a los delitos contra la economía. La promulgaciónel 12 de abril de 1977 de las ResolucionesMinisteriales 458 y 459 prohibiendo la introducciónde todo material genético de caña de azúcar o de otrasgramíneas, así como de tierra, abonos orgánicos, turba,provenientes de cualquier país donde estuviera reportadoel carbón de la caña, protegían a nuestro principalcultivo.El radio de acción se amplió y se comenzó a actuar sobrela producción de semilla fundamentalmente de66/fitosanidad

Historia de la cuarentena de plantas en Cubapapa, programa que se inició en la campaña1969-1970. Posteriormente se incorporarían los restantescultivos. Esto garantizaba una semilla de más calidaddesde el punto de vista fitosanitario.El fortalecimiento del trabajo de Cuarentena Interiorquedó demostrado con la detección de patógenos tanimportantes como la bacteria Pseudomonas solanacearum(hoy Ralstonia solanacearum), que fue reportada por primeravez en el país el día 21 de febrero de 1973 en unárea de 0,10 cab de papa, variedad Red Pontiac de 64días, en Alquízar, provincia de La Habana. El 16 demarzo de 1976 se dictó la Instrucción 3/76, que resumíay organizaba las acciones para el control cuarentenariode esta bacteria.En octubre de 1978 se detectó la roya de la caña deazúcar, cuyo agente causal es el hongo Pucciniaerianthis. Ese mismo año fue detectado en la zona de Pilón,provincia de Granma, el carbón de la caña de azúcar,en áreas plantadas con la variedad B 42-231, queresultó muy susceptible a este patógeno. Las esporasdel hongo llegaron al país transportadas por las corrientesaéreas procedentes de Jamaica, donde se encontraba.Este patógeno, al ser detectado en nuestraárea geográfica, hizo que se elaborara una estrategia deprevención y control que se denominó Programa deDefensa contra el Carbón de la Caña de Azúcar, siendoel primero de este tipo, y fue fechado en los primerosmeses del año 1977, más de un año antes de su detección.La eficiencia de este programa quedó demostradaal cumplirse el pronóstico de aparición en nuestro país,siempre que se introdujera por vía natural. El activismofuncionó, además, pues la detección la hizo un campesinoadiestrado por el sistema como rastreador, por loque se cumplía así con una de las tareas del programarelacionada con la capacitación de campesinos, técnicosy profesionales de la rama cañera y pecuaria.En 1979 se detectó en Pinar del Río el moho azul de tabaco.Causó un gran impacto económico con un saldode más de 343 millones de pesos de pérdidas por conceptode exportaciones dejadas de realizar, y la afectaciónal consumo nacional, que fue cubierto en granmedida a partir de importaciones que por primera vezel país se vio obligado a realizar.En esta década se detectaron otros patógenos que estabansometidos a cuarentena, pero pronto dejaron detener importancia como tal. Como ejemplo podemoscitar la Xanthomonas vesicatoria, que fue detectada en lazona montañosa de Cabeza, municipio de Unión deReyes, en la provincia de Matanzas, afectando al cultivodel tomate. Esta detección se puede considerarcomo la promotora del Activismo Técnico Fitosanitario,que se desarrolla de conjunto con la ANAP, ya quepor detectarse en áreas de campesino con una gran dispersión,fue necesario adiestrar a los productores en lossíntomas y en el manejo del patógeno para lograr sucontrol, lo que sirvió para diseñar todo un sistema deadiestramiento a campesinos, que a lo largo de estosaños ha demostrado eficiencia, como señalamos en elcaso del carbón de la caña.La Cuarentena Exterior, por su parte, sufrió un incrementoimportante en su actividad, fundamentalmentedebido a la diversificación del mercado y al crecienteintercambio con países de otras latitudes, sobre los queno se tenía mucha información fitosanitaria.La semilla de papa, que antes de la revolución sólo seimportaba de Estados Unidos y Canadá, hubo quetraerla de Europa, fundamentalmente de Holanda,Francia y en menor grado de Escocia, debido al bloqueo,que sólo nos dejó la opción de Canadá como suministradoren el área. Esto trajo consigo nuevosriesgos de introducción de plagas de importancia parala cuarentena, fundamentalmente de nemátodos cistógenos,muy distribuidos en este continente como consecuenciade la segunda guerra mundial. También lapapa de consumo hubo que traerla desde zonas tan lejanascomo la URSS y la RDA. Para minimizar esteriesgo se tomó la decisión de aplicar, al igual que se haciacon Canadá, la inspección en origen, comenzandoasí las labores en el exterior de manera más amplia delServicio de Cuarentena.Se tomaron además medidas internas para el controlde los envases y distribución de la papa, contempladasen la Instrucción 11/75. La actividad en los aeropuertos,también experimentó un incremento, con la reaperturadel aeropuerto internacional de Varadero, en1979.Debido precisamente al incremento del intercambiocomercial en 1974, se comenzaron las inspecciones enlos almacenas de la economía interna, como complementode las inspecciones que se realizaban en los puntosde entrada al país. La aplicación de la cuarentena depost-entrada se amplió a otros cultivos además de lacaña de azúcar. Fue creada entre otras la de pastos yforraje de Indio Hatuey, en Perico, provincia de Matanzas.En mayo de 1975 se fundó la primera Estación de Protecciónde Plantas del país en el municipio de Calimete,en Matanzas, en el Laboratorio de Producciónde Mosca Lixophaga, que poseía el científico Luis Scaramuzzaen el Central 6 de Agosto, de este municipio.Esta estación atendería los municipios de Colón, Calimetey Arabos. Sin duda este paso contribuyó de formadecisiva al desarrollo y consolidación del Servicio deCuarentena Interior.Estos son los aspectos mas significativos del desarrollode la cuarentena en el país en estos ochenta años, desde1900 hasta 1980.Como se puede observar, no es hasta el triunfo revolucionario,que se tiene una verdadera visión de lo quedebe ser un sistema de cuarentena como parte del sistemade protección de plantas. Sólo así nuestro país hafitosanidad/67

Torrent Molinapodido resistir la agresión biológica a que ha estado sometidodurante estos cuarenta años, de ahí que la decisiónde reforzar este servicio y extenderlo a todo elpaís, fuera muy acertada como parte del sistema nacionalde defensa civil.De esta manera, quedaba preparado el camino para eldesarrollo posterior en las décadas del ochenta y el noventa,en las que el Servicio de Cuarentena daría unsalto cualitativo en el cumplimiento de sus dos objetivosfundamentales: garantizar la detección tempranade los organismos nocivos de interés cuarentenario,que por cualquier vía no intencional se introdujera al paísy defender al país ante los actos de agresión biológica.REFERENCIASDirección General de Sanidad Vegetal: Informe sobre la proyecciónde la sanidad vegetal en Cuba, 1976, pp. 117-119.Departamento de Cuarentena Exterior: Legislación Fitosanitaria, 1989.Navarro Lantes, Aurelio: Cuarentena vegetal. Estructura, organizacióny sistema de vigilancia de la cuarentena interna, 1999.«La mosca del Mediterráneo», revista Agricultura, 1956, p. 39.Testimonios de Félix Manso Acosta, Aurelio Navarro Lantes, Rafael RodríguezBarrera, Domingo O. González Pastrana, Humberto HernándezCastañeda, Jacinto Domínguez Luis, José J. Torrent Molina.Relación de integrantes del grupo seleccionado en Álvaro Reynoso,en 1969, para el fortalecimiento del servicio de cuarentenade plantas en Cuba1. Agapito S. Abreu2. José Cera Velázquez3. Pastor Corbea4. Isacc Curbelo5. Atanasio Delgado Huerta6. Jacinto Domínguez Luis7. Claudel Espinosa Morales8. Domingo O. González Pastrana9. Humberto Hernández Castañeda10. Raúl Iznaga Cao11. Félix Manso Acosta12. Rafael Martínez Padilla13. Máximo Martínez Rodríguez14. Orlando Mejía Barrios15. Ángel Migues Aguilera16. Julio Muiña17. Aurelio Navarro Lantes18. Mario Pedroso19. Rubén Pérez Álvarez20. Luis Pérez Vicente21. Lorenzo Pescozo22. Rogelio Rivero23. Norge Rodríguez Almaguer24. Rafael Rodríguez Barrera25. Javier Sampedro26. Eliecer Sánchez González (Fallecido)27. Alberto Sosa Pérez28. José Joaquín Torrent Molina29. Luis L. Vázquez Moreno30. Alfredo Vidal Novoa68/fitosanidad