cultivo del rotÃfero brachionus sp. y copepodos nativos en ... - Imarpe
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COPEPODOSCaracterísticas <strong>del</strong> medio de <strong>cultivo</strong>Se utilizó agua de mar filtrada a 1µ, salinidad de 35 ppm, la cual fue almac<strong>en</strong>ada <strong>en</strong> untanque de fibra de vidrio (0.5 m 3 ) con aireación constante suministrada través de unamanguera tran<strong>sp</strong>ar<strong>en</strong>te de 3/16” y una piedra difusora, se mantuvo bajo condiciones <strong>del</strong>uz y temperatura acorde al <strong>cultivo</strong> (21 – 24 ºC). La r<strong>en</strong>ovación total <strong>del</strong> aguaalmac<strong>en</strong>ada se realizó cada dos días.Obt<strong>en</strong>ción y mant<strong>en</strong>imi<strong>en</strong>to de stockLa muestra constituida básicam<strong>en</strong>te por nauplios fue obt<strong>en</strong>ida y colectada de la laguna“La Mellizera” <strong>en</strong> las salinas Chilca, <strong>en</strong> el distrito de Chilca, provincia de Cañete <strong>en</strong> eldepartam<strong>en</strong>to de Lima. Dicha laguna se <strong>en</strong>cu<strong>en</strong>tra a 65 km al sur de Lima. La toma fueindirecta ya que al obt<strong>en</strong>er rotíferos <strong>del</strong> medio natural se <strong>en</strong>contró y extrajo tambiénnauplios de copépodos y hasta adultos ovados.La muestra fue extraída con ayuda de una malla de 53 micras y trasladada <strong>en</strong> balde<strong>sp</strong>lásticos de 10 litros de capacidad, cerrados herméticam<strong>en</strong>te previam<strong>en</strong>te rotulados yllevado al laboratorio para su adaptación, limpieza y posterior <strong>cultivo</strong>.La etapa de adaptación se realiza a través <strong>del</strong>: acondicionami<strong>en</strong>to de los copépodos a lascondiciones de <strong>cultivo</strong> <strong>en</strong> el laboratorio (salinidad, temperatura y alim<strong>en</strong>tación)AdaptaciónConsiste <strong>en</strong> la división de las muestras <strong>en</strong> un mayor número de recipi<strong>en</strong>tes a fin deadicionar poco a poco cantidades de agua de mar filtrada, disminuy<strong>en</strong>do así la d<strong>en</strong>sidady adaptando a las e<strong>sp</strong>ecies a la salinidad de 35 ppm con la que se trabajará a lo largo desu <strong>cultivo</strong>, luego se realizó el lavado de las mismas <strong>en</strong> <strong>en</strong>vases plástico con tamiz basede tamaño de malla 145 µ para separar adultos de nauplios.La purificación y aislami<strong>en</strong>to de cepas se realizó a través de tamizado <strong>en</strong> mallas de 53 µaprovechando la superioridad <strong>en</strong> talla fr<strong>en</strong>te a los rotíferos, lo que no descarta queexistieron días <strong>en</strong> que se mantuvo a ambas e<strong>sp</strong>ecies d<strong>en</strong>tro <strong>del</strong> sistema de <strong>cultivo</strong> de losrotíferos aunque <strong>en</strong> un numero reducido de <strong>en</strong>vases, esto debido a que <strong>en</strong> estadiosiniciales los copépodos pued<strong>en</strong> medir igual que los rotíferos adultos y hasta m<strong>en</strong>os.Aislami<strong>en</strong>toLa selección de las cepas se realizó a través de pipeteo y al estereoscopio, esta consistió<strong>en</strong> seleccionar hembras ovadas, las mismas que fueron colocadas <strong>en</strong> numero conocido<strong>en</strong> vasos de precipitado de 500 ml con agua de mar filtrada y esterilizada (0.45 micras)y se les suministró la microalga Nannochloris <strong>sp</strong> <strong>en</strong> conc<strong>en</strong>tración y volum<strong>en</strong> conocido,se rotuló y almac<strong>en</strong>ó <strong>en</strong> una incubadora a temperatura constante (18 ºC). Los cambiosde agua se realizaron cada 3 días por el consumo rápido <strong>del</strong> alim<strong>en</strong>to y la producción deexcretas por los mismos.Los copépodos obt<strong>en</strong>idos <strong>del</strong> medio natural, luego de pasar por las etapas deacondicionami<strong>en</strong>to, lavado y purificación fueron colocados <strong>en</strong> <strong>en</strong>vases de capacidadconocido plásticos (10 litros) con agua filtrada a 1 micra, <strong>en</strong> un volum<strong>en</strong> de 5 litros con250 mL/ día (microalgas), registrándose d<strong>en</strong>sidades poblacionales y tallas exist<strong>en</strong>tes.