1.- Leucemias Agudas I.pdf

MIELOBLASTICASLINFOBLASTICASLEUCEMIASCRONICASExpansión de elementosmaduros de MOAGUDASExpansión clonal deprecursores hematopoyeticos80% L.infantiles son LLA15% son LMARestantes son indiferenciadas o cronicas(LMC, LMMC JUVENIL)

LEUCEMIAS AGUDASEN LA INFANCIA

ANTECEDENTES HISTORICOS Virchow, 1845Ehrich, 1891 CitoquimicaFarber, 1948 empleo Aminopterina

ESTRATEGIAS DE ESTUDIO DELAS L.A:METODOS DE LABORATORIO PARA CARACTERIZAR BLASTOS LEUCEMICOS:CLINICADATOSLABORATORIOMORFOLOGIAL.A.BIOLOGIAMOLECULARINMUNOFENOTIPOFISHCITOGENETICAComplejo diagnostico de las Leucemias en la Actualidad.

DEFINICION LEUCEMIA Proliferación neoplásica a partir de una célulahematopoyética inmadura que ha perdido lacapacidad de diferenciarse. Disminución del tejido hematopoyetico normal enMO y posterior invasión de sangre periférica yotros órganos. Enfermedad oncológica más frecuentediagnosticada en menores de 15 años.

ETIOLOGIA La mayoría carecen de etiología clara Factores predisponentes: Factores genéticos Anomalías cromosómicas Inmunodeficiencias congénitas Radiaciones ionizantes Fármacos mielotóxicos. Enfermedades inmunológicas Virus

CLINICASINTOMAS CONSTITUCIONALES: astenia,debilidad, perdida peso, sudoración nocturna.SINTOMAS POR INFILTRACION DE LA MO:- desplazamiento serie roja: Anemia ( palidez)- desplazamiento serie blanca: Fiebre (50%),infecciones 2ª a neutropenia.- desplazamiento serie plaquetar: diátesishemorrágicas(petequias, sangrado) por la plaquetopenia.

CLINICA SINTOMAS POR INFILTRACION DE ALGUNORGANO O TEJIDO:1. - 50-80% hepatoesplenomegalia2. - linfoadenopatias3. - 40% niños dolor óseo o articular4. - hipertrofia gingival5. - infiltración piel, mediastino y SNC (5-7% deniños con L.A.)

DATOS DE LABORATORIO 95% Anemia normocítica, normocrómica yarregenerativa ( ret ) Neutropenia.El compromiso de 2 o masseries hematopoyeticas 90% Trombocitopenia.MIELOGRAMA 16% carecen de blastos en SP.

CARACTERISTICAS SERICAS LDH elevada: Se correlaciona con la masatumoral y la gravedad de la enfermedad Otras menos frecuentes Hipercalcemia Hiperuricemia Aumento de transaminasas Uremia

FROTIS SANGUINEO NORMALPLAQUETASLINFOCITOMONOCITONEUTROFILO

AUTOANALIZADOR : ADVIA 120SISTEMA AUTOMATIZADO PARAESTUDIO DEL HEMOGRAMA

ADVIA 120: AUTOANALIZADORHEMATOLOGICO Autoanalizador por citometria de flujo. Tres sistemas analíticos:1Citómetro de flujo con lámpara diodo laser para canales:RBC/PLAQBASOLOBULARIDADRETICULOCITOS2.Citometro de flujo con lámpara tungsteno para canal dePEROXIDASA.3.Colorimetro para medir HEMOGLOBINA.

Autoanalizador hematologico:Graficas serie blancatamañomieloperoxidasaGraficas serie rojaComplejidad nuclearSerie plaquetarVOLUMENDENSIDADCONCENTRACION DE HbTAMAÑO

HEMOGRAMA AUTOMATIZADO DESANGRE NORMAL

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL Reacciones leucemoides linfocitarias:mononucleosis infecciosa, Bordetella Pertussis…. Hiperplasia linfoide madura en niños< 2 años. Otros: Anemia aplasica, linfoma, neuroblastoma,síndromes hemorrágicos (purpuratrombocitopenica aguda), síndromemielodisplasico…

MONONUCLEOSIS INFECCIOSAAUTOMATIZADOMANUALAtipias linfocitarias

LEUCEMIA AGUDA VISTA ALM.OPTICOBLASTOS

LEUCEMIA AGUDA (SISTEMAAUTOMATIZADO:

LEUCEMIASAGUDAS.CLASIFICACION FABBritish Journal of Hematology, 1976 Aug ; 33(4): 451-8Proposals for the Classification of the Acute LeukaemiasFRENCH-AMERICAN-BRITISH (FAB) CO-OPERATIVE GROUPBennett JM , Catovsky D, Daniel MT , Flandrin G, Galton DA, Gralnick HR, Sultan C,Accepted for publication 26 January 1976PROBLEMAS CON LA CLASIFICACION FAB:•No todas las L. Agudas tienen 30% blastos (traslocaciones especificas).•Excluye leucemias bifenotipicas.•No incluye L. multilínea u otras poco frecuentes•Excluye información esencial para tto y pronostico.

CLASIFICACION MORFOLOGICAFAB (1976)MIELOBLÁSTICAL1L2L3LINFOBLÁSTICATamaño celularMorfología NuclearNucleolosBasofilia citoplasmáticaVacuolas citoplasmáticasL1: cels pequeñasL2: cels pequeñas y grandesL3: tipo Burkitt.M0 minimamente diferenciadaM1 Sin maduraciónM2 Con maduraciónM3 promielociticaM4 mielomonociticaM5 monoblásticaM6 eritroleucemiaM7 megacarioblástica

LEUCEMIA AGUDACLASIFICACION OMS ( 2001) L.MIELOIDES AGUDAS L.LINFOIDES AGUDASDe precursor de cel BDe precursor de cel TDe Burkit L.MIELOIDE CRONICA L.LINFATICA CRONICA

LEUCEMIA AGUDACLASIFICACION OMS ( 2001)L. AGUDA 20%BLASTOSCLASIFICACION OMS:MORFOLOGIAGENETICAFENOTIPO

CLASIFICACION INMUNOFENOTIPICAEGIL (1995)Mas usadaLINFOBLASTICASAGUDASMIELOBLASTICASAGUDASBIFENOTIPICAS AGUDAS

SCORE INMUNOFENOTIPICO DE LAS LEUCEMIAS BIFENOTIPICAS

ESTUDIO INICIAL DE LA LEUCEMIA.CITOMETRIA DE FLUJOPaneles de anticuerpos monoclonales empleados para el estudio inicial de lasLAs (FITC/ PE/ ECD/ PC5/ PC7)LLA LLA DE de FENOTIPO fenotipo B B LLA LLA DE de FENOTIPO fenotipo TT LMAcMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34CD45/ CD4/ CD8/ CD3/ CD19CD10/ CD20/ CD45/ CD34/ CD19CD38/ CD22/ CD45/ HLADR/ CD19CD15/ CD13/ CD45/ CD33/ CD19KOR-SA/ 7.1/ CD45/ CD24/ CD19IP (DNA)/ pan-BcMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34CD45/ CD4/CD8/ CD3/ CD19CD7/ CD34/ CD3/ HLADR/ CD5CD7/ CD1a/ CD45/ CD33/ CD56CD7/ CD13/ CD45/ CD10/ CD2CD38/ TCRαβ/ CD45/ TCRγδ/ CD3cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34CD45/ CD4/ CD8/ CD3/ CD19CD15/ CD13/ CD45/ CD33/ CD34CD7/ CD117/ CD45/ CD34/ CD56CD65/ CD135/ CD45/ CD2/ CD34CD64/ CD11b/ CD45/ CD14/ CD16HLADR/ CD235a/ CD45/ CD34/ CD41INMUNOFENOTIPOSLEUCÉMICOS

LEUCEMIAS 2001-2005MIELOIDESMIELOIDES 25%LINFOIDES75%LINFOIDESLEUCEMIA TLEUCEMIA B

LEUCEMIAS NIÑO JESUS 2005LINFOIDESLLA TINTERMEDIALLA PROBLLA B PROB-PREBLLA T PRO TMIELOIDE M0CD56+MIELOIDE M0MIELOIDE M3MIELOIDE M4MIELOIDESMIELOIDE M5LLA BCOMUNLMCLMMJ

LEUCEMIAS LINFOBLÁSTICASAGUDAS B (EGIL):FRECUENCIA5%SUBTIPOSLAL B1 opro-BMARCADORESINMUNOLOGICOSCD79a+ y/o CD 22+y/o CD19+,CD34+CD34+TdT +CD19+CD22+60%15%3%LAL B2 ocomunLAL B3 opre- BLAL B4 omadurosCD79a+ y/o CD 22+y/o CD19+,CD34±CD 10+CD79a+ y/o CD 22+y/o CD19+,Cad µintracitoplasmaticaCD79a+ y/o CD 22+y/oCD19+,Ig Sup+CD10++CD34+/-TdT+CD19+CD22+CD10 +dCD10+/-CD20++IgM+CD19+CD22++CD20++IgM+ CD19+CD22+Ig super+

LEUCEMIAS LINFOBLÁSTICASAGUDAS T (EGIL):FRECUENCIA15%SUBTIPOSMARCADORESINMUNOLOGICOSTdT+CD3+CD34 +CD7+LAL T1 opro-TLAL T2,pre-T+ CD 7 Y CD3citoplasmático, CD34+A lo anterior añadir +CD 2 y/o CD 5 y/oCD8.CD2+TdT+CD3+CD8+CD5+CD7+MASFRECUENTELAL T3,tímicocorticalLAL T4,madura+ CD1aDemostración de laexistencia de CD 3 desup en ausencia de CD1a.CD4+CD8+CD1a+TdT +CD3+CD3+CD4 oCD8CD2CD5CD7TdT+CD2+CD5+CD7+

LEUCEMIAS LINFOBLASTICAS T Menos frecuentes ( 15% LAL pediátricas). Mas agresivas (30% recaen a los dosaños). Menos caracterizadas citogeneticamente(25-50% presentan cariotipos alterados). Menos información pronostica. Ttos menos específicos.

CLASIFICACION INMUNOLOGICA-MORFOLOGICATIPOinmunologTdTHLADRCD10CALLACD3CD1aCD7CD2CD5CD8CD19 CIg SIg TipoFABproB + + - - - - - + - - L1L2COMUN + + + - - - - + - - L1L2PreB + + ± - - - - + + - L1L2B NEG + ± - - - - + - + L3ProT + - ± +cit - + - - - - L1L2PreT + - ± +cit - + + - - - L1L2TIMICOCORTICAL+ - - +cit POS + + - - - L1L2TIMICOMADURO- - - +sup NEG + + - - - L1L2

LEUCEMIAS AGUDAS1. DIAGNOSTICO2. TRATAMIENTO3. TRANSPLANTE4. EMR

COMO SE REALIZA UNDIAGNOSTICO? ANALIZADORES AUTOMATICOS. EXTENSION DE SANGRE PERIFERICA. EXTENSIONES DE MEDULA OSEA CITOQUIMICA DE EXTENSIONES MO. CITOMETRIA DE FLUJO DEL ASPIRADO DEMEDULA OSEA PARA TIPIFICAR LA LEUCEMIA CITOGENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

FROTIS NORMAL MOmegacariocitoeritroblastos

MO PATOLOGICALEUCEMIAMIELOIDE AGUDALEUCEMIA LINFOIDE AGUDA

CONTRIBUCION DE LA CITOQUIMICAAL DIAGNOSTICO HEMATOLOGICO La citoquímica estudia la composición qca. de lascélulas y hace posible detectar y precisar lalocalización de algunos principios inmediatos,enzimas y sust.inorgánicas (metales pesados). Compuestos: Carbohidratos: reacción del ác peryódico de Shiffo reacción del PAS. Enzs oxidantes: reacción de las peroxidasas. Enzs hidrolíticas: fosfatasas alcalinas, ácidas, ß-glucuronidasa, muramidasa, N-acetil- ß-glucosaminidasa, esterasas inespecíficas. Componentes inorgánicos: hierro⇒azul de Prusiao de Perls.

CITOQUIMICATipos FABL1 L2 L3 MO M1 M2 M3 M4 M5 M6PAS +GRANO+GRANO- +MPX- - - - +++ +++++ -+ -P acida +T +T-Cloroacetatoesterasa- - - - -+++ +++ -+ - -ANAE( naftolacetatoestarasa)+T +T- - - - -+ ++-

FOTOS CITOQUIMICAANAEPAcidaPASMPX

GRACIAS