cultivo del rotÃfero brachionus sp. y copepodos nativos en ... - Imarpe

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traslado, recepción de muestras, adaptación, limpieza, purificación y aislamiento decepas.El mantenimiento del stock comprendió: la preservación de la cepa aislada y lapreservación del monocultivo.La obtención de cepas se realizó a través de aislamiento de 20 rotíferos colocados envasos de precipitado(3) con 40 ml de agua de mar (35 ppm de salinidad) filtrada yesterilizada por triplicado a la cual se le adicionó como alimento algas unicelulares(Nannochloris sp.), luego de una semana se filtró la suspensión del cultivo, seenjuagaron los rotíferos en una malla de 53 micras y se trasvasó a vasos de precipitado(3) de 500 ml conteniendo agua de mar filtrada y esterilizada (350 ml) y nuevamente sele adicionó como alimento microalga Nannochloris sp., se mantuvo las cepas en unambiente semicontrolado con temperatura ambiente e iluminación artificial.El potenciamiento de las cepas se realizó bajo el mismo procedimiento señaladoanteriormente partiendo con densidades de 4 a 25 rot.ml -1 .Cultivo inicialSe realizó el trasvase de cepas a baldes plásticos (4 litros) conteniendo 2 litros de aguade mar, se inocularon los rotíferos a una densidad de 8 a 45 rot.ml -1 .Los trabajos de desdoble se realizaron con un tamiz de 40 µ de base y uno de 245 µ conel cual se filtraron las partículas grandes y que constituían restos de fondo existente enlos baldes de cultivo, se alcanzó densidades de 15 a 103 rot.ml -1 , con lo cual se inició elcultivo intermedio en baldes plásticos de 10 litros.Cultivo intermedioEn baldes de plásticos de 10 litros se inocularon los rotíferos procedentes del cultivoinicial a una densidad de 12 a 22 rot.ml -1 .Los desdobles se realizaron con ayuda de un tamiz de base de 40 µ y uno de 245 µ conel cual se filtraron partículas procedentes del fondo o suspensión del balde.Cultivo masivoSe realizó en tanques de fibra de vidrio de 0,1 m 3 y 0,3 m 3 , partiendo en ambos tanquescon una densidad inicial de 38 rot.ml -1 .Los rotíferos fueron sembrados para el tanque de 0,1 m 3 , en 90 litros de medio decultivo y alimentados con levadura de panificación, no se le practicó renovacionesparciales de agua.El cultivo inicial, intermedio y masivo, se mantuvo con temperatura ambiente, luzartificial y aireación moderada pero constante.Como alimento para el cultivo inicial, intermedio y masivo se suministró Nannochlorissp. (botellas de 4 litros), y los mililitros a dar estuvieron determinados por laconcentración de células por ml así como por la fecha de inoculación de la microalga.
Los rotíferos fueron sembrados para el tanque de 0,3 m 3 , en 250 litros de medio decultivo y alimentados con levadura de panificación, no se le practicó renovacionesparciales de agua y su cosecha fue total pasada la obtención de la densidad máximaalcanzada.La determinación de la densidad se realizó a través de conteos diarios en la cámara deconteo SEDGEWICK RAFTER de medidas 50 mm x 20 mm x 1 mm, con capacidad de1 ml de muestra la cual va fijada con 3 gotas de una solución de lugol, realizándose elconteo en un estereoscopio.Durante las diferentes etapas de cultivo a excepción del cultivo masivo, se registró lapresencia de la diatomea Skeletonema sp, formando una sustancia mucilaginosa en losbordes y fondo de los recipientes y que trajo como primera consecuencia la disminucióndrástica de la densidad de rot.ml -1 provocando así una caída del cultivo. Frente a esteproblema se realizaron acciones como: (1) dejar decantar el medio de cultivo en losbaldes quitando la aireación por períodos cortos y rescatando después la suspensión delcultivo, (2) variar condiciones de cultivo tales como la iluminación y por ende latemperatura, rescatando también la suspensión. La recuperación resulto en algunoscasos eficaces y en otros no, a la par se fue recuperando el cultivo con lo producido enlas cepas y también con nuevas colectas del medio natural acelerando así larecuperación de la producción.Análisis de datosDeterminación de densidad absoluta (d.a), constante de crecimiento (K) yrendimiento poblacional (R) del rotífero Brachionus sp.Tasa instantánea de crecimiento (K), se aplicó la siguiente formula:(Yufera y Pascual, 1980)K= ln Nt – ln No / T 1 – T 0Donde:ln = logaritmo naturalNt =Numero de individuos en el tiempo tNo =Numero inicial de individuosT 1 - T 0 =Tiempo en díasRendimiento poblacional (R), según Verginelli et al. 1994 (Carrera, 1999)R= N2 – N1/ T 2 – T 1Donde:N1 =densidad al día 1N2 =densidad al día 2T 2 – T 1 =intervalo considerado
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