(Eh) y metanólico (Em) de Pera distichophylla sobre un aislado de ...

C. M. WAGNER et al.
Porcentaje (%) de lisis= Nº de amibas (T y Q) iniciales - Nº de amibas (T y Q) finales x 100
Nº de amibas (T y Q) iniciales
T: trofozoítos
Q: quistes
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RESULTADOS Y DISCUSIóN
El uso de productos naturales y/o sus derivados
en el tratamiento de pacientes con queratitis
acantamibiana y ulceras corneales ha sido evaluado
tanto in vitro (Polat et al., 2007a,b; 2008; My Chu,
1998; Derda et al., 2004) como in vivo (Vural et
al., 2007). De estos reportes, se deriva la necesidad
de evaluar la susceptibilidad de cada especie de
Acanthamoeba a los diferentes extractos de una
misma planta, ya que estudios previos con plantas
de la familia Apocynaceae muestran que in vitro no
poseen la misma actividad contra microorganismos
similares. La disponibilidad de algunos extractos de
la planta Pera distichophylla y sus antecedentes de
actividad antiparasitaria ofrecieron la posibilidad
de evaluar sus efectos in vitro sobre un aislado
de Acanthamoeba spp, A27, productor de úlcera
corneal (Luna, 2003; Rodríguez et al., 2006).
La morfología de los trofozoítos y quistes del
aislado A27 se observó al microscopio óptico
a 400 aumentos, antes de ser expuesto al Ec. En
los quistes se apreció una doble pared quística,
conformada por un exoquiste, moderadamente
ondulado y un endoquiste poliédrico o estrellado.
Se destacó un citoplasma granular y vacuolar, pero
sin distinguirse el núcleo. Cuando se realizaron las
medidas de los mismos, presentaron un diámetro
entre 12,5 y 20 µm, con un tamaño promedio de 16
µm (Figura 1).
Los trofozoítos mostraron una movilización
lenta, a través de la emisión de uno o dos pseudópodos
hialinos, con abundantes acantopodios a lo largo de
toda la célula. El endoplasma se observó granular,
con una o dos vacuolas contráctiles. Las medidas
oscilaron entre 17,5 y 37,7 µm, teniendo un valor
medio de 27 µm (Figura 2), concordando estas
descripciones de trofozoítos y quistes del género
Acanthamoeba con las hechas por otros autores
(Rondanelli y Scala, 1987).
Después de haber sido expuestos al efecto del
Ec a concentraciones de 1 y 10 mg/ml, se realizó la
observación microscópica y micrometría para los
quistes y trofozoítos. Los parámetros morfométri-
Figura 1. Quistes de Acanthamoeba spp, aislado A27,
antes de la exposición al extracto Ec de Pera distichophylla.
Examen directo en medio líquido de Page modificado.
1.000 aumentos. Quiste con 4 puntas, donde se evidencia
ecto (a) y endoquiste (b), con poro u ostiolo (c) .
cos de los trofozoítos y quistes se resumen en la
Tabla 1. La morfología de los quistes no varió a
ninguna de las dos concentraciones del Ec evaluadas:
ni en el control con el DMSO 3%. El tamaño
y las características morfológicas de la pared y del
interior de los quistes variaron poco comparados
con los quistes control y los expuestos al DMSO,
debido probablemente a la naturaleza quitinosa de
la pared quística, lo cual le confiere resistencia a la
penetración del Ec. Para complementar estas observaciones
y al no determinarse cambios morfológicos
visibles en los quistes al microscopio óptico,
se sugiere realizar estudios ultraestructurales, para
detectar si hay modificaciones en alguno de los organelos
celulares.
Respecto a la morfometría de los trofozoítos,
para todos los casos, se observó una disminución
en el tamaño, al ser comparados con el control sin
exponer al tratamiento con Ec y DMSO. Además,
se observó redondeamiento de los mismos, lo cual
se mantuvo a lo largo del experimento, para la con-
Rev. Ibero-Latinoam. Parasitol. (2012); 71 (1): 55-61