(Eh) y metanÃ³lico (Em) de Pera distichophylla sobre un aislado de ...

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A. MUÑOZ et al. Evaluación de la susceptibilidad de aislados de T. cruzi en estadio de tripomastigote - El rango de actividad de los fármacos NF y BZ contra tripomastigotes de T. cruzi se muestra en la Tabla 3. Los resultados reflejan un aumento en los valores de CI 50 para el fármaco NF (46,54 ± 0,56 a 213,96 ± 21,28 µM) y BZ (49,32 ± 3,90 a >3.800 µM) estadísticamente significativo (p < 0,05), con respecto a los obtenidos para el estadio de epimastigote. Los valores de CI 50 para los aislados de transmisión oral al fármaco NF presentaron variaciones significativas (46,54 ± 0,56 y 213,96 ± 21,28 µM, para el aislado 1.593 y 1.595 respectivamente). Adicionalmente, se pudo evidenciar que los aislados de transmisión oral 1.593 y 1.595 reflejaron los valores más bajos de CI 50 a los fármacos NF y BZ respectivamente. En cuanto al aislado de transmisión vectorial (PM), no se encontró diferencia estadísticamente significativa en sus valores de CI 50 en comparación con los obtenidos para el aislado EP, para ambos fármacos. Es interesante resaltar que estos dos aislados (PM y EP) bajo las condiciones experimentales evaluadas en este trabajo, resultaron ser poco susceptibles al fármaco BZ con valores de CI 50 mayores a 3800 µM, la cual fue la máxima concentración utilizada para este fármaco en los ensayos. Comparación de la susceptibilidad al fármaco Nz y Bz por parte de los estadios epimastigote y tripomastigote de los aislados de T. cruzi - Los análisis comparativos se llevaron a cabo tomando en cuenta los valores de CI 50 mostrados en las tablas 3 y 4 y por observación del comportamiento de la variable porcentaje (%) de viabilidad celular a diferentes concentraciones de cada fármaco. Para el caso de NF (Figura 1), es posible 18 observar un comportamiento dosis-dependiente claramente marcado en ambos estadios parasitarios y para cada uno de los aislados evaluados, con valores de correlación de Pearson entre 0,70 y 0,85, los cuales estadísticamente no son significativos, pero reflejan que el aumento de la concentración de los fármacos tiene un efecto relacionado con la disminución de la viabilidad celular. Es interesante resaltar que todos los aislados evaluados en este estudio, cualquiera que fuese su comportamiento dosis-respuesta alcanzaron el 0% de viabilidad celular a la máxima concentración evaluada. Con respecto a las tendencias obtenidas para el fármaco BZ (Figura 2), es posible observar un comportamiento por parte de los aislados en estadio epimastigote y tripomastigote completamente diferente al descrito anteriormente. Las diferencias observadas pueden dividir en dos aspectos, el primero de ellos corresponde al aislado evaluado y el segundo a la efectividad del fármaco reflejado como porcentaje (%) de viabilidad celular. Con respecto al tipo de aislado utilizado, se puede evidenciar que para el estadio epimastigote los aislados PM y EP siguen una tendencia dosis-dependiente similar a la mostrada para el fármaco NF, presentando valores de correlación de Pearson estadísticamente significativos (p < 0,05); aunque es evidente una menor efectividad, ya que para la máxima concentración evaluada solamente se alcanzó aproximadamente 80% de susceptibilidad o 20% de viabilidad celular (Figura 2a). Esta misma tendencia se obtiene en el estadio de tripomastigote, aunque la efectividad del fármaco fue 4 veces menor en comparación con el estadio de epimastigote (Figura 2b). Para los aislados de transmisión oral se evidencian dos comportamientos diferentes: a) para el caso del estadio Tabla 3. Susceptibilidad in vitro de aislados humanos y cepas de referencia de T. cruzi en estadio tripomastigote contra Nifurtimox y Benznidazol Aislado Hospedador (fase de la ECh) CI50 (µM) (media ± DS) NF BZ EP ND 61,26 ± 1,25 >3800 PM Vectorial 60,84 ± 1,27 >3800 1593 Oral 46,54 ± 0,56 650,53 ± 6,25 1595 Oral 213,96 ± 21,28 49,32 ± 3,90 ND: No determinado. Los valores de CI50 fueron calculados a partir de tres ensayos independientes. Rev. Ibero-Latinoam. Parasitol. (2012); 71 (1): 14-22
Figura 1. Curvas de viabilidad celular de aislados de T. cruzi frente a concentraciones crecientes del fármaco Nifurtimox. a) Estadio de epimastigote; b) Estadio de tripomastigote. Cada punto de la curva fue calculado a partir de tres ensayos independientes, con su respectiva desviación estándar. Figura 2. Curvas de viabilidad celular de aislados de T. cruzi frente a concentraciones crecientes del fármaco Benznidazol. A) Estadio de epimastigote; B) Estadio de tripomastigote. Cada punto de la curva fue calculado a partir de tres ensayos independientes, con su respectiva desviación estándar. de epimastigote los dos aislados presentan un comportamiento similar, con valores de correlación de Pearson entre 0,54 y 0,62 para el aislado 1.593 y 1.595 respectivamente, sugiriendo que los aislados no se ven afectados directamente al aumentar las concentraciones de los fármacos, quedando algo menos del 50% de la población parasitaria sin ser afectada por el fármaco (Figura. 1a); b) al observar las tendencias obtenidas para el estadio de tripomastigote (Figura 2b) el aislado 1.593 presenta un comportamiento dosis-dependiente con una correlación Rev. Ibero-Latinoam. Parasitol. (2012); 71 (1): 14-22 SUSCEPTIBILIDAD IN VITRO T. CRUZI ISOLATES FROM VENEZUELA de Pearson de 0,99, aunque alcanzando el 50% de efectividad a una concentración de 650,53 ± 6,25 µM, lo que se traduce en 14 veces más cantidad de fármaco comparado con la CI 50 para el fármaco NF (Tabla 3) y 18 veces más concentración de fármaco BZ con respecto al estadio de epimastigote (Tabla 2). La tendencia del aislado oral 1595 en estadio de tripomastigote es similar a la mostrada en el estadio de epimastigote, obteniéndose una correlación de Pearson de 0,432, comprobándose estadísticamente que a partir de una concentración de 38,42 µM has- 19
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