cultivo del rotÃfero brachionus sp. y copepodos nativos en ... - Imarpe
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traslado, recepción de muestras, adaptación, limpieza, purificación y aislami<strong>en</strong>to decepas.El mant<strong>en</strong>imi<strong>en</strong>to <strong>del</strong> stock compr<strong>en</strong>dió: la preservación de la cepa aislada y lapreservación <strong>del</strong> mono<strong>cultivo</strong>.La obt<strong>en</strong>ción de cepas se realizó a través de aislami<strong>en</strong>to de 20 rotíferos colocados <strong>en</strong>vasos de precipitado(3) con 40 ml de agua de mar (35 ppm de salinidad) filtrada yesterilizada por triplicado a la cual se le adicionó como alim<strong>en</strong>to algas unicelulares(Nannochloris <strong>sp</strong>.), luego de una semana se filtró la su<strong>sp</strong><strong>en</strong>sión <strong>del</strong> <strong>cultivo</strong>, se<strong>en</strong>juagaron los rotíferos <strong>en</strong> una malla de 53 micras y se trasvasó a vasos de precipitado(3) de 500 ml cont<strong>en</strong>i<strong>en</strong>do agua de mar filtrada y esterilizada (350 ml) y nuevam<strong>en</strong>te sele adicionó como alim<strong>en</strong>to microalga Nannochloris <strong>sp</strong>., se mantuvo las cepas <strong>en</strong> unambi<strong>en</strong>te semicontrolado con temperatura ambi<strong>en</strong>te e iluminación artificial.El pot<strong>en</strong>ciami<strong>en</strong>to de las cepas se realizó bajo el mismo procedimi<strong>en</strong>to señaladoanteriorm<strong>en</strong>te parti<strong>en</strong>do con d<strong>en</strong>sidades de 4 a 25 rot.ml -1 .Cultivo inicialSe realizó el trasvase de cepas a baldes plásticos (4 litros) cont<strong>en</strong>i<strong>en</strong>do 2 litros de aguade mar, se inocularon los rotíferos a una d<strong>en</strong>sidad de 8 a 45 rot.ml -1 .Los trabajos de desdoble se realizaron con un tamiz de 40 µ de base y uno de 245 µ conel cual se filtraron las partículas grandes y que constituían restos de fondo exist<strong>en</strong>te <strong>en</strong>los baldes de <strong>cultivo</strong>, se alcanzó d<strong>en</strong>sidades de 15 a 103 rot.ml -1 , con lo cual se inició el<strong>cultivo</strong> intermedio <strong>en</strong> baldes plásticos de 10 litros.Cultivo intermedioEn baldes de plásticos de 10 litros se inocularon los rotíferos proced<strong>en</strong>tes <strong>del</strong> <strong>cultivo</strong>inicial a una d<strong>en</strong>sidad de 12 a 22 rot.ml -1 .Los desdobles se realizaron con ayuda de un tamiz de base de 40 µ y uno de 245 µ conel cual se filtraron partículas proced<strong>en</strong>tes <strong>del</strong> fondo o su<strong>sp</strong><strong>en</strong>sión <strong>del</strong> balde.Cultivo masivoSe realizó <strong>en</strong> tanques de fibra de vidrio de 0,1 m 3 y 0,3 m 3 , parti<strong>en</strong>do <strong>en</strong> ambos tanquescon una d<strong>en</strong>sidad inicial de 38 rot.ml -1 .Los rotíferos fueron sembrados para el tanque de 0,1 m 3 , <strong>en</strong> 90 litros de medio de<strong>cultivo</strong> y alim<strong>en</strong>tados con levadura de panificación, no se le practicó r<strong>en</strong>ovacione<strong>sp</strong>arciales de agua.El <strong>cultivo</strong> inicial, intermedio y masivo, se mantuvo con temperatura ambi<strong>en</strong>te, luzartificial y aireación moderada pero constante.Como alim<strong>en</strong>to para el <strong>cultivo</strong> inicial, intermedio y masivo se suministró Nannochloris<strong>sp</strong>. (botellas de 4 litros), y los mililitros a dar estuvieron determinados por laconc<strong>en</strong>tración de células por ml así como por la fecha de inoculación de la microalga.