Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras - Bolsa de ...

PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nuevaedición de sus folletos de Métodos Analíticos en Alimentaria,en la que podrán apreciar a simple vistaun cambio de formato respecto a las anteriores.M E T O D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I AEsta nueva imagen, pretende ser una expresión delos cambios que con el tiempo hemos experimentadoen nuestros campos de actividad, puesto que si continuamosmanteniendo una importante implantaciónen el sector alimentario como fabricantes dereactivos para análisis PANREAC y de los aditivosalimentarios ADITIO, actualmente hemos aumentadonuestra aportación de productos para el análisisalimentario con nuestras líneas de Cromatografía enCapa Fina PANREAC-TLC y Medios de CultivoDeshidratados para Microbiología CULTIMED.La colección Métodos Analíticos en Alimentaria secompone de 6 folletos monográficos, por campos dealimentos, que recogen una transcripción íntegrade los métodos oficiales de análisis en España, quea su vez son publicados en los correspondientesB.O.E. mencionados en el índice de cadamonografía incorporando los reactivos y productosauxiliares PANREAC en la calidad consideradamás idónea, así como los medios de cultivoCULTIMED.

MLos títulos de las 6 monografías son:Aceites y grasasAguas potablesde consumo públicoy aguas de bebida envasadasCarne y productos cárnicosCereales, derivados de cerealesy cervezaLeche y productos lácteosProductos derivados de la uva,aguardientes y sidrasObviamente esta edición ha sido actualizada con lasdisposiciones publicadas hasta el momento, queestablecen nuevos procedimientos o que modificannotablemente características anteriormente establecidas.Por último, comentarles que están a su disposiciónademás de esta colección, nuestros:Catálogo General de Reactivos PANREACCatálogo ADITIO de Aditivos AlimentariosCatálogo CULTIMED de Medios de Cultivo DeshidratadosCatálogo PANREAC-TLC de Placas, Folios yAccesorios para Cromatografía en Capa Fina.

INDICEProductos derivadosde la uva:VinosMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,30-8-1979 Y 14-10-1981)1- Examen organoléptico(B.O.E. 22-7-1977) ............................ 92- Ensayos previos de conservación ....... 93a- Color (B.O.E. 14-10-1981).................. 103b- Color de los vinos (aplicable a vinostintos y rosados (B.O.E. 22-7-1977) ... 144a- Masa volúmica y densidad relativa(método picnométrico)........................ 144b- Masa volúmica y densidad relativa(método areométrico) ......................... 155a- Título alcohométrico (métodopicnométrico)...................................... 225b- Título alcohométrico (métodoareométrico) (B.O.E. 23-7-1977) ......... 296- Extracto seco total ............................. 317a- Azúcares reductores (defecaciónplúmbica) (provisional) ........................ 347b- Azúcares reductores (defecaciónmercúrica) (provisional) ....................... 367c- Azúcares reductores (valoración)(B.O.E. 30-8-1979) ............................. 378- Glicerol (Glicerina) (B.O.E. 23-7-1977).. 389- 2,3-Butanodiol ................................... 4010a- Sacarosa (método cualitativocolorimétrico)...................................... 4210b- Sacarosa (método cuantitativo) ........... 4311- Cenizas ............................................. 4312- Alcalinidad de cenizas ........................ 4413- Fosfatos ............................................. 4414- Calcio (método complexométrico) ....... 4515- Magnesio ........................................... 4616- Hierro (método colorimétrico delsulfocianuro)....................................... 4717- Cobre ................................................ 4818- Potasio (fotometría de llama) .............. 4919- Sodio (fotometría de llama) ................. 4920- Acidez total ........................................ 5021- Acidez volátil ...................................... 5122- Acido Sórbico en el destilado paraacidez volátil ...................................... 5223- Acidez fija (B.O.E. 25-7-1977) ............ 5324a- Acido Tartárico total (método del calcioracemato)........................................... 5324b- Acido Tartárico total (métodocomplexométrico)............................... 5425- Acido Láctico ..................................... 5426- Acido Cítrico ...................................... 56

M27- Sulfatos (B.O.E. 26-7-1977) ............... 5828a- Anhídrido Sulfuroso (método Paul) ......... 5928b- Anhídrido Sulfuroso (método Ripper doble) 6029- Acido Sórbico .................................... 6130- Cloruros (B.O.E. 30-8-1979) ............... 6231- Acido Benzoico (B.O.E. 26-7-1977) .... 6332- Bromo total ....................................... 6433- Bromo orgánico ................................. 6534- Acidos Monobromoacético yMonocloroacético de origen orgánico(método cualitativo) (provisional) ......... 6635- Indice de Permanganato(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 6736a- Determinación de presencia de vinoprocedente de “híbridos productoresdirectos” (método cualitativo) ............. 6836b- Determinación de presencia de vinoprocedente de “híbridos productoresdirectos” (provisional) ........................ 6837- Metanol (Alcohol metílico) (método delácido cromotrópico) .......................... 6938- Nitrógeno (método Kjeldhal) .............. 7039a- Flúor (provisional) .............................. 7139b- Flúor (B.O.E. 30-8-1979) ................... 7340- Hidroximetilfurfural (provisional)(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 7441- Determinación cualitativa de AcidoSórbico, Benzoico, p-Clorobenzoico,Salicílico, p-Hidroxibenzoico y su ésteretílico ................................................ 7542- Investigación de derivadosmonohalogenados del Acido Acético(B.O.E. 30-8-1979) ............................ 7743- Grado alcohólico en potencia ............ 7844- Grado alcohólico total ....................... 7845- Colorantes sintéticos ......................... 7846- Mercurio ............................................ 7947- Plomo ................................................ 8148- Relación P/ ..................................... 8249- Anhídrido Carbónico (método aprobadopero no publicado en el B.O.E.) ......... 8250- Etanal (método aprobado pero nopublicado en el B.O.E.) ...................... 8451- Presión del Anhídrido Carbónico(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 8552- Antisépticos y Antifermentos (métodomicrobiológico) .................................. 85Zumos de UvaMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 7-5-1988)1- Grado Brix ........................................ 892- Densidad .......................................... 983- pH .................................................... 994- Acidez total ...................................... 995- Acidez volátil ..................................... 1006- Sólidos solubles ................................. 1017- Azúcares totales y reductores ............ 1038- Acido Ascórbico ................................ 1049- Relación glucosa/fructosa ................. 10510- Nitrógeno total .................................. 10511- Etanol ............................................... 10612- Indice de formol ................................ 10713- Prolina .............................................. 10714- Acido Sórbico .................................... 10815- Acido Benzoico ................................. 10816- Hidroximetilfurfural ............................. 10917- Cenizas ............................................. 10918- Material mineral insoluble en AcidoClorhídrico al 10% ............................ 11019- Fósforo total ...................................... 11020- Sulfatos ............................................. 11121- Anhídrido Sulfuroso ........................... 11222- Potasio .............................................. 11223- Sodio ................................................ 11324- Arsénico ............................................ 11325- Hierro ................................................ 11426- Plomo ............................................... 11527- Estaño ............................................... 11528- Cobre ............................................... 11629- Zinc ................................................... 116VinagresMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 27-7-1977, 30-8-1979Y 14-10-1981)1- Extracto total (B.O.E. 27-7-1977) ....... 1192- Acidez total (grado acético) ................ 1193- Acidez fija ......................................... 1194- Acidez volátil ..................................... 1205- Sulfatos ............................................. 1206- Acetilmetilcarbinol (Acetoína)(B.O.E. 30-8-1979) ............................ 1217- Cenizas (B.O.E. 27-7-1977) ............... 1218- Indice de oxidación ........................... 1229- Metanol (Alcohol Metílico), método delAcido Cromotrópico (B.O.E. 30-8-1979). 12310a- Acido Tartárico (método cualitativo) .... 12310b- Acido Tartárico (método cuantitativo) .. 12411- Cobre ............................................... 12512- Cloruros ............................................ 12613- Grado alcohólico ................................ 12614- Arsénico ............................................ 12715- Zinc ................................................... 12816- Prolina .............................................. 12917- Acido Acético de síntesis(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 129Orujos, Heces y LíasMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 30-8-1979)1- Contenido alcohólico en orujos, hecesy lías ................................................. 133

Aguardientescompuestos:WhiskyMETODOS DE ANALISIS (Anexo I de laOrden 3-4-1985, B.O.E. 13-4-1985)1- Obtención del destilado ..................... 1352- Furfurol ............................................. 1353- Extracto seco .................................... 1364- Esteres .............................................. 1365- Alcoholes superiores .......................... 1376- Metanol ............................................. 1387- Grado alcohólico ............................... 1388- Aldehídos .......................................... 1399- Acidez volátil ...................................... 14010- Cenizas (materia mineral total) ............ 14011- Plomo ................................................ 14112- Zinc ................................................... 14213- Cobre ................................................ 14214- Arsénico ............................................ 142RonMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 24-10-1985)1- Obtención del destilado ...................... 1452- Furfurol (Furfuraldehído) ...................... 1453- Extracto seco reducido ...................... 1464- Esteres .............................................. 1475- Alcoholes superiores .......................... 1486- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 1487- Grado alcohólico ............................... 1498- Aldehídos .......................................... 1499- Acidez volátil ..................................... 15010- Azúcares reductores .......................... 15011- Plomo ............................................... 15312- Zinc ................................................... 15313- Cobre ................................................ 15414- Arsénico ............................................ 15415- Sacarosa .......................................... 155GinebraMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 25-10-1985)1- Obtención del destilado ..................... 1572- Furfurol (Furfuraldehído) ..................... 1573- Extracto seco .................................... 1584- Bases nitrogenadas ........................... 1585- Alcoholes superiores .......................... 1586- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 1597- Grado alcohólico ............................... 1608- Sacarosa ........................................... 1609- Acidez total ....................................... 16110- Materias reductoras(Azúcares reductores) ........................ 16111- Plomo ................................................ 16312- Zinc ................................................... 16313- Cobre ................................................ 16414- Arsénico ............................................ 164AnísMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 13-5-1987)1- Obtención del destilado ..................... 1672- Peso específico del aceite esencialnatural (en materia prima) ................... 1673- Punto de fusión del aceite esencialnatural (en materia prima) ................... 1684- Grado alcohólico ............................... 1695- Azúcares totales ............................... 1696- Anetol ............................................... 1707- Metanol ............................................. 1718- Bases nitrogenadas ........................... 1729- Aceites esenciales ............................. 17310- Hidroximetilfurfural y furfural ............... 17411- Arsénico ............................................ 17412- Plomo ............................................... 17613- Zinc ................................................... 17614- Cobre ................................................ 177Sidras:Sidra y otras bebidasderivadas de lamanzanaMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 28-7-1980)1- Eliminación del AnhídridoCarbónico .......................................... 1792- Grado alcohólico adquirido ................ 1793- Azúcares reductores .......................... 1794- Anhídrido Sulfuroso ............................ 1795- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 1796- Acidez volátil ..................................... 1797- Extrato seco total .............................. 1798- Cenizas ............................................. 1799- Hierro ................................................ 17910- Etanal ................................................ 17911- Anhídrido Carbónico .......................... 180

MRelación de reactivosy productos auxiliaresque se utilizan en losmétodos analíticos,Productos derivados dela Uva, Aguardientesy Sidras....................................... 184Aditivos ycoadyuvantestecnológicos parauso alimentarioindustrial................................. 190

Productos derivadosde la uva:VinosNOTA: Se han consignado todos los métodosoficiales de análisis de vinos publicados en elB.O.E., pero no los prescritos por el Reglamento2676/90 de la C.E., por no estar suficientementeextendidos en nuestro país y, por tanto, no teneruna aplicación generalizada.

MMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,30-8-1979 Y 14-10-1981)1. EXAMEN ORGANOLEPTICO1.1. Examen del color.Determinar mediante apreciación visual lascaracterísticas, bien definidas, del color del vino.Observar el vino colocado en copas de cristal finoe incoloro, o bien en tazas de plata o de fondoplateado, el cual presentará diferentes formasconvexas o abolladas, para apreciar el vino endiferentes espesores y sobre fondo brillante.Utilizar las siguientes calificaciones del colorpara vinos tintos: rojo rubí, rojo violáceo o morado,viraje a tono cebolla o amarillento.Según la intensidad del color, el vino tinto puedecalificarse en: vino tinto, rosado, clarete, y sitiene mucho o poco color dentro de estos tipos,se dirá que tiene mucha o poca capa.En vinos blancos, utilizar las calificaciones detono verdoso, casi incoloro, amarillo, amarillo-oro,ambarino, pajizo claro u oscuro (rancia), etc., y entodos los tipos, si el color es blanco, o si azulea,pardea o ennegrece.1.2. Formación de espuma.Observar el aspecto de la espuma que se formaal agitar el vino en la copa y determinar si es ono abundante, si desaparece rápidamente o, encaso de vinos tintos, si persiste unos momentosel color más o menos intenso. El vino de muchacapa o el vino enyesado produce espuma que tardamucho en desaparecer.1.3. Presencia de gas carbónico.Verter vino en una copa. La formación de burbujasindica la presencia de gas carbónico en elvino. Este gas carbónico debe eliminarse paracontinuar el examen de la muestra, agitando o enla forma que se indica en los métodos analíticos.1.4. Limpieza.Apreciar en copa o en taza de plata, al mismotiempo que el color, si el vino está turbio, claro obrillante.Observar también si hay depósito y si al agitartiene aspecto cristalino o pulverulento que enturbieel vino.1.5. Degustación o cata.Proceder a la degustación recién destapada labotella, consignando datos, referentes a la calidad,origen, edad y posibles alteraciones del vino.Coger una copa de cristal ovoide por su platillocon los dedos pulgar, índice y central de la manoderecha, quedando la copa libre para examinar elvino. Llenar con vino sólo 1/3 o 1/4 de la copa,para poder agitar bien y tener un espacio vacíodonde se concentren los aromas. Agitar haciendogirar el vino y apreciar el aroma.Apreciar y caracterizar el olor a “vinoso”, queacusa vino nuevo, el “afrutado”, el del vino quecomenzó la “crianza”, la riqueza alcohólica, oloresácidos volátiles, olores que acusen defectos deelaboración, etc., y la presencia de enfermedadesy alteraciones.En degustación de más precisión, como serála necesaria para definir características de un tipode vino y que han de servir de referencia, es necesarioreunir un grupo determinado de buenoscatadores, y realizar un nú-mero de catas suficientespara obtener resultados satisfactoriosestadísticamente según las normas específicasexistentes.1.6. Referencia.1.6.1. Amerine, M.A., y Feduchy, E.: “Losresultados de la cata del vino y del análisis químico”.Boletín I.N.I.A., 31, 353-375, 1956.2. ENSAYOS PREVIOS DECONSERVACION2.1. Prueba del aire.2.1.1. “Quiebras” tánico-férricas o fosfatoférricas.-Dejar el vino en contacto con el aire (en unacopa mediada), en sitio fresco y al resguardo de laluz. Observar al cabo de 12 o más horas. El enturbiamientoo el ennegrecimiento pone de manifiestola posibilidad de “quiebras” tánico-férricas ofosfato-férricas.2.1.2. “Quiebra oxidásica”.- Proceder como en2.1.1., utilizando dos muestras de vino, una pasterizada,para destruir la oxidasa, y la otra sinpasterizar. La formación de color pardo y precipitadopulverulento oscuro son señales característicasde la “quiebra oxidásica”.2.1.3. “Quiebra cuprosa”.- Poner la muestraen botella cerrada, calentar en baño de agua a35, y exponer a la luz. Si la riqueza en cobre essuficiente, aparece enturbiamiento característicode la “quiebra cuprosa”.2.2. Prueba del frío.Enfriar el vino a la temperatura que normalmentese suponga va a estar expuesto, y comprobarsi se produce precipitación de bitartrato.2.3. Prueba de la estufa.Mantener una muestra de vino en estufa a 22-25durante 3-4 días. Examinar al microscopio el posibledesarrollo microbiano distinguiendo si se trata delevaduras o de bacterias. Si es necesario, proceder alconteo y la identificación de los microorganismos.2.4. Examen microscópico.Realizar el examen microscópico sobre preparacióndel poso de la muestra, que puede aparecerdespués de reposo en estufa o a temperaturaambiente.9

10Si el vino se presenta turbio en el envase original,hacer una preparación directamente del vinoo del poso obtenido por centrifugación de esevino. Si no se presenta depósito y el vino estápoco turbio, hacer una preparación del posoobtenido por centrifugación.Determinar en el examen microscópico si eldepósito es microbiano, distinguiendo levaduras ybacterias.3(a). COLOR3.(a).1. Principio.El color de los vinos se determina por transparenciacomo se percibe por la vista, pero porun procedimiento independiente de la apreciaciónpersonal, valiéndose de métodos espectrofométricostriestimulares de ordenadas seleccionadasde Hardy, fundado en el sistema de laCommisión Internationale de l’Echairage (C.I.E.),con relación a la luz producida por un cielo nublado(fuente C).3(a).2.1. Espectrofotómetro para medida enel espectro visible. Los valores de transmitanciacorrespondientes a una misma muestra, nodeben acusar diferencias superiores a 0,005 ycuando la escala del aparato esté graduada envalores de transmitancia multiplicados por 100,no debe haber diferencias superiores a 0,5.Las cubetas de cuarzo o de vidrio de índice derefracción máximo 1,5, de paredes paralelas yespesor interno b que se expresa en centímetrosy con una aproximación de ± 0,002.b.Conviene disponer de cuatro pares de cubetasen las que los espesores b, sean de 0,1 cm;0,2 cm; 0,5 cm y 1 cm.Según la intensidad del color se escogerán unpar de cubetas de tal forma que la absorbancia Aquede comprendida entre 0,3-0,7 (transmitancia0,5-0,2).3(a).3. Procedimiento.Si el vino no está limpio centrifugar previamente.Eliminar el gas carbónico, si es necesario, poragitación con vacío parcial.Medir directamente con el espectrofotómetrolas transmitancias del vino a las cuatro longitudesde onda = 625, 550, 495 y 445 mm, empleandola cubeta de espesor conveniente, según intensidaddel color del vino.3(a).4. Cálculo.Utilizar 131074 Agua PA-ACS como líquido dereferencia.3(a).4.1. Calcular las coordenadas (x, y) delpunto representativo del color del vino en el diagramatricromático de la C.I.E.XYx = ————— y = —————X + Y + ZX + Y + ZX = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495Z = 0,24 T495 + 0,94 T445Los valores triestimulares X, Y, Z, expresan lasproporciones de colores rojos, verdes y azulesque dan por mezcla el color del vino.Cuando el espesor b de la cubeta sea inferiora 1 cm, referir la transmitancia a 1 cm en lasiguiente forma T = T’ 1/b y si la transmitancia vieneexpresada en porcentaje.T’ 1/bT = ————–—100 (1/b ) -1T = transmitancia referida a 1 cm de espesorde cubeta.T’ = transmitancia obtenida para b cm deespesor de cubeta.b = espesor en cm de la cubeta utilizada.Como los espectrofotómetros están generalmentegraduados tanto en transmitancia T comoen absorbancia A, se puede también calcular latransmitancia en 1 cm de espesor del vino a partirde la absorbancia observada en el espesor b, sila medida se ha hecho en cubeta de espesor inferiora 1 cm, teniendo en cuenta que:1A = log ———TCon este fin, se calculan las absorbancias A enun cm de espesor multiplicando respectivamentepor 2,5 y 10 las absorbancias leídas en un espesorb de 0,5; 0,2 y 0,1 cm. Se obtienen despuéslos valores correspondientes de transmitanciabien por aplicación de la relación anterior, bienrefiriéndose a la tabla calculada a partir de esamisma relación.3(a).4.2. Luminosidad relativa.- Es el valor deY, expresado en porcentaje (siendo el negro y = 0y el incoloro y = 100).3(a).4.3. Cromaticidad.- Para expresar la cromaticidad(longitud de onda dominante y pureza)se recurre al diagrama de cromaticidad, querepresenta el “locus” de todos los colores delespectro, considerando que a 400 nm, correspondeel azul, a 520 nm corresponde el verde ya 700 nm el rojo. El punto 0 corresponde a lafuente luminosa utilizada, que, en este caso, esel iluminante estándar Q, que representa la luz

Mde un día medianamente claro y cuyas coordenadasson:x o = 0,3101 e y o = 0,31633(a).4.4. Longitud de onda dominante.Conocidas las coordenadas x e y del color, seune el punto de esas coordenadas C al punto 0.En el punto en el que esta recta corta al “SpectrumLocus” se encuentra la longitud de ondadominante que corresponde al matiz de estecolor. Así en el caso de vinos de tono teja, la longitudde onda dominante se sitúa entre 585 y 598nm aproximadamente. Para los vinos de un colortinto franco, se sitúa entre 599 y 650 nm, mientrasque para los vinos de tono rojo púrpura estácaracterizada por la longitud de onda dominantedel color complementario. Se obtiene el valor deesta longitud de onda prolongando la recta en ladirección de C hacia 0 para que ella corte el“Spectrum Locus” como hemos visto antes.Este color complementario en el caso de vinosde tono rojo púrpura se sitúa en el verde. Se anotael valor de esta longitud de onda seguida de c(complementario), por ejemplo 495 c.3(a).4.5. Pureza.La pureza se calcula determinando la distanciarelativa del punto C que representa el color delvino examinado y del punto S que corresponde al“Spectrum Locus” al punto 0 que representa aliluminante.Se expresa la pureza en porcentaje por la relación:Distancia del punto C al punto 0100 x —————————————––———Distancia del punto 0 al punto S11Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.

3(a).5. Observaciones.3(a).5.1. El color de un vino queda completamentedefinido por la luminosidad relativa Y enporcentaje y las coordenadas tricromáticas x e y.Se pueden preveer las características cromáticasde una mezcla de varios vinos cuando seconocen las características cromáticas de lasmismas. Los valores triestimulares X, Y, Z de lamezcla se obtienen por la suma de esos valoresmultiplicando por su proporción para cada constituyente.TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS%trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9120 3,00 2,70 2,52 2,40 2,30 2,22 2,15 2,10 2,051 2,00 1,96 1,92 1,89 1,85 1,82 1,80 1,77 1,74 1,722 1,70 1,68 1,66 1,64 1,62 1,60 1,59 1,57 1,55 1,543 1,52 1,51 1,50 1,48 1,47 1,46 1,44 1,43 1,42 1,414 1,40 1,39 1,38 1,37 1,36 1,35 1,34 1,33 1,32 1,315 1,30 1,29 1,28 1,28 1,27 1,26 1,25 1,24 1,24 1,236 1,22 1,21 1,21 1,20 1,19 1,19 1,18 1,17 1,17 1,167 1,15 1,15 1,14 1,14 1,13 1,13 1,12 1,11 1,11 1,108 1,10 1,09 1,09 1,08 1,08 1,07 1,07 1,06 1,06 1,059 1,05 1,04 1,04 1,03 1,03 1,02 1,02 1,01 1,01 1.0010 1,00 1,00 0,99 0,99 0,98 0,98 0,97 0,97 0,97 0,9611 0,96 0,95 0,95 0,95 0,94 0,94 0,93 0,93 0,93 0,9212 0,92 0,92 0,91 0,91 0,91 0,90 0,90 0,90 0,89 0,8913 0,89 0,88 0,88 0,88 0,87 0,87 0,87 0,86 0,86 0,8614 0,85 0,85 0,85 0,84 0,84 0,84 0,84 0,83 0,83 0,8315 0,82 0,82 0,82 0,82 0,81 0,81 0,81 0,80 0,80 0,8016 0,80 0,79 0,79 0,79 0,78 0,78 0,78 0,78 0,77 0,7717 0,77 0,77 0,76 0,76 0,76 0,76 0,75 0,75 0,75 0,7518 0,74 0,74 0,74 0,74 0,73 0,73 0,73 0,73 0,73 0,7219 0,72 0,72 0,72 0,71 0,71 0,71 0,71 0,71 0,70 0,7020 0,70 0,70 0,69 0,69 0,69 0,69 0,69 0,68 0,68 0,6821 0,68 0,68 0,67 0,67 0,67 0,67 0,67 0,66 0,66 0,6622 0,66 0,66 0,65 0,65 0,65 0,65 0,65 0,64 0,64 0,6423 0,64 0,64 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,62 0,6224 0,62 0,62 0,62 0,61 0,61 0,61 0,61 0,61 0,60 0,6025 0,60 0,60 0,60 0,60 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,5926 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,57 0,57 0,57 0,5727 0,57 0,57 0,57 0,57 0,56 0,56 0,56 0,56 0,56 0,5628 0,55 0,55 0,55 0,55 0,55 0,54 0,54 0,54 0,54 0,5429 0,54 0,54 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,5230 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,51 0,51 0,51 0,5131 0,51 0,51 0,51 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,5032 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,48 0,4833 0,48 0,48 0,48 0,48 0,48 0,47 0,47 0,47 0,47 0,4734 0,47 0,47 0,47 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,4635 0,46 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,4436 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,43 0,4337 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,42 0,42 0,42 0,4238 0,42 0,42 0,42 0,42 0,42 0,41 0,41 0,41 0,41 0,4139 0,41 0,41 0,41 0,41 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,4040 0,40 0,40 0,40 0,40 0,39 0,39 0,39 0,39 0,39 0,3941 0,39 0,39 0,39 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,3842 0,38 0,38 0,38 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,3743 0,37 0,37 0,37 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,3644 0,36 0,36 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35

MTABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS%trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,945 0,35 0,35 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,3446 0,34 0,34 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,3347 0,33 0,33 0,33 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,3248 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,31 0,31 0,31 0,31 0,3149 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,30 0,30 0,30 0,3050 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,29 0,29 0,29 0,2951 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,2852 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,2853 0,28 0,28 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,2754 0,27 0,27 0,27 0,27 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,2655 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,25 0,25 0,25 0,25 0,2556 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,2457 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,2458 0,24 0,24 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,2359 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,22 0,22 0,22 0,2260 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,2261 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,2162 0,21 0,21 0,21 0,21 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,2063 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,19 0,1964 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,1965 0,19 0,19 0,19 0,19 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,1866 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,17 0,1767 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,1768 0,17 0,17 0,17 0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,1669 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,1670 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,1571 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,14 0,14 0,14 0,1472 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,1473 0,14 0,14 0,14 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,1374 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,1375 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,1276 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,11 0,11 0,1177 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,1178 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,10 0,10 0,10 0,10 0,1079 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,1080 0,10 0,10 0,10 0,10 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,0981 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,0982 0,09 0,09 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,0883 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,0884 0,08 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,0785 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,0786 0,07 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,0687 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,0688 0,06 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,0589 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,0590 0,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,0491 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0.0492 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,0393 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,0394 0,03 0,03 0,03 0,03 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,0295 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,0296 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,0197 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,0198 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,0099 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00100 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,0013

143(b). COLOR DE LOS VINOS(Aplicable a vinos tintos y rosados)3(b).1. Principio.La intensidad de color se mide por la suma delas absorbancias del vino para un espesor de 1cm correspondientes a las longitudes de onda deabsorbancia mínima (420 nm) del vino tinto.La tonalidad se expresa por el ángulo que formacon el eje de longitudes de onda la cuerdaque une los puntos de la curva espectrofotométricarepresentativos de las absorbancias correspondientesa las longitudes de onda de 420 y520 nm.3(b).2. Material y aparatos.Como en 3(a).2.3(b).3. Procedimiento.Como en 3(a).3, excepto que las longitudes deonda utilizadas serán de 420 nm y 520 nm.3(b).4. Cálculo.Calcular la intensidad colorante y la tonalidad.3(b).4.1. Intensidad colorante:1I = (A 420 + A 520 ) –––––bA 420 = absorbancia a 420 nm.A 520 = absorbancia a 520 nm.b = espesor en cm de la cubeta.3(b).4.2. Tonalidad.- La tonalidad se mide porel ángulo cuya tangente es igual a la diferencia delvalor numérico de las dos absorbancias A 520 -A 420 .Conocido este valor, se puede determinar el valordel ángulo por tablas expresadas en grados sexagesimales.3(b).5. Observaciones.Con este método no se determina el color,sino la intensidad y la tonalidad del color, que soncaracterísticas cromáticas convencionales. Por surapidez y sencillez, es muy práctico para comprobarla evolución de la materia colorante durantesu “crianza” o añejamiento.3(b).6. Referencias.3(b).6.1. Determinación triestimular del colorde los vinos, método simplificado por C.Stella.Comunicación al O.I.V. núm. 282 (2 febrero 1968).3(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. AO, 1-14. 1969.4(a). MASA VOLUMICA Y DENSIDADRELATIVA(Método picnométrico)4(a).1. Principio.La masa volúmica es el cociente de la masa deun cierto volumen de vino o de mosto por estevolumen, Se expresa en g por ml y su símbolo esr 20 .La densidad relativa es el cociente de la masavolúmica del vino por la masa volúmica del agua.Su símbolo es d20 ó simplemente d, cuando nohaya posibilidad de confusión.La masa volúmica y la densidad relativa de unvino se determinan a 20°C.El método picnométrico consiste en la determinaciónponderal del contenido en alcohol de undestilado por medio de un picnómetro.4(a).2. Material y aparatos.4(a).2.1. Picnómetro de vidrio de 50 ml decapacidad, de cuello con diámetro interior de3,5 mm. Embudo y sifón para picnómetros.4(a).2.2. Termómetro contrastado dividido en1/5-1/10 de grado Celsius graduado de 10 a30C.4(a).2.3. Termostato regulado a 20C ± 0,2.4(a).2.4. Balanza con aproximación de 0,1 mg.4(a).3. Procedimiento.Lavar bien el picnómetro y enjuagarlo despuéscon 131085 Etanol 96% v/v PA y luego con EterDietílico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, escurrir bien y secar cuidadosamentecon paño de hilo o papel filtro el exterior, y concorriente de aire seco el interior, tapar, dejar enreposo en la caja de la balanza durante 30 minutosaproximadamente, y pesar.Llenar después con agua a 20 recién destilada,con cuidado de evitar burbujas de aire en elinterior del picnómetro. Sumergir en el agua a latemperatura comprobada de 20.Mantener el picnómetro en el termostatodurante 30 minutos, y enrasar el nivel del aguacon la marca del cuello. Tapar el picnómetro,secar exteriormente con las precaucionesexpuestas, dejar nuevamente 30 minutos en lacaja de la balanza y después pesar.Vaciar el picnómetro, enjuagar nuevamente,primero con agua y después con Etanol 96% v/vPA y Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm deBHT PA-ACS-ISO, y secar como anteriormente,llenar con el vino a temperatura de 20C, aproximadamente,cuidando que no quede ningunaburbuja de aire (en caso de que el vino tenga gascarbónico, se eliminará previamente como luegose indica). Dejar el picnómetro con el vino en eltermostato a 20C ± 0,2 durante 30 minutos, llenarhasta volumen con el vino y pesar.

M4(a).4. Cálculo.4(a).4.1. Cálculo de la densidad relativa a20C.P” - P20 = ––––––––P’ - Pd 20P = peso en g del picnómetro vacío.P’ = peso en g del picnómetro más agua a20C.P” = peso en g del picnómetro más vino a20C.4(a).4.2. Cálculo de la masa volúmica r 20 .r 20 = 0,998203 d 2020o biencr 20 = d 2020 - ––––––––1.000El valor de c se encuentra en las tablas 4(a).I y4(a).II.La aproximación de los resultados será de0,0003. Para mayor precisión, se tendrá en cuentael empuje del aire como en 5(a).5.4(a).5. Observaciones.Si el vino contiene cantidad sensible de gascarbónico, se eliminará todo lo posible agitandoun volumen de unos 250 ml del vino, en matrazde 1.000 ml.Si el vino está turbio, se filtrará por papel de filtraciónrápida, de pliegues y procurando airear lomenos posible, tapando también el embudo convidrio de reloj.Si el enturbiamiento es por suspensión delevadura, la filtración corriente aludida no lo aclarará,siendo conveniente en este caso, dejardecantar el vino en probeta tapada, durante dos otres días en sitio fresco.4(a).6. Referencia.4(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V., A1, 11-26. 1969.4(b). MASA VOLUMICA Y DENSIDADRELATIVA(Método areométrico)4(b).1. Principio.Determinación de la masa volúmica a partir dela lectura del areómetro que flota introducidoen el vino.4(b).2. Material y aparatos.4(b).2.1. Areómetro. Los areómetros empleadosdeben responder a las siguientes normas (I.S.O.):Parte cilíndrica sumergible y tallo de seccióncircular de 3 mm de diámetro como mínimo. ParaTABLA 4(a). ICálculo de la masa volúmica (r 20 ) a partir de la densidadrelativa 20/20 y recíprocamenteDensidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100Correcciones c 1,73 1,76 1,80 1,84 1,87 1,91 1,94 1,98Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260Correcciones c 2,02 2,05 2,09 2,12 2,16 2,20 2,23 2,27Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400Correcciones c 2,30 2,34 2,38 2,41 2,45 2,48 2,52TABLA 4(a). IICálculo de la masa volúmica (r 15 ) a partir de la densidadrelativa 15/15 y recíprocamenteDensidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100Correcciones c 0,86 0,88 0,90 0,92 0,94 0,95 0,97 0,99Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260Correcciones c 1,01 1,03 1,04 1,06 1,08 1,10 1,12 1,13Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400Correcciones c 1,15 1,17 1,19 1,21 1,22 1,24 1,2515

vinos secos, la graduación será de 0,983 a 1,003en milésimas y 0,2 milésimas. Las divisiones demilésimas deben ser de 5 mm como mínimo. Paravinos desalcoholizados y vinos dulces, y eventualmentepara mostos, se recomienda un juego de 5areómetros graduados de 1,000-1,030; 1,030-1,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150.Estos aparatos estarán graduados en masasvolúmicas a 20C, en milésimas y 0,5 milésimaspor lo menos. Cada división de una milésima seráde 3mm como mínimo. En los aparatos se indicaráque las lecturas deben hacerse por la partesuperior del menisco.4(b).2.2. Termómetro contrastado, graduadopor lo menos en 1/2 grados.4(b).2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diámetrointerior y 320 mm de altura.4(b).2.4. Plataforma con tornillos de nivelación,para mantener vertical la probeta sobre ella colocada.4(b).3. Procedimiento.Colocar en la probeta descrita 250 ml del vinoe introducir el areómetro y el termómetro.El areómetro y especialmente el tallo graduadodeberán estar limpios y desengrasados.Agitar para uniformar la temperatura. Un minutodespués, hacer la lectura del termómetro. Retirarel termómetro y hacer la lectura de la masaaparente sobre el tallo del areómetro, después deun minuto de reposo.4(b).4. Cálculo.Calcular la masa volúmica referida a 20C.c ( _ si t es inferior a 20C)r 20 = r t ± ––––––1.000 (+ si t es superior a 20C)r 20 = masa volúmica referida a 20.rt= lectura del tallo graduado del areómetro.c = valor de la corrección correspondiente a latemperatura del vino en el momento de la lectura.Este valor se encuentra en las tablas 4(b). I y 4(b).II.t = temperatura del vino en el momento de lalectura.Los resultados se obtendrán con una precisiónde 0,0003.4(b).5. Observaciones.Si se utilizan areómetros que den d 154 o d 2020,hay que corregir la lectura en las tablas correspondientes,y después expresar los resultados end 2020 o r 20 , empleando las fórmulas y tablas siguientes:Cd 2020 = d 154 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). III.1.000Cd 2020 = d 1515 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). IV.1.000Cr 2020 =d 154 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). V.1.000Cr 2020 =d 1515 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). VI.1.0004(b).6. Referencias.4(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. A1, 11-26.4(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables decorrespondance entre les diverses tables Alcoométriques”.Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,111-141, 1966.TABLA 4(b). ICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 20TemperaturasGRADOS ALCOHOLICOS0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 1510º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,341611º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,1512º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,9413º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,7314º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,5215º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,2916º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,93 0,99 1,0517º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81

MTABLA 4(b). ICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 20TemperaturasTemperaturasGRADOS ALCOHOLICOS0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 1518º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,5519º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,2820º21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,2922º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,6023º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,9124º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,2425º 1.16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,5726º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,9227º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,2728º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,6329º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,9930º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38GRADOS ALCOHOLICOS16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 2710º 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,3111º 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,9012º 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,4913º 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,0714º 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,6615º 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,2316º 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,8017º 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,3618º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,9119º 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,4620º21º 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,4822º 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,9623º 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,4524º 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,9525º 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,4526º 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,9627º 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,4828º 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,0029º 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,541730º 3,40 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 20MASAS VOLUMICAS VINOS DE 131,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,1811º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,7812º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,4013º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,0014º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,6115º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,1916º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,7817º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,3618º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,9219º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,4820º21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,4722º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,9323º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,4324º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,9025º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,4026º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,8727º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,3528º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,8929º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,3730º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 20TemperaturasTemperaturasMASAS VOLUMICAS VINOS DE 151,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010º 2,51 2,85 3,20 3,54 3,86 4,02 4,4611º 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,0212º 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,6113º 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,1914º 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,7715º 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,3216º 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,8817º 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,4418º 0,60 0,66 0,73 0,80 0,86 0,91 0,9719º 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,5120º1821º 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,5022º 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,9823º 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,5124º 1,32 1,44 1.54 1,66 1,78 1,89 2,0025º 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,5226º 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,0127º 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,5228º 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,0729º 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,5930º 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16

MTABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 20MASAS VOLUMICAS VINOS DE 171,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010º 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,7411º 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,2812º 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,8413º 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,3914º 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,9415º 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,4716º 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,0017º 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,5218º 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,0319º 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,5320º21º 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,5322º 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,0423º 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,5924º 1,43 1,55 1,65 1,77 1,89 2,00 2,1125º 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,6626º 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,1727º 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,7128º 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,3029º 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,8230º 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 20TemperaturasTemperaturasMASAS VOLUMICAS VINOS DE 191,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,0711º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,5712º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,1013º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,6114º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,1315º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,6216º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,1317º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,6218º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,0919º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,5620º21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,5622º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,1023º 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,6824º 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,231925º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,7126º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,3527º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,9228º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,5329º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,0830º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 20TemperaturasMASAS VOLUMICAS VINOS DE 211,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010º 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,4111º 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,8812º 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,3713º 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,8514º 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,3315º 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,8016º 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,2617º 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,7118º 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,1519º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,5920º21º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,5922º 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,1723º 1,25 1,34 1,44 1,53 1,61 1,70 1,7824º 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,3625º 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,9726º 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,5427º 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,1328º 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,7729º 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,3630º 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,02TABLA 4(b). IIICálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/4Vinos secos (d 15 4 comprendida entre 0,97 y 1,03)Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 0,9 0,8 0,8 0,8 0,7 0,7 0,7Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 0,6 0,6 0,5 0,5 0,4 0,3 0,3Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 0,2 0,1 0,0 0,0 -0,1 -0,2 -0,3Vinos dulces20Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010 0,7 0,5 0,3 0,1 0,0 -0,2 -0,313 0,6 0,4 0,2 0,0 -0,1 -0,3 -0,4Grados15 0,5 0,2 0,0 -0,2 -0,3 -0,5 -0,617 0,4 0,1 -0,1 -0,3 -0,4 -0,6 -0,7Alcohólicos{19 0,2 -0,1 -0,3 -0,5 -0,6 -0,8 -0,921 0,0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,7 -0,9 -1,0

MTABLA 4(b). IVCálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/15Vinos secosGrados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 0,1 0,1 0,1 0,2 0,2 0,2 0,3Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 0,3 0,4 0,4 0,5 0,6 0,6 0,7Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 0,9 0,9 1,0 1,0 1,1 1,2 1,2Vinos dulcesDensidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010 0,2 0,4 0,5 0,7 0,8 1,0 1,113 0,3 0,5 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2Grados15 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1 1,3 1,417 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2 1,4 1,5Alcohólicos{19 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4 1,6 1,721 1,0 1,1 1,2 1,4 1,5 1,7 1,8TABLA 4(b). VCálculo de la masa volúmica a 20C ( r 20 ) a partir de la densidad 15/4Vinos secosGrados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 0,9 1,0 1,0 1,0 1,1 1,1 1,1Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 1,2 1,2 1,3 1,3 1,4 1,5 1,5Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 1,6 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1Vinos dulcesDensidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010 1,1 1,3 1,5 1,7 1,8 2,0 2,113 1,2 1,4 1,6 1,8 1,9 2,1 2,2Grados15 1,3 1,6 1,8 2,0 2,1 2,3 2,417 1,4 1,7 1,9 2,1 2,2 2,4 2,5Alcohólicos{19 1,6 1,9 2,1 2,3 2,4 2,6 2,721 1,8 2,0 2,2 2,4 2,5 2,7 2,821

TABLA 4(b). VICálculo de la masa volúmica a 20C ( r 20 ) a partir de la densidad 15/151515Vinos secos (d comprendida entre 0,97 y 1,03)Grados alcohólicos 5,11 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 1,81 1,9 1,9 1,9 2,0 2,0 2,0Grados alcohólicos 12,11 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 2,11 2,1 2,2 2,2 2,3 2,4 2,4Grados alcohólicos 19,11 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 2,65 2,6 2,7 2,7 2,8 2,9 3,0Vinos dulcesDensidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,12010 2,0 2,2 2,4 2,6 2,7 2,9 3,113 2,1 2,3 2,5 2,7 2,8 3,1 3,2Grados15 2,2 2,5 2,7 2,9 3,0 3,3 3,417 2,3 2,6 2,8 3,0 3,1 3,4 3,5Alcohólicos{19 2,5 2,8 3,0 3,2 3,3 3,6 3,721 2,7 2,9 3,1 3,3 3,4 3,7 3,8225(a). TITULO ALCOHOMETRICO (1)(Método picnométrico)5(a).1. Principio.El título alcohométrico es igual al número delitros de etanol contenidos en 100 l de vino, medidosambos volúmenes a 20C, y se expresa engrados alcohólicos volumétricos, con una precisiónde 0,1C.Se determina por destilación simple de líquidoalcalinizado y medida de la densidad del destiladopor picnometría.5(a).2. Material y aparatos.5(a).2.1. Aparato de destilación.- Consta delas siguientes partes:5(a).2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 mlcon rodaje esmerilado.5(a).2.1.2. Columna rectificadora de 20 cm delargo.5(a).2.1.3. Disco metálico o de amianto con unorificio de 8 cm de diámetro.5(a).2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm delongitud, con circulación rápida de agua y dispuestoverticalmente.5(a).2.2. Picnómetro.- Como en 4(a).2.1, devidrio pyrex.5(a).2.3. Tara del picnómetro.- Recipiente devidrio del mismo volumen exterior que el picnómetro.Se llena casi por completo con una solución de sodiocloruro, de densidad tal que la masa de esta tara seaigual a la masa del picnómetro lleno de un líquido dedensidad 1,01. Este recipiente cierra a la llama. Sucapacidad exterior debe ser igual a la del picnómetrolleno, con una aproximación de 1 ml de diferencia.5(a).2.4. Termostato y accesorios, descritos en4(a).2.5(a).2.5. Balanza analítica de 0,1 mg y 100 gde carga.5(a).3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural,escoriforme QP131325 Fenolftaleína PA-ACS211835 Piedra Pómez gránulos QP5(a).3.1. Lechada de cal. Solución de 120 gde Calcio Oxido natural escoriforme QP en 1.000 mlde Agua PA-ACS.(1).- Denominación adoptada para el grado alcohólico por la Oficina Internacional del Vino (O.I.V.).

M5(a).4. Procedimiento.Para vinos jóvenes o espumosos, eliminarpreviamente el gas carbónico. Agitar 250 ml de vinoen un matraz de 500 ml previamente siliconado elinterior del matraz por tres gotas de solución al 1%,de silicona soluble en agua, y después de bien seco,añadir el vino.5(a).4.1. Destilación.- Medir 250 ml de vino en unmatraz aforado con cuello de 12 mm de diámetrointerior como máximo, y anotar la temperatura.Introducir el vino en un matraz de destilación quecontenga una docena de fragmentos de materiaporosa Piedra Pómez gránulos QP. Lavar el matrazcuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Añadir10 ml de la Lechada de cal. La materia colorante delvino debe virar a la alcalinidad. En el caso de vinosmuy ácidos, puede comprobarse por toques externosel viraje de la Fenolftaleína PA-ACS. Recoger eldestilado en el mismo matraz de 250 ml, conteniendounos 10 ml de Agua PA-ACS, en la que debe sumergirseel pico del tubo afilado, prolongación del refrigerante.Destilar por lo menos 200 ml. Después agitar yllenar hasta volumen con Agua PA-ACS, a la mismatemperatura que se midió el vino inicialmente.5(a).4.2. Tarado del picnómetro vacío.- Poner enun platillo de la balanza la tara y en el otro el picnómetrovacío, limpio y seco, y a su lado, las masas necesariasp, para entre ambos equlibrar la balanza.La masa equivalente a la de la tara será:Masa del picnómetro + m + pm = 0,0012 V.m = masa en g del aire contenido en el picnómetrovacío.V = volumen en ml del picnómetro.0,0012 g/ml = masa volúmica del aire.El volumen del picnómetro se considera, con suficienteaproximación, que es numéricamente igual a lamasa de Agua PA-ACS que llene el picnómetro.Para calcular esta masa, colocar el picnómetrolleno de Agua PA-ACS en el platillo de la balanza, si p’es la masa que hay que colocar a su lado para equilibrarla de la tara, la masa m será:m = (p - p’) . 0,0012Operar siempre a 20 exactamente para realizar elenrase, utilizando el termostato. Si se opera a t, paraconocer el volumen del picnómetro a 20, hay quemultiplicar (p - p’) por un factor F, que da la tabla 5 (a). Ipara picnómetro del vidrio pyrex.Repetir estas operaciones de tara tres vecesseguidas. Al cabo de un año, volver a comprobar latara del picnómetro.Con balanza monoplato, proceder análogamente.Primero poner la tara, hacer la lectura correspondienteen la escala de pesos y después poner el picnómetrovacío. Anotar los pesos p que hay que añadirhasta marcar la pesada que alcanzó la tara.Tara = picnómetro + aire + p5(a).4.3. Determinación picnométrica.- Llenar elpicnómetro lavado y seco con las precaucionesexpuestas en 4(a). 3 con el destilado alcohólico a latemperatura ambiente, llevar después al termostato,agitar el líquido haciendo girar el picnómetro pordos o tres veces, hasta que la temperatura quemarca el termómetro del picnómetro sea constante.Enrasar con el borde superior del tubo lateral, secaréste, colocarlo sobre el tapón receptor (para pequeñosrebordes) y anotar la temperatura tº utilizandouna lupa. Secar con el mismo cuidado el exteriordel picnómetro y llevarlo al platillo de la balanza.Equilibrar la tara del picnómetro colocada en el otroplatillo.5(a).5. Cálculo.Calcular el título alcohométrico expresado en gradosalcohólicos volumétricos.5(a).5.1. Cálculo de la masa volúmica aparente.p + m - p’r t = ——————————————volumen del picnómetro a 20ºr t = masa volúmica aparente.m = masa del aire contenido en el picnómetrovacío.p = diferencia de masa entre la tara y el picnómetrolleno con destilado alcohólico.5(a).5.2. Cálculo de grado alcohométrico.Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V. a20C utilizando la tabla 5(a). I de masa volúmicas a tcorregidas del empuje del aire.Buscar sobre la línea horizontal correspondiente ala cifra de la parte entera de la temperatura, t, la cifrade la masa volumen inmediatamente superior a rt. Elgrado alcohólico que encabeza la columna donde seencuentra esta cifra será la parte entera del gradoalcohólico a 20C.Determinar la masa volúmica r correspondiente ala parte entera de la temperatura, t, utilizando la diferenciatabular que se lee por debajo de la masavolúmica inmediatamente superior a r t antes encontrada,y la cifra decimal t, r = r t + (diferencia tabular xparte decimal de t) 10 -5 .Hallar la parte decimal del grado alcohólico a 20,buscando en las tablas sobre la línea horizontal quecomienza con la cifra de los enteros de la temperatura,t, la masa volúmica r‘ que sea inmediatamentesuperior a r, y dividiendo la diferencia r‘ - r por ladiferencia tabular que está a la derecha de la cifra dela masa volúmica r‘.5(a).6. Referencias.5(a).6.1 Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. A2,1-25. 1969.5(a).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de correspondanceentre les diverses tables alcoométriques”.Société Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141. 1966.23

24TABLA 5 (a). IMasas volúmicas aparentes de mezclas hidroalcohólicas (picnómetro Pyrex)GRADOS ALCOHOLICOS0 1 2 3 4 5 6Temperaturas10º 999 61 1 50 998 11 1 46 996 65 1 43 995 22 1 39 993 83 1 34 992 49 1 30 991 19 1 259 8 8 9 9 10 911º 999 52 1 49 998 03 1 46 996 57 1 44 995 13 1 39 993 74 1 35 992 39 1 29 991 10 1 2610 10 10 10 10 10 112º 999 42 1 49 997 93 1 46 996 47 1 44 995 03 1 39 993 64 1 35 992 29 1 30 990 99 1 2611 11 11 11 11 11 1213º 999 31 1 49 997 82 1 46 996 36 1 44 994 92 1 39 993 53 1 35 992 18 1 31 990 87 1 2612 12 13 12 13 13 1314º 999 19 1 49 997 70 1 47 996 23 1 43 994 80 1 40 993 40 1 35 992 05 1 31 990 74 1 2614 14 13 14 14 14 1415º 999 05 1 49 997 56 1 46 996 10 1 44 994 66 1 40 993 26 1 35 991 91 1 31 990 60 1 2714 14 15 14 14 15 1616º 998 91 1 49 997 42 1 47 995 95 1 43 994 52 1 40 993 12 1 36 991 76 1 32 990 44 1 2716 16 15 16 16 16 1617º 998 75 1 49 997 26 1 46 995 80 1 44 994 36 1 40 992 96 1 36 991 60 1 32 990 28 1 2817 17 17 17 18 18 1818º 998 58 1 49 997 09 1 46 995 63 1 44 994 19 1 41 992 78 1 36 991 42 1 32 990 10 1 2818 18 18 18 18 19 1919º 998 40 1 49 996 91 1 46 995 45 1 44 994 01 1 41 992 60 1 37 991 23 1 32 989 91 1 2919 19 20 20 19 19 2020º 998 21 1 49 996 72 1 47 995 25 1 44 993 81 1 40 992 41 1 37 991 04 1 33 989 71 1 2920 20 20 20 21 21 2121º 998 01 1 49 996 52 1 47 995 05 1 44 993 61 1 41 992 20 1 37 990 83 1 33 989 50 1 3021 21 21 21 21 22 2222º 997 80 1 49 996 31 1 47 994 84 1 44 993 40 1 41 991 99 1 38 990 61 1 33 989 28 1 3022 22 22 23 23 23 2323º 997 58 1 49 996 09 1 47 994 62 1 45 993 17 1 41 991 76 1 38 990 38 1 33 989 05 1 3124 24 24 23 24 24 2524º 997 34 1 49 995 85 1 47 994 38 1 44 992 94 1 42 991 52 1 38 990 14 1 34 988 80 1 3124 24 24 25 25 25 2525º 997 10 1 49 995 61 1 47 994 14 1 45 992 69 1 42 991 27 1 38 989 89 1 34 988 55 1 3125 25 25 25 25 26 2626º 996 85 1 49 995 36 1 47 993 89 1 45 992 44 1 42 991 02 1 39 989 63 1 34 988 29 1 3226 26 27 27 27 27 2827º 996 59 1 49 995 10 1 48 993 62 1 45 992 17 1 42 990 75 1 39 989 36 1 35 988 01 1 3227 28 27 27 28 28 2828º 966 32 1 50 994 82 1 47 993 35 1 45 991 90 1 43 990 47 1 39 989 08 1 35 987 73 1 3328 28 28 29 28 28 2929º 996 04 1 50 994 54 1 47 993 07 1 46 991 61 1 42 990 19 1 39 988 80 1 36 987 44 1 3329 29 29 29 30 30 3030º 995 75 1 50 994 25 1 47 992 78 1 46 991 32 1 43 989 89 1 39 988 50 1 36 987 14 1 34

MTABLA 5 (a). I(Continuación)GRADOS ALCOHOLICOS7 8 9 10 11 12Temperaturas10º 989 94 1 19 988 75 1 16 987 59 1 13 986 46 1 11 985 35 1 08 984 27 1 0410 11 11 12 13 1411º 989 84 1 20 988 64 1 16 987 48 1 14 986 34 1 12 985 22 1 08 984 13 1 0511 12 12 13 15 1512º 989 73 1 21 988 52 1 16 987 36 1 15 986 21 1 14 985 07 1 09 983 98 1 0712 12 14 15 15 1713º 989 61 1 21 988 40 1 18 987 22 1 16 986 06 1 14 984 92 1 11 983 81 1 0713 14 15 15 16 1714º 989 48 1 22 988 26 1 19 987 07 1 16 985 91 1 15 984 76 1 12 983 64 1 0915 16 16 17 18 1915º 989 33 1 23 988 10 1 19 986 91 1 17 985 74 1 16 984 58 1 13 983 45 1 1016 16 17 18 19 2016º 989 17 1 23 987 94 1 20 986 74 1 18 985 56 1 17 984 39 1 14 983 25 1 1117 18 18 19 20 2117º 989 00 1 24 987 76 1 20 986 56 1 19 985 37 1 18 984 19 1 15 983 04 1 1218 18 19 20 21 2218º 988 82 1 24 987 58 1 21 986 37 1 20 985 17 1 19 983 98 1 16 982 82 1 1320 20 21 21 22 2319º 988 62 1 24 987 38 1 22 986 16 1 20 984 96 1 20 983 76 1 17 982 59 1 1420 21 22 23 23 3420º 988 42 1 25 987 17 1 23 985 94 1 21 984 73 1 20 983 53 1 18 982 35 1 1622 22 22 23 24 2521º 988 20 1 25 986 95 1 23 985 72 1 22 984 50 1 21 983 29 1 19 982 10 1 1722 23 24 24 26 2722º 987 98 1 26 986 72 1 24 985 48 1 22 984 26 1 23 983 03 1 20 981 23 1 1724 25 25 16 26 2723º 987 74 1 27 986 47 1 24 985 23 1 23 984 00 1 23 982 77 1 21 981 56 1 1825 25 26 27 27 2824º 987 49 1 27 986 22 1 25 984 97 1 24 983 73 1 23 982 50 1 22 981 28 1 2025 26 27 27 29 3025º 987 24 1 28 985 96 1 26 984 70 1 24 983 46 1 25 982 21 1 23 980 98 1 2027 27 27 29 29 3026º 986 97 1 28 985 69 1 26 984 43 1 26 983 15 1 25 981 92 1 24 980 68 1 2128 29 29 29 31 3127º 986 96 1 29 985 40 1 26 984 14 1 26 982 88 1 27 981 61 1 24 980 37 1 2329 29 30 31 31 3328º 986 40 1 29 985 11 1 27 983 84 1 27 982 57 1 27 981 30 1 26 980 04 1 2329 30 31 31 32 3329º 986 11 1 30 984 81 1 28 983 53 1 27 982 26 1 28 980 98 1 27 979 71 1 2431 31 31 32 33 3430º 985 80 1 30 984 50 1 28 983 22 1 28 981 94 1 29 980 65 1 28 979 37 1 2525

26TABLA 5 (a). I(Continuación)GRADOS ALCOHOLICOS13 14 15 16 17 18Temperaturas10º 983 23 1 02 982 21 99 981 22 98 980 24 94 979 30 94 978 36 9115 16 18 19 21 2211º 983 08 1 03 982 05 1 01 981 04 99 980 05 96 979 09 95 978 14 9317 18 19 20 22 2312º 982 91 1 04 981 87 1 02 980 85 1 00 979 85 98 978 87 96 977 91 9517 19 20 22 23 2513º 982 74 1 06 981 68 1 03 980 65 1 02 979 63 99 978 64 98 977 66 9619 19 21 22 24 2514º 982 55 1 06 981 49 1 05 980 44 1 03 979 41 1 01 978 40 99 977 41 9720 22 22 24 25 2615º 982 35 1 08 981 27 1 05 980 22 1 05 979 17 1 02 978 15 1 00 977 15 9721 22 24 24 26 2816º 982 14 1 09 981 05 1 07 979 98 1 05 978 93 1 04 977 89 1 02 976 87 1 0022 23 24 26 27 2817º 981 92 1 10 980 82 1 08 979 74 1 07 978 67 1 05 977 62 1 03 976 59 1 0223 24 26 27 28 3018º 981 69 1 11 980 58 1 10 979 48 1 08 978 40 1 06 977 34 1 05 976 29 1 0324 25 26 28 29 3019º 981 45 1 12 980 33 1 11 979 22 1 10 978 12 1 07 977 05 1 06 975 99 1 0526 27 28 28 30 3220º 981 19 1 13 980 06 1 12 978 94 1 10 977 84 1 09 976 75 1 08 975 67 1 0626 27 28 30 31 3221º 980 93 1 14 979 79 1 13 978 66 1 12 977 54 1 10 976 44 1 09 975 35 1 0827 29 30 31 32 3322º 980 66 1 16 979 50 1 14 978 36 1 13 977 23 1 11 976 12 1 10 975 02 1 0928 29 30 31 33 3323º 980 38 1 17 979 21 1 15 978 06 1 14 976 92 1 13 975 79 1 11 974 68 1 1130 30 32 33 34 3624º 980 08 1 17 978 91 1 17 977 74 1 15 976 59 1 14 975 45 1 13 974 32 1 1130 32 32 34 34 3625º 979 78 1 19 978 59 1 17 977 42 1 17 976 25 1 14 975 11 1 15 973 96 1 1331 32 34 34 36 3726º 979 47 1 20 978 27 1 19 977 08 1 17 975 91 1 16 974 75 1 16 973 59 1 1433 33 34 36 37 3827º 979 14 1 20 977 94 1 20 976 74 1 19 975 55 1 17 974 38 1 17 973 21 1 1533 35 35 36 37 3828º 978 81 1 22 977 59 1 20 976 39 1 20 975 19 1 18 974 01 1 18 972 83 1 1734 35 36 37 39 4029º 978 47 1 23 977 24 1 21 976 03 1 21 974 82 1 20 973 62 1 19 972 43 1 1835 36 37 38 39 4030º 978 12 1 24 976 88 1 22 975 66 1 22 974 44 1 21 973 23 1 20 972 03 1 20

MTABLA 5 (a). I(Continuación)GRADOS ALCOHOLICOS19 20 21 22 23 24Temperaturas10º 977 45 89 976 56 90 975 66 91 974 75 91 973 84 94 972 90 9424 25 27 29 32 3211º 977 21 90 976 31 92 975 39 93 974 46 94 973 52 94 972 58 9725 27 28 30 31 3412º 976 96 92 976 04 93 975 11 95 974 16 95 973 21 97 972 24 9826 27 30 31 33 3513º 976 70 93 975 77 96 974 81 96 973 85 97 972 88 99 971 89 1 0026 29 30 32 34 3514º 976 44 96 975 48 97 974 50 98 973 53 99 972 54 1 00 971 54 1 0228 29 31 33 35 3715º 976 16 97 975 19 99 974 20 1 00 973 20 1 01 972 19 1 02 971 17 1 0429 31 32 33 35 3716º 975 87 99 974 88 1 00 973 88 1 01 972 87 1 03 971 84 1 04 970 80 1 0630 31 33 35 36 3817º 975 57 1 00 974 57 1 02 973 55 1 03 972 52 1 04 971 48 1 06 970 42 1 0831 32 34 36 38 4018º 975 26 1 01 974 25 1 04 973 21 1 05 972 16 1 06 971 10 1 08 970 02 1 0932 34 35 36 38 3919º 974 94 1 03 973 91 1 05 972 86 1 06 971 80 1 08 970 72 1 09 969 623 1 1133 34 36 38 39 4120º 974 61 1 04 973 57 1 07 972 50 1 08 971 42 1 09 970 33 1 11 969 22 1 1334 35 36 38 40 4121º 974 27 1 05 973 22 1 08 972 14 1 10 971 04 1 11 969 93 1 12 968 81 1 1534 36 38 39 41 4322º 973 93 1 07 972 86 1 10 971 76 1 11 970 65 1 13 969 52 1 14 968 38 1 1636 37 38 40 41 4323º 973 57 1 08 972 49 1 11 971 38 1 13 970 25 1 14 969 11 1 16 967 95 1 1736 38 40 41 42 4424º 973 21 1 10 972 11 1 13 970 98 1 14 969 84 1 15 968 69 1 18 967 51 1 1938 39 40 41 44 4525º 972 83 1 11 971 72 1 14 970 58 1 15 969 43 1 18 968 25 1 19 967 06 1 2038 40 41 43 44 4526º 972 45 1 13 971 32 1 15 970 17 1 17 969 00 1 19 967 81 1 20 966 61 1 2239 40 42 43 44 4627º 972 06 1 14 970 92 1 17 969 75 1 18 968 57 1 20 967 37 1 22 966 15 1 2440 41 42 44 46 4728º 971 66 1 15 970 51 1 18 969 33 1 20 968 13 1 22 966 91 1 23 965 68 1 2541 43 44 45 46 4829º 971 25 1 17 970 08 1 19 968 89 1 21 967 68 1 23 966 45 1 25 965 20 1 2642 42 44 45 47 4830º 970 83 1 17 969 66 1 21 968 45 1 23 967 22 1 24 965 98 1 26 964 72 1 2827

28TABLA 5 (a). I(Continuación)GRADOS ALCOHOLICOS25 26 27 28 29 30Temperaturas10º 971 96 94 971 02 97 970 05 99 969 06 1 01 968 05 1 03 967 02 1 0835 37 39 41 43 4511º 971 61 96 970 65 99 969 66 1 01 968 65 1 03 967 62 1 05 966 57 1 0935 38 40 42 44 4612º 971 26 99 970 27 1 01 969 26 1 03 968 23 1 05 967 18 1 07 966 11 1 1237 38 40 42 44 4613º 970 89 1 00 969 89 1 03 968 86 1 05 967 81 1 07 966 74 1 09 965 65 1 1437 40 42 44 46 4714º 970 52 1 03 969 49 1 05 968 44 1 07 967 37 1 09 966 28 1 10 965 18 1 1639 40 42 44 46 4815º 970 13 1 04 969 09 1 07 968 02 1 09 966 93 1 11 965 82 1 12 964 70 1 1739 41 43 44 46 4816º 969 74 1 06 968 68 1 09 967 59 1 10 966 49 1 13 965 36 1 14 964 22 1 2040 42 43 46 47 4917º 969 34 1 08 968 26 1 10 967 16 1 13 966 03 1 14 964 89 1 16 963 73 1 2041 42 45 46 48 5018º 968 93 1 09 967 84 1 13 966 71 1 14 965 57 1 16 964 41 1 18 963 23 1 2341 44 45 47 49 5019º 968 52 1 12 967 40 1 14 966 26 1 16 965 10 1 18 965 92 1 19 962 73 1 2543 44 46 48 49 5120º 968 09 1 13 966 96 1 16 965 80 1 18 964 62 1 19 963 43 1 21 962 22 1 2643 45 46 48 50 5221º 967 66 1 15 966 51 1 17 965 34 1 20 964 14 1 21 962 93 1 23 961 70 1 2744 45 47 49 50 5222º 967 22 1 16 966 06 1 19 964 87 1 22 963 65 1 22 962 43 1 25 961 18 1 2944 47 48 49 52 5323º 966 78 1 19 965 59 1 20 964 39 1 23 963 16 1 25 961 91 1 26 960 65 1 3146 47 49 51 52 5324º 966 32 1 20 965 12 1 22 963 90 1 25 962 65 1 26 961 39 1 27 960 12 1 3246 48 50 51 52 5525º 965 86 1 22 964 64 1 24 963 40 1 26 962 14 1 27 960 87 1 30 959 57 1 3347 48 50 51 53 5426º 965 39 1 23 964 16 1 26 962 90 1 27 961 63 1 29 960 34 1 31 959 03 1 3648 49 50 52 54 5527º 964 91 1 24 963 67 1 27 962 40 1 29 961 11 1 31 959 80 1 32 959 58 1 3648 50 52 53 54 5628º 964 43 1 26 963 17 1 29 961 88 1 30 960 58 1 32 959 26 1 34 957 92 1 3849 51 52 54 55 5729º 963 94 1 28 962 66 1 30 961 36 1 32 960 04 1 33 958 71 1 36 957 35 1 4050 51 53 54 56 5730º 963 44 1 29 962 15 1 32 960 83 1 33 959 50 1 35 958 15 1 37 956 78 1 40

M5(b). TITULO ALCOHOMETRICO(Método areométrico)5(b). 1.Principio.Como en 5(a).1.5(b).2. Material y aparatos.5(b).2.1. Aparatos de destilación.- Como en5(a).2.1.5(b).2.2. Aparatos de areometría.5(b).2.2.1. Alcohómetro.5(b).2.2.2. Termómetro.5(b).2.2.3. Probeta.5(b).3. Reactivos.Como en 5(a).3.5(b).4. Procedimiento.Las generalidades como en 5(a).4.5(b).4.1. Destilación.- Como en 5(a).4.1.5(b).4.2. Determinación areométrica.- Comoen 4(b).3, teniendo en cuenta que se utiliza destiladoen vez de vino, y que el tallo del areómetroviene graduado en grados alcohólicos aparentes.Hacer al menos tres lecturas del grado alcohólicoaparente, sirviéndose si es preciso de una lupa.5(b).5. Cálculo.Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V.a 20C, utilizando la tabla 5(b).I, añadiendo o restandoal grado alcohólico aparente a t la correccióncorrespondiente.5(b).6. Referencias.5(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. A2, 1-25. 1969.5(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables decorrespondance entre les diverses tables alcoométriques”.Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,111, 141, 1966.TABLA 5 (b). ICorrecciones a efectuar sobre el grado alcohólico aparentepara corregir la acción de la temperaturaTemperaturasGrados alcohólicos aparentes0 1 2 3 4 5 6 7 810º 0,84 0,87 0,88 0,92 0,96 1,01 1,08 1,16 1,2411º 0,80 0,81 0,83 0,86 0,90 0,96 1,01 1,08 1,1612º 0,74 0,76 0,78 0,80 0,84 0,88 0,94 1,00 1,0713º 0,67 0,69 0,70 0,73 0,76 0,80 0,85 0,90 0,9514º 0,60 0,61 0,62 0,65 0,68 0,71 0,75 0,79 0,85R E S T A R S U M A R15º 0,51 0,52 0,54 0,56 0,58 0,61 0,64 0,68 0,7216º 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,53 0,55 0,5817º 0,32 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,4618º 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,30 0,3119º 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,14 0,15 0,1620º - - - - - - - - -21º - 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,1622º - 0,26 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,32 0,3423º - 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,5124º - 0,56 0,57 0,58 0,59 0,61 0,64 0,67 0,7025º - 0,71 0,72 0,73 0,75 0,78 0,81 0,84 0,8926º - 0,86 0,88 0,91 0,93 0,96 1,00 1,04 1,0927º - - 1,05 1,08 1,10 1,14 1,18 1,23 1,2828º - - 1,22 1,25 1,28 1,33 1,38 1,44 1,5029º - - 1,40 1,44 1,48 1,52 1,58 1,64 1,712930º - - 1,59 1,62 1,66 1,71 1,77 1,85 1,93

TABLA 5 (b). I (continuación)Grados alcohólicos aparentes9 10 11 12 13 14 15 16 1710º 1,34 1,44 1,58 1,73 1,89 2,06 2,24 2,43 2,63R E S T A R S U M A R11º 1,25 1,34 1,46 1,59 1,73 1,88 2,04 2,21 2,3812º 1,15 1,23 1,32 1,43 1,55 1,68 1,82 1,97 2,1313º 1,02 1,10 1,18 1,28 1,38 1,48 1,60 1,72 1,8514º 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,39 1,49 1,5915º 0,77 0,82 0,87 0,94 1,01 1,09 1,17 1,26 1,3416º 0,62 0,66 0,71 0,76 0,82 0,88 0,94 1,01 1,0817º 0,48 0,51 0,55 0,58 0,63 0,67 0,71 0,76 0,8118º 0,33 0,34 0,36 0,39 0,42 0,45 0,47 0,50 0,5319º 0,16 0,17 0,18 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,2820º - - - - - - - - -21º 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,2822º 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,51 0,5423º 0,54 0,56 0,60 0,63 0,67 0,71 0,74 0,78 0,8224º 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04 1,0925º 0,93 0,98 1,02 1,07 1,12 1,18 1,24 1,32 1,3826º 1,14 1,19 1,24 1,30 1,36 1,43 1,51 1,57 1,6527º 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,85 1,9328º 1,56 1,62 1,68 1,75 1,83 1,92 2,02 2,11 2,2129º 1,78 1,85 1,92 2,00 2,08 2,17 2,28 2,39 2,5030º 2,00 2,07 2,15 2,23 2,33 2,45 2,55 2,67 2,79TABLA 5 (b). I (continuación)TemperaturasTemperaturasGrados alcohólicos aparentes18 19 20 21 22 23 24 25 2610º 2,84 3,01 3,15 3,29 3,44 3,58 3,70 3,82 3,930R E S T A R S U M A R11º 2,56 2,71 2,84 2,95 3,08 3,21 3,32 3,42 3,5212º 2,27 2,40 2,51 2,63 2,73 2,84 2,93 3,02 3,1013º 1,99 2,11 2,20 2,29 2,38 2,47 2,57 2,64 2,7114º 1,71 1,81 1,89 1,96 2,03 2,11 2,19 2,25 2,3015º 1,44 1,51 1,58 1,64 1,71 1,77 1,82 1,87 1,9116º 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36 1,40 1,45 1,49 1,5317º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,12 1,1518º 0,56 0,60 0,63 0,65 0,68 0,70 0,72 0,75 0,7619º 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,3720º - - - - - - - - -21º 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,3822º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,71 0,73 0,7423º 0,86 0,90 0,94 0,98 1,00 1,03 1,06 1,08 1,1124º 1,14 1,21 1,27 1,31 1,35 1,38 1,42 1,46 1,5025º 1,44 1,51 1,60 1,65 1,69 1,72 1,76 1,81 1,8626º 1,73 1,82 1,90 1,97 2,02 2,06 2,12 2,18 2,2327º 2,02 2,12 2,22 2,30 2,36 2,42 2,47 2,53 2,5928º 2,31 2,43 2,54 2,63 2,70 2,76 2,83 2,90 2,9629º 2,62 2,73 2,85 2,96 3,05 3,11 3,18 3,25 3,3230º 2,91 3,04 3,16 3,28 3,38 3,38 3,46 3,54 3,61

MTABLA 5 (b). I (continuación)TemperaturasGrados alcohólicos aparentes27 28 29 3010º 4,04 4,14 4,24 4,4311º 3,61 3,69 3,78 3,8612º 3,18 3,25 3,32 3,3913º 2,78 2,84 2,89 2,9414º 2,36 2,42 2,47 2,52R E S T A R S U M A R15º 1,96 2,01 2,05 2,0916º 1,56 1,59 1,62 1,6417º 1,17 1,19 1,21 1,2318º 0,77 0,79 0,81 0,8219º 0,38 0,40 0,41 0,4220º - - - -21º 0,38 0,39 0,39 0,4022º 0,76 0,78 0,79 0,8123º 1,14 1,16 1,19 1,2124º 1,53 1,56 1,58 1,6025º 1,90 1,94 1,97 2,0026º 2,28 2,31 2,35 2,3927º 2,64 2,70 2,74 2,7828º 3,02 3,07 3,12 3,1629º 3,39 3,45 3,51 3,5630º 3,76 3,83 3,89 3,956. EXTRACTO SECO TOTAL6.1. Principio.El extracto seco total o materias secas totaleses el conjunto de todas las sustancias que, encondiciones físicas determinadas, no se volatilizan.Estas condiciones físicas deben fijarse de talmanera que las sustancias componentes de esteextracto sufran el mínimo de alteración.El extracto seco total se calcula indirectamenteconociendo la densidad del “residuo sin alcohol”,que es el vino cuyo alcohol ha sido evaporadoy después se ha restablecido el volumen primitivopor adición de agua.6.2. Procedimiento.Llevar el residuo de la destilación del alcohol delvino (sin previa neutralización) al matraz en dondese midió el vino. Lavar el matraz en donde se destilóel vino con varias porciones de agua, y llenarcon estas aguas hasta volumen, el matraz con elresiduo de la destilación, a la misma temperatura ala que se enrasó el vino. Mezclar bien, verter en unaprobeta y determinar la densidad como en 4(a).6.3. Cálculo.Calcular el extracto seco expresado en g/l apartir de la densidad del residuo sin alcohol utilizandola tabla 6.I.6.3.1. Determinar la densidad del residuo sinalcohol como en 6.2.6.3.2. Calcular la densidad 20/20 del residuosin alcohol según la fórmula de Tabarié:d r = dv - da +1dr = densidad 20/20 del residuo sin alcohol.dv = densidad del vino a 20.da = densidad a 20 de la mezcla hidroalcohólicadel mismo grado que el vino.6.3.3. Calcular la densidad del residuo sinalcohol a partir de las masas volúmicas.d r = 1,0018 (r v - r a ) + 1r v = masa volúmica del vino a 20º.r a = masa volúmica a 20 de la mezcla hidroalcohólicadel mismo grado que el vino.Para valores de r v menores a 1,05 puedetomarse 1 en vez de 1,0018.31

6.4. Observaciones.El extracto seco se expresa por la cantidad desacarosa que, disuelta en agua hasta 1 l, da unasolución de la misma densidad que el residuo sinalcohol. En la tabla 6. I se encuentra la equivalenciade esta densidad, en extracto, expresada ensacarosa.6.5. Referencia.6.5.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’ Analyse des Vins. O.I.V. A3, 1-6. 1969.TABLA 6. IContenido en extracto seco (g/l)Densidadcon dosdecimalesTercer decimal de la densidad0 1 2 3 4 5Gramos de extracto por litro1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,91,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,81,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,71,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,71,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,81,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,91,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,01,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,21,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,51,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,81,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,21,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,61,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,11,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,71,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,31,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,91,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,71,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,51,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,41,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,31,20 527,8 - - - - -32

MTABLA 6. I(Continuación)Densidadcon dosdecimalesTercer decimal de la densidad6 7 8 9Gramos de extracto por litro1,00 15,4 18,0 20,6 23,21,01 41,3 43,9 46,5 49,11,02 67,3 69,9 72,5 75,11,03 93,3 95,9 98,5 101,11,04 119,4 122,0 124,6 127,21,05 145,5 148,1 150,7 153,31,06 171,6 174,3 176,9 179,51,07 197,8 200,5 203,1 205,81,08 224,1 226,8 229,4 232,01,09 250,4 253,1 255,7 258,41,10 276,8 279,5 282,1 284,81,11 303,3 305,9 308,6 311,21,12 329,8 332,4 335,1 337,81,13 356,3 359,0 361,6 364,31,14 382,9 385,6 388,3 390,91,15 409,6 412,3 415,0 417,61,16 436,4 439,0 441,7 444,41,17 463,2 465,9 468,6 471,31,18 490,1 492,8 495,5 498,21,19 517,0 519,7 522,4 525,11,20 - - - -TABLA INTERCALAR4º decimalde la densidadExtracto g/l1 0,32 0,53 0,84 1,05 1,36 1,67 1,88 2,19 2,333

347 (a). AZUCARES REDUCTORES(Defecación plúmbica)(Provisional)7(a).1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reductorasdistintas de los azúcares por defecación conplomo acetato neutro, y valoración basada en laacción reductora sobre solución cupro-alcalina.Aplicable a vinos blancos y tintos de color no muyintenso.7(a).2. Material y aparatos.7(a).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerantede reflujo.7(a).2.2. Filtro de vidrio G 3 con capa fina deamianto de fibra fina y lavado con agua hirviendo.7(a).2.3. Kitasatos de 500 ml con frasco deseguridad intermedio.7(a).3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121212 Calcio Carbonato precipitado PA131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS121793 Hierro II Sulfato 2-hidrato PA121360 Hierro III Sulfato x-hidrato PA131466 Plomo II Acetato 3-hidratoPA-ACS-ISO181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l(0,1N) SV(o preparar con 131527 Potasio PermanganatoPA-ACS-ISO)131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidratoPA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS7(a).3.1. Solución de Plomo II Acetato (aproximadamentesaturada). Añadir a 250 g de Plomo IIAcetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACScaliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución completa.7(a). 3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV7(a).3.3. Calcio Carbonato precipitado PA7(a).3.4. Solución Cúprica A. Mezclar 40 g deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO con 2 mlde Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir AguaPA-ACS hasta 1 l.7(a).3.5. Solución Tartrato-Alcalina B. Mezclar200 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO con 150 g de Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta 1 l.7(a).3.6. Solución de Hierro III C. Mezclar 50 gde Hierro III Sulfato x-hidrato PA con 20 g deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. Comprobar esta soluciónponiendo en un vaso de vidrio 30 ml de soluciónC, 100 ml de Agua PA-ACS y una gota de HierroII-1, 10 Fenantrolina. La coloración amarillo-verdosade esta mezcla debe virar a verde puro conuna sola gota de Potasio Permanganato 0,02mol/l (0,1N) SV. En caso contrario, añadir PotasioPermanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV a la soluciónhasta conseguir el viraje descrito. Generalmentees necesario añadir 1-3 ml de Potasio Permanganato0,02 mol/l (0,1N) SV por l de solución C.7(a).3.7. Solución de Hierro II-1,10 Fenantrolina.Mezclar 0,695 g de Hierro II Sulfato 2-hidratoPA , 100 ml de Agua PA-ACS y 1,485 g de1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS.7(a).3.8. Potasio Permanganato 0,02 mol/l(0,1N) SV. En su defecto preparar disolviendo 3,16 gde Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en AguaPA-ACS hasta 1 l. Comprobar esta solución porvaloración con una solución de di-Sodio OxalatoPA-ACS7(a).4. Procedimiento.7(a).4.1. Vinos secos.- Llevar 100 ml de vino aun matraz aforado de 125 ml, añadir (V-0,5) ml deSodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volumende solución N/10 utilizada para valorar laacidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Añadiragitando 5 ml de solución saturada de PlomoII Acetato y 1g de Calcio Carbonato precipitadoPA, agitar varias veces y dejar sedimentar por lomenos 15 minutos, enrasar con Agua PA-ACS,añadir 0,6 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.7(a).4.2. Vinos dulces.- En un matraz aforadode 100 ml colocar un volumen de vino variablesegún su riqueza en azúcar. Para vinos dulces conmasa volúmica comprendida entre 1,005 y 1,038,tomar 20 ml de líquido a analizar, diluido al 20%.Para vinos abocados con masa volúmica entre0,997 y 1,006, tomar 20 ml de vino no diluido.Añadir 0,5 g. de Calcio Carbonato precipitadoPA, unos 60 ml de Agua PA-ACS y cantidad (0,5-2,0 ml) de solución saturada de Plomo II Acetatohasta el límite del enturbiamiento, agitar y dejarreposar durante 15 minutos por lo menos, agitandode cuando en cuando. Enrasar, añadir0,2 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.Un ml del filtrado corresponde a 0,04 ml devino dulce y 0,20 ml de vino abocado.En el Erlenmeyer de 300 ml, poner 20 ml desolución Cúprica A, 20 ml de solución Tartrato-Alcalina B, 20 ml de solución azucarada conteniendode 10 a 100 mg de azúcar reductor. Hacerhervir con reflujo (o con la boca del matraz tapadacon un pequeño embudo) durante 3 minutos,enfriar inmediatamente bajo una corriente deAgua PA-ACS hasta refrigeración completa, dejarposar el Cobre I Oxido (inclinando el Erlenmeyeren un cristalizador con algodón y descansando el

Mcuello en el borde), filtrar después por el filtro G 3con la capa de amianto, ayudando la filtración conla trompa de vacío. Tener la precaución de que, enlo posible, haya una capa de líquido sobre el precipitadoadherido al fondo, tanto en el filtro comoen el Erlenmeyer, para evitar que se oxide. Lavarel precipitado del Erlenmeyer con Agua PA-ACShirviendo y verter en el filtro, repitiendo tres vecesla operación, agitar cada vez con precacución deoperar rápidamente para no dejar al descubiertoel precipitado de Cobre I Oxido. Cambiar el Kitasatoy proceder a la disolución del Cobre I Oxido,añadiendo primero al Erlenmeyer unos 10 ml desolución C de Hierro III Sulfato, que disuelve rápidamenteel precipitado y verter la solución en el filtro.Disolver el precipitado que queda en el filtro,agitando con varilla de vidrio para facilitar la disolución.Repetir tres veces estas adiciones y lavarErlenmeyer y filtro cinco veces con unos 20 ml deAgua PA-ACS fría cada vez.Valorar el Hierro II Sulfato formado, que seencuentra en el líquido del Kitasato, con PotasioPermanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV, añadiendopreviamente una gota de solución de Hierro II-1,10-Fenantrolina. Dar por terminada la valoracióncuando el color pase de verde-naranja a verdefranco.7(a).5. Cálculo.La cantidad de azúcar contenida en la soluciónazucarada utilizada se obtiene en la tabla 7(a).I.7(a).6. Referencias.7(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 8-10, 1969.7(a).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, págs.170-171, 1951.TABLA 7 (a). IKMn0 4 Azúcar KMn0 4 Azúcar KMn0 4 AzúcarN/10mlinvertidomgN/10mlinvertidomgN/10mlinvertidomg4,0 12,4 12,0 39,1 20,0 68,74,2 13,0 12,2 39,7 20,2 69,34,4 13,6 12,4 40,5 20,4 70,14,6 14,3 12,6 41,2 20,6 70,94,8 14,9 12,8 42,0 20,8 71,65,0 15,5 13,0 42,6 21,0 72,45,2 16,2 13,2 43,3 21,2 73,25,4 16,8 13,4 44,1 21,4 74,15,6 17,5 13,6 44,7 21,6 74,95,8 18,1 13,8 45,5 21,8 75,66,0 18,8 14,0 46,3 22,0 76,46,2 19,4 14,2 47,0 22,2 77,26,4 20,1 14,4 47,6 22,4 78,06,6 20,7 14,6 48,4 22,6 78,76,8 21,4 14,8 49,1 22,8 79,57,0 22,0 15,0 49,8 23,0 80,37,2 22,7 15,2 50,5 23,2 81,17,4 23,4 15,4 51,3 23,4 81,97,6 24,1 15,6 52,1 23,6 82,77,8 24,7 15,8 52,7 23,8 83,58,0 25,5 16,0 53,5 24,0 84,48,2 26,1 16,2 54,2 24,2 85,28,4 26,8 16,4 55,0 24,4 86,08,6 27,5 16,6 55,7 24,6 86,78,8 28,1 16,8 56,4 24,8 87,59,0 28,8 17,0 57,2 25,0 88,49,2 29,5 17,2 57,9 25,2 89,29,4 30,1 17,4 58,7 25,4 90,09,6 30,8 17,6 59,4 25,6 90,99,8 31,5 17,8 60,1 25,8 91,610,0 32,2 18,0 61,0 26,0 92,510,2 32,9 18,2 61,6 26,2 93,310,4 33,6 18,4 62,4 26,4 94,110,6 34,3 18,6 63,2 26,6 95,010,8 35,0 18,8 64,0 26,8 95,811,0 35,6 19,0 64,8 27,0 96,611,2 36,4 19,2 65,4 27,2 97,311,4 37,0 19,4 66,2 27,4 98,211,6 37,7 19,6 67,1 27,6 99,111,8 38,4 19,8 67,8 27,8 99,935

367(b). AZUCARES REDUCTORES(Defecación mercúrica)(Provisional)7(b).1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reductorasdistintas de los azúcares por defecación conmercurio II acetato, y valoración por la acciónreductora de los azúcares sobre la solucióncupro-alcalina. Aplicable a vinos jóvenes, de colorintenso y ricos en azúcar, o cuando se va a realizaruna valoración polarimétrica. Este métodoproporciona la menor pérdida de azúcares reductores.7(b).2. Material y aparatos.7(b).2.1. Aparato generador de ácido sulfhídrico.Filtrar el gas producido por la acción del ácidoclorhídrico diluido sobre el hierro II sulfuro porpaso a través de lana de vidrio y lavado en unfrasco lavador con agua.7(b).2.2. Dispositivo para eliminar el exceso deácido sulfhídrico. Eliminar el ácido sulfhídrico enexceso después de la precipitación del exceso demercurio, mediante aspiración conectada al tubolateral de un Kitasato, en el que se encuentra ellíquido a tratar. Tapar el matraz con un tapón atravesadopor un tubo que se sumerge en el líquido.Humedecer el aire aspirado que entra en el tubopor borboteo en un matraz de un litro lleno hastala mitad de agua.7(b).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO171321 1,10 -Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS131325 Fenolftaleína PA-ACS121793 Hierro II Sulfato 2-hidrato PA131426 Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l(0,1N) SV(o preparar con 131527 Potasio PermanganatoPA-ACS-ISO131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidratoPA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS141783 Zinc metal, polvo PRS7(b).3.1. Solución de Mercurio II. Mezclar 240 gde Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS con 240 mlde Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y añadirAgua PA-ACS hasta 1 litro. Hervir hasta disolucióncompleta, enfriar y añadir Agua PA-ACS hasta 1litro.7(b).3.2. Solución de Sodio Hidróxido 4N aproximadamente.Tomar Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N)SV y diluir convenientemente. Esta solución debepoder neutralizar exactamente un volumen igual alsuyo, de la solución de Mercurio II en presencia deFenolftaleína PA-ACS. Se debe comprobar estacorrespondencia antes de su empleo, en particularsi se observa un depósito en la solución deMercurio II y si es necesario diluir la solución sódica.7(b).3.3. Zinc metal, polvo PRS. Para eliminarel exceso de Mercurio.7(b).3 (4,5,6,7,y 8). Como 7 (a). 3 (4,5,6,7 y 8).7(b).4. Procedimiento.7(b).4.1. Vinos secos y dulces, en los que sepropone determinar el azúcar y la desviación polarimétrica.Colocar 100 ml de vino en una cápsulade 10-12 cm de diámetro y adicionar (V-0,5) ml deSodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volumende Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SVempleado para valorar la acidez total de 10 ml devino, como en 20.4. Evaporar en baño de aguahirviendo con corriente de aire caliente sobre lasuperficie del líquido, hasta reducir el volumen a50 ml, aproximadamente. Llevar a un matraz de100 ml, lavar tres veces la cápsula con Agua PA-ACS, añadir 5 ml de solución de Mercurio II y, agitando,5 ml de solución de Sodio Hidróxido quese corresponde, volumen a volumen, con la deMercurio II (solución de Sodio Hidróxido 4N aproximadamente),dejar reaccionar 5 minutos por lomenos; añadir 2 ml de solución de Mercurio IIAcetato y enrasar a 100 ml. Filtrar y recoger el filtradoen un Kitasato de 500 ml.Tratar el filtrado con una corriente de AcidoSulfhídrico para precipitar el Mercurio en forma deSulfuro negro (este tratamiento puede detenersecuando el precipitado tome color negro). Despuésse hace barbotar aire (previamente saturado devapor de agua) a través del líquido, hasta quehaya perdido todo su olor a Acido Sulfhídrico(5-10 minutos) y se filtra. Un ml del filtrado correspondea 1 ml de vino. Este líquido se emplea sindilución cuando se trata de vino seco o con unos5 g/l de azúcar.Con vino más rico en azúcar conviene diluirdespués del examen polarimétrico y antes delanálisis químico.7(b).4.2. Vinos secos y dulces en los que solamentese va a realizar el análisis del azúcar por elmétodo químico y no por polarografía. Tomar20 ml de vino sin diluir o diluido según normaanterior, añadir 20 ml de Agua PA-ACS y 1 ml desolución de Mercurio II Acetato y añadir, agitando,1 ml de la solución sódica.Dejar actuar 5 minutos por lo menos, añadir

M1 ml de solución de Mercurio II, enrasar con aguay filtrar. Tratar con Acido Sulfhídrico y aire húmedobarbotando en la forma antes expuesta, y filtrar.Continuar como en 7(a). 4 después de la defecación.7(b).5. Observaciones.En los análisis de azúcar por el método químico,para vinos no muy ricos en azúcar, en vez deeliminar el exceso de mercurio por el ácido sulfhídrico,es más práctico eliminarlo mediante la adiciónde Zinc metal, polvo PRS, de la siguienteforma: Añadir 1 g de Zinc metal, polvo PRS allíquido filtrado, agitar durante 2 horas de cuandoen cuando, y filtrar.7(b).6. Referencias.7(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 6-8. 1969.7(b).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, pág.176, 1951.7(c). AZUCARES REDUCTORES(Valoración)7(c).1. Principio.Eliminación de las materias reductoras distintasde los azúcares reductores por defecación, yposterior valoración basada en la acción reductorade los azúcares sobre una solución cupro-alcalina.7(c).2. Material y aparatos.7(c).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerantede reflujo.7(c).2.2. Material necesario para volumetría.7(c).2.3. Baño de agua.7(c).3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO211835 Piedra Pómez gránulos QP131542 Potasio Yoduro PA-ISO131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV7(c).3.1. Solución Cupro-Alcalina:Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfato5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato10-hidrato PA-ISO en 300-400 ml de AguaTABLA 7(c).IAzúcares reductores, expresados en mgml sodiotiosulfato0,1NPrimera cifra decimal0 1 2 3 4 5 6 7 8 90 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,91 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,12 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,43 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,74 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,15 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,56 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,97 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,38 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,79 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,010 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,511 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,012 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,513 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,014 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,515 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,016 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,617 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,418 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,119 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,020 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,921 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,822 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,823 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,824 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,825 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,837

38PA-ACS caliente. Mezclar la solución de AcidoCítrico y la de Sodio Carbonato. Añadir a continuaciónla solución de Cobre II Sulfato y completar elvolumen con Agua PA-ACS hasta un litro.7(c).3.2. Solución de Potasio Yoduro al 30%.Conservar en frasco topacio.7(c).3.3. Solución de Acido Sulfúrico al 25% envolumen.7(c).3.4. Solución de Engrudo de Almidón de5 g/l; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Estasolución debe ser mantenida diez minutos en ebulliciónen el momento de su preparación.7(c).3.5. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.7(c).4. Procedimiento.Poner en el Erlenmeyer de 300 ml, 25 ml de lasolución Cupro-Alcalina y 25 ml del vino previamentedefecado según 7(a) o 7(b). Este volumenañadido no debe contener más de 60 mg de azúcaresreductores.Añadir algunos granos de Piedra Pómez gránulosQP, y llevar a ebullición, que debe ser alcanzadaen dos minutos, adaptando el Erlenmeyer alrefrigerante de reflujo y mantener exactamentedurante diez minutos la ebullición.Enfriar inmediatamente bajo corriente de aguafría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduroal 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúricoal 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación,valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l(0,1N) SV.Efectuar una prueba en blanco, sustituyendolos 25 ml del vino previamente defecados porigual volumen de Agua PA-ACS y tratar como seha indicado antes para la muestra.7(c).5. Cálculo.La cantidad de azúcar, expresada en azúcarinvertido contenida en la muestra analizada, seobtiene en la tabla 7(c).1 en función del n’ - n deml de tiosulfato utilizado.Siendo:n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 Nutilizados en la valoración de la muestra.n’ = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 Nutilizados en la prueba en blanco.Expresar el contenido del vino en g de azúcarinvertido por litro, teniendo en cuenta las dilucionesefectuadas en el curso de la defecación delvolumen de la muestra analizada.7(c).6. Referencia.7(c).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. A 4e 29-31.8. GLICEROL (Glicerina)8.1. Principio.La glicerina separada del vino, previa defecación,por extracción con acetona, se oxida conácido peryódico a formaldehído. La reaccióncoloreada del formaldehído con la fluoroglucinapermite la determinación espectrofotométrica a480 nm. La presencia de sorbitol y de manitolson causa de error en la determinación de glicerina.8.2. Material y aparatos.8.2.1. Aparato de destilación. Compuesto delas siguientes partes:8.2.1.1. Matraz esférico de 500 ml.8.2.1.2. Columna rectificadora.8.2.1.3. Columna Widmer con camisa de aislamiento.8.2.1.4. Termómetro con escala de 0-110 C.8.2.1.5. Refrigerante.8.2.2. Frascos con tapón esmerilado de 1 l y de60 ml.8.2.3. Matraz aforado de 50 ml.8.2.4. Matraz aforado de 200 ml.8.2.5. Matraces con tapón esmerilado de 60 ml.8.2.6. Matraces aforados de 100 ml.8.2.7. Kitasato o recipiente para vacío de 250 ml.8.2.8. Filtro de porosidad número 4.8.2.9. Filtros de papel Schleicher et Schull 1574de 12,5 cm de diámetro o similar.8.2.10 Espectrofotómetro con cubetas de 1 cmde espesor interior.8.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP131188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISOFluoroglucina 0,2%141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX211456 Piedra Pómez gránulos QP121523 Potasio meta-Peryodato PA181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV8.3.1. Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO.8.3.2. Arena de Mar lavada, grano fino QP8.3.3. Acetona PA-ACS-ISO8.3.4. Sodio Hidróxido 1N SV.8.3.5. Piedra Pómez gránulos QP8.3.6. Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (IN) SV8.3.7. Solución 0,05 M de Acido Peryódico. En unmatraz aforado de 1 l, introducir 11,5 g de Potasiometa-Peryodato (KIO 4 ) y aproximadamente unos 800a 850 ml de Agua PA-ACS. Si la sal utilizada esK 2 H 3 IO 6 se pesan 15,2 g. Añadir en seguida 15 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y calentar muy ligeramen-

Mte en baño de agua hasta disolución completa. Enfriara la temperatura ordinaria y llenar hasta volumen.8.3.8. Solución de Fluoroglucina 0,2%. Estasolución debe ser renovada cada 15 días.8.3.9. Solución madre de Glicerina. Diluir unos20 ml de Glicerina PRS-CODEX a 100 ml. Determinardespués la concentración exacta de esta soluciónmidiendo su índice de refracción, y después,por diluciones convenientes y sucesivas, llevar suconcentración a 0,1 g por l.8.4. Procedimiento.Extraer los polioles y valorar la glicerina.8.4.1. Separación de polioles.- Introducir en unmatraz de 100 ml, de tapón esmerilado, 5 g deBario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO (no pulverizar), 5 gde Arena de Mar lavada, grano fino QP y 10 ml devino, que se deja deslizar por la pared del matraz.Si el vino contiene más de 120 g de azúcar porlitro, se opera sólo con 5 ml.Agitar enérgicamente durante 30 segundos ydejar en reposo, agitando de cuando en cuando.Añadir después 50 ml de Acetona PA-ACS-ISO yagitar otra vez durante 30 segundos. Llevar elmatraz a un termostato a 45ºC durante 5 minutos,agitando enérgicamente cada minuto.Filtrar la solución caliente por un crisol filtrante deporosidad número 4 dispuesto sobre Kitasato devidrio en el que se han puesto 40 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.Lavar el residuo tres veces con Acetona PA-ACS-ISO, removiendo el precipitado con una espátula.Escurrir después el precipitado lo más posible. Trasvasardespués este precipitado al matraz del aparatodestilador, enjuagando bien el Kitasato con AcetonaPA-ACS-ISO.Destilar la Acetona con llama fuerte, hasta que eltermómetro marque 100ºC, y destilar después20 ml más de Agua PA-ACS.Añadir al residuo de la destilación aún caliente,5 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV, dejarenfriar y trasvasar a matraz aforado de 50 ml. Seenrasa con las aguas de lavado del matraz, agitar yfiltrar por filtro de papel.8.4.2. Valoración de la glicerina.- Esta operaciónhay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguientesa la separación de los polioles.Llevar una alícuota de 5 ml del filtrado anterior amatraz aforado de 100 ml y enrasar con Agua PA-ACS.Introducir 20 ml de esta dilución en un matraz de60 ml con tapón esmerilado. Añadir 10 ml de soluciónde Acido Peryódico 0,05 M. Agitar y dejar enreposo 5 minutos.Añadir después sucesiva y rápidamente, deslizandoa lo largo de la pared, las siguientes soluciones:10 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y10 ml de solución de Fluoroglucina. Agitar despuésde la adición de cada una de las soluciones.Llevar rápidamente la mezcla de soluciones a lacubeta del espectrofotómetro y medir la absorbanciaa 480 nm en un minuto, porque la coloraciónvioleta que se obtiene es muy fugaz.Ajustar el espectrofotómetro de forma que lasolución obtenida, al sustituir en las operacionesanteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-ACS, dé una densidad óptica 0.8.4.3. Obtención de la curva patrón.Diluir 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ml de solucióninicial de glicerina de 0,1 g por l, a 200 ml.Tomar después 20 ml de cada una de estas dilucionesy 20 ml de la solución inicial, y llevar a fras-TABLA 8.IFACTORES DE CORRECCION PARA EL CONTENIDO EN GLICERINADE VINOS QUE CONTENGAN AZUCARESContenido enContenido enazúcar g/l Factor azúcar g/l Factor5 1,020 80 1,12310 1,030 90 1,13420 1,045 100 1,14530 1,060 110 1,15640 1,073 120 1,16850 1,086 130 1,18060 1,099 140 1,19170 1,111 150 1,20239

40cos de 60 ml con tapón esmerilado y tratar como en8.4.2 para los 20 ml de la dilución del filtrado. Medirdespués las densidades ópticas correspondientes,ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.Esta escala corresponde a riquezas en glicerinaen 0,2 ml de vino, que varían de 0 a 2 mg8.5. Cálculo.Calcular el contenido en glicerina expresado en g/l.PGlicerina = 50 —— f g/lVP = peso en g de glicerina obtenido de la curvapatrón.V = volumen en ml de la muestra de vino.f = 1 para contenido de azúcar en vinos inferiores a5 g/l.f = valor del factor de corrección según la tabla 8.Ipara contenidos de azúcar en vinos superiores a5 g/l.8.6. Referencia.8.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9, 1969.9. 2,3-BUTANODIOL9.1. Principio.El 2,3-butanodiol separado del vino, previa defecación,por extracción con acetona, se oxida conácido peryódico a acetaldehído. La reacción coloreadadel acetaldehído con el sodio nitroprusiato yla piperidina permite la determinación espectrofotométricaa 570 nm.9.2. Material y aparatos.9.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), como 8.2. (1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10).9.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISOAcido Peryodico 0,05 M131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP121188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA124551 2,3-Butanodiol PA211456 Piedra pómez granulos QP162377 Piperidina PS121523 Potasio meta-Peryodato PA131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS181691 Sodio Hidroxido 1 mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA9.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7), como 8.3. (1; 2; 3; 4; 5;6 y 7).9.3.8. Solución de Sodio Acetato al 27%.9.3.9. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.Conservar en la oscuridad y renovar semanalmente.9.3.10. Solución de Piperidina al 10%. Renovarcada 15 días.9.3.11. Solución madre de 2,3-Butanodiol. Utilizar2,3-Butanodiol rectificado, desechando el primeroy el último tercio. Pesar con exactitud 2 g ydisolverlos en 1.000 ml. Diluir esta solución hasta1/10.9.4. Procedimiento.Extraer los polioles y valorar el 2,3-Butanodiol.9.4.1. Separación de polioles. Como en 8.4.1.9.4.2. Valoración del 2,3-Butanodiol.Esta operación hay que realizarla antes de las 2o 3 horas siguientes a la separación de los polioles.Llevar a un matraz de 60 ml con tapón esmerilado5 ml del filtrado, 5 ml de solución de Sodio Acetatoal 27% y 10 ml de solución de Acido Peryódico0,05M.Agitar y dejar 2 minutos en contacto. Añadirdeslizando por las paredes del frasco: 5 ml desolución de Sodio Nitroprusiato al 2% y 5 ml de lasolución de Piperidina al 10%. Agitar después dela adición de cada una de las soluciones. Llevarinmediatamente la solución a la cubeta de 1 cmy hacer la lectura en el espectrofotómetro a570 nm. La coloración violeta que se obtiene conla reacción alcanza el máximo de intensidad a los30-40 segundos y después disminuye rápidamente.Ajustar el espectrofotómetro de forma que lasolución obtenida al sustituir en las operacionesanteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-ACS dé una densidad óptica 0.9.4.3. Obtención de la curva patrón.Diluir 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ml de la solucióninicial hasta 100 ml. Tomar 5 ml de cada una deestas diluciones y tratarlas como en 9.4.2 para los5 ml del filtrado inicial. Determinar inmediatamentelas densidades ópticas máximas correspondientes,ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.Esta curva proporciona valores de contenido en2,3-Butanodiol en 5 ml de vino que varían de 0 a0,7 mg.9.5. Cálculo.9.5.1. Vinos con contenido en azúcar inferior a5 g/l. La cantidad de 2,3-butanodiol en g/l de vinoes igual a la cantidad de 2,3-butanodiol en mg contenidoen 5 ml del filtrado.9.5.2. Vinos cuyo contenido en azúcar estácomprendido entre 5 y 120 g/l.La cantidad calculada según 9.5.1 se corrigesumando o restando el factor encontrado en la tabla9.I.9.5.3. Vinos con contenidos en azúcar superioresa 120 g/l.- (La defecación se realiza sobre 5 mlde vino). La cantidad calculada según 9.5.1 se corri-

Mge como en 9.5.2, utilizando sólo la mitad del contenidoen azúcar. El resultado multiplicado por 2 esel contenido en 2,3-butanodiol en g/l de vino.9.6. Referencia.9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analysedes Vins. 0. I. V. A21, 1-9. 1969.TABLA 9.ICorrecciones a realizar para expresar el contenido en2,3-butanodiol de vinos con azúcaresButanodiolg/lContenido en azúcar, g/l10 20 30 40 50 60 70 800- 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,0350,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,030,4 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,030,5 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,020,6 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,020,7 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 -0,010,8 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,000,9 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,011,0 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,021,1 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,02 +0,031,2 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,03 +0,041,3 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,051,4 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,071,5 0,00 +0,01 +0,02 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,081,6 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,101,7 +0,01 +0,03 +0,04 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,121,8 +0,02 +0,03 +0,05 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,131,9 +0,02 +0,04 +0,06 +0,08 +0,10 +0,12 +0,14 +0,152,0 +0,02 +0,05 +0,07 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15 +0,1741

TABLA 9.ICorrecciones a realizar para expresar el contenido en2,3-butanodiol de vinos con azúcaresContenido en azúcar, g/lButanodiolg/l 90 100 110 120 130 140 1500 - 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,0350,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,030,4 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,020,5 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,02 -0,010,6 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,000,7 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,00 +0,010,8 0,00 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,020,9 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03 +0,031,0 +0,02 +0,03 +0,03 +0,03 +0,03 +0,04 +0,051,1 +0,04 +0,04 +0,04 +0,05 +0,05 +0,06 +0,071,2 +0,05 +0,05 +0,05 +0,06 +0,07 +0,07 +0,081,3 +0,06 +0,07 +0,07 +0,08 +0,09 +0,09 +0,101,4 +0,08 +0,09 +0,09 +0,10 +0,11 +0,11 +0,121,5 +0,09 +0,10 +0,11 +0,12 +0,13 +0,13 +0,141,6 +0,11 +0,12 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0 171,7 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0,17 +0,18 +0 191,8 +0,15 +0,16 +0,18 +0,19 +0,20 +0,21 +0,221,9 +0,17 +0,18 +0,20 +0,21 +0,23 +0,24 +0,252,0 +0,19 +0,20 +0,22 +0,24 +0,26 +0,27 +0,284210(a). SACAROSA(Método cualitativo colorimétrico)10(a).1. Principio.El vino se defeca por plomo acetato, magnesio ypotasio permanganato a pH = 8-9. Se trata el defecadoa 100°C con difenilamina en medio clorhídricoy acético. El producto de condensación obtenido enpresencia de sacarosa se extrae por cloroformo quese colorea de azul.10(a).2. Material y aparatos.10(a).2.1. Baño de agua con temperatura controlada.10(a).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121828 Difenilamina PA121086 Etanol absoluto PA211276 Magnesio Oxido QP131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO131252 Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO10(a).3.1. Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO.10(a).3.2. Magnesio Oxido QP.10(a).3.3. Potasio Permanganato al 2%.10(a).3.4. Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO.10(a).3.5. Reactivo de Difenilamina. A 10 ml desolución de Difenilamina PA al 10% en Etanol absolutoPA, añadir 20 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 70 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.

MPara comprobar la pureza de este reactivo añadir2 ml de reactivo de Difenilamina y 2 ml de AguaPA-ACS, calentar en baño de agua hirviendo durante5 minutos. Enfriar la solución bruscamente por inmersiónen agua fría y extraer con 1 ml de Triclorometanoestabilizado con etanol PA-ACS-ISO, nodebiendo presentar el líquido extraído coloraciónazul.10(a).4. Procedimiento.Disolver en 10 ml de Agua PA-ACS 100 a 200 mgde Magnesio Oxido QP y unos 200 mg de Plomo IIAcetato 3-hidrato PA-ACS-ISO.Llevar al baño de agua que se mantiene a 90-95°Cdurante 3 a 5 minutos. Añadir 2 ml del vino quedebe estar limpio y con una riqueza en azúcar inferioral 1%.Diluir la muestra si la riqueza en azúcar es superiora la indicada como límite.Comprobar si la dosis de Plomo II Acetato3-hidrato PA-ACS-ISO es suficiente y no excesiva,lo que disminuiría la sensibilidad de la reacción. Paraello añadir gota a gota, al líquido que sobrenada,una solución concentrada de Plomo II Acetato,hasta que no se acuse enturbiamiento al caer lagota sobre el líquido. Añadir entonces soluciónsaturada de Sodio Sulfato para eliminar el excesode Plomo.Añadir 0,5 ml de la solución de Potasio Permanganatoy mantener la mezcla en el baño de agua a90-95° durante 10 minutos.Enfriar bruscamente por inmersión en agua fría,y filtrar.Puede aparecer una débil coloración amarilla,pero no influye en la reacción.Poner en un tubo de ensayo 2 ml del líquido filtrado,añadir 2 ml del reactivo de Difenilamina; manteneren baño de agua hirviendo, durante 5 minutosexactamente. Enfriar por inmersión en agua fría,añadir 1 ml de Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO y observar la coloración que seforma.10(a).5. Expresión de los resultados.Los vinos secos no adicionados con sacarosapueden dar una coloración gris-azulada muy ligera,pero, en presencia de sacarosa, aparece una francacoloración azul.Los vinos ricos en azúcar dan una coloraciónamarillo oro en ausencia de sacarosa, pero en presenciade ésta, la coloración es verde franco.Los resultados son sensibles para riquezas desacarosa desde 0,2 mg.10(a).6. Referencia.10(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A-S, 1-2. 1969.10(b). SACAROSA(Método cuantitativo)10(b).l. Principio.La sacarosa se determina por la diferencia de lospoderes reductores antes y después de la hidrólisisclorhídrica del líquido procedente de la defecacióndel vino.10(b).2. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO10(b).2.1. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.10(b).3. Procedimiento.Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 mlcada uno el mismo volumen del líquido de defecación,según las normas indicadas para el análisis deazúcares. La defecación se realiza como en 7(b) coneliminación previa del alcohol.Añadir a cada matraz un volumen de Acido Clorhídrico35% PA-ISO a razón de 0,3 ml por 10 ml delíquido azucarado.En uno de los matraces añadir inmediatamente0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N (disolver Sodio Hidróxidolentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS yajustar a la concentración indicada), por cada10 ml de líquido azucarado procediendo a la valoraciónde los azúcares reductores.Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizara baño de agua hirviendo durante 2 minutos.Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido12N que al otro matraz y valorar.10(b).4. Cálculo.La diferencia entre las cantidades de azúcaresreductores encontrada en los resultados de estasdos valoraciones, multiplicada por 0,95 da la riquezaen sacarosa de la muestra en estudio.Este resultado se expresa en g por l de vino,teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmenteen el curso de la defecación y del volumende la muestra de vino que se sometió a la defecación.10(b).5. Referencia.10(b).5.l. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A5, 4, 1969.-8011. CENIZAS11.1. Principio.Se denominan cenizas de un vino, al conjunto delos productos de incineración del residuo de evaporaciónde un volumen conocido del vino, realizadade manera que se puedan obtener todos los cationes(excepto amonio) en forma de carbonatos yotras sales minerales anhidras.43

4411.2. Materiales y aparatos.11.2.1. Horno eléctrico regulable.11.2.2. Baño de agua y baño de arena.11.2.3. Lámpara de infrarrojo.11.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de70 mm de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.11.3. Procedimiento.Colocar 20 ml de vino en una cápsula tarada enbalanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con precauciónen baño de agua, después de evaporarhasta consistencia siruposa, continuar el calentamientosobre baño de arena con moderación ydurante una media hora. Es conveniente ayudar a laevaporación con la aplicación de rayos infrarrojoshasta carbonización. Cuando ya no se desprendanvapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525°C± 25° y con aireación continua.Después de 5 minutos de carbonización completa,sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y añadir5 ml de agua que se evaporan en baño de agua,y llevar de nuevo al horno a 525°C.Si la combustión de las partes carbonosas no seconsigue en 15 minutos, volver a comenzar la operaciónde adición de agua, evaporación y recalcinación.Cuando se trate de un vino rico en azúcares, serecomienda adicionar unas gotas de aceite purovegetal al extracto, antes de comenzar la calcinaciónpara impedir el desbordamiento de la masa delcontenido. La duración de la primera carbonizacióndeberá ser en este caso 15 minutos.Después de enfriar en el desecador cápsula ycenizas, se pesan.11.4. Cálculo.Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l.Cenizas = 50 P g/lP = peso en g de las cenizas contenidas en 20 mlde vino.Dar los resultados con una aproximación de0,03 g/l.11.5. Referencias.11.5.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A6, 1. 1969.11.5.2. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”,pág. 106. Ministerio de Agricultura, 1956.12. ALCALINIDAD DE CENIZAS12.1. Principio.Se denomina alcalinidad total de cenizas la sumade los cationes, diferentes del amonio, combinadoscon los ácidos orgánicos del vino.La valoración se funda en la volumetría conácido sulfúrico, valorando en retorno después dedisolver en el mismo y en caliente, las cenizas, yempleando el anaranjado de metilo como indicador.12.2. Material y aparatos.12.2.1. Baño de agua.12.2.2. Pipeta de 10 ml.12.2.3. Varilla de vidrio.12.2.4. Bureta de valoraciones.12.3. Reactivos.181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV12.3.1. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.12.3.2. Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE.12.3.3. Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV.12.4. Procedimiento.Añadir a las cenizas ya pesadas, 10 ml de AcidoSulfúrico 0,05mol/l (0,1N) SV y llevar la cápsula a unbaño de agua hirviendo durante un cuarto de hora,frotando varias veces el fondo de la cápsula con unavarilla de vidrio para activar la disolución de las partículasdifíciles de disolver. Añadir en seguida dosgotas de Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE yvalorar el exceso de Acido Sulfúrico con SodioHidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV, hasta que el indicadorvire a amarillo.12.5. Cálculo.Calcular la alcalinidad de las cenizas expresadasen meq/l o en g/l de potasio carbonato.Alcalinidad de las cenizas = 5 (10 - V) meq/lAlcalinidad de las cenizas = 0,345 (10 - V) g/l depotasio carbonato.V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N utilizados.Dar los resultados con una aproximación de0,5 g por l en potasio carbonato.12.6. Referencia.12.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A7, 1-2, 1969.13. FOSFATOS13.1. Principio.Oxidación del vino, evaporación e incineración.Pre-cipitación del ácido fosfórico en ácido nítrico alestado de amonio fosfomolibdato. Esta sal sedisuelve por acción de un exceso de sodio hidróxido0,5N en presencia de formaldehído. Valoracióndel exceso de sodio hidróxido por ácido clorhídrico0,5N en presencia de fenolftaleína.

M13.2. Material y aparatos.13.2.1. Cápsula de sílice de 70 mm de diámetro.13.2.2. Baño de arena.13.2.3. Horno de mufla.13.2.4. Erlenmeyer de 500 ml.13.2.5. Vasos de precipitados y elementos paravolumetría.13.2.6. Agitador mecánico.13.3. Reactivos.181022 Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV121737 Acido Nítrico 53% PA131074 Agua PA-ACS131134 Amonio Molibdato 4-hidratoPA-ACS-ISO131135 Amonio Nitrato PA-ACS-ISO171327 Fenolftaleína solución 1% RE131328 Formaldehído 36,5-38% p/v estabilizadocon metanol PA-ACS181692 Sodio Hidróxido 0,5mol/l (0,5N) SV13.3.1. Solución de Acido Nítrico al 25% (d1,153). Añadir a 440 ml de Acido Nítrico 53% PAAgua PA-ACS hasta 1.000 ml.13.3.2. Solución de Amonio Nitrato. Añadir, a340 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.13.3.3. Solución de Amonio Molibdato. Añadir, a30 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO,Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.13.3.4. Solución de lavado. 50 g de AmonioNitrato PA-ACS-ISO, 40 ml de Acido Nítrico al 25%y Agua PA-ACS hasta 1 l.13.4. Procedimiento.Evaporar a sequedad 100 ml de vino en cápsulade cuarzo en sucesivas adiciones. Añadir después4 ml de Acido Nítrico 53% PA y calentar progresivamenteen el baño de arena y después en elhorno de mufla.Añadir a las cenizas 2 ml de Acido Nítrico 53%PA y evaporar a sequedad en el baño de agua parainsolubilizar la sílice. Añadir 10 ml de Acido Nítrico al25%; remover y arrastrar las cenizas a un filtro; lavarla cápsula y filtro con 5 ml del mismo ácido y despuéscon 20-30 ml de Agua PA-ACS. Recoger el filtradoen un Erlenmeyer de unos 500 ml, adicionar25 ml de solución de Amonio Nitrato de 340 g por ly agitar.Después añadir de una vez 80 ml de solución deAmonio Molibdato 3% y agitar mecánicamentedurante 12 minutos a razón de 200 sacudidas porminuto. Decantar y filtrar por papel. Lavar luego elprecipitado con 75 ml de líquido de lavado dosveces. Cada lavado no debe durar más de 10 minutos.Lavar 8 veces más con Agua PA-ACS.Colocar el filtro y el precipitado en un vaso con50 ml de Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. Añadir12,5 ml de Formaldehído 36,5-38% p/v, estabilizadocon metanol PA-ACS neutralizado en presenciade Fenolftaleína solución 1% RE, para disolver elprecipitado de Fosfomolibdato. Escurrir el filtro yextender sobre la pared del vaso, por encima dellíquido de la solución. Valorar el exceso de sodiohidróxido con Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV,hasta decoloración de la Fenolftaleína, habiendosumergido al final nuevamente el filtro.13.5. Cálculo.Calcular el contenido en fosfatos expresado enmeq de ácido fosfórico (considerado como triácido),o en g de P205 por l de vino.Fosfatos = 0,577 (50 - V) meq de ácido fosfórico.Fosfatos = 0,01365 (50 - V) g de P 2 0 5 por l devino.V = volumen en ml de solución de ácido clorhídrico0,5N.Dar los resultados con una aproximación de0,01 g/l.13.6. Referencia.13.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A16, 1-2 1969.14. CALCIO(Método complexométrico)14.1. Principio.Valoración del calcio por complexometría sobre lasolución nítrica o clorhídrica de las cenizas del vino.14.2. Material y aparatos.14.2. (1, 2, 3 y 4) como 11.2. (1, 2, 3 y 4).14.2.5. Matraces Erlenmeyer de 1.000 ml.14.2.6. Matraces Erlenmeyer de 100 ml.14.3. Reactivos.182318 Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV182120 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 0,05 mol/l (0,05M) SV (AcidoEDTA Na 2 ) (o preparar con 131669Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO)Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Naftalensulfónico,Sal Sódica(CALCON)131074 Agua PA-ACS182241 Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV(o preparar con 121212 Calcio Carbonatoprecipitado PA)131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO14.3.1. Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV.14.3.2. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto añadira 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACShasta 1.000 ml y disolver.45

4614.3.3. Lejía de Sodio Hidróxido al 40%. Añadira 40 g de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISOAgua PA-ACS hasta 100 ml.14.3.4. Indicador de Calcon. Mezclar 1 g deAcido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Naftalensulfónico,Sal Sódica con 100 g de Sodio CloruroPA.14.3.5. Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. Ensu defecto disolver 5,05 g de Calcio Carbonato precipitadoPA en la cantidad necesaria de Acido Clorhídricodiluido y completar a 1 litro. Valorar estasolución por medio de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en presenciade Calcon en la forma que luego se describe.14.4. Procedimiento.Evaporar a sequedad en baño de agua hirviendo50 ml de vino colocados en cápsulas preferentementede platino. Incinerar el residuo como en 11.Disolver las cenizas en 8 ml de Acido Clorhídrico0,25 mol/l (0,25N) SV, llevar a un matraz aforado de50 ml; lavar varias veces la cápsula con AguaPA-ACS vertiéndola en el matraz. Enrasar y agitar.Tomar 20 ml de la solución de cenizas y calentarhasta ebullición, en un Erlenmeyer de unos 100 ml.Dejar enfriar y después añadir 0,5 ml de solución deSodio Hidróxido al 40%, 10 ml de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SVy 100 mg aproximadamente de indicador Calcon.Si el color de la mezcla es rojo-vinoso, añadirAcido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05mol/l (0,05M) SV en exceso hasta aparición de colorazul-violeta.Evitar una cantidad de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en excesorelativamente grande, que enmascara el puntode viraje.Valorar el exceso de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV añadiendoCalcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. El indicadorCalcon virará de azul violeta a rojo-vinoso al finalde la reacción.14.5. Cálculo.Calcular el contenido en calcio como iones Caen meq/l, o como iones Ca expresados en g/l.Calcio = (10 - V) 5 meq/l de ion Ca.Calcio = (10 - V) 0,1 g/l de ion Ca.V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M.14.6. Referencias.14.6.1. Castino, M. “Determinazione complessometricadel Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivistade Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.14.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A26, 2-3, 1969.15. MAGNESIO15.1. Principio.Valoración del magnesio por complexometríasobre la solución nítrica o clorhídrica de las cenizasdel vino.15.2. Material y aparatos.15.2. (1, 2, 3 y 4), como 11.2. (1, 2, 3 y 4).15.2. (5 y 6), como en 14.2. (5 y 6).15.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO182120 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 0,05 mol/l (0,05M) SV181397 Magnesio Cloruro 0,l mol/l (0,1M) SV(diluir o preparar como se indica en 15.3.4)211276 Magnesio Oxido QP (*)171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO171730 Solución Tampón pH 10 RE(o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO,121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA y 131074 AguaPA-ACS)15.3.1 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica0,05 mol/l (0,05M) SV. Como en 14.3.2.15.3.2. Solución Tampón pH 10 RE. En sudefecto preparar disolviendo 50 g de Amonio CloruroPA-ACS-ISO en 350 g de Amoníaco 25% (enNH 3 ) PA y añadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.15.3.3. Indicador Negro de Eriocromo T. Mezclar1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS,con 100 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.15.3.4. Solución de Magnesio Cloruro 0,05M. Enun matraz aforado de 1 l introducir 500 ml de MagnesioCloruro 0,1mol/l (0,1M) SV, diluir y enrasar conAgua PA-ACS o preparar disolviendo 2,25 g deMagnesio Oxido QP en la cantidad necesaria deAcido Clorhídrico diluido y llevar después el volumena 1 litro. Valorar esta solución con Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV(15.3.1) en presencia de Negro de Eriocromo T(15.3.3) como se indica a continuación.15.4. Procedimiento.Tomar 20 ml de la solución de cenizas antes preparada,llevar a ebullición en un Erlenmeyer de unos100 ml, dejar enfriar y añadir 10 ml de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M)SV, 5 ml de Solución Tampón pH 10 RE, 50 mgaproximadamente de indicador Negro de EriocromoT.Valorar después el exceso de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV

Mcon la solución de Magnesio Cloruro 0,05M. El indicadorvira del azul al rojo vinoso.15.5. Cálculo.Calcular el contenido en magnesio expresado enmeq/l o en g/l de iones Mg.Magnesio = (V - V’) x 5 meq/lMagnesio = (V - V’) x 0,06075 g/l de iones Mg.V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M utilizadopara valorar el exceso de ácido EDTA Na 20,05M en la determinación del calcio (14.4).V’ = volumen en ml de solución de magnesiocloruro 0,05M.(*) El magnesio óxido del comercio está generalmentecarbonatado, aun puro, por lo que debe calcinarse.Tomar 5 g en cápsulas de platino; llevar alrojo durante más de 30 minutos. Dejar enfriar ypesar los 2,25 g.15.6. Referencias.15.6.1. Castino, M. “Determinazione complessometricadel Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista diViticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.15.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V., A26, 2-3, 1969.16. HIERRO(Método colorimétrico delsulfocianuro)16.1. Principio.El hierro oxidado por el agua oxigenada se combinacon el ion sulfociánico en medio clorhídrico. Elcolor rojo se compara con escala patrón o se midepor espectrofotometría. Para los vinos tintos, el hierrosulfocianuro se extrae con éter. Para valorarsolamente el hierro trivalente, se suprime la adicióndel agua oxigenada.16.2. Material y aparatos.16.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro paralectura a 508 nm de longitud de onda.16.2.2. Tubos de 200 x 20 mm.16.2.3. Bola de decantación de 50 ml.16.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131036 Acido Nitrico 60% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO131365 Amonio Hierro lll Sulfato 12-hidratoPA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BTH PA-ACS-ISO141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)PRS211934 Hierro metal, granulado fino QP121534 Potasio Tiocianato PA141699 Sodio metal, barras PRS(o 121237 Carbón Activo polvo PA o142367 Manganeso IV Oxido 85%precipitado PRS)131687 Sodio Hidróxido lentejas PA16.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.16.3.2. Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.Usese Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) PRS ydiluir convenientemente.16.3.3. Eter Dietílico. Destilar el Eter Dietílico estabilizadocon 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO antes de suempleo o bien mantenerlo en presencia de Sodio metal,barras PRS o Carbón Activo polvo PA o Manganeso IVOxido 85% precipitado PRS.16.3.4. Solución de Potasio Tiocianato. Añadir a200 g de Potasio Tiocianato PA Agua PA-ACS hasta1litro, y disolver.16.3.5. Solución de Hierro III Cloruro de 0,1 g deHierro metal, granulado fino QP por litro. Disolver 0,1 gde Hierro metal, granulado fino QP en 10 ml de AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO y 30 ml de Agua PA-ACS.Añadir 1 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y hervir. Enfriary añadir Agua PA-ACS hasta 1 litro.También puede prepararse la siguiente solución deHierro. Disolver 0,863 g de Amonio Hierro III Sulfato12-hidrato PA-ACS-ISO, 0,863 g de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO (*) y 10 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS y diluir hasta 1.000 ml.(*). En el original indica “amonio”, entendemos setrata de Amonio Cloruro.16.3.6. Etanol de 20º. Usese Etanol 96% v/v PA ydiluir convenientemente.16.4. Procedimiento.16.4.1. Determinación del hierro total. (Férrico +ferroso).16.4.1.1. Vinos blancos o poco coloreados. Colocar10 ml de vino en un tubo de 200 x 20 mm, añadir 1 mlde Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, 5 gotas deHidrógeno Peróxido y 1 ml de solucion de Potasio Tiocianato.A la aparición del color añadir 20 ml de Eter Dietílico,agitar para mezclar las dos fases sin emulsionar ydejar decantar 5 minutos. Determinar la absorbancia dellíquido decantado en espectrofotómetro colorímetro a508 nm. Ajustar el espectrofotómetro a cero, utilizandocomo prueba en blanco 10 ml de vino acidulados con1 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluidoscon 1 ml de Agua PA-ACS. De esta forma se compen-47

48sa la influencia del color del vino y de la posible apariciónde color o del reavivado del vino, ambas coloracionesdebidas a la acidez añadida al vino.Obtener una curva, procediendo en la formaanteriormente descrita y utilizando en vez de 10 mlde vino mezclas de 5 ml de alcohol de 20° y porcionesde 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ml, completadashasta 5 ml con Agua PA-ACS. Estas mezclas contendrán,respectivamente, 5,10, 15, 20 y 25 mg/l dehierro.16.4.1.2. Vinos tintos.- Como en 16.4.1.1, peroutilizando sólo 0,2 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. El exceso de acidez dificulta la extraccióndel hierro sulfocianuro por el éter.16.4.2. Determinación del hierro trivalente.Como en 16.4.1, pero sin adicionar HidrógenoPeróxido.16.5. Cálculo.Calcular el contenido en hierro expresado enmg/l por comparación de la absorbancia con lacurva patrón.16.6. Observaciones.En lugar del éter algunos autores (16.7.2) recomiendanel empleo del etilo acetato, que no tiene elinconveniente de la posible presencia de peróxidos;sin embargo, en algunos vinos de intenso color denuestro país se ha observado extracción de partede la materia colorante con el etilo acetato, lo queno sucede con el éter.16.7. Referencias.16.7.1. Ribereau-Gayon, J., y Peynaud, E.“Analyse et Controle des Vins”, pág. 194, 1958.16.7.2. Jaulmes, P.; Brun, S.; Tour, C.; Cabanis,J.C. “Dosage direct du fer dans les vins”. SociétéPharmacie Montpellier, 24:2, 1964.17. COBRE17.1. Principio.El sodio dietilditiocarbamato reacciona con elcobre (reacción de Delepine), dando la sal correspondientea este metal y coloración amarilla oro,cuya intensidad se mide por colorimetría o espectrofotometría.Para evitar interferencias debidas a la presenciade hierro y otros cationes polivalentes presentes enel vino se emplea la sal disódica del ácido etilendiaminotetraacético,que forma complejos solubles ymuy estables a pH = 8. También puede utilizarse elamonio citrato para evitar la interferencia del hierro.17.2. Material y aparatos.17.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro con filtropara longitud de onda de 420 nm.17.2.2. Bola de decantación de unos 100 ml.17.3. Reactivos.131669 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO(Acido EDTA Na 2 2-hidrato) (o 131120di-Amonio Hidrógeno Citrato PA-ACS)131074 Agua PA-ACS121129 Amoníaco 25% (en NH 3 ) PA131245 Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO131091 Metanol PA-ACS-ISO131668 Sodio Dietilditiocarbamato 3-hidratoPA-ACS17.3.1. Solución acuosa al 0,1% de Sodio Dietilditiocarbamato.17.3.2. Suspensión de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica al 20%, o bien solución acuosade Amonio Citrato al 20%.17.3.3. Solución amoniacal al 15%. Diluir convenietementeel Amoníaco 25% (en NH 3 ) PA con AguaPA-ACS.17.3.4. Metanol PA-ACS-ISO.17.3.5. Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO.17.3.6. Agua bidestilada en vidrio. Utilizarla tambiénpara la preparación de reactivos.17.4. Procedimiento.Poner en una bola de decantación 10 ml delvino, añadir 5 ml de una suspensión del Acido EDTANa 2 2-hidrato (o 5 ml de soluciónde Amonio Citrato)y llevar a pH 8 con la solución amoniacal. Añadir1 ml de reactivo de Sodio Dietilditiocarbamato y5 ml de Metanol PA-ACS-ISO (para evitar emulsión),y agitar durante 1 minuto.Extraer varias veces con Carbono TetracloruroPA-ACS-ISO (agitando cada vez durante 1 minuto)hasta recoger 20 ml, cuidando que no pasen restosde agua, pues éstos dan enturbiamiento con el CarbonoTetracloruro PA-ACS-ISO. Si pasa algunagota, filtrar por papel de filtro puro, quedando lastrazas de agua en el papel.Determinar la absorbancia en el espectrofotómetroa 420 nm de longitud de onda.Para la prueba en blanco utilizar los mismosreactivos en las mismas proporciones, sustituyendoel volumen de vino por otro igual de Agua bidestiladaen aparato de vidrio.La curva que previamente será construida apartir de lecturas correspondientes a escala dediferentes riquezas de cobre es una línea recta,por obedecer a la ley de Lamber-Beer. En el intervaloen que se opera con 1 ml de reactivo puedenvalorarse 10 ppm de cobre; para valores superiores,se añadirán 2 ml o se toma menor volumende muestra.17.5. Cálculo.El valor obtenido para la absorbancia a 420 nm

Mse lleva a la curva patrón y se expresa el correspondientecontenido en cobre en ppm.17.6. Referencia.17.6.1. Garoglio, P. G., y Stella, C. “Methodi ufficialidi analisi per i mosti, i vini e gli aceti”, pág. 75,1958.18. POTASIO(Fotometría de llama)18.1. Principio.Se utiliza una solución de referencia con 100 mgde potasio por litro y con diversos aniones, cationesy materia orgánica en proporciones tales que denun compuesto similar a un vino diluido a 1/10 conagua.18.2. Material y aparatos.18.2.1. Fotómetro de llama y accesorios.18.2.2. Pipetas de 10 ml.18.2.3. Matraces aforados de 1.000 ml.18.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACSAlilo Isotiocianato121221 Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA121085 Etanol 96% v/v PA141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX211794 Magnesio Cloruro 50% MgCl 2 QP121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA131621 Sacarosa PA-ACS131965 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidratoPA-ACS141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX18.3.1. Solución de referencia. Disolver 481,3 mgde Potasio Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml deAgua PA-ACS muy caliente y mezclar con una soluciónde 10 ml de Etanol 96% v/v PA, 700 mg deAido Cítrico anhidro PA-ACS, 300 mg de SacarosaPA-ACS, 1.000 mg de Glicerina (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX, 20 mg de Sodio di-Hidrógeno Fosfato1-hidrato PA-ACS, 10 mg de Calcio Cloruro anhidro95% polvo PA y 10 mg de Magnesio Cloruro50% MgCl 2 polvo QP en 400 ml de Agua PA-ACS.Completar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.Añadir dos gotas de Alilo Isotiocianato para conservaciónmás segura de la solución.18.3.2. Solución de dilución. Igual que la anterior,cambiando el Potasio Hidrógeno Tartrato PApor 383 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.Para preparar la solución de referencia, comenzarpor disolver 481,3 mg de Potasio HidrógenoTartrato PA en medio litro de Agua PA-ACS muycaliente y mezclar esta solución con los otros componentes,previamente disueltos en 400 ml de AguaPA-ACS; enrasar después a 1 litro exactamente.Para la conservación más segura de esta soluciónse añaden 2 gotas de Alilo isotiocianato.Con vinos dulces, añadir una cantidad de SacarosaPA-ACS igual a la décima parte de la que contengael vino.Añadir a la solución de referencia una cantidadde Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACSequivalente al contenido en sodio del vino cuandoeste contenido sea superior al equivalente a 20 mgde Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS.En el caso del fraude por adición de 1 g/l deSodio Salicilato, añadir 100 mg de Sodio Salicilato(USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX por litro de la soluciónde referencia y de dilución. El Sodio Salicilatotiene una influencia muy marcada en el resultado delanálisis.18.4. Procedimiento.Regular el aparato y establecer una curva decalibración con la solución de referencia pura y condiversas diluciones de la solución de referencia diluidaa 1/20, 1/10, 1/5, 1/2, con la solución de dilución.Diluir el vino a 1/10 con agua y hacer la determinaciónen el fotómetro.Si la lectura no queda comprendida entre losvalores 40 y 100 de la escala del galvanómetro,diluir convenientemente el vino con solución de dilución.18.5. Cálculo.Calcular el contenido en potasio expresado eng/l con una aproximación de ±0,02 g/l.Potasio = 10 L g/lL = valor correspondiente a la lectura de la escaladel galvanómetro en la curva de calibración.18.6. Referencia.18.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A8, 1-6, 1969.19. SODIO(Fotometría de llama)19.1. Principio.Como en 18.1, referido a sodio.19.2. Material y aparatos.Como en 18.2.19.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACSAlilo Isotiocianato49

50121221 Calcio Cloruro anhidro 95%, polvo PA121085 Etanol 96% v/v PA141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX211794 Magnesio Cloruro 50% MgCl 2 QP131621 Sacarosa PA-ACS131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX19.3.1. Solución de referencia.- Como en18.3.1, sustituyendo los 20 mg de Sodio di-HidrógenoFosfato 1-hidrato PA-ACS por 50,84 mg deSodio Cloruro PA-ACS-ISO.19.3.2. Solución de dilución.- Como en 18.3.2,suprimiendo los 50,84 mg de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.19.4. Procedimiento.Como en 18.4. Para la curva de calibración, utilizarla solución de referencia diluida a 1/20, 1/10,1/2, 3/4.19.5. Cálculo.Calcular el contenido en sodio expresado en g/lcon una aproximación de ± 0,05 g/l.19.6. Referencia.19.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A25, 1-2, 1969.20. ACIDEZ TOTAL20.1. Principio.La acidez total de un vino se considera como lasuma de los ácidos titulables cuando se lleva el vinoa pH = 7 por adición de un licor alcalino valorado. Elácido carbónico y el anhídrido sulfuroso libre y combinadono se consideran comprendidos en la acideztotal.El gas carbónico se elimina previamente del vinopor agitación en frío y con vacío parcial.20.2. Material y aparatos.20.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.20.2.2. Agitador magnético.20.2.3. Puente con solución saturada de ClKpara evitar la introducción del electrodo de calomelanosen el vino.20.2.4. Kitasato de un litro.20.2.5. Pipeta de 20 ml.20.2.6. Vaso de 100 ml de capacidad.20.2.7. Bureta de 50 ml.20.3. Reactivos.171495 Potasio Cloruro solución saturada RE171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE20.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE.20.4. Procedimiento.Poner 50 ml de vino en un Kitasato de 1l decapacidad, conectar al vacío agitando al mismotiempo el matraz. El desprendimiento de CO 2 seaprecia a los pocos momentos. Observar atentamenteel momento en que dejan de desprenderselas burbujas, desconectar del vacío.Tomar 20 ml del vino sin CO 2 y llevar a un vasode unos 100 ml de capacidad, introducir el electrodode vidrio en el vino y el de calomelanos en vasolateral con Potasio Cloruro solución saturada RE.Disponer un puente de la misma solución en tubode vidrio con los extremos uno en cada vaso estableciendocontacto.Poner en marcha el agitador y añadir desdebureta Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE al vinohasta que la aguja del potenciómetro marque pH =7, manteniendo el agitador en marcha durante laoperación, que no debe durar más de cinco minutos.20.5. Cálculo.Calcular la acidez total expresada en meq/l conuna aproximación de 0,1 meq/l o en g de ácido tartárico.VAcidez total = 10 —— - 0,35 V - 0,25 V” meq/l2VAcidez total = 0,75 ( —— - 0,035 V’ - 0,025 V”) g/l2de ácido tartárico.V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.V’ = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado parala oxidación de anhídrido sulfuroso libre (21.-).V” = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado parala oxidación del anhídrido sulfuroso combinado (21.-).20.6. Referencias.20.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A10, 1-3, 1969.20.6.2. Jaulmes, P. ”La mesure de l’acidité totaldes vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,556, 1955.NOTA: Organismos como la American Society ofEnologist y la Association of Official Analytical Chemist,aconsejan que el punto de viraje sea a pH 8,2en lugar de 7,0 por tratarse de una valoración deácidos débiles con una base fuerte.

M21. ACIDEZ VOLATIL21.1. Principio.La acidez volátil está constituida por la parte deácidos grasos pertenecientes a la serie acética quese encuentra en los vinos, ya sea en estado libre ode sal. Se determina mediante la separación de losácidos volátiles por arrastre con vapor de agua yrectificación de los vapores. Se debe evitar con precauciónla presencia de gas carbónico en el destilado.La acidez del anhídrido sulfuroso libre y combinadoarrastrados con el destilado no deben comprenderseen la acidez volátil, por lo que hay querestar la equivalencia de su acidez de la del destilado,así como la del ácido sórbico eventualmentepresente. Para estas correcciones se sigue la normaJaulmes (21.7.2), en la que se considera comocompleta la influencia de SO 2 libre y sólo la mitad dela del combinado.21.2. Material y aparatos.21.2.1. Aparato para destilación aislada (fig.21.I).21.2.1.1. Matraz de generador de vapor de3.500 ml.El agua condensada en el tubo de unión delmatraz con el barbotador se purga por el purgador(c).21.2.1.2. Barbotador (b).- Tubo cilíndrico de3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo reposasobre un disco de amianto de 15 cm de diámetro,con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) porel que entra el vapor en el barbotador debe llegar a1 cm del fondo.21.2.1.3. Columna rectificadora (e) .- Constituidapor un tubo cilíndrico de 20 mm de diámetro y50 cm de altura, conteniendo una hélice de tela deacero inoxidable número 100 plegada, con 15 mmde paso.21.2.1.4. Refrigerante de West (f).- De 40 cm delongitud activa, colocado verticalmente.21.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131066 Acido L (+)-Tartárico PA-ACS-ISO171073 Agua de Cal solución saturada RE(o 171071 Agua de Barita solución saturada RE)131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS131542 Potasio Yoduro PA-ISO131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidratoPA-ACS-ISO181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV21.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.21.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol96% v/v PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluirconvenientemente.21.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 ydeterminar el factor.21.3.4. Almidón soluble RE.21.4. Procedimiento.Alimentar el generador de vapor con Agua deCal solución saturada RE o Agua de Barita soluciónsaturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta unos2/3 de su volumen. Poner en el barbotador 20 mldel vino exento de gas carbónico como en 20.4.Añadir al vino unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor,manteniendo abierta la salida del tubo purgador delvapor; después de cerrar ésta, calentar el barbotador.Durante la operación se regula el calentamientode forma que el volumen de líquido en el barbotadorno pase sensiblemente de los 20 ml iniciales.Destilar en unos 12-15 minutos 250 ml.Valorar con Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SVen presencia de dos gotas de Fenolftaleína comoindicador.Valorar el sulfuroso libre en este destilado, añadiendoal terminar la anterior valoración una gota deAcido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, para acidularnuevamente y valorar el SO 2 libre con solución deYodo 0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidónsoluble RE como indicador y un cristal de PotasioYoduro PA-ISO.Para determinar el Acido Sulfuroso combinadocon el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución saturadade di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO (el líquido toma un color rosa pálido) y valorarnuevamente con solución de Yodo 0,01N.21.5. Cálculo.Calcular la acidez volátil expresada en meq/l,con una aproximación de 0,2 ml, o en g/l de ácidosulfúrico o de ácido acético, con una aproximaciónde 0,1 g/l.Acidez volátil = 5 (V - V’/10 - V”/20) meq/l0,49Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de2ácido sulfúrico.0,6Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de2ácido acético.V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.V’= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en laoxidación del anhídrido sulfuroso libre.V”= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la51

oxidación del anhídrido sulfuroso combinado con elacetaldehído.21.6. Observaciones.En la destilación del vino para la determinaciónde la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en sutotalidad al destilado, junto con el ácido acético, falseandoel resultado del análisis. Para corregir elresultado, determinar el ácido sórbico en el destiladocomo en 29, procediendo en la siguiente formasimplificada: tomar 0,5 ml del destilado de la acidezvolátil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno,añadir 1,5 ml de la solución (a), dejar la cubetaal aire durante unos minutos y medir después laabsorbancia en el espectrofotómetro a 256 nm.Graduar el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución(b) y 1,5 ml de la solución (a).21.7. Referencias.21.7.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. All, 1-4, 1969.21.7.2. Jaulmes, P. Analyse des Vins, 2a. ed.,1951.22. ACIDO SORBICO EN EL DESTILADOPARA ACIDEZ VOLATIL22.1. Principio.En la destilación del vino para la determinaciónde la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en sutotalidad al destilado junto con el ácido acético, falseandoel resultado del analísis. Para valorar esteácido sórbico se parte de una muestra de 0,5 ml dedestilado (lo que no supone un error sensible) y sevalora por espectrofotometría en el ultravioleta.22.2. Material y aparatos.22.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta.22.2.2. Cubetas de cuarzo de 1 cm.22.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.22.3. Reactivos.141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX131074 Agua PA-ACS131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121531 Potasio Sorbato PA121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA52Figura 21.I.- Aparato para destilación aislada

M22.3.1. Solución a): Mezclar 0,5 g de SodioHidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre IISulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta un litro.22.3.2. Solución b): Llevar 20 mg de Acido Sórbico(USP-NF) PRS-CODEX a matraz de un litro quecontenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar,dejar enfriar y enrasar a un litro. En vez de AcidoSórbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse26,8 g de Potasio Sorbato PA.22.4. Procedimiento.Tomar 0,5 ml del destilado de la acidez volátil,llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, añadir1,5 ml de la solución a), dejar la cubeta al airedurante unos minutos y medir después la absorbanciaen el espectrofotómetro a 256 nm. Graduarel espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución b) y1,5 ml de la solución a).22.5. Cálculo.Un gramo de ácido sórbico corresponde a8,92 ml de solución normal y a 0,438 g de ácido sulfúrico.Para todo vino adicionado con 200 mg deácido sórbico por litro la corrección sustractiva quecorresponde hacer a la acidez volátil es de 1,7 meqo 0,088 g del ácido sulfúrico o 0,107 g de ácidoacético por litro de vino.22.6. Referencia.22.6.1.Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. All, 3.23. ACIDEZ FIJA23.1. Principio.Se considera convencionalmente como acidezfija la diferencia entre acidez total y acidez volátil,ambas expresadas en ácido tartárico.No es necesario hacer las correcciones poreventual presencia de anhídrido sulfuroso combinadoy libre.24(a). ACIDO TARTARICO TOTAL(Método del calcio racemato)24(a).1. Principio.Adición al vino de ácido tartárico levógiro que enunión con el ácido tartárico dextrógiro del vino y enpresencia de solución de calcio, forman en condicionesdeterminadas calcio racemato insoluble.En el método adoptado se determinan las condicionesde precipitación del calcio racemato, fijandola solubilidad del calcio tartrato levógiro (quetambién se forma) y las del calcio racemato en funcióndel pH y de la riqueza en iones de calcio. Conestos datos se ha fijado un pH conveniente paraque precipite el calcio racemato y se solubilice eltartrato levógiro.24(a).2. Material y aparatos.24(a).2.1. Vaso cilíndrico de 600 ml.24(a).2.2. Filtros de porosidades números 4 y 2.24(a).2.3. Kitasato y trompa de agua para vacío.24(a).2.4. Material accesorio para una volumetría.24(a).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACSAmonio D(-)-Tartrato121212 Calcio Carbonato precipitado PA24(a).3.1. Solución de Calcio Acetato de 10 g deCalcio por litro. Mezclar en matraz aforado de1.000 ml 25 g de Calcio Carbonato precipitado PAcon 40 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO yenrasar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.24(a).3.2. Calcio Racemato cristalizado. En unvaso, introducir 20 ml de una solución de AcidoL(+)-Tartárico de 5 g por litro, 100 ml de Agua PA-ACS, 20 ml de una solución de Amonio Tartratolevógiro de 6,126 g por litro y 6 ml de la solución deCalcio Acetato.Dejar precipitar durante dos horas. Recoger elprecipitado sobre un filtro de porosidad número 4,lavando y arrastrando cuatro veces. Secar en estufaa 70° hasta peso constante. Se obtienen unos340 mg de Calcio Racemato cristalizado.Conservar en frasco tapado.24(a).3.3. Licor de precipitación. Introducir enmatraz aforado de 1.000 ml 150 g de Amonio D(-)-Tartrato levógiro, 8,8 ml de solución de Calcio de10 g/l y enrasar con Agua PA-ACS.Por ser el Calcio Racemato ligeramente solubleen este licor, conviene saturarlo antes de su empleo,añadiendo 5 g de Calcio Racemato a un litro de estelicor. Agitar durante 12 horas y filtrar.24(a).4. Procedimiento.24(a).4.1. Precipitación del Racemato.- En unvaso cilíndrico de 600 ml introducir 500 ml de licorde precipitación y 10 ml de vino. Mezclar y dejarprecipitar durante 24 horas.24(a) 4.2. Valoración gravimétrica.- Filtrar sobrefiltro poroso número 2, tarado y puesto sobre elKitasato, recogiendo el precipitado. Lavar el vaso enel que se ha efectuado la precipitación y arrastrar lasúltimas partículas de precipitado con el líquido ya filtrado.Secar en estufa a 70° hasta peso constante.24(a).5. Cálculo.Calcular el ácido tartárico expresado en g/l devino o en g de potasio bitartrato.Acido tartárico = 28,84 x P g/l53

54Acido tartárico = 36,15 x P g de potasio bitartrato.P = peso en g del calcio racemato, cristalizadocon cuatro moléculas de agua.24(a).6. Referencia.24(a).6.1. Jaulmes, P.; Brum, S.; Cabanis, J.“Comunicación número 304 de Métodos de Análisisde Vinos”. 0. I. V., 1969.24(b). ACIDO TARTARICO TOTAL(Método complexométrico)24(b).1. Principio.Como en 24(a).1.24(b).2. Material y aparatos.24(b).2. (1, 2, 3, 4) como 24 (a) .2. (1, 2, 3, 4).24(b).3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO182120 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 0,05 mol/l (0,05M) SV(Acido EDTA Na 2 0,05M SV) (o prepararcon 131669 Acido EDTA Na 22-hidrato PA-ACS-ISO)131074 Agua PA-ACS211276 Magnesio Oxido QP171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV272172 Tampón, Solución pH 9,00 ±0,02 (20ºC) ST(o preparar con 131121 Amonio CloruroPA-ACS-ISO, 121129 Amoníaco 25% (en NH 3 )PA y Agua PA-ACS)24(b).3.1. Solución Tampón pH 9,00 ±0,02(20ºC) ST, o preparar mezclando 54 g de AmonioCloruro PA-ACS-ISO, 350 ml de Amoníaco 25% (enNH 3 ) PA y completar con Agua PA-ACS hasta unlitro.24(b).3.2. Indicador de Negro de Eriocromo T.Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645)RE-ACS con 100 g de Sodió Cloruro PA-ACS-ISO.24(b).3.3. Solución de Magnesio 0,05M. Disolver2,25 g de Magnesio Oxido QP (para asegurar queno esté carbonatado se recomienda calcinar 5 g deMagnesio Oxido QP al rojo en horno eléctricodurante 30 minutos, enfriar y pesar 2,25 g). Hacer ladisolución en cantidad necesaria de Acido Clorhídricodiluido (10%) y luego se enrasa a un litro.Valorar esta solución con Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV enpresencia de Negro de Eriocromo T.24(b).3.4. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica2-hidrato PA-ACS-ISO en 1 litro de Agua PA-ACS.24(b).3.5. Acido Clorhídrico diluido a 1/5 (v/v).Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.24(b).3.6. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.24(b).4. Procedimiento.Disolver en 10 ml de Acido Clorhídrico diluido elprecipitado de Racemato recogido sobre el crisol filtrante.Lavar el crisol filtrante con unos 50 ml deAgua PA-ACS. Añadir un volumen de Sodio Hidróxido1 mol/l (1N) SV suficiente para neutralizar lasolución (unos 20-22 ml). Añadir después 5 ml deSolución Tampón pH = 9, 5 ml de sal de magnesio0,05M y 50 mg de indicador Negro de Eriocromo T.Valorar con Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 0,05 mol/l (0,05M) SV.24(b).5. Cálculo.Acido tartárico en g/l de vino = (V - 5) 3,75.Acido tartárico expresado en g/l de potasio bitartrato= (V - 5) 4,70.V = volumen en ml de ácido EDTA Na 2 0,05M.La expresión de los resultados será en potasiobitartrato y con una aproximación de 0,5 miliequivalentespor litro, o de 0,05 g / l.25. ACIDO LACTICO25.1. Principio.Aislamiento del ácido láctico mediante columnade resinas cambiadoras de aniones, oxidación aacetaldehído y valoración colorimétrica por la reaccióncoloreada del acetaldehído con la piperidina.25.2. Material y aparatos.25.2.1. Espectrofotómetro y accesorios.25.2.2. Tubo de vidrio o bureta de 10-11 mm dediámetro y 30 cm de longitud con llave en la parteinferior.25.2.3. Lana de Vidrio, lavada QP.25.2.4. Resina Lewatit ® MP 600 (*) (aniónica fuerte l)25.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131034 Acido L(+)-Lactico 85% PA-ACS182105 Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV131074 Agua PA-ACS121248 Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA211376 Lana de Vidrio lavada QP162377 Piperidina PSResina Lewatit ® MP 600(aniónica fuerte I)131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO141717 Sodio Sulfito anhidro PRS

M25.3.1. Solución de Cerio IV Sulfato 0,1M enAcido Sulfúrico 0,7N. Disolver en frío 40,431 g deCerio IV Sulfato 4-hidrato PA en 350 ml de AcidoSulfúrico 1 mol/l (2N) SV exactamente valorado. Nocalentar, pues se formaría un cerio IV óxido insoluble.Llevar la solución a 1.000 ml con Agua PA-ACS.25.3.2. Solución valorada de Sodio Hidróxido2,5N. Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentraciónindicada y determinar el factor.25.3.3. Solución de Sodio Acetato al 27%. Disolver270 g de Sodio Acetato anhidro PA-ACS enAgua PA-ACS y completar 1.000 ml.25.3.4. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.25.3.5. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.Disolver 2 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA enAgua PA-ACS, después completar a 100 ml. Conservartapado en la oscuridad. La solución no debetener más de ocho días.25.3.6. Solución de Piperidina al 10%. Llevar aun matraz de 100 ml, 10 ml de Piperidina PS y enrasara 100 ml con Agua PA-ACS.(*). En el original indica “resina cambiadora de aniones”.Consideramos apropiada la aniónica fuerte I.25.4. Procedimiento.25.4.1. Preparación de la columna de resinasaniónicas. Colocar Lana de Vidrio lavada QP en elfondo del tubo o bureta 25.2.2, formando tapón de2-3 mm de altura proximadamente, añadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapónde Lana de Vidrio, lavada QP. Añadir después laResina Lewatit ® MP 600, que estará conservada enAcido Acético glacial al 30%, agitar esta suspensióny añadir rápidamente un volumen de unos 10 ml.Dejar sedimentar y después depositar en la superficieun tapón de Lana de Vidrio lavada QP que seconduce a través del líquido sin resinas con unavarilla de vidrio.La Resina Lewatit ® MP 600 no sirve más quepara una sola vez.25.4.2. Aislamiento del Acido Láctico. Abrir lallave inferior de la columna y dar salida al Acido Acéticodiluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapónde lana superior. Añadir unos 10 ml de Acido Acéticoal 0,5%, vaciar hasta igual altura y repetir estoslavados cuatro veces.Después del último lavado, y con llave cerrada,adicionar 10 ml del vino y señalar la altura alcanzada,con lápiz graso. Dejar salir goteando el vinoa razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml porminuto). Vaciar hasta el nivel del tapón de Lana deVidrio lavada QP superior. Llenar de nuevo lacolumna con Acido Acético al 0,5% hasta la señalde lápiz graso. Dejar salir a la misma velocidadque la vez anterior y lavar después en la mismaforma siete veces, cada vez con 10 ml de AguaPA-ACS.Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuandoel nivel del líquido se encuentre un poco más arribadel tapón de Lana de Vidrio lavada QP superior.Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml.Eluir los ácidos fijados en el cambiador de anionesmediante adiciones de solución de Sodio Sulfito0,5M (prepararlo disolviendo Sodio Sulfito anhidroPRS en Agua PA-ACS), hasta la señal trazada en eltubo.Resulta práctico, para realizar esta operación,colocar un frasco con la solución de Sodio Sulfitounido por el cuello a la columna mediante un manguitode caucho y con unas pinzas para regular lacaída del líquido en la bureta o tubo. Puestos así encomunicación los dos aparatos (frasco y bureta otubo), abrir las pinzas del caucho de unión y la llaveinferior, dejando caer el líquído a la bureta hastaunos 10 cm de altura, y sin que queden huecosvacíos. Se regula la salida del líquido a la proporciónde 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz receptorhasta el enrase.25.4.3. Valoración del Acido Láctico. Introducir10 ml del eluido en un tubo de ensayo de paredesque no sean gruesas y de unos 50 ml de capacidadcon tapón. Añadir 10 ml del reactivo de Cerio IV Sulfato.Agitar e introducir el tubo de ensayo en un termostatoa 65°C durante 10 minutos exactamente.Inmediatamente después de la inmersión en el líquido,destapar durante unos segundos, para dar salidaal aire dilatado. Cerrar rápidamente con el tapónpara evitar pérdidas del Acetaldehído formado.Después de 10 minutos, retirar y enfriar el tubo conagua corriente hasta la temperatura de 20°C.Añadir 5 ml de la solución de Sodio Hidróxido2,5N, mezclar bien y filtrar.Tomar 15 ml del filtrado y verterlos en probeta detapón esmerilado de 50 ml de capacidad, que contenga5 ml de solución de Sodio Acetato al 27% y2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV. Añadir además5 ml de solución de Sodio Nitroprusiato y mezclarbien. Añadir después 5 ml de solución de Piperidina,mezclar rápidamente, introducir en seguidaen la cubeta del espectrofotómetro de 10 mmde espesor. Medir la coloración producida, quevaría, de verde a violeta, con relación al aire a la longitudde onda de 570 nm. Esta coloracion aumentaal principio, pero disminuye en seguida rápidamente.Tomar como valor definitivo el valor máximo de lalectura de absorbancia.Si el eluido es muy rico en Acido Láctico y ladensidad óptica es muy elevada, diluir el eluido consolución de Sodio Sulfato al 7,1%.25.4.4. Curva patrón. Tomar 10 ml de una soluciónde Acido Láctico 1N exacta, y añadir 10 ml deSodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y completar a unlitro con solución de Sodio Sulfato al 7,1%. Tomar 5,10, 15, 20 y 25 ml, respectivamente, e introducircada alícuota en un matraz aforado de 100 ml.Enrasar con solución de Sodio Sulfato al 7,1%.55

56Mezclar bien, tomar 10 ml de las soluciones asíobtenidas y determinar los valores de las absorbanciasrespectivas.Las diferentes soluciones corresponden a eluidodel vino conteniendo 0,45; 0,90; 1,35; 1,80 y 2,25g/l de Acido Láctico.La representación gráfica de las absorbanciasde estas soluciones en función de la riqueza enAcido Láctico, es una recta.25.5. Cálculo.Llevar los valores de absorbancia obtenidos a lacurva patrón y deducir los correspondientes contenidosen ácido láctico expresados en g/l.25.6. Observaciones.Si el vino tiene más de 250 mg por litro de sulfurosototal, el resultado puede ser erróneo, por lapresencia de ácido aldehído sulfuroso. En determinacionesde precisión, conviene realizar una correcciónen la forma siguiente:Tomar 15 ml de eluido y llevar a probeta detapón esmerilado, en la que se habrá añadido 5 mlde sodio acetato al 27% y 2 ml de ácido sulfúrico1,55N (77,5 ml de ácido sulfúrico 2N diluidos a100 ml con agua destilada). Añadir 5 ml de sodionitroprusiato al 2% y 5 ml de piperidina al 10%.Mezclar y hacer la determinación espectrofotométricaa 570 nm que da el factor de corrección:L = L’ - C x 0,25L = contenido real de ácido láctico expresado eng/l.L’ = contenido aparente de ácido láctico expresadoen g/l.C = factor de corrección en g/l.25.7. Referencia.25.7.1. Rebelein, M. “Deutsche Lebens-mittelRudshan”, 2: 36-41, 1961, y 59: 131, 1963.26. ACIDO CITRICO26.1. Principio.El ácido cítrico es fijado junto con los otros ácidosdel vino por una resina cambiadora de aniones.Después se procede a la elución, la que se realizafraccionadamente y separando el ácido citromálicoque es causa de error en la valoración del ácidocítrico.El ácido cítrico es transformado por oxidacióncuidadosa en acetona, la que se separa por destilación.El etanal arrastrado se oxida a ácido acético yse valora sola la acetona por yodometría.26.2. Material y aparatos.26.2.1. Columna cambiadora de aniones. Enuna bureta de llave de 25 ml de capacidad, colocarun tapón de Lana de Vidrio, lavada QP en el fondoy verter 20 ml de Resina Dowex 1 x 2.Someter la Resina a dos ciclos completos deregeneración con pasos alternos de Acido Clorhídrico1mol/l (1N) SV y Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.Lavar después con 50 ml de Agua PA-ACS, agitandola Resina Dowex cuando los primeros ml deAgua PA-ACS pasan por la columna para despegarladel fondo de la bureta.Saturar la Resina de iones acetato, mediante elpaso de 250 ml de una solución de Acido Acético4N. Lavar luego con 100 ml de Agua PA-ACS.26.2.2. Aparato para la oxidación. Aparato compuestode matraz de cuello largo, atravesado lateralmentepor el tubo afilado de embudo con llave, yen comunicación con refrigerante, según dimensionesy forma del diseño (fig. 26.I).26.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121793 Hierro II Sulfato 2-hidrato PA211376 Lana de Vidrio, lavada QP131413 Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS211456 Piedra Pómez gránulos QP131509 Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO182114 Potasio Permanganato 0,01 mol/l(0,05N) SVResina DOWEX 1 x 2 (50-100 mallas)181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV26.3.1. Resina Dowex 1 x 2 (50-100 mallas)26.3.2. Solución de Acido Acético 4N. DiluirAcido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS a la concentración indicada y determinar elfactor.26.3.3. Solución de Acido Acético 2,5N. DiluirAcido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS a la concentración indicada y determinar elfactor.26.3.4. Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV.26.3.5. Acido Sulfúrico diluido al 1/5 (v/v). DiluirAcido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.26.3.6. Solución Tampón pH = 3,2-3,4. En unmatraz aforado de 1 l introducir 150 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido

Morto-Fosfórico (d = 1,689) y enrasar con Agua PA-ACS. (Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISOcon Agua PA-ACS hasta obtener la densidad indicada)26.3.7. Solución de Manganeso Sulfato de 50 g/l.Disolver Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS enAgua PA-ACS.26.3.8. Piedra Pómez gránulos QP.26.3.9. Potasio Permanganato 0,01 mol/l(0,05N) SV.26.3.10. Acido Sulfúrico diluido a 1 (v/v).26.3.11. Solución de Potasio Permanganato 2N.Disolver Potasio Permanganato PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS, ajustar a la concentración indicada ydeterminar el factor.26.3.12. Solución de Hierro II Sulfato de 40 g por100.26.3.13. Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV.26.3.14. Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV.26.3.15. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N.Diluir exactamente 1:5 de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor.26.3.16. Almidón soluble RE.26.4. Procedimiento.26.4.1. Separación de los ácidos cítrico y citromálico.Hacer pasar 25 ml del vino a través de lacolumna cambiadora de aniones Dowex 1 x 2 enforma acética a razón de 3 ml cada dos minutos.Lavar la columna con 20 ml de Agua PA-ACS entres veces. Eluir los ácidos con 200 ml de soluciónde Acido Acético 2,5N que se hace pasar por lacolumna a la misma velocidad. En esta fracción deeluido se encuentra, entre otros ácidos, el ácidocitromálico que interesa eliminar.Eluir los ácidos cítricos y tartáricos haciendopasar a través de la columna 100 ml de SodioHidróxido 2 mol/l (2N) SV y recoger el eluido en elmatraz del aparato de oxidación y destilación descrito26.4.2. Oxidación. En el matraz que contiene yael eluido anterior, añadir Acido Sulfúrico diluido al1/5 (unos 20 ml) para llevar el pH a 3,2-3,8, 25 mlde Solución Tampón pH = 3,2-3,4, 1 ml de soluciónde Manganeso II Sulfato y algunos gramos de PiedraPómez gránulos QP. Tapar y conectar el matrazcon el refrigerante, calentando hasta ebullición.Separar los primeros 50 ml destilados.Colocar Potasio Permanganato 0,01 mol/l(0,05N) SV en el embudo lateral de llave, y verter enel matraz a razón de una gota por segundo, cayendoen el eluido en ebullición. El destilado se recogeen frasco de 500 ml de tapón esmerilado que contieneunos ml de Agua PA-ACS. Continuar la oxidaciónhasta que la coloración parda del líquido acuseun exceso de permanganato.26.4.3. Separación de la acetona. Si el volumendel destilado es inferior a 90 ml, completar conAgua PA-ACS hasta este volumen: añadir después4,5 ml de Acido Sulfúrico al 1/3 y 5 ml de una soluciónde Potasio Permanganato 2N.Si el volumen del destilado excede de los 90 ml,completar a 180 ml con Agua PA-ACS y utilizar ladosis doble de reactivos.En estas condiciones (medio Acido Sulfúrico0,5N y Potasio Permanganato 0,1N), el alcohol etílicoes oxidado a ácido acético y la acetona permaneceintacta.Tapar el frasco, dejar en reposo durante 45minutos a la temperatura ambiente. Al cabo de estetiempo se destruye el exceso de permanganato adicionandosolución de Hierro II Sulfato.Destilar después y recoger 50 ml aproximadamentede destilado en un frasco de tapón esmeriladoque contenga 5 ml de Sodio Hidróxido 5 mol/l(5N) SV.Figura 26.l57

5826.4.4. Valoración de la acetona, añadir al contenidodel frasco 25 ml de Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV,si la dosis de Acido Cítrico es superior a 0,5-0,6 g/lserá necesario añadir más solución de Yodo, hastaque quede color amarillento que indicará este exceso.Duplicar o triplicar las dosis de Yodo hasta llegara este punto, pero si la riqueza en Acido Cítrico esmayor de 1,5 g, comenzar otra vez el análisis consólo 10 ml de vino.Dejar en contacto el Yodo añadido durante 20minutos permaneciendo el frasco tapado. Añadir8 ml de Acido Sulfúrico al 1/5 y valorar el exceso deyodo con Sodio Tiosulfato 0,02N en presencia deAlmidón soluble RE.Hacer una valoración en blanco en las mismascondiciones sustituyendo los 50 ml de destilado por50 ml de Agua PA-ACS.26.5. Cálculo.Calcular el contenido en ácido cítrico expresadoen g/l.V’ - V”Acido cítrico = 0,64 ———— g/lVV = volumen en ml de la muestra de vino.V’ = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N utilizadoen la valoración en blanco.V” = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N utilizadoen la valoración del yodo en exceso.26.6. Referencia.26.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V., A29, 1-3, 1969.27. SULFATOS27.1. Principio.Precipitación del bario sulfato en el vino, previamentedesprovisto de anhídrido sulfuroso por ebulliciónal abrigo del aire.27.2. Material y aparatos.27.2.1. Matraz cónico (Erlenmeyer) de 500 ml,provisto de ampolla con llave de 100 ml y de desprendimientode vapor, atravesando ambos eltapón. El matraz se coloca sobre disco metálico de15 cm de diámetro con abertura circular de 8 cm dediámetro.27.2.2. Vaso cilíndrico de 400 ml.27.2.3. Baño de agua o plancha caliente a 60°C.27.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO27.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.27.3.2. Bario Cloruro, 100 g de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.27.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.27.4. Procedimiento.27.4.1. Eliminación del anhídrido sulfuroso delvino. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descrito50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhídrico37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución para eliminarel aire del aparato. Introducir 100 ml del vinopor la ampolla de llave evitando que la ebullición separe durante esta adición. Continuar la ebulliciónhasta reducir el volumen del líquido a unos 100 ml,eliminando así todo el SO 2 .27.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar elresiduo de la evaporación anterior a un vaso de400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad deAgua PA-ACS suficiente para llevar el volumen totala 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l(2N) y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota 10 mlde solución de Bario Cloruro, con la precaución deno parar la ebullición y dejar reposar en caliente,colocando el vaso sobre placa a 60° durante cuatrohoras y en baño de agua hirviendo durante doshoras. En el caso de pequeñas cantidades de precipitado,se recomienda un segundo reposo en fríodurante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavarel vaso y precipitado con Agua PA-ACS calientehasta que no dé reacción con Plata Nitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado acrisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, despuésde enfriar en un desecador, pesar.27.5. Cálculo.Calcular el contenido de sulfatos expresado enmeq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproximaciónde ± 0,05 g/l.Sulfato = 85,68 P meq/l.Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.P = peso de las cenizas en g.27.6. Referencias.27.6.1. Deibner, P.; Bernard, P. “Industries Alimentaireset Agricoles”, 71: 1, 23 y 5, 427,1954.27.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V., A14, 1-4. 1969.

M28(a). ANHIDRIDO SULFUROSO(Método Paul)28(a).1. Principio.Liberación de sulfuroso “libre” por acidificacióndel vino, arrastre por corriente de aire, oxidación porbarboteo en agua oxigenada neutra y valoracióncon sodio hidróxido del ácido sulfúrico formado.Liberación por ebullición moderada del sulfuroso“combinado”, que queda en el vino después de laextracción del sulfuroso “libre”, y análogo tratamientoque en la determinación del sulfuroso “libre”. Elsulfuroso “total” es la suma del sulfuroso “libre” y elsulfuroso “combinado”. Puede determinarse acidificandoel vino y calentando y procediendo como enlos dos casos anteriores.28(a).2. Material y aparatos.Utilizar el aparato representado en la figura28(a).I.28(a).2.1. Matraz de 100 ml o de 250 ml.28(a).2.2. Tubo barbotador provisto de bola huecaen un extremo con unos 20 orificios de 0,2 mmde diámetro alrededor del círculo máximo horizontal.28(a).2.3. Refrigerante que condense vapores ydeje pasar el gas en recorrido seguro.28(a).2.4. Frasco con agua y con tapón atravesadopor el tubo que comunica con el barbotadorpara hacer vacío, y otro tubo sumergido en el aguapara acusar la intensidad del vacío por la depresiónde la columna de agua en el interior del tubo,depresión que debe mantenerse entre 20-30 cm.El gasto de vapor será de 40 l/h.28(a).2.5. Baño de agua regulable a 10°C.28(a).3. Reactivos.131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC121085 Etanol 96% v/v PA141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)PRS171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV28(a).3.1. Acido Fosfórico aI 25% (p/v). Diluirconvenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.28(a).3.2. Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenes59Figura 28(a).I. Las dimensiones están indicadas en mm. Los diámetros interiores de los cuatro tubos concéntricosque constituyen el refrigerante son 45, 34, 27 y 10 mm

60por 100. Diluir convenientemente Hidrógeno Peróxido30% p/v (100 vol.) PRS con Agua PA-ACS.28(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,01N. En un matrazaforado diluir a 1:10, Sodio Hidróxido 0,1 mol/l(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factorde la solución obtenida 0,01N.28(a).3.4. Indicador. Mezclar 100 mg de Rojo deMetilo (C.I. 13020) RE-ACS, 50 mg de Azul de Metileno(C.I. 52015) DC y 100 ml de Etanol de 50°.Diluir convenientemente Etanol 96% v/v PA conAgua PA-ACS.28(a).4. Procedimiento.28(a).4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre.En el matraz de 100 ml del aparato poner 10 ml delvino y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al 25%, colocandoacto seguido el matraz en su sitio. Si la riquezaen SO 2 del vino es pequeña, se emplea el matrazde 250 ml y se ponen 20-25 ml de vino.Sumergir el matraz en un baño de agua a 10°C.Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3volúmenes y dos gotas del reactivo Indicador en elbarbotador y neutralizar el Hidrógeno Peróxido conSodio Hidróxido 0,01N.Adaptar el barbotador al aparato y hacer barbotarel aire (o nitrógeno) durante 12-15 minutos.Arrastrar el anhídrido sulfuroso libre y después oxidara H 2 SO 4 . Retirar el barbotador y valorar el ácidoformado con solución de Sodio Hidróxido 0,01N.28(a).4.2. Análisis del anhídrido sulfuroso combinado.Después de terminar la valoración del anhídridosulfuroso libre, colocar en el barbotador ya limpio,los 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizadoy con las dos gotas del indicador. Calentar con llamapequeña hasta llevar a la ebullición el vino quequedó en el matraz despojado del anhídrido sulfurosolibre por la determinación anterior. Aplicar el fuegodirecto sobre el fondo del matraz, que descansarásobre chapa metálica perforada con orificiode 30 mm de diámetro, para evitar la pirogenaciónde las materias extractivas del vino sobre las paredesdel matraz. Mantener el paso del aire o nitrógenodurante la ebullición, que durará 12-15 minutos,tiempo que se considera suficiente para arrastrartodo el sulfuroso combinado, y después oxidarlo.Continuar como en 28(a).4.1 a partir de “Colocar2-3 ml de Hidrógeno Peróxido...”.28(a).4.3. Anhídrido sulfuroso total. Puededeterminarse por la suma anhídrido sulfuroso libremás anhídrido sulfuroso combinado, pero tambiénpuede determinarse directamente, actuandodesde un principio con corriente de aire y concalor.28(a).5. Cálculo.Calcular el contenido en anhídrido sulfurosoexpresado en mg/l con una aproximación de10 mg/l.Anhídrido sulfuroso = 32 V mg/l.V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.28(a).6. Observaciones.Para vino sensiblemente picado (con más de2 g/l de acidez acética) puede arrastrarse con elanhídrido sulfuroso, ácidos volátiles, especialmentecuando la corriente de aire es intensa.Corregir determinando la acidez volátil presenteen el líquido del barbotador, operando de la siguienteforma:Después de la neutralización con el sodio hidróxidoal valorar la acidez, añadir un cristal de 131066Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO y llevar el contenidodel barbotador al aparato de determinación de laacidez volátil por destilación en corriente de vapor.Restar despues del resultado anterior la parte deacidez correspondiente a los ácidos volátiles.28(a).7. Referencias.28(a).7.1. Paul, F. “Mitteilungen Klosternenberg”,A: 8, 21, 1958.28(a).7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 1-8, 1969.28(b). ANHIDRIDO SULFUROSO(Método Ripper doble)28(b).1. Principio.Valoración yodométrica del SO 2 operando directamentecon el vino.Para evitar el error introducido por la recombinaciondel sulfuroso liberado de su combinación conlos aldehídos, durante la valoración volumétrica, sehace una segunda valoración, después de nuevaliberación del SO 2 recombinado.28(b).2. Material y aparatos.28(b).2.1. Erlenmeyer de 500 ml y material parauna volumetría.28(b).3. Reactivos.Acetaldehído131669 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO(Acido EDTA Na 2 2-hidrato)131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121428 Mercurio II Yoduro rojo PA182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV28(b).3.1. Sodio Hidróxido 4N. En un matrazaforado diluir a 4:5, Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SVcon Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución4N obtenida.

M28(b).3.2. Acido Sulfúrico al 1/10 en volumen(180 g/l). Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO con Agua PA-ACS.28(b).3.3. Engrudo de almidón preparado de lasiguiente forma:Pesar 2,5 g de Almidón soluble RE y triturarlo enun mortero junto con 10 mg de Mercurio II Yodurorojo PA. Llevar a un vaso y añadir un volumen deAgua PA-ACS suficiente para poder hervir la suspensióncon fluidez. Llevar después ésta a matrazcon 1 litro de Agua PA-ACS en ebullición, que semantiene durante 10 minutos. El líquido obtenidoestará limpio y si es necesario se filtra.28(b).3.4. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.28(b).3.5. Sodio Tiosulfato 0,01N. En un matrazaforado diluir a 1:5, Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l(0,05N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factorde la solución 0,01N obtenida.28(b).3.6. Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.28(b).4. Procedimiento.Colocar en el Erlenmeyer de 500 ml, 50 ml delvino, 3 ml de Acido Sulfúrico al 1/10, 5 ml de Engrudode Almidón y 30 mg de Acido EtilendiaminotetraaceticoSal Disodica 2-hidrato PA-ACS-ISO (conel fin de evitar la oxidación del SO 2 libre durante lavaloración).Homogeneizar la solución y añadir con buretaYodo 0,025 mol/l (0,05N) SV hasta coloración azuldel almidón, que primero será fugaz, y netamentepersistente después, durante 10-15 segundos,considerándola entonces aceptable. Sea V el volumendel yodo empleado.Añadir 8ml de solución de Sodio Hidróxido 4N,agitar una sola vez y dejar en contacto durante 5minutos. Después verter, de un solo golpe y agitandoenérgicamente, 10 ml de Acido Sulfúrico a 1/10.Se valora inmediatamente con Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV el SO 2 liberado. Sea V’ el volumen en mlde solución de yodo empleado.Se añade después 20 ml de Sodio Hidróxido4N, se deja en contacto durante 5 minutos despuésde haber agitado una sola vez. Se diluye con 200 mlde Agua PA-ACS bien fría, agitar después enérgicamentey añadir 30 ml de Acido Sulfúrico al 1/10 yvalorar con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO 2 liberado.Sea V” el volumen en ml de la solución deyodo empleado.Con estas valoraciones se corrige el error quepuede originarse por la recombinación de parte delSO 2 ya liberado de los aldehídos, con el mismoaldehído que estará presente en el líquido que sevalora.También es posible causa de error, y especialmentecuando se trate de vinos tintos ricos en colory extractos, el consumo de yodo por estas sustancias;para corregir este error se opera de la manerasiguiente:Adicionar a 50 ml del vino, colocados en unErlenmeyer de 300 ml, un exceso de Acetaldehídopara que sea capaz de combinarse con todo el SO 2libre; dicha cantidad puede ser de unos 5 ml desolución de Acetaldehído, de 7 g por litro. Se tapael matraz y después de un reposo de 30 minutos,como mínimo, se añaden 3 ml de Acido Sulfúricodiluido al 1/10 y después los de Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV necesarios hasta el viraje de almidón.Sea V’’’ el volumen en ml necesarios.La presencia de ácido ascórbico también puedeser causa de error. Descontar el yodo correspondiente,considerando que 1 ml de Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV es consumido por 4,4 mg de ácidoascórbico.28(b).5. Cálculo.SO 2 libre = 32 (V - V’’’) mg/l.SO 2 combinado = 32 (V’ + V”) mg/l.SO 2 total = 32 (V + V’ + V” - V’’’) mg/l.Con aproximación de 10 mg/l.28(b).6. Observaciones.Para vinos pobres en SO 2 , es convenienteemplear yodo más diluido, solución 0,02N, reemplazandoentonces el coeficiente 32 por el de 12,8en los cálculos.En los vinos tintos es conveniente, para apreciar elviraje, iluminar con luz amarilla el fondo del Erlenmeyerdonde está el vino. Hay dispositivos sencillos abase de simple bombilla con filtro preparado consolución de potasio cromato, o bien con luz amarillade lámpara de vapor de sodio.Cuando haya un interés especial en la determinacióndel SO 2 libre, debe dejarse la muestra enreposo durante 4 días, al abrigo del aire y a temperaturade 20°C. El análisis se realizará también a20ºC.28(b).7. Referencias.28(b).7.1. Jaulmes, P. y Dienziede. “MéthodeRipper double d’analyse de SO 2 . Bol.”. O. I. V., 274.52-54, 1959.28(b).7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 7. 1969.29. ACIDO SORBICO29.1. Principio.El ácido sórbico arrastrado por el vapor de agua(constante de volatilidad 0,59), se valora en el destiladopor espectrofotometría en el ultravioleta.29.2. Material y aparatos.29.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta y cubetasde cuarzo de 1 cm de espesor.61

6229.2.2. Matraces aforados de 20 ml y de 1 litro.29.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.29.3. Reactivos.141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX(o 121531 Potasio Sorbato PA)131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA29.3.1. Solución (a) (destinada a catalizar la oxidacióndel ácido sulfuroso por el aire). Mezclar 0,5 gde Sodio Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadirAgua PA-ACS hasta 1.000 ml.29.3.2. Solución (b) de Acido Sórbico (USP-NF)PRS-CODEX de 20 mg/l. Introducir 20 mg de AcidoSórbico (USP-NF) PRS-CODEX en un matraz aforadode 1 litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACScaliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a 1 litro.En vez de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEXpuede emplearse 26,8 mg de Potasio Sorbato PA.29.4. Procedimiento.Destilar como en 21.4, 20 ml de vino adicionadode 1-2 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.Recoger 320-330 ml de destilado para conseguir lamás completa extracción del Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, que requiere unos 100 ml másque los necesarios para la acidez volátil.Tomar 5 ml del destilado, colocar en un matrazaforado 20 ml y enrasar con la solución (a).Llenar con esta mezcla una cubeta de cuarzo de1 cm de espesor. Dejar la cubeta al aire duranteunos minutos. Determinar la absorbancia a 256 nm.Para la prueba en blanco, sustituir los 5 ml de destiladopor 5 ml de Agua PA-ACS.Para obtener la curva patrón, determinar laabsorbancia de soluciones que contengan 0,5, 1,2,5 y 5 mg/l de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX obtenidas diluyendo con Agua PA-ACS lasolución (b). La gráfica correspondiente a estosvalores es una línea recta.29.5. Cálculo.Calcular el ácido sórbico expresado en mg/l.Acido sórbico = 0,2 . C . V mg/l.C = contenido en mg/l de ácido sórbico determinadopor comparación con curva patrón.V = volumen en ml de destilado.29.6. Referencias.29.6.1. Jaulmes, P.; Mestres, R. y Mandrou, B.“Annales des Falsifications et de l’Expertise Chimique”,111, 1961.29.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V., A30, 1-3, 1969.30. CLORUROS30.1. Principio.Determinación directa de cloruros por potenciometríautilizando el electrodo Ag/AgCl.30.2. Material y aparatos.30.2.1. pH-metro con escala que permita apreciar2mV.30.2.2. Agitador magnético.30.2.3. Electrodo Ag/AgCl, con una soluciónsaturada de potasio nitrato como electrolito.30.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.30.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISOPotasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)30.3.1. Solución patrón de cloruros.- Disolver2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)puro para análisis (máximo 0,005% de bromo) previamentedesecado, en Agua PA-ACS hasta 1 litro.1 ml de esta solución contiene 1 mg de ion Cloro.30.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en una soluciónal 10% v/v de Etanol 96% v/v PA en Agua PA-ACS, hasta un litro. 1 ml de esta solución correspondea 1 mg de ion Cloro.30.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.30.4. Procedimiento.30.4.1. Determinación del potencial del punto deequivalencia.Introducir 5,0 ml de la solución patrón de clorurosen un vaso de 150 ml.Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70%PA-ACS-ISO (30.3.3). Introducir los electrodos.Añadir 10 ml de la solución de Plata Nitrato, agitandomoderadamente: adicionar los cuatro primerosml en fracciones de 1 ml y leer las correspondienteslecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, enfracciones de 0,2 ml y continuar adicionando enfracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzadoun total de 10 ml. Después de cada adición esperarunos treinta segundos antes de hacer la correspondientelectura en milivoltios. Llevar los valores asíobtenidos sobre un papel milimetrado en funciónde los correspondientes ml de solución de PlataNitrato y a partir del punto singular de la curvaobtenida determinar el potencial del punto de equivalencia.Para comprobar el potencial del punto de equivalencia,llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la

Msolución patrón de cloruros, 95 ml de Agua PA-ACSy 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Introducirel electrodo y valorar agitando, justamente hasta elpotencial del punto de equivalencia.Repetir esta operación hasta obtener una buenaconcordancia de resultados. Este control debeefectuarse antes de determinar la concentración decloruros en cada serie de muestras a analizar.30.4.2. Determinación.Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vino.Añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1,0 ml de AcidoNítrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuaciónsiguiendo el procedimiento descrito anteriormentehasta alcanzar el potencial del punto de equivalencia.30.5. Cálculo.La cantidad de cloruros se determina mediantelas expresiones:0,02 n en g de ion cloro.0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion cloro.0,0329 n en g de sodio cloruro por litro.Siendo:n = volumen, en ml, de solución de plata nitratonecesario para alcanzar el potencial del punto deequivalencia.30.6. Referencia.30.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. A 15j.31. ACIDO BENZOICO31.1. Principio.Extracción por el éter del ácido benzoico presenteen el vino. Tratamiento del extracto por lamezcla nitro-sulfúrica y formación del ácido 3,5-dinitrobenzoico, que es extraído con éter y despuésrecogido por la mezcla acetona-alcohol. La adiciónde sodio hidróxido da origen a una coloración violeta.Esta reacción es sensible, específica y cuantitativa,siempre que se opere en condiciones que asegurenla transformación del ácido benzoico encompuesto coloreado medible en el espectrofotómetroa 570 nm.31.2. Material y aparatos.31.2.1. Espectrofotómetro que permita lecturasa 570 nm.31.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.31.2.3. Matraces de 100 ml aforados.31.2.4. Cápsulas.31.2.5. Baño de agua.31.2.6. Matraces aforados de 50 ml.31.2.7. Erlenmeyer de 50 ml.31.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO121014 Acido Benzoico PA131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA121085 Etanol 96 v/v PA132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO131524 Potasio Nitrato PA-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO31.3.1. Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.31.3.2. Mezcla Acetona-Etanol: Mezclar 1.000 mlde Acetona PA-ACS-ISO con 1.000 ml de Etanolabsoluto PA.31.3.3. Mezcla Nitro-Sulfúrico: Añadir a 10 g dePotasio Nitrato PA-ISO, 100 ml de Acido Sulfúrico96% PA-ISO.31.3.4. Solución Sodio Hidróxido-Etanol al 5%.Añadir a 5 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO (sin Na 2 CO 3 ) 50 ml de Agua PA-ACS.Después de fría la mezcla se añade Etanol 96%v/v PA hasta 100 ml.La solución debe quedar limpia.31.4. Procedimiento.Vinos secos o con riqueza en azúcar de 100 g/l.Añadir a 10 ml de vino puestos en ampolla dedecantación 2 ml de Acido Sulfúrico al 25% y 25 mlde Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm de BHTPA-ACS-ISO, dos veces seguidas. Decantar y filtrarel Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm de BHTPA-ACS-ISO, por papel seco, llevarlo a matraz aforadode 50 ml y enrasar.Poner 20 ml de la solución de Eter Dietílico enErlenmeyer de 50 ml, evaporar aspirando los vaporesmediante vacío, permaneciendo el Erlenmeyersumergido en baño de agua fría. Añadir al residuo5 ml de la mezcla Nitrosulfúrica cuidando de empaparbien todo el residuo. Llevar después al baño deagua hirviendo durante 35 minutos y agitando decuando en cuando, sobre todo al principio.Enfriar en agua fría, añadir 5 ml de Agua PA-ACS, seguir enfriando y verter el contenido en unaampolla de decantación de 250 ml. Enjuagar elErlenmeyer con 5 ml de Agua PA-ACS, volver a verterel contenido en la ampolla y añadir 30 ml de EterDietílico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar cinco minutos. Eliminar la fase acuosadespués de cuidadosa decantación y lavar el EterDietílico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO con 5 ml de Agua PA-ACS. Decantar con cuidado(un lavado más prolongado originaría pérdidasde dinitrobenzoico en la fase acuosa, por lo que espreferible decantar bien, que volver a lavar).Filtrar el Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm63

64de BHT PA-ACS-ISO por filtro revestido con SodioSulfato anhidro PA-ACS-ISO, lavar el filtro en seguidacon 10 ml de Eter Dietílico estabilizado con 6ppm de BHT PA-ACS-ISO. Evaporar el filtrado enuna pequeña cápsula a 35°, arrastrar con tres adicionesde 5 ml de Acetona-Etanol, cada vez (previamenteenfriado en nevera). Recoger todos estoslíquidos en un tubo de ensayo de tapón esmeriladoy aforado a 15 ml.En un tubo de ensayo de tapón esmerilado ycon trazo de aforo a 15 ml, poner de 0,5 a 5 ml dela anterior solución. Este volumen debe variar con lariqueza supuesta, para obtener la reacción coloreadacon el ácido dinitrobenzoico originado por 0,1 a0,5 mg de Acido Benzoico PA. El método es válidoentre 0,03 y 1 mg, si se utiliza aparato capaz demedir absorbancias superiores a 1,5.Diluir el volumen de líquido puesto en el tubo,con la mezcla Acetona-Etanol fría, hasta 14,7 ml yañadir después 0,3 m Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO diluido al 5% en Agua PA-ACS, agitar ysumergir en hielo fundente.Hacer la determinación en cubeta de 1/2-1 cm a570-580 nm después de 30 minutos y antes de 70minutos a partir del momento de la mezcla.Utilizar como solución compensadora para comparaciónuna mezcla de 14,5 de Acetona-Etanolcon 0,3 ml de Sodio Hidróxido al 5%.Para obtener la curva patrón, preparar una soluciónvalorada de 50 mg de Acido Benzoico PA en100 ml de Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm deBHT PA-ACS-ISO. Diluir esta solución a 1/10 conEter Dietílico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO y tratar 10 ml de esta solución de 50 mgpor litro, como se ha indicado antes para la muestra.La densidad de óptica varía linealmente con lacantidad de Acido Benzoico.31.5. Cálculo.Llevar la absorbancia obtenida a la curva patróny expresar el correspondiente contenido de ácidobenzoico en mg/l.31.6. Referencia.31.6.1. Spanyar, E,; Kerel, E. y Kiszel, M.“Zeitschrift für Lebenmittel Untersuchung und Forschung”,1958.32. BROMO TOTAL32.1. Principio.Saponificación cuidadosa, para evitar pérdidas,de los ésteres del ácido brómico, eventualmentepresentes en el vino, transformación del rojo defenol en azul de bromofenol, y valoración colorimétricao espectrofotométrica.32.2. Material y aparatos.32.2.1. Cápsula de sílice de 7 cm de diámetro.32.2.2. Baño de agua.32.2.3. Horno eléctrico, recomendable conregulador automático, para regular a 525°.32.2.4. Espectrofotómetro o colorímetro capacespara lectura a 584 nm.32.3. Reactivos.182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)PRS-CODEX121489 Potasio Bromuro PA171615 Rojo de Fenol RE-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO32.3.1. Solución de Sodio Hidróxido al 50%.Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS.32.3.2. Lechada de Cal 4N (224 g de Calcio Oxidonatural escoriforme QP por litro con Agua PA-ACS).32.3.3. Solución de Rojo de Fenol. Mezclar 0,24 gde Rojo de Fenol RE-ACS y 24 ml de Sodio Hidróxido0,1 mol/l (0,1N) SV. Añadir Agua PA-ACS hasta1.000 ml.32.3.4. Solución Tampón pH = 4,65. Mezclar500 ml de Acido Acético 2 mol/l (2N) SV, 250 ml deSodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y 250 mI de AguaPA-ACS.32.3.5. Solución oxidante. A 2 g de Cloramina T3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX añadir AguaPA-ACS hasta un litro.Preparar esta solución 48 horas antes de suempleo y sólo será válida hasta quince días.32.3.6. Solución reductora. Añadir a 25 g deSodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO AguaPA-ACS hasta un litro.32.3.7. Solución valorada de Potasio Bromuro.Añadir a 1,489 g de Potasio Bromuro PA Agua PA-ACS hasta un litro.Esta solución contiene 1 g de Bromuro por litro.En el momento de su empleo se hacen dos dilucionessucesivas a 1/10 y se tendrá la solución a emplearque contiene 10 microgramos de Bromo por ml.32.4. Procedimiento.Adicionar 0,5 ml de Sodio Hidróxido al 50% y1 ml de Lechada de Cal 4N a 50 ml del vino colocadosen una cápsula de cuarzo de 7 cm de diámetro.Esta adición proporciona un soporte infusible quepermite una buena combustión del carbón. Si el vinoes muy ácido conviene añadir antes sodio hidróxidopara llevarlo a pH 10 por lo menos.

MSi el vino contiene compuestos orgánicos debromo o antisépticos bromados, dejar por lo menos24 horas la muestra de vino alcalinizada, tapando lacápsula con un vidrio de reloj, con el fin de saturarlos ésteres del ácido bromoacético, que son muyvolátiles.Evaporar el líquido de la cápsula en baño deagua, calentar el residuo con pequeña llama o enbaño de arena para eliminar las últimas trazas deagua. Incinerar hasta cenizas blancas en el hornoeléctrico regulado a 525°C, sin pasar de esta temperaturapara evitar pérdidas por sublimación.Para facilitar la obtención de cenizas blancas,retirar la cápsula después de 15 minutos de incineración,dejar enfriar y humedecer las cenizas aún grisáceascon unas gotas de Agua PA-ACS, evaporary volver al horno, repitiendo esta operación lasveces necesarias hasta conseguir cenizas blancas.Añadir a las cenizas 5 ml de Agua PA-ACShirviendo y remover con una varilla, llevar a pH 4,6-4,5 con Acido Sulfúrico diluido 1:10 y ajustar conAcido Sulfúrico diluido a 1/100 y completar conAgua PA-ACS hasta 10 ml.Para calcular la cantidad de Agua PA-ACS a añadir,tomar el volumen final igual a 10,2 ml, por considerarel aumento de volumen Agua PA-ACS másAcido Sulfúrico, equivalente a 0,2 ml, que habrá sidoarrastrado en la precipitación de los 334 mg de CalcioSulfato hidratado, formado al reaccionar partedel Acido Sulfúrico con la Lechada de Cal 4N añadida.Las restantes causas de pequeña variación devolumen (como las del H 2 SO 4 al pasar a Na 2 SO 4 yK 2 SO 4 ), se consideran sin sensible influencia.Triturar con varilla de vidrio el calcio sulfato precipitadoy remover bien.Diluir, si es necesario, la solución de cenizas hastaun contenido en bromo del vino de 1 mg/l, aproximadamente.Para comprobar cualitativamente si elcontenido en bromo del vino es superior o inferior a1 mg/l, tomar 1 ml de la solución de cenizas delvino, poner en tubo de ensayo y añadir una gota desolución tampón pH 4,65, una gota de soluciónRojo de Fenol y una gota de solución Cloramina T.Después de un minuto exactamente, detener lareacción añadiendo una gota de solución de SodioTiosulfato. Si la solución es amarilla, amarillo-pardao amarillo-verdosa, el contenido en bromo es aproximadamenteinferior a 1 mg/l, y si es azul, violeta ovioleta fugaz, el contenido en bromo es superior a1 mg/l, siendo necesario diluir la solución.Decantar el líquido y trasvasar a un tubo deensayo.Poner en tubo de ensayo 5 ml de la solución decenizas y añadir 0,25 ml de Solución Tampón,0,25 ml de Rojo de Fenol y 0,25 ml de Cloramina T.Después de un minuto exactamente, paralizar lareacción con 0,25 ml de solución de Sodio Tiosulfato5-hidrato PA-ACS-ISO. Determinar la absorbanciacon fotocolorímetro o espectrofotómetromediante medida a 584 nm.Para obtener la curva patrón, tomar la soluciónde Potasio Bromuro con 10 mg de Bromo por litro,alícuotas de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 2,00y 2,50 ml y llevar a 5 ml con Agua PA-ACS.El contenido en bromo de estas soluciones es,respectivamente, 0,5; 1; 1,5; 2,0; 2,5; 3; 4 y 5 mg/l.Tratar cada una de estas soluciones de 5 mlcomo la solución de cenizas y hacer las correspondientesdeterminaciones en el espectrofotómetro a584 nm.32.5. Cálculo.Calcular el contenido en bromo expresado enmg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.32.6. Referencias.32.6.1. Jaulmes, P., y Bruns, S. “Valoration dubrome dans les vins”. Annales des Falsifications etde Fraudes. 1952.32.6.2. Saldoval, J. A., e Hidalgo, T. “Medidaespectrofotométrica de reacciones coloreadas muyfugaces”. Boletín I. N. I. A. 19, 60, 40.33. BROMO ORGANICO33.1. Principio.El coeficiente de dilución del ácido monobromoacéticoentre el éter y el agua acidulada con ácidosulfúrico (que anula la ionización) es próximo a 5.Los ésteres del ácido monobromoacético sonmenos solubles en el agua que el mismo ácido, porlo que es más fácil su extracción por el éter. Treslavados con un volumen de éter igual al del vino sonsuficientes para extraer todo el bromo orgánico.33.2. Material y aparatos.33.2. (1; 2; 3 y 4) como 32.2. (1; 2; 3 y 4).33.2.5. Ampollas de decantación de 50 y500 ml.33.3. Reactivos.182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)PRS-CODEX132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO121489 Potasio Bromuro PA171615 Rojo de Fenol RE-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV65

66182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO33.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7) como 32.3. (1; 2; 3; 4;5; 6 y 7).33.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO33.4. Procedimiento.Colocar en una ampolla de decantación 20-200 mlde vino (según la riqueza supuesta), añadir 5 g deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO por litro de vino, seañade después un volumen de Eter Dietílico estabilizadocon 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO igual alvolumen de vino, agitar y decantar cuidadosamenteel Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm de BHTPA-ACS-ISO. Repetir tres veces esta operación. Filtrarel Eter Dietilico estabilizado con 6 ppm deBHT PA-ACS-ISO, evaporar en frío en cápsula decuarzo que contenga 0,5 ml de Sodio Hidróxido al50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N. Después deunas 24 horas de saponificación de los ésteres,durante las que permanece la cápsula tapada conun vidrio de reloj, incinerar progresivamente el residuoa la temperatura de 550°C. Arrastrar y disolverlas cenizas como en 32, realizando también en igualforma la valoración colorimétrica del bromo.33.5. Cálculo.Calcular el contenido en bromo expresado enmg/l a partir de la correspondiente curva patrón.34. ACIDOS MONOBROMOACETICO YMONOCLOROACETICO DE ORIGENORGANICO(Método cualitativo) (Provisional)34.1. Principio.Siendo fraudulenta la presencia de compuestosorgánicos monohalogenados, es suficiente parainvestigar el fraude un análisis cualitativo.Extracción de compuestos monohalogenadosen medio ácido con éter y transformación por adiciónde amonio en glicocola y sal de amonio porcombinación del halógeno desplazado. Separacióncromatográfica y revelado con plata nitrato, obteniéndoseuna mancha blanca para la plata cloruro yotra negra para la plata bromuro.34.2. Material y aparatos.34.2.1. Frascos de tapón esmerilado que ajusteperfectamente, de 500 ml de capacidad.34.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.34.2.3. Agitador mecánico de unas 150 agitacionespor minuto.34.2.4. Papel Watman número 1 para cromatografía.34.2.5. Pipetas, micropipetas de 0,2 ml capilaresdivididas en milésimas.34.2.6. Secador de aire.34.2.7. Campana o recipiente para cromatografíay accesorios.34.2.8. Pulverizador todo de vidrio y pulverizaciónfina.34.2.9. Campana de luz infrarroja.34.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO121050 Acido Pirogálico PA131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121118 Amonio Bromuro PA131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO121129 Amoníaco 25% (en NH 3 ) PA121085 Etanol 96% v/v PA131313 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO34.3.1. Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO34.3.2. Solución de Acido Sulfúrico: solución enAgua PA-ACS al 1/3 en volumen.34.3.3. Amoníaco 25% (en NH 3 ) PA (sin cloruros).34.3.4. Mezcla Acetona PA-ACS-ISO-AguaPA-ACS en la proporción 100/20 en volumen.34.3.5. Revelador de Plata Nitrato. Mezclar85 mg de Plata Nitrato PA-ACS-ISO, 1 ml de AguaPA-ACS, 5 ml de Amoníaco 25% (en NH 3 ) PA y Etanol96% v/v PA hasta 200 ml.34.3.6. Revelador de Acido Pirogálico. Disolver13 mg de Acido Pirogálico PA en 200 ml de Etanol96% v/v PA. La solución puede durar tres días si seconserva fría y al abrigo de la luz.34.3.7. Solución testigo de Cloro. Disolver 100mg de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS y enrasar a 1.000 ml.34.3.8. Solución testigo de Bromo. Disolver100 mg de Amonio Bromuro PA en Agua PA-ACS yenrasar a 1.000 ml.34.4. Procedimiento.34.4.1. Extracción del compuesto halogenado.Tomar 100 ml de vino, llevar el matraz de 500 mlcon tapón esmerilado, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico1/3 y, acto seguido, 100 ml de Eter Dietílicoestabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.Agitar brevemente hasta formación de ligera emulsión,destapar unos momentos el frasco y observarla facilidad de separación.A veces, como especialmente sucede con vinode prensa, la separación es difícil, siendo necesarionueva adición de Acido Sulfúrico 1/3 y de Eter Dietílicoestabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.Observar si hay facilidad de separación y llevarel frasco a un agitador mecánico, agitando durantetres horas. Poner en ampolla de decantación de

M250 ml de capacidad con el fin de separar el vino dela fracción etérea; eliminar el Eter Etílico por completofiltrando rápidamente por ligera capa de algodón.Añadir inmediatamente 10 ml de Amoníaco 25%(en NH 3 ) PA, agitar fuertemente durante tres minutos,con el fin de iniciar la formación del aminoácidocorrespondiente (glicocola) y evitar la de otros compuestos.En este momento se forma la sal de amoniopor combinación del halógeno desplazado.Dejar reposar 24 horas para que la reacción seacompleta y proceder a la cromatografía.34.4.2. Análisis cromatográfico.- Depositar conmicropipeta sobre papel Whatman número 1 paracromatografía (28 x 15 cm) a lo largo de una líneaparalela al borde inferior y situada a 2,5 cm de esteborde, 0,02 ml de soluciones testigo de Cl y de Br, yde 0,02 a 0,06 ml, según el contenido en halogenado,de las muestras de vino, separando cada aplicación2 cm por lo menos. Enrollar el papel y colocaren el fondo de la cubeta con el disolvente y en lacámara o campana de cromatografía.Retirar el papel de la cubeta cuando el frentedel líquido ascendente se encuentre a 1 cm delborde superior del papel, y dejar secar. Pulverizarcon la solución de Plata Nitrato y, estando húmedoel papel, pulverizar nuevamente con solución deAcido Pirogálico. Para mayor uniformidad del revelado,conviene desecar el papel con lámpara infrarroja.La mancha correspondiente al Cl es de colorblanco y tiene un Rf de 0,29, y la mancha correspondienteal Br es de color marrón y tiene un Rf de0,59.34.5. Referencia.34.5.1. Morales, J., y Vega, R. “Comunicaciónde los Métodos Internacionales de Análisis”. O. I. V.,número 245, 1967.35. INDICE DE PERMANGANATO35.1. Principio.Valoración con una solución de permanganatodel poder reductor en frío de las sustancias polifenólicasdel vino. Como todos los componentesfenólicos del vino, a igual concentración no reducenla misma cantidad de permanganato, se trata deuna valoración global que da un índice, al que sedenomina “índice de permanganato”; I Mn.Constituye una expresión del contenido en sustanciasfenólicas que están en relación con loscaracteres gustativos de dureza, astringencia oaterciopelado sin que la relación sea absoluta. Esuna determinación especial para vinos tintos; enblancos es poco apreciable y se presta a confusionespor consumo de permanganato por otros componentesdel vino, que aquí tiene una influenciarelativa más marcada.35.2. Material y aparatos.Los elementos necesarios para una volumetría.35.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS251246 Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC121085 Etanol 96% v/v PA121515 Potasio Hidróxido lentejas 85% PA181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l(0,1N) SV35.3.1. Solución de Potasio Permanganato0,01N. Se conserva mal. Preparar a partir de PotasioPermanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En unmatraz aforado diluir a 1:10, Potasio Permanganato0,02 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinarel factor de la solución 0,01N obtenida.35.3.2. Indicador de Indigo. Preparar una soluciónde 3 g/l de Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC.Filtrar, tomar 50 ml de esa solución, añadir 50 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y Agua PA-ACS hasta1.000 ml. Mezclar bien.35.4. Procedimiento.Colocar en un vaso de 50 ml del Indicador deIndigo antes indicado y añadir 2 ml del vino. Inmediatamenteadicionar gota a gota la solución dePotasio Permanganato 0,01N, y al final, cada vezmás lentamente, hasta desaparición completa delcolor azul y aparición de amarillo oro.En vinos nuevos, el viraje es menos neto, por loque conviene tomar sólo 1 ml de muestra.Hacer la prueba testigo para eliminar el permanganatopor sustancias no polifenoles, sustituyendolos 2 ml de vino por 2 ml de una solución de AcidoL(+)-Tartárico de 5 g/l, neutralizada hasta la mitadcon solución de Potasio Hidróxido y encabezadahasta 10° de Etanol 96% v/v PA.35.5. Cálculo.Calcular el índice de permanganato o el título dematerias oxidables en frío del vino por permanganatoexpresado en meq/l.Indice de permanganato = 5 (V-V’).Materias oxidables en frío = 5 (V-V’) meq/l.V = volumen en ml de solución de potasio permanganato0,01N para oxidar el vino.V’ = volumen en ml de solución de potasio permanganato0,01N gastados en la prueba testigo.35.6. Referencia.35.6.1. Ribereau-Gayon et Peynaud. “Analyse etContrôle des Vins”. página 320, 1958.67

6836(a). DETERMINACION DE PRESENCIADE VINO PROCEDENTE DE“HIBRIDOS PRODUCTORESDIRECTOS”(Método cualitativo)36(a).1. Principio.Transformación de la malvina, por la acción controladade un oxidante apropiado, en una sustanciaque a la luz de Wood acusa viva fluorescencia decolor verde muy sensible.36(a).2. Material y aparatos.36(a).2.1. Lámpara que emita luz fluorescentede 366 nm de longitud de onda (luz de Wood).36(a).2.2. Tubos de ensayo.36(a).3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACSAmoníaco (gas)121085 Etanol 96% v/v PA131703 Sodio Nitrito PA-ACS36(a).3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.36(a).3.2. Sodio Nitrito al 1%. Disolver SodioNitrito PA-ACS en Agua PA-ACS y ajustar a la concentraciónindicada.36(a).3.3. Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco(gas)36(a).4. Procedimiento.36(a).4.1. Vinos tintos.- Para vinos tintos introduciren el tubo de ensayo: 1 ml de vino, una gotade Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV, y 1 ml deSodioNitrito al 1%. Agitar y esperar dos minutos, despuésañadir 6 ml de Etanol 96% v/v PA con el 5% deAmoníaco (gas). Agitar, esperar cinco minutos, filtrary observar el filtrado a la luz de Wood. Si hay malvinase apreciará la fluorescencia color verde.36(a).4.2. Vinos rosados o claretes.- Introduciren el tubo de ensayo 5 ml de vino, cinco gotas deAcido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV y 1 ml de SodioNitrito al 1%.Agitar, esperar dos minutos y añadir despuésEtanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco (gas).Agitar y observar a la luz de Wood (366 nm).36(a).5. Cálculo.La intensidad de la fluorescencia verde es muysensible y puede acusar netamente la presencia deuna dosis de 0,2% de híbrido Oberlein en el vino,siendo la tolerancia admitida hasta un 2% de riquezade híbrido Oberlein.36(a).6. Referencia.36(a).6.1. Ribereau-Gayon, J.; Peynaud, E.“Analyse et Contrôle des Vins”, pág. 320, 1958.36(b). DETERMINACION DE PRESENCIADE VINO PROCEDENTE DE“HIBRIDOS PRODUCTORESDIRECTOS”(Provisional)36(b).1. Principio.Determinación de malvina en vinos tintos secospor cromatografía de papel. La fase móvil es lasolución Britten-Robinson, en las condiciones delmétodo. Observación del cromatograma a la luz deWood de 366 nm.Como escala de comparación se emplea unaserie de manchas de soluciones de pinacianol, queda fluorescencia similar a la de la malvina, aunquecon coloración verdosa en vez de la roja ladrillo dela malvina, pero con intensidades de la fluorescenciaproporcionales a las dosis aplicadas, haciendocomparativos los resultados.36(b).2. Material y aparatos.36(b).2.1. Fuente de luz de Wood (366 nm).36(b).2.2. Cámara o campana para cromatografíay accesorios (soporte, pinzas, etc.).36(b).2.3. Papel Arches para cromatografía.36(b).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PAPinacianol o Azul de Quinaldina(Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina)131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO36(b).3.1. Solución Britten-Robinson. Mezclar3,92 g de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO,2,40 g de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y4,48 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO y añadir AguaPA-ACS hasta 1.000 ml. El pH de esta solución es1,81.36(b).3.2. Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yodurode 1,1’-Dietilcarbocianina).36(b).3.3. Etanol 96% v/v PA neutro. DestilarEtanol 96%v/v PA rectificado en presenia de SodioHidróxido lentejas PA (5 g/l).36(b).4. Procedimiento.Hacer aplicaciones con micropipeta de 50 ul devino cada una, sobre papel a 2 cm del borde inferior,de tal forma que aparezcan manchas rectangularesde 2 cm de base por 0,5 cm de los bordes.Aplicar 12 gotas de 4 ul en cada punto, secandocada vez con corriente de aire a temperatura nosuperior a 30°.Llenar la cubeta hasta una altura de 2 cm con lasolución Britten-Robinson. Sumergir el papel sólo1 cm y retirarlo cuando el líquido llegue a 1 cm del

Mborde superior. Ayudar a la desecación con corrientede aire no superior a 30° y terminar la desecaciónal ambiente.Para obtener una escala patrón preparar unasoIución en Etanol 96% v/v PA neutro de Pinacianolo Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina)de 0,5 g/l y diluir a 1/10. Tomar alícuotasde 0,3; 0,4; 0,6; 0,8; 1,2; 1,7; 2,4; 3,5 y 5 mly completar con Etanol 96% v/v PA hasta 5 ml. Aestas mezclas les corresponde un contenido convencionalde híbrido de 3; 4; 6; 8; 12; 17; 24; 35 y50%, respectivamente.Aplicar cada una de estas mezclas como anteriormente.Secar las manchas, recortar y pegarmediante una cola celulósica (aplicar en pequeñasdosis para que no desborde) a lo largo del borde deuna tira de cartulina negra.Renovar la escala cada 30 o 45 días, pues pierdeintensidad, por lo que hay que conservarla alabrigo de la luz.Observar las manchas del cromatograma a la luzde Wood (366 nm) en cámara oscura y hacer rápidamentela comparación con la escala.Para comprobar la eficacia de la lámpara sehace el siguiente ensayo: Lavar por capilaridad conEtanol 96% v/v PA el papel Arches de cromatografía.Aplicar solución alcohólica de Pinacianol de1 mg/l en cantidad tal que la mancha sea visible y lamisma cantidad diluida a la mitad de una manchano visible en las mismas condiciones de observación.Regular la distancia de la lámpara a la hojapara conseguir este efecto.36(b).5. Cálculo.Si al observar el cromatograma del vino a la luzde Wood en las condiciones expuestas se aprecianmanchas de color rojo ladrillo y fluorescentes de unRf = 0,55 ± 0,09 será clara manifestación de presenciade malvina.Para el análisis cuantitativo, comparar con laescala patrón.La intensidad del color de cada mancha de laescala testigo de solución de pinacianol será valoradapor el número de mg de pinacianol por litro desolución alcohólica con que se ha hecho la manchasobre el papel.Con esta definición convencional de la intensidaddel color de las manchas puede establecersetambién, por comparación de estas manchas conlas correspondientes a las de cromatogramas devinos con mezcla conocida de “híbrido”, un coeficienteproporcional a la riqueza de éste presente enlos mismos.La sensibilidad de las manchas pueden acusarel 1% de híbrido Oberlein (elegido como patrón).La dosis correspondiente al valor 2 de la escalaconvencional, o sea el 2% de híbrido Oberlein, es lamáxima tolerada provisionalmente por la ConvenciónInternacional.36(b).6. Referencias.36(b).6.1. Dorier y Verelle. “Comunication a laSociété des Experts-Chemistes de France”. 6 enero1965.36(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. A18, 1-4, 1969.37. METANOL(Alcohol Metílíco)(Método del ácido cromotrópico)37.1. Principio.Oxidación del alcohol metílico a formaldehídopor potasio permanganato en presencia de ácidofosfórico y medida espectrofotométrica de la reaccióncoloreada del formaldehído con ácido cromotrópico.Coloración violeta específica del formaldehído.37.2. Material y aparatos.37.2.1. Matraces aforados de 50 ml.37.2.2. Baño de agua con regulación a 60-75°.37.2.3. Espectrofotómetro que permita lectura a575 nm.37.2.4. Matraz esférico de cuello largo, de500 ml y refrigerante con alargadera.37.3. Reactivos.171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica2-hidrato RE131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131091 Metanol PA-ACS-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO131698 Sodio Disulfito PA-ACS141717 Sodio Sulfito anhidro PRS37.3.1. Solución de Potasio Permanganato.Disolver 3 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISOy 15 ml de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISOen 100 ml de Agua PA-ACS. Preparar mensualmente.37.3.2. Solución de Acido Cromotrópico SalDisódica 2-hidrato. Solución al 5%. Filtrar si no quedaclara. Preparar semanalmente.37.3.3. Solución al 2% p/v de Sodio Sulfito anhidroPRS.37.4. Procedimiento.Diluir o ajustar la muestra hasta una concentracióntotal de alcohol de 5-6% en volumen.Utilizando 50 ml de muestra, destilar en destiladorsimple, recogiendo 40 ml de destilado enbaño de hielo. Diluir hasta 50 ml con Agua PA-ACS (si se ha determinado previamente el alcohol,el destilado puede ajustarse a 5-6% de concentra-69

70ción de alcohol y utilizarse para esta prueba). Si haymás de 0,05% de metanol por volumen, diluir hastaaproximadamente esa concentración con Etanol96% v/v PA previamente diluido al 5,5% con AguaPA-ACS. Para muestras que contengan menos de0,05% de metanol, poner 200 ml de destilador eficientede fraccionamiento, colocar el sistema dedestilación reflujo total durante 15 minutos y luegodestilar lentamente a elevada proporción de reflujo(por lo menos 20:1). Recoger 10 ml de destilado ydiluir hasta 160 ml con Agua PA-ACS.Pipetear 2 ml de solución de Potasio Permanganatoen un matraz aforado de 50 ml. Enfriar enbaño de hielo, añadir 1 ml de muestra diluida y fría ydejar 30 minutos en baño de hielo. Decolorar con unpoco de Sodio Disulfito PA-ACS seco (*) y añadir1 ml de solución de Acido Cromotrópico. Añadir lentamentecon agitado y en baño de hielo 15 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y colocar 15 minutosen baño de agua caliente (60-75°). Enfriar, añadiruna cantidad suficiente de Agua PA-ACS para llevaraproximadamente a la marca de 50 ml, mezclar ydiluir hasta volumen con Agua PA-ACS a la temperaturaambiente. Leer la absorbancia a 575 nm utilizandocomo reactivo en blanco Etanol al 5,5% tratadoanálogamente a la forma descrita. Tratar soluciónpatrón de Metanol PA-ACS-ISO, que contenga0,025% por volumen de Metanol PA-ACS-ISO, enEtanol al 5,5% simultáneamente en la misma forma,y leer la absorbancia (la temperatura del patrón y dela muestra no debe diferir en más de 1°, ya que latemperatura afecta a la intensidad del color).37.5. Cálculo.Calcular el contenido en metanol expresado enporcentaje.AMetanol = 0,025 —— FA’A = absorbancia de la muestra.A’ = absorbancia de la solución patrón de metanol.F = factor de dilución de la muestra.37.6. Observaciones.Si el color de la muestra es demasiado intenso,diluir con reactivo en blanco. No diluir más de tresveces porque la relación de ácido cromotrópico ametanol se reduce demasiado.37.7. Referencia.37.7.1. “Association of Official Agricultural Chemists”.Official Methods of Analysis, pág.138, 1965.(*). En el original indica NaHSO 3 seco. El SodioBisulfito como tal fórmula sólo existe en soluciónacuosa y por tanto debe entenderse Sodio Disulfito,seco, de fórmula Na 2 S 2 O 5 .38. NITROGENO(Método Kjeldhal)38.1. Principio.Transformación del nitrógeno orgánico en amoniosulfato por ataque con ácido sulfúrico en ebulliciónen presencia de sustancias catalizadoras queacortan el tiempo de la mineralización y adición desal potásica que eleve el punto de ebullición. Destilaciónpor ebullición de vapor recogiendo el destiladoen volumen conocido de solución de ácido sulfúrico.Valoración con solución de sodio tiosulfato, delyodo liberado por el ácido sulfúrico al añadir aldestilado solución de potasio yoduro-potasioyodato.38.2. Material y aparatos.38.2.1. Aparato micro-Kjeldhal.38.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO182102 Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE122726 Cobre II Sulfato anhidro PA171327 Fenolftaleína solución 1% REPapel Tornasol131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO131540 Potasio Yodato PA-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO141625 Selenio metal, polvo PRS182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV38.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.38.3.2. Catalizador de Selenio. Mezclar bien pulverizados80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO,20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Seleniometal, polvo PRS.38.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y PapelTornasol.38.3.4. Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.38.3.5. Potasio Yoduro solución al 4%. DisolverPotasio Yoduro PA en Agua PA-ACS y ajustar a laconcentración indicada.38.3.6. Potasio Yodato solución al 5%. DisolverPotasio Yodato PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar ala concentración indicada.38.3.7. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N. Enun matraz aforado diluir a 1:5 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar elfactor de la solución 0,02N obtenida.38.3.8. Solución concentrada de Almidón solubleRE.38.4. Procedimiento.Poner en el matraz Kjeldhal 50 ml de vino, evaporara ebullición lenta hasta unos 10 ml, añadir10 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 0,6 g de

Mla mezcla pulverizada y bien uniformada de CobreII Sulfato anhidro PA, Selenio metal, polvo PRS yPotasio Sulfato PA-ACS-ISO, continuar calentandoprimero lentamente y después enérgicamente,hasta decoloración, y proseguir unos minutosmás. Si es necesario se van añadiendo nuevasdosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO de 5 en5 ml.Enfriar, pasar el contenido a matraz aforado de100 ml arrastrando el residuo con pequeñas porcionesde Agua PA-ACS para enjuagar varias veces elmatraz, comprobando que los últimos lavados nodan trazas de reacción ácida al papel de tornasol.Tomar una alícuota de 20 ml y llevar al matrazdel aparato de destilación, adicionando unas gotasde Fenolftaleína solución 1% RE. En un vaso cilíndricode unos 200 ml, se añaden 10 ml de AcidoSulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.Añadir al matraz solución de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV (4%) en cantidad suficiente para virajede la Fenolftaleína solución 1% RE y se encaja rápidamenteen su sitio. Conectar el aparato de destilacióncon el generador de vapor de agua y comenzaráel arrastre del amoníaco pasando alrefrigerante y recogiendo el destilado en la SoluciónSulfúrica.Después de 15-20 minutos, comprobar conpapel tornasol si una gota del destilado no acusareacción alcalina. En este caso separar el vaso yproceder a la valoración.Añadir al vaso con el Acido Sulfúrico 0,01 mol/l(0,02N) SV 4 ml de Potasio Yoduro al 4% y 2 ml dePotasio Yodato al 5%. Mezclar con una varilla ydespués de 20 minutos valorar el yodo liberadocon solución de Sodio Tiosulfato 0,02N empleandocomo indicador 5-10 ml de solución de Almidón.38.5. Cálculo.Calcular el nitrógeno expresado en meq/l o enmg/l.10 - VNitrógeno = ——— x 100 meq/l5010 - VNitrógeno = ——— x 100 x 14 mg/l50V = volumen en ml de solución de sodio tiosulfato0,02N.39(a). FLUOR(Provisional)39(a).1. Principio.Incineración de 525° del vino en presencia de unexceso de calcio o magnesio, destilación encorriente de vapor del ácido fluorhídrico a 135-140°, valoración del ácido destilado a pH 3,6 porsolución de torio nitrato en presencia de alizarinasodio suifonato.39(a).2. Material y aparatos.39(a).2.1. Aparato de Truhaut, que consta degenerador de vapor, barbotador de pared doble,ampolla para la introducción de la solución sulfúricade las cenizas magnéticas, refrigerante de retorno yrefrigerante de West para la salida del destilado(figura 39.I.).39(a).2.2. Cápsula de platino o níquel para lascenizas.39(a).2.3. Horno eléctrico regulable para 525°.39(a).2.4. Matraz de 250 ml.39(a).2.5. Dos cápsulas de porcelana iguales, deunos 10 cm de diámetro.39(a).2.6. Material para volumetría.39(a).3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica2-hidrato RE131057 Acido Sulfanílico PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE211376 Lana de Vidrio lavada QP131394 Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS211276 Magnesio Oxido QP141801 Plata Sulfato PRS171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SVTetracloroetanoTorio Nitrato 4-hidrato39(a).3.1. Solución Tampón de pH = 3,1. Mezclar100 ml de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE,303 ml de Agua PA-ACS y 97 ml de Acido Clorhídrico1 mol/l (1N) SV.39(a).3.2. Solución de Torio Nitrato 0,01N. Disolver1,3806 g de Torio Nitrato 4-hidrato, en un litrode Agua PA-ACS.39(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.39(a).3.4. Acido Sulfúrico al 1/10. Diluir convenientementeAcido Sulfúrico 96% PA-ISO con AguaPA-ACS.39(a).3.5. Azul de Bromotimol solución 0,04%RE.39(a).3.6. Magnesio Oxido al 1/10. Suspensiónde Magnesio Oxido QP en Agua PA-ACS.71

39(a).3.7. Magnesio Acetato al 1/10. DisolverMagnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS en Agua PA-ACS.39(a).3.8. Solución Spadns. Añadir a 0,02 g deSpadns, Agua PA-ACS hasta 100 ml. El Spadnsresulta de la combinación del Acido Sulfanílico PA-ACS con el Acido Cromotrópico Sal Disódica2-hidrato RE. Su proceso de preparación es laborioso.Se encuentra preparado por Eastman-Kodak.39(a).3.9. Plata Sulfato PRS.39(a).4. Procedimiento.39(a).4.1. Incineración.- Poner 20 ml de vino encápsula de platino o de níquel, añadir 2 ml de suspensiónde Magnesio Oxido al 1/10 y 4 ml de MagnesioAcetato al 1/10. Evaporar, desecar y calcinaren el horno a 550°C.39(a).4.2. Destilación.- Colocar en el barbotadordel aparato Truhaut 20 ml de Acido Sulfúrico 96%PA-ISO diluido al 50% en Agua PA-ACS, 0,5 g deLana de Vidrio lavada QP y 0,5 g de Plata SulfatoPRS, con el fin de retener el Acido Clorhídrico. Llevarel barbotador a 146°C por ebullición del Tetracloroetano(punto de ebullición 146°) en la doblepared (A) y forzar la corriente de vapor de agua a lavelocidad de 5 g por minuto. Conviene calentar previamenteel Tetracloroetano en la doble pared delaparato antes de que barbote el vapor en el líquido,por haberse observado que así se evitan la formaciónde burbujas de espuma, que son un peligropor posible desborde y paso al refrigerante de salida.Se continúa la destilación hasta recoger unos100 ml de destilado.Con estas operaciones queda el aparato desprovistode posible presencia de flúor.Disolver las cenizas en el menor volumen posiblede Acido Sulfúrico al 1/10 e introducir en el barbota-REFRIGERANTE LIEBIG-WEST40 cm, BOCAS 14/23REFRIGERANTE DE BOLASDE REFUERZO 30 CM.BOCAS 14 / 2372Figura 39.I. Aparato de TruhautEl barbotador (C) tiene una pared doble (A) donde se hierve el tetracloroetano a 146°. El tubo de entrada devapor de agua rodea (E) la pared interna y penetra en su interior, prolongándose verticalmente hasta casi el fondo.El refrigerante de retorno para condensar los vapores de tetracloroetano se conecta en (B).La ampolla (F), con llave y tapón esmerilado, se ajusta a la boca del barbotador y el tubo penetra hasta lamisma altura que el punto de entrada del tubo de vapor de agua. La salida del destilado comunica con refrigerantede West, vertical que se prolonga por alargadera tubular cuyo pico se sumerge en el agua que contieneel matraz receptor.

Mdor, enfriando previamente el líquido del barbotadorantes de verter en él la solución sulfúrica de cenizas.Proseguir la destilación con el barboteo devapor, comenzando por calentar previamente,como se ha indicado, el Tetracloroetano contenidoen la doble pared. Recoger unos 100 ml de destiladoen un matraz de 250 ml que contenga 5 ml deAgua PA-ACS, de forma que quede sumergido elpico de la alargadera del refrigerante.39(a).4.3. Valoración.- Descarbonatar el destiladopor agitación en frío y con vacío neutralizar conSodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia deAzul de Bromotimol solución 0,04% RE como indicador.Llevar después a una cápsula de porcelanablanca bien limpia, siendo recomendable frotar previamentesu interior con pasta silícea y enjuagarlacon Agua PA-ACS.Añadir a 50 ml del destilado 1 ml de soluciónacuosa de Spadns y 1 ml de Solución Tampón depH = 3,1. Añadir con microbureta solución de TorioNitrato 0,01N hasta viraje a rojo violeta.Para apreciar el punto del viraje se compara latonalidad del color con la de una valoración testigohecha en otra cápsula igual y con el mismo volumende Solución Tampón, 1 ml de Spadns y 0,05 ml desolución de Torio Nitrato. Se ha observado que con0,1 ml de Torio Nitrato es más clara la comparaciónde colores.Restar del volumen de Torio Nitrato gastado enel líquido problema los 0,05 y 0,1 ml añadidos altestigo.39(a).5. Cálculo.Equivalencia: 1 ml de solución de torio nitrato0,01N < > 0,19 mg de flúor.Expresar los resultados en mg de flúor por litro ycon una aproximación de unos 0,5 mg.39(a).6. Referencia.39(a).6.1. Fabré, R.; Trumant, A.; Bouquet, A., yBernuchon, J. (1960-1965), Cont. Rendu Aca.Sciences.1965, 240, pág. 211; 1959, 248, pág.504.39(b). FLUOR39(b).1. Principio.Determinación directa del flúor total por potenciometríautilizando un electrodo iónico específico.Para eliminar las posibles causas de error se leadiciona al vino una solución tampón.39(b).2. Material y aparatos.39(b).2.1. pH-metro con escala que permitaapreciar 0,1 mV.39(b).2.2. Electrodo selectivo de flúor.39(b).2.3. Electrodo de referencia de calomelanos.39(b).2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.39(b).2.5. Recipientes de plástico de 50-100 mlde capacidad para mezclas y matraces en materialde plástico para conservar las soluciones patrón.39(b).2.6. Pipetas de precisión graduadas enmicrolitros.39(b).2.7. Agitador magnético.39(b).3. Reactivos.131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131675 Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO39(b).3.1. Solución patrón de fluoruros 10 –2 Mconteniendo 190 mg de F – por litro. Pesar 0,4198 gde Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO (desecado durantecuatro horas a 106°C antes de su utilización), disolvery enrasar a un volumen de 1.000 ml.39(b).3.2. Solución Tampón de Acido orto-Fosfórico0,75 M. Diluir convenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.39(b).4. Procedimiento.39(b).4.1. Verificación del electrodo y determinaciónde su pendiente.A partir de la solución 3.1 preparar, mediantediluciones, soluciones de concentraciones conocidasde10 –3 M, 10 –4 M y 10 –5 M, que contienen, respectivamente,19; 1,9 y 0,19 mg de F – por litro.Tomar dos vasos de precipitados; en uno deellos colocar 25 ml de la disolución 10 –3 M de F – ,adicionar 5 ml de solución Tampón de Acido orto-Fosfórico y determinar su potencial agitando deforma moderada mientras dure la medida. En el otrovaso, poner 25 ml de disolución 10 –4 M de F – , 5 mlde solución Tampón de Acido orto-Fosfórico ydeterminar su potencial, agitando como anteriormente.La diferencia entre los dos potenciales es lapendiente del electrodo (S) y cuyo valor debe ser,aproximadamente, 59 mV.39(b).4.2. Determinación.Tomar 25 ml de vino, adicionar 5 ml de la soluciónTampón y determinar su potencial (E 1 ). A continuación,y en el mismo vaso, adicionar un ml dedisolución 10 –3 Mde F – y determinar su potencial (E 2 )Si el salto de potencial es pequeño, indica que laconcentración de F – es muy alta y hay que diluir lamuestra hasta que el salto alcanzado esté comprendidoalrededor de 20-40 mV.Los volúmenes de muestra y solución Tampónpueden ser modificados en función de la forma ydisposición de los electrodos utilizados.39(b).5. Cálculo.La cantidad de flúor, expresada en mg/l, nosviene determinada por la fórmula:73

74V . CC F - = ——————————— E25 [(antilog —— ) - 1]SSiendo:C F - = concentración, en mg/l, de F – en el medio.V = volumen, en ml, de solución patrón de fluoruroañadida.C = concentración, en mg/l, de la soluciónpatrón adicionada.S = pendiente del electrodo. E = diferencia de los potenciales E 1 y E 2 obtenidosen 39(b).4.2.Este valor se deberá multiplicar por el factor dedilución correspondiente, en caso de haber sido necesarioefectuarla.39(b).6. Observaciones.39(b).6.1. Todas las soluciones deben conservaruna temperatura próxima a 25°C ±1°C durante lamedida .39(b).7. Referencias.39(b).7.1. H. E. Haller y C. H. Junge, 1974, O. I.V. 317/FV/518 y 133/FV/439.39(b).7.2. Deschreider, A., y Mme. R. Meaux,1974. Determination des fluor dans les vins et eauxminerales naturelles au moyen d’une electrode ioniquespecifique.40. HIDROXIMETILFURFURAL(Provisional)40.1. Principio.El hidroximetilfurfural se produce al calentar enexceso los mostos para su concentración, desulfitacióno pasterización. La presencia de hidroximetilfurfuralen ciertos vinos dulces se considera comoindicio de la adición de mostos.Este método está basado en la reacción deWinckler (formación de un complejo rojo para laacción del hidroximetilfurfural sobre la p-toluidina yácido barbitúrico). Se utiliza para los vinos blancos ytintos, previa extracción con éter etílico en lossegundos.40.2. Material y aparatos.40.2.1. Espectrofotómetro y accesorios (cubetapara 1 cm de espesor del líquido).40.2.2. Matraces aforados.40.2.3. Embudo de decantación con tapónesmerilado y de 100 ml de capacidad.40.2.4. Cápsula de porcelana de unos 10 cm dediámetro.40.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISOAcido Barbitúrico131090 2-Propanol PA-ACS-ISO132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO162378 P-Toluidina PS40.3.1. Reactivo de p-Toluidina. Disolver 10 g dep-Toluidina PS en 50 ml de 2-Propanol PA-ACS-ISO. Llevar a matraz aforado de 100 ml, añadir10 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y completarhasta el enrase con 2-Propanol PA-ACS-ISO.Este reactivo dura 4 días.40.3.2. Reactivo de Acido Barbitúrico. Se introduceen matraz aforado de 100 ml, 0,5 g de AcidoBarbitúrico desecado a 105°C y unos 70 ml deAgua PA-ACS. Se calienta ligeramente en baño deagua, se enfría y enrasa con Agua PA-ACS.40.4. Procedimiento.Llevar 10 ml del vino a embudo de decantacióny añadir 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con 6ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar durante 3 minutos,decantar el Eter Dietílico estabilizado con 6ppm de BHT PA-ACS-ISO a cápsula de porcelanaque contenga 2 ml de Agua PA-ACS, repetir cuatroveces la extracción del residuo del embudo conotros 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con 6ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez y decantarigualmente a la cápsula. Dejar evaporar el éter enmedio ambiente. Al residuo de evaporación añadirAgua PA-ACS hasta 10 ml, agitar y tomar 2 ml paraanálisis.Mezclar los 2 ml tomados con 5 ml de Reactivode p-Toluidina y un 1 ml de Acido Barbitúrico llevándolosinmediatamente a la cubeta del espectrofotómetro(de un cm de espesor del líquido) y hacerrápidamente la lectura de la absorbancia a 546 nm.Emplear como líquido de referencia el AguaPA-ACS en lugar de Acido Barbitúrico, o sea, 3 mlde Agua PA-ACS más 5 ml de Reactivo de p-Toluidina.40.5. Cálculo.Determinar el contenido en hidroximetilfurfuralexpresado en mg/l por comparación con la correspondientecurva patrón teniendo en cuenta el factorde dilución.40.6. Observaciones.En el caso de vinos turbios centrifugar previamente.Si hay presencia de CO 2 eliminarlo agitandoel vino en un matraz.40.7. Referencias.40.7.1. Sandoval, J. A.; Hidalgo, T. “Puesta apunto de un método para análisis cuantitativoespectrofotométrico de hidroximetilfurfural en losvinos”. Boletín I. N. I. A., 16: 4. 454-469,1967.40.7.2. Amerine, M. A. “Hydroximethyl-furfural inCalifornia Wines”. Food Research. 13: 264-269, 1948.

M41. DETERMINACION CUALITATIVA DEACIDO SORBICO, BENZOICO,p-CLOROBENZOICO, SALICILICO,p-HIDROXIBENZOICO Y SUESTER ETILICO41.1. Principio.Extracción con éter etílico de los antisépticos del vinopreviamente acidificados. Separación por cromatografíade capa fina. Identificación a la luz ultravioleta yreveladores específicos.41.2. Material y aparatos.41.2.1. Extractor en continua de Palkin (figura 41.I)que comporta un tubo A de 55 cm de longitud y 3,8cm de diámetro. La parte superior va unida a un refrigerantede bolas mediante boca esmerilada 34-25. A30 cm de la base y formando un ángulo de 60º seencuentra un tubo lateral acodado a los 13 cm, formandoun ángulo de 120°. Este tubo lateral terminaen una junta esmerilada 24/40 en bisel, lo que permitesu unión a un matraz de 50 ml que se calientasobre una placa. En el tubo A se introducen bolitas devidrio y el tubo interior (B) de 48,5 cm de longitud y1,2 cm de diámetro, terminando en una placa devidrio poroso.41.2.2. Agitador mecánico (ver 41.6.1).41.2.3. Erlenmeyer de 500 ml de boca esmerilada.41.2.4. Baño María.41.2.5. Estufa eléctrica (200º C).41.2.6. Embudos de separación de 500 ml.41.2.7. Cápsulas de porcelana de 70-80 cm dediámetro.41.2.8. Equipo de cromatografía de capa fina.41.2.9. Placas de vidrio de 20 x 20 cm.41.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO121014 Acido Benzoico PA182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SVAcido p-Clorobenzoico163231 Acido 4-Hidroxibenzoico PS141045 Acido Salicílico (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX131057 Acido Sulfanílico PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISOAcido Tiobarbitúrico131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA121085 Etanol 96% v/v PA132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmBHT PA-ACS-ISO132063 n-Hexano PA-ACS131252 Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO164542 4-Nitroanilina PS122006 n-Pentano PAPolvo de Poliamida para Cromatografía131500 Potasio Dicromato PA-ISORevelador F 254131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV131703 Sodio Nitrito PA-ACS131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO131091 Metanol PA-ACS-ISO41.3.1. Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.41.3.2. Metanol PA-ACS-ISO.41.3.3. Etanol 96% v/v PA41.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO diluido a20% (v/v) con Agua PA-ACS.41.3.5. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO.41.3.6. Polvo de Poliamida para cromatografíaMacherey-Nagel o Merck.41.3.7. Revelador F 254 Merck o equivalente.41.3.8. Solventes:n-Pentano PA: 10 partes.n-Hexano PA-ACS: 10 partes.Acido Acético glacial PA-ACS-ISO: 3 partes.41.3.9. Soluciones patrones. Preparar solucionesde 0,1 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA conlos Acidos Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, p-Clorobenzoico,Salicílico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,4-Hidroxibenzoico PS y sus ésteres. Preparar unasolución de 0,2 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PAcon el Acido Benzoico PA.41.3.10. Preparación de las placas. 10 g dePoliamida con el 3% de indicador fluorescente sehomogenizan durante 20 segundos en agitadormecánico con 35 ml de Metanol PA-ACS-ISO y25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO. Las placas impregnadas se secan durante1 hora a 80°C.41.3.11. Solución hidroalcohólica conteniendo0,15 g por 100 de Potasio Dicromato PA-ISO(41.6.2).41.3.12. Solución saturada de Acido Tiobarbitúricoen Etanol 96% v/v PA (0,1% aproximadamente)(41.6.2).41.3.13. Solución de 0,5 g de 4-Nitroanilina en100 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.3).41.3.14. Solución de Sodio Nitrito al 5% (41.6.3).Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS.41.3.15. Solución de Sodio Acetato al 20%(41.6.3). Disolver Sodio Acetato anhidro PA-ACS enAgua PA-ACS.41.3.16. Solución de Sodio Carbonato al 15%(41.6.3). Disolver Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO en Agua PA-ACS.41.3.17. Reactivo de Pauly. Disolver 4,5 g deAcido Sulfanílico PA-ACS en 45 ml de Acido Clorhídrico2 mol/l (2N) SV (calentando, diluir la solución a500 ml en Agua PA-ACS, 10 ml de la solución diluidase enfrían con hielo), se le añaden 10 ml de soluciónacuosa de Sodio Nitrito al 4,5% también fría. El75

76reactivo resultante se mantiene durante 15 minutosa 0°C (a esta temperatura es estable de 1 a 3 días)y se le añade un volumen igual de solución acuosade Sodio Carbonato al 10% en el momento de pulverizarlas placas (41.6.4).41.4. Procedimiento.Acidular 100 ml de vino o mosto con 10 ml deAcido Sulfúrico al 20%.Figura 41.l. Extractor continuo de PalkinExtraer tres veces con 20 ml de Eter Dietílicoestabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISOcada vez, reuniendo las soluciones etéreas; o bien,durante 6 horas en el extractor continuo de Palkincon 175 ml de Eter Dietílico estabilizado con 6ppm de BHT PA-ACS-ISO a una velocidad de reflujode 500-600 ml/hora.Los extractos etéreos se desecan con 6 g deSodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO durante 12horas. Filtrar y el Eter Dietílico estabilizado con 6ppm de BHT PA-ACS-ISO se evapora a sequedaden baño María 40-45°. El residuo se disuelve en unml Etanol absoluto PA tomando cantidades de 5 a10 l para cromatografía. Mediante el tratamientode los extractos etéreos con 5 ml de Sodio Hidróxido2,5N (diluir a 1:1 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SVcon Agua PA-ACS) y acidulado de nuevo con 5 mlde Acido Sulfúrico al 20% se obtendrá en los cromatogramaslas manchas correspondientes a losácidos liberados por efecto de la saponificación.Para obtener el desarrollo de los cromatogramas,depositar la muestra en forma de manchaspuntuales de 5-10 l.El desarrollo se lleva a cabo en cámara saturadacon el eluyente y a temperatura ambiente. Dejarmigrar el solvente hasta una altura de unos 15 cm(una hora y media a dos horas y media).Retirar la placa de la cubeta y dejar secar a latemperatura ordinaria.41.5. Cálculo.Observación a la luz ultravioleta (360 nm).Los conservadores aparecen de abajo arriba enel siguiente orden: ácido 4-hidroxibenzoico, ésteresdel ácido 4-hidroxibenzoico, ácido salicílico,ácido p-clorobenzoico, ácido benzoico y ácidosórbico.Para detectar el ácido sórbico pulverizar primeramenteel cromatograma con la solución 41.3.11 yseguidamente con la 41.3.12. Calentar la placa a80°C, 5-10 minutos. La mancha de ácido sórbicoaparece de color rojo sobre fondo ocre.Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxibenzoicoy éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico,pulverizar la placa con una mezcla compuestade 2 ml de 41.3.13 más 3-5 gotas de 41.3.14más 8 ml de 41.3.15, añadiéndolos en esteorden. Una vez seca la placa aparecen las manchascorrespondientes a los tres componentescitados de color amarillo. La materia colorantepropia de los vinos toma colores que van delamarillo al naranja. Pulverizar de nuevo con lasolución 41.3.16. La manchas del ácido 4-hidroxibenzoicotoman color rojo; las del éster etílicodel ácido 4-hidroxibenzoico, color rosa, y las delacido salicílico, amarillo limón. Los distintos componentesde la materia colorante toman coloresque van desde distintos tonos de ocre al pardo ytambién verde y azulado.

MPara detectar los ácidos 4-hidroxibenzoico ysalicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoicose utiliza empleando el reactivo 41.3.17.41.6. Observaciones.41.6.1. Para el análisis cualitativo.41.6.2. Para detectar el ácido sórbico.41.6.3. Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxibenzoicoy éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico.41.6.4. Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoicoy salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico.42. INVESTIGACION DE DERIVADOSMONOHALOGENADOS DELACIDO ACETICO42.1. Principio.Extracción de los derivados monohalogenadosdel ácido acético con éter etílico previamente acidificado.Formación de tioindigo, de color rojo, que seextrae con cloroformo.El método permite detectar de 1,5 a 2 mg/l deácido monocloroacético y las cantidades correspondientesde otros derivados monohalogenados.42.2. Material, aparatos y reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISOAcido Tiosalicílico131074 Agua PA-ACS131252 Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO131503 Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO42.2.1. Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.42.2.2. Acido Sulfúrico (1 + 4) (v/v) . Diluir AcidoSulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.42.2.3. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISOdesecado en estufa a 105°C.42.2.4. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.42.2.5. Acido Tiosalicílico (2 Mercaptobenzoico)al 3% (p/v) en Sodio Hidróxido 1,5N (diluir SodioHidróxido 2 mol/l (2N) SV con Agua PA-ACS y ajustara la concentración indicada).42.2.6. Potasio Ferricianuro al 2% (prepararinmediatamente antes de usar). Disolver PotasioHexacianoferrato lll PA-ACS en Agua PA-ACS.42.2.7. Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO.42.2.8. Baño de agua.42.2.9. Estufa eléctrica.42.2.10. Embudos de separación.42.2.11. Cápsulas de porcelana 70-80 mm Ø.42.2.12. Tubos de 150 x 15 mm con tapónesmerilado.42.2.13. Tubos de 150 x 15 mm con llave inferior.42.3. Procedimiento.Introducir en un Erlenmeyer de 500 cc y bocaesmerilada 100 ml de vino, 5 ml de Acido Sulfúrico(1+5) y, agitando, 100 ml de Eter Dietílico estabilizadocon 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, continuandoen un agitador durante una hora.Separar en embudo de decantación y descartarla capa inferior. Añadir 8-10 g de Sodio Sulfato anhidroPA-ACS-ISO al extracto éter, agitando vigorosamente.Verter el éter en otro embudo de 500 ml,agregando sucesivamente: 5,0, 2,5 y 2,5 ml deSodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV, agitando unminuto cada vez y reuniendo las tres capas inferioresalcalinas obtenidas en un tubo con tapón esmerilado,en el cual se habrá vertido previamente 1 mlde la solución de Acido Tiosalicílico. Agitar enérgicamentedurante treinta segundos y transferir elcontenido del tubo a una cápsula de porcelana,evaporando durante una hora en baño de agua(90-100°C), tiempo que habrá de respetarse auncuando el agua se evapore mucho antes.Si se formara una costra sobre la superficie, esconveniente romperla con una varilla fina de vidrio, loque facilitará la evaporación. Pasado este tiempo,llevar la cápsula con el residuo seco a la estufa mantenidaa 200°C durante treinta minutos exactamente,pasados los cuales se retira y se deja enfriar a latemperatura ambiente. Añadir 2 ml de Agua PA-ACSque disolverá la mayor parte del extracto y recogeren un tubo con llave en su parte inferior; agregarotros 2 ml de Agua PA-ACS para lavar la cápsula y,por último, 3 ml de solución de Potasio Ferricianuro,recogiendo todo ello con los primeros, agitando bienel tubo durante treinta segundos para facilitar la oxidación.Conviene asegurarse de que todo el residuose disolvió bien en los 4 ml de Agua PA-ACS antesde añadir la solución de Potasio Ferricianuro. En presenciade un derivado monohalogenado se desarrollaráuna coloración rojo-anaranjado (apenas perceptiblepara contenidos inferiores a 0,1 mg). Agregar3 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO; agitar alternativamente tres-cuatro veces ydecantar. Si el extracto clorofórmico inferior se coloreade rojo-fucsia o rosado, indica la presencia dederivados monohalogenados del ácido acético.42.4. Referencias.42.4.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. A 35h.42.4.2. Cabezuco, Gorostiza y Garrido: Determinaciónde derivados monohalogenados del ácidoacético. Instituto de Fermentaciones (1971, ATA,vol. II, núm. 1, páginas 145-151).77

7843. GRADO ALCOHOLICO ENPOTENCIA43.1. Principio.Es el volumen en litros de alcohol susceptible deobtenerse por fermentación total de los azúcarescontenidos en 100 litros de vino.43.2. Material y aparatos.Como en 7(a).2 o 7(b).2.43.3. Reactivos.Como en 7(a).3 o 7(b).3.43.4. Procedimiento.Como en 7(a) o 7(b).43.5. Cálculo.N - 1Grado alcohólico en potencia = ————17donde:N = g/l de azúcares reductores de la muestra.44. GRADO ALCOHOLICO TOTAL44.1. Principio.Se considera el grado alcohólico total como lasuma del grado alcohólico adquirido determinadosegún 5(a) o 5(b), y del grado alcohólico potencial,determinado según 43.44.2. Cálculo.Grado alcohólico total = Grado alcohólico adquirido ++ Grado alcohólico potencial.45. COLORANTES SINTETICOS45.1. Principio.Concentración mediante ebullición, extraccióncon éter etílico y fijación de colorantes sintéticosbásicos y ácidos sobre lana y posterior confirmaciónpor cromatografía en papel.45.2. Material y aparatos.45.2.1. Hebras de lana blanca previamentedesengrasadas con Eter Dietílico estabilizado con6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.45.2.2. Hebras de lana blanca mordentadas.Disolver 1 g de Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme(BP, F. Eur.) PRS-CODEX y 1,2 g de PotasioHidrógeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS.Introducir en esta solución 10 g de hebras de lanablanca, previamente desengrasadas con Eter Dietílicoestabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISOy secas, agitar durante una hora y dejar reposar dedos a tres horas; transcurrido dicho tiempo, secar atemperatura ambiente.45.2.3. Papel para cromatografía Whatmannúmero 1 o similar.45.2.4. Erlenmeyer de 50 ml de capacidad.45.2.5. Ampolla de decantación de 200 ml decapacidad.45.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131082 1-Butanol PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA141101 Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme(BP, F. Eur.) PRS-CODEX141128 Amoníaco 20% (en NH 3 ) PRS132770 Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO45.3.1. Eter Dietílico estabilizado con 6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.45.3.2. Sodio Hidróxido al 5%. Disolver SodioHidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.45.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.45.3.4. Acido Acético diluido, 1/18 (v/v). DiluirAcido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.45.3.5. Acido Clorhídrico diluido 1/10 (v/v). DiluirAcido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.45.3.6. Amoníaco 20% (en NH 3 ) PRS.45.3.7. Solvente número 1 para cromatografíade colorantes de carácter básico:1-Butanol PA-ACS-ISO ...........50 mlEtanol 96% v/v PA .............. 25 mlAcido Acético glacial PA-ACS-ISO . . . 10 mlAgua PA-ACS. ................. 25 ml45.3.8. Solvente número 2 para la cromatografíade colorantes de carácter ácido:1-Butanol PA-ACS-ISO ........... 50 mlEtanol 96% v/v PA .............. 25 mlAmoníaco 20% (en NH 3 ).......... 10 mlAgua PA-ACS. ................. 25 ml45.4. Procedimiento.45.4.1. Determinación de colorantes de carácterbásico.Poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 mly llevar a ebullición hasta que el vino se reduzca a untercio de su volumen. Enfriar y neutralizar con lasolución de Sodio Hidróxido al 5% hasta claro virajedel color natural del vino. Extraer dos veces, con30 ml de Eter Dietílico estabilizado con 6 ppm deBHT PA-ACS-ISO cada vez, y juntar las dos fasesetéreas; en ellas se encuentran eventualmente loscolorantes básicos; el residuo de la extracción debeser conservado con objeto de investigar los colo-

Mrantes ácidos. Lavar dos veces el Eter Dietílico estabilizadocon 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO empleadoen la extracción con 5 ml de Agua PA-ACS, conel objeto de eliminar el Sodio Hidróxido; a continuación,añadir 5 ml de Acido Acético diluido a la faseetérea; la presencia de un colorante básico coloreala fase ácido-acuosa; la presencia de este colorantepuede confirmarse por su fijación sobre lana mordentada.La fase ácido-acuosa obtenida se alcaliniza conAmoníaco 20% (en NH 3 ) PRS previamente diluido al5% con Agua PA-ACS; añadir 0,5 g de lana mordentaday llevar a ebullición durante un minuto;aclarar la lana bajo el chorro de agua fría; de permanecercoloreada, el vino contiene un colorantebásico.45.4.1.1. Caracterización por cromatografía depapel. A partir de la fase acético-acuosa que contieneel colorante básico, concentrar hasta 0,5 ml.Si el colorante ha sido fijado sobre lana, añadir aésta 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de AcidoAcético glacial PA-ACS-ISO y llevar a ebullición, yuna vez retirada la lana previamente escurrida, concentrarla solución hasta 0,5 ml.Depositar sobre papel de cromatografía 20microlitros de la anterior solución concentrada a3cmdel borde lateral y a 2 cm del borde inferior.Introducir dicho papel en una cubeta que contengael solvente 45.3.7. de forma que su borde inferioresté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar ydejar secar al aire cuando se haya alcanzado unaaltura del frente del solvente comprendido entre 20o 25 cm. Identificar el colorante por medio desoluciones de colorantes sintéticos básicosdepositados simultáneamente sobre el cromatograma.45.4.2. Determinación de colorantes de carácterácido.Partir del residuo de vino concentrado a un tercioy neutralizado después de su extracción conEter Dietílico estabilizado con 6 ppm de BHTPA-ACS-ISO; si no se realizó la determinación decolorante de carácter básico, poner 200 ml de vinoen un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebulliciónhasta que el vino se reduzca a un tercio de su volumen.En uno u otro caso, añadir 3 ml de Acido Clorhídricodiluido (45.3.5) y 0,5 g de lana blanca; hervirdurante cinco minutos, decantar el líquido y lavar lalana con Agua PA-ACS abundante. En el Erlenmeyerque contiene la lana, añadir 100 ml de Agua PA-ACS y 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5);hervir durante cinco minutos, decantar el líquidoácido y repetir esta operación hasta que el líquidode lavado sea incoloro. Después de haber lavadobien la lana, para eliminar completamente el líquidoácido añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 10 gotas deAmoníaco 20% (en NH 3 ) PRS; llevar a ebulliciónsuave durante diez minutos a fin de disolver la materiacolorante artificial que eventualmente se hayafijado sobre la lana. A continuación, retirar la lana delErlenmeyer, llevar el volumen de líquido a 100 ml yhervir hasta evaporación completa del AmonioHidróxido; una vez conseguida dicha evaporación,añadir 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5)(comprobar que el líquido haya adquirido reacciónfrancamente ácida, llevando una gota de éste sobreel papel indicador). Poner en el Erlenmeyer 60 mgde lana blanca y llevar a ebullición durante cincominutos; retirar la lana y aclararla bajo el chorro deagua fría. Si después de esta operación la lana tomacoloración roja, cuando se trata de vino tinto, oamarilla, si se trata de vino blanco, confirma la presenciade materia colorante orgánica artificial denaturaleza ácida. Si la coloración adquirida es débilo dudosa, repetir el tratamiento con Amoníaco 20%(en NH 3 ) PRS y hacer una segunda fijación sobreuna hebra de lana de 30 mg. Si transcurrida estasegunda fijación se obtiene una coloración rosa,aunque sea débil, se deduce la presencia de coloranteácido. Recurrir para un análisis más completoa nuevas fijaciones-eluciones (hasta 4 o 5), operandosiempre de forma idéntica a la empleada para lasegunda fijación hasta que se obtenga una coloraciónrosácea que, aunque sea pálida, no ofrecelugar a dudas.45.4.2.1. Caracterización por cromatografía depapel.Añadir sobre la hebra de lana coloreada 10 ml deAgua PA-ACS, 10 gotas de Amoníaco 20% (en NH 3 )PRS y llevar a ebullición; retirar la lana previamenteescurrida y concentrar la solución amoniacal hasta0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografía 20microlitros de la anterior solución concentrada, a3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior;introducir dicho papel en una cubeta que contengael solvente 45.3.8 de forma que su borde inferioresté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejarsecar al aire cuando se haya alcanzado una alturadel frente del solvente comprendida entre 20 o25 cm. Identificar el colorante por medio de solucionesde colorantes sintéticos ácidos depositadossimultáneamente sobre el cromatograma.45.5. Referencia.45.5.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. A43k, páginas 1-6.46. MERCURIO46.1. Principio.Oxidación de la materia orgánica con ácido nítricoy crómico, reducción de las sales mercúricas poracción de Sn 2+ , volatilización del Hg metálico, arrastredel mismo por corriente de aire y determinaciónde su absorbancia a 253,7 nanómetros.Este método es aplicable a concentraciones demercurio superiores a 0,05 mg/l.79

46.2. Material y aparatos.46.2.1. Espectrofotómetro de absorción.46.2.2. Lámpara de mercurio.46.2.3. Aparato para la reducción del ion mercúricoa mercurio metal y posterior arrastre de éstecon corriente de aire (figura 46.1).46.2.4. Matraces de reacción de forma cónicade 100 ml de capacidad.46.2.5. Bomba peristáltica accionada con motorprovisto de vaciador de velocidad.46.2.6. Llave de purga en T de teflón.46.2.7. Tubo flexible de tigón de 1/8 pulgada dediámetro interior y un metro, aproximadamente, delongitud.46.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO471058 Acido Sulfúrico 95-98%(máx 0,0000005% de Hg) PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS471153 Cromo VI Oxido(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS471303 Estaño ll Cloruro(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS-ISO121925 Hidroxilamonio Sulfato PA313186 Mercurio solución patrónHg = 1,000 ± 0,002 g/l AA251450 Parafina P. F. 55-60º C en pastilla DC46.3.1. Acido Sulfúrico 95-98% (máximo0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO, exento de mercurio.46.3.2. Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS.46.3.3. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)PA-ACS exento de mercurio.46.3.4. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)PA-ACS exento de mercurio.46.3.5. Solución de Acido Crómico al 5%. Llevara un vaso de 500 ml 25 g de Cromo VI Oxido y80Figura 46.l. Esquema de la instalación

Mdisolverlos en 25 ml de Agua PA-ACS. Añadir lentamentey agitando Acido Sulfúrico concentradohasta enrasar a 500 ml cuando la solución esté fría.46.3.6. Solución reductora.- Solución al 40% deEstaño II Cloruro en Agua PA-ACS, acidulada conAcido Sulfúrico.46.3.7. Solución patrón.- Mercurio soluciónpatrón Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo1,080 g de 131426 Mercurio ll oxido amarilloPA en 100 ml de 131019 Acido Clohídrico 35%PA-ISO a 1000 ml. En ambos casos, mediante dilución1/1.000 se obtiene la solución de 1 mg/l.46.4. Procedimiento.46.4.1. Preparación de la muestra.Tomar 1 ml de muestra y colocarla dentro de unmatraz cónico. Añadir 2 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Cerrar con película de Parafina P. F. 55-60°C en pastilla DC y dejarlo en digestión durantesesenta minutos a temperatura ambiente. Añadir 5 mlde Acido Crómico al 5%, refrigerando durante la adiciónen baño de hielo. Tapar el matraz y dejarlodurante sesenta minutos, agitando cada diez minutos.Transcurrido este tiempo, añadir 15 ml de AguaPA-ACS, enfriando durante la adición con baño dehielo. Una vez fríos los matraces, añadir 2 g, aproximadamente,de Hidroxilamonio Sulfato PA, agitar y acoplarlos matraces al aparato de medida. Añadir 10 mlde solución reductora. Continuar como en 46.4.3.46.4.2. Construcción de la curva patrón.A partir de 46.3.7, tomar 0; 5; 10; 15; 20 y 25 ml.Tratarlas a continuación como se indica en 46.4.1.Estas soluciones contienen 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 y0,5 partes por millón de Hg. Anotar las absorbanciasobtenidas frente a las concentraciones correspondientes.46.4.3. Determinación.Efectuar la lectura de la absorbancia de la muestra.Una vez preparada según 46.4.1.46.5. Referencias.46.5.1. A. Bouchard: “Determination of mercuryaftersoon temperature digestion by flamaless atomicabsorption.” Atom. Absorpt. Newsletter, vol. 12,número 5 (115-117), 1973.46.5.2. A. García de Jalón y J. Frías: “Un métodopara la determinación de mercurio en vinos medianteespectrofotometría de absorción atómica sinllama.” Ministerio de Agricultura. Abril 1972.47. PLOMO47.1. Principio.Determinación del plomo por A. A. después deuna concentración previa con objeto de conseguirresultados suficientemente precisos.47.2. Material y aparatos.47.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.47.2.2. Lámpara de plomo.47.2.3. Cápsula de platino de 100 ml de capacidado similar.47.2.4. Baño de arena.47.2.5. Mufla con circulación de aire.47.2.6. Matraces de 10; 100 y 1.000 ml decapacidad.47.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA47.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.47.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.47.3.3. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.47.3.4. Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo1,598 g de 131473 Plomo ll Nitrato PA enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.47.4. Procedimiento.47.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 mlde la muestra en una cápsula de platino y llevarla aevaporación hasta consistencia siruposa en bañode arena. Añadir a continuación 2 ml de Acido Sulfúrico96% PA-ISO y carbonizar el residuo en elbaño de arena. Seguidamente introducir la cápsulaen la mufla y mantenerla durante dos horas a450°C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarlaenfriar. Añadir 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO,evaporar en el baño de arena e introducir en lamufla, repitiendo esta operación hasta obtener cenizasblancas. Disolver a continuación las cenizas con1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml deAgua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger elfiltrado en un matraz de 10 ml, lavando la cápsula yel filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.47.4.2. Construcción de la curva patrón.- A partirde la solución patrón 47.3.4, tomar alícuotas de0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1 ml, y llevar a 100 ml con AcidoNítrico al 1% (v/v).El contenido en plomo de estas soluciones es,respectivamente, 2; 4; 6; 8 y 10 ppm Anotar lasabsorbancias obtenidas frente a las concentracionescorrespondientes.47.4.3. Determinación.- Efectuar la lectura directade la muestra preparada según 47.4.1 a 283,3 nm.47.5. Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado enppm mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.81

8248. RELACION P/48.1. Principio.Estimación de los contenidos relativos de glucosay fructosa, en mostos, vinos dulces y mistelas,mediante el establecimiento de la relación entre azúcaresreductores y desviación polarimétrica a 20°C.48.2. Material y aparatos.48.2.1. Como en 7(a).2; 7(b).2, o 7(c).2.48.2.2. Polarímetro con luz monocromática amarilla(lámpara de vapor de sodio) y tubo de 20 cm.48.3. Procedimiento.48.3.1. Determinar el contenido en azúcaresreductores según el método 7(a), 7(b) o 7(c).48.3.2. Medida de la desviación polarimétrica.Una vez verificado el correcto reglaje del polarímetro,comprobando la correspondencia del valor“cero” con la existencia de un campo luminoso uniforme,ajustándolo si es necesario, introducir en eltubo del polarímetro el líquido de defecación, sindiluir, incoloro y limpio, utilizando para la determinaciónde azúcares reductores, evitando la formaciónde burbujas de aire. Anotar la temperatura del líquidoque debe ser lo más próxima posible a 20°C.Efectuar la lectura de la desviación polarimétricavarias veces sucesivas, tomando la media de losresultados obtenidos.48.4. Cálculo.Determinar el poder rotatorio y la relación P/aplicando las fórmulas siguientes: 20 = t + t (t - 20) x KP/ 20 (expresado con su correspondiente signo)siendo:P = g/l de azúcares reductores. t = poder rotatorio en divisiones sacarimétricasa t°C (un grado polarimétrico = 4,615 divisionessacarimétricas). 20 = poder rotatorio en divisiones sacarimétricasa20°C.t = temperatura del líquido en el momento de lalectura.K = coeficiente variable con la naturaleza de losazúcares, dado por la tabla I en función del valorP / t .48.5. Referencias.48.5.1. J. Blouin. Manual practique d’analysedes Moûts et Vins. 1977.48.5.2. J. Ribereau Gayon, E. Peynaud. Scienceset Techniques du Vin. Tome I. 1972.p/ tTABLA I49. ANHIDRIDO CARBONICO(Método aprobado pero nopublicado en el B.O.E.)49.1. Principio.Después de la oxidación en frío del anhídridosulfuroso por el hidrógeno peróxido en presenciadel ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplazadodel vino por una solución tampón de fosfato yácido fosfórico es arrastrado en frío en circuitocerrado por una corriente de aire mediante unapequeña bomba de circulación hacia una soluciónvalorada de bario hidróxido. El exceso de esta basese determina inmediatamente con una soluciónvalorada de ácido clorhídrico en presencia de unindicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.Aplicable a contenidos inferiores a 6 g/l.49.2. Material y aparatos.49.2.1. Aparato de vidrio para extracción delCO 2 en circuito cerrado (fig. l) compuesto de:- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bolaantiespuma sobre la que va adaptada unabureta (5);- dos barboteadores (2) y (3);- una bomba (4) que garantice la circulación delaire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).49.3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)PRSK- 1,19 0,006- 1,41 0,007- 1,73 0,008- 2,24 0,009- 2,64 0,012- 3,20 0,012- 4,06 0,013- 5,56 0,014- 8,8 0,022- 21 0,042

M121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV171739 Timolftaleína RE49.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N: En unmatraz aforado diluir exactamente a 1:1 SodioHidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.49.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g deBaCl 2 . 2H 2 0 por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidratoPA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.49.3.3. Solución de Bario Hidróxido.Mezclar 2 volúmenes de la solución de BarioCloruro de 90 g/l con 1 volumen de solución deSodio Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente queevite la carbonatación.49.3.4. Solución tampón:Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA yañadir 50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20°C =1,63): Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISOcon Agua PA-ACS hasta la densidad indicada quecorresponde a, aproximadamente, 79,4% y completarhasta 1 l con Agua PA-ACS recientementehervida.49.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 gde Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en100 g de solución.Utilizarla 15 días después de su preparaciónpara lograr la decantación del eventual Na 2 CO 3 .Esta solución debe ser transparente.49.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H 2 O 2por litro y libera 10 veces su volumen de oxígenopor descomposición catalítica con MnO 2 en medioalcalino.49.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,pulverizado.49.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA,neutro y completar hasta 100 ml.49.3.9. Acido Clorhídrico 0,2N. En un matrazaforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SVcon Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución0,2N obtenida.49.4. Procedimiento.49.4.1. Vinos que contienen menos de 4 g deCO 2 por litro.La botella de vino se debe mantener en posiciónhorizontal durante una noche a 0°C.Colocar en el barboteador (2) 150 ml exactamentemedidos de solución de Bario Hidróxido.Introducir en el matraz (1) algunos cristales deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, concuidado, en un matraz previamente enjuagado yenfriado a 0°C, 50 ml de vino. Colocar el matraz (1)en el circuito y esperar 10 minutos.Conectar la bomba, e introducir mediante labureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en funcionamiento30 minutos.Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 mlde la solución de Bario Hidróxido; valorarla con AcidoClorhídrico 0,2N con indicador mixto. Sea V 2 elnúmero de ml gastados.Es indispensable valorar diariamente el BarioHidróxido utilizando 150 ml. Sea V 1 el número de mlde Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.49.4.2. Vinos que contienen más de 4 g de CO 2por litro.La botella debe mantenerse en posición horizontala 0°C durante una noche. Abrir la botella conprecaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 mldel vino por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%haciendo resbalar suavemente la solución por elcuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente yhomogeneizar su contenido agitándola; colocarlaseguidamente en un baño de agua a 20°C.Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos desolución de Bario Hidróxido.Introducir en el matraz (1) unos cristales deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.Introducir lentamente la pipeta en la botella paraevitar desprendimiento de CO 2 y tomar 50 ml delvino y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato ydejarlo reposar 10 minutos.El volumen del vino tomado se deberá reducir a25 ml, si éste contiene más de 8 g/l de anhídridocarbónico.Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 mlde la solución de Bario Hidróxido. Valorarla con AcidoClorhídrico 0,2N en presencia de indicador mixto.Sea V 2 el número de ml utilizados. Sea V 1 elnúmero de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumidospara valorar 150 ml de solución de Bario Hidróxido.49.5. Cálculo.49.5.1. Para vinos que contienen menos de 4 gde CO 2 por litro.Cantidades de CO 2 en gramos por l en el vino.CO 2 (g/l) = 0,088 (V 1 - 3V 2 ).49.5.2. Para vinos que contienen más de 4 g deCO 2 por litro.Medir el volumen de líquido que queda en la botellay añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para ladeterminación. Sea V el volumen total así determinado.Calcular seguidamente el factor de corrección f,necesario para tener en cuenta los 50 ml de SodioHidróxido al 50% introducidos en la botella:83

Vf = ————V - 50Si la muestra para la determinación es de 50 ml,la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es (2V 1 -6V 2 ) . 0,088 . f.Este resultado debe multiplicarse por 2 si latoma de muestra es de 25 ml.49.6. Referencias.49.6.1. Jaulmes (P.), Meth. An. 1972, n° 422;Ann. Fals. Exp. chim. 1973, n° 708, 96-109.49.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.50. ETANAL(Método aprobado pero nopublicado en el B.O.E.)50.1. Principio.El etanal se determina en el vino, previamentedecolorado con carbón, midiendo a 570 nm la coloraciónverde o violeta que da con el sodio nitroprusiatoy la piperidina.50.2. Material y aparatos.50.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuarlecturas a 570 nm.50.3. Reactivos.131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131064 Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121237 Carbón Activo polvo PAEtanal171327 Fenolftaleína solución 1% RE162377 Piperidina PS182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV84Figura 150.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 mlde Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.50.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%(p/v).En un matraz aforado de 250 ml disolver 1 g deSodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.50.3.3. Carbón Activo polvo PA.50.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientementeAcido Clorhídrico 35% PA-ISO con AguaPA-ACS.50.3.5. Solución alcalina.Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en400 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Completarhasta un litro con Agua PA-ACS.50.4. Procedimiento.50.4.1. Determinación del Etanal.Colocar 25 ml de líquido a analizar en un Erlenmeyerde 100 ml, adicionar unos 2 g de CarbónActivo polvo PA. Agitar enérgicamente durantealgunos segundos, dejar reposar durante 2 minutosy filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino paraobtener un filtrado claro.2 ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlenmeyerde 100 ml y se adiciona agitando 5 ml de soluciónde Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solución dePiperidina, mezclar y colocar inmediatamente la mezclaen la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La

Mcoloración obtenida que varía del verde al violeta, semide a 570 nm con relación al aire. Esta coloraciónaumenta para disminuir seguidamente con rapidez.Elegir como valor definitivo la máxima absorbanciaque se obtiene al cabo de unos 50 segundos.La cantidad de Etanal contenido en el líquidoanalizado se deduce de una curva patrón.50.4.2. Construcción de la curva patrón.Solución patrón de Etanal combinado con elAnhídrido Sufuroso.Tomar Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS,valorar en SO 2 determinar su cantidad exactamidiéndola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV.En un matraz aforado de 1 litro colocar el volumende esta solución que corresponda a 1.500 mgde SO 2 . Introducir en el matraz, ayudados con unembudo, alrededor de 1 ml de Etanal destiladorecientemente y recogido sobre una mezcla refrigerante.Enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS, mezclar ydejar durante la noche.La cantidad exacta de esta solución patrón deEtanal combinada con el SO 2 debe determinarsecomo sigue:En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml desolución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del AcidoClorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxidarel SO 2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV en presenciade solución de Almidón soluble RE hastacoloración azul débil.Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapariciónde la coloración azul y aparición de color rosa.Valorar el SO 2 combinado al Etanal con el Yodo0,05 mol/l (0,1) SV hasta coloración azul débil. Siendon el volumen gastado, la solución patrón de Etanalcombinado con el SO 2 contiene: 44,05 n mg deEtanal por litro.Preparación de la curva patrón:En matraces aforados de 100 ml colocar sucesivamente5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones correspondena cantidades de Etanal próximas a 40-80-120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilucionesdebe calcularse a partir del contenido enEtanal de la solución patrón determinada anteriormente.Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml decada una de estas soluciones como se indica anteriormente.La representación gráfica de las absorbanciasde estas soluciones en función de la cantidadde Etanal es una recta que no pasa por elorigen.50.5. CálculoCalcular el contenido en Etanal mediante comparacióncon la correspondiente curva patrón.50.6. Observaciones.Si, de forma excepcional, el líquido a analizarcontiene Etanal libre, no combinado con el SO 2 seránecesario, antes de empezar a determinar el Etanaltotal, pasarlo previamente al estado de combinacióncon el SO 2 . Para efectuar esto, adicionar a unaparte del líquido a analizar un pequeño exceso deSO 2 libre y esperar algunas horas antes de procedera la determinación.50.7. Referencias.50.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.Rdsch 1970. 66, 5-6.50.7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. A-37, 1978.51. PRESION DEL ANHIDRIDOCARBONICO51.1. Principio.Medida de la presión gaseosa de un recipientecerrado herméticamente mediante un aparato adecuadoque disponga de un manómetro.51.2. Material y aparatos.51.2.1. Equipo manométrico que conste de lassiguientes partes:51.2.1.1. Aguja perforadora del tapón o del recipiente,hueca, con válvula que obture el orificio deentrada de gas a la misma y sistema estancode adaptación al tapón o recipiente.51.2.1.2. Conducto que ponga en comunicaciónla aguja con el manómetro.51.2.1.3. Manómetro que permita lecturas dehasta 10 kg/cm 2 .51.3. Procedimiento.Mantener la muestra en reposo durante doshoras al menos. Llevar la temperatura aproximadamentea 20°C y perforar el tapón o el recipientesegún el caso. Abrir la válvula con lo que el gaspasa al manómetro. Leer la presión que indica elmanómetro.51 4. Expresión de los resultados.La presión se expresará en atmósferas a 20°C.1 atm. = 760 mm de Hg = 1.034 kg/cm 252. ANTISEPTICOS Y ANTIFERMENTOS(Método microbiológico)52.1. Principio.Comparación del desarrollo, en vino problema ytestigo, de las levaduras contenidas en láminas deagar-extracto de levadura glucosado, tras permanecersumergidas 48 horas en ellos.52.2. Material y aparatos.52.2.1. Hematímetro.85

52.2.2. Cajas Petri.52.2.3. Portaobjetos rayados en zig-zag.52.2.4. Varilla en forma de U de unos 0,5 cm dediámetro.52.2.5. Tubos de ensayo aforados a 10 ml.52.2.6. Tubos capaces de contener portaobjetosnormales de microscopía.52.2.7. Autoclave.52.2.8. Microscopio.52.2.9. Estufa de cultivo.52.3. Reactivos y medios de cultivo.141792 Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX131074 Agua PA-ACSEtanal403687 Extracto de levadura CULTIMED121341 D(+)-Glucosa PA52.3.1. Solución acuosa de Etanal de 6,9 g/l (1 mlde esta solución combina 10 mg de SO 2 ).52.3.2. Mosto de 10º Bé. peptonado al 1 por1.000. Esterilizar en autoclave a 112°C durante 20minutos.52.3.3. Agar-extracto de levadura glucosado:Extracto de levadura CULTIMED. . . . . 5 gD(+)-Glucosa PA . . . . . . . . . . . . . . . . 20 gAgar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX . 17,5 gAgua PA-ACS . . . . . . . . . . . . . . . . 1.000 gUna vez fundido en baño de agua, distribuir a razónde 10 ml por tubo y esterilizar a 120°C durante 20minutos.52.3.4. Capa de levadura: Saccharomycesbayanus.52.4. Procedimiento.52.4.1. Preparación del vino problema: Si ladosis de SO 2 libre es superior a 15 mg/l, proceder acombinación del exceso mediante la solución acuosade Etanal, dejando transcurrir 24 horas, desdesu adición. Comprobar de nuevo que el contenidode SO 2 libre es inferior a 15 m/l.52.4.2. Preparación del vino testigo: Utilizar unvino de características lo más parecidas posibles alvino problema, especialmente en grado alcohólico.Respecto al SO 2 libre se procederá como en 52.4.152.4.3. Siembra del Agar (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX y formación de la película: Una vezfundidos en baño de agua los tubos con 10 ml deagar-extracto de levadura glucosado y cuando latemperatura baja a 45-50°C, sembrar, tras conteocon hematímetro, 5 millones de levaduras/ml (50millones por tubo) de un cultivo de 72 horas enmosto peptonado de 10° Bé.Tras homogeneizar rápidamente los tubos sembrados,verter su contenido sobre los portaobjetosrayados, situados en posición inclinada, apoyadossobre un brazo de la varilla en U colocada dentro dela caja Petri; el agar fundido deslizará uniformementesobre la superficie de cada portaobjeto, formandouna lámína de agar. Acto seguido colocar horizontalmentelos portaobjetos apoyando sobre losdos brazos de la varilla en U y dejar en reposodurante un par de horas.52.4.4. Formación de colonias: Asegurada lasolidificación del medio sembrado, sumergir completamentelos portaobjetos en los tubos que contienenel vino problema y el vino testigo. Tapar noherméticamente los tubos y mantener en la estufade cultivo a 25°C durante 48 horas.Finalizado este período eliminar el vino de lostubos, dejando los portaobjetos en el interior deellos en contacto con el aire y a 25°C.52.4.5. Observación microscópica: Observar lasláminas inmediatamente después de sacadas delvino. Si no se aprecia desarrollo de colonias incubaren estufa a 25°C y repetir la observación microscópicaa las 24, 48 y 72 horas si es necesario.En los vinos de alto grado alcohólico puederetrasarse aún más el desarrollo de las colonias,como se comprueba en el vino testigo.52.5. Interpretación de los resultados.La presencia franca de colonias indica la ausenciade antisépticos y antifermentos.52.6. Referencia.52.6.1. Método biológico español-argentinopara la investigación de la presencia de antisépticosen los vinos. E. Feduchy An. INIA. Serv. Tecnol. agr.N 2. 1975.86

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88Productos derivadosde la uva:Zumos de uva

MMETODOS DE ANALISIS1. GRADO BRIX1.1. Principio.Medida del índice de refracción y conversión engrados Brix mediante las tablas adjuntas.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Refractómetro provisto del equipo necesariopara mantener la temperatura a 20ºC.1.2.2. Matraces o recipientes de vidrio que cierrenherméticamente.1.3. Procedimiento.Colocar el refractómetro en un lugar iluminadocon luz difusa o frente a una fuente de luz artificial.Circular agua a temperatura constante a 20°C através de los prismas del refractómetro. Ajustar elinstrumento colocando unas gotas de agua destiladaentre los prismas. El índice de refracción deberáser 1,3330; si no es así corregir adecuadamente lalectura.Situar el zumo de uva en un envase herméticamentecerrado en un baño a 20°C y esperar a quealcance dicha temperatura. Tomar con una pipetaun poco de zumo de uva y poner unas gotas entrelos prismas del refractómetro. Medir el índice derefracción.1.4. Expresión de los resultados.A partir del valor obtenido del índice de refracciónse obtiene el grado Brix mediante la tabla I.1.5. Observaciones.1.5.1. Si se emplea otra temperatura para medirel índice de refracción, utilizar la tabla II para lacorrección de temperatura a 20°C .1.6. Referencias.Official Methods of Analysis, AOAC-1984.TABLA IConversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix1,3330 0,0091,3331 0,0781,3332 0,1491,3333 0,2531,3334 0,2881,3335 0,3581,3336 0,4281,3337 0,4981,3338 0,5671,3339 0 6371,3340 0,7071,3341 0,7761,3342 0,8461,3343 0,9151,3344 0,9851,3345 1,0541,3346 1,1241,3347 1,1931,3348 1,2631,3349 1,3321,3350 1,4011,3351 1,4701,3352 1,5401,3353 1,6091,3354 1,6781,3355 1,7471,3356 1,8151,3357 1,8851,3358 1,9541,3359 2,0231,3360 2,0921,3361 2,1611,3362 2,2301,3363 2,2991,3364 2,3671,3365 2,4361,3366 2,5051,3367 2,5741,3368 2,6421,3369 2,7111,3370 2,7791,3371 2,8481,3372 2,9171,3373 2,9851,3374 3,0531,3375 3,1221,3376 3,1901,3377 3,2591,3378 3,3271,3379 3,3951,3380 3,4631,3381 3,5321,3382 3,6001,3383 3,6681,3384 3,7361,3385 3,8041,3386 3,8721,3387 3,9401,3388 4,0081,3389 4,0761,3390 4,1441,3391 4,2121,3392 4,2791,3393 4,3471,3394 4,4151,3395 4.4831,3396 4,5501,3397 4,6181,3398 4,6861,3399 4,7531,3400 4,8211,3401 4,8881,3402 4,9561,3403 5,0231,3404 5,0911,3405 5,1581,3406 5,2251,3407 5,2931,3408 5,3601,3409 5,4271,3410 5,4941,3411 5,5621,3412 5,6291,3413 5,6961,3414 5,7631,3415 5,8301,3416 5,8971,3417 5,9641,3418 6,0311,3419 6,0981,3420 6,1651,3421 6,2311,3422 6,2981,3423 6,3651,3424 6,4321,3425 6,4981,3426 6,5651,3427 6,6321,3428 6,6981,3429 6,7651,3430 6,8311,3431 6,8981,3432 6,9641,3433 7,0311,3434 7,0971,3435 7,1641,3436 7,2301,3437 7,29689

TABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix901,3438 7,3621,3439 7,4291,3440 7,4951,3441 7,5611,3442 7,6271,3443 7,6931,3444 7,7591,3445 7,8251,3446 7,8911,3447 7,9571,3448 8,0231,3449 8,0891,3450 8,1551,3451 8,2211,3452 8,2871,3453 8,3521,3454 8,4181,3455 8,4841,3456 8,5501,3457 8,6151,3458 8,6811,3459 8,7461,3460 8,8121,3461 8,8781,3462 8,9431,3463 9,0081,3464 9,0741,3465 9,1391,3466 9,2051,3467 9,2701,3468 9,3351,3469 9,4001,3470 9,4661,3471 9,5311,3472 9,5961,3473 9,6611,3474 9,7261,3475 9,7911,3476 9,8561,3477 9,9211,3478 9,9861,3479 10,0511,3480 10,1161,3481 10,1811,3482 10,2461,3483 10,3311,3484 10,3751,3485 10,4401,3486 10,5051,3487 10,5701,3488 10,6341,3489 10,6991,3490 10,7631,3491 10,8281,3492 10,8921,3493 10,9571,3494 11,0211,3495 11,0861,3496 11,1501,3497 11,2151,3498 11,2791,3499 11,3431,3500 11,4071,3501 11,4721,3502 11,5361,3503 11,6001,3504 11,6641,3505 11,7231,3506 11,7921,3507 11,8561,3508 11,9201,3509 11,9841,3510 12,0481,3511 12,1121,3512 12,1751,3513 12,2401,3514 12,3041,3515 12,3681,3516 12,4311,3517 12,4951,3518 12,5591,3519 12,6231,3520 12,6861,3521 12,7501,3522 12,8131,3523 12,8771,3524 12,9401,3525 13,0041,3526 13,0671,3527 13,1311,3528 13,1941,3529 13,2581,3530 13,3211,3531 13.3841,3532 13,4481,3533 13,5511,3534 13,5741,3535 13,6371,3536 13,7001,3537 13,7631,3538 13,8261,3539 13,8901,3540 13,9531,3541 14,0161,3542 14,0791,3543 14,1411,3544 14,2041,3545 14,2671,3546 14,3301,3547 14,3931,3548 14,4561,3549 14,5181,3550 14,5811,3551 14,6441,3552 14,7071,3553 14,7591,3554 14,8321,3555 14,8941,3556 14,9571,3557 15,0191,3558 15,0821.3559 15.1441,3560 15,2071,3561 15,2691,3562 15,3321,3563 15,3941,3564 15,4561,3565 15,5181,3566 15,5811,3567 15,6431,3568 15,7051,3569 15,7671,3570 15,8291,3571 15,8911,3572 15,9531,3573 16,0161,3574 16,0781,3575 16,1401,3576 16,2011,3577 16,2631,3578 16,3251,3579 16,3871,3580 16,4491,3581 16,5111,3582 16,5731,3583 16,6341,3584 16,6961,3585 16,7581,3586 16,8191,3587 16,8811,3588 16,9431,3589 17,0041,3590 17,0651,3591 17,1271,3592 17,1891,3593 17,2501,3594 17,3111,3595 17,3731,3596 17,4341,3597 17,4961,3598 17,5571,3599 17,6181,3600 17,6791,3601 17,7411,3602 17,8021,3603 17,8631,3604 17,9241,3605 17,9851,3606 18,0461,3607 18,1071,3608 18,1681,3609 18,2291,3610 18,2901,3611 18,3511,3612 18,4121,3613 18,4731,3614 18,5341,3615 18,5951,3616 18,6551,3617 18,7161,3618 18,7771,3619 18,8371,3620 18,8981,3621 18,9591,3622 19,0191,6223 19,0801,3624 19,1411,3625 19,2011,3626 19,2621,3627 19,3221,3628 19,3821,3629 19,4431,3630 19,5031,3631 19,5641,3632 19,6241,3633 19,6841,3634 19,7451,3635 19,8051,3636 19,8651,3637 19,9251,3638 19,9851,3639 20,0451,3640 20,1061,3641 20,1661,3642 20,2261,3643 20,2861,3644 20,3461,3645 20,406

MTABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix1,3646 20,4661,3647 20,5251,3648 20,5851,3649 20,6451,3650 20,7051,3651 20,7651,3652 20,8251,3653 20,8841,3654 20,9441,3655 21,0041,3656 21,0631,3657 21,1231,3658 21,1831,3659 21,2421,3660 21,3021,3661 21,3611,3662 21,4211,3663 21,4801,3664 21,5401,3665 21,5991,3666 21,6581,3667 21,7181,3668 21,7771,3669 21,8361,3670 21,8951,3671 21,9551,3672 22,0141,3673 22,0731,3674 22,1321,3675 22,1921,3676 22,2511,3777 22,3101,3678 22,3691,3679 22,4281,3680 22,4871,3681 22,5461,3682 22,6051,3683 22,6641,3684 22,7231,3685 22,7811,3686 22,8401,3687 22,8991,3688 22,9581,3689 22,0171,3690 23,0751,3691 23,1341,3692 23,1931,3693 23,2511,3694 23,3101,3695 23,3691,3696 23,4271,3697 23,4861,3698 23,5441,3699 23,6031,3700 23,6611,3701 23,7201,3702 23,7781,3703 23,8361,3704 23,8951,3705 23,9531,3706 24,0111,3707 24,0701,3708 24,1281,3709 24,1861,3710 24,2441,3711 24,3021,3712 24,3611,3713 24,4191,3714 24,4771,3715 24,5351,3716 24,5931,3717 24,6511,3718 24,7091,3719 24,7671,3720 24,8251,3721 24,8831,3722 24,9411,3723 24,9981,3724 25,0561,3725 25,1141,3726 25,1721,3727 25,2301,3728 25,2871,3729 25,3451,3730 25,4031,3731 25,4601,3732 25,5181,3733 25,5761,3734 25,6331,3735 25,6911,3736 25,7481,3737 25,8061,3738 25,8631,3739 25,9211,3740 25,9781,3741 26,0351,3742 26,0931,3743 26,1501,3744 26,2071,3745 26,2651,3746 26,3221,3747 26,3791,3748 26,4361,3749 26,4931,3750 26,5511,3751 26,6081,3752 26,6651,3753 26,7221,3754 26,7791,3755 26,8361,3756 26,8931,3757 26,9501,3758 27,0071,3759 27,0641,3760 27,1211,3761 27,1781,3762 27,2341,3763 27,2911,3764 27,3481,3765 27,4051,3766 27,4621,3767 27,5181,3768 27,5751,3769 27,6321,3770 27,6881,3771 27,7451,3772 27,8021,3773 27,8581,3774 27,9151,3775 27,9711,3776 28,0281,3777 28,0841,3778 28,1411,3779 28,1971,3780 28,2531,3781 28,3101,3782 28,3661,3783 28,4221,3784 28,4791,3785 28,5351,3786 28,5911,3787 28,6481,3788 28,7041,3789 28,7601,3790 28,8161,3791 28,8721,3792 28,9281,3793 28,9841,3794 29,0401,3795 29,0961,3796 29,1521,3797 29,2081,3798 29,2641,3799 29,3201,3800 29,3761,3801 29,4321,3802 29,4881,3803 29,5441,3804 29,6001,3805 29,6551,3806 29,7111,3807 29,7671,3808 29,8231,3809 29,8781,3810 29,9341,3811 29,9291,3812 30,0451,3813 30,1011,3814 30,1561,3815 30,2121,3816 30,2671,3817 30,3231,3818 30,3781,3819 30,4341,3820 30,4891,3821 30,5441,3822 30,6001,3823 30,6551,3824 30,7111,3825 30,7661,3826 30,8211,3827 30,8761,3828 30,9321,3829 30,9871,3830 31,0421,3831 31,0971,3832 31,1521,3833 31,2071,3834 31,2621,3835 31,3171,3836 31,3721,3837 31,4281,3838 31,4821,3839 31,5371,3840 31,5921,3841 31,6471,3842 31,7021,3843 31,7571,3844 31,8121,3845 31,8671,3846 31,9221,3847 31,9761,3848 32,0311,3849 32,0861,3850 32,1401,3851 32,1951,3852 32,2501,3853 32,30491

TABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix921,3854 32,3591,3855 32,4141,3856 32,4681,3857 32,5231,3858 32,5771,3859 32,6321,3860 32,6861,3861 32,7411,3862 32,7951,3863 32,8491,3864 32,9041,3865 32,9581,3866 33,0131,3867 33,0671,3868 33,1211,3869 33,1751,3870 33,2301,3871 33,2841,3872 33,3381,3873 33,3921,3874 33,4461,3875 33,5001,3876 33,5551,3877 33,6091,3878 33,6631,3879 33,7171,3880 33,7711,3881 33,8251,3882 33,8791,3883 33,9331,3884 33,9871,3885 34,0401,3886 34,0941,3887 34,1481,3888 34,2021,3889 34,2561,3890 34,3101,3891 34,3631,3892 34,4171,3893 34,4711,3894 34,5241,3895 34,5781,3896 34,6321,3897 34,6851,3898 34,7391,3899 34,7931,3900 34,8461,3901 34,9001,3902 34,9531,3903 35,0071,3904 35,0601,3905 35,1141,3906 35,1671,3907 35,2201,3908 35,2741,3909 35,3271,3910 35,3801,3911 35,4341,3912 35,4871,3913 35,5401,3914 35,5931,3915 35,6471,3916 35,7001,3917 35,7531,3918 35,8061,3919 35,8591,3920 35,9121,3921 35,9651,3922 36,0191 3923 36,0721,3924 36,1251,3925 36,1781,3926 36,2311,3927 36,2841,3928 36,3371,3929 36,3891,3930 36,4421,3931 36,4951,3932 36,5481,3933 36,6011,3934 36,6541,3935 36,7061,3936 36,7591,3937 36,8121,3938 36,8651,3939 36,9171,3940 36,9701,3941 37,0231,3942 37,0751,3943 37,1281,3944 37,1801,3945 37,2331,3946 37,2861,3947 37,3381,3948 37,3911,3949 37,4431,3950 37,4951,3951 37,5481,3952 37,6001,3953 37,6531,3954 37,7051,3955 37,7571,3956 37,8101,3957 37,8621,3958 37,9141,3959 37,9671,3960 38,0191,3961 38,0711,3962 38,1231,3963 38,1751,3964 38,2281,3965 38,2801,3966 38,3321,3967 38,3841,3968 38,4361,3969 38,4881,3970 38 5401,3971 38 5921,3972 38,6441,3973 38,6961,3974 38,7841,3975 38,8001,3976 38,8521,3977 38,9041,3978 38,9551,3979 39,0071,3980 39,0591,3981 39,1111,3982 39,1631,3983 39,2141,3984 39,2661,3985 39,3181,3986 39,3701,3987 39,4211,3988 39,4731,3989 39,5251,3990 39,5761,3991 39,6281,3992 39 6791,3993 39 7311,3994 39,7821,3995 39,8341,3996 39,8851,3997 39,9371,3998 39,9881,3999 40,0401,4000 40,0911,4001 40,1421,4002 40,1941,4003 40,2451,4004 40,2951,4005 40,3481,4006 40,3991,4007 40,4501,4008 40,5011,4009 40,5531,4010 40,6041,4011 40,6551,4012 40,7061,4013 40,7571,4014 40,8081,4015 40,8601,4016 40,9111,4017 40,9621,4018 41,0131,4019 41,0641,4020 41,1151,4021 41,1661,4022 41,2171,4023 41,2681,4024 41,3181,4025 41,3691,4026 41,4201,4027 41,4711,4028 41,5221,4029 41,5731,4030 41,6231,4031 41,6741,4032 41,7251,4033 41,7761,4034 41,8261,4035 41,8771,4036 41,9281,4037 41,9781,4038 42,0291,4039 42,0801,4040 42,1301,4041 42,1811,4042 42,2311,4043 42,2821,4044 42,3321,4045 42,3831,4046 42,4331,4047 42,4841,4048 42,5341,4049 42,5851,4050 42,6351,4051 42,6851,4052 42,7361,4053 42,7861,4054 42,8361,4055 42,8871,4056 42,9371,4057 42,9871,4058 43,0371,4059 43,0881,4060 43,1381,4061 43,188

MTABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix1,4062 43,2381,4063 43,2881,4064 43,3381,4065 43,3881,4066 43,4391,4067 43,4891,4068 43,5391,4069 43,5891,4070 43,6391,4071 43,6891,4072 43,7391,4073 43,7891,4074 43,8381,4075 43,8881,4076 43,9381,4077 43,9881,4078 44,0381,4079 44,0881,4080 44,1381,4081 44,1871,4082 44,2371,4083 44,2871,4084 44,3371,4085 44,3861,4086 44,4361,4087 44,4861,4088 44,5351,4089 44,5851,4090 44,6351,4091 44,6841,4092 44,7341,4093 44,7831,4094 44,8331,4095 44,8821,4096 44,9321,4097 44,9811,4098 45,0311,4099 45,0801,4100 45,1301,4101 45,1791,4102 45,2281,4103 45,2781,4104 45,3271,4105 45,3761,4106 45,4261,4107 45,4751,4108 45,5241,4109 45,5741,4110 45,6231,4111 45,6721,4112 45,7211,4113 45,7701,4114 45,8201,4115 45,8691,4116 45,9181,4117 45,9671,4118 46,0161,4119 46,0651,4120 46,1141,4121 46,1631,4122 46,2121,4123 46,2611,4124 46,3101,4125 46,3591,4126 46,4081,4127 46,4571,4128 46,5061,4129 46,5551,4130 46,6041,4131 46,6521,4132 46,7011,4133 46,7501,4134 46,7991,4135 46,8481,4136 46,8961,4137 46,9451,4138 46,9941,4139 47,0431,4140 47,0911,4141 47,1401,4142 47,1881,4143 47,2371,4144 47,2861,4145 47,3341,4146 47,3831,4147 47,4311,4148 47,4801,4149 47,5281,4150 47,5771,4151 47,6251,4152 47,6741,4153 47,7221,4154 47,7711,4155 47,8191,4156 47,8681,4157 47,9161,4158 47,9641,4159 48,0131,4160 48,0611,4161 48,1091,4162 48,1581,4163 48,2061,4164 48,2541,4165 48,3021,4166 48,3501,4167 48,3991,4168 48,4471,4169 48,4951,4170 48,5431,4171 48,5911,4172 48,6391,4173 48,6871,4174 48,7351,4175 48,7841,4176 48,8321,4177 48,8801,4178 48,9281,4179 48,9761,4180 49,0231,4181 49,0711,4182 49,1191,4183 49,1671,4184 49,2151,4185 49,2631,4186 49,3111,4187 49,3591,4188 49,4071,4189 49,4541,4190 49,5021,4191 49,5501,4192 49,5981,4193 49,6451,4194 49,6931,4195 49,7411,4196 49,7881,4197 49,8361,4198 49,8841,4199 49,9311,4200 49,9791,4201 50,0271,4202 50,0741,4203 50,1221,4204 50,1691,4205 50,2171,4206 50,2641,4207 50,3121,4208 50,3591,4209 50,4071,4210 50,4541,4211 50,5021,4212 50,5491,4213 50,5961,4214 50,6441,4215 50,6911,4216 50,7381,4217 50,7861,4218 50,8331,4219 50,8801,4220 50,9281,4221 50,9751,4222 51,0221,4223 51,0691,4224 51,1161,4225 51,1641,4226 51,2111,4227 51,2581,4228 51,3051,4229 51,3521,4230 51,3991,4231 51,4461,4232 51,4931,4233 51,5401,4234 51,5871,4235 51,6341,4236 51,6811,4237 51,7281,4238 51,7751,4239 51,8221,4240 51,8591,4241 51,9161,4242 51,9631,4243 52,0101,4244 52,0571,4245 52,1041,4246 52,1501,4247 52,1971,4248 52,2441,4249 52,2911,4250 52,3381,4251 52,3841,4252 52,4311,4253 52,4781,4254 52,5241,4255 52,5711,4256 52,6181,4257 52,6641,4258 52,7111,4259 52,7581,4260 52,8041,4261 52,8511,4262 52,8971,4263 52,9441,4264 52,9901,4265 53,0371,4266 53,0831,4267 53,1301,4268 53,1761,4269 53,22393

TABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix941,4270 53,2691,4271 53,3161,4272 53,3621,4273 53,4081,4274 53,4551,4275 53,5011,4276 53,5481,4277 53,5941,4278 53,6401,4279 53,6861,4280 53,7331,4281 53,7791,4282 53,8251,4283 53,8711,4284 53,9181,4285 53,9641,4286 54,0101,4287 54,0561,4288 54,1021,4289 54,1481,4290 54,1941,4291 54,2411,4292 54,2871,4293 54,3331,4294 54,3791,4295 54,4251,4296 54,4711,4297 54,5171,4298 54,5631,4299 54,6091,4300 54,6551,4301 54,7011,4302 54,7461,4303 54,7921,4304 54,8381,4305 54,8841,4306 54,9301,4307 54,9761,4308 55,0221,4309 55,0671,4310 55,1131,4311 55,1591,4312 55,2051,4313 55,2501,4314 55,2961,4315 55,3421,4316 55,3881,4317 55,4331,4318 55,4791,4319 55,5241,4320 55,5701,4321 55,6161,4322 55,6611,4323 55,7071,4324 55,7521,4325 55,7981,4326 55,8441,4327 55,8891,4328 55,9351,4329 55,9801,4330 56,0261,4331 56,0711,4332 56,1161,4333 56,1621,4334 56,2071,4335 56,2531,4336 56,2981,4337 56,3431,4338 56,3891,4339 56,4341,4340 56,4791,4341 56,5251,4342 56,5701,4343 56,6151,4344 56,6601,4345 56,7061,4346 56,7511,4347 56,7961,4348 56,8411,4349 56,8871,4350 56,9321,4351 56,9771,4352 57,0221,4353 57,0671,4354 57,1121,4355 57,1571,4356 57,2021,4357 57,2471,4358 57,2921,4359 57,3371,4360 57,3821,4361 57,4271,4362 57,4721,4363 57,5171,4364 57,5621,4365 57,6071,4366 57,6521,4367 57,6971,4368 57,7421,4369 57,7871,4370 57,8321,4371 57,8771,4372 57,9211,4373 57,9661,4374 58,0111,4375 58,0561,4376 58,1011,4377 58,1451,4378 58,1901,4379 58,2351,4380 58,2791,4381 58,3241,4382 58,3691,4383 58,4131,4384 58,4581,4385 58,5031,4386 58,5471,4387 58,5921,4388 58,6371,4389 58,6811,4390 58,7261,4391 58,7701,4392 58,8151,4393 58,8591,4394 58,9041,4395 58,9841,4396 58,9931,4397 59,0371,4398 59,0821,4399 59,1261,4400 59,1701,4401 59,2151,4402 59,2591,4403 59,3041,4404 59,3481,4405 59,3921,4406 59,4371,4407 59,4811,4408 59,5251,4409 59,5691,4410 59,6141,4411 59,6581,4412 59,7021,4413 59,7461,4414 59,7911,4415 59,8351,4416 59,8791,4417 59,9231,4418 59,9671,4419 60,0111,4420 60,0561,4421 60,1001,4422 60,1441,4423 60,1881,4424 60,2321,4425 60,2761,4426 60,3201,4427 60,3641,4428 60,4081,4429 60,4521,4430 60,4961,4431 60,5401,4432 60,5841,4433 60,6231,4434 60,6721,4435 60,7161,4436 60,7591,4437 60,8031,4438 60,8471,4439 60,8911,4440 60,9351,4441 60,9791,4442 61,0231,4443 61,0661,4444 61,1101,4445 61,1541,4446 61,1981,4447 61,2411,4448 61,2851,4449 61,3291,4450 61,3721,4451 61,4161,4452 61,4601,4453 61,5031,4454 61,5471,4455 61,5911,4456 61,6341,4457 61,6781,4458 61,7211,4459 61,7651,4460 61,3091,4461 61,8521,4462 61,8951,4463 61,9391,4464 61,9831,4465 62,0261,4466 62,0701,4467 62,1131,4468 62,1561,4469 62,2001,4470 62,2431,4471 62,2871,4472 62,3301,4473 62,3731,4474 62,4171,4475 62,4601,4476 62,5031,4477 62,547

MTABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix1,4478 62,5901,4479 62,6331,4480 62,6771,4481 62,7201,4482 62,7631,4483 62,8061,4484 62,8491,4485 62,8931,4486 62,9361,4487 62,9791,4488 63,0221,4489 63,0651,4490 63,1081,4491 63,1521.4492 63,1951,4493 63,2381,4494 63,2811,4495 63,3241,4496 63,3671,4497 63,4101,4498 63,4531,4499 63,4961,4500 63,5391,4501 63,5821,4502 63,6251,4503 63,6681,4504 63,7111,4505 63,7541,4506 63,7971,4507 63,8401,4508 63,8821,4509 63,9251,4510 63,9681,4511 64,0111,4512 64,0541,4513 64,0971,4514 64,1391,4515 64,1821,4516 64,2251,4517 64,2681,4518 64,3111,4519 64,3531,4520 64,3961,4521 64,4391,4522 64,4811,4523 64,5241,4524 64,5671,4525 64,6091,4526 64,6521,4527 64,6951,4528 64,7371,4529 64,7801,4530 64,8231,4531 64,8651,4532 64,9081,4533 64,9501,4534 64,9921,4535 65,0351,4536 65,0781,4537 65,1201,4538 65,1631,4539 65,2051,4540 65,2481,4541 65,2901,4542 65,3331,4543 65,3751,4544 65,4171,4545 65,4601,4546 65,5021,4547 65,5441,4548 65,5871,4549 65,6291,4550 65,6721,4551 65,7141,4552 65,7561,4553 65,7981,4554 65,8411,4555 65,8831,4556 65,9251,4557 65,9671,4558 66,0101,4559 66,0521,4560 66,0941,4561 66,1361,4562 66,1781,4563 66,2211,4564 66,2631,4565 66,3051,4566 66,3471,4567 66,3891,4568 66,4311,4569 66,4731,4570 66,5151,4571 66,5571,4572 66,5991,4573 66,6411,4574 66,6831,4575 66,7251,4576 66,7671,4577 66,8091,4578 66,8511,4579 66,8931,4580 66,9351,4581 66,9771,4582 67,0191,4583 67,0611,4584 67,1031,4585 67,1451,4586 67,1861,4587 67,2281,4588 67,2701,4589 67,3121,4590 67,3541,4591 67,3961,4592 67,4371,4593 67,4791,4594 67,5211,4595 67,5631,4596 67,6041,4597 67,6461,4598 67,6881,4599 67,7291,4600 67,7711,4601 67,8131,4602 67,8541,4603 67,8951,4604 67,9381,4605 67,9791,4606 68,0211,4607 68,0631,4608 68,1041,4609 68,1461,4610 68,1871,4611 68,2291,4612 68,2701,4613 68,3121,4614 68,3531,4615 68,3951,4616 68,4361,4617 68,4781,4618 68,5191,4619 68,5611,4620 68,6021,4621 68,6431,4622 68,6851,4623 68,7261,4624 68,7681,4625 68,8091,4626 68,8501,4627 68,8921,4628 68,9331,4629 68,9741,4630 69,0161,4631 69,0571,4632 69,0981,4633 69,1391,4634 69,1811,4635 69,2221,4636 69,2631,4637 69,3041,4638 69,3461,4639 69,3871,4640 69,4281,4641 69,4691,4642 69,5101,4643 69,5511,4644 69,5931,4645 69,6341,4646 69,6751,4647 69,7161,4648 69,7571,4649 69,7981,4650 69,8391,4651 69,8801,4652 69,9211,4653 69,9621,4654 70,0031,4655 70,0441,4656 70,0851,4657 70,1261,4658 70,1671,4659 70,2081,4660 70,2491,4661 70,2901,4662 70,3311,4663 70,3721,4664 70,4131,4665 70,4531,4666 70,4941,4667 70,5351,4668 70,5761,4669 70,6171,4670 70,6581,4671 70,6981,4672 70,7391,4673 70,7801,4674 70,8211,4675 70,8611,4676 70,9021,4677 70,9431,4678 70,9841,4679 71,0241,4680 71,0651,4681 71,1061,4682 71,1461,4683 71,1871,4684 71,2281,4685 71,26895

TABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix961,4686 71,3091,4687 71,3491,4688 71,3901,4689 71,4311,4690 71,4711,4691 71,5121,4692 71,5521,4693 71,5931,4694 71,6331,4695 71,6741,4696 71,7141 4697 71,7551 4698 71,7951,4699 71,8361,4700 71,8761,4701 71,9171,4702 71,9571,4703 71,9981,4704 72,0381,4705 72,0781,4706 72,1191,4707 72,1591,4708 72,1991,4709 72,2401,4710 72,2801,4711 72,3201,4712 72,3611,4713 72,4011,4714 72,4411,4715 72,4821,4716 72,5221,4717 72,5621,4718 72,6021,4719 72,6431,4720 72,6831,4721 72,7231,4722 72,7631,4723 72,8031,4724 72,8431,4725 72,8841,4726 72,9241,4727 72,9641,4728 73,0041,4729 73,0441,4730 73,0841,4731 73,1241,4732 73,1641,4733 73,2041,4734 73,2441,4735 73,2851,4736 73,3251,4737 73,3651,4738 73,4051,4739 73,4451,4740 73,4851,4741 73,5241,4742 73,5641,4743 73,6041,4744 73,6441,4745 73,6841,4746 73,7241,4747 73,7641,4748 73,8041,4749 73,8441,4750 73,8841,4751 73,9241,4752 73,9631,4753 74,0031,4754 74,0431,4755 74,0831,4756 74,1231,4757 74,1621,4758 74,2021,4759 74,2421,4760 74,2821,4761 74,3211,4762 74,3611,4763 74,4011,4764 74,4411,4765 74,4801,4766 74,5201,4767 74,5601,4768 74,5991,4769 74,6331,4770 74,6781,4771 74,7181,4772 74,7581,4773 74,7971,4774 74,8371,4775 74,8761,4776 74,9161,4777 74,9561,4778 74,9951,4779 75,0351,4780 75,0741,4781 75,1141,4782 75,1531,4783 75,1931,4784 75,2321,4785 75,2721,4786 75,3111,4787 75,3501,4788 75,3901,4789 75,4291,4790 75,4691,4791 75,5081,4792 75,5471,4793 75,5871,4794 75,6261,4795 75,6661,4796 75,7051,4797 75,7441,4798 75,7841,4799 75,8231,4800 75,8621,4801 75,9011,4802 75,9411,4803 75,9801,4804 76,0191,4805 76,0581,4806 76,0981,4807 76,1371,4808 76,1761,4809 76,2151,4810 76,2541,4811 76,2941,4812 76,3331,4813 76,3721,4814 76,4111,4815 76,4501,4816 76,4891,4817 76,5281,4818 76,5671,4819 76,6071,4820 76,6461,4821 76,6851,4822 76,7241,4823 76,7631,4824 76,8021,4825 76,8411,4826 76,8801,4827 76,9191,4828 76,9581,4829 76,9971,4830 77,0361,4831 77,0751,4832 77,1131,4833 77,1521,4834 77,1911,4835 77,2301,4836 77,2691,4837 77,3081,4838 77,3471,4839 77,3861,4840 77,4251,4841 77,4631,4842 77,5021,4843 77,5411,4844 77,5801,4845 77,6191,4846 77,6571,4847 77,6961,4848 77,7351,4849 77,7741,4850 77,8121,4851 77,8511,4852 77,8901,4853 77,9281,4854 77,9671,4855 78,0061,4856 78,0451,4857 78,0831,4858 78,1221,4859 78,1601,4860 78,1991,4861 78,2381,4862 78,2761,4863 78,3151,4864 78,3531,4865 78,3921,4866 78,4311,4867 78,4691,4868 78,5081,4869 78,5461,4870 78,5851,4871 78,6231,4872 78,6621,4873 78,7001,4874 78,7391,4875 78,7771,4876 78,8161,4877 78,8541,4878 78,8921,4879 78,9311,4880 78,9691,4881 79,0081,4882 79,0461,4883 79,0841,4884 79,1231,4885 79,1611,4886 79,1991,4887 79,2381,4888 79,2761,4889 79,3141,4890 79,3531,4891 79,3911,4892 79,4291,4893 79,468

MTABLA I (Continuación)Conversión de Indice de Refracción a Grados Brixn Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix1,4894 79,5061,4895 79,5441,4896 79,5821,4897 79,6201,4898 79,6591,4899 79,6971,4900 79,7351,4901 79,7731,4902 79,8111,4903 79,8501,4904 79,8881,4905 79,9251,4906 79,9641,4907 80,0021,4908 80,0401,4909 80,0781,4910 80,1161,4911 80,1541,4912 80,1921,4913 80,2311,4914 80,2691,4915 80 3071,4916 80 3451,4917 80,3831,4918 80,4211,4919 80,4591,4920 80,4971,4921 80,5341,4922 80,5721,4923 80,6101,4924 80,6481,4925 80,6861,4926 80,7241,4927 80,7621,4928 80,8001,4929 80,8381,4930 80,8761,4931 80,9131,4932 80,9511,4933 80,9891,4934 81,0271,4935 81,0651,4936 81,1031,4937 81,1401,4938 81,1781,4939 81,2161,4940 81,2541,4941 81,2911,4942 81,3291,4943 81,3671,4944 81,4051,4945 81,4421,4946 81,4801,4947 81,5181,4948 81,5551,4949 81,5931,4950 81,6311,4951 81,6681,4952 81,7061,4953 81,7441,4954 81,7811,4955 81,8191,4956 81,8561,4957 81,8941,4958 81,9321,4959 81,9691,4960 82,0071,4961 82,0441,4962 82,0821,4963 82,1191,4964 82,1571 4965 82,1941 4966 82,2321,4967 82,2691,4968 82,3071,4969 82,3441,4970 82,3811,4971 82,4191,4972 82,4561,4973 82,4941,4974 82,5311,4975 82,5691,4976 82,6061,4977 82,6431,4978 82,6811,4979 82,7181,4980 82,7551,4981 82,7931,4982 82,8301,4983 82,8671,4984 82,9051,4985 82,9421,4986 82,9791,4987 83,0161,4988 83,0541,4989 83,0911,4990 83,1281,4991 83,1651,4992 83,2021,4993 83,2401,4994 83,2771,4995 83,3141,4996 83,3511,4997 83,3881,4998 83,4251,4999 83,4631,5000 83.5001,5001 83,5371,5002 83,5741,5003 83,6111,5004 83,6481,5005 83,6851,5006 83,7221,5007 83,7591,5008 83,7961,5009 83,8331,5010 83,8701,5011 83,9071,5012 83,9441,5013 83,9811,5014 84,0181,5015 84,0551,5016 84,0921,5017 84,1291,5018 84,1661,5019 84,2031,5020 84,2401,5021 84,2771,5022 84,3141,5023 84,3511,5024 84,3331,5025 84,4241,5026 84,4611,5027 84,4981,5028 84,5351,5029 84,5721,5030 84,6091,5031 84,6451,5032 84,6821,5033 84,7191,5034 84,7561,5035 84,7921,5036 84,8291,5037 84,8661,5038 84,9031,5039 84,9391,5040 84,9761,5041 85,0131,5042 85,0491,5043 85,0861,5044 85,1231,5045 85,1591,5046 85,1951,5047 85,2331,5048 85,2691,5049 85,3061,5050 85,3431,5051 85,3791,5052 85,4161,5053 85,4521,5054 85,4891,5055 85,5251,5056 85,5621,5057 85,5981,5058 85,6351,5059 85,6721,5060 85,7031,5061 85,7441,5062 85,7811,5063 85,8171,5064 85,8541,5065 85,8901,5066 85,9271,5067 85,9631,5068 86,0001,5069 86,0361,5070 86,0721,5071 86,1091,5072 86,1451,5073 86,1821,5074 86,2181,5075 86,2541,5076 86,2911,5077 86,3271,5078 86,3631,5079 86,39997

TABLA IlGRADO BRIXTemp.°C 0 5 10 15 20 25 30 40 50 60 7010 0,50 0,54 0,58 0,61 0,64 0,66 0,68 0,72 0,74 0,76 0,7911 0,46 0,49 0,53 0,55 0,58 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,7112 0,42 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,61 0,6313 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0.48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,5514 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48RESTAR15 0,27 0,29 0,31 0,33 0,34 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39 0,4016 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,28 0,30 0,30 0,31 0,3217 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23 0,2418 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,16 0,1619 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,0821 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,0822 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,1623 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,2424 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,3225 0,33 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,40 0,40 0,40SUMAR26 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,48 0,48 0,4827 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,55 0,55 0,56 0,56 0,56 0,5628 0,56 0,57 0,60 0,61 0,62 0,63 0,63 0,64 0,64 0,64 0,6429 0,64 0,66 0,68 0,69 0,71 0,72 0,72 0,73 0,73 0,73 0,7330 0,72 0,74 0,77 0,78 0,79 0,80 0,80 0,81 0,81 0,81 0,81982. DENSIDAD2.1. Principio.La densidad (20°/20ºC) del líquido a analizarse determina por medio del picnómetro.2.2. Material y aparatos.2.2.1. Estufa.2.2.2. Desecador.2.2.3. Baño a 20°C.2.2.4. Balanza analítica sensible a 0,1 mg.2.2.5. Picnómetro Reischauer de 50 ml o similar.El picnómetro Reischauer consiste en unmatraz de 50 ml de capacidad, cerrado conun capuchón esmerilado provisto de un cuello de6 cm de longitud y 4 mm de diámetro interior.2.2.6. Erlenmeyer de 500 ml.2.2.7. Embudo de 10 cm de diámetro.2.2.8. Tubos capilares.2.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS502612 DERQUIM Mezcla crómicaPapel de filtro2.4. Procedimiento.Si el líquido a analizar contiene una apreciablecantidad de gas carbónico, conviene eliminarcompletamente éste agitando fuertemente en unErlenmeyer y filtrarlo a continuación por medio deun filtro cubierto de un vidrio de reloj.2.4.1 Determinación del peso del picnómetrovacío: Limpiar el picnómetro con Mezcla crómicaDERQUIM, caliente si es necesario; despuésenjuagar cuidadosamente con Agua PA-ACS.Secar durante tres horas en la estufa a 105-108ºC. Enfriar en desecador hasta temperaturaambiente y expresar el resultado con cuatro cifrasdecimales.2.4.2. Determinación del peso del picnómetrolleno de agua. Llenar el picnómetro hasta la marcacon Agua PA-ACS. Tapar y ponerlo en un baño deagua a 20ºC durante veinte minutos. Estando latemperatura equilibrada, enrasar el picnómetro(siempre sumergido en el baño de agua) con laayuda de un capilar.Secar la parte vacía del cuello del picnómetropor medio del papel de filtro.Colocar el tapón, retirar el picnómetro delbaño de agua y secar cuidadosamente. El peso

Mdel picnómetro lleno de agua debe ser determinadocon una precisión de cuatro cifras decimales.2.4.3. Determinación del peso del picnómetrolleno de muestra: Después de haber vaciado elpicnómetro, lavar varias veces con la muestra yproceder como en 2.4.2., sustituyendo el AguaPA-ACS por zumo de uva.2.5. Cálculos.Calcular la densidad 20º/20°C aplicando lasiguiente fórmula:c - ad = ———b - aSiendo:a = Peso picnómetro vacío.b = Peso picnómetro lleno de agua hasta lamarca.c = Peso picnómetro lleno de líquido paraanalizar hasta la marca.La densidad obtenida debe expresarse conuna precisión de cuatro cifras decimales.2.6. Referencias.Federation Internationale des Producteurs deJus de Fruits. Método número 1, 1968.3. pH3.1. Principio.Medida potenciométrica a 20ºC, previa eliminacióndel dióxido de carbono por agitación enfrío y con vacío parcial.3.2. Material y aparatos.3.2.1. pH-metro.3.2.2. Electrodo/s para medida de pH.3.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS131481 Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO272168 Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02(20ºC) ST272170 Tampón, Solución pH 7,00 ± 0,02(20ºC) ST3.3.1. Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02(20ºC) ST o prepararla disolviendo 10,211 g dePotasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO (KHC 6 H 4 O 4 )(secado una hora a 105ºC) en un litro de Agua PA-ACS a 20ºC.3.4. Procedimiento.Introducir un volumen adecuado de muestraen un kitasato. Conectar a vacío agitando al mismotiempo el matraz, hasta eliminación del gascarbónico.Tomar un volumen de muestra exento de dióxidode carbono y determinar el pH.3.5. Expresión de los resultados.Expresar el pH medido a 20ºC con uno o dosdecimales, según la precisión del aparato.3.6. Observaciones.3.6.1. Antes de cada nueva medida, limpiar loselectrodos con agua destilada y secarlos conpapel de filtro.3.6.2. El electrodo de calomelanos debe serllenado de tiempo en tiempo de solución saturadade ClK.3.6.3. El electrodo de vidrio debe ser conservadoen agua y el de calomelanos en soluciónsaturada de ClK. Los electrodos combinadosdeben ser conservados en solución saturada deClK.3.6.4. El calibrado se hace con ayuda de lassoluciones tampones siguiendo las indicacionesparticulares del fabricante del aparato.3.7. Referencias.Federation International des Producteurs deJus de Fruits. Método número 11, año 1968.4. ACIDEZ TOTAL4.1. Principio.Valoración potenciométrica a pH=8,1 de la acidezdel zumo de uva, previa eliminación del dióxidode carbono.4.2. Material y aparatos.4.2.1. pH-metro con electrodo/s para medidasde pH.4.2.2. Agitador magnético.4.3. Reactivos.171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE4.4. Procedimiento.Tomar 20 ml del zumo de uva, exento de dióxidode carbono, obtenido como en 3.4, y llevar aun vaso de unos 100 ml de capacidad. Poner enmarcha el agitador y valorar con solución 4.3 hastapH 8,1 a 20ºC.Mantener en marcha el agitador durante laoperación, que debe durar, como mínimo, cincominutos.4.5. Cálculos.Calcular la acidez total expresada en meq/l,con una aproximación de 0,1 meq/l, o en gramosde ácido tartárico/l.99

100VAcidez total (meq/l) = 10 ——2VAcidez total (g ac.tartárico/l) = 0,75 ——2Siendo:V= Volumen, en ml, de solución de SodioHidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE4.6. ReferenciasRecuil des Méthodes Internationales d’Analysedes Vins O.I.V. A 10 (1969), 1-3.5. ACIDEZ VOLATIL5.1. Principio.Separación de los ácidos volátiles del zumo deuva por arrastre con vapor de agua, evitando lapresencia de dióxido de carbono en el destilado.Valoración con solución de sodio hidróxido, descontandolos contenidos de ácido sórbico y dedióxido de azufre libre y total.5.2. Material y aparatos.5.2.1. Aparato para destilación (ver figura 21.Ipág. 52).5.2.1.1. Matraz generador de vapor de 3.500 ml(a). El agua condensada en el tubo de unión delmatraz con el borboteador, se purga por el purgador(c).5.2.1.2. Borboteador (b). Tubo cilíndrico de3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tuboreposa sobre un disco de amianto de 15 cm dediámetro con un orificio central de 29 mm. El tubo(d) por el que entra el vapor en el borboteadordebe llegar a 1cm del fondo.5.2.1.3. Columna rectificadora (e). De 20 mmde diámetro y 50 cm de altura.5.2.1.4. Refrigerante de West (f). De 40 cm delongitud útil, colocado verticalmente.5.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131066 Acido L(+) Tartárico PA-ACS-ISO171073 Agua de Cal solución saturada RE(o 171071 Agua de Barita soluciónsaturada RE)131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121085 Etanol 96% PA131325 Fenolftaleína PA-ACS131542 Potasio Yoduro PA-ISO131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidratoPA-ACS-ISO182153 Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV5.3.1. Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV5.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol96% PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluirconvenientemente.5.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 ydeterminar el factor.5.3.4. Almidón soluble RE.5.4. ProcedimientoAlimentar el generador de vapor con Agua deCal solución saturada RE o Agua de Barita soluciónsaturada RE limpia, manteniéndolo lleno hastaunos 2/3 de su volumen. Poner en el borboteador20 ml de zumo de uva exento de gas carbónico,como en 3.4. Añadir al zumo de uva unos 0,5 g deAcido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marchael generador de vapor, manteniendo abierta la salidadel tubo purgador del vapor; después de cerraréste, calentar el borboteador. Durante la operaciónse regula el calentador de forma que el volumen dellíquido en el borboteador no pase sensiblementede los veinte ml iniciales.Destilar en unos doce-quince minutos 250 ml.Valorar con Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N)SV en presencia de dos gotas de Fenolftaleínacomo indicador.Valorar el dióxido de azufre libre en este mismodestilado, añadiendo al terminar la valoraciónanterior una gota de Acido Clorhídrico 37%PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente, valorandoel dióxido de azufre libre con solución de Yodo0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón solubleRE como indicador y un cristal de PotasioYoduro PA-ISO.Para determinar el dióxido de azufre combinadocon el Acetaldehído, añadir 20 ml de soluciónsaturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO (el liquido toma un color rosa pálido) yvalorar nuevamente con solución de Yodo 0,01N.5.5. Cálculos.Calcular la acidez volátil expresada en meq/l oen g de ácido acético/l.Acidez volátil (meq/l)=5(V/2-V’/10-V’’/20)Acidez volátil (g/l ácido acético)=0,3(V/2-V’/10-V”/20)Siendo:V = Volumen en ml utilizados de solución desodio hidróxido 0,05N.V’ = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado enla oxidación del dióxido de azufre libre.V” = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado enla oxidación del dióxido de azufre combinadocon el acetaldehído.

M5.6. Observaciones.5.6.1. La determinación de la acidez volátil seefectuará inmediatamente después de la aperturadel envase.5.6.2. En la destilación del zumo de uva parala determinación de la acidez volátil, el ácido sórbicopasa casi en su totalidad al destilado, falseandoel resultado del análisis. Efectuar lacorrección.100 mg de ácido sórbico equivalen a 0,892meq = 0,0535 g de ácido acético.5.6.3. La corrección de la acidez volátil se realizasegún la norma Jaulmes, descontándose Iatotalidad del contenido en dióxido de azufre libre yla mitad del contenido de dióxido de azufre total.6. SOLIDOS SOLUBLESEl contenido en sólidos solubles expresado eng/l se calcula a partir del valor de la densidad,obtenida según el método oficial número 2 y utilizandola tabla adjunta.TABLA 6.1Estracto seco total (g/l)Densidadrelativacon dosdecimales01Tercer decimal de la densidad relativa2 3 4 5 6 7 8 9Gramos por litro del extracto1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,21,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,11,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,11,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,11,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,21,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,31,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,51,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,81,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,01,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,41,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,81,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,21,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,81,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,31,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,91,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,61,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,41,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,31,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,21,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,11011,20 527,8 530,5 533,3 536,0 538,7 541,4 544,1 546,8 549,6 552,31,21 555,0 557,7 560,4 563,1 565,8 568,5 571,2 573,9 576,6 579,3

TABLA 6.1(Continuación)Densidadrelativacon dosdecimales0 1Tercer decimal de la densidad relativa2 3 4 5 6 7 8 9Gramos por litro del extracto1,22 582,0 584,8 587,5 590,2 593,0 595,7 598,4 601,1 603,9 606,61,23 609,3 612,1 614,8 617,5 620,3 623,0 625,7 628,4 631,2 633,91,24 636,6 639,4 642,1 644,9 647,4 650,3 653,1 655,8 658,6 661,31,25 664,0 666,8 669,5 672,3 675,0 677,7 680,5 683,2 686,0 688,71,26 691,4 694,2 697,0 699,8 702,5 705,3 708,1 710,8 713,6 710,41,27 719,1 721,9 724,7 727,4 730,2 732,9 735,7 738,5 741,2 744,01,28 746,7 749,5 752,3 755,1 757,8 760,6 763,4 766,1 768,9 771,71,29 774,4 777,2 780,0 782,8 785,6 788,3 791,1 793,9 796,7 799,51,30 802,3 805,0 807,8 810,6 813,4 816,2 819,0 821,8 824,6 827,41,31 830,2 833,1 835,9 838,7 841,5 844,3 847,1 849,9 852,7 855,51,32 858,3 861,2 864,0 866,8 869,6 872,4 875,3 878,1 880,9 883,71,33 886,5 889,4 892,2 895,0 897,9 900,7 903,5 906,4 909,2 912,01,34 914,8 917,7 920,5 923,3 926,2 929,0 931,8 934,7 937,5 940,31,35 943,1TABLA DE INTERPOLAR4° decimalde la densidadrelativag/l del extracto seco1021 0,262 0,523 0,784 1,045 1,306 1,567 1,828 2,089 2,34

M7. AZUCARES TOTALES Y REDUCTORES7.1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reductorasdistintas de los azúcares por defecación, inversióny posterior valoración basada en la acciónreductora de los azúcares sobre una solucióncupro-alcalina.7.2. Material y aparatos.7.2.1. Material necesario para volumetrías.7.2.2. Baño de agua.7.2.3. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante dereflujo.7.3. Reactivos131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS131505 Potasio Hexacianoferrato III 3-hidratoPA-ACS131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO172174 Reactivo de Luff-Schoorl RE131648 Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO181723 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA7.3.1. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % envolumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO con Agua PA-ACS.7.3.2. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.7.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.7.3.4. Solución de Potasio Hidróxido al 30%.Disolver unos gramos de Potasio Hidróxido 85%lentejas PA-ISO en el volumen conveniente de AguaPA-ACS.7.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%. UsesePotasio Yoduro PA-ISO, disuelto con Agua PA-ACS hasta la concentración deseada. Conservar enfrasco topacio.7.3.6. Solución de Almidón al 1%. Disolver 1 gde Almidón soluble RE con Agua PA-ACS, enrasandoa 100 ml.7.3.7. Solución de Carrez I:Disolver 150 g de Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato PA-ACS en un litro de Agua PA-ACS.7.3.8. Solución de Carrez II:Disolver 300 g de Zinc Sulfato 7-hidrato PA en unlitro de Agua PA-ACS.7.3.9. Reactivo de Luff-Schoorl RE, o bien prepararlode la siguiente forma:Disolver 50 g de Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO en 500 ml de Agua PA-ACS y 143,7 g de SodioCarbonato anhidro PA-ACS-ISO en 350 ml de AguaPA-ACS tibia; cuando se haya enfriado, mezclarcon cuidado ambas soluciones. Disolver 25 g deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 mlde Agua PA-ACS. Añadir a la solución anterior yenrasar con Agua PA-ACS hasta 1 l.7.3.10. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.7.3.11. Solución de Fenolftaleína: Disolver 0,1 gde Fenolftaleína PA-ACS en 100 ml de Etanol 96%v/v PA.7.4. Procedimiento.7.4.1. Preparación de la muestra: Tomar conpipeta 25 ml de la muestra en matraz aforado de500 ml. Añadir 150 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de lasolución Carrez I; mezclar y añadir 5 ml de la soluciónCarrez II. Mezclar y enrasar con Agua PA-ACS.Dejar en reposo diez minutos y filtrar.7.4.2. Inversión de los azúcares: Tomar conpipeta 25 ml de la muestra preparada según (7.4.1.)y llevar a un matraz de 100 o 200 ml, según la dilucióna emplear. Diluir con Agua PA-ACS hasta 75 mly añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 1-hidrato PA-ACS-ISO. Antes de 5 minutos llevarlo a 67-70°C enun baño de agua, mantenerlo durante cinco minutosa esa temperatura. Comprobar la temperaturacon un termómetro introducido en la disolución.Enfriar inmediatamente el matraz a 20°C, quitar eltermómetro y aclararlo. Neutralizar el contenido consolución de Potasio Hidróxido al 30%, utilizandoFenolftaleína como indicador. Añadir unas gotas deAcido Acético glacial PA-ACS-ISO hasta que elcolor de la Fenolftaleína desaparezca. Enrasar elmatraz con Agua PA-ACS.7.4.3. Determinación de los azúcares totales:La solución de la muestra no debe contener másde 50 mg de azúcares reductores. Tomar conpipeta 25 ml de la muestra preparada según(7.4.2.) sobre un matraz que contenga 25 ml de lasolución de Luff-Schoorl (7.3.9.). Añadir al matrazunas perlas de vidrio y conectar el refrigerante dereflujo. Calentar el matraz con llama potentedurante dos minutos y mantener a ebullicióndurante diez minutos exactos. Enfriar inmediatamenteen agua. Cuando esté completamente frío,añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro(7.3.5.) y, con cuidado, 25 ml de la solución deAcido Sulfúrico (7.3.1.). Añadir 2 ml de la soluciónde Almidón (7.3.6.) y valorar el contenido delmatraz con solución de Sodio Tiosulfato 0,1mol/l(0,1N) SV (7.3.10.) hasta obtener una coloraciónblanca cremosa. Si se hubieran empleado menosde 5 ml en la valoración, repetir la determinaciónutilizando una dilución de la muestra más adecuada.Realizar en paralelo una determinación en blanco,empleando 25 ml de Agua PA-ACS.103

1047.4.4. Azúcares reductores: Para la determinaciónde azúcares reductores seguir el mismo procedimientosuprimiendo la inversión (7.4.2.).7.5. Cálculos.Sea D la diferencia entre lo gastado de SodioTiosulfato por el blanco y lo gastado por la muestra.La concentración de azúcares totales expresadosen glucosa se obtiene del valor D en la tabla, interpolandoen caso necesario y multiplicando por elfactor de dilución.7.6. Referencias.Federation International des Producteurs de Jusde Fruits. Método número 4. Año 1985.Tabla 7,1Para 25 ml de reactivo de Luff-SchoorlD = ml de Tiosulfato mg de Glucosa Diferencia1 2,4 2,42 4,8 2,43 7,2 2,54 9,7 2,55 12,2 2,56 14,7 2,67 17,2 2,68 19,8 2,69 22,4 2,610 25,0 2,611 27,6 2,712 30,3 2,713 33,0 2,714 35,7 2,715 38,5 2,816 41,3 2,917 44,2 2,918 47,1 2,919 50,0 3,020 53,0 3,021 56,0 3,022 59,1 3,123 62,28. ACIDO ASCORBICO8.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación delácido ascórbico por cromatografía de líquidos dealta eficacia, detectándolo en el ultravioleta a268 nm.8.2. Material y aparatos.8.2.1. Equipo de filtración de muestra y disolventepara eliminar partículas superiores a 0,5 mm.8.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado condetector de ultravioleta de longitud de onda variabley registrador.8.2.3. Columna NH 2 - Lichorsob de 250 x4,6 mm fr 10 mm o similar.8.3. Reactivos.263093 Acetonitrilo-gradiente HPLC131013 Acido L(+)-Ascórbico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131509 Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO8.3.1. Solución patrón de Acido Ascórbico de300 mg/l, preparada con Acido L(+) - AscórbicoPA-ACS-ISO y Agua PA-ACS y conservada enmatraz color topacio.8.3.2. Solución A: Tampón fosfato pH 3,5. Disolución0,005M de Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO (KH 2 PO 4 ): Filtrar esta solución con(8.2.1.).8.3.3. Solución B: Acetonitrilo-gradiente HPLC.8.4. Procedimiento.8.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:Fase móvil: Tampón Potasio di-Hidrógeno Fosfato/Acetonitrilo-gradienteHPLC: 60/40 (v/v).Flujo : 1 ml/minuto.8.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafoentre 10 y 20 ml de la solución patrón (7.3.1.) y calcularel factor de respuesta.CoFactor de respuesta (F) = ––––ApSiendo:Co = Concentración en mg/l de ácido ascórbico.Ap = Area del pico en el cromatograma de lasolución patrón.8.4.3. Determinación: Homogeneizar. Filtrarmediante (8.2.1.) e inyectar de 10 a 20 ml en el cromatógrafo.8.5. Cálculos.El contenido de ácido ascórbico, expresado en

Mmg/l (sin decimales), se obtendrá mediante lasiguiente fórmula:Acido ascórbico (mg/l) = F x AcSiendo:F = Factor de respuesta.Ac = Area del pico del ácido ascórbico en lamuestra.8.6. Observaciones.8.6.1. La determinación del ácido ascórbico serealizará inmediatamente después de la aperturadel envase.8.6.2. Con este método no se determina ácidodehidroascórbico.9. RELACION GLUCOSA-FRUCTOSA9.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación deglucosa y fructosa por cromatografía de líquidos dealta eficacia con detector de índice de refracción.9.2. Material y aparatos.9.2.1. Equipos de filtración de muestra y disolventespara eliminar partículas superiores a 0,5 mm.9.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado condetector de índice de refracción y registrador.9.2.3. Columna Sugar-Pack u otra columna quepermita la separación de glucosa y fructosa.9.2.4. Horno para columna.9.3. Reactivos.124559 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódico Cálcica PA131074 Agua PA-ACS212236 Agua Desionizada QP121211 Calcio Acetato x-hidrato PA142728 D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP)PRS-CODEX121341 D(+)-Glucosa PA9.3.1. Soluciones patrón de Glucosa y Fructosaal 10% (p/v). Preparar ambas soluciones disolviendo10 g de D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRS-CODEX y D(+)-Glucosa PA en 100 ml de Agua PA-ACS.9.4. Procedimiento.9.4.1. Condiciones cromatográficas orientativaspara la columna Sugar-Pack:Fase móvil: Solución de 20 mg/l de Calcio Acetatox-hidrato PA o Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódico Cálcica PA en Agua Desionizada QP yAgua PA-ACS.Flujo : 0,4-0,5 ml/min.Temperatura del horno : 90-95° C.9.4.2. Calibrado: inyectar en el cromatógrafo unacantidad conocida de la solución patrón y calcularlos factores de respuesta.CoFactor de respuesta (F) = ––––ApSiendo:Co = Concentración en g/l del patrón.Ap = Area del pico patrón en el cromatograma.9.4.3. Determinación: Filtrar la muestra mediantelos equipos del apartado (9.2.1.) e inyectar una cantidadconocida en la columna.9.5. CálculosEl contenido en glucosa y fructosa, expresadoen g/l, se obtiene mediante la siguiente fórmula:Glucosa (g/l) = F 1 x A 1 x fFructosa (g/l) = F 2 x A 2 x fSiendo:F 1 = Factor de respuesta de la glucosa.F 2 = Factor de respuesta de la fructosa.f = Factor de dilución.A 1 = Area del pico de glucosa en la muestra.= Area del pico de fructosa en la muestra.A 29.6. Observaciones.Los factores de respuesta deben calcularsevarias veces durante una sesión. Es pues recomendabletener termostatizado el detector.10. NITROGENO TOTAL10.1. Principio.Digestión del producto con ácido sulfúrico concentrado,en presencia de catalizador, en la cual setransforma el nitrógeno orgánico en iones amonio,que en medio fuertemente básico es desplazado enforma de amoníaco, y recogido sobre ácido bórico.La posterior valoración con ácido clorhídrico permiteel cálculo de la cantidad inicialmente presentede nitrógeno orgánico y amoniacal en la muestra.10.2. Material y aparatos.10.2.1. Aparato Kjeldahl.10.3. Reactivos.131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS122726 Cobre II Sulfato anhidro PA121085 Etanol 96% v/v PA105

106171327 Fenolftaleína solución 1% REPapel Tornasol131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS141625 Selenio metal polvo PRS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO171759 Verde de Bromocresol indicadorRE-ACS10.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.10.3.2. Catalizador de selenio. Mezclar bien pulverizados80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g deCobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal polvoPRS.10.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel Tornasol.10.3.4. Indicador: Pesar 105 mg de Rojo de Metilo(C.I. 13020) RE-ACS y 150 mg de Verde de Bromocresolindicador RE-ACS y disolver a 100 ml con Etanol96% v/v PA.10.3.5. Solución de Acido Bórico al 1%. Pesar10 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO, disolver con AguaPA-ACS, añadir 10 ml del indicador (10.3.4.) y enrasara 1 litro con Agua PA-ACS.10.3.6. Solución de Sodio Hidróxido al 40%. DisolverSodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS hasta la concentración deseada.10.3.7. Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV.10.4. Procedimiento.Poner en el matraz Kjeldahl 5-10 ml de zumo deuva y añadir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.Evaporar hasta consistencia siruposa. Añadir 10 mlde Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 7 g de catalizador(10.3.2.), continuar calentando primero lentamente ydespués enérgicamente hasta decoloración, proseguirunos minutos más. Si es necesario se van añadiendonuevas dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISOde 5 en 5 ml.Enfriar el matraz a temperatura ambiente, adicionarunas gotas de Fenolftaleína solución 1% RE y llevarloal aparato de destilación. En un vaso cilíndrico deunos 200 ml añadir 25 ml de Acido Bórico PA-ACS-ISO (10.3.5.). Añadir al matraz solución de SodioHidróxido (10.3.6.) en cantidad suficiente para virajede la Fenolftaleína solución 1% RE. Conectar el aparatode destilación con el generador de vapor de aguay comenzar el arrastre del Amoníaco recogiendo eldestilado en la solución de Acido Bórico (10.3.5.).Después de quince-veinte minutos, comprobarcon Papel de Tornasol si una gota del destilado noacusa reacción alcalina. En este caso separar el vasoy proceder a la valoración. Valorar con Acido Clorhídrico0,05 mol/l (0,05N) SV (10.3.7).10.5. Cálculo.El contenido en nitrógeno expresado en mg/lvendrá por la siguiente fórmula:700 (V 1 - V 0 )Nitrógeno (mg/l) = –––––––––––––VSiendo:V = Volumen, en ml, utilizados de muestras.V 1 = Volumen, en ml, de solución de ácido clorhídricoempleado en la valoración.V 0 = Volumen, en ml, de solución de ácido clorhídricoempleado en el blanco.10.6. Observaciones.Para efectuar el procedimiento Kjeldahl podránutilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos,adaptándose a las especificaciones del equipo.10.7. Referencias.Recueil des Methodes Internationales d’Analysedes Vins. O. I. V. A. (40). 1969.11. ETANOL11.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación deletanol por cromatografía gaseosa.11.2. Material y aparatos.11.2.1. Cromatógrafo de gases equipado condetector de ionización de llama.11.2.2. Columna cromatográfica. Columna de2 m de longitud y 2 mm de diámetro interno, rellenode Porapak Q 80-100 mallas o cualquier otracolumna que permita la separación y cuantificacióndel etanol.11.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS351085 Etanol 96% v/v CG354457 2-Propanol CG11.4. Procedimiento.11.4.1. Condiciones cromatográficas: Las condicionescromatográficas orientativas para la columnade Porapak son: Gas portador nitrógeno 35 ml/min.;temperatura del horno: 130° C; temperatura delinyector y del detector: 180° C.11.4.2. Calibrado.11.4.2.1. Patrón interno: Solución al 10% (v/v) de2-Propanol CG en Agua PA-ACS11.4.2.2. Solución patrón: Preparar una soluciónde Etanol 96% v/v CG-Agua PA-ACS que contenga elporcentaje de Etanol que se supone tiene la muestra.11.4.2.3. Solución de calibrado: A 100 ml de lasolución patrón (11.4.2.2.) se le ha de añadir 1 ml dela solución del patrón interno (11.4.2.1.) y se inyecta1 microlitro en el cromatógrafo.11.4.2.4. Muestra problema: A 100 ml de la muestraañadir 1 ml de la solución patrón interno(11.4.2.1.) e inyectar 1 microlitro en el cromatógrafo.

M11.5. Cálculos.Calcular el factor de respuesta y la concentraciónde etanol en la muestra, aplicando las fórmulassiguientes:C i x A pFactor de respuesta (FR) = –––––––––A iConcentración en la muestraA im(% en volumen) = FR x –––––––A pmSiendo:C i = Porcentaje en volumen del etanol en lasolución patrón.A p = Area del patrón interno en la soluciónpatrón.A i = Area del etanol en la solución patrón.A im = Area del etanol en la muestra problema.A pm = Area del patrón interno en la muestraproblema.11.6 Observaciones.La determinación de etanol se efectuará inmediatamentedespués de la apertura del envase.12. INDICE DE FORMOL12.1. Principio.Valoración de la acidez de los compuestos formadospor la reacción del formaldehído con los a-aminoácidos.12.2. Material y aparatos.pH metro.12.3. Reactivos.131328 Formaldehído 36,5-38% p/vestabilizado con metanol PA-ACS141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)PRS182155 Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV12.3.1. Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV.12.3.2. Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)PRS.12.3.3. Solución de Formaldehído. Llevar el Formaldehído36,5-38% p/v estabilizado con metanolPA-ACS, a pH 8,1 mediante la solución de SodioHidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.), utilizandoel pH-metro. Comprobar cada hora.12.4. Procedimiento.Poner 25 ml de zumo de uva en un vaso de precipitadosy neutralizar con Sodio Hidróxido0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.) hasta pH 8,1, utilizandoel pH-metro. Añadir 10 ml de la solución deFormaldehído (12.3.3.) y mezclar. Al cabo de unminuto efectuar la valoración potenciométrica de lasolución problema con la solución de Sodio Hidróxido0,25 mol/l (0,25N) SV hasta pH 8,1.Si se hubieran utilizado más de 20 ml de la soluciónde Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV,deberá realizarse de nuevo la valoración empleando15 ml de solución de Formaldehído, en lugar de10 ml.Si la muestra contiene Anhídrido Sulfuroso, añadiralgunas gotas de Hidrógeno Peróxido 30% p/v(100 vol.) PRS antes de la neutralización.12.5 Expresión de los resultados.El índice de formol de la muestra analizada esigual a la cantidad de solución alcalina utilizada en lavaloración expresada en ml de sodio hidróxido 0,1Ny que corresponden a 100 ml de zumo de uva.12.6. Referencias.Federation Internationale des Producteurs deJus de Fruits. Analyses F.I.P.J.F. No. 30 Año 1984.13. PROLINA13.1. Principio.Determinación cuantitativa de la prolina por reaccióncon ninhidrina en medio ácido.13.2. Material y aparatos.13.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.13.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro quepermita efectuar lecturas a 517 nm.13.3. Reactivos.131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS131074 Agua PA-ACS141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS132362 Ninhidrina PA-ACS131090 2-Propanol PA-ACS-ISO13.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílicodel Etilenglicol PRS13.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS13.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS1:1 (v/v).13.4. Procedimiento.Diluir la muestra hasta que contenga de 5 a50 mg/l de prolina. Tomar 0,5 ml de muestra diluidae introducirla en un tubo de ensayo con tapón derosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico 98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al 3%. Cerrarherméticamente el tubo e introducirlo en un baño deagua hirviendo durante catorce o quince minutos,añadiendo mientras se enfría 5 ml de solución de2-Propanol PA-ACS-ISO- Agua PA-ACS 1:1 (v/v).A continuación efectuar la lectura de la absorcióna 517 nm después de cinco minutos y antes107

108de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo elprocedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de AguaPA-ACS en vez de la solución problema.13.5. Interpretación de los resultados.Calcular el contenido en prolina por comparacióncon una curva patrón que comprenda concentracionesentre 5 y 50 mg/l.13.6. Referencias.C.S. Dugh J. of Food Science 34 (1969). 228.14. ACIDO SORBICO14.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación delácido sórbico por cromatografía de líquidos de altaeficacia y detección en ultravioleta a 230 nm.14.2. Material y aparatos.14.2.1. Equipos de filtración de muestra y desolventes, para eliminar partículas superiores a0,5 mm.14.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado condetector de ultravioleta de longitud de onda variabley registrador.14.2.3. Columna C-18 de 250x4,6 mm de 10 mmo similar.14.3. Reactivos.141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX131074 Agua PA-ACS261091 Metanol HPLC122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidratoPA131509 Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO14.3.1. Solución patrón de 50 mg/l de AcidoSórbico (USP-NF) PRS-CODEX en Metanol HPLC.14.3.2. Solución tampón de fosfatos de pH =6,6. Disolver 2,5 g de di-Potasio Hidrógeno Fosfato3-hidrato PA (K 2 HPO 4 .3H 2 O) y 2,5 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH 2 PO 4 ) en unlitro de Agua PA-ACS. Filtrar esta solución con(12.4.1.).14.3.3. Metanol HPLC.14.4. Procedimiento.14.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:Fase móvil: Metanol HPLC-tampón fosfato10:90 (v/v).Flujo : 1 ml/min.14.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafoentre 10 y 20 ml de la solución patrón (14.3.1.) ycalcular el factor de respuesta.CoFactor de respuesta (F) = –––––ApSiendo:Co = Concentración en mg/l de ácido sórbico.Ap = Area del pico en el cromatograma de lasolución patrón.14.4.3. Determinación: Poner 10 ml de zumo deuva en un matraz de 50 ml y enrasar con MetanolHPLC. Homogeneizar. Filtrar con 14.2.1. e inyectarentre 10 y 20 µl en el cromatógrafo.14.5. Cálculos.El contenido en ácido sórbico expresado en mg/lse obtendrá mediante la siguiente fórmula:Acido Sórbico (mg/l) = F x A 1 x fSiendo:F = Factor de respuesta.A 1 = Area del pico del ácido sórbico en lamuestra.f = Factor de dilución de la muestra.14.6. Observaciones.La sensibilidad puede aumentarse efectuandolecturas a 250 nm.14.7. Referencias.T. Stijve and Hischenhuber-Deutsche Lebensmittel-Rundschau80, Jahrf/Heft 3/1984.15. ACIDO BENZOICO15.1 Principio.Separación, identificación y cuantificación delácido benzoico por cromatografía de líquidos dealta eficacia y detección en el ultravioleta a 230 nm.15.2. Material y aparatos.Como en 14.2.15.3. Reactivos.121014 Acido Benzoico PA131074 Agua PA-ACS261091 Metanol HPLC122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidratoPA131509 Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO15.3.1. Solución patrón de Acido Benzoico PAen Metanol HPLC de 50 mg/l.15.3.2. Como en 14.3.2.15.3.3. Como en 14.3.3.15.4 Procedimiento.Como en 14.4., siendo en este caso Co la concentraciónen mg/l de Acido Benzoico en la soluciónpatrón (15.3.1.).

M15.5. Cálculos.El contenido en ácido benzoico expresado enmg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:Acido benzoico (mg/l) = F x A 1 x fSiendo:F = Factor de respuesta.A 1 = Area del pico del ácido benzoico en lamuestra.f = Factor de dilución de la muestra.15.6. Observaciones.La sensibilidad puede aumentarse efectuandolecturas a 217 nm.15.7. Referencias.Como en 14.7.16. HIDROXIMETILFURFURAL16.1 Principio.Separación, identificación y cuantificación delhidroximetilfurfural por cromatografía de líquidos dealta eficacia y detección en el ultravioleta a 285 nm.16.2. Material y aparatos.16.2.1. Equipos de filtración de muestra y desolventes, para eliminar partículas superiores a0,5 µm.16.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado condetector ultravioleta de longitud de onda variable yregistrador.16.2.3. Columna C-18 de 200 x 4,6 mm de 5 µmo similar.16.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACSHidroximetilfurfural261091 Metanol HPLC16.3.1. Solución patrón: Solución de 20 mg/l deHidroximetilfurfural recientemente destilado enMetanol HPLC.16.4. Procedimiento.16.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:Fase móvil: Agua Destilada y Desionizada.tiempo de retención aproximado: 7 minutos.Flujo 1 ml/min.16.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo20 µl de la solución patrón (16.3.1.) y calcular el factorde respuesta.CoFactor de respuesta (F) = ––––––ApSiendo:Co = Concentración, en mg/l, de hidroximetilfurfural.Ap = Area del pico en el cromatograma de lasolución patrón.16.4.3. Determinación: Inyectar en el cromatógrafo20 µl de la muestra filtrada.16.5. Cálculos.El contenido en hidroximetilfurfural expresado enmg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:Hidroximetilfurfural (mg/l) = F x A 1 x fSiendo:F = Factor de respuestaA 1 = Area del pico de HMF en la muestraf = Factor de dilución de la muestra.17. CENIZAS17.1 Principio.Incineración del residuo obtenido tras la evaporacióndel zumo de uva realizada de manera que sepuedan obtener todos los cationes (excepto amonio)en forma de carbonatos y otras sales mineralesanhidras.17.2. Material y aparatos.17.2.1. Cápsulas de platino o cuarzo, de unos80 mm de diámetro, con fondo plano.17.2.2. Baño de agua y arena.17.2.3. Horno eléctrico regulable.17.2.4. Balanza analítica con sensibilidad de0,1 mg.17.3. Procedimiento.Poner 25 ml de zumo de uva en cápsula tarada.Evaporar con precaución en baño de agua (17.2.2.)hasta consistencia siruposa.Añadir al residuo unas gotas de aceite de oliva,calentar lentamente en baño de arena (17.2.2.),hasta que la mayor parte de la sustancia orgánicaesté carbonizada. Introducir la cápsula en el horno(17.2.3.) a 525° C hasta que el residuo esté blanco(generalmente a las seis u ocho horas). Enfriarenseguida la cápsula en un desecador (unos treintaminutos) y pesar rápidamente.Puede, ocurrir, a veces, que el carbono no sequema completamente. En este caso, humidificarlas cenizas con Agua PA-ACS, evaporar de nuevo ycalcinar. Si fuera necesario, repetir esta operaciónvarias veces.17.4. Cálculos.El contenido en cenizas, expresado en gramospor litro, vendrá dado por la siguiente fórmula:Cenizas (g/l) = 40 x P109

110Siendo:P = Peso en g de las cenizas contenidas en25 ml de zumo de uva.17.5. Observaciones.Un ligero color marrón rojizo de las cenizas, posiblementede Fe 2 O 3 es aceptado y no requiere unposterior tratamiento.17.6. Referencias.Federation International des Producteurs de Jusde Fruits. Método N° 9. Año 1962.18. MATERIAL MINERAL INSOLUBLEEN ACIDO CLORHIDRICO AL 10%18.1. Principio.Tratamiento de las cenizas con ácido clorhídricoal 10%, en las condiciones que se especifica en elmétodo.18.2. Material y aparatos.18.2.1. El mismo que en (17.2.).18.2.2. Papel de filtro, sin cenizas, de porosidadmedia o crisol filtrante número 3.18.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO18.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.18.3.2. Solución de Acido Clorhídrico al 10%(p/p).18.3.3. Solución de Plata Nitrato de 100 g/l.Disolver Plata Nitrato PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentración deseada.18.4. Procedimiento.Añadir a las cenizas totales en la misma cápsulaque se ha utilizado para su preparación, de 15 a25 ml de la solución de Acido Clorhídrico (18.3.2.).Llevar la cápsula y mantener a ebullición durantediez minutos. Recubrir la cápsula con vidrio de reloj,para impedir cualquier proyección.Dejar enfriar y filtrar el contenido de la cápsula através del papel del filtro o crisol (18.2.2.). Lavar elpapel de filtro o crisol con Agua PA-ACS hasta quelas aguas de lavado estén exentas de Acido Clorhídrico,lo que se comprueba con la solución de PlataNitrato (18.3.3.).Evaporar cuidadosamente e incinerar en el hornoregulado a 525° C durante una hora. Dejarenfriar la cápsula o el crisol y pesar con una precisiónde 0,001 g. Repetir las operaciones de incineraciónhasta que la diferencia de masa entre dosdeterminaciones sucesivas sea inferior a 0,001 g.18.5. Cálculos.El contenido en cenizas insoluble en ácido,expresadas en mg/l, vendrá dado por la siguienteexpresión:Cenizas insolubles mg/l = (P 1 -P 0 ) x 40Siendo:P 0 = Peso, en mg, de la cápsula vacía o el crisolvacío.P 1 = Peso, en mg, de la cápsula o crisol con lascenizas insolubles en ácido.18.6. Referencias.Instituto de Racionalización y Normalización delTrabajo, UNE 34-096-81.19. FOSFORO TOTAL19.1. Principio.Transformación de los compuestos fosforados yposterior valoración espectrofotométrica como fosfomolibdovanadato.19.2. Material y aparatos.19.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro deefectuar lecturas a 400 nm.19.2.2. Cápsula de platino, cuarzo o similar.19.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131134 Amonio Molibdato 4-hidratoPA-ACS-ISO122352 Amonio meta-Vanadato PA131509 Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO19.3.1. Solución patrón de fosfatos. Disolver0,2397 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH 2 PO 4 ), desecado previamente en estufadurante dos horas a 105° C, en Agua PA-ACS y enrasara 250 ml.19.3.2. Solución de Amonio Molibdato. Disolver60 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO en900 ml de Agua PA-ACS caliente, enfriar y enrasar a1 litro.19.3.3. Solución de Amonio meta-Vanadato.Disolver 1,5 g de Amonio meta-Vanadato PA en690 ml de Agua PA-ACS caliente, añadir 300 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, enfriar y enrasar a 1litro.19.3.4. Solución de metamolibdovanadato. Añadirlentamente la solución de Amonio Molibdato (19.3.2.)sobre la solución de Amonio meta-Vanadato(19.3.3.), agitando. Conservar la solución en frascosde polietileno.

M19.3.5. Solución de Acido Clorhídrico. AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en(1 + 3) (v/v).19.3.6. Solución de Acido Clorhídrico. AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en(1 + 9) (v/v).19.4. Procedimiento.19.4.1. Curva de calibrado. A partir de la soluciónpatrón (19.3.1.) preparar una serie de solucionesque contengan 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20;0,25; 0,30 y 0,35 mg de P 2 O 5 /10 ml respectivamente.A continuación poner alícuotas de 10 ml decada solución en matraz aforado de 50 ml. Rápidamenteañadir a cada matraz 5 ml del reactivo deMetamolibdovanadato (19.3.4.), mezclar, enrasar ytapar. Dejar reposar al menos treinta minutos.Efectuar las lecturas de los patrones frente a lasolución 0,00 antes de una hora, a 400 nm. Representargráficamente concentraciones frente aabsorbancias leídas.19.4.2. Preparación de la muestra. Tomar 25 mlde zumo de uva y obtener las cenizas según métodooficial número 17. Disolver las cenizas en 10 mlde solución de Acido Clorhídrico (19.3.5.) y evaporaren baño de agua. Disolver el residuo obtenido en10 ml de solución de Acido Clorhídrico (19.3.6.)calentar en baño maría y transferir a matraz de100 ml, enfriar y enrasar con Agua PA-ACS. Agitar yfiltrar para eliminar las materias insolubles presentes.19.4.3. Determinación. Tomar 10 ml de filtrado ycontinuar como en la curva de calibrado (19.4.1.).Si el contenido de P 2 O 5 en las cenizas es superiora 3,5 mg, llevar a matraz aforado superior a 100ml o efectuar diluciones hasta que el contenido deP 2 O 5 en la alícuota sea menor a 0,35 mg.19.5. Cálculos.El contenido en mg de P 2 O 5 en 100 ml de muestrase obtendrá mediante la curva de calibrado,teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.Para expresar el resultado como mg de P en100 ml de muestra, multiplicar el resultado anteriorpor 0,437.19.6. Referencias.Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª edición,1984.20. SULFATOS20.1. Principio.Previa eliminación del dióxido de azufre por ebullición,se precipitan los iones sulfato como BarioSulfato, se calcina y se pesa.20.2. Material y aparatos.20.2.1. Matraz Erlenmeyer de 500 ml provisto deampolla con llave de 100 ml y tubo de desprendimientode vapor, atravesando ambos el tapón. Elmatraz se coloca sobre disco metálico de 15 cm dediámetro con abertura circular de 8 cm de diámetro.20.2.2. Baño de agua y plancha caliente.20.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO20.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.20.3.2. Bario Cloruro. 100 g de Bario Cloruro2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.20.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO20.4. Procedimiento.20.4.1. Eliminación del dióxido de azufre delzumo de uva. Introducir en el Erlenmeyer del aparatodescrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta soluciónpara eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml dezumo de uva por la ampolla de llave evitando que laebullición se pare durante esta adición. Continuar laebullición hasta reducir el volumen del líquido a unos100 ml eliminando todo el dióxido de azufre.20.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar elresiduo de la evaporación anterior a un vaso de400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad deAgua PA-ACS suficiente para llevar el volumen totala 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l(2N) SV y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota10 ml de solución de Bario Cloruro, con la precauciónde no parar la ebullición y dejar reposar encaliente, colocando el vaso sobre placa a 60°Cdurante cuatro horas y en baño de agua hirviendodurante dos horas. En el caso de pequeñas cantidadesde precipitado, se recomienda un segundoreposo en frío durante 12 horas. Filtrar por filtro sincenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PA-ACS caliente hasta que no dé reacción con PlataNitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamenteplegado a crisol de porcelana tarado, desecar, calcinary, después de enfriar en un desecador, pesar.20.5. Cálculos.Calcular el contenido de sulfatos expresado enmeq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproximaciónde ± 0,05 g/l.Sulfato = 85,68 P meq/l.Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.P = peso de las cenizas en g.20.6. Referencias.Recueil des Méthodes Internationales d’Analysedes Vins. O.I.V., A 14, 1-4. 1969.111

11221. ANHIDRIDO SULFUROSO21.1. Principio.Liberación del sulfuroso “libre” por acidificacióndel zumo de uva, arrastre por corriente de aire,oxidación por borboteo en agua oxigenada neutray valoración con sosa del ácido sulfúrico formado.Liberación por ebullición moderada del sulfuroso“combinado”, que queda en el zumo de uva despuésde la extracción del sulfuroso “libre” y análogotratamiento que en la determinación del sulfuroso“libre”. El sulfuroso “total” es la suma delsulfuroso “libre” y el sulfuroso “combinado”. Puededeterminarse acidificando el zumo de uva y calentandoy procediendo como en los dos casos anteriores.Este método es aplicable para contenidos enanhídrido sulfuroso superiores a 10 mg/l.21.2. Material y aparatos.Como en 28 (a).2. de Métodos de Análisis deVinos pág. 59.21.3. Reactivos.Como en 28 (a).3. de Métodos de Análisis deVinos pág. 59.21.4. Procedimiento.21.4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre. Enel matraz de 100 ml del aparato, poner 10 ml dezumo de uva y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio.Si la riqueza en SO 2 del vino es pequeña, se empleael matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de uva.Sumergir el matraz en un baño de agua a 10° C.Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenesy dos gotas del reactivo indicador en elmatraz B y neutralizar el Hidrógeno Peróxido conSodio Hidróxido 0,01N.Adaptar el matraz B al aparato y hacer borbotearaire (o, nitrógeno) durante 12-15 minutos. Retirar elmatraz B y valorar el ácido sulfúrico formado conSodio Hidróxido 0,01 N.21.4.2. Análisis de anhídrido sulfuroso combinado.Después de terminar la valoración del anhídridosulfuroso libre, colocar en el matraz B, ya limpio, los2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado y conlas dos gotas del indicador. Calentar con llamapequeña hasta llevar a la ebullición el zumo de uvaque quedó en el matraz después de la determinaciónanterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondodel matraz, que descansará sobre chapa metálicaperforada con orificio de 30 mm de diámetro, paraevitar la pirogenación de los azúcares del zumo deuva sobre las paredes del matraz.Mantener el paso del aire o nitrógeno durante laebullición que durará 12-15 minutos, tiempo que seconsidera suficiente para arrastrar todo el sulfurosocombinado y después oxidarlo. Retirar el matraz By valorar el ácido sulfúrico formado con SodioHidróxido 0,01N.21.4.3. Anhídrido sulfurososo total. Puede determinarsepor la suma del anhídrido sulfuroso libremás el anhídrido sulfuroso combinado, pero tambiénpuede determinarse directamente, actuandodesde un principio con corriente de aire o nitrógenoy con calor.21.5. Cálculos.Calcular el contenido en anhídrido sulfurosoexpresado en mg/l, con una aproximación de10 mg/l.320 V 1Anhídrido sulfuroso = –––––––– mg/lV 2Siendo:V 1 = Volumen, en ml, de NaOH 0,01N gastadosen la valoración.V 2 = Volumen, en ml, de muestra para el análisis.21.6. Referencias.21.6.1. Paul, F. “Mitteinlungen Klosternenberg”,A : 8, 21, 1958.21.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V., A17, 1-8, 1969.22. POTASIO22.1. Principio.El potasio se determina por fotometría de llamaprevia adición de litio cloruro, para evitar la ionizaciónparcial de los metales en la llama.22.2. Material y aparatos.22.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.22.2.2. Material de uso normal en laboratorio.22.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS141392 Litio Cloruro PRS313190 Potasio solución patrónK = 1,000 ± 0,002 g/l AA22.3.1. Potasio solución patrón K = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,907 g de131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO en un litro deAgua PA-ACS.22.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 gde Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.22.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3; 5 y7 mg/l preparadas a partir de la solución de Potasio,previa adición de la cantidad necesaria de LitioCloruro PRS, para que el Litio se encuentre en unaproporción de aproximadamente 2.000 mg/l.

M22.4. Procedimiento.Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 200 ml conAgua PA-ACS (previa adición de la cantidad necesariade Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuentreen una proporción de aproximadamente2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama frentea las soluciones de referencia a 766-770 nm.22.5. Cálculos.El contenido de potasio se calcula a partir delvalor obtenido en el espectrofotómetro por comparacióncon la curva patrón, teniendo en cuenta ladilución efectuada. Los resultados se expresan enmg de Potasio/ 100 ml de la muestra.22.6. Observaciones.Puede utilizarse una solución de 40 g/l de clorurode cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en estecaso la concentración adecuada de cloruro de cesioen las disoluciones de la muestra y patrones entre0,1-0,4%.22.7. Referencias.22.7.1. Federation International des Producteursde Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.23. SODIO23.1. Principio.El Sodio se determina por fotometría de llamaprevia adición de litio cloruro, para evitar la ionizaciónparcial de los metales en la llama.23.2. Material y aparatos.23.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.23.2.2. Material de uso normal en laboratorio.23.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS141392 Litio Cloruro PRS313192 Sodio solución patrónNa = 1,000 ± 0,002 g/l AA23.3.1. Sodio solución patrón Na = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 2,542 g de131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO (NaCl) en unlitro de Agua PA-ACS.23.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 gde Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.23.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3 y 5 mg/lpreparadas a partir de la solución de Sodio, previaadición de la cantidad necesaria de Litio CloruroPRS, para que el Litio se encuentre en una proporciónde aproximadamente 2.000 mg/l.23.4. Procedimiento.Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 100 ml (ver23.6.2.) con Agua PA-ACS (previa adición de la cantidadnecesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litiose encuentre en una proporción de aproximadamente2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llamafrente a las soluciones de referencia a 589 nm.23.5. Cálculos.El contenido de sodio se calcula a partir del valorobtenido en el espectrofotómetro por comparacióncon la curva patrón, teniendo en cuenta la diluciónefectuada. Los resultados se expresan en mg desodio/l de la muestra.23.6. Observaciones.23.6.1. Puede utilizarse una solución de 40 g/l decloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendoen este caso la concentración adecuada de clorurode cesio en las disoluciones de la muestra y patronesentre 0,1 y 0,4%.23.6.2. Efectuar las diluciones necesarias paraque la muestra esté en el rango de la curva.23.7. Referencias.23.7.1. Federation International des Producteursde Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.23.7.2. Métodos Associations of Official AnalyticalChemist. Ed. 1984.24. ARSENICO24.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida conuna mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza porespectrofotometría de absorción atómica, congenerador de hidruros.24.2. Material y aparatos.24.2.1. Material de uso normal en laboratorio.24.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml.24.2.3. Espectrofotómetro de absorción atómicaequipado con sistema generador de hidruros.24.2.4. Lámpara de descarga sin electrodos.24.2.5. Fuente de alimentación para lámpara dedescarga sin electrodos.24.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrónAs = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejasPA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO113

11424.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.24.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico al 32%v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.24.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico al 1,5%.Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de1.000 ml.24.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO24.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.24.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%(p/v): Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta unvolumen de 100 ml.24.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%(p/v): Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro ydisolverlo hasta 100 ml con la solución de SodioHidróxido al 1%.24.3.8. Disolución de EDTA Sal Disódica 2-hidratoal 1%. Pesar 1 g de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlohasta 100 ml con Agua PA-ACS.24.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 23,5 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumende 100 ml.24.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(24.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.24.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.24.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000± 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoIII Oxido EQP en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al20% (24.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al20% (24.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico1% (24.3.11.).24.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración10 mg/l. Pipetear 1 ml de la soluciónpatrón de Arsénico (24.3.12.), en un matraz aforadode 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.24.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución deArsénico (24.3.13.), en un matraz aforado de100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.24.4. Procedimiento.24.4.1. Preparación de la muestra: En un matrazKjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO. Llevar a ebulliciónhasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disolvercon Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml lasolución resultante.24.4.2. Preparación de los patrones de trabajosy del blanco. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 mlde la solución de Arsénico (24.3.14.) y someterlo almismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solucióncontiene 10 nanogramos de Arsénico. Prepararun blanco con todos los reactivos utilizadossiguiendo el tratamiento dado a la muestra.24.4.3. Condiciones del espectrofotómetro:Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiempo suficientepara que se estabilice la energía de la lámpara.Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdocon las condiciones del aparato. Encender el generadorde hidruros, colocando la temperatura de lacelda a 900° C, esperando hasta que se alcanzadicha temperatura. Se ajustan las condiciones delgenerador de hidruros según las especificacionesdel aparato. Ajustar el flujo de argón de acuerdocon las características del aparato.24.4.4. Determinación: Las determinaciones dela concentración de Arsénico se realizan por elmétodo de adición de patrones, por medio demedidas duplicadas en el espectrofotómetro en lascondiciones especificadas en (24.4.3.), añadiendoal matraz de reacción 3 ml de la solución (24.3.8.).Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng deArsénico. Lavar los matraces antes y después decada uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (24.3.3.). Alconstruir la gráfica de adición hay que descontar elvalor de absorbancia del blanco obtenido en lasmismas condiciones anteriores, pero añadiendo3 ml de la solución blanco. En estas condiciones ellímite de detección de la técnica es de 5 ng.25. HIERRO25.1. Principio.Determinación del hierro por absorción atómicaprevia mineralización de la muestra.25.2. Material y aparatos.25.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.25.2.2. Lámpara de hierro.25.2.3. Los utilizados para el plomo en (26.2.3.),(26.2.4.) y (26.2.5.).25.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313182 Hierro solución patrónFe = 1,000 ± 0,002 g/l AA25.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.25.3.2. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentraciónindicada.25.3.3. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.

M25.3.4. Hierro solución patrón Fe = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1g de 131365Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA en 50 ml dela solución de Acido Nítrico (1+1) y diluir hasta1.000 ml con Acido Nítrico 1% (v/v).25.4. Procedimiento.25.4.1. Preparación de la muestra. Como en(26.4.1.).25.4.2. Curva de calibrado. A partir de la soluciónpatrón (25.3.4.), preparar una serie de solucionesconteniendo de 0,5 a 5,0 mg de hierro por litro,con Acido Nítrico al 1% (v/v).25.4.3. Determinación. Igual que para el Plomo.Efectuar las lecturas a 248,3 nm.25.5. Cálculos.Obtener el contenido de hierro de la muestra porinterpolación a partir de la curva de calibrado yteniendo en cuenta las diluciones efectuadas.26. PLOMO26.1. PrincipioDeterminación del plomo por absorción atómicaprevia mineralización de la muestra.26.2. Material y aparatos.26.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.26.2.2. Lámpara de plomo.26.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.26.2.4. Baño de arena o placa calefactora.26.2.5. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo decontrol de temperatura.26.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA26.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.26.3.2. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.26.3.3. Plomo solución patrón Pb = 1,000± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1000 ml con Acido Nítrico al 1%.26.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.26.4 Procedimiento.26.4.1. Preparación de la muestra.- Poner100 ml de la muestra en una cápsula de platino ocuarzo y llevarla a evaporación hasta consistenciasiruposa en baño de arena. Añadir a continuación2 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar elresiduo en el baño de arena. Seguidamente introducirla cápsula en la mufla y mantenerla durante doshoras a 450°C. Transcurrido dicho tiempo, sacarla ydejarla enfriar.Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendoesta operación hasta obtener cenizas blancas.Un ligero color marrón rojizo en éstas, posiblementede Fe 2 O 3 es aceptado y no requiere unposterior tratamiento.Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger en un matrazde 10 ml, lavando la cápsula y el filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.26.4.2. Curva patrón.- Diluir alícuotas apropiadasde la solución patrón con Acido Nítrico al 1%para obtener una curva de concentraciones 2; 4; 6;8 y 10 mg/l.26.4.3. Determinación.- Operar según las especificacionesdel aparato, usando llama de aire-acetileno.Medir las absorbancias de la muestra y patronesa 283 nm. Si la solución está muy concentrada,diluirla con Acido Nítrico al 1%.26.5. Cálculos.Calcular el contenido en plomo, expresado enmg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor dilución.26.6. Referencias.26.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.27. ESTAÑO27.1. Principio.Determinación de estaño por absorción atómica,previa digestión ácida.27.2. Materiales y aparatos.27.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.27.2.2. Lámpara de estaño.27.2.3. Material de uso normal en laboratorios.27.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO212236 Agua Desionizada QP313180 Estaño patrón Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA27.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.27.3.2. Solución de Acido Clorhídrico 7N. DiluirAcido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentración deseada.27.3.3. Agua Desionizada27.3.4. Estaño solución patrón Sn = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de115

116141304 Estaño metal, granalla PRS en 100 ml deAcido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluir hasta1.000 ml con Agua Desionizada.27.4. Procedimiento.27.4.1. Preparación de la muestra.- Medir de 1 a5 ml de la muestra directamente en un Erlenmeyer.Añadir 25 ml de solución de Acido Clorhídrico 7N.Llevar a ebullición y mantenerla a fuego lento durantecinco minutos. Enfriar y transferir cuantitativamentea un matraz de 50 ml, enrasando con Agua PA-ACS. Agitar y filtrar con papel Watman número 1.27.4.2. Curva de calibrado.- A partir de la soluciónpatrón de Estaño, preparar una serie de solucionesconteniendo 50; 100; 150 y 250 mg/l deEstaño.27.4.3. Determinación.- Operar según las especificacionesdel aparato usando una llama reductorade óxido nitroso-acetileno. Medir las absorbanciasde la muestra y patrones a 286 nm.27.5. Cálculos.Obtener el contenido de estaño de la muestrapor interpolación a partir de la curva de calibrado.28. COBRE28.1. PrincipioDeterminación del cobre por absorción atómica,previa mineralización de la muestra.28.2. Material y aparatos.28.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.28.2.2. Lámpara de cobre.28.2.3. Los utilizados para el Plomo, en (26.2.3.),(26.2.4.) y (26.2.5.).28.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/l AA28.3.1. Los utilizados para el plomo en (26.3.1.),(26.3.2.) y (26.3.4.)28.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de AcidoNítrico 70% PA-ACS-ISO 1:1. Diluir después aun litro con Acido Nítrico al 1%.28.4 Procedimiento.28.4.1. Preparación de la muestra.- Como parael Plomo en (26.4.1.).28.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluirpartes alícuotas de la solución patrón de Cobrecon Acido Nítrico al 1% para obtener solucionesque contengan de 1 a 5 mg de Cobre.28.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.Medir a 324,7 nm.28.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidospara la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de Cobre de la muestra,teniendo en cuenta el factor de dilución.29. ZINC29.1. Principio.Determinación del zinc por absorción atómica,previa mineralización de la muestra.29.2. Material y aparatos.29.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.29.2.2. Lámpara de zinc.29.2.3. Los utilizados para el Plomo en (26.2.3.),(26.2.4.) y (26.2.5.).29.3 Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrónZn = 1,000 ± 0,002 g/l AA29.3.1. Los utilizados para el Plomo en (26.3.1.),(26.3.2.) y (26.3.4.).29.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141783Zinc metal, polvo PRS en el mínimo volumen necesariode Acido Nítrico diluido con Agua PA-ACS(1:1) y diluir a un litro con Acido Nítrico al 1% (v/v).29.4. Procedimiento.29.4.1. Preparación de la muestra.- Como parael Plomo (26.4.1.).29.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (29.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5a 1 mg/l.29.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,5 nm.29.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos,hallar las concentraciones de Zinc para lamuestra, teniendo en cuenta el factor concentracióno dilución.

M117

118Productos derivadosde la uva:Vinagres

M1. EXTRACTO TOTAL1.1. Principio.El extracto seco total se define como el conjuntode todas las sustancias que, en condiciones físicasdeterminadas, no se volatilizan. En estas condicionesfísicas deben fijarse de tal manera que las sustanciascomponentes del extracto sufran el mínimode alteración.El método está basado en una evaporación delvinagre en baño de agua con secado posterior enestufa regulable a 100 - 105°C.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Balanza con aproximación de 0,001 g.1.2.2. Estufa con ventilación de aire regulable de100 a 105°C.1.2.3. Desecador de vidrio con ácido sulfúricoconcentrado o gel de sílice (sílice amorfa impregnadacon sustancia reveladora) como sustanciadesecadora.1.2.4. Baño de agua.1.2.5. Cápsulas de fondo plano de 5 cm de diámetroconstruidas en platino, níquel o cuarzo.1.2.6. Pipetas aforadas de 10 ml con doble enrase.1.3. Procedimiento.Agitar la muestra y filtrar a través de un papel defiltro plegado (tipo jarabe). Medir 10 ml del vinagrefiltrado en una cápsula previamente tarada. Evaporaren baño de agua hirviente durante 30 minutos ymantener en la estufa durante dos horas y media a105°C. Dejar secar la cápsula en el interior deldesecador y, una vez fría, pesar en la balanza deprecisión.1.4. Cálculo.El valor del extracto total del vinagre , en porcentaje,se hallará mediante la fórmula siguiente:Extracto total: (M - m) 10en la que:M = masa, en gramos, de la cápsula con elextracto seco.m = masa, en gramos, de la cápsula vacía.1.5. Referencias.1.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33.101.1.5.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.11a. ed., página 519, 30.061.2. ACIDEZ TOTAL(Grado acético)2.1. Principio.La acidez total se define como la totalidad de losácidos volátiles y fijos que contiene el vinagre expresadaen gramos de ácido acético por 100 ml devinagre.La determinación se efectúa mediante una volumetríade neutralización en presencia de soluciónalcohólica de fenolftaleína como indicador.2.2. Material y aparatos.2.2.1. Bureta de 50 ml graduada en décimas deml.2.2.2. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.2.2.3. Matraces Erlenmeyer de 250 ml de capacidad.2.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV2.3.1. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.2.3.2. Solución indicadora de Fenolftaleína. Sedisuelven 10 g de Fenolftaleína PA-ACS en Etanol96% v/v PA y se completa a un litro con el mismosolvente.2.4. Procedimiento.Medir 10 ml de vinagre, previamente filtrado, enun Erlenmeyer de 250 ml. Diluir con 100 o 150 mlde Agua PA-ACS recién hervida y fría hasta conseguiruna solución débilmente coloreada. Añadir seisgotas de la solución indicadora de Fenolftaleína yagregar Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV contenidoen la bureta gota a gota y agitando hasta virajedel indicador.2.5. Cálculo.El valor de la acidez total o grado acético delvinagre en porcentaje se hallará mediante la fórmulasiguiente:Acidez total o grado acético = a x 10 x 0,0300en la que :a =volumen, en ml, de sodio hidróxido 0,5N.2.6. Referencias.2.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33.101.2.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.11a. ed , página 520, 30. 068.3. ACIDEZ FIJA3.1. Principio.La acidez fija se define como la totalidad de los ácidosfijos que contiene el vinagre, expresada en gramos,de ácido acético por 100 ml de vinagre.119

1203.2. Material y aparatos.3.2.1. Baño de agua.3.2.2. Bureta de 10 ml de capacidad graduadaen décimas de ml.3.2.3. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.3.2.4. Cápsulas de 200 ml de capacidad.3.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV3.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.3.3.2. Disolución indicadora de Fenolftaleína PA-ACS al 1% en Etanol 96% v/v PA.3.4. Procedimiento.Medir 10 ml de vinagre previamente filtrado y llevarloa una cápsula de porcelana. Evaporar asequedad en baño de agua. Añadir de 5 a 10 mlAgua PA-ACS recientemente hervida y volver a evaporara sequedad, repitiendo esta operación cincoveces más. Añadir, aproximadamente, 180 ml deAgua PA-ACS recientemente hervida y fría, añadirseis gotas de la solución indicadora de Fenolftaleínay agregar Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV contenidoen la bureta, gota a gota y agitando, hastaviraje del indicador.3.5. Cálculo.El valor de la acidez fija del vinagre, expresadoen gramos de ácido acético por 100 ml, se hallarámediante la fórmula siguiente:Acidez fija = a x 10 x 0,00600en la que:a = volumen, en ml de sodio hidróxido 0,1N.3.6. Referencias.3.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33.101.3.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.11a. ed., página 520, 30.069.4. ACIDEZ VOLATIL4.1. Principio.Se define convencionalmente como valor de laacidez volátil de un vinagre la diferencia entre losvalores de su acidez total y fija, expresadas ambasen gramos de ácido acético por 100 ml de vinagre.4.2. Cálculo.El valor de la acidez volátil del vinagre, expresadoen gramos de ácido acético por 100 ml, se hallarámediante la fórmula siguiente:At - Af = acidez volátilen la que :At = acidez total o grado acético, expresado engramos de ácido acético por 100 ml.Af = acidez fija de la misma muestra de vinagre,expresada en gramos de ácido acético por100 ml.4.3. Referencias.4.3.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33.101.4.3.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.11a. ed., página 520, 30.070.5. SULFATOS5.1. Principio.Precipitación del bario sulfato en medio ácido.5.2. Material y aparatos.5.2.1. Vasos de precipitado de 250 ml.5.2.2. Baño de agua.5.2.3. Estufa.5.2.4. Desecador.5.3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO171461 Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE5.3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.5.3.2. Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO.5.4. Procedimiento.A 100 ml de muestra en vaso de precipitado de250 ml añadir 2 ml de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N)SV, calentar a ebullición e ir añadiendo gota a gota10 ml de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO (1 g/100 ml de BaCl 2 .2H 2 O) sin que deje de hervir lasolución. Continuar hirviendo cinco minutos manteniendoel volumen constante, añadiendo Agua PA-ACS caliente siempre que sea necesario. Dejar enreposo hasta que el sobrenadante esté claro (unanoche es suficiente, aunque no conviene sobrepasarese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de porofino, lavar con Agua PA-ACS caliente hasta que nodé reacción con Plata Nitrato solución 0,1% p/v RElas aguas del lavado, secar, calcinar, enfriar endesecador y pesar.5.5. Cálculo.La proporción de sulfatos = 7,465 P g/l de K 2 SO 4siendo;P = peso, en g, del producto de la calcinación.5.6. Referencias.5.6.1. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.11a. ed. (1970).

M5.6.2. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33-104-73.6. ACETILMETILCARBINOL (ACETOINA)6.1. Principio.Determinación cuantitativa de la acetoína porcromatografía de gases.6.2. Material y aparatos.6.2.1. Equipo de cromatografía de gases compuestopor:6.2.1.1. Detector de ionización de llama.6.2.1.2. Horno con temperatura regulable.6.2.1.3. Registrador.6.2.1.4. Gases: Aire-nitrógeno.6.2.1.5. Columna: FFAP 2,5% sobre ChromosorbG (HP), añadiéndose un 0,5 de un reductor decolas (p. e., Carbowax 1.500) y de dimensiones 2 mde longitud y 1/8 de pulgada de diámetro externode la columna.6.2.2. Microjeringa de 1 a 10 µl.6.3. Reactivos.Acetoína131074 Agua PA-ACS121884 1-Pentanol PA121086 Etanol absoluto PA142400 Calcio Hidróxido polvo 90% (USP)PRS-CODEX6.3.1. Acetoína.6.3.2. 1-Pentanol PA.6.3.3. Etanol absoluto PA.6.3.4. Calcio Hidróxido polvo 90 % (USP) PRS-CODEX.6.4. Procedimiento.6.4.1. Disolución patrón.6.4.1.1. De Acetoína: A partir de Acetoína purificadade su posible contenido en Diacetilo mediantedestilación, obtener soluciones de Acetoína quecubran un rango de concentraciones de 10 a500 mg/l en Agua PA-ACS.6.4.1.2. De patrón interno: Añadir 2 ml de1-Pentanol PA en 100 ml de Solución Hidroalcohólicaal 50%.6.4.2. Determinación.6.4.2.1. Condiciones cromatográficas. Gas portador:Nitrógeno (flujo de 12,5 mg/min.).Temperatura horno: 70° C.Temperatura inyector: 180° C.Inyección : 4 o 2 µl.Patrón interno: 1-Pentanol PA.6.4.2.2. Método operatorio.A cada una de las soluciones patrón de Acetoínapreparadas en 6.4.1.1., añadir solución de 1-PentanolPA de tal forma que a las soluciones que contengande 10 a 50 mg/l de Acetoína se le añadan15 µl y a las que contengan de 50 a 500 mg/l se leañadan 35 µl e inyectarlas a continuación, obteniendola curva de calibrado (se deben efectuar doscurvas de calibrado, una que cubra el rango de0-50 mg/l de Acetoína y otra de 50 a 300 mg/l).La inyección de la muestra puede efectuarsedirectamente del vinagre, una vez añadido el patróninterno, pero teniendo en cuenta que el tiempo deretención es elevado y la concentración del acéticoes muy grande, obliga a esperar un largo períodode tiempo entre dos inyecciones sucesivas. Paraevitar esta dificultad, deben neutralizarse a pH = 7las muestras, preferiblemente con Calcio Hidróxidopolvo, 90% (USP) PRS-CODEX para evitar variacionesde volumen. Téngase en cuenta que la concentraciónde Acetoína en el medio neutro puede variarcon tiempo, por lo que la neutralización debe hacerseinmediatamente antes de inyectar en el cromatógrafo.6.5. Cálculo.Los cromatogramas obtenidos de las distintassoluciones patrón permiten representar gráficamentela relación existente entre el cociente:Area del pico de la acetoína–––––––––––––––––––––––––––––––Area del pico del alcohol n-amílicoLa relación de áreas obtenida para la muestra secompara con la curva de calibrado (concentraciónde acetoína /relación de áreas ), obteniéndose lacantidad de acetoína de la muestra.6.6. Referencia.6.1.1. E. F. Gorostiza, M. L. Gil de la Peña y M.C. Gómez Cordobés. Instituto de FermentacionesIndustriales.7. CENIZAS7.1. Principio.Se denominan cenizas de un vinagre el conjuntode los productos de incineración del residuo deevaporación de un volumen conocido del vinagre,realizada de manera que se puedan obtener todoslos cationes en forma de carbonatos y otras salesminerales anhidras.7.2. Material y aparatos.7.2.1. Horno eléctrico regulable.7.2.2. Baño de agua y baño de arena.7.2.3. Lámpara de infrarrojo.7.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de 70 mmde diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.121

1227.3. Procedimiento.Colocar 20 ml de vinagre en una cápsula taradaen balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar conprecaución en baño de agua hasta consistenciasiruposa, continuar el calentamiento sobre baño dearena con moderación y durante una media hora.Es conveniente ayudar a la evaporación con la aplicaciónde rayos infrarrojos hasta carbonización.Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cápsulaal horno eléctrico a 525 ± 25° C y con aireacióncontinua. Después de cinco minutos de carbonizacióncompleta, sacar la cápsula del horno, dejarenfriar y añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evaporanen baño de agua, y llevar de nuevo al horno a525°C.Si la combustión de las partes carbonosas nose consigue en 15 minutos, volver a comenzar laoperación de adición de Agua PA-ACS, evaporacióny recalcinación.Después de enfriar en el desecador, pesar la cápsulacon las cenizas.7.4. Cálculo.Calcular el contenido en cenizas expresadoen g/l.Cenizas = 50 P g/l.P = peso, en g, de las cenizas contenidas en20 ml de vinagre.Dar los resultados con una aproxinación de0,03 g/l.7.5. Referencias.7.5.1. Recueil des Méthodes Internationalesd'Analyse des Vins. O. I. V., AGI, 1969.7.5.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,Ministerio de Agricultura, 1971, pág. 66.8. INDICE DE OXIDACION8.1. Principio.Oxidación con potasio permanganato de lassustancias volátiles fácilmente oxidables de losvinagres.8.2. Materiales y aparatos.8.2.1. Matraz de destilación de 250 ml de capacidadprovisto de dispositivo de entrada de vaporde agua para destilación por arrastre de vapor.8.2.2. Matraz Erlenmeyer de 50 ml de capacidadprovisto de boca esmerilada y tapón.8.2.3. Matraz aforado de 50 ml de capacidad.8.2.4. Refrigerante de serpentín de 25 cm decapacidad útil.8.2.5. Calderín generador de vapor.8.2.6. Pipeta aforada con doble enrase de 10;20; 25 y 50 ml de capacidad.8.2.7. Bureta de 50 ml de capacidad graduadaen décimas de ml.8.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón Soluble RE181528 Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV131542 Potasio Yoduro PA-ISO181722 Sodio Tiosulfato 1mol/l (1N) SV8.3.1. Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV8.3.2. Disolución valorada de Sodio Tiosulfato1 mol/l (1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:1Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACSy determinar el factor de la solución 0,5N obtenida.8.3.3. Disolución de Potasio Yoduro PA-ISO al50%. Ver 8.6.2. Disolver Potasio Yoduro PA-ISO enAgua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.8.3.4. Disolución indicadora de Almidón. Disolver5 g de Almidón soluble RE en 20 ml de AguaPA-ACS y se vierte en 1 ml de Agua PA-ACS hirviente.Se continúa la ebullición durante cinco minutosy se deja enfriar antes de su empleo. Convieneguardarla en frascos esterilizados.8.3.5. Disolución de Acido Sulfúrico al 50% envolumen. Diluir Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS.8.4. Procedimiento.Ajustar el vinagre a 4 g por 100 de acidez total,expresada en ácido acético. Tomar 50 ml de vinagre,con la acidez debidamente ajustada, e introduciren el matraz de destilación. Pasar a su travésuna corriente de vapor de agua procedente del calderíndescrito, a una velocidad regulada, de maneraque cuando se hayan recogido 50 ml de destiladose conserven en el matraz de destilación aproximadamente45 ml. Comprobar que la temperatura deldestilado no sobrepase 25°C. Pasar los 50 ml deldestilado al matraz Erlenmeyer de 500 ml. Añadir10 ml de la solución de Acido Sulfúrico 96% PA-ACS y 25 ml Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N)SV. Mantener el matraz durante una hora en el bañode agua a 25°C.Trascurrido ese tiempo, añadir 20 ml de la disoluciónde Potasio Yoduro. Tapar el matraz y mezclarbien su contenido. Inmediatamente valorar el yodoliberado con la dilolución de Sodio Tiosulfato 1 mol/l(1N) SV. Simultáneamente, a la muestra de vinagrellevar, en las mismas condiciones, un blanco en queel destilado se sustituya por 50 ml de Agua PA-ACS.8.5. Cálculo.El valor del índice de oxidación de hallarámediante la fórmula siguiente:

Ma -bI = –––––– x grado acético del vinagre original8donde:I = índice de oxidación.a = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 mol/l(1N) SV consumido en la valoración de lamuestra en blanco.b = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 moll(1N) SV consumido en la valoración de lamuestra de vinagre diluido.8.6. Observaciones.8.6.1. Si el índice de oxidación resulta mayor que15, ha de repetirse la determinación, usando 25 mldel vinagre ajustando a 4 grados acéticos, añadiendo25 ml de agua. Repetir esta reducción a lamitad hasta que el índice de oxidación sea menorque 15. Calcular el índice de oxidación, teniendo encuenta las diluciones efectuadas.8.6.2. Esta disolución no se debe usar si presentacolor amarillento.8.7. Referencias.8.7.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33-102-73.8.7.2. Métodos Oficiales de Análisis de la Associationof Official Agricultural Chemists de EstadosUnidos (ed. 1970).9. METANOL (Alcohol Metílico),METODO DEL ACIDOCROMOTROPICO9.1. Principio.Como en 37.1 de los métodos oficiales de análisisde vinos.9.2. Material y aparatos.Como en 37.2 de los métodos oficiales de análisisde vinos y matraz aforado de 25 ml.9.3 Reactivos.171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica2-hidrato RE131032 Acido orto-Fosfórico 85%PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO131698 Sodio Disulfito PA-ACS141717 Sodio Sulfito anhidro (BP, F. Eur.)PRS-CODEX9.3.1. Como 37.3.1 de los métodos oficiales deanálisis de vinos.9.3.2. Idem.9.3.3. Idem.9.3.4. Etanol 96% v/v PA.9.4. Procedimiento.Tomar 25 ml de vinagre, destilar en destiladorsimple y recoger 15 ml de destilado en matraz aforadode 25 ml sumergido en baño de hielo. Añadirel Etanol 96% v/v PA suficiente para que una vezenrasado a 25 ml con Agua PA-ACS la concentracióndel Etanol 96% v/v PA sea del 5-6% (9.6.1.).Continuar como en 37.4. de los métodos oficialesde análisis de vinos.9.5.Cálculo.Como en 37.5 de los métodos oficiales de análisisde vinos.9.6. Observaciones.9.6.1. En vinagres normales suele ser suficienteañadir 1,5% de Etanol 96% v/v PA.9.7. Referencia.9.7.1. Association of Official Agricultural ChemistsOfficial Methods of Analysis,1965, página138.10 (a). ACIDO TARTARICO(Método cualitativo)10 (a).1. Principio.Precipitación del ácido tartárico en forma de potasiobitartrato.10 (a).2. Material y aparatos.10 (a).2.1. Centrífuga.10 (a).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO121526 di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidratoPA-ACS-ISO10 (a).3.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.10 (a).3.2. Solución de Precipitación. Disolver300 g de Potasio Cloruro PA-ACS-ISO; 5,75 g dePotasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO y1,25 g de di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA y enrasara 1.000 ml con Agua PA-ACS.A baja temperatura la solución deposita pequeñoscristales, por lo que se debe calentar ligeramenteantes de emplearse.10 (a).3.3. Etanol 96% v/v PA.10 (a).4. Procedimiento.Poner en un tubo de centrífuga 10 ml de vinagre,123

1240,4 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO, 7,5 mlde la solución de Precipitación y 2 ml de Etanol96% v/v PA. Agitar con una varilla de vidrio hastaque aparezca un enturbiamiento cristalino aproximadamentea los diez segundos. Mantener el tubodurante una hora a 8°C aproximadamente. Al cabode este tiempo agitar enérgicanente el contenidodel tubo con una varilla de vidrio, con la precauciónde mezclar bien con la solución que sobrenada.Dejar en reposo aproximadamente a 8°C duranteuna hora. Transcurrido este tiempo centrifugar.10 (a).5. Interpretación de resultados.La aparición de precipitado indica la presenciade ácido tartárico en la muestra.10 (a) .6. Referencia.10 (a).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd'Analyse des Vins. O. I. V. A-12-h.10 (b). ACIDO TARTARICO(Método cuantitativo)10(b).1 Principio.Aislamiento del ácido tartárico mediante columnade resinas cambiadoras de aniones y posteriorvaloración colorimétrica.10(b).2. Material y aparatos.10(b).2.1. Resinas aniónicas de basicidad fuerte(III Merck o equivalente). Las resinas deben deencontrarse en forma de acetato. Para ello debenestar al menos veinticuatro horas en contacto conuna solución de ácido acético al 30 %.10(b).2.2. Columnas de vidrio de 10-11 mm dediámetro y 30 cm de longitud con llave en la parteinferior.10(b).3. Reactivos.131008 Acido Acetico glacial PA-ACS-ISO181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N)SV182105 Acido Sulfúrico 1mol/l (2N) SV131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS122352 Amonio meta-Vanadato PA141339 Glicerina (USP,BP,F. Eur.) PRS-CODEX211376 Lana de Vidrio, lavada QPResina Lewatit MP 600 (aniónica fuerte I)131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS181691 Sodio Hidróxido 1mol/l 1N SV121700 Sodio meta-Peryodato PA121716 Sodio Sulfato anhidro PA10(b).3.1. Acido Acético al 30 % (v/v).- Introducir300 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en unmatraz aforado y completar a 1.000 ml con AguaPA-ACS.10(b).3.2. Acido Acético al 0,5 % (v/v).- Introducir5 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en unmatraz aforado y completar hasta 1.000 ml conAgua PA-ACS10(b).3.3. Solución de Sodio Sulfato al 7,1 %(0,5N).- Disolver 71 g de Sodio Sulfato anhidro PA ycompletar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.10(b).3.4. Reactivo Vanádico.- Disolver 10 g deAmonio meta-Vanadato PA en 150 ml de SodioHidróxido 1 mol/l (1N) SV. Pasar esta solución a unmatraz aforado de 500 ml, añadir seguidamente200 ml de una solución de Sodio Acetato anhidroPA diluido al 27 % en Agua PA-ACS y llevar luego a500 ml con Agua PA-ACS.10(b).3.5. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.10(b).3.6. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.10(b).3.7. Solución de Acido Peryódico 0,1N(0,05M).- Introducir 10,696 g de Sodio meta-PeryodatoPA en un matraz aforado de 1.000 ml, añadir50 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV y completarhasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.10(b).3.8. Solución de Glicerina al 10 %.- Pesar10 g de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,bidestilada y llevarla a 100 ml con Agua PA-ACS.10(b).3.9. Solución de Acido Tartárico de 1 gpor l.- En un matraz aforado de 500 ml disolver500 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO en 6,6ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV y enrasar consolución de Sodio Sulfato al 7,1% a 500 ml.10(b).4. Procedimiento.10(b).4.1. Preparación de las columnas de resinasaniónicas. Colocar en el fondo de la columna[10(b).2.2.] Lana de Vidrio lavada QP formandotapón de 2-3 mm de altura, aproximadamente, yañadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos5 mm sobre el tapón de Lana de Vidrio lavada QP.Añadir la Resina Lewatit ® MP 600 aniónica (*) conservadaen Acido Acético al 30 %, agitar esta suspensióny agregar rápidamente un volumen de unos10 ml, evitando la formación de burbujas de aire,depositando en la superficie un tapón de Lana deVidrio lavada QP, que se conduce con una varilla devidrio con el fin de no remover las resinas en lossucesivos lavados anteriores en su superficie. Lasresinas solamente pueden servir para una sola vez.10(b).4.2. Aislamiento del Acido Tártarico.- Abrirla llave inferior de la columna y dar salida al AcidoAcético diluido hasta unos 2-3 ml por encima deltapón superior de Lana de Vidrio lavada QP. Añadirseguidamente unos 10 ml de Acido Acético al 0,5%y vaciar hasta igual altura; efectuar estos lavadoscuatro veces.Después del último lavado y con la llave cerrada,adicionar 10 ml de vinagre a analizar y señalar laaltura alcanzada con un lápiz graso, abrir a continuaciónla llave y dejar salir vinagre goteando arazón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml porminuto) hasta un poco por encima del tapón supe-

Mrior de Lana de Vidrio lavada QP. Llenar de nuevo lacolumna con Acido Acético al 0,5 % hasta la señaldel lápiz graso y dejar salir a la misma velocidad quela vez anterior y lavar después en la misma formasiete veces con 10 ml de Agua PA-ACS.Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuandoel nivel del líquido se encuentre un poco másarriba del tapón superior de Lana de Vidrio lavadaQP.Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluirlos ácidos fijados en el cambiador de aniones,mediante adiciones de solución de Sodio Sulfato[10(b).3.3.] hasta la señal trazada en el tubo.Para hacer esta operación resulta práctico colocarun frasco con solución de Sulfato unido por elcuello a la columna mediante un manguito de cauchoy con unas pinzas para regular la caída del líquidoen la bureta o tubo. Puestos así en comunicaciónlos dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrirlas pinzas del caucho de unión y la llave inferior,dejando caer el líquido a la bureta unos 10 cm dealtura y sin que queden huecos vacíos. Regular lasalida del líquido en la proporción de 2-3 gotas porsegundo, para llenar el matraz receptor hasta elenrase.10(b).4.3. Determinación del ácido Tartárico.- Endos matraces cónicos de 100 ml (A) y (B) introducir20 ml del eluido. El matraz (A) sirve para la medida yel matraz (B), en el cual el Acido Tartárico es destruidopor el Acido Peryódico, constituye el testigo.Añadir al matraz (A) 2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l(2N) SV, 5 ml de Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N)SV y 1 ml de Glicerina (USP,BP,F.Eur) PRS-CODEXal 10%.En el matraz (B), añadir 2 ml de Acido Sulfúrico1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Peryódico 0,1N,esperar quince minutos y añadir 1 ml de Glicerina al10 % para destruir el exceso de Acido Peryódico.Esperar dos minutos.Verter a continuación, agitando, primero en elmatraz (B) e inmediatamente después en el matraz(A), 5 ml del Reactivo Vanádico. Disparar inmediatamenteun cronómetro e introducir el contenido dedichos matraces en las cubetas de caras paralelasde 10 mm de espesor del espectrofotómetro. Alcabo de un minuto y treinta segundos medir la densidadóptica a 490 nm del líquido procedente delmatraz (A) (medida) después de haber reglado elaparato para obtener la transmisión al 100 % con lacubeta conteniendo el líquido testigo (B).10(b).5. Cálculo10(b).5.1. Preparación de la curva patrón.-Tomar 10; 20; 30; 40 y 50 ml de la solución10(b).3.9. e introducir cada alícuota en un matrazaforado de 100 ml. Enrasar con solución de sodiosulfato al 7,1%. Las diferentes diluciones correspondena eluidos del vinagre conteniendo 1; 2; 3; 4y 5 g de ácido tartárico por litro.En dos matraces (A) y (B) de 100 ml poner 20 mlde cada una de estas soluciones y tratarlas idénticamenteigual a los eluidos del vinagre anteriormentedescrito.La representación gráfica de las densidadesópticas de estas soluciones está en función de lacantidad de ácido tartárico. Para ello es recomendabley más preciso partir de concentraciones 0,1;0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1 g/l de ácidotartárico.10(b).5.2. Comprobar los valores obtenidos en elensayo con los correspondientes de la curvapatrón.10(b).6. Referencia.10(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. A12h.(*). En el original indica “Resina cambiadora deaniones”, entendemos que es apropiada la ResinaLewatit “ MP 600 aniónica fuerte I.11. COBRE11.1. Principio.Determinación directa por espectrofotometría deabsorción atómica.11.2. Material y aparatos.Espectrofotómetro de absorción atómica, con lámparaespecífica de cobre.11.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrónCu = 1,000 + 0’002 g/l AA11.3.1 Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0’002 g/l AA o preparar disolviendo 1’000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de AcidoNítrico 70% PA-ACS-ISO (1 + 1) y diluir a 1 litrocon Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO previamentediluido al 1 % (v/v) con Agua PA-ACS.11.3.2. Soluciones que contengan de 1 a 10 mg/lde Cobre.- Diluir partes alícuotas de la soluciónpatrón con Acido Acético al 5 % en Agua PA-ACS.11.4. Procedimiento.11.4.1. Calibrado del aparato.- Ajustar el aparatoa una longitud de onda de 324,7 nm en condicionestales que se obtenga una respuesta lineal alintroducirse las series de patrones preparados.11.4.2. Determinación.- Efectuar la lectura directade la absorbancia.11.5. Interpretación de los resultados.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos,hallar mediante la curva de patrón las concentracionesde cobre de la muestra.125

12611.6. Referencias.11.6.1 G. Charlot et D. Bezier: “Analyse quantitativeminerale”. El Masson, París (1955), 749-752.11.6.2. H.E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter”(1963), 1311.6.3. Standart Conditions for Zn and Cu.Analytical Methods for atomic absorbtion spectrophotometry“Perkin-Elmer”.11.6.4. F. Rousselet: “Spectrophotometrie parabsorption atomique Boudin”. Ed. Paris (1968),págs 59-144.12. CLORUROS12.1. Principio.Determinación directa de cloruros por potenciometríautilizando el electrodo Ag/AgCl.12.2. Material y aparatos.12.2.1. pH-metro con escala que permita apreciar2 mV.12.2.2. Agitador magnético.12.2.3. Electrodo Ag/AgCl con una soluciónsaturada de potasio nitrato como electrolito.12.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISOPotasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)12.3.1. Solución patrón de Cloruros.- Disolver2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de bromo),para análisis, previamente desecado en AguaPA-ACS hasta 1 litro; 1 ml de esta solución contiene1 mg de ion Cloro.12.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en Etanol al10% (v/v) hasta un litro. Diluir Etanol 96% v/v PAcon Agua PA-ACS. 1 ml de esta solución correspondea 1 mg de ion Cloro.12.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.12.4. Procedimiento.12.4.1. Determinación del potencial del punto deequivalencia.- Introducir 5,0 ml de la soluciónpatrón de Cloruros en un vaso de 150 ml. Diluiraproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS yacidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (12.3.3.). Introducir los electrodos. Añadir lasolución de Plata Nitrato agitando moderadamente.Los cuatro primeros ml se adicionan en fraccionesde 1 ml y se leen las correspondientes lecturasen milivoltios; los dos siguientes ml, en fraccionesde 0,2 ml y se continúa adicionando en fraccionesde 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de10 ml. Después de cada adición se debe esperarunos treinta segundos antes de hacer la correspondientelectura en minivoltios. Los valores así obtenidosse llevan sobre un papel milimetrado en funciónde los correspondientes ml de solución de PlataNitrato, y a partir del punto singular de la curvaobtenida, determinar el potencial del punto de equivalencia.Para comprobar el potencial del punto de equivalencia,llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de lasolución patrón de Cloruros, 95 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70 % PA-ACS-ISO.Introducir el electrodo y valorar agitando, justamentehasta el potencial del punto de equivalencia.Repetir esta operación hasta obtener una buenaconcordancia con los resultados.Este control debe efectuarse antes de determinarla concentración de cloruros en cada serie demuestras a analizar.12.4.2. Determinación.- Llevar a un vaso de150 ml, 50,0 ml de vinagre. Añadir 50 ml de AguaPA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.Valorar a continuación, siguiendo el procedimientodescrito anteriormente, hasta alcanzar el potencialdel punto de equivalencia.12.5. Cálculo.La cantidad de cloruros se determina mediantelas expresiones:0,02 n en gramos de ion cloro.0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion cloro.0,0329 n en gramos de sodio cloruro por litro.Siendo:n = volumen en ml de solución de plata nitratonecesario para alcanzar el potencial delpunto de equivalencia.12.6. Referencia.12.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. OIV A-15j.13. GRADO ALCOHOLICO13.1. Principio.Separación del alcohol por destilación, oxidacióndel mismo por potasio dicromato y determinacióndel contenido por valoración del exceso de dicromato.13.2. Material y aparatos.Como en los apartados 5(a).2.1; 5(a).2.1.1;5(a).2.1.2; 5(a).2.1.3 y 5(a).2.1.4 de los MétodosOficiales de Análisis de Vinos.13.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

M131074 Agua PA-ACS131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidratoPA-ISO211229 Calcio Hidróxido natural, polvo QP171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS131362 Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO131500 Potasio Dicromato PA-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO13.3.1. Solución de Potasio Dicromato.- Disolver33,608 g de Potasio Dicromato PA-ISO en una cantidadsuficiente de Agua PA-ACS y completar hastaun litro a 20° C. Esta solución corresponde al gradoalcohólico internacional O.I.V. 1 ml de esta soluciónoxida 7,8934 mg de alcohol.13.3.2. Solución de Amonio Hierro II Sulfato.-Disolver 135 g de Amonio Hierro II Sulfato 6-hidratoPA-ISO y 20 ml de Acido Sulfúrico 96 % PA-ISO enuna cantidad de Agua PA-ACS suficiente y completarhasta 1 litro, un volumen de esta solucióncorresponde a medio volumen de solución de PotasioDicromato cuando está recientemente preparada.Esta solución se oxida lentamente, por lo quedebe ser valorada frecuentemente en la misma quese realiza la determinación del alcohol, sustituyendola disolución alcohólica por Agua PA-ACS.13.3.3. Solución de Potasio Permanganato.-Disolver 1,088 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en una cantidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hasta 1 litro.13.3.4. Solución de Acido Sulfúrico diluido.- A500 ml de Agua PA-ACS añadir, poco a poco y agitando,500 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Despuésde enfriado, completar hasta 1 litro con AguaPA-ACS.13.3.5. Reactivo de Hierro II orto-Fenantrolina.-Disolver 0,695 g de Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS, añadir 1,485 gde 1,10-Fernantrolina 1-hidrato RE-ACS. Calentarpara favorecer la disolución.13.3.6. Lechada de cal 4N.- Desleír en la concentraciónconveniente, Calcio Hidróxido natural,polvo QP con Agua PA-ACS.13.4 Procedimiento.13.4.1. Destilación.- Medir 200 ml de vinagre enmatraz aforado y anotar la temperatura. Introducir elvinagre en el matraz de destilación que contengaunos fragmentos de material poroso. Lavar elmatraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS.Alcalinizar con un ligero exceso de Lechada de cal4N. Recoger el destilado en el matraz aforado de100 ml. Enrasar con Agua PA-ACS a la misma temperaturaque se midió el vinagre inicialmente.13.4.2. En un matraz Erlenmeyer, con tapónesmerillado, de 250 ml, poner 20 ml de soluciónvalorada en Potasio Dicromato, 20 ml de Acido Sulfúricodiluido y agitar. Añadir 10 ml de destiladoexactamente medidos. Tapar el Erlenmeyer, agitar yesperar por lo menos treinta minutos, agitando devez en cuando.13.4.3. Valoración.- Valorar el exceso de Dicromatocon la solución de Amonio Hierro II Sulfato.Cuando la coloración verde de la solución vire a verdeazulado, añadir cuatro gotas de reactivo de1,10-Fenantrolina. Detener la adición de solución deAmonio Hierro II cuando el líquido vire a marrón.A menudo se puede llegar a pasar el viraje, siendoentonces necesario volver al punto preciso adicionandosolución de Potasio Permanganato. Undécimo del volumen empleado de esta solución seresta del volumen de empleado de Hierro II Sulfato.Hacer una prueba en blanco sustituyendo los 10 mlde destilado por Agua PA-ACS.13.5. Cálculo.n’ - nGrado alcohólico = –––––––n’Siendo:n = volumen, en ml, gastados en la valoración.n’ = volumen, en ml, gastados en la prueba enblanco.13.6. Observaciones.Si el grado alcohólico del vinagre es superior a0,8°, repetir la oxidación utilizando 10 ml de destiladodiluido a 1/2.13.7. Referencia.13.7.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyses des vins. O. I. V. A-2-16.14. ARSENICO14.1. Principio.Reducción del arsénico a arsenamina gaseosaque reacciona con plata dietilditiocarbamato (disueltoen piridina), dando un complejo de color rojo.14.2. Material y aparatos.14.2.1. Aparato Quickfit (figura I)14.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro quepermita lecturas a 538 nm.14.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfurico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACSArsénico131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO131303 Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131457 Piridina PA-ACS127

128Figura 14.1122382 Plata Dietilditiocarbamato PA131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISOZinc metal, granulado, exentode Arsénico.14.3.1. Solución de Plata DietilditiocarbamatoPA.- Disolver 1.000 g de este reactivo en 200 ml dePiridina PA-ACS. Esta solución puede conservarsealgunas semanas.14.3.2. Plomo II Acetato en algodón.- Impregnarel algodón hidrófilo en solución acuosa de Plomo IIAcetato 3-hidrato PA-ACS-ISO al 10%, escurrir ellíquido en exceso y desecar al vacío.14.3.3. Solución acuosa de Potasio Yoduro PA-ISO al 15%.14.3.4. Solución acuosa de Cobre II Sulfato5-hidrato PA-ACS-ISO al 2%14.3.5. Solución de Estaño Cloruro.- Disolver0,33 g de Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISOen 100 cc de Acido Clorhídrico al 32% (d=1,16).Diluir Acido Clorhídrico 35 % PA-ISO con Agua PA-ACS.14.3.6. Zinc metal granulado, exento de Arsénico.14.3.7. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO14.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.14.3.9. Solución de 100 mg/l de Arsénico.14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra.- En un matrazKjeldahl de 500 ml, introducir 100 ml de vinagre con100 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, para evitarlas pérdidas de As. Llevar a ebullición hasta reducirel volumen a 10 ml, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico96% PA-ISO y continuar la ebullición adicionandoAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO gota a gota hasta latotal decoloración. Después de la expulsión de losvapores nitrosos dejar enfriar, diluir con 10 ml deAgua PA-ACS y calentar hasta casi sequedad. Unavez frío el matraz, trasvasar el residuo al matraz devaloración utilizando 40 ml de Agua PA-ACS.14.4.2. Valoración.- Poner en el tubo en U, 3 mlde la solución de Plata Dietilditiocarbamato. Colocaren la parte superior del tubo intermedio del aparatoel algodón impregnado en Plomo II Acetato al 10 %con objeto de retener el sulfhídrico y la fosfaminaque puedan desprenderse al mismo tiempo que laarsenamina.Introducir la muestra preparada en el Erlenmeyerde 100 ml del aparato descrito y añadir sucesivamente10 ml de la solución de Estaño II Cloruro, 5 mlde la solución de Potasio Yoduro y 1 ml de la soluciónde Cobre II Sulfato. Después de quine minutosañadir 5 g de Zinc granulado y cerrar rápidamente elaparato. Colocarlo en la oscuridad y dejar pasarvapores por lo menos durante una hora.14.4.3. Preparación de la curva de patrón.- Apartir de una solución 14.3.9, preparar solucionesque contengan 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11;12 mg de Arsénico por litro.14.5. Cálculo.Calcular el contenido en arsénico utilizando lacorrespondiente curva patrón.14.6. Observaciones.14.6.1. Interfiere en la determinación el antimoniocuyo complejo absorbe a 510 nm.14.6.2. La Ley de Lambert-Beer se cumple entrelas concentraciones de 0 y 15 microgramos de As.14.6.3. Este método tiene un límite de detecciónde 0,2 microgramos.14.7. Referencias.14.7.1. Vasak, V y Sedivec, V (1952) Chem. Listy46, 341, citado por M.D. Garrido, M.L. Gil y C. Llaguno.An. Bromatología XXVI-2 (1974), 167-176.14.7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyses des Vins. O. I. V. A-34f.15. ZINC15.1. Principio.Determinación directa por espectrofotometría deabsorción atómica.

M15.2. Material y aparatos.15.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.15.2.2. Lámpara de zinc.15.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrónZn = 1,000 + 0,002 g/l AA15.3.1. Zinc solución patrón Zinc = 1,000 +0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de zincpuro en el mínimo volumen necesario de AcidoNítrico 60% PA-ISO (1+1) y diluir a 1 litro con AcidoNítrico al 1% (v/v) (diluir Acido Nítrico 60% PA-ISOcon Agua PA-ACS).15.4. Procedimiento.15.4.1. Preparación de la muestra.- No se necesitapreparación especial. En caso de elevada concentración,realizar una o varias diluciones hastaquedar dentro del rango de medida.15.4.2. Determinación.- Diluir partes alícuotas dela solución (15.3.1.) con Acido Acético al 5% (diluirAcido acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS) para obtener soluciones de 0, 0,5, 1, 1,5 y2 ppm. Aspirar las soluciones patrón y a continuaciónla muestra, anotando las absorbancias obtenidasa 213,8 nm.15.5. Interpretación de resultados.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos,hallar las concentraciones de zinc de la muestra.15.6. Referencias.15.6.1. H. E. Parker, Atomic Absorptions Newsletter(1963), 13.15.6.2. Standart conditions for Zn and Cu.Analytical Methods for atomic absorption spectrophotometry“Perkin-Elmer”.16. PROLINA16.1. Principio.Determinación cuantitativa de la prolina por reaccióncon ninhidrina en medio ácido.16.2. Material y aparatos.16.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.16.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro quepermita efectuar lecturas a 517 nm.16.3. Reactivos.131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS131074 Agua PA-ACS141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS132362 Ninhidrina PA-ACS131090 2-Propanol PA-ACS-ISO16.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílicodel Etilenglicol PRS.16.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS.16.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS1:1 (v/v)16.4. Procedimiento.Diluir la muestra hasta que contenga de 0,05 a0,5 milimoles/ml de prolina. Tomar 1/2 ml de muestradiluida e introducirla en un tubo de ensayo contapón de rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al3%. Cerrar herméticamente el tubo e introducirlo enun baño de agua hirviendo durante catorce o quinceminutos. Enfriarlo a unos 200°C de cinco a diezminutos, añadiendo mientras se enfría 5 ml de soluciónde 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS1:1 (v/v).A continuación efectuar la lectura de la absorcióna 517 nm después de cinco minutos y antesde treinta minutos.Efectuar un blanco siguiendo el procedimientoanterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS envez de la solución problema.16.5. Interpretación de resultados.Calcular el contenido en prolina por comparacióncon una curva patrón que comprenda concentracionesentre 0,05 y 0,50 milimoles/ml.16.6. Referencia.16.6.1. C.S.Ough J. of Food Science 34 (3),pág. 228 (1969).17. ACIDO ACETICO DE SINTESIS17.1. Principio.Separación del ácido acético mediante extraccióncon éter iso-propílico y medida de su contenidoen C14 mediante espectrofotometría de centelleolíquido.17.2. Material y aparatos.17.2.1. Pipeta automática de 100 µl.17.2.2. Pipeta aforada de 10 ml.17.2.3. Viales para conteo, de vidrio con bajocontenido en potasio, dotados de un sistema decierre de material plástico para evitar el ataque delácido acético.17.2.4. Extractor líquido-líquido en continuo, concapacidad para 2 litros de muestra y 3,5 litros dedisolvente orgánico.17.2.5. Columna rectificadora de 1 cm de longitudy 3 cm de diámetro interno, rellena de anillos129

130rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerradaal vacío.17.2.6. Columna de destilación fraccionada de40 cm de longitud y 3 cm de diámetro interno, rellenade anillos rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisaaislante cerrada al vacío y llave de salida a los20 cm.17.2.7. Espectrofotómetro de centelleo líquido.17.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISOButil-PBD.131314 Eter Di-iso-Propílico estabilizado con~50 ppm de BHT PA-ACSTolueno marcado con C 1417.3.1. Eter Di-iso-Propílico estabilizado con~ 50 ppm de BHT PA-ACS.17.3.2. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.17.3.3. Tolueno marcado con C 14 .17.3.4. Solución de 8 g/l de Butil-PBD en Toluenopara centelleo.17.4. Procedimiento.17.4.1. Extracción y purificación del ácido acético.-Extraer 2 litros de vinagre de 5 grados acéticos(o la cantidad correspondiente si se trata de vinagresde otra graduación) en continuo con 3,5 litrosde Eter Di-iso-Propílico estabilizado con ~ 50 ppmde BHT PA-ACS durante 24 horas al menos con loque se obtiene un extracto que debe conteneraproximadamente el 70% de ácido acético presenteen el vinagre.Eliminar el disolvente por destilación en la columna17.2.5. y rectificar el residuo en la columna17.2.5. Recoger, por la salida situada en el centrode la columna, la fracción que destila a 114° despreciandolas primeras gotas de destilado. El destiladodebe tener una riqueza de ácido acético mayordel 95% en peso.17.4.2. Medidas espectrofotométricas.17.4.2.1. Fondo: En un vial se introducen 10,5 gde Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 10 ml dellíquido del centelleo (17.3.4.).17.4.2.2. Muestra problema: Introducir, en losviales de conteo, 10,5 g de cada destilado y 10 mlde líquido de centelleo (17.3.4.) Preparar al menos2 viales por cada muestra problema y uno para elfondo de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Cadavial se lee 300 minutos como mínimo.Una vez efectuado el conteo añadir a cada vialun volumen de patrón interno (17.3.3.) que dé aproximadamente40.000 dpm y contar durante 4 minutos.17.5. Cálculo.Actividad específica (dpm C 14 /g de C) = A 1 - A 2siendo:cpm(M)A 1 = –––––––––––––––0,4 x E 1 x g x ecpm(F)A 2 = –––––––––––––––0,4 x E 2 x g x ccpm (M+P) - cpm(M)E 1 (Eficacia de la muestra) = –––––––––––––––––dpm (P)cpm (F+P) - cpm(F)E 2 (Eficacia del fondo ) = –––––––––––––––––––dpm (P)g= gramos de la muestra o fondo en el vial.c= gramos de ácido acético por gramo de muestrao de fondo.cpm (M+P) = cuentas por minuto de la muestramás el patrón.cpm (F+P) = cuentas por minuto del fondo más elpatrón.cpm (M) = cuentas por minuto de la muestra.cpm (F) = cuentas por minuto del fondo.dpm (P) = desintegraciones por minuto del patrón.

M131

132Productos Derivadosde la Uva:Orujo, Heces y Lías.

MMETODOS DE ANALISIS1. CONTENIDO ALCOHOLICO ENORUJOS, HECES Y LIAS.1.1. Principio.Se determina por destilación de la muestra alcalinizaday medida del contenido alcohólico por alcohometría.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Aparato de destilación.- Consta de lassiguientes partes:1.2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml conrodaje esmerilado. Se puede utilizar de boca anchao de boca estrecha.1.2.1.2. Columna de rectificación de 20 cm delargo.1.2.1.3. Disco metálico o de amianto con un orificiode 8 cm de diámetro.1.2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longitudcon circulación rápida de agua.1.2.2. Equipo de medida.1.2.2.1. Alcohómetros.1.2.2.2. Termómetros.- Graduados en grados ydécimas de grado y comprendiendo el intervalo de0 a 30°.1.2.2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diámetroy 320 mm de altura.1.2.3. Granatorio.1.2.4. Matraz aforado de 200 ml.1.2.5. Vaso de precipitados.Destilar a continuación recogiendo 200 ml, obien las tres cuartas partes de este volumen(150 ml).Añadir al destilado más gotas de Tornasol tinturaRE y comprobamos que el destilado toma colorazul, de franca alcalinidad, debida al NH 3 que contiene.Seguidamente, con una pipeta se adiciona AcidoSulfúrico al 10% en cantidad suficiente para queel destilado vire a rojo, añadiendo un poco más(0,5 ml) para que el medio quede francamente ácido.Completar con Agua PA-ACS el contenido delos 200 ml del matraz y se procede a una segundadestilación, como si de un vino se tratase.El destilado recogido de esta segunda destilaciónestá ya en condiciones para determinar su gradoalcohólico por aerometría y efectuar la correccióna 20° C.1.5. Expresión de los resultados.El resultado se puede expresar:- cm 3 de alcohol absoluto / 100 g de muestra.1.6. Referencias.1.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analysesdes Vins. O. I. V. 1969, A2 1-19.1.6.2. De Bernadi, P.; García Viana, E. 1969.“Determinación de grado alcohólico de heces ylías”. Estación Enológica de Requena.1.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP171748 Tornasol tintura RE1.3.1. Lechada de Cal. Solución de 120 g deCalcio Oxido natural, escoriforme QP en 1.000 mlde Agua PA-ACS.1.3.2. Acido Sulfúrico al 10%. Diluir Acido Sulfúricoal 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.1.4. Procedimiento.El producto a analizar es vertido en un vaso deprecipitados donde es agitado para su homogeneizacióny al mismo tiempo para favorecer la expulsiónde CO 2 que pueda contener.En el caso de orujos, el muestreo se realiza deforma que la muestra sea lo más homogénea posible.Pesar 200 g de muestra homogeneizada y vaciaren el matraz de destilación, añadiendo 200 ml deAgua PA-ACS, parte de los cuales se utilizan paraenjuagar el vaso que ha contenido la muestra y acontinuación se añade Lechada de Cal hasta neutralizarel exceso (10 ml aproximadamente).Figura 1.1133

134Aguardientescompuestos:Whisky

MMETODOS DE ANALISIS1. OBTENCION DEL DESTILADO1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones determinadas.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidadde fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth, (20-30 cm delongitud) o similar.1.2.3. Matraces aforados de 100 y 200 ml decapacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS1.4. Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua de20 ° C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiandoel interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las paredesdel matraz.Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz de destilación, lavando tres veces consecutivasel matraz aforado de 200 ml con 20 ml deAgua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas delavado al matraz de destilación. Cuando se trate debebidas siruposas, por su gran contenido en azúcar,el lavado debe efectuarse consecutivamentecon tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Procedera la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para facilitarla ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespumainerte (como silicona).El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale por la pared sinsalpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fríaa menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado deuna alargadera que penetre por lo menos 4-6 cmen el cuello del matraz.Cuando se hayan recogido aproximadamente190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentrodel mismo baño, enrasarse con Agua PA-ACSmediante pipeta.Tapar el matraz e invertirlo varias veces parahomogeneizar su contenido, antes de proceder a ladeterminación del etanol.1.4.2. Muestras con más de 60% de etanol.El procedimiento anteriormente descrito, difiereúnicamente en que la muestra se mide en matrazaforado de 100 ml, que se lava varias veces conagua hasta alcanzar un volumen de aproximadamente230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.1.5. Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarseen ambos casos como sigue:Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al10% en volumen 5 veces sucesivas. Determinar enla última destilación el título alcohométrico del destiladoque no debe ser menor de 9,9% en volumende etanol.1.5.2. La destilación debe efectuarse procurandoque el flujo del destilado sea uniforme.1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre 45 y 90 minutos.1.6. Referencia.1.6.1. Instituto Español de Normalización.UNE 33-112-75.2. FURFUROL2.1. Principio.Destilación y posterior medida espectrofotométricade su absorción a 277 nm.2.2. Material y aparatos.2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.2.2.4. Aparato de destilación por arrastre devapor, según figura I.Figura 2.1135

1362.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121085 Etanol v/v 96% PA141334 Furfuraldehído PRS2.3.1. Disolución patrón de furfurol (furfuraldehído)de aproximadamente 116 mg/l. Destilar FurfuraldehídoPRS recogiendo solamente la fracción depunto de ebullicion, 161,2°C. De este destiladotomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 mlenrasando con Etanol 96% v/v PA. Tomar 5 ml deesta disolución y diluir con alcohol al 50% en volumenen un matraz aforado de 500 ml.2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de(2.3.1.) obtener disoluciones de 0; 1 ;2; 3; 4 y5 mg/l de Furfuraldehído PRS.2.4. Procedimiento.2.4.1. Preparación de la muestra.Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descritoen (2.2.4.) recogiendo 200 ml.Si se observa turbidez en el destilado añadir unvolumen conocido de Etanol 96 % v/v PA, hastalograr total limpidez en el destilado.2.4.2. Determinación.Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a277 nm, comparando con las lecturas efectuadas alas disoluciones de referencia o bien calculando laabsorbancia de una disolución que contenga 1 mg/lde Furfuraldehído PRS (valor aproximado 0,15).2.5. Cálculo.El contenido en furfuraldehído se obtiene mediantela fórmula:AFurfuraldehído (mg/l) = ––– x FA’Siendo:A = Absorbancia de la muestra.A’ = Absorbancia de una disolución que contiene1 mg/l de furfuraldehído.F = Factor de dilución.2.6. Observaciones.2.6.1. La disolución de referencia se debe prepararinmediatamente antes de efectuar la medida.2.7. Referencia.2.7.1. Instituto Español de Normalización.UNE 33-109-74.3. EXTRACTO SECO3.1. Principio.Evaporación de la muestra a 105° C y pesadaposterior del residuo.3.2. Material y aparatos.3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondoplano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm dealtura.3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácidosulfúrico concentrado o gel de sílice como sustanciasdesecadoras.3.2.4. Baño de agua.3.2.5. Balanza analítica.3.3. Procedimiento.Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar asequedad, en las cápsulas correspondientes previamentedesecadas y taradas, en baño de aguahirviente y mantener en la estufa a 105° C durante30 minutos.Dejar enfriar las cápsulas en el interior del desecadory una vez frías pesar en la balanza.3.4. Cálculo.El valor del extracto total de la muestra, en gramospor litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:Extracto total (g/l) = ( M - m ) x 40Siendo:M = Peso, en g, de la cápsula con el extractoseco.m = Peso, en g de la cápsula vacía.3.5. Referencia.3.5.1. Instituto Español de Normalización.UNE 33-106-74.4. ESTERES4.1. Principio.Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxilaminaen solución alcalina, formación de ácidohidroxámico, acidificación, formación de un complejocoloreado con iones férricos y medida delcolor desarrollado a 525 nm.4.2. Material y aparatos.4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que permitalecturas a 525 nm.4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y diámetrointerno 2,5 cm.4.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO131914 Hidroxilamino Cloruro PA-ACS-ISO141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

M4.3.1. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato2M. Conservar en nevera.4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5N.4.3.3. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato1M en Sodio Hidróxido 1,75 N. Mezclar inmediatamenteantes de su uso, volúmenes iguales del reactivo(4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas.4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.4.3.5. Disolución de Hierro Tricloruro 0,37M.Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozosPRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matrazaforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Acido Clorhídrico4N y enrasar con agua.4.4. Procedimiento.4.4.1. Construcción de la curva patrón.4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo AcetatoPA-ACS-ISO y llevar a un litro con alcohol de50° (preparar a partir de Etanol 96% v/v PA y AguaPA-ACS).4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y300 mg/l de Etilo Acetato. Tomar de la solución(4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml introduciéndolosen matraces de 250 ml de capacidad ycompletar con alcohol de 50° hasta el enrase.4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de lasolución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.) mezclándolasen un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar yañadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones(4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensayo(4.2.2.), 2 ml de cada una de las soluciones(4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).Agitar y dejar reaccionar entre uno y 20 minutos.Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico 4Ny mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro IIICloruro 0,37 M a cada uno de los matraces, tanto alde la solución de referencia como a los de las soluciones(4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimétricasa una longitud de onda de 525 nm.Obtener las gráficas de calibrado mediante larepresentación de las diferencias de absorción delas soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución dereferencia, en función de la concentración de EtiloAcetato.4.4.2. Preparación de la muestra.Destilar siguiendo el procedimiento descrito en elmétodo oficial nº 1.4.4.3. Determinación.Introducir en un tubo (4.2.2.) 2 ml del destilado y4 ml de disolución de Hidroxilamina Clorhidrato(4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre 1 y 20 minutos.Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico(4.3.4.) y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución deHierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colorimétricaa 525 nm inmediatamente, tomando comoblanco la solución de referencia preparada de lasiguiente forma:Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disoluciónde Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.) y 2 ml dela solución de Acido Clorhídrico (4.3.4.), mezclar yañadir 2 ml de destilado. Añadir 2 ml de la disoluciónde Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.4.5. Cálculo.A partir de las lecturas obtenidas se halla el contenidoen ésteres expresados en etilo acetato,mediante las gráficas de calibrado.4.6. Observaciones.4.6.1. El mismo blanco puede ser usado parauna serie de muestras de distinto contenido enésteres, pero de semejente graduación alcohólica.4.7. Referencias.4.7.1. Association of Official Analytical Chemists.Edición 1975-9053-59.4.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE33-111-77.5. ALCOHOLES SUPERIORES5.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de losalcoholes superiores al etanol, por cromatografía degases.5.2. Material y aparatos.5.2.1. Cromatógrafo de gases equipados condetector de ionización de llama.5.2.2. Columna cromatográfica.- Columna de4 m de longitud de 1/8” de diámetro interno rellenade Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W80-100 mallas, lavado a los ácidos.5.2.3. Microjeringas de 1 ml.5.3. Reactivos.5.3.1. Patrones cromatográficos:351082 1-Butanol CG354330 iso-Butanol CG353851 2-Butanol CG354539 2-Metil-1-Butanol CG351079 3-Metil-1-Butanol CG352516 4-Metil-2-Pentanol CG351885 1-Propanol CG5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.5.4. Procedimiento.5.4.1. Condiciones cromatográficas.- Las condicionescromatográficas orientativas son: Gas portadornitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno35°C, temperatura del inyector y del detector150°C.5.4.2. Calibrado.5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en etanolde 40° de 4-Metil-2-Pentanol.137

1385.4.2.2. Solución patrón: Preparar una soluciónen etanol de 40° en las proporciones que se indicanen la Tabla 1.5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de lasolución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de lasolución del patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta1 ml en el cromatógrafo.5.4.3. Muestra problema.- A 10 ml de la muestrallevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno(5.4.2.1.) e inyectar 1 mlitro en las mismas condicionesen que se hizo para el calibrado.5.5. Cálculo.Una vez identificados los picos por sus retencionesrelativas al patrón interno se calculan los factoresde respuesta para cada uno de ellos y las concentracionesen la muestra problema aplicando lasfórmulas:Ci x ApFactor de respuesta (Fr) = ––––––––AiAimConcentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x fApmSiendo:Ci = Concentración del compuesto en la soluciónpatrón.Ap = Area del patrón interno en la soluciónpatrón.Ai = Area del compuesto en la soluciónpatrón.Aim = Area del compuesto en la muestra problema.Apm = Area del patrón interno en la muestraproblema.f = Factor de dilución de la muestra.El contenido en alcoholes superiores vendrádado por la suma de los valores individuales obtenidosde cada uno de ellos y se expresará en mg/100ml de alcohol absoluto.5.6. Referencia.5.6.1. Association of Official Agricultural ChemistsTABLA 1––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––Compuesto Concentración (mg/l)––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––2-Butanol 101-Propanol 125iso-Butanol 1751-Butanol 152-Metil-1-Butanol 1003-Metil-1-Butanol 300––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––6. METANOL6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación delalcohol metílico por cromatografía gaseosa.6.2. Material y aparatos.Como en (5.2.).6.3. Reactivos.Etanol pureza cromatográfica.Metanol pureza cromatográfica352516 4-Metil-2-Pentanol CG6.4. Procedimiento.6.4.1. Condiciones cromatográficas.Como en (5.4.1.)6.4.2. Calibrado.6.4.2.1. Patrón interno.- Como en (5.4.2.1.).6.4.2.2. Solución patrón.- Preparar una soluciónde Metanol, en Etanol a 40º C, de concentraciónsimilar a la esperada en la muestra.6.4.2.3. Solución de calibrado.- A 10 ml de lasolución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml de lasolución del patrón interno (6.4.2.1.), y se inyecta1 ml en el cromatógrafo.6.4.3. Muestra problema.Como en (5.4.3.).6.5. Cálculo.Como en (5.5.).7. GRADO ALCOHOLICO7.1. Principio.Se determina por destilación del producto ymedida de la densidad del destilado por areometría.Para bebidas con un contenido en extracto secomenor o igual a 600 mg en 100 ml, se efectuarádirectamente, sin destilación.7.2. Material y aparatos.7.2.1. Aparatos de destilación como en (1.2.).7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° ded 20/20 debidamente contrastado.

M7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diámetrointerior y 320 mm de altura.7.2.5. Baño termostático a 20°C.7.3. Procedimiento.7.3.1. Obtención del destilado.- Según métodooficial nº 1 en el caso de bebidas con extracto seco,sea mayor de 600 mg/100 ml.7.3.2. Determinación areométrica.- Limpiar ysecar el alcohómetro antes de su empleo. Dejar queel alcohómetro, termómetro, probeta y muestra,alcancen en el baño termostatizado la temperaturade 20ºC.Aclarar 2 o 3 veces con la muestra la probetaque contiene el termómetro. Echar la muestra en laprobeta hasta un volumen conveniente, inclinarlaunos 45° para evitar la agitación y las burbujas (alintroducir luego el alcohómetro, el nivel del líquidodebe estar justo por debajo del borde de la probeta).Tapar la probeta con la palma de la mano, einvertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturasde la probeta y del líquido. Secar el líquido de laparte exterior de la probeta (no poner las manossobre la probeta para no calentar el líquido contenido).Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba aabajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la mismatemperatura y que se distribuya cualquier cambiode temperatura en todo el líquido. Mantener el bulbodel alcohómetro en el líquido, secar el vástago,dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocasdécimas de grados estén mojadas.Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojojusto debajo del plano de la superficie del líquido,levantar lentamente la cabeza manteniendo la visualperpendicular al alcohómetro, hasta que la superficievaríe de elipse a una línea recta.Anotar el punto en que esta línea interseccionacon la escala del alcohómetro, siendo ésta la lecturadel alcohómetro.Levantarlo ligeramente por encima de dicha lecturay dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en elalcohómetro y en el termómetro, comprobando asílas primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohómetrocon aproximación de 0,05° y la del termómetrocon 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertirla probeta con la muestra varias veces para que seequilibre térmicamente todo el conjunto. Volver aatemperar el alcohómetro, secar el vástago y realizarnuevas lecturas en el alcohómetro y en el termómetro.Los valores calculados son válidos si tienenaproximación de 0,1 grados alcohólicos, si no fueraasí, realizar lecturas adicionales y calcular la media.7.4. Cálculo.7.4.1. Muestras con extracto seco mayor de600 mg en 100 ml:El grado alcohólico real es el leído en el destiladoobtenido según (7.3.1.).Si en la obtención del destilado, 100 ml demuestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida,debe ser multiplicada por 2.7.4.2. Muestras con extracto seco menor o iguala 600 mg en 100 ml:Para obtener el grado alcohólico real, adicionaral grado alcohólico aparente (leído directamente enla muestra sin destilar) 0,2 grados alcohólicos porcada 100 mg de extracto/100 ml.7.5. Referencia.7.5.1. Association of Official Analytical Chemist.Edición 1980-9015-9.8. ALDEHIDOS8.1. Principio.Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoracióndel exceso de yodo con sodio tiosulfato.8.2. Material y aparatos.8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas demililitro.8.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución 40%p/v QP182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Prepararesta disolución a partir de Sodio HidrógenoSulfito solución 40% p/v QP y Agua PA-ACS.8.4. Procedimiento.Poner 100 ml del destilado (obtenido segúnMétodo Oficial 1) en un matraz de 500 ml. Añadir100 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la disolución(8.3.3.) calculado de modo que equivalgapor lo menos a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV.Dejar el matraz bien tapado, durante 30 minutosagitando de vez en cuando.Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.Valorar el exceso de Yodo añadido con Sodio Tiosulfato0,05 mol/l (0,05N) SV, hasta decoloracióncompleta.Debe hacerse simultáneamente un ensayo enblanco, para comprobar en cada serie de ensayosla estabilidad de las disoluciones de Yodo y Tiosulfatopor ser tan diluidas.139

1408.5. Cálculo.El contenido en aldehídos, expresado comoacetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100de etanol absoluto)= (V 2- V 1) x –––––––––––ASiendo:V 1 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfatogastado en la muestra.V 2 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfatogastado en el blanco.A = Grado alcohólico.8.6. Observaciones.8.6.1. La disolución de sodio bisulfito tienemayor tiempo de estabilidad si se le añade un 10 %de alcohol. En cualquier caso esta solución es establecomo máximo una semana.8.7. Referencias.8.7.1. Association of Official Agricultural Chemists1980-9052.8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE33-107-74.9. ACIDEZ VOLATIL9.1. Principio.Se define convencionalmente como la diferenciaentre los valores de la acidez total y fija, expresadasambas en mg de ácido acético por 100 ml de alcoholabsoluto.9.2. Material y aparatos.9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.9.2.2. pH-metro.9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana.9.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N.Diluir a 1:10 en matraz aforado Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS.9.3.2. Etanol absoluto PA.9.4. Procedimiento.9.4.1. Acidez Total.Valorar 50 ml de la muestra con la disolución deSodio Hidróxido (9.3.1.), a pH 8,2 utilizando el pHmetro.9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño maría, enuna cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarlaa 100°C durante 30 minutos. Disolver y transferir elresiduo con varias porciones de alcohol (llevandopreviamente a pH 8,2) de una graduación similar ala muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA entotal.Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.9.5. Cálculo.9.5.1. Acidez total (enV1 x 1,2 x 100mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––ASiendo :V 1 = Volumen, en ml de sodio hidróxidoempleados en (9.4.1.).A = Grado alcohólico de la muestra.9.5.2. Acidez fija (enV2 x 1,2 x 100mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––ASiendo:V 2 = Volumen, en ml, de sodio hidróxidoempleados en (9.4.2.)A = Grado alcohólico de la muestra.9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado enmg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,vendrá dado por la fórmula:Acidez volátil = Acidez total - Acidez fija.9.6. Referencia.9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.Edición 1980-9046-9045.10. CENIZAS(Materia mineral total)10.1. Principio.Se denominan cenizas de un whisky, al conjuntode los productos de incineración del residuo deevaporación de un volumen conocido del whisky.10.2. Material y aparatos.10.2.1. Horno eléctrico regulable.10.2.2. Baño de agua y baño de arena.10.2.3. Lámpara de infrarrojo.10.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura, fondoplano.10.2.5. Balanza analítica.10.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

M10.4. Procedimiento.Colocar 25 ml de whisky en una cápsula taradaen balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar conprecaución en baño de agua hasta consistenciasiruposa, continuar el calentamiento sobre baño dearena con moderación y durante una media hora.Es conveniente ayudar a la evaporación con la aplicaciónde rayos infrarrojos hasta carbonización.Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cápsulaal horno eléctrico a 525°C ± 25°C y con aireacióncontinua.Después de cinco minutos de carbonizacióncompleta, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar yañadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evapora enbaño de agua, y llevar de nuevo al horno a 525° C.Si la combustión de las partes carbonosas no seconsigue en quince minutos, volver a comenzar laoperación de adición de Agua PA-ACS, evaporacióny recalcinación.Después de enfriar en el desecador, pasar lacápsula con las cenizas.10.5. Cálculo.El contenido en cenizas vendrá dado por lasiguiente fórmula:Cenizas (g/l) = 40 x PSiendo:P = Peso, en gramos, de las cenizas contenidasen 25 ml de whisky.10.6. Referencias.10.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyses des Vins. O.I.V., AGI, 1969.10.6.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,Ministerio de Agricultura, 1971, pág 66.11. PLOMO11.1. Principio.Determinación del plomo por A.A., previa mineralizaciónde la muestra.11.2. Material y aparatos.11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.11.2.2. Lámpara de plomo.11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.11.2.4. Baño de arena o placa calefactora conregulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150°C.11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml decapacidad.11.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.11.3.3. Acido Nítrico al 1% v/v en Agua PA-ACS.11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.11.4. Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra.- Poner100 ml de la muestra en la cápsula (11.2.3.) y llevarlaa evaporación hasta consistencia siruposa enbaño de arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 mlde Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuoen el baño de arena o placa. Seguidamenteintroducir la cápsula en la mufla y mantenerla durantedos horas a 450°C, transcurrido dicho tiempo,sacarla y dejarla enfriar.Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendoesta operación hasta obtener cenizas blancas.Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Hierro III Oxido) es aceptado y norequiere un tratamiento posterior.Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas dellavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.11.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluiralícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curvade concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.11.4.3. Determinación.- Operar según las especificacionesdel aparato; usando llama de aire-acetileno.Medir las absorbancias de la muestra y patronesa 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.11.5 Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/lmediante comparación con la correspondiente curvapatrón y teniendo en cuenta el factor de concentracióno dilución.11.6. Referencia.11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.12. ZINC12.1. Principio.Determinación del Zinc por A.A. previa mineralizaciónde la muestra.141

14212.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.12.2.2. Lámpara de Zinc.12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrónZn = 1,000 ± 0,002 g/l AA12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.).12.3.2. Zinc solución patron Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zincmetal , granalla PRS en el mínimo volumen necesariode Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítricodel 1% (v/v).12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra.- Como en(11.4.1.).12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;1; 1,5 y 2 mg/l.12.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.12.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos,hallar las concentraciones de Zinc para la muestra,teniendo en cuenta el factor concentración o dilución.12.6. Referencia.12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter(1963), 13.13. COBRE13.1. Principio.Determinación del cobre por A.A., mineralizaciónpor cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a lalectura con objeto de conseguir resultados suficientementeprecisos.13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.13.2.2. Lámpara de cobre.13.2.3. Los utilizados para el plomo en (11.2.3.),(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).13.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/l AA13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.).13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puroen el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico (1:1)y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en(11.4.1.).13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) conAcido Nítrico del 1% para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de cobre/l.13.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.13.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidospara la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de cobre de la muestra.13.6. Referencias.13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter(1963),13”.13.6.2. F. Rousselet: “Spectrophotometrie parabsorption atomique Boudin”. Ed. París (1968), pág59-144.14. ARSENICO14.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida conuna mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza porespectrofotometría de absorción atómica, con generadorde hidruros.14.2. Material y aparatos.14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g.14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml decapacidad.14.2.3. Pipetas de doble aforo.14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómicaequipado con sistema generador de hidruros.14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara dedescarga sin electrodos.14.2.8. Registro gráfico.14.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético salDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO

M131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrónAs = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido 97%, lentejasPA-ACS-ISO14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO(d= 1,19 g/ml).14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 32% v/v.Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d= 1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta unvolumen de 100 ml.14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 1,5% v/v.Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d=1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volumende 1.000 ml.14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84).14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISOy disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlohasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.14.3.8. Disolución de Acido Etilendiaminotetraacéticoal 1%. Pesar un gramo de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumende 100 ml.14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISOcon Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoIII Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxidoal 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico1% (14.3.11.).14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración10 mg/l. Pipetear 1 ml de la soluciónpatrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforadode 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.14.3.14. Solución patrón de Arsénico deconcentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de lasolución de Arsénico (14.3.13.), en un matrazaforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase conAgua PA-ACS.14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra. En un matrazKjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO.Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a5ml.Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en unmatraz de 50 ml la solución resultante.14.4.2. Preparación del blanco y patrones detrabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de lasolución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mismotratamiento que la muestra.1 ml de la solución contiene 10 nanogramos deArsénico.Preparar un blanco con todos los reactivos utilizadossiguiendo el tratamiento dado a la muestra.14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiempo suficientepara que se estabilice la energía de la lámpara.Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla deacuerdo con las condiciones del aparato.Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcanza dicha temperatura.Se ajustan las condiciones del generador dehidruros según las especificaciones del aparato.Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con lascaracterísticas del aparato.Encender el registrador.14.4.4. Determinación.- Las determinaciones dela concentración de Arsénico se realizan por elmétodo de adición de patrones, por medio demedidas duplicadas en el espectrofotómetro en lascondiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendoal matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solución(14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,20 y 50 ng de Arsénico.Lavar los matraces antes y después de cadauso, con Acido Clorhídrico 1,5% (14.3.3.).Al construir la gráfica de adición hay que descontarel valor de absorbancia del blanco obtenidoen las mismas condiciones anteriores, pero añadiendo3 ml de la solución blanco.En estas condiciones el límite de detección de latécnica es de 5 ng.143

144Aguardientescompuestos:Ron

MMETODOS DE ANALISIS1. OBTENCION DEL DESTILADO1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones determinadas.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidadde fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm delongitud) o similar.1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml decapacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS1.3.1. Agua PA-ACS1.4 Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua a20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiandoel interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las paredesdel matraz.Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas del lavado almatraz de destilación. Cuando se trate de bebidassiruposas, por su gran contenido en azúcar, el lavadodebe efectuarse consecutivamente con tres porcionesde 50 ml de Agua PA-ACS.Proceder a la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para facilitarla ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespumanteinerte (como silicona).El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale por la pared sinsalpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría,a menos de 10° C. El refrigerante debe ir dotado deuna alargadera que penetra por lo menos 4-6 cmen el cuello del matraz.Cuando se hayan recogido aproximadamente190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentrodel mismo baño, enrasar con Agua PA-ACSmediante pipeta.Tapar el matraz e invertirlo varias veces parahomogeneizar su contenido antes de proceder a ladeterminación del etanol.1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. Elprocedimiento anteriormente descrito difiere únicamenteen que la muestra se mide en matraz aforadode 100 ml, que se lava varias veces con AguaPA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximadamente230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.1.5 Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarseen ambos caso como sigue:Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al10% en volumen cinco veces sucesivas. Determinaren la última destilación el título alcohométrico deldestilado, que no debe ser menor del 9,9% en volumende etanol.1.5.2. La destilación debe efectuarse procurandoque el flujo del destilado sea uniforme.1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre cuarenta y cinco y noventaminutos.1.6. Referencia.1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE33-112-75.2. FURFUROL(Furfuraldehído)2.1. Principio.Destilación y posterior medida espectrofotométricade su absorción a 277 nm.2.2. Material y aparatos.2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.2.2.4. Aparato de destilación por arrastre devapor, según figura 1.2.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA141334 Furfuraldehído PRS2.3.1. Disolución patrón de Furfuraldehído deaproximadamente 116 mg/l. Destilar FurfuraldehídoPRS recogiendo solamente la fracción del punto deebullición 161,2°C. De este destilado tomar 1 ml,llevarlo a un matraz aforado de 100 ml, enrasandocon Etanol al 95% en volumen. Tomar 5 ml de estadisolución y diluir con Etanol al 50% en volumen enun matraz aforado de 500 ml.2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de(2.3.1.) obtener disoluciones de 0, 1, 2, 3, 4 y5 mg/l de Furfuraldehído.145

2.6. Observaciones.2.6.2. La disolución de referencia se debe prepararinmediatamente antes de efectuar la medida.2.7. Referencia.2.7.1. Instituto Español de Normalización. UNE33-109-74.146Figura 2.12.4. Procedimiento.2.4.1. Preparación de la muestra. Destilar 25 mlde la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.),recogiendo 200 ml.Si se observa turbidez en el destilado, añadir unvolumen conocido de Etanol 95% hasta lograr totallimpidez en el destilado.2.4.2. Determinación. Leer la absorbancia en elespectrofotómetro a 277 nm, comparando con laslecturas efectuadas a las disoluciones de referenciao bien calculando la absorbancia de una disoluciónque contenga 1 mg/l de Furfuraldehído PRS (valoraproximado 0,15).2.5. Cálculo.El contenido en Furfuraldehído se obtiene mediantela fórmula:AFurfuraldehído (mg/l) = ––– x FA’Siendo:A = absorbancia de la muestra.A’ = absorbancia de una disolución quecontiene 1 mg/l de Furfuraldehído.F = factor de dilución.3. EXTRACTO SECO REDUCIDO3.1. Principio.Evaporación de la muestra a 105°C y pesadaposterior del residuo, y aplicación de una fórmulaempírica.3.2. Material y aparatos.3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a los105°C.3.2.2. Crisoles de platino o cuarzo de fondo plano,de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura.3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácidosulfúrico concentrado o gel de sílice como sustanciadesecadora.3.2.4. Baño de agua.3.2.5. Balanza analítica.3.3. Procedimiento.Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar asequedad, en las cápsulas correspondientes previamentedesecadas y taradas, en baño de aguahirviente y mantener la estufa a 105ºC, durantetreinta minutos.Dejar enfriar las cápsulas en el interior del desecadory una vez frías pesar en la balanza de precisión.3.4. Cálculo.El valor del extracto total de la muestra, en gramospor litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:Extracto total (g/l) = (M-m)x40Siendo:M = peso, en g, de la cápsula con el extractoseco.m = peso, en g, de la cápsula vacía.El extracto seco reducido se calcula mediante lafórmula siguiente:Extracto seco reducido = ESR en (g/l)Extracto seco total = EST en (g/l)Azúcares totales = AT en (g/l) = sacarosa +azúcares reductoresESR= EST - AT3.5. Referencia.3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE33-106-74.

M4. ESTERES4.1. Principio.Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxilaminaen solución alcalina, formación de ácidohidroxámico, acidificación, formación de un complejocoloreado con iones férricos y medida delcolor desarrollado a 525 nm.4.2. Material y aparatos.4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro quepermita lectura a 525 nm.4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm ydiámetro interno 2,5 cm.4.3. Reactivos131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO131914 Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozosPRS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO4.3.1. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro2M. Diluir convenientemente Hidroxilamonio CloruroPA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. Conservaren nevera.4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5 N.Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejasPA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.4.3.3. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro 1Men Sodio Hidróxido 1,75N: mezclar inmediatamenteantes de su uso, volúmenes iguales delreactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seishoras.4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35%PA-ISO en Agua PA-ACS.4.3.5. Disolución de Hierro III Cloruro 0,37M.Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozosPRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en unmatraz aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de AcidoClorhídrico 4N y enrasar con agua.4.4. Procedimiento.4.4.1. Construcción de la curva patrón.4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de EtiloAcetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con Etanol96% v/v PA convenientemente diluido en AguaPA-ACS hasta concentración 50º.4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250y 300 mg/l de Etilo Acetato PA-ACS-ISO. Tomarde la solución (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y15,0 ml introduciéndolos en matraces de 250 mlde capacidad y completar con Etanol de 50° hastael enrase.4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml dela solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.)mezclándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclary añadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones(4.4.1.2.).Introducir en una serie de tubos de ensayo(4.2.2.), 2ml de cada una de las soluciones(4.4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).Agitar y dejar reaccionar entre uno y veinteminutos. Añadir 2 ml de la disolución de AcidoClorhídrico 4N y mezclar. Añadir 2 ml de la disoluciónde Hierro III Cloruro 0,37M a cada uno de losmatraces, tanto al de la solución de referenciacomo a los de las soluciones (4.4.1.2.).Efectuar las lecturas colorimétricas a una longitudde onda de 525 nm.Obtener las gráficas de calibrado mediante larepresentación de las diferencias de absorción delas soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución dereferencia, en función de la concentración de EtiloAcetato.4.4.2. Preparación de la muestra. Destilarsiguiendo el procedimiento descrito en el métodooficial número 1.4.4.3. Determinación. Introducir en un tubo(4.2.2.), 2 ml del destilado y 4 ml de disolución deHidroxilamonio Cloruro (4.3.3.), agitar y dejarreaccionar entre uno y veinte minutos. Añadir 2 mlde la disolución de Acido Clorhídrico (4.3.4.) ymezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro IIICloruro (4.3.5.)Efectuar la lectura colorimétrica a 525 nminmediatamente, tomando como blanco la soluciónde referencia preparada de la siguiente forma:Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disoluciónde Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.) y 2 ml dela solución de ácido clorhídrico (4.3.4.), mezclar yañadir 2 ml del destilado. Añadir 2 ml de la disoluciónde Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.4.5 Cálculo.A partir de las lecturas obtenidas se halla el contenidoen ésteres, expresados en mg de etilo acetatopor 100 ml de alcohol absoluto, mediante lasgráficas de calibrado.4.6. Observaciones.4.6.1. El mismo blanco, puede ser usado parauna serie de muestras de distinto contenido enésteres, pero de semejante graduación alcohólica.4.7. Referencias.4.7.1. Association of Official Analytical Chemists.Edición 1975-9053-594.7.2. Instituto Español de normalización. UNE33-111-77.147

1485. ALCOHOLES SUPERIORES5.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de losalcoholes superiores al etanol por cromatografía degases.5.2. Material y aparatos.5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado condetector de ionización de llama.5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 mde longitud de 1/8” de diámetro interno rellena deCarbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W80-100 mallas, lavado a los ácidos.5.2.3. Microjeringas de 1 µl.5.3. Reactivos.5.3.1. Patrones cromatográficos:131082 1-Butanol PA-ACS-ISO354330 iso-Butanol CG353851 2-Butanol CG354539 2-Metil-1-Butanol CG351079 3-Metil-1-Butanol CG4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)351885 1-Propanol CG5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.5.4. Procedimiento.5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condicionescromatográficas orientativas son: gas portadornitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno85°C, temperatura del inyector y del detector150°C.5.4.2. Calibrado.5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en etanolde 40° C 4-Metil-2-Pentanol.5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una soluciónen alcohol de 40° en las proporciones que se indicanen la tabla 1.5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de lasolución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml dela solución patrón interno (5.4.2.1.) Y se inyecta 1 µlen el cromatógrafo.5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestrallevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno(5.4.2.1.) e inyectar un litro en las mismas condicionesen que se hizo para el calibrado.5.5. Cálculo.Una vez identificados los picos por sus retencionesrelativas al patrón interno se calculan los factoresde respuesta para cada uno de ellos y las concentracionesen la muestra problema aplicando lasfórmulas.ApFactor de respuesta ( Fr ) = Ci x –––––AiAimConcentración en la muestra (mg/l) = Fr x –––––– x fApmSiendo:Ci = concentración del compuesto en la soluciónpatrón.Ap = área del patrón interno en la soluciónpatrón.Ai = área del compuesto en la solución patrón.Aim = área del compuesto en la muestra problema.Apm = área del patrón interno en la muestra problema.f = factor de dilución de la muestra.El contenido en alcoholes superiores vendrádado por la sumo de los valores individuales obtenidosde cada uno de ellos y se expresará en mg/100ml de alcohol absoluto.5.6. Referencia.5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists1980, 9075.TABLA 1–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––Compuesto Concentración (mg/l)–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––2-Butanol 101-Propanol 125iso-Butanol 1751-Butanol 152-Metil-1-Butanol 1003-Metil-1-Butanol 300–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––6. METANOL(Alcohol Metílico)6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación delmetanol por cromatografía gaseosa.6.2. Material y aparatos.Como en 5.2.6.3. Reactivos.Metanol pureza cromatográfica.4-Metil 2-Pentanol (Patrón interno).Etanol pureza cromatográfica.6.4. Procedimiento.6.4.1. Condiciones cromatográficas.- Como en5.4.1.6.4.2. Calibrado.6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución

Mde Metanol en Etanol a 40°, de concentración similara la esperada en la muestra.6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de lasolución del patrón interno (6.4.2.2.), se le añade1 ml de la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y seinyecta 1 µl en el cromatógrafo.6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.6.5. Cálculo.Como en 5.5.6.6. Referencia.Como en 5.6.7. GRADO ALCOHOLICO7.1. PrincipioSe determina por destilación del producto ymedida de la densidad del destilado por areometría.7.2. Material y aparatos.7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° ded 20/20 debidamente contrastado.7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diámetrointerior y 320 mm de altura.7.2.5. Baño termostático a 20°C.7.3. Procedimiento.7.3.1. Obtención del destilado. Según métodooficial número 1.7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar ysecar el alcohómetro antes de su empleo.Echar el destilado en la probeta, inclinarla unos45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar laprobeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4veces para igualar las temperaturas de la probeta yel líquido.Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta ydestilado, alcance en el baño termostatizado latemperatura de 20°C.Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba aabajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la mismatemperatura y que se distribuya cualquier cambiode temperatura en todo el líquido. Mantener el bulbodel alcohómetro en el líquido, secar el vástago,dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocasdécimas de grados estén mojadas.Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojojusto debajo del plano de la superficie del líquido,levantar lentamente la cabeza manteniendo la visualperpendicular al alcohómetro, hasta que la superficievaríe de elipse a una línea recta.Anotar el punto en que esta línea interseccionacon la escala del alcohómetro, siendo ésta la lecturadel alcohómetro.Levantarlo ligeramente por encima de dicha lecturay dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en elalcohómetro y en el termómetro, comprobando asílas primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohómetrocon aproximación de 0,05° y la del termómetrocon 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertirla probeta con la muestra varias veces (el termómetroquede en su sitio), para que se equilibre térmicamentetodo el conjunto. Volver a atemperar el alcohómetro,secar el vástago y realizar nuevas lecturasen el alcohómetro y en el termómetro. Los valorescalculados son válidos si tienen aproximación de0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lecturasadicionales y calcular la medida.7.4. Cálculo.El grado alcohólico real es el leído en el destiladoobtenido según 7.3.1.Si en la obtención del destilado, 100 ml demuestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida,debe ser multiplicada por 2.7.5. Referencia.7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.Edición 1980-9015-9.8. ALDEHIDOS8.1. Principio.Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoracióndel exceso de yodo con sodio tiosulfato.8.2. Material y aparatos.8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas deml.8.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución40% p/v QP182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Diluirconvenientemente Sodio Hidrógeno Sulfito solución40% p/v QP en Agua PA-ACS.8.4. Procedimiento.Poner 100 ml del destilado (obtenido segúnMétodo oficial número 1) en un matraz de 500 mlde Agua PA-ACS y un exceso de la disolución(8.3.3.) calculado de modo que equivalga, por lomenos, a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.Dejar el matraz, bien tapado, durante treintaminutos, agitando de vez en vez.Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.Valorar el exceso de yodo añadido con Sodio Tio-149

150sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV hasta decoloracióncompleta.Debe hacerse simultáneamente un ensayo enblanco, para comprobar en cada serie de ensayosla estabilidad de las soluciones de Yodo y Tiosulfatopor ser tan diluidas.8.5. Cálculo.El contenido en aldehídos, expresado comoacetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100de alcohol absoluto)= (V 2 - V 1 ) x ––––––––––ASiendo:V 1 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastadoen la muestra.V 2 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastadoen el blanco.A = grado alcohólico.8.6. Observaciones.8.6.1. La solución de sodio bisulfito tiene mayortiempo de estabilidad si se le añade un 10% dealcohol. En cualquier caso esta solución es estable,como máximo una semana.8.7. Referencias.8.7.1. Association of Official Agricultural Chemists1980-9052.8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE33-107-74.9. ACIDEZ VOLATIL9.1. Principio.Se define convencionalmente como la diferenciaentre los valores de la acidez total y fija, expresadasambas en mg de ácido acético por 100 ml de alcoholabsoluto.9.2. Material y aparatos.9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.9.2.2. pH-metro.9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana.9.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N.Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejasPA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.9.3.2. Etanol absoluto PA.9.4. Procedimiento.9.4.1. Acidez total. Valorar 50 ml de la muestracon la disolución de Sodio Hidróxido (9.3.1.) apH 8,2 utilizando el pH-metro.9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño María, enuna cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarlaa 100° C durante treinta minutos. Disolver y transferirel residuo con varias porciones de Etanol absolutoPA (llevando previamente a pH 8,2) de una graduaciónsimilar a la muestra usando 50 ml de Etanolabsoluto PA en total.Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.9.5. Cálculo.9.5.1. Acidez fija (en V 1 x 1,2 x 100mg/100 ml de etanol absoluto) = –––––––––––––––ASiendo:V 1 = volumen, en ml, de sodio hidróxido empleadosen 9.4.1.A = grado alcohólico de la muestra.9.5.2. Acidez fija ( en V 2 x 1,2 x 100mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––ASiendo:V 2 = volumen, en ml, de sodio hidróxido empleadosen 9.4.2.A = grado alcohólico de la muestra.9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado enmg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,vendrá dado por la fórmula :Acidez volátil = acidez total - acidez fija.9.6. Referencia.9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.Edición 1980-9046-9048.10. AZUCARES REDUCTORES10.1 Principio.Eliminación previa de todas las materias reductorasdistintas de los azúcares reductores por defecacióny posterior valoración basada en la acciónreductora de los azúcares sobre una solucióncupro-alcalina.10.2. Material y aparatos.10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeraciónde reflujo.10.2.2. Material necesario para volumetría.10.2.3. Baño de agua.10.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

M131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121212 Calcio Carbonato precipitado PA131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO211835 Piedra Pómez gránulos QP131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidratoPA-ACS-ISO (aproximadamente saturada). Añadir a250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO,Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hastadisolución completa.10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver porseparado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de AcidoCítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar lasolución de Cobre Sulfato y completar el volumencon Agua PA-ACS hasta un litro.10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISOcon Agua PA-ACS. Conservar en frasco topacio.10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % envolumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO en Agua PA-ACS.10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l. Diluir convenientemente5 g de Almidón soluble RE en 1 l deAgua PA-ACS; contendrá 200 g/l de Sodio CloruroPA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Estasolución debe ser mantenida diez minutos en ebulliciónen el momento de su preparación.25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuaciónvalorar con Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.10.5. Cálculo.La cantidad de azúcar, expresada en azúcaresreductores contenida en la muestra analizada, seobtiene en la tabla adjunta en función del númeron’ - n de ml de tiosulfato utilizado.Siendo:n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato0,1 N, utilizados para la valoración de lamuestra.n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato0,1 N, utilizados en la prueba en blanco.Expresar el contenido en gramos de azúcaresreductores por litro, teniendo en cuenta las dilucionesefectuadas en el curso de la defecación delvolumen de la muestra analizada.10.6. Referencia.10.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyses des Vins. O. I. V. A4e 106-107 (defecacióny 126-127 (valoración).10.4. Procedimiento.10.4.1. Defecación plúmbica. Llevar 100 ml deron a un matraz aforado de 125 ml. Añadir agitando5 ml de solución saturada de Plomo II Acetato y 1 gde Calcio Carbonatado precipitado PA, agitar variasveces y dejar sedimentar, por lo menos quinceminutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 mlmás de Agua PA-ACS y filtrar.10.4.2. Valoración. Poner en el Erlenmeyer de300 ml 25 ml de la solución cuproalcalina y 25 mlde ron previamente defecado. Añadir unos gramosde Piedra Pómez granulos QP y llevar a ebullición,que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptandoa Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantenerexactamente durante diez minutos la ebullición.Enfriar inmediatamente bajo corriente de aguafría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduroal 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al151

2TABLA 10.IAzúcares reductores expresados en mg de glucosaml sodiotiosulfato 0,1NPrimera cifra decimal0 1 2 3 4 5 6 7 8 90 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,91 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,12 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,43 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,74 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,15 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,56 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,97 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,38 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,79 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,010 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,511 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,012 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,513 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,014 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,515 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,016 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,617 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,418 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,119 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,020 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,921 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,822 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,823 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,824 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,825 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

M11. PLOMO11.1. Principio.Determinación del plomo por A.A., previa mineralizaciónde la muestra.11.2. Material y aparatos.11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.11.2.2. Lámpara de plomo.11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.11.2.4. Baño de arena o placa calefactora conregulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150° C.11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1000 ml de capacidad.11.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS(v/v).11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,589 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.11.4. Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 mlde la muestra en la cápsula (11.2.3.), llevarla a evaporaciónhasta consistencia siruposa en baño dearena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de AcidoSulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en elbaño de arena o placa. Seguidamente introducir lacápsula en la mufla y mantenerla durante dos horasa 450° C, transcurrido dicho tiempo, sacarla ydejarla enfriar.Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendoesta operación hasta obtener cenizas blancas.Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Fe 2 O 3 ) es aceptado y no requiereun tratamiento posterior.Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas delavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.11.4.2. Construcción de la curva de patrón.Diluir alícuotas apropiadas de la solución patrón(11.3.4.) con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obteneruna curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.11.4.3. Determinación. Operar según las especificacionesdel aparato, usando llama de aire-acetileno.Medir las absorbancias de la muestra y patronesa 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.11.5. Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado enmg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de concentracióno dilución.11.6. Referencia.11.6.1. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”.Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.12. ZINC12.1. Principio.Determinación del zinc por A.A. previa mineralizaciónde la muestra.12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.12.2.2. Lámpara de zinc.12.2.3. Los utilizados para el plomo en 11.2.3.,11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.12.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO313193 Zinc solución patrónZn = 1,000 ± 0,002 g/l AA12.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,11.3.2. y 11.3.3.12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumennecesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) ydiluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra. Como en11.4.1.12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.) conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,2;1; 1,5 y 2 mg/l.12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.12.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos,hallar las concentraciones de Zn para la muestra,teniendo en cuenta el factor concentración odilución.153

15412.6. Referencia.12.6.1. H. E. Parker. “Atomic Absorption Newsletter”(1963),13.13. COBRE13.1. Principio.Determinación del cobre por A.A., mineralizaciónpor cenizas a < 450° C y concentración previa a lalectura con objeto de conseguir resultados suficientementeprecisos.13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.13.2.2. Lámpara de cobre.13.2.3. Los utilizados para el plomo, en 11.2.3.,11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.13.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO313193 Cobre solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/l AA13.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,11.3.2. y 11.3.3.13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de AcidoNítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litrocon Acido Nítrico del 1% (v/v).13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra. Como en11.4.1.13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) conAcido Nítrico del 1%, para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de Cu/l.13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.13.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidospara la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de cobre de la muestra.13.6. Referencia.13.6.1. H. E. Parker “Atomic Absorption Newsletter”(1963),13.13.6.2. F. Rousselet “Spectrophotometrie parabsorption atomique Boudin”. Edición París (1968),páginas 59-144.14. ARSENICO14.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida conuna mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza porespectrofotometría de absorción atómica, con generadorde hidruros.14.2. Material y aparatos.14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de0,1 g.14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml decapacidad.14.2.3. Pipetas de doble aforo.14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómicaequipado con sistema generador de hidruros.14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara dedescarga sin electrodos.14.2.8. Registrador gráfico.14.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrónAs = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de1000 ml.14.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO.14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO ydisolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlo hasta100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.14.3.8. Disolución al 1% de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta100 ml con Agua PA-ACS.14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO

My disolverlo con Agua PA-ACS hasta el volumen de100 ml.14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con AguaPA-ACS hasta un volumen de 100 ml.14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoIII Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al20% (14.3.9), neutralizar con Acido Sulfúrico al 20%(14.3.10), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1%(14.3.11.).14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico(14.3.12.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración0,1mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico(14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra. En un matrazKjeldahl, de 250 ml, introducir 10 ml de muestra con20 ml de Acido Nítrico (14.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfúrico(14.3.5.).Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5mlDejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en unmatraz de 50 ml la solución resultante.14.4.2. Preparación del blanco y patrones de trabajo.En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la soluciónde Arsénico (14.3.14.), y someterlo al mismo tratamientoque la muestra.Un ml de la solución contiene 10 nanogramos deArsénico.Preparar un blanco con todos los reactivos utilizadossiguiendo el tratamiento dado a la muestra.14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro. Encenderla fuente de alimentación de las lámparas dedescarga sin electrodos con el tiempo suficiente paraque se estabilice la energía de la lámpara.Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdocon las condiciones del aparato.Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcance dicha temperatura.Se ajustan las condiciones del generador de hidrurossegún las especificaciones del aparato.Ajustar el flujo de argón de acuerdo con las característicasdel aparato.Encender el registrador.14.4.4. Determinación. Las determinaciones de laconcentración de Arsénico se realizan por el métodode adición de patrones por medio de medidas duplicadasen el espectrofotómetro en las condicionesespecificadas en 14.4.3., añadiendo al matraz dereacción 3 ml de la solución 14.4.1., más 3 ml de lasolución 14.3.2. y 10 ml de la solución 14.3.8. Comopatrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.Lavar los matraces antes y después de cada uso,con Acido Clorhídrico (14.3.3.).Al construir la gráfica de adición hay que descontarel valor de absorbancia del blanco obtenido en lasmismas condiciones anteriores, pero añadiendo 3 mlde la solución blanco.En estas condiciones el límite de detección de latécnica es de 5 ng.15. SACAROSA15.1. Principio.La sacarosa se determina por la diferencia de lospoderes reductores antes y después de la hidrólisisclorhídrica del líquido procedente de la defecación delron.15.2. Reactivos131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO15.2.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO15.2.2. Sodio Hidróxido 12 N. Diluir convenientementeSodio Hidróxido lentejasPA-ACS-ISO con Agua PA-ACS15.3 Procedimiento.Poner en dos matraces Erlenmeyer, de 200 mlcada uno, el mismo volumen del líquido defecadosegún el método oficial número 10. Añadir a cadamatraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, por cada 10 ml de líquido defecado.En uno de los matraces añadir inmediatamente0,3 ml de Sodio Hidróxido 12 N, por cada 10 ml delíquido defecado, procediendo a la valoración de losazúcares reductores según el método oficial número10.Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizara baño de agua hirviendo durante 3 minutos. Añadirentonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido12 N que al otro matraz y valorar como en el casoanterior.15.4. Cálculo.La diferencia entre las cantidades de azúcaresreductores encontrada en los resultados de estas dosvaloraciones, multiplicada por 0,95 de la riqueza ensacarosa de la muestra de estudio.Este resultado se expresa en g/l de ron teniendopresentes las diluciones efectuadas eventualmente enel curso de la defecación y del volumen de la muestrade ron que se sometió a la defecación.15.5. Referencia.15.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analysesdes Vins. O. I. V. AS, 4, 1969.155

156Aguardientescompuestos:Ginebra

MMETODOS DE ANALISIS1. OBTENCION DEL DESTILADO1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones determinadas.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad,de fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm delongitud) o similar.1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml decapacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS1.3.1. Agua PA-ACS.1.4. Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua a20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiandoel interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las paredesdel matraz.Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz de destilación lavando tres veces consecutivasel matraz aforado de 200 ml con 20 ml de AguaPA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de lavadoal matraz de destilación. Cuando se trate de bebidassiruposas, por su gran contenido en azúcar, ellavado debe efectuarse consecutivamente con tresproporciones de 50 ml de Agua PA-ACS.Proceder a la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para facilitarla ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespumanteinerte (como silicona).El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale por la pared sinsalpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fríaa menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado deuna alargadera que penetre, por lo menos, 4-6 cmen el cuello del matraz.Cuando se hayan recogido, aproximadamente,190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentrodel mismo baño, enrasar con Agua PA-ACSmediante pipeta.Tapar el matraz e invertirlo varias veces parahomogeneizar su contenido antes de proceder a ladeterminación del etanol.1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. Elprocedimiento anteriormente descrito difiere únicamenteen que la muestra se mide en matraz aforadode 100 ml, que se lava varias veces con AguaPA-ACS hasta alcanzar un volumen de, aproximadamente,230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.1.5. Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarseen ambos casos como sigue:Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al10% en volumen cinco veces consecutivas. Determinaren la última destilación el título alcoholimétricodel destilado, que no debe ser menor del 9,9% envolumen de etanol.1.5.2. La destilación debe efectuarse procurandoque el flujo del destilado sea uniforme.1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre cuarenta y cinco y noventaminutos.1.6. Referencia.1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE33-112-75.2. FURFUROL(Furfuraldehído)2.1. Principio.El furfurol se combina con la anilina en presenciadel ácido acético para dar un compuesto de colorrojo.2.2. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO141156 Anilina PRS2.2.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.2.2.2. Anilina PRS recientemente destilada. Aldestilar debe pasar, como mínimo, un 95% entre183°C y 185°C.2.3. Procedimiento.Poner 10 ml de destilación de ginebra (obtenidosegún el método oficial número 1) o la ginebradirectamente, si no contiene ni extracto ni color, enun tubo de tapón esmerilado. Añadir 0,5 ml de AnilinaPRS y 2 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Agitar.2.4. Cálculo.Si antes de veinte minutos no aparece ningunacoloración rosa salmón, la muestra se consideraexenta de furfurol.157

1582.5. Referencia.2.5.1. Codex Oenologique International. OIV.3. EXTRACTO SECO3.1. Principio.Evaporación de la muestra a 105°C y pesadaposterior del residuo.3.2. Material y aparatos.3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondoplano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm dealtura.3.2.3. Desecador de vidrio que contenga141058 Acido Sulfúrico 95-98% (USP-NF,BP) PRS-CODEX o 211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indicadorQP.3.2.4. Baño de agua.3.2.5. Balanza analítica.3.3. Procedimiento.Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar asequedad, en cápsulas correspondientes previamentedesecadas y taradas, en baño de agua hirvientey mantener la estufa a 105°C durante treintaminutos.Dejar enfriar las cápsulas en el interior del desecadory una vez frías pesar en la balanza.3.4. Cálculo.El valor del extracto total de la muestra, en gramospor litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:Extracto total (g/l) = (M - m) x 40Siendo:M = Peso en g de la cápsula con el extractoseco.m = Peso en g de la cápsula vacía.3.5. Referencia.3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE33-106-74.4. BASES NITROGENADAS4.1. Principio.Fijación del amoníaco y las bases nitrogenadasmediante ácido fosfórico, seguida de una primeradestilación. Liberación del amoníaco y las basesnitrogenadas con sodio hidróxido, segunda destilacióny posterior valoración con ácido clorhídrico delsegundo destilado.El límite de detección del método es de 1 mg/l.4.2. Material y aparatos.4.2.1. Matraz de 200 ml de capacidad.4.2.2. Según (1.2.2.), (1.2.3.), (1.2.4.) y (1.2.5.).4.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS171688 Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE4.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA.4.3.2. Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE.4.3.3. Solución de Acido Clorhídrico 0,01N.Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PA-ISO en Agua PA-ACS.4.3.4. Solución de Rojo de Metilo (C.I. 13020)RE-ACS, disolver con 50 ml de Etanol absoluto PAal 90% de volumen.4.4. Procedimiento.En un matraz de 200 ml, introducir 50 ml demuestra, adicionar 40 ml de Agua PA-ACS y dosgotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar ydesechar los primeros 80 ml.Enfriar el matraz y al residuo frío adicionar 2 mlde Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE (o 20 mlde solución de sodio hidróxido al 1%, si hay proyecciones).Destilar de nuevo recogiendo alrededorde 7 ml de destilado en un tubo de ensayo en elque previamente se han introducido 2 ml de AguaPA-ACS y una gota de solución de Rojo de Metilo,procurando que el destilado caiga en el fondo deltubo con la ayuda de una alargadera. Valorar acontinuación con una solución de Acido Clorhídrico0,01N hasta que el indicador vire a rojo.4.5. Cálculo.Nitrógeno (mg de nitrógeno/litro) = 2,8 n.Siendo:n = volumen, en ml, de solución de ácido clorhídrico,0,01N gastados en la valoración.4.6. Referencia.4.6.1. Codex Oenologique International. OIV,1978, pág. 17.5. ALCOHOLES SUPERIORES5.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de losalcoholes al etanol, por cromatografía de gases.5.2. Material y aparatos.5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado condetector de ionización de llama.

M5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 mde longitud de 1/8” de diámetro interno rellena deCarbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W80-100 mallas, lavado a los ácidos.5.2.3. Microjeringas de 5 µl.5.3. Reactivos.5.3.1. Patrones cromatográficos:353851 2-Butanol CG351885 1-Propanol CG354330 iso-Butanol CG131082 1-Butanol PA-ACS-ISO354539 2-Metil-1-Butanol CG351079 3-Metil-1-Butanol CG352516 4-Metil-2-Pentanol CG5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.5.4. Procedimiento.5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condicionescromatográficas orientativas son : Gas portadornitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno85°C, temperatura del inyector y del detector 150°C.5.4.2. Calibrado.5.4.2.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l en Etanolde 40° de 4-Metil-2-Pentanol.5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una soluciónen alcohol de 40° en las proporciones que se indicanen la tabla 1.5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de lasolución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml dela solución patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1µlen el cromatógrafo.5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestrallevada a 40° se le añade 1 ml de patrón interno(5.4.2.1.) e inyectar un µl en las mismas condicionesen que se hizo para el calibrado.5.5. Cálculo.Una vez identificados los picos por sus retencionesrelativas al patrón interno se calculan los factoresde respuesta para cada uno de ellos y las concentracionesen la muestra problema aplicando lasfórmulas:ApFactor de respuesta (Fr) = Ci x ––––AiAimConcentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x fApmSiendo:Ci = concentración del compuesto en lasolución patrón.Ap = área del patrón interno en la soluciónpatrón.Ai = área del compuesto en la solución patrón.Aim = área del compuesto en la muestraproblema.Apm = área del patrón interno en la muestraproblema.f = factor de dilución de la muestra.El contenido en alcoholes superiores vendrádado por la suma de los valores individuales obtenidosde cada uno de ellos y se expresará enmg/100 ml de alcohol absoluto.5.6. Referencia.5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists1980, 9075.TABLA 1––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––Compuesto Concentración (mg/l)––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––2-Butanol 101-Propanol 1252-Metil-1-Propanol 1751- Butanol 152-Metil-1-Butanol 1003-Metil-1-Butanol 300––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––6. METANOL(Alcohol Metílico)6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del metanolpor cromatografía gaseosa.6.2. Material y aparatos.Como en 5.2.6.3. Reactivos6.3.1. Metanol pureza cromatográfica6.3.2. 4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)6.3.3. Etanol pureza cromatográfica6.4. Procedimiento.6.4.1. Condiciones cromatográficas. Como en5.4.1.6.4.2. Calibrado.6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una soluciónde Metanol pureza cromatográfica a 40°C, de concentraciónsimilar a la esperada en la muestra.6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de lasolución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml dela solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se inyecta1 µl en el cromatógrafo.6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.159

1606.5. Cálculo.Como en 5.5.6.6. Referencia.6.6.1. Association of Official Agricultural Chemists1980, 9075.7. GRADO ALCOHOLICO7.1. Principio.Se determina por destilación del producto ymedida de la densidad del destilado por areometría.7.2. Material y aparatos.7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1°C ded 20/20 debidamente contrastado.7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diámetrointerior y 320 mm de altura.7.2.5. Baño termostático a 20°C.7.3 Procedimiento.7.3.1. Obtención del destilado. Según métodooficial número 1.7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar ysecar el alcohómetro antes de su empleo.Echar el destilado en la probeta, inclinar a unos45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar laprobeta con la palma de la mano, e invertirla tres ocuatro veces para igualar las temperaturas de laprobeta y del líquido.Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta ydestilado, alcance en el baño termostatizado latemperatura de 20°C.Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba aabajo cinco o seis veces, de manera que alcance lamisma temperatura y que se distribuya cualquiercambio de temperaturas en todo el líquido. Mantenerel bulbo del alcohómetro en el líquido, secar elvástago, dejarlo en reposo de modo que sólo unaspocas décimas de grados estén mojadas.Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojojusto debajo del plano de la superficie del líquido,levantar lentamente la cabeza manteniendo la visualperpendicular al alcohómetro, hasta que la superficievaríe de elipse a una línea recta.Anotar el punto en que esta línea interseccionacon la escala del alcohómetro, siendo ésta la lecturadel alcohómetro.Levantarlo ligeramente por encima de dicha lecturay dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en elalcohómetro y en el termómetro, comprobando asílas primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohómetrocon aproximación de 0,05° y la del termómetrocon 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertirla probeta con la muestra varias veces (el termómetroqueda en su sitio), para que se equilibre térmicamentetodo el conjunto. Volver a atemperar el alcohómetro,secar el vástago y realizar nuevas lecturasen el alcohómetro y en el termómetro. Los valorescalculados son válidos si tienen aproximación de0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lecturasadicionales y calcular la media.7.4. Cálculo.El grado alcohólico real es el leído en el destiladosegún 7.3.1.Si en la obtención del destilado, 100 ml demuestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida,debe ser multiplicada por 2.7.5. Referencia.7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.Edición 1980-9015-98. SACAROSA8.1. Principio.La sacarosa se determina por la diferencia de lospoderes reductores antes y después de la hidrólisisclorhídrica del líquido procedente de la defecaciónde la ginebra.8.2. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO8.2.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.8.2.2. Sodio Hidróxido 12N. Diluir convenientementeSodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS8.3. Procedimiento.Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 mlcada uno, el mismo volumen del líquido defecadosegún el método oficial número 10. Añadir a cadamatraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO por cada 10 ml de líquido defecado.En uno de los matraces, añadir inmediatamente0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N, por cada 10 ml delíquido defecado, procediendo a la valoración de losazúcares reductores, según el método oficial número10.Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizara baño de agua hirviendo durante tres minutos.Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido12N que al otro matraz y valorar como en elcaso anterior.8.4. Cálculo.La diferencia entre las cantidades de azúcaresreductores encontrada en los resultados de estasdos valoraciones, multiplicadas por 0,95, da lariqueza en sacarosa de la muestra de estudio.

MEste resultado se expresa en g/l de ginebra,teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmenteen el curso de la defecación y del volumende la muestra de ginebra que se sometió a ladefecación.8.5. Referencia.8.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analysesdes Vins. OIV, A5, 4. 1968.9. ACIDEZ TOTAL9.1. Principio.La acidez total de la ginebra se considera comola suma de los ácidos titulables cuando se lleva laginebra a pH=7 por adición de un licor alcalino valorado.El ácido carbónico no se considera comprendidoen la acidez total.El gas carbónico se elimina previamente de laginebra por agitación en frío y con vacío parcial.9.2. Material y aparatos.9.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.9.2.2. Agitador magnético9.2.3. Kitasato de un litro.9.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01Nrecientemente preparada.9.4. Procedimiento.Poner 150 ml de ginebra en un Kitasato de 1 l decapacidad, conectar al vacío agitando al mismotiempo el matraz. El desprendimiento de CO 2 seaprecia a los pocos momentos. Observar atentamenteel momento en que dejan de desprenderselas burbujas, desconectar del vacío.Tomar 100 ml de la ginebra sin CO 2 y llevar a unvaso de unos 250 ml de capacidad, introducir elelectrodo del vidrio en la ginebra.Poner en marcha el agitador procurando que nose formen burbujas y añadir desde bureta soluciónde Sodio Hidróxido (9.3.1.) a la ginebra hasta que laaguja del potenciómetro marque pH=7, manteniendoel agitador en marcha durante la operación, queno debe durar más de cinco minutos.9.5. Cálculo.Calcular la acidez total expresada en meq/l con unaaproximación de 0,1 meq/l o en mg de ácido acético.Acidez total = 6 v mg ácido acético /lv = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.9.6. Referencias.9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analysesdes Vins. OIV, A 10, 1 3, 1969.9.6.2. Jaulmes, P.: “La mesure de l’acidité totaldes Vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,556, 1955.10. MATERIAS REDUCTORAS(Azúcares reductores)10.1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reductorasdistintas de los azúcares por defecación yposterior valoración basada en la acción reductorade los azúcares sobre una solución cupro-alcalina.10.2. Material y aparatos.10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante dereflujo.10.2.2. Material necesario para volumetría.10.2.3. Baño de agua.10.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121212 Calcio Carbonato precipitado PA131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO211835 Piedra Pómez gránulos QP131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato(aproximadamente saturada). Añadir a 250 g dePlomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolucióncompleta.10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver porseparado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de AcidoCítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar lasolución de Cobre Sulfato y completar el volumencon Agua PA-ACS hasta 1 l.10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO enAgua PA-ACS. Conservar el frasco en topacio.10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico 25% envolumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO en Agua PA-ACS.161

10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l; contendrá200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegurarsu conservación. Esta solución debe ser mantenidadiez minutos en ebullición en el momento desu preparación.10.4. Procedimiento.10.4.1. Defecación plúmbica.Llevar 100 ml de ginebra a un matraz aforado de125 ml. Añadir agitando 5 ml de solución saturadade Plomo II Acetato 3-anhidro PA-ACS-ISO y 1 g deCalcio Carbonato precipitado PA, agitar variasveces y dejar sedimentar, por lo menos quinceminutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 mlmás de agua y filtrar.10.4.2. Valoración.Poner en el Erlenmeyer de 300 ml 25 ml de la solucióncupro-alcalina y 25 ml de ginebra previamentedefecado. Añadir unos gramos de Piedra PómezQP y llevar a ebullición, que debe ser alcanzada endos minutos, adaptando el Erlenmeyer al refrigerantede reflujo y mantener exactamente durante diezminutos la ebullición.Enfriar inmediatamente bajo corriente de aguafría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduroal 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuaciónvalorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.10.5. Cálculo.La cantidad de azúcar, expresada en azúcaresreductores contenida en la muestra analizada, seobtiene en la tabla adjunta en función del númeron’-n de ml de tiosulfato utilizado.Siendo:n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato0,1 mol/l (0,1N) utilizados en la valoraciónde la muestra.n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato0,1 mol/l (0,1N) utilizados para la pruebaen blanco.Expresar el contenido en gramos de azúcaresreductores por litro, teniendo en cuenta las dilucionesefectuadas en el curso de la defecación delvolumen de la muestra analizada.10.6. Referencia.10.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyses des Vins. OIV, A4e, 106-107 (defecación)y 126-127 (valoración).ml sodiotiosulfato0,1NPrimera cifra decimal0 1 2 3 4 5 6 7 8 91620 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,91 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,12 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,43 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,74 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,15 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,56 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,97 23,2 23 5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,38 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,79 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,010 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,511 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,012 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,513 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,014 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,515 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,016 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,617 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,418 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,119 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,020 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,921 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,822 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,823 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,824 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,825 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

M11. PLOMO11.1. PrincipioDeterminación del plomo A.A., previa mineralizaciónde la muestra.11.2. Material y aparatos.11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.11.2.2. Lámpara de plomo.11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.11.2.4. Baño de arena o placa calefactora conregulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150°C.11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml decapacidad.11.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000ml con Acido Nítrico al 1%.11.4 Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 mlde la muestra en la cápsula (11.2.3.) llevarla a evaporaciónhasta consistencia siruposa en baño dearena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de AcidoSulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en elbaño de arena o placa. Seguidamente introducir lacápsula en la mufla y mantenerla durante dos horasa 450°C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarlaenfriar.Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendoesta operación hasta obtener cenizas blancas.Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Fe 2 O 3 ) es aceptado y no requiereun tratamiento posterior.Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas dellavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.11.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluiralícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curvade concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.11.4.3. Determinación. Operar según las especificacionesdel aparato, usando llama de aire-acetileno.Medir las absorbancias de la muestra y patronesa 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.11.5. Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado enmg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuente el factor de concentracióno dilución.11.6. Referencia.11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.12. ZINC12.1. Principio.Determinación del zinc por A.A. previa mineralizaciónde la muestra.12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.12.2.2. Lámpara de zinc.12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),(11.2.4.) (11.2.5.) y (11.2.6.)12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrónZn = 1,000 ± 0,002 g/l AA12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.)12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumennecesario de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro conAcido Nítrico del 1 % (v/v).12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra. Como en(11.4.1.).12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;1; 1,5 y 2 mg/l.12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.12.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos,hallar las concentraciones de Zn para la muestra,teniendo en cuenta el factor concentración odilución.163

16412.6. Referencia.12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter(1963), 13.13. COBRE13.1. Principio.Determinación del cobre por A.A., mineralizaciónpor cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a lalectura con objeto de conseguir resultados suficientementeprecisos.13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.13.2.2. Lámpara de cobre.13.2.3. Los utilizados para el plomo, en (11.2.3.),(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).13.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/l AA13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.)13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario deHNO 3 (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 %(v/v).13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra. Como en(11.4.1.).13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.), conAcido Nítrico del 1% para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de Cobre/l.13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.13.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidospara la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de cobre de la muestra.13.6 Referencias.13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter(1963),13”13.6.2 F. Rousselet: “Spectrophotometrie parabsorption atomique Boudin”. Ed Paris (1968), pág.59-14414. ARSENICO14.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida conuna mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza porespectrofotometría de absorción atómica, congenerador de hidruros.14.2. Material y aparatos.14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de0,1 g.14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml decapacidad.14.2.3. Pipetas de doble aforo.14.2.4. Matraces Kjeldahl de 250 ml.14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómicaequipado con sistema generador de hidruros.14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara dedescarga sin electrodos.14.2.8. Registrador gráfico.14.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrónAs = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml.14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISOy disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlohasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.14.3.8. Disolución al 1 % de Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetra-acético PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-

MISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumende 100 ml.14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(14.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoIII Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxidoal 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúricoal 20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico1% (14.3.11.).14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración10 mg/l. Pipetear 1 ml de la soluciónpatrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforadode 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución deArsénico (14.3.13.), en un matraz aforado de100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.condiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendoal matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solución(14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,20 y 50 ng de Arsénico.Lavar los matraces antes y después de cadauso, con Acido Clorhídrico (14.3.3.).Al construir la gráfica de adición hay que descontarel valor de absorbancia del blanco obtenidoen las mismas condiciones anteriores, pero añadiendo3 ml de la solución blanco.En estas condiciones el límite de detección de latécnica es de 5 ng.14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra. En un matrazKjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO.Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5 ml.Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en unmatraz de 50 ml la solución resultante.14.4.2. Preparación del blanco y patrones detrabajo. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml de lasolución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mismotratamiento que la muestra.1 ml de la solución contiene 10 nanogramos deArsénico.Preparar un blanco con todos los reactivos utilizadossiguiendo el tratamiento dado a la muestra.14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiempo suficientepara que se estabilice la energía de la lámpara.Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla deacuerdo con las condiciones del aparato.Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcance dicha temperatura.Se ajustan las condiciones del generador dehidruros según las especificaciones del aparato.Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con lascaracterísticas del aparato.Encender el registrador.14.4.4. Determinación.- Las determinaciones dela concentración de Arsénico se realizan por elmétodo de adición de patrones, por medio demedidas duplicadas en el espectrofotómetro en las165

166Aguardientescompuestos:Anís

M1. OBTENCION DEL DESTILADO1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones determinadas.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidadde fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm delongitud) o similar.1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml decapacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS1.3.1. Agua PA-ACS1.4. Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua a20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiandoel interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las paredesdel matraz.Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz de destilación, lavando tres veces consecutivasel matraz aforado de 200 ml con 20 ml deAgua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas dellavado al matraz de destilación. Cuando se trate debebidas siruposas, por su gran contenido en azúcar,el lavado debe efectuarse consecutivamentecon tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS.Proceder a la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para facilitarla ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespumanteinerte (como silicona).El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale sin salpicadurapor la pared del matraz, que debe estar dentro deun baño de hielo o agua fría, a menos de 1°C.El refrigerante debe ir dotado de una alargaderaque penetra por lo menos 4-5 cm en el cuello delmatraz.Cuando se hayan recogido aproximadamente190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C.Cuando se alcance dicha temperatura, dentrodel mismo baño, enrasar con Agua PA-ACSmediante pipeta.Tapar el matraz e invertirlo varias veces parahomogeneizar su contenido antes de proceder a ladeterminación del etanol.1.4.2. Muestras con más del 60% del Etanol.El procedimiento anteriormente descrito difiere únicamenteen que la muestra se mide en matraz aforadode 100 ml, que se lava varias veces con AguaPA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximadamente230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.1.5. Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarseen ambos caso como sigue: Destilar 200 mlde una mezcla hidroalcohólica al 10 por 100 envolumen cinco veces sucesivas. Determinar en laúltima destilación el título alcohométrico del destilado,que no debe ser menor del 9,9% en volumen deetanol.1.5.2. La destilación debe efectuarse procurandoque el flujo del destilado sea uniforme.1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre 45 y 90 minutos.1.5.4. El destilado podrá tener aspecto lechosocomo consecuencia de la emulsión de los aceitesesenciales.1.6. Referencias.1. Métodos Oficiales de análisis del ron, ginebra ywhisky.2. PESO ESPECIFICO DEL ACEITEESENCIAL NATURAL(En materia prima)2.1. Principio.Se basa en la determinación de la densidad relativadel aceite esencial respecto al agua a la mismatemperatura.Se determinará esta densidad relativa a 25°Cpara evitar la posible solidificación de la muestra.2.2. Material y aparatos.2.2.1. Baño de agua termostatizado a 25 ± 0,1°C.2.2.2. Picnómetro de 50 ml, según figura adjunta(fig. 2.1.).2.2.3. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado endécimas de grado.2.2.4. Tubo capilar.2.2.5. Balanza analítica.2.3. Procedimiento.2.3.1. Llenar completamente el picnómetro conagua recientemente destilada, tapar y colocar en2.2.1., de forma que el nivel del agua del baño estéligeramente por encima del nivel de enrase del picnómetro.167

2.3.2. Después de treinta minutos quitar el tapóny con 2.2.4. ajustar el nivel del agua hasta que laparte inferior del menisco sea tangente con la señalde enrase del picnómetro.2.3.3. Sacar el picnómetro del baño. Con unpequeño rollo del papel de filtro secar el interior delcuello del picnómetro y el tapón. Introducirlo enbaño a temperatura ambiente durante quince minutospara acelerar la atemperación del líquido. Pasadoeste tiempo sacar el picnómetro del baño,secarlo cuidadosamente, dejarlo otros quince minutosa temperatura ambiente y pesar.2.3.4. Vaciar el picnómetro, enjuagar con acetonay secar completamente con corriente de aire.Dejar quince minutos a temperatura ambiente,tapar y pesar.Según lo descrito:Pa = Peso aparente del agua = Peso del picnómetrolleno - Peso del picnómetro vacío.2.3.5. Del mismo modo que con el agua, se procedecon el líquido problema, siendo:Pw = Peso del picnómetro lleno - Peso del picnómetrovacío.2.4. Cálculos:PaPeso específico : P 25/25 = –––––Pw2.5. Observaciones.Para evitar la solidificación de la muestra, esconveniente que la temperatura de la habitaciónesté próxima a los 25° C.2.6. Referencias.1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 13ªedición, 1984 : 9.020-9.022.3. PUNTO DE FUSION DEL ACEITEESENCIAL NATURAL(En materia prima)3.1. Principio.Observación, con un sistema adecuado, de latemperatura a la que se produce la fusión del aceiteesencial, previamente congelado. Como el aceiteesencial no es un compuesto puro, no tendrá puntode fusión fijo, sino que fundirá en un rango determinadodesde que se observan los primeros síntomasen los cristales hasta que la muestra se vuelve completamentelíquida.168Figura 2.l3.2. Material y aparatos.3.2.1. Agitador.3.2.2. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado endécimas de grado.3.2.3. Tubos capilares de vidrio.3.2.4. Lupa o lente de aumento.3.2.5. Vaso de precipitado de 1.000 ml, forma baja.3.3. Procedimiento.Se dispone de un sencillo sistema de medidaconsistente en un agitador magnético con placa decalefacción variable, un vaso de precipitado de600 ml, un termómetro y una lupa.Preparar un tubo capilar cerrado en su extremo,donde se hace llegar una gota del aceite esencialcon la ayuda de otro tubo capilar más fino.Introducir la punta del tubo capilar en un baño dehielo, durante dos horas, para que se congele.Llevar el vaso aproximadamente a la mitad conagua destilada e introducir la punta del capilar y eltermómetro de forma que queden al menos 30 milímetrospor debajo de la superficie.Empezando 8-10°C por debajo del punto defusión de la muestra, calentar suavemente paraincrementar la temperatura del baño 0,5°C/minuto,aproximadamente, agitando simultáneamente elagua del baño con ayuda del agitador.Anotar la temperatura a la que se produce lafusión completa de la muestra, que se observarácon la ayuda de una lupa o lente de aumento.

M3.4. Resultado.El punto de fusión del aceite esencial será lamedia aritmética de tres determinaciones sucesivasque deberán coincidir en un rango de 0,5°C.3.5. Referencias.1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ªedición, 1984: 28.014.En el caso de muestras de más de 60% dealcohol, sólo se toman 100 ml que se diluyen a200 ml por lo cual, hay que multiplicar la lectura pordos.4.5. Referencias.1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ªedición, 1984 : 9.023-9.024.4. GRADO ALCOHOLICO4.1. Principio.Destilación del producto y posterior medida de ladensidad del destilado por areometría.4.2. Material y aparatos.4.2.1. Aparato de destilación como en el MétodoOficial número 1.4.2.2. Alcohómetro graduado en décimas degrado de d 20/20, debidamente contrastado.4.2.3. Termómetro graduado en décimas de gradocentígrado.4.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diámetrointerior y 320 mm de altura.4.2.5. Baño termostático a 20°C.4.3. Procedimiento.4.3.1. Obtención del destilado: Según MétodoOficial número 1.4.3.2. Determinación areométrica:Limpiar y secar el alcohómetro antes de suempleo.Verter el destilado debidamente homogeneizadoen la probeta.Introducir el alcohómetro y el termómetro en ellíquido.Esperar veinte minutos para que el termómetro,el alcohómetro y el destilado adquieran la temperaturadel baño termostático.Alcanzada esta temperatura, sacar el termómetro,secar el vástago del alcohómetro y dejarlo introduciren el destilado con un ligero movimiento derotación.Anotar el grado alcohólico leído.Repetir estas operaciones varias veces. Las lecturasobtenidas son válidas si tienen aproximaciónde 0,1 grados alcohólicos. Si no fuera así, realizarlecturas adicionales y calcular la media.4.4. Cálculos.El grado alcohólico es la lectura obtenida en4.3.2., expresada en grados y décimas de grado dealcohol.Si en la obtención del destilado 100 ml de muestrase destilaron a 200 ml, la lectura hay que multiplicarlapor dos.Nota: No quedando claro el párrafo anterior,interpretamos:5. AZUCARES TOTALES5.1. Principio.Dilución previa de la muestra, inversión y posteriorvaloración basada en la acción reductora de losazúcares sobre una solución cuproalcalina.5.2. Material y aparatos.5.2.1. Erlenmeyer de 250 ml con boca esmerilada.5.2.2. Refrigerante de reflujo de 30 cm de longitudútil.5.2.3. Material necesario para volumetría.5.2.4. Baño de agua con termostato.5.3. Reactivos.131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS141270 Cobre II Sulfato 5-hidrato(USP, BP) PRS-CODEX171327 Fenolftaleína solución 1% RE131542 Potasio Yoduro PA-ISO121647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV5.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.5.3.2. Solución de Sodio Hidróxido 12N, preparadaa partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS.5.3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.5.3.4. Solución cuproalcalina:Disolver por separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato (USP,BP) PRS-CODEX (SO 4 Cu.5H 2 O) en100 ml de Agua PA-ACS, 50 g de Acido Cítrico1-hidrato PA-ACS-ISO en 300 ml de Agua PA-ACSy 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA en300-400 ml de agua caliente. Mezclar cuidadosamentelas soluciones de Acido Cítrico y Sodio Carbonato.Añadir enseguida la solución de Cobre Sulfatoy llevar a un litro.5.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30% (p/v),preparada a partir de Potasio Yoduro PA-ISO yAgua PA-ACS.169

170Conservar en frasco topacio. Es aconsejable nopreparar más de lo que se vaya a consumir diariamente.5.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25% envolumen, preparada a partir de Acido Sulfúrico 96%PA-ISO.5.3.7. Engrudo de almidón de 5 g/l. Para prepararesta solución mantenerla en ebullición durantediez minutos. Añadir 200 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO por litro para asegurar su conservación.5.3.8. Solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l(0,1N) SV.5.4. Procedimiento.Pipetear 10 ml de anís ( o el volumen adecuado enfunción del contenido en azúcares) en un matraz de500 ml, enrasándose con Agua PA-ACS (soluciónA).En un matraz de 200 ml se pipetean 25 ml de lasolución A, enrasándose con Agua PA-ACS.Se realiza la inversión de la forma siguiente:En un matraz de 50 ml pipetear 20 ml de soluciónB.Se añaden 3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, llevándose durante cinco minutos a unbaño a 75°C.Se saca y se deja enfriar.Se añade Fenolftaleína solución 1% RE y se neutralizacon solución de Sodio Hidróxido 12N hastacerca del punto de viraje y posteriormente con soluciónde Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV hastaviraje. Se enrasa con Agua PA-ACS y se procedeal análisis de los azúcares reductores totales(solución M).En un Erlenmeyer se ponen 25 ml de la solucióncuproalcalina y 25 ml de la solución M, sesomete a ebullición con refrigerante de reflujomanteniendo la ebullición diez minutos; se enfríarápidamente, se añaden 2 ml de almidón, 10 mlde solución de Potasio Yoduro y 25 ml de AcidoSulfúrico al 25%, valorándose inmediatamentecon solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N)SV. Se repite la valoración con un blanco, sustituyendolos 25 ml de solución M por 25 ml de AguaPA-ACS.5.5. Cálculos.Sea D la diferencia entre lo gastado por elblanco y lo gastado por la muestra.La concentración de azúcares totales en lamuestra se obtiene a partir del valor D en la tabla,interpolando en cada caso necesario y multiplicandoel valor obtenido por 40 (factor de dilución).Concentración azúcares totalesgramos/litros = Valor obtenido en tabla x 40.5.6. Observaciones.5.6.1. En el caso de haber tomado un volumendistinto de anís, tener en cuenta para los cálculosel factor de dilución.5.7. Referencias1. Recueil des méthodes internationales d'analysedes vins OIV A4-126-127.––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––D = mlde tiosulfatoMg Diferencia––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––1 2,4 2,42 4,8 2,43 7,2 2,54 9,7 2,55 12,2 2,56 14,7 2,67 17,2 2,68 19,8 2,69 22,4 2,610 25,0 2,611 27,6 2,712 30,3 2,713 33,0 2,714 35,7 2,715 38,5 2,816 41,3 2,917 44,2 2,918 47,1 2,919 50,0 3,020 53,0 3,021 56,0 3,022 59,1 3,123 62,2 ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––6. ANETOL6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación delanetol por cromatografía de gases.6.2 Material y aparatos.6.2.1. Cromatógrafo de gases equipado condetector de ionización de llama.6.2.2. Columna de acero inoxidable de 3 m delongitud de 1/8 pulgadas de diámetro interno,rellena de SE 52 al 4% sobre Chromosob. AW.DMCS, de 100-120 mallas.6.2.3. Microjeringa de 1 µl.6.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA142961 L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEXTrans-anetol

M6.3.1. Trans-anetol patrón con un contenido encis-anetol menor de 0,5%.6.3.2. L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX6.3.3. Etanol absoluto PA.6.4. Procedimiento.6.4.1. Curva de calibrado.6.4.1.1. Patrón interno.Pesar 0,25 g de L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX y llevar a un matraz aforado de100 ml, disolver en 40 ml de Etanol absoluto PA yenrasar con Agua PA-ACS.6.4.1.2. Solución patrón.Pesar 1 g de anetol y disolver en 400 ml de Etanolabsoluto PA, enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS.Ese patrón debe estar en el momento de su utilizaciónrecientemente preparado.6.4.1.3. Solución de calibrado. A partir de la solución6.4.1.2. preparar soluciones que contengan0,1; 0,25; 0,50; 0,75 y 1 g/l en alcohol de 40°C.A 100 ml de estas soluciones se le añade 5 mlde la solución 6.4.1.1.Estas soluciones se inyectan en el cromatógrafoobteniendo la curva de calibrado, representándose:Area del Patrón––––––––––––––––––––– frente a concentraciones.Area del patrón interno6.4.2. Condiciones cromatográficas aproximadas.Temperatura del horno: 130°C.Temperatura del inyector: 220°C.Temperatura del detector: 220°C.6.4.3. Preparación de la muestra:Tomar 100 ml del destilado, según método 1.Añadir 5 ml de patrón interno e inyectar en el cromatógrafo.6.5. Cálculos.Aim6.5.1. Calcular la relación –––– y llevar a la curvaApmde calibrado, obteniéndose el valor de la concentraciónde anetol en la muestra problema.6.5.2. También se puede emplear un patrón deconcentración fija de anetol, calculándose el factorde respuesta y la concentración de la muestra aplicandolas fórmulas siguientes:ApFr = Ci ––––AiAimConcentración de la muestra g/l = Fr x –––– x fApmSiendo :Ci = Concentración del anetol en la soluciónpatrón, que será similar a la esperada enla muestra problema.Ap = Area del patrón interno en la soluciónpatrón.Ai = Area del anetol en la solución patrón.Aim = Area del anetol en la muestra problema.Apm = Area del patrón interno en la muestraproblema.F = Factor de dilución de la muestra.Se debe realizar el cálculo de la concentraciónen anetol de la muestra con un patrón de riquezaaproximada a la esperada. En caso de no conocerseésta, se debe efectuar una inyección previa parafijar el nivel de anetol refiriéndola al patrón de 1g/l yuna vez evaluado se inyectará un patrón, si fuesenecesario, de concentración próxima a la de lamuestra, obteniendo el resultado final por referenciaa este segundo patrón.6.6. Referencias.1. José Ramón García Hierro y Gertrudis MarínEsteban. Informe del Laboratorio Arbitral de la SubdirecciónGeneral de Laboratorios Agrarios.7. METANOL7.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación delmetanol por cromatografía gaseosa.7.2. Material y aparatos.7.2.1. Cromatógrafo de gases equipado condetector de ionización de llama.7.2.2. Columna cromatográfica.Columna de 4 m de longitud, de 1/8 pulgadasde diámetro interno, rellena de Carbowax 1500, al15% sobre Chromosorb W, 80-100 mallas, lavada alos ácidos.7.2.3. Microjeringas de 1 µl.7.3. Reactivos.7.3.1. Metanol pureza cromatográfica7.3.2. 352516 4-Metil-2-Pentanol CG7.3.3. Etanol pureza cromatográfica7.4. Procedimiento.7.4.1. Obtención del destilado como en el métodooficial número 1.7.4.2. Condiciones cromatográficas:Las condiciones cromatográficas orientativasson: Gas portador; nitrógeno, 20 ml/min, temperaturadel horno, 85°C; temperatura del inyector y deldetector, 150°C.171

7.4.3. Calibrado:7.4.3.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l de4-Metil-2-Pentanol CG en etanol de 40°C.7.4.3.2. Solución Patrón: preparar una soluciónde metanol en etanol de 40°, de concentraciónsimilar a la esperada en la muestra. A 10 ml de estasolución añadir 1 ml de la solución de patrón interno7.4.3.1. e inyectar 1 µl en el cromatógrafo.7.4.4. Muestra problema: A 10 ml del destiladode anís llevado a 40°, se le añade 1 ml de patróninterno 7.4.4.1. e inyectar 1 µl en las mismas condicionesen que se hizo para el calibrado.7.5. Cálculos.Calcular el factor de respuesta y la concentraciónde metanol aplicando las siguientes fórmulas:ApFactor de respuesta (Fr) = Ci ––––AiAimConcentración de la muestra (mg/l) = Fr ––––– f ,Apmsiendo:Ci = Concentración del metanol en la soluciónpatrón.Ap = Area del patrón interno en la soluciónpatrón.Ai = Area del metanol en la solución patrón.Aim = Area del metanol en la muestra problema.Apm = Area del patrón interno en la muestraproblema.f = Factor de dilución de la muestra.7.6. Referencias.1. "Official Methods of Analysis of the A.O.A.C"14ª edición, 1984 : 5.008-5.011.8. BASES NITROGENADAS8.1. Principio.Fijación de las bases nitrogenadas y del amoníacomediante el ácido fosfórico en el destilado de lamuestra.Liberación de éstos mediante solución de sodiohidróxido y valoración con ácido clorhídrico.El límite de detección de este método es de1 mg/l.8.2. Material y aparatos.8.2.1. Destilador simple con dispositivos paraadición (figura 8.1.).8.2.2. Probeta de 100 ml de capacidad.8.2.3. Tubos de ensayo de boca esmerilada de30 ml de capacidad.8.2.4. Bureta de 25 ml de capacidad.8.2.5. Pipetas de 50 ml de capacidad.8.2.6. Matraz de 50 ml.8.3. Reactivos.182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO172Figura 8.lDestilador simple con dispositivo para adición

M8.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA (d= 1,34g/ml).8.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%, preparadaa partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS.8.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 0,01N,preparada a partir de Acido Clorhídrico 0,05 mol/l(0,05N) SV y Agua PA-ACS.8.3.4. Disolución de Rojo de Metilo: Pesar 0,1 g deRojo de Metilo RE-ACS y disolver en 50 ml de Etanol90% v/v, preparado por dilución previa de Etanol96% v/v PA.8.3.5. Agua Destilada PA (pH 6,5-7,5).8.4. Procedimiento.Obtener el destilado de 100 ml de muestra, operandosegún método de análisis número 1.En un matraz de fondo redondo de 250 ml introducir60 ml del destilado, 40 ml de Agua PA-ACS y2 gotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar,recogiendo los primeros 80 ml del destilado en8.2.2. y desecharlos.Enfriar el matraz y al residuo frío añadir 20 ml dedisolución de Sodio Hidróxido al 1%. Destilar denuevo, recogiendo alrededor de 10 ml de destiladoen un tubo de ensayo, en el que previamente sehan introducido 2 ml de Agua PA-ACS y una gotade disolución de Rojo de Metilo, procurándose queel destilado caiga en el fondo del tubo con la ayudade una alargadera.Valorar a continuación con disolución de AcidoClorhídrico 0,01N hasta viraje del indicador.Efectuar el mismo procedimiento sobre un blancode etanol al 40%.8.5. Cálculos.Concentración de bases nitrogenadas expresadascomo hidróxido de amonio (mg/l) = 2,8 (v - v').Siendo:v = Volumen, en mililitros, de disolución de AcidoClorhídrico 0,01N gastados en la valoración.v' = Volumen, en mililitros, de disolución de AcidoClorhídrico 0,01 N gastados en el blanco.8.6. Referencias.1. "Codex Oenologique International, O.I.V.",1978, página 179. ACEITES ESENCIALES9.1. Principio.Extracción de los aceites esenciales y cuantificación.9.2. Material y aparatos.9.2.1. Embudos de decantación de 500 ml.9.2.2. Desecador con dispositivos para hacervacío o rotavapor.9.2.3. Matraces de 100 ml de forma corazóncon boca adecuada para adaptar al rotavapor.9.3. Reactivos131074 Agua PA-ACSAnetol Patrón132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppmde BHT PA-ACS-ISO122006 n-Pentano PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO121716 Sodio Sulfato anhidro PA9.3.1. n-Pentano PA.9.3.2. Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.9.3.3. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm deBHT PA-ACS-ISO.9.3.4. Anetol Patrón.9.4. Procedimiento.Tomar 40 ml de anís e introducir en un embudode decantación añadiendo 160 ml de Agua PA-ACS, 40 g de ClNa y 60 ml de n-Pentano PA. Agitary dejar decantar durante unos diez minutos.Una vez separadas las fases, tomar la correspondienteal Pentano. Añadir Sodio Sulfato anhidroPA. Filtrar. Llevar al rotavapor para evaporar el Pentano,sin que la temperatura del baño alcance los30° C.Disolver el residuo obtenido en 5 ml de EterDietílico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO e inyectar en el cromatógrafo en las mismascondiciones del método número 6. Normalizaresta inyección obteniendo el porcentaje deAnetol.9.5 Cálculos.El contenido en aceites esenciales totales expresadoen gramos por litro vendrá dado por lasiguiente fórmula:100Aceites esenciales (g/l) = A –––––BSiendo :A = Contenido de anetol, expresado en g/l,obtenido en el método 6.B = Contenido en porcentaje de anetol obtenidoen la normalización.9.6. Referencias.1. "Dosaje des huilles essentielles totales dansles liqueurs anissés". A. Maurel. Annales des Falsificationset L'Expertise Chimique et Toxicologuique,19412. Informe interno del Grupo de Trabajo deMétodos Oficiales de análisis del Ministerio de Agricultura,Pesca y Alimentación.173

17410. HIDROXIMETILFURFURAL YFURFURAL10.1. Principio.Separación y cuantificación por cromatografíalíquido-líquido de hidroximetilfurfural y furfural.10.2. Material y aparatos.10.2.1. Cromatógrafo líquido-líquido con detectorU.V.10.2.2. Columna Sherisorb ODS 5 µ de 20 x0,46 cm o columna similar de fase reserva.10.2.3. Microjeringa de 25 o 50 µl o cualquiersistema de inyección adecuado según loop e inyector.10.2.4. Equipo de filtración de disolventes paracromatografía líquido-líquido con filtro de 0,45 µm osimilar.10.2.5. Equipo de filtración de muestras con filtrosde 0,5 µm o similar.10.3. Reactivos.261091 Metanol HPLC141334 Furfuraldehído PRSHidroximetilfurfural131509 Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidratoPA10.3.1. Metanol HPLC.10.3.2. Solución tampón de Potasio di-HidrógenoFosfato PA-ACS-ISO y di-Potasio HidrógenoFosfato 3-hidrato PA. Disolver 1,25 g de KH 2 PO 4 y1,25 g de K 2 HPO 4 en agua hasta un litro.10.3.3. Hidroximetilfurfural patrón y Furfuraldehidorecientemente destilado.10.4. Procedimiento.10.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:Fase móvil. Solución de metanol al 10% (v/v) endisolución tampón (10.3.2.).Flujo: 0,8 ml/mn.Longitud de onda. 285 nm.Tiempo de retención aproximado: Siete minutospara Hidroximetilfurfural y diez minutos para el Furfural.10.4.2. Soluciones patrón:Prepara soluciones de Hidroximetilfurfural y Furfuralen Metanol de concentraciones aproximadas a5 mg/l.10.4.3. Diluir 5 ml de la muestra en Metanol a25 ml.Filtrar e inyectar directamente.10.5. Cálculos.Calcular la concentración de Hidroximetilfurfuraly Furfural expresada en mg/l, mediante las siguientesfórmulas.AmHidroximetilfurfural o Furfural (mg/l) = ––––– x CApSiendo:Am = Area de la muestra.Ap = Area del patrón externo.C = Concentración en mg/l del patrón.10.6. Observaciones.10.6.1. Observación. - La preparación del patrónde Hidroximetilfurfural debe efectuarse cada día.Para evitar esta preparación se puede utilizar el mismopatrón, pero controlando su riqueza actual,midiendo la absorbancia en U.V. a 284 nm, empleandola siguiente fórmula:Ac = –––– x 100E x lSiendo:c = Concentración en moles/l de Hidroximetilfurfural.E = Coeficiente de absorción Molar, 1,82 x 10 4 .l = Longitud de paso de la cubeta en cm.A = Absorbancia del patrón a 284 nm.11. ARSENICO11.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida conuna mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza porespectrofotometría de absorción atómica, congenerador de hidruros.11.2. Material y aparatos.11.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de0,1 g11.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml decapacidad.11.2.3. Pipetas de doble aforo.11.2.4. Matraces "Kjeldahl" de 250 ml.11.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómicaequipado con sistema generador de hidruros.11.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.11.2.7. Fuente de descarga sin electrodos.11.2.8. Registrador gráfico.11.3. Reactivos.Se utilizan solamente reactivos de grado depureza para análisis y Agua Destilada.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO

M131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrónAs = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO11.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO(d=1,19 g/ml).11.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico.Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hastaun volumen de 1.000 ml.11.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico.Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hastaun volumen de 1.000 ml.11.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO (d=1,40 g/ml).11.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84g/ml).11.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumende 100 ml.11.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlohasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%, preparadaa partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS.11.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiamino-tetraacéticoSal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO(EDTANa 2 ). Pesar 1 g de EDTANa 2 y disolverlo hasta100 ml con Agua PA-ACS.11.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejasPA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta unvolumen de 100 ml.11.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v).Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.11.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.11.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoOxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxidoal 20% (11.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al20% (11.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico1% (11.3.11.).11.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración10 mg/l.Pipetear 1 ml de la solución patrón de Arsénico(11.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.11.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración0,1 mg/l.Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico(11.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.11.4. Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra.En un matraz "Kjeldahl", de 250 ml introducir 4 gde muestra con 20 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO(11.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(11.3.5.).Llevar la ebullición hasta reducir el volumen a5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS enun matraz de 50 ml la solución resultante.11.4.2. Preparación del blanco y patrones detrabajo. En un matraz "Kjeldahl", introducir 5 ml dela solución de Arsénico (11.3.14.) y someterlo almismo tratamiento que la muestra.1 ml de la solución contiene 10 nanogramos dearsénico.Preparar un blanco con todos los reactivos utilizadossiguiendo el tratamiento dado a la muestra.11.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiemposuficiente para que se estabilice la energía de lalámpara.Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla deacuerdo con las condiciones del aparato.Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcance dicha temperatura.Se ajustan las condiciones del generador dehidruros según las especificaciones del aparato.Ajustar el flujo de argón de acuerdo con lascaracterísticas del aparato.Encender el registrador.11.4.4. Determinación.Las determinaciones de la concentración deArsénico se realizan por el método de adición depatrones, por medio de medidas duplicadas en elespectrofotómetro en las condiciones especificadasen (11.4.3.), añadiendo al matraz de reacción 3 mlde la solución (11.4.1.), más 3 ml de la solución(11.3.2.), y 10 ml de la solución (11.3.8.). Comopatrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.Lavar los matraces antes y después de cadauso, con Acido Clorhídrico (11.3.3.).Al construir la gráfica de adición hay que descontarel valor de absorbancia del blanco obtenidoen las mismas condiciones anteriores, pero añadiendo3 ml de la solución blanco.175

17612. PLOMO12.1. PrincipioDeterminación del plomo por absorción atómica.12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.12.2.2. Lámpara de plomo.12.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar (de150 ml de capacidad, aproximadamente)12.2.4. Baño de arena o placa calefactora conregulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150°C.12.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.12.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml decapacidad.12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISOAcido Nítrico al 1%131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/l AA12.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d= 1,835g/ml).12.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (d=1,413 g/ml).12.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.12.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra.- Pesar 20 gde la muestra en la cápsula (12.2.3.); llevarla a evaporaciónhasta consistencia siruposa en baño dearena (12.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de AcidoSulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar lentamente elresiduo en el baño de arena o placa. Seguidamenteintroducir la cápsula en la mufla y mantenerla durantedos horas a 450°C; transcurrido dicho tiempo,sacarla y dejarla enfriar.Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendoesta operación hasta obtener cenizas blancas.Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Fe 2 O 3 ) es aceptado y no requiereun tratamiento posterior.Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas dellavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluiralícuotas apropiadas de la solución patrón (12.3.4.)con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curvade concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.12.4.3. Determinación. Operar según las especificacionesdel aparato, usando llama de aire-acetileno.Medir las absorbancias de la muestra y patronesa 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.12.5. Cálculos.Calcular el contenido en plomo, expresado enmg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de concentracióno dilución.12.6. Referencia.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos. Ministeriode Agricultura, pág. 134 (I), 1976.13. ZINC13.1. Principio.Determinación del zinc por absorción atómicaprevia mineralización de la muestra.13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.13.2.2. Lámpara de zinc.13.2.3. Los utilizados para el Pb en (12.2.3.),(12.2.4.) (12.2.5.) y (12.2.6.)13.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISOAcido Nítrico al 1%131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrónZn = 1,000 ± 0,002 g/l AA13.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.),(12.3.2.) y (12.3.3.)13.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumennecesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) ydiluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 % (v/v).13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en(12.4.1.).13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;1; 1,5 y 2 mg/l.13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.

M13.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos,hallar las concentraciones de Zinc para lamuestra, teniendo en cuenta el factor concentracióno dilución.13.6. Referencia.1. H.E. Parker. “Atomic Absorption Newsletter”(1963), 13.14. COBRE14.1 PrincipioDeterminación del cobre por absorción atómicaprevia mineralización de la muestra.14.2. Material y aparatos.14.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.14.2.2. Lámpara de Cobre.14.2.3. Los utilizados para el plomo, en (12.2.3.),(12.2.4.), (12.2.5.) y (12.2.6.).14.3. Reactivos131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISOAcido Nítrico al 1%131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/l AA14.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.),(12.3.2.) y (12.3.3.)14.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de AcidoNítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litrocon Acido Nítrico del 1 % (v/v).14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra.- Como en(12.4.1.).14.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluirpartes alícuotas de la solución patrón (14.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de Cobre/litro.14.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.14.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidospara la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de Cobre de la muestra.14.6 Referencias.1. H.E. Parker: "Atomic Absorption Newsletter"(1963).13.2 F. Rousselet: "Spectrophotometrie par absorptionatomique Boudin". Ed Paris (1968), pág. 59-144.177

178Sidras:Sidras y otras bebidasderivadas de laManzana

MMETODOS DE ANALISIS1. ELIMINACION DEL ANHIDRIDOCARBONICO1.1. Principio.Desgasificación de la sidra mediante agitación yfiltración.1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz Erlenmeyer.1.2.2. Papel de filtro.1.2.3. Embudo.1.3. Procedimiento.El volumen de sidra que vaya a utilizar, previamentellevada a 17-20°C, verterlo en un matrazErlenmeyer de capacidad doble del volumen utilizado.Agitar durante diez minutos y filtrar a continuacióna través de un embudo cubierto de papel de filtroseco.2. GRADO ALCOHOLICO ADQUIRIDOEliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método 1 y proceder como se indica en losmétodos oficiales de vinos número 5(a) ("Boletín Oficialdel Estado" de 22 de julio de 1977) y 5(b)("Boletín Oficial del Estado" del 23 de julio de 1977).3. AZUCARES REDUCTORESEliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen los métodos oficiales de vinos números 7(a) y7(b) ("Boletín Oficial del Estado" de 23 de julio de1977) y 7(c) ("Boletín Oficial del Estado" de 30 deagosto de 1979).4. ANHIDRIDO SULFUROSOProceder como se indica en el método oficial devinos números 28(a) y 28(b) ("Boletín Oficial delEstado" de 26 de julio de 1977).5. METANOL(Alcohol Metílico)Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 37 ("BoletínOficial del Estado" de 27 de julio de 1977).6. ACIDEZ VOLATILProceder como se indica en el método oficial devinos número 21 ("Boletín Oficial del Estado" de 23de julio de 1977).7. EXTRACTO SECO TOTALEliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 6 ("Boletín Oficialdel Estado" de 23 de julio de 1977).8. CENIZASEliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 11 ("BoletínOficial del Estado" de 23 de julio de 1977).9. HIERROEliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 16 ("BoletínOficial del Estado" de 23 de julio de 1977).10. ETANAL10.1. Principio.El etanal se determina en la sidra, previamentedecolorada con carbón, midiendo a 570 nm, lacoloración verde o violeta que da con el sodio nitroprusiatoy la piperidina.10.2. Material y aparatos.10.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuarlecturas a 570 nm.10.3. Reactivos.131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO121064 Acido Sulfuroso solución 6% PA131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121237 Carbón Activo polvo PAEtanal171327 Fenolftaleína solución 1% RE162377 Piperidina PS182415 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV10.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 mlde Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.179

18010.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%(p/v).En un matraz aforado de 250 ml, disolver 1 g deSodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.10.3.3. Carbón activo polvo PA.10.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientementeAcido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.10.3.5. Solución alcalina.Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en400 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV con AguaPA-ACS.10.4. Procedimiento.10.4.1. Determinación de etanal.Colocar 25 ml de líquido a analizar en un erlenmeyerde 100 ml, adicionar unos 2 g de CarbónActivo polvo PA. Agitar enérgicamente durantealgunos segundos, dejar reposar durante 2 minutosy filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino paraobtener un filtrado claro.Dos ml de filtrado incoloro se colocan en unErlenmeyer de 100 ml y se adiciona, agitando, 5 mlde solución de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de soluciónde Piperidina; mezclar y colocar inmediatamentela mezcla en la cubeta de lectura de 10 mmde espesor. La coloración obtenida que varía delverde al violeta, se mide a 570 nm con relación alaire. Esta coloración aumenta para disminuir seguidamentecon rapidez. Elegir como valor definitivo lamáxima absorbancia que se obtiene al cabo deunos 50 segundos.La cantidad de etanal contenido en el líquidoanalizado se deduce de una curva patrón.10.4.2. Construcción de la curva patrón.Solución patrón de Etanal combinado con el AnhídridoSulfuroso.Tomar Acido Sulfuroso 6% PA, valorar en SO 2 ydeterminar su cantidad exacta midiéndola con Yodo0,05 mol/l (0,1N) SV.En un matraz aforado de 1 litro colocar el volumende esta solución que corresponda a 1.500 mgde SO 2 . Introducir en el matraz, ayudados con unembudo, alrededor de 1 ml de Etanal destiladorecientemente y recogido sobre una mezcla refrigerante.Enrasar a un litro con Agua PA-ACS, mezclary dejar durante la noche.La cantidad exacta de esta solución patrón deEtanal combinada con el SO 2 debe determinarsecomo sigue:En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml desolución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del AcidoClorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxidarel SO 2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV enpresencia de Almidón soluble RE hasta coloraciónazul débil.Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapariciónde la coloración azul y aparición de color rosa.Valorar el SO 2 combinado al Etanal con el Yodo0,05 mol/l (0,1N) SV hasta coloración azul débil.Siendo n el volumen gastado, la solución patrón deEtanal combinado con el SO 2 contiene : 44,05 n mgde Etanal por litro.Preparación de la curva patrón:En matraces aforados de 100 ml colocar sucesivamente5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones correspondena cantidades de Etanal próximas a 40-80-120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilucionesdebe calcularse a partir del contenido enEtanal de la solución patrón determinada anteriormente.Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml decada una de estas soluciones como se indica anteriormente.La representación gráfica de las absorbanciasde estas soluciones en función de la cantidadde Etanal es una recta que no pasa por elorigen.10.5. Cálculo.Calcular el contenido en etanal mediante comparacióncon la correspondiente curva patrón.10.6. Observaciones.Si, de forma excepcional, el líquido a analizarcontiene etanal libre, no combinado con el SO 2 seránecesario, antes de empezar a determinar el etanaltotal, pasarlo previamente al estado de combinacióncon el SO 2 . Para efectuar esto, adicionar a unaparte del líquido a analizar un pequeño exceso deSO 2 libre y esperar algunas horas antes de procedera la determinación.10.7. Referencias.10.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.Rdsch 1970. 66, 5-6.10.7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd'Analyses des Vins. O. I. V. A-37, 1978.11. ANHIDRIDO CARBONICO11.1. Principio.Después de la oxidación en frío del anhídridosulfuroso por el hidrógeno peróxido en presenciadel ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplazadode la sidra por una solución tampón de fosfatoy ácido fosfórico es arrastrado en frío en circuitocerrado por una corriente de aire medianteuna pequeña bomba de circulación hacia unasolución valorada de bario hidróxido. El exceso deesta base se determina inmediatamente con unasolución valorada de ácido clorhídrico en presenciade un indicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.Aplicables a contenidos inferiores a 6 g/l.

M11.2. Material y aparatos.11.2.1. Aparato de vidrio para extracción delCO 2 en circuito cerrado (fig. 1) compuesto de:- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bolaantiespuma sobre la que va adaptada una bureta (5);- dos barboteadores (2) y (3);- una bomba (4) que garantice la circulación delaire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).11.3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)PRS121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidratoPA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV171739 Timolftaleína RE11.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N : Enun matraz aforado diluir exactamente a 1:1 SodioHidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.11.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g deBaCl 2 .2H 2 O por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidratoPA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.11.3.3. Solución de Bario Hidróxido.Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario Clorurode 90 g/l con 1 volumen de solución de SodioHidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que evite lacarbonatación.11.3.4. Solución tampón:Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20° C = 1,63) :Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO conAgua PA-ACS hasta la densidad indicada quecorresponde a, aproximadamente, 79,4% y completarhasta 1 l con Agua PA-ACS recientementehervida.11.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g deSodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO en 100 g desolución.Utilizarla 15 días después de su preparaciónpara lograr la decantación del eventual CO 3 Na 2 .Esta solución debe ser transparente.11.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H 2 O 2por litro y libera 10 veces su volumen de oxígenopor descomposición catalítica con MnO 2 en medioalcalino.11.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,pulverizado.11.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PAneutro, y completar hasta 100 ml.11.3.9. Acido Clorhídrico 0,2 N. En un matrazaforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1mol/l (1N) SVcon Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución0,2N obtenida.11.4. Procedimiento.11.4.1. Sidras que contienen menos de 4 g deCO 2 , por litro.La botella de sidra se debe mantener en posiciónhorizontal durante una noche a 0°C.Colocar en el barboteador (2) 150 ml exactamentemedidos de solución de Bario Hidróxido.Introducir en el matraz (1) algunos cristales deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, concuidado, en un matraz previamente enjuagado yenfriado a 0°C, 50 ml de sidra. Colocar el matraz (1)en el circuito y esperar 10 minutos.Conectar la bomba, e introducir mediante labureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en funcionamiento30 minutos.Parar la bomba y tomar del barboteador (2),50 ml de la solución de Bario Hidróxido; valorarlacon Acido Clorhídrico 0,2N con indicador mixto.Sea V 2 el número de ml gastados.Es indispensable valorar diariamente el BarioHidróxido utilizando 150 ml. Sea V 1 el número de mlde Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.11.4.2. Sidras que contienen más de 4 g de CO 2por litro.La botella debe mantenerse en posición horizontala 0°C durante una noche. Abrir la botella conprecaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 mlde sidra por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%haciendo resbalar suavemente la solución por elcuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente yhomogeneizar su contenido agitándola; colocarlaseguidamente en un baño de agua a 20° C.Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos desolución de Bario Hidróxido.Introducir en el matraz (1) unos cristales deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.Introducir lentamente la pipeta en la botella paraevitar desprendimiento de CO 2 y tomar 50 ml de lasidra y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato ydejarlo reposar 10 minutos.El volumen de la sidra tomado se deberá reducira 25 ml, si ésta contiene más de 8 g/l de anhídridocarbónico.Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.Parar la bomba y tomar del barboteador (2)50 ml de la solución de Bario Hidróxido. Valorarlacon Acido Clorhídrico 0,2N en presencia de indica-181

dor mixto. Sea V 2 el número de ml utilizados. Sea V 1el número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumidospara valorar 150 ml de solución de BarioHidróxido.11.5. Cálculo.11.5.1. Para sidras que contienen menos de 4 gde CO 2 por litro.Cantidades de CO 2 en gramos por l en la sidra.CO 2 (g/l) = 0,088 (V 1 - 3V 2 ).11.5.2. Para sidras que contienen más de 4 g deCO 2 por litro.Medir el volumen de líquido que queda en labotella y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomadapara la determinación. Sea V el volumen total asídeterminado. Calcular seguidamente el factor decorrección f, necesario para tener en cuenta los50 ml de Sodio Hidróxido al 50% introducidos en labotella:Vf = ––––––V - 50Si la muestra para la determinación es de 50 ml,la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es(2V 1 - 6V 2 ) x 0,088 x f.Este resultado debe multiplicarse por 2 si latoma de muestra es de 25 ml.11.6. Referencias.11.6.1. Jaulmes (P.), Metch. An. 1972, n° 422;Ann. Fals. Exp. Chim. 1973, n°708, 96-109.11.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd'Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.182Figura l

M183

Relación de reactivosy productos auxiliaresque se utilizan en losmétodos analíticos.Productos derivados dela Uva, Aguardientesy Sidras.184 NOTA: Algunos de los reactivos recomendados enlos métodos analíticos previamente descritos hanmodificado su código y mejorado su calidad.Además se han producido nuevas incorporaciones.Por favor, consulte este anexo antes de efectuarsu pedido. Es la versión actualizada de la oferta deproductos suministrables en Mayo de 1999.

MREACTIVOS Y PRODUCTOS AUXILIARES QUE HAN CAMBIADO DE CÓDIGO O DE CALIDADANTERIORACTUAL263093 Acetonitrilo gradiente HPLC 221881 Acetonitrilo (HLPC-gradiente) PAI171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato RE 121024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato PA124559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Disódica 144559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal CálcicaCálcica PADisódica(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX171096 Almidón soluble RE 121096 Almidón de Patata soluble PA121118 Amonio Bromuro PA 131118 Amonio Bromuro PA-ACS171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE 281432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RV171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE 281168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RV351082 1-Butanol CG 361082 1-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI354330 iso-Butanol CG 361089 iso-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI353851 2-Butanol CG 123851 2-Butanol PA351086 Etanol absoluto CG 361086 Etanol absoluto (UV-IR-HPLC) PAI351085 Etanol 96% CG 361085 Etanol 96% (UV-IR-HPLC) PAI141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS 131897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PA-ACS171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS 131321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato PA-ACS171327 Fenolftaleína solución 1% RE 281327 Fenolftaleína solución 1% RV141334 Furfuraldehído PRS 131334 Furfural estabilizado con ~0,1% de BHTPA-ACS261091 Metanol HPLC 361091 Metanol (UV-IR-HPLC prep.) PAI351091 Metanol CG 321091 Metanol (PAR) PAI351079 3-Metil-1-Butanol CG 131079 3-Metil-1-Butanol PA-ACS352516 4-Metil-2-Pentanol CG 162516 4-Metil-2-Pentanol PS164542 4-Nitroanilina PS A10369 4-Nitroanilina, 98%171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS 131439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) PA-ACS251450 Parafina P.F. 55-60°C en pastilla DC 253211 Parafina P.F. 56-58°C en lentejas DC121884 1-Pentanol PA 131884 1-Pentanol PA-ACS171495 Potasio Cloruro solución saturada RE 281495 Potasio Cloruro solución saturada RV351885 1-Propanol CG 361885 1-Propanol (UV-IR-HPLC) PAI354457 2-Propanol CG 321090 2-Propanol (PAR) PAI171615 Rojo de Fenol RE-ACS 131615 Rojo de Fenol PA-ACS171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 131617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) PA-ACS171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE 281634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RV171730 Tampón solución pH 10 RE 281730 Solución Tampón pH 10 RV171739 Timolftaleína RE 121739 Timolftaleína PA171748 Tornasol tintura RE 281748 Tornasol tintura RV171759 Verde de Bromocresol RE-ACS 131759 Verde de Bromocresol PA-ACS121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA 131787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA-ACS185

186ACETALDEHIDOA13752 3-HIDROXI-2-BUTANONA dímero,98%(ACETOINA dímero)131007 ACETONA PA-ACS-ISO221881 ACETONITRILO (HPLC-gradiente) PAI131008 ACIDO ACETICO glacial PA-ACS-ISOACIDO ACETICO 2 mol/l (2N)131013 ACIDO L(+)- ASCORBICO PA-ACS-ISOA10934 ACIDO BARBITURICO, 98+%121014 ACIDO BENZOICO PA131015 ACIDO BORICO PA-ACS-ISO131808 ACIDO CITRICO anhidro PA-ACS131018 ACIDO CITRICO 1-hidrato PA-ACS-ISO131020 ACIDO CLORHIDRICO 37% PA-ACS-ISO131019 ACIDO CLORHIDRICO 35% PA-ISO182107 ACIDO CLORHIDRICO 0,05 mol/l(0,05N)SV182318 ACIDO CLORHIDRICO 0,25 mol/l(0,25N)SV181022 ACIDO CLORHIDRICO 0,5 mol/l(0,5N)SV181021 ACIDO CLORHIDRICO 1 mol/l (1N) SV182108 ACIDO CLORHIDRICO 2 mol/l (2N) SVA15135 ACIDO 4-CLOROBENZOICO, 98+%121024 ACIDO CROMOTROPICO SALDISODICA 2-hidratoPA144559 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICOSAL CALCICA DISODICA(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX131669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICOSAL DISODICA 2-hidrato PA-ACS-ISO182120 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICOSAL DISODICA 0,05 mol/l (0,05N) SV131030 ACIDO FORMICO 98% PA-ACS131032 ACIDO orto-FOSFORICO 85%PA-ACS-ISO121660 ACIDO orto-FOSFORICO 50% PAA13700 ACIDO 4-HIDROXIBENZOICO, 99%131034 ACIDO L(+)- LACTICO PA-ACS131037 ACIDO NITRICO 69% PA-ACS-ISO131036 ACIDO NITRICO 60% PA-ISO121737 ACIDO NITRICO 53% PAACIDO NITRICO AL 1%ACIDO PERYODICO 0,05 M121050 ACIDO PIROGALICO PA141045 ACIDO SALICILICO (RFE, USP, BP,Ph. Eur)PRS-CODEX141055 ACIDO SORBICO (RFE, USP, BP,Ph. Eur.)PRS-CODEX131057 ACIDO SULFANILICO PA-ACS471058 ACIDO SULFURICO 95-98%(máx 0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO131058 ACIDO SULFURICO 96% PA-ISO182102 ACIDO SULFURICO0,01 mol/l (0,02N) SV181061 ACIDO SULFURICO 0,05 mol/l (0,1N) SV181059 ACIDO SULFURICO 0,5 mol/l (1N) SV182105 ACIDO SULFURICO 1 mol/l (2N) SV131064 ACIDO SULFUROSOsolución 6%PA-ACS131066 ACIDO L(+)- TARTARICO PA-ACS-ISOACIDO TIOBARBITURICOA13401 ACIDO TIOSALICILICO,98%141792 AGAR (USP) PRS-CODEX131074 AGUA PA-ACS171071 AGUA DE BARITA solución saturada RE171073 AGUA DE CAL solución saturada RE212236 AGUA DESIONIZADA QPALILO iso-TIOCIANATO121096 ALMIDON DE PATATA soluble PA141101 ALUMINIO SULFATO 18-hidrato(RFE, BP,Ph. Eur.) PRS-CODEXAMONIACO GAS121129 AMONIACO 25% (en NH 3 ) PA141128 AMONIACO 20% (en NH 3 ) PRS131118 AMONIO BROMURO PA-ACS131121 AMONIO CLORURO PA-ACS-ISO131120 di-AMONIO HIDROGENOCITRATOPA-ACS131368 AMONIO HIERRO (II) SULFATO6-hidratoPA-ISO131365 AMONIO HIERRO (III) SULFATO12-hidratoPA-ACS-ISO131134 AMONIO MOLIBDATO 4-hidratoPA-ACS-ISO131135 AMONIO NITRATO PA-ACS-ISO121146 di-AMONIO TARTRATO PA132352 AMONIO meta-VANADATO PA-ACS281432 ANARANJADO DE METILOsolución 0,1%RVA13482 trans-ANETOL,98%+141156 ANILINA PRS211160 ARENA DE MAR lavada, grano fino QPA16992 ARSENICO POLVO -100 mesh, 99,99%313171 ARSENICO solución patrónAs = 1,000 ± 0,002 g/lAA281168 AZUL DE BROMOTIMOL solución0,04% RV251170 AZUL DE METILENO (C.I. 52015) DC131182 BARIO CLORURO 2-hidratoPA-ACS-ISO131188 BARIO HIDROXIDO8-hidratoPA-ACS-ISO2,3-BUTANODIOL361082 1-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI131082 1-BUTANOL PA-ACS-ISO361089 iso-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI123851 2-BUTANOL PAA13159 BUTIL-PBD (2-(4-Bifenil)-5-(4-tert-butilfenil)-1,3,4-oxadiazol121211 CALCIO ACETATO x-hidrato PA121212 CALCIO CARBONATO precipitado PA121221 CALCIO CLORUROanhidro, polvoPACALCIO CLORURO 0,5 mol/l (0,05M)

M142400 CALCIO HIDROXIDO polvo,(RFE,USP, BP. Ph. Eur.) PRS-CODEX211229 CALCIO HIDROXIDO natural, polvo QP211234 CALCIO OXIDO natural, trozos QP124537 CALCON (C.I. 15705) PA121237 CARBON ACTIVO polvo PA131245 CARBONO TETRACLORUROPA-ACS-ISO251246 CARMIN DE INDIGO (C.I. 73015) DC121248 CERIO (IV) SULFATO 4-hidrato PA142323 CLORAMINA T 3-hidrato(RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX313178 COBRE solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/lAA141266 COBRE METAL, polvo PRS122726 COBRE (II) SULFATO anhidro PA131270 COBRE (II) SULFATO 5-hidratoPA-ACS-ISO141270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato(RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX471153 CROMO (VI) OXIDO(máx. 0,000005% de Hg) PA-ACS502612 DERQUIM MC MEZCLA CROMICA121828 DIFENILAMINA PA313180 ESTAÑO solución patrónSn = 1,000 ± 0,002 g/lAA141304 ESTAÑO metal granalla PRS471303 ESTAÑO (II) CLORURO(máx. 0,000005% de Hg) PA-ACS131303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidratoPA-ACSETANAL (ACETALDEHIDO)121086 ETANOL ABSOLUTO PA361086 ETANOL ABSOLUTO (UV-IR-HPLC) PAI361085 ETANOL 96% v/v (UV-IR-HPLC) PAI121085 ETANOL 96% v/v PA132770 ETER DIETILICO estabilizado con~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO131314 ETER DI-iso-PROPILICO estabilizadocon ~50 ppm de BHTPA-ACS131897 ETER mono-METILICO DELETILENGLICOLPA-ACS131318 ETILO ACETATO PA-ACS-ISO403687 EXTRACTO DE LEVADURAIngredienteCULTIMED131321 1,10-FENANTROLINA 1-hidrato PA-ACS131325 FENOLFTALEINA PA-ACS281327 FENOLFTALEINA solución 1% RVA13034 FLUOROGLUCINOL DIHIDRATO, 98%(FLUOROGLUCINA)131328 FORMALDEHIDO 37-38% p/pestabilizado con metanol PA-ACS142728 D (-)-FRUCTOSA(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX131334 FURFURAL estabilizado con~ 0,1% de BHT PA-ACS141339 GLICERINA (RFE,USP, BP, Ph. Eur.)PRS-CODEX121341 D (+) - GLUCOSA PA132063 n-HEXANO PA-ACS141076 HIDROGENO PEROXIDO30% p/v (100 vol.) estabilizado PRS131914 HIDROXILAMONIO CLORUROPA-ACS-ISO121925 HIDROXILAMONIO SULFATO PAA12475 5-(HIDROXIMETIL)-2-FURALDEHIDO, 97%313182 HIERRO solución patrónFe = 1,000 ± 0,002 g/lAA211934 HIERRO metal, granulado fino QP141358 HIERRO (III) CLORURO 6-hidrato trozosPRS121793 HIERRO (II) SULFATO ~2-hidrato PA131362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidratoPA-ACS-ISO121360 HIERRO (III) SULFATO x-hidrato PA211376 LANA DE VIDRIO, lavada QP141392 LITIO CLORURO PRS131394 MAGNESIO ACETATO 4-hidrato PA-ACS211794 MAGNESIO CLORURO~50% MgCl 2 polvo QPMAGNESIO CLORURO 0,1 mol/l (0,1M)211276 MAGNESIO OXIDO QP142367 MANGANESO (IV) OXIDOprecipitadoPRS131413 MANGANESO (II) SULFATO 1-hidratoPA-ACS142961 L(-)-MENTOL (RFE, USP, BP, Ph. Eur.)PRS-CODEX131426 MERCURIO (II) OXIDO amarilloPA-ACS121428 MERCURIO (II) YODURO rojo PA313186 MERCURIO solución patrónHg = 1,000 ±0,002 g/lAA361091 METANOL (UV-IR-HPLC prep.) PAI321091 METANOL (PAR) PAI131091 METANOL PA-ACS-ISO2-METIL-1-BUTANOL131079 3-METIL-1-BUTANOL PA-ACS162516 4-METIL-2-PENTANOL PS131439 NEGRO DE ERIOCROMO T (C.I. 14645)PA-ACS132362 NINHIDRINA PA-ACSA10369 4-NITROANILINA, 98%PAPEL DE FILTRO(Ver Tarifa Panreac, Filtración MN)91187 PAPEL DE TORNASOL neutro (rollo)253211 PARAFINA P.F. 56-58°C en lentejas DC122006 n-PENTANO PA131884 1-PENTANOL PA-ACS211835 PIEDRA POMEZ gránulos QPPINACIANOL O AZUL DE QUINALDINA(YODURO DE 1,1’-DIETILCARBOCIANINA)162377 PIPERIDINA PS131457 PIRIDINA PA-ACS187

188132382 PLATA DIETILDITIOCARBAMATOPA-ACS131459 PLATA NITRATO PA-ACS-ISOPLATA NITRATO solución 0,1% p/v141801 PLATA SULFATO PRS313189 PLOMO solución patrónPb = 1,000 ± 0,002 g/lAA131466 PLOMO (II) ACETATO 3-hidratoPA-ACS-ISO131473 PLOMO (II) NITRATO PA-ACS816610.1 POLIAMIDA PARA CROMATOGRAFIA313190 POTASIO solución patrónK = 1,000 ± 0,002 g/lAA121489 POTASIO BROMURO PAPOTASIO CLORURO(máx 0,005% de Br)131494 POTASIO CLORURO PA-ACS-ISO281495 POTASIO CLORUROsolución saturadaRV131500 POTASIO DICROMATO PA-ISO131505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)3-hidratoPA-ACS131503 POTASIO HEXACIANOFERRATO (III)PA-ACS122333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO3-hidratoPA131509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATOPA-ACS-ISO131481 POTASIO HIDROGENO FTALATOPA-ISO121486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO PA121515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas PA131524 POTASIO NITRATO PA-ISO121526 di-POTASIO OXALATO 1-hidrato PA131527 POTASIO PERMANGANATOPA-ACS-ISO182114 POTASIO PERMANGANATO0,01 mol/l (0,05N) SV181529 POTASIO PERMANGANATO0,02 mol/l (0,1N) SV181528 POTASIO PERMANGANATO0,2 mol/l (1N) SV121523 POTASIO meta-PERYODATO PA131729 POTASIO SODIO TARTRATO 4-hidratoPA-ACS-ISO121531 POTASIO SORBATO PA131532 POTASIO SULFATO PA-ACS-ISO121534 POTASIO TIOCIANATO PA131540 POTASIO YODATO PA-ACS-ISO131542 POTASIO YODURO PA-ACS-ISO361885 1-PROPANOL (UV-IR-HPLC) PAI131090 2-PROPANOL PA-ACS-ISO321090 2-PROPANOL (PAR) PAI172174 REACTIVO DE LUFF-SCHOORL REA12130 RESINA DOWEX 1X2-100(Cl)RESINA LEWATIT‚ MP 600(aniónica fuerte I)816710 INDICADOR FLUORESCENTE UV 254131615 ROJO DE FENOL PA-ACS131617 ROJO DE METILO (C.I.13020) PA-ACS131621 SACAROSA PA-ACS141625 SELENIO METAL polvo PRS313192 SODIO solución patrónNa = 1,000 ± 0,002 g/lAA141669 SODIO METAL, barrasen atmósfera de argónPRS131633 SODIO ACETATO anhidro PA-ACS281634 SODIO ACETATO 1 mol/l (1M) RV131644 di-SODIO tetra-BORATO 10-hidratoPA-ACS-ISO123314 SODIO BOROHIDRURO PA131648 SODIO CARBONATO anhidroPA-ACS-ISO122032 SODIO CARBONATO 1-hidrato PA131647 SODIO CARBONATO10-hidratoPA-ISO131659 SODIO CLORURO PA-ACS-ISO131668 SODIO DIETILDITIOCARBAMATO3-hidratoPA-ACS131698 SODIO DISULFITO PA-ACS131675 SODIO FLUORURO PA-ACS-ISO121638 SODIO HIDROGENO CARBONATO PA131965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO1-hidratoPA-ACS121677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO2-hidratoPA131687 SODIO HIDROXIDO lentejasPA-ACS-ISO171688 SODIO HIDROXIDO solución 10% p/vRE182153 SODIO HIDROXIDO0,05 mol/l (0,05N) SV171694 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) RE181693 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV181694 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV182155 SODIO HIDROXIDO0,25 mol/l (0,25N) SVSODIO HIDROXIDO 0,4 mol/l (0,4N)181692 SODIO HIDROXIDO 0,5 mol/l (0,5N) SV181691 SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)Indicador: Azul de Bromofenol SV182415 SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)Indicador: FenolftaleínaSV182158 SODIO HIDROXIDO 2 mol/l (2N) SV182159 SODIO HIDROXIDO 5 mol/l (5N) SV131703 SODIO NITRITO PA-ACS121705 SODIO NITROPRUSIATO 2-hidrato PA131706 di-SODIO OXALATO PA-ACS131700 SODIO meta-PERYODATO PA-ACS141859 SODIO SALICILATO(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX131716 SODIO SULFATO anhidro PA-ACS-ISO141717 SODIO SULFITO anhidro PRS131721 SODIO TIOSULFATO 5-hidratoPA-ACS

M182160 SODIO TIOSULFATO0,05 mol/l (0,05N) SV181723 SODIO TIOSULFATO 0,1mol/l (0,1N) SV181722 SODIO TIOSULFATO 1 mol/l (1N) SV281730 SOLUCION TAMPON pH 10 RV272168 TAMPON SOLUCIONpH 4,00 ± 0,02 (20°C)ST272170 TAMPON SOLUCIONpH 7,00 ± 0,02 (20°C)ST272172 TAMPON SOLUCIONpH 9,00 ± 0,02 (20°C)STTETRACLOROETANO121739 TIMOLFTALEINA PATOLUENO MARCADO CON C14162378 p-TOLUIDINA PSTORIO NITRATO 4-hidrato281748 TORNASOL TINTURA RV131252 TRICLOROMETANO estabilizadocon etanolPA-ACS-ISO131759 VERDE DE BROMOCRESOL PA-ACS181969 YODO 0,01 mol/l (0,02N) SV182161 YODO 0,025 mol/l (0,05N) SV181772 YODO 0,05 mol/l (0,1N) SV141782 ZINC METAL, granalla PRS313193 ZINC solución patrónZn = 1,000 ± 0,002 g/lAAA17368 ZINC, ALAMBRE, Ø 0,25 mm, 99,99+%141783 ZINC METAL, polvo PRS131787 ZINC SULFATO 7-hidrato PA-ACS189

AditioAditivos ycoadyuvantestecnológicos parauso alimentarioindustrialPANREAC QUIMICA, S.A., fabrica además delos reactivos para análisis PANREAC, una línea deaditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso alimentarioindustrial, que cumplen las especificacionesde pureza prescritas por The Food ChemicalsCodex 4ª ed., complementadas con las exigenciasespecíficas fijadas por la legislación españolay comunitaria de la CEE.En la relación que sigue se indica denominacióndel producto, fórmula y número de identificación.Para mayor información, solicite nuestrocatálogo ADITIO 1995.190

MCódigo Producto Sinónimos FórmulaN.º deidentificación201003 ACEITE DE VASELINA204333 ACETOFENONA C 8 H 8 O201007 ACETONA CH 3 COCH 3201008 ACIDO ACETICO GLACIAL CH 3 COOH E-260202342 ACIDO ADIPICO (CH 2 CH 2 COOH) 2 E-355201013 ACIDO L(+)-ASCORBICO C 6 H 8 O 6 E-300202422 ACIDO DL-ASPARTICO C 4 H 7 NO 4202034 ACIDO L-ASPARTICO C 4 H 7 NO 4201014 ACIDO BENZOICO C 6 H 5 COOH E-210201808 ACIDO CITRICO anhidro C 6 H 8 O 7 E-330201018 ACIDO CITRICO 1-hidrato C 6 H 8 O 7 .H 2 O E-330201020 ACIDO CLORHIDRICO 37% HCl E-507202019 ACIDO CLORHIDRICO 35% HCI E-507202785 ACIDO DECANOICO C 10 H 20 O 2202512 ACIDO ESTEARICO C 18 H 36 O 2(Mezcla de ácidos grasos)201669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRA-ACETICO SAL di-SODICA 2-hidratoNa 2 H 2 C 10 H 12 N 2 O 8 .2H 2 O201030 ACIDO FORMICO 98% HCOOH E-236201029 ACIDO FORMICO 85% HCOOH E-236201032 ACIDO orto-FOSFORICO 85% H 3 PO 4 E-338202344 ACIDO FUMARICO HOOCCHCHCOOH E-297202042 ACIDO L-GLUTAMICO C 5 H 9 NO 4 E-620201034 ACIDO L(+)-LACTICO CH 3 CHOHCOOH E-270202368 ACIDO LAURICO C 12 H 24 O 2202051 ACIDO DL-MALICO C 4 H 6 O 5 E-296202591 ACIDO MIRISTICO CH 3 (CH 2 ) 12 COOH203389 ACIDO NlCOTINlCO E-375202786 ACIDO OCTANOICO C 8 H 16 O 2202345 ACIDO PALMITICO201810 ACIDO PROPIONICO CH 3 CH 2 COOH E-280201055 ACIDO SORBICO C 6 H 8 O 2 E-200201883 ACIDO SUCCINICO HOOCCH 2 CH 2 COOH E-363201058 ACIDO SULFURICO 95-98% H 2 SO 4 E-513201065 ACIDO TANICO201066 ACIDO L(+)-TARTARICO (CHOH) 2 (COOH) 2 E-334201792 AGAR E-406202035 DL-ALANINA C 3 H 7 NO 2202043 L-ALANINA C 3 H 7 NO 2201081 ALCOHOL BENCILICO C 6 H 5 CH 2 OH201103 ALUMINIO POTASIO SULFATO12-hidrato AIK(SO 4 ) 2 .12H 2 O E-522201130 AMONIACO 30% (en NH 3 ) NH 4 OH E-527201129 AMONIACO 25% (en NH 3 ) NH 4 OH E-527201119 AMONIO CARBONATO ~(NH 4 ) 3 (CO 3 ) 2 H+NH 2 COONH 4 E-503i201121 AMONIO CLORURO NH 4 Cl E-510201116 AMONIO HIDROGENO CARBONATO (Amonio Bicarbonato) NH 4 HCO 3 E-503ii201127 di-AMONIO HIDROGENO FOSFATO (NH 4 ) 2 HPO 4 E-342ii201126 AMONIO di-HIDROGENO FOSFATO NH 4 H 2 PO 4 E-342i201140 AMONIO SULFATO (NH 4 ) 2 SO 4 E-517203464 L-ARGININA C 6 H 4 N 4 O 2204109 L-ASPARAGINA anhidra C 4 H 8 N 2 O 3202357 BENZOILO PEROXIDO humectadocon aprox. 25% de agua C 14 H 10 O 4203977 D (+)-BIOTINA191

Código Producto Sinónimos FórmulaN.º deidentificación192201089 iso-BUTANOL C 4 H 10 O201082 1-BUTANOL201429 BUTANONA (Metiletilcetona) C 4 H 8 O204233 2-ter-BUTIL-4-METOXIFENOL (BHA, Butildroxianisol) C 11 H 16 O 2 E-320201211 CALCIO ACETATO x-hidrato Ca(CH 3 COO) 2 .xH 2 O E-263201212 CALCIO CARBONATO precipitado CaCO 3 E-170i201213 tri-CALCIO di-CITRATO 4-hidrato Ca 3 (C 6 H 5 O 7 ) 2 .4H 2 O E-333iii201219 CALCIO CLORURO anhidroescoriforme CaCl 2 E-509201221 CALCIO CLORURO anhidro polvo CaCl 2 E-509201215 CALCIO CLORURO 2-hidratoescoriforme CaCl 2 .2H 2 O E-509201232 CALCIO CLORURO 2-hidrato polvo CaCl 2 .H 2 O E-509201214 CALCIO CLORURO 6-hidrato CaCl 2 .6H 2 O E-509202824 CALCIO CLORURO solución 45%(en CaCl 2 .2H 2 O) E-509201818 CALCIO ESTEARATO ~Ca(C 18 H 35 O 2 ) 2 E-470a201224 CALCIO FORMIATO C 2 H 2 CaO 4 E-238201228 tri-CALCIO FOSFATO ~Ca 3 (PO 4 ) 2 E-341iii201227 CALCIO HIDROGENO FOSFATOanhidro CaHPO 4 E-341ii201226 CALCIO HIDROGENO FOSFATO2-hidrato CaHPO 4 .2H 2 O E-341ii201225 CALCIO bis (di-HIDROGENOFOSFATO) 1-hidrato (Calcio Difosfato) CaH 4 (PO 4 ) 2 .H 2 O E-341i202400 CALCIO HIDROXIDO polvo Ca(OH) 2 E-526201230 CALCIO LACTATO 5-hidrato Ca(CH 3 CHOHCOO) 2 .5H 2 O E-327203238 CALCIO PROPIONATO E-282201235 CALCIO SULFATO 2-hidrato CaSO 4 .2H 2 O E-516201237 CARBON ACTIVO polvo202416 CARBOXIMETILCELULOSA SALSODICA (baja viscosidad) E-466204441 CARBOXIMETILCELULOSA SALSODICA (media viscosidad) E-466203922 CARBOXIMETLCELULOSA SALSODICA (alta viscosidad) E-466203645 L-CISTINA C 6 H 12 N 2 O 4 S 2 E-921202825 2,6-Di-ter-BUTIL-4-METILFENOL (BHT, Butilhidroxitoluol) C 15 H 24 O E-321201286 1,2 DICLOROETANO ClCH 2 ClCH 2201254 DICLOROMETANOestabilizado con amileno CI 2 CH 2201877 1-DODECANOL C 12 H 26 O201303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato SnCl 2 .2H 2 O E-512201086 ETANOL absoluto CH 3 CH 2 OH201085 ETANOL 96% v/v CH 3 CH 2 OH202695 ETANOL 70% v/v CH 3 CH 2 OH201318 ETILO ACETATO CH 3 COOC 2 H 5201319 ETILO S-(-)-LACTATO C 5 H 10 O 3202047 L-FENILALANINA C 9 H 11 NO 2202728 D(-)-FRUCTOSA C 6 H 12 O 6202060 GELATINA 80-100 Blooms201339 GLICERINA (Glicerol) C 3 H 8 O 3 E-422202329 GLICERINA 87% (Glicerol) C 3 H 8 O 3 E-422201922 GLICERINA tri-ACETATO C 9 H 14 O 6 E-1518201340 GLICINA H 2 NCH 2 COOH E-640

MCódigo Producto Sinónimos FórmulaN.º deidentificación201341 D(+)-GLUCOSA C 6 H 12 O 6203140 D(+)-GLUCOSA 1-hidrato C 6 H 12 O 6 .H 2 O202061 GOMA ARABIGA polvo E-414201076 HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v(100 vol.) estabilizado H 2 O 2201362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato FeSO 4 .7H 2 O202045 L-HISTIDINA C 6 H 9 N 3 O 2202198 L-HISTIDINA mono-CLORHIDRATO 1-hidrato C 6 H 10 ClN 3 O 2 .H 2 O201375 LACTOSA 1-hidrato C 12 H 22 O 11 .H 2 O202046 L-LEUCINA C 6 H 13 NO 2203385 D-(+)-LIMONENO C 10 H 16201396 MAGNESIO CLORURO 6-hidrato MgCl 2 .6H 2 O E-511202029 MAGNESIO ESTEARATO ~Mg(C 18 H 35 O 2 ) 2 E-470b201399 tri-MAGNESIO di-FOSFATO (Magnesio Mg 3 (PO 4 ) 2 .5H 2 O5-hidratoorto-fosfato)201927 MAGNESIO HIDROGENO FOSFATO3-hidrato MgHPO 4 .3H 2 O E-343ii201395 MAGNESIO HIDROXI CARBONATO5-hidrato (Magnesio Carbonato) E-504ii201404 MAGNESIO SULFATO 7-hidrato MgSO 4 .7H 2 O E-518201410 MANGANESO (ll) CLORURO 4-hidrato MnCl 2 .4H 2 O201413 MANGANESO (ll) SULFATO 1-hidrato MnSO 4 .H 2 O202067 D(-)-MANITA (Manitol) C 6 H 14 O 6 E-421201091 METANOL CH 3 OH203332 METILO 4-HIDROXIBENZOATO C 8 H 8 O 3 E-218203209 PARAFINA 51- 53°C lentejas201479 POTASIO ACETATO CH 3 COOK E-261201487 POTASIO BROMATO KBrO 3 E-924201490 POTASIO CARBONATO K 2 CO 3 E-501i201492 tri-POTASIO CITRATO 1-hidrato K 3 C 6 H 5 O 7 .H 2 O E-332ii201494 POTASIO CLORURO KCl E-508201522 POTASIO DISULFITO K 2 S 2 O 5 E-224201513 tri-POTASIO FOSFATO 1-hidrato K 3 PO 4 .H 2 O E-340iii201505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)3-hidrato (Potasio Ferrocianuro) K 4 Fe(CN) 6 .3H 2 O E-536201480 POTASIO HIDROGENO CARBONATO (Potasio Bicarbonato) KHCO 3 E-501ii201512 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATOanhidro(di-Potasio orto-Fosfato) K 2 HPO 4 E-340ii202333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO3-hidrato K 2 HPO 4 .3H 2 O E-340ii201509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Potasioorto-Fosfato) KH 2 PO 4 E-340i201486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO (COO) 2 KH(CHOH) 2 E-336i201515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas KOH E-525201524 POTASIO NITRATO KNO 3 E-252201855 POTASIO NITRITO KNO 2 E-249201729 POTASIO SODIO TARTRATO4-hidrato NaK(COO) 2 (CHOH) 2 .4H 2 O E-337201531 POTASIO SORBATO CH 3 (CHCH) 2 COOK E-202201532 POTASIO SULFATO K 2 SO 4 E-515i201533 POTASIO SULFITO201537 POTASIO TARTRATO 1/2-hidrato K 2 (COO) 2 (CHOH) 2 .1/2H 2 O E-336ii201540 POTASIO YODATO KIO 3201542 POTASIO YODURO KI193

Código Producto Sinónimos FórmulaN.º deidentificación194203646 L-PROLINA C 5 H 9 NO 2201545 1,2-PROPANODIOL CH 2 OHCHOHCH 3201090 2-PROPANOL CH 3 CH 2 CH 2 OH201633 SODIO ACETATO anhidro CH 3 COONa E-262i201632 SODIO ACETATO 3-hidrato CH 3 COONa.3H 2 O E-262i203865 SODIO L(+)-ASCORBATO C 6 H 7 NaO 6 E-301201637 SODIO BENZOATO C 6 H 5 COONa E-211201648 SODIO CARBONATO anhidro Na 2 CO 3 E-500i202032 SODIO CARBONATO 1-hidrato Na 2 CO 3 .H 2 O E-500i201647 SODIO CARBONATO 10-hidrato Na 2 CO 3 .10H 2 O E-500i201655 tri-SODIO CITRATO 2-hidrato Na 3 C 6 H 5 O 7 .2H 2 O E-331iii201656 tri-SODIO CITRATO 51/2-hidrato Na 3 C 6 H 5 O 7 .5 1 / 2 H 2 O E-331iii201659 SODIO CLORURO NaCl201698 SODIO DISULFITO Na 2 S 2 O 5 E-223202363 SODIO DODECILO SULFATO (Lauril SulfatoSódico)C 12 H 25 NaO 4 S201681 tri-SODIO FOSFATO 1-hidrato Na 3 PO 4 .H 2 O E-339iii201680 tri-SODIO FOSFATO 12-hidrato Na 3 PO 4 .12H 2 O E-339iii201665 SODIO HIDROGENO di-ACETATO (Sodio Diacetato) CH 3 COONaCH 3 COOH E-262ii201638 SODIO HIDROGENO CARBONATO (Sodio Bicarbonato) NaHCO 3 E-500ii201654 di-SODIO HIDROGENO CITRATO 11/2 Hidrato C 6 H 6 Na 2 O 7 .1 1 / 2 H 2 O E-331ii201679 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO (di-Sodioanhidro orto-Fosfato) Na 2 HPO 4 E-339ii201678 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO12-hidrato Na 2 HPO 4 .12H 2 O E-339ii201965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Sodio1-hidrato orto-Fosfato) NaH 2 PO 4 .H 2 O E-339i201677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO2-hidrato NaH 2 PO 4 .2H 2 O E-339i201709 di-SODIO di-HlDROGENO PIROFOSFATO H 2 Na 2 O 7 P 2 E-450i201687 SODIO HIDROXIDO lentejas NaOH E-524201686 SODIO HIDROXIDO escamas NaOH E-524203307 SODIO LACTATO sol. 50% p/p C 3 H 5 NaO 3 E-325201702 SODIO NITRATO NaNO 3 E-251201703 SODIO NITRITO NaNO 2 E-250201711 tetra-SODIO PIROFOSFATO anhidro (tetra-SodioDifosfato) Na 4 P 2 O 7 E-450iii201710 tetra-SODIO PIROFOSFATO (tetra-Sodio10-hidrato Difosfato) Na 4 P 2 O 7 .10H 2 O E-450iii201684 SODIO POLIFOSFATO (NaPO 3 ) 6 E-452i201716 SODIO SULFATO anhidro Na 2 SO 4 E-514i201715 SODIO SULFATO 10-hidrato Na 2 SO 4 .10H 2 O E-514i201717 SODIO SULFITO anhidro Na 2 SO 3 E-221201720 SODIO TARTRATO anhidro Na 2 (COO) 2 (CHOH) 2 E-335ii201719 SODIO TARTRATO 2-hidrato Na(COO) 2 (CHOH) 2 .2H 2 O E-335ii201721 SODIO TIOSULFATO 5-hidrato Na 2 S 2 O 3 .5H 2 O203064 D(-)-SORBITA (Sorbitol) C 6 H 14 O 6 E-420i201733 TALCO lavado E-553b202475 TIERRA SILICEA purificada y calcinada202101 TITANIO (IV) OXIDO TiO 2 E-171202049 L-TRIPTOFANO C 11 H 12 N 2 O 2202048 VAINILLINA C 8 H 8 O 3201786 ZINC OXIDO ZnO201788 ZINC SULFATO 1-hidrato ZnSO 4 .H 2 O201787 ZINC SULFATO 7-hidrato ZnSO 4 .7H 2 O

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