1 kb DNA Ladder (Ref. 31.005) - Biotools
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1 <strong>kb</strong> <strong>DNA</strong> <strong>Ladder</strong> (<strong>Ref</strong>. <strong>31.005</strong>)Concentración: 0.5 mg/ml (50µg)C/ Valle de Tobalina, 52 - Nave 39 E-28021 Madrid (Spain)Tel: (34) 91 710 00 74 Fax: (34) 91 505 31 18e-mail: info@biotools.eu www.biotools.euConservar a -20ºCDescripciónEl 1 <strong>kb</strong> <strong>DNA</strong> <strong>Ladder</strong> se obtiene a partir de vectores de ADN digeridoscompletamente con enzimas de restricción hasta generar bandas entre 250bp y 10 <strong>kb</strong>, aptas para ser utilizadas como marcadores de peso molecular engeles de agarosa. Este marcador se compone de 14 fragmentos individualespurificados por cromatografía (en pares de bases): 10000, 8000, 6000, 5000,4000, 3500, 3000, 2500, 2000, 1500, 1000, 750, 500 y 250. Los fragmentosde 1000, 3000 y 6000 bp presentan una intensidad superior y se comportancomo bandas de referencia.1<strong>kb</strong> <strong>DNA</strong> <strong>Ladder</strong>0.5µg/carrilgel de agarosa al 1%teñido con bromuro de etidioBuffer de Almacenamiento (buffer TE)Tris-HCl (pH 7.6) 10 mM, EDTA 1 mM
AlmacenamientoAlmacenar a -20ºC. Para uso frecuente y a fin de evitar ciclos decongelación/ descongelación se recomienda realizar alícuotas, o bienalmacenar a 4ºC en presencia de buffer de carga (estable durante 4 meses).Protocolo de uso1- Preparar la siguiente mezcla (para carriles de 5mm de longitud*):• 1 <strong>kb</strong> <strong>DNA</strong> <strong>Ladder</strong> 1 µl (0.5 µg)• Buffer de carga 6X 1 µl• Agua destilada 4 µl2- Mezclar suavemente3- No calentar4- Cargar la totalidad de la mezcla en el carril del gel de agarosa5- Visualizar el ADN por tinción con bromuro de etidio o con SYBR® Green I.*La mezcla debe ser escalada en función del ancho del carril. Utilizaraproximadamente 0.1µg de ADN /mm de longitud del carril.Si bien el 1<strong>kb</strong> <strong>DNA</strong> <strong>Ladder</strong> no está diseñado para la cuantificación precisa deADN, puede utilizarse para una cuantificación aproximada (ver Tabla 1).Para cuantificar se recomienda ajustar la masa de ADN en la muestra a labanda del marcador de tamaño más próximo.Tabla 1. Porcentaje y masa de fragmentos individuales para 0,5 µg de 1 <strong>kb</strong> <strong>DNA</strong> <strong>Ladder</strong>Fragmento Tamaño %masa(ng/0.5µg)1 10000 6 302 8000 6 303 6000 14 704 5000 6 305 4000 6 306 3500 6 307 3000 14 708 2500 5 259 2000 5 2510 1500 5 2511 1000 12 6012 750 5 2513 500 5 2514 250 5 25Aviso a usuariosUso exclusivo en investigación y aplicaciones in vitro.Ed. 06 – Junio 10
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