(Eh) y metanólico (Em) de Pera distichophylla sobre un aislado de ...

DISCUSIóN
Se ha señalado que el diagnóstico temprano de
una lesión corneal por Acanthamoeba spp. podría
resultar en curación (Kilvigton et al., 2002). Sin
embargo, recientes trabajos demuestran que la amiba
puede permanecer en la cornea de un paciente
curado clínicamente. Los quistes presentes en el
estroma, resistentes a la terapia son considerados
“quistes durmientes” (Shuste y Visvesvara, 2004).
En estos casos, los tratamientos alternativos adquieren
mayor importancia.
El uso de productos naturales y/o sus derivados
en el tratamiento de pacientes con queratitis
acantamibiana y úlceras corneales ha sido evaluado
tanto in vitro (Chu et al., 1998; Derda et al., 2004;
Polat et al., 2007a, 2008) como in vivo (Vural et
al., 2007). De estos reportes, se deriva la necesidad
de evaluar la susceptibilidad de cada especie de
Acanthamoeba a los diferentes extractos de una
misma planta, ya que estudios previos con plantas
de la familia Apocynaceae muestran que in vitro no
poseen la misma actividad contra microorganismos
similares. Adicionalmente, un número de extractos
de plantas relativamente importante se ha reportado
con efecto tumoricida y microbicida, sin embargo,
no mostraron actividad contra Acanthamoeba (Chu
et al., 1998).
La evaluación del efecto del Eh y Em obtenidos
de P. distichophylla sobre el aislado A27 de Acanthamoeba
spp. in vitro, se realizó determinando la
actividad de dos concentraciones diferentes de cada
extracto. La selección de estas concentraciones se
estableció con base en los resultados obtenidos por
Salazar (2004), quien utilizó y evaluó un extracto
crudo alcohólico (Ec) de esta planta sobre el mismo
aislado de Acanthamoeba spp., a concentraciones
de 1 mg/ml y 10 mg/ml (Salazar ,2004).
La acción de varios extractos de plantas como
Thymus sipyleus subsp. sipyleus var. sipyleus, especies
de Allium y plantas del sureste asiático, entre
otras, sobre especies de Acanthamoeba ha sido
evaluada empleando concentraciones que variaron
entre 0,1 hasta 32 mg/ml (Chu et al., 1998; Polat
et al., 2007 a y b). En este estudio, con P. distichophylla,
la evaluación de concentraciones de Eh y
Em a 0,75 y 3,8 mg/ml en vez de 1 y 10 mg/ml, se
debió a que, por ser estos extractos particularmente
pigmentados, no se pudieron emplear las concentraciones
superiores a 5 mg/ml, ya que dificultaron
Rev. Ibero-Latinoam. Parasitol. (2012); 71 (1): 42-54
PERA DISTICHOPHYLLA SOBRE ACANTHAMOEBA DE ÚLCERA CORNEAL
las observaciones al microscopio.
Al exponer los trofozoítos del aislado A27 de
Acanthamoeba spp. a las diferentes concentraciones
del Eh, las modificaciones morfológicas observadas
a partir de las 72 horas, detectadas también en los
controles de DMSO respectivos, parecen ser efecto
de la acción de este solvente. Resultados similares
fueron obtenidos por Salazar (2004), en los que el
mismo aislado expuesto al Ec a la concentración de
1 mg/ml, presentó modificaciones en la morfología
de los trofozoítos ocasionados por el DMSO. Este
mismo efecto parece ocurrir para el extracto Em
sólo a la concentración de 3,8 mg/ml y su control
de DMSO 1,5%, a diferencia del control de DMSO
0,3% donde no se observó variaciones morfológicas
significativas, pero sí a la concentración del Em 0,75
mg/ml, indicando un posible efecto del extracto a
esta concentración sin influencia del DMSO.
Cabe resaltar que a las 96 horas de exposición
a ambas concentraciones del extracto Eh, no se observó
ninguna alteración en los trofozoítos. Con el
Em, se observó este mismo efecto para la concentración
de 0,75 mg/ml. Estos hallazgos sugieren
que los cambios pudieran ser reversibles o que los
extractos afectaron a algunos de los trofozoítos y a
otros no, permaneciendo sin alteraciones morfológicas
los no afectados a las 96 horas. Sin embargo,
a la concentración de 3,8 mg/ml del Em, sí se presentaron
alteraciones morfológicas en el aislado a
las 96 horas, pero a diferencia del efecto de la concentración
de 0,75 mg/ml, que se evidencia desde
las 2 horas hasta las 72 horas de exposición, el efecto
del Em 3,8 mg/ml se manifiesta a partir de las 48
horas, extendiéndose hasta el final del experimento,
indicando un posible retraso en la aparición de las
variaciones morfológicas y por ende, una prolongación
del efecto.
Por otra parte, no se observó ninguna modificación
de las formas quísticas del aislado A27 al
microscopio óptico, durante el tiempo de exposición
a los extractos Eh y Em. Dado que la pared
quística de este protozoario es de naturaleza quitinosa,
conformada por dos capas, el exo y el endoquiste,
esta característica pareciera conferir cierta
resistencia a la penetración tanto de los extractos
como del DMSO. Estas observaciones difieren de
lo reportado por algunos autores para el DMSO y
su efecto en el aumento de la penetración de ciertas
drogas sobre las formas quísticas de Acanthamoeba
spp. resistentes a la propamidina, proponiendo que
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