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[SAS-1 urine analysis]. - Agentúra Harmony vos

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<strong>SAS</strong>-1 URINANALYSEb) <strong>SAS</strong>-4 (Auto-Stainer)Schritt Dauer (mm:ss) Temperatur (°C) AndereFärben 04:00 Umlauf EINEntfärben 02:00 Umlauf EINEntfärben 02:00 Umlauf EINTrocknen 12:00 64c) ManuellDem für den <strong>SAS</strong>-2 Auto-Stainer angegebenen Ablauf folgen. Zum Fixieren, Färben, Entfärben undWaschen ein Färbebad, und zum Trocknen einen Trockenschrank mit Umluft und einerTemperatur von 60...70°C verwenden.11. Am Ende des Färbevorgangs das Gel aus der Färbekammer nehmen. Das Gel kann nunausgewertet werden.Protokoll für die Immunfixation8. Das Gerät mit den folgenden Parametern programmieren.i) Nur für <strong>SAS</strong>-1 Plus:Inkubation Schritt 1 10 Min, 37°C (inkubieren)Inkubation Schritt 2 8 Min., 40°C (D-Blot)ii) Nur für <strong>SAS</strong>-3:Schritt Dauer (mm:ss) Temperatur (°C)Antiseren auftragen 10:00 21Kämme einstecken 02:00 21Blotter D 05:00 40Trocknen 08:00 549. (Nur für <strong>SAS</strong>-3: Die Führungsschiene entfernen). Schablone zum Auftragen des Antiserums aufdie Geloberfläche positionieren. BITTE BEACHTEN: Die gestanzten Rinnen für das Antiserumsollten zentriert über dem beschrifteten Rahmen auf dem Gel ausgerichtet werden, in der dieProben aufgetragen werden.10. 2 Tropfen (oder 50µl) des entsprechenden Antiserums / Fixativs in die Öffnung derImmunglobinspuren geben. Sicherstellen, dass die Spuren vollständig mit Antiserum gefüllt sind.11. Nur für <strong>SAS</strong>-1: Gel inkubieren: 15...30°C, 10 Minuten.Nur für <strong>SAS</strong>-1 Plus: Gel inkubieren.12. Nach der Inkubation einen Blotterkamm in die Öffnungen der Antiserumschablone stecken.2 Minuten lang den Antiseren-Überschuss aufsaugen lassen, dann Blotterkämme und Schablonevon der Geloberfläche entfernen.13. i) Nur für <strong>SAS</strong>-1: Die Gel-Blöcke mit dem Gelblockentferner entfernen. Gel 5 Minuten inWaschlösung waschen.ii) Nur für <strong>SAS</strong>-1 Plus und <strong>SAS</strong>-3: Eine Blotter D (mit der glatten Seite nach unten) auf dieGeloberfläche legen, nach 10 Sekunden entfernen.14. i) Nur für <strong>SAS</strong>-1: Das Gel auf mit der Agarose-Seite nach oben auf einen Blotter D legen. EinenBlotter B (mit Waschlösung angefeuchtet) auf die Geloberfläche legen, gefolgt von 2 Blotter X.Das Gel 10 Minuten mit dem Entwicklungsgewicht pressen.ii) Nur für <strong>SAS</strong>-1 Plus und <strong>SAS</strong>-3: Blotter D mit der glatten Seite nach unten auf die Geloberflächelegen und zum Flachhalten des Blotters die Antiserum-Schablone wieder auflegen. Gel blotten.21Deutsch

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