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LCA Catalina Leos RivasTesis Doctoral(G) que es el tiempo requerido para que una célula se divida o una población seduplique y fue determinado mediante la siguiente fórmula:Tiempo de generación (G) = t .. 3.3logNb/NaDonde:G = Tiempo de generaciónt = Tiempo determinado3.3 = ConstanteNb = Número de células a un tiempo determinadoNa = Número de células iniciales5.8.3 Determinación de Citotoxicidad en Cultivo CelularSe determinó el porcentaje de viabilidad de los extractos en estudio sobre lascélulas Vero mediante el ensayo de CellTiter-Blue.Se utilizó el medio de cultivo M-199 suplementado con 4 % de suero fetalbovino. Las células utilizadas en el estudio fueron obtenidas a partir de cultivosconfluentes de aproximadamente 80-90 %, utilizando tripsina al 0.025 %, su viabilidad(mayor al 98 %) se determinó por el método de exclusión con colorante de azul tripano.Se colocaron en volúmenes de 100 µl de la suspensión celular (3x10 3 cel/pozo)en microplacas de 96 pozos (Costar Corning Inc), se incubaron a 37°C con 5 % de CO 2durante 24 h, posteriormente se agregaron 100 µl de medio de cultivo M-199, mas 100µl de los extractos; estos se diluyeron en buffer de fosfatos salino (PBS) a una62