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Contenido - Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal

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FITOSANIDAD vol. 10, no. 4, diciembre 2006VARIABILIDAD DE LAS ISOENZIMAS ESTERASAS DE BEAUVERIABASSIANA (BALSAMO) VUILLEMINMaría E. Estrada Martínez y Dolores Piñón Gómez<strong>Instituto</strong> Nacional <strong>de</strong> <strong>Investigaciones</strong> <strong>de</strong> la Caña <strong>de</strong> Azúcar. Carretera CAI Manuel Martínez PrietoKm 2½, Boyeros, Ciudad <strong>de</strong> La Habana, CP 19390, fax: (53-7) 260 2571, meem@inica.edu.cuRESUMENSe <strong>de</strong>terminó la variabilidad <strong>de</strong> las isoenzimas esterasas <strong>de</strong>lhifomiceto entomopatógeno Beauveria bassiana (Balsamo) Vuilleminmediante electroforesis vertical en gel <strong>de</strong> poliacrilamida a 8,5%. Seanalizaron los zimogramas <strong>de</strong> 21 aislamientos <strong>de</strong> diferentes orígenesgeográficos y entomológicos. A partir <strong>de</strong> la matriz <strong>de</strong> los datosoriginales se calculó la distancia genética y se realizó el análisis <strong>de</strong>agrupamiento <strong>de</strong> los individuos mediante el método <strong>de</strong> los promedios<strong>de</strong> las distancias no pon<strong>de</strong>radas. La presencia <strong>de</strong> 24 bandas diferencialesy <strong>de</strong> seis grupos <strong>de</strong> diversidad molecular evi<strong>de</strong>nciaron la variabilidadgenética <strong>de</strong> B. bassiana para el sistema enzimático estudiado.Palabras claves: Beauveria bassiana, variabilidad, esterasas, Diatraeasaccharalis, caña <strong>de</strong> azúcarABSTRACTIsoenzyme esterases variability of hyphomycete fungus Beauveriabassiana (Balsamo) Vuillemin was <strong>de</strong>terminated by means verticalelectrophoresis on 8.5% polyacrylami<strong>de</strong> gel. Twenty one isolates fromdifferent geographical and entomology origin groups were analyzed.Starting from the matrix of the original data the genetic distance wascalculated. The analysis of individuals cluster was carried out bymeans of the unweighted pair–group method, arithmetic average. Thepresence of 24 differential bands and six groups of molecular diversityevi<strong>de</strong>nced the genetic variability of B. bassiana for the studie<strong>de</strong>nzymatic system.Keys words: Beauveria bassiana, variability, esterases, Diatraeasaccharalis, sugar caneINTRODUCCIÓNBeauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin es un hifomicetoentomopatógeno ampliamente utilizado en lalucha biológica contra los insectos plaga <strong>de</strong> los cultivosagrícolas [Moino et al., 2002; Sáenz <strong>de</strong> Cabezón et al.,2003; Estrada et al., 2004; Kauffman et al., 2005]. EnCuba se utiliza para disminuir las poblaciones larvales<strong>de</strong> Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Cambridae), barrenador<strong>de</strong> la caña <strong>de</strong> azúcar (Saccharum sp. híbrido).El estudio <strong>de</strong> las isoenzimas esterasas contribuye alconocimiento <strong>de</strong> la variabilidad genética <strong>de</strong> diferentesespecies entomopatógenas [Estrada et al., 1997;Bruce et al., 2003]. Este análisis permite establecerdiferencias no <strong>de</strong>tectables <strong>de</strong>s<strong>de</strong> el punto <strong>de</strong> vistamorfológico.El interés agronómico y ecológico <strong>de</strong> las aplicaciones <strong>de</strong>B. bassiana en el cultivo <strong>de</strong> la caña <strong>de</strong> azúcar precisaconocer las diferencias isoenzimáticas entre los aislamientos<strong>de</strong>l hifomiceto, <strong>de</strong> forma tal que estos puedanser i<strong>de</strong>ntificados luego <strong>de</strong> su aplicación en el agroecosistemacañero. En este sentido en el presente trabajose <strong>de</strong>termina la variabilidad <strong>de</strong> las isoenzimasesterasas <strong>de</strong> B. bassiana, sistema enzimático reportadopolimorfo para esta especie [Fernan<strong>de</strong>s et al.,2006].MATERIALES Y MÉTODOSSe analizaron 21 aislamientos (Tabla 1) <strong>de</strong> B. bassiana,los cuales se cultivaron en 50 mL <strong>de</strong> medio <strong>de</strong> cultivoestático Adamek (1965) e incubados a 25 o C durantesiete días.El micelio obtenido se pesó húmedo y seco, <strong>de</strong>spués <strong>de</strong>filtrarlo por papel Filtrak 390 y llevarlo a sequedad atemperatura ambiente durante tres días. Un gramo <strong>de</strong>lsecado se maceró con tampón fosfato a pH = 6,5 consacarosa a 20% en una proporción <strong>de</strong> 1:3. El maceradose centrifugó a 10 000 rpm durante 10 min.fitosanidad/279

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