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Artículo Original 42 Rev. Ibero-Latinoam. Parasitol. (2012); 71 (1): 42-54 Evaluación de la actividad biológica de los extractos hexanólico (Eh) y metanólico (Em) de Pera distichophylla sobre un aislado de Acanthamoeba spp. proveniente de una úlcera corneal DORLA A. 1 , WAGNER C. M. 1 , PÉREZ DE G. M. V. 1 , BLANCO DE M. J. 2 , GALINDO M. V. 1 , NESSI A. 1 , VETHENCOURT M. A., BANDES A. 1 y GUZMáN DE R. C. T. 1 1 Laboratorio de Amibiasis, Cátedra de Parasitología, Escuela de Bioanálisis, Universidad Central de Venezuela. E-mail: bioparas@ucv.ve, angelyseb@gmail.com 2 Grupo de Productos Naturales, Escuela de Química. Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela. ABSTRACT BIOLOGICAL ACTIVITY OF HEXANOLIC (EH) AND METHANOLIC (EM) EXTRACTS FROM PERA DISTICHOPHYLLA AGAINST AN ACANTHAMOEBA SPP. ISOLATE OBTAINED FROM A CORNEAL ULCER Recently, infections due to Acanthamoeba genus have increased, specially ocular affections and pharmacological treatment for them has some limitations. Searching for effective alternatives against this protozoan, we decided to evaluate natural products obtained from plants, having previous reports of amoebicidal activity of some extracts against different species of Acanthamoeba. We evaluated in vitro biological activity of hexanolic (Eh) and methanolic (Em) extract, obtained from Pera distichophylla, an amazonic plant, against an Acanthamoeba spp. (A27) strain, isolated from a patient suffering a corneal ulcer. Trophozoites of isolate A27 exposed to different Eh concentrations presented morphological changes, probably caused by the effect of DMSO as solvent extract, while morphological changes observed after contact with Em seemed to be caused by 0.75 mg/ml Em concentration and not by the DMSO; no changes were observed in the cysts. The 0.75 mg/ml Eh concentration apparently decreased the proliferation of Acanthamoeba spp. and Em produced lysis. Viability tests not yielded important changes. Finally, we recommend evaluating these extracts on other Acanthamoeba spp. isolates, to determine whether these effects are isolate-dependent; performing cytotoxicity tests on corneal cells and in vivo studies in experimental animals, which would provide more information about its activity and prophylactic potential or therapeutic use. Key words: Acanthamoeba spp., corneal ulcer, natural extracts, Pera distichophylla. Recibido: 15 de Junio de 2011. Aceptado: 15 de Mayo de 2012. Correspondencia: Carolina M. Wagner. Laboratorio de Amibiasis, Cátedra de Parasitología, Escuela de Bioanálisis, Universidad Central de Venezuela. E-mail: bioparas@ucv.ve, angelyseb@gmail.com
RESUMEN En los últimos años, las infecciones por Acanthamoeba spp. se han incrementado, especialmente las oculares y el tratamiento farmacológico utilizado tiene ciertas limitaciones. En la búsqueda de alternativas para un tratamiento efectivo contra este protozoario, surgió la inquietud de evaluar productos naturales provenientes de plantas, ya que se ha reportado la existencia de actividad amebicida de algunos extractos sobre diferentes especies de Acanthamoeba. Se planteó una evaluación in vitro de la actividad biológica de los extractos hexanólico (Eh) y metanólico (Em) obtenidos de Pera distichophylla, una planta del Amazonas, sobre un aislado de Acanthamoeba spp. (A27), proveniente de una paciente con úlcera corneal. Los trofozoítos del aislado A27 expuestos a las diferentes concentraciones del Eh presentaron modificaciones morfológicas, probablemente originadas por el efecto del DMSO como solvente del extracto, mientras que los cambios morfológicos observados después del contacto con el Em sí parecen ser ocasionados por la concentración de 0,75 mg/ml y no por el DMSO; en los quistes no se observó ninguna modificación. El Eh a la concentración de 0,75 mg/ml, aparentemente disminuyó la proliferación de Acanthamoeba spp. y el Em, produjo lisis. Los ensayos de viabilidad no arrojaron cambios importantes. Finalmente, se recomienda evaluar estos extractos sobre otros aislados de Acanthamoeba spp., para determinar si estos efectos son aislado-dependientes, realizar ensayos de citotoxicidad sobre células corneales y ensayos in vivo en animales de experimentación, lo cual permitiría obtener mayor información sobre su actividad y posible uso profiláctico y/o terapéutico. Palabras clave: Acanthamoeba spp., úlcera corneal, extractos naturales, Pera distichophylla. INTRODUCCIóN Las amibas de vida libre (AVL) son protozoarios descritos como parásitos facultativos y patógenos oportunistas (Page,1974; Shuster y Wisvesvara, 2004). Entre las AVL que pueden afectar al hombre se encuentran las del género Acanthamoeba spp., que son las más ampliamente distribuidas en la naturaleza (Page, 1988). En el ojo, pueden ocasionar queratitis y úlceras corneales, afectando la visión en distintos grados y aunque la queratitis por Acanthamoeba spp. es poco común, se considera una infección de la córnea potencialmente grave. Desde 1980 hasta el año 2000, se han reportado un aproximado de 3.000 casos de queratitis por Acanthamoeba (Shuster y Wisvesvara, 2004 Jersic, 2007) afectando a individuos de cualquier edad, pero es mas común en adultos jóvenes, usualmente con buen estado de salud e inmunocompetentes (Shuster y Wisvesvara, 2004; Ishibashi, 1997). Estudios recientes sugieren un estimado de 1,2 adultos por millón por año para infecciones severas por este género (Mathers, 2004), relacionados en su mayoría con el uso de lentes de contacto (Pérez de Galindo, 1995; Oddó, 2006; Jersic, 2007), con una incidencia entre 0,2 y 0,3 por cada 10.000 usuarios Rev. Ibero-Latinoam. Parasitol. (2012); 71 (1): 42-54 PERA DISTICHOPHYLLA SOBRE ACANTHAMOEBA DE ÚLCERA CORNEAL de lentes de contacto por año (Seal, 2003; Mathers, 2004). En Venezuela, no se conoce bien la frecuencia de las infecciones oftalmológicas ocasionadas por Acanthamoeba spp., existiendo sólo algunos reportes (Pérez de Galindo, 2005). A pesar de los avances en el tratamiento de las queratitis producidas por Acanthamoeba spp., continúan ocurriendo fallas terapéuticas, necesitando intensificar y prolongar la terapia médica, realizar intervenciones quirúrgicas y enfrentarse a la posible pérdida permanente de la visión o la enucleación del ojo (Seal, 2003; Van der Vijl, et al., 2004). El uso de plantas para el tratamiento de diferentes especies de Acanthamoeba spp. ha sido objeto de varias investigaciones (Chu et al., 1998, Rodríguez et al., 1999, Vural et al., 2007; Polat et al., 2007 ayb, 2008). Venezuela posee en el Amazonas, una gran diversidad de especies vegetales, muchas de ellas con propiedades curativas; Pera spp. es un género botánico perteneciente a la familia Euphorbiaceae (Luna, 2003), dentro del cual, muchas especies han sido utilizadas en la medicina tradicional para la cura de enfermedades. Las quinonas han sido los compuestos aislados de este género con mayor actividad biológica (Rodríguez et al., 2006). Pera distichophylla se ubica en bosques de tierra 43
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