[SAS-1 urine analysis]. - Agentúra Harmony vos

SAS-1 ANALYSE D’URINEPRÉLÈVEMENTS DES ÉCHANTILLONSL’utilisation d’urine fraîchement recueillie est fortement recommandée. Les échantillons peuvent êtreconservés 72 heures entre 2...6°C ou 2 semaines à -20°C. Les échantillons peuvent être utilisés sansconcentration ou dilution, jusqu’à une protéinurie n’excédant pas 1000mg/l. Si une lecture du gel estréalisée à l’aide d’un densitomètre, il est possible de déterminer la protéinurie ou la concentration desbandes protéiques spécifiques en incorporant le standard interne Protéine urinaires (réf. 3032) àchaque échantillon. Se référer à la procédure jointe à chaque flacon de standard interne Protéinesurinaires.MÉTHODOLOGIE1. Pipeter 35µl d’échantillon dans les puits correspondants du porte-échantillon du SAS-1 ou dans lescupules échantillons jetables.i) Pour les utilisateurs SAS-1 et SAS-1 Plus: Placer avec précaution le porte-échantillon sur le chariotapplicateur. S’assurer qu’il est solidement mis en place.ii) Pour les utilisateurs SAS-3: Mettre en place le porte-échantillon avec précaution à l’aide des ergotsde guidage de l’embase. S’assurer qu’il est solidement mis en place.2. Sortir le gel de son emballage puis:i) Pour les utilisateurs SAS-1: Placer le gel dans le SAS-1, agarose vers le haut, en respectant lespolarités.ii) Pour les utilisateurs SAS-1 Plus: Déposer 400µl de REP-prep dans le dissipateur thermique. Placerle gel sur le dissipateur thermique, agarose vers le haut, en respectant les polarités et en veillant àce qu’il n’y ait pas de bulles d’air sous le gel.iii) Pour les utilisateurs SAS-3: Placer le guide d’alignement sur les picots et déposer 400µl de REPprepau centre de la chambre. Placer le gel dans la chambre, agarose vers le haut, en respectantles polarités et en veillant à ce qu’il n’y ait pas de bulles d’air sous le gel.3. Sécher la surface du gel à l’aide d’un buvard C, jeter le buvard.4. i) Pour les utilisateurs SAS-1: Fixer les électrodes sur la partie supérieure des plots que sortequ’elles soient en contact avec les ponts d’agarose.ii) Pour les utilisateurs SAS-1 Plus: (même chose que ci-dessus). Mettre le couvercle sur le gel et lesélectrodes et faire pression 5 secondes pour assurer un bon contact.iii) Pour les utilisateurs SAS-3: Fixer les électrodes sur les plots que sorte qu’elles soient en contactavec les ponts d’agarose.5. Mettre en place deux applicateurs dans l’instrument (Pour les utilisateurs SAS-3: encoches A et 10).6. Faire migrer:i) Pour les utilisateurs SAS-1:Analyse d’urine: (avec la norme interne, Réf. 3032) 100 volts, 16 min., 10 dépôts.Analyse d’urine: (sans norme interne, Réf. 3032) 100 volts, 17 min., 10 dépôts.Immunofixation: 80 volts, 17 min., 10 dépôts.ii) Pour les utilisateurs SAS-1 Plus:Analyse d’urine: (avec la norme interne, Réf. 3032) 100 volts, 20 min., 20°C, 10 dépôts.Analyse d’urine: (sans norme interne, Réf. 3032) 100 volts, 21 min., 20°C, 10 dépôts.Immunofixation: 80 volts, 20 min., 20°C, 10 dépôts.11Français