Dormancia en arroz - LAC Biosafety
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América Latina: Desarrollo de capacidad multi-país <strong>en</strong>cumplimi<strong>en</strong>to del Protocolo de Cartag<strong>en</strong>a <strong>en</strong> Bioseguridad(COLOMBIA, PERU, COSTA RICA, BRASIL)1.Informe técnico de avance de implem<strong>en</strong>tación de subproyectosNOMBRE DEL PROYECTO<strong>Dormancia</strong> de semillas de <strong>arroz</strong>NOMBRE DEL INVESTIGADOR PRINCIPALAdriana Murillo WilliamsNOMBRE DEL PERSONAL INVOLUCRADOInvestigadores asociados: Ing. Andrés Monge Vargas (CIGRAS-UCR) y MSc. Alvaro Azofeifa Delgado (CIGRAS-UCR)Asist<strong>en</strong>tes de Investigación: Viviana Madrigal, Tatiana Vargas, Alejandro Morales, José Pablo González, Alejandro Ureña y Elian Méndez.NOMBRE DE LA INSTITUCIÓN QUE DESARROLLA EL PROYECTOC<strong>en</strong>tro para Investigaciones <strong>en</strong> Granos y Semillas (CIGRAS) Universidad de Costa RicaJUSTIFICACIÓNLas variedades de <strong>arroz</strong> (Oryza sativa) varían considerablem<strong>en</strong>te <strong>en</strong> su grado de dormancia (J<strong>en</strong>nings y de Jesús, 1964), la cual es unacaracterística de la semilla que controla la germinación de éstas (Finch-Savage y Leubner-Metzger, 2006) y determina la sincronía y elporc<strong>en</strong>taje de germinación de semillas viables que permanec<strong>en</strong> <strong>en</strong> el banco de semillas (Finkelstein et al 2008).En Costa Rica, la disponibilidad de <strong>arroz</strong> transgénico resist<strong>en</strong>te a herbicidas puede repres<strong>en</strong>tar una alternativa para los agricultorespara el control selectivo de malezas y reducir los costos de mano de obra. Sin embargo, varios estudios han demostrado el flujo de g<strong>en</strong>es de<strong>arroz</strong> transgénico a las arv<strong>en</strong>ses y a <strong>arroz</strong> no transgénico y la expresión del rasgo transgénico <strong>en</strong> la prog<strong>en</strong>ie (Oard et al, 2000; Ch<strong>en</strong> et al,
22004; Rong et al, 2005; Sánchez-Olguín et al 2009).En condiciones de campo, tanto la cosecha de <strong>arroz</strong> mecanizada como la manual conduc<strong>en</strong> a la pérdida de semillas <strong>en</strong> el campo. Enun caso hipotético <strong>en</strong> el cual se sembrara <strong>arroz</strong> OGM <strong>en</strong> el país, si las semillas que ca<strong>en</strong> al suelo ti<strong>en</strong><strong>en</strong> o adquier<strong>en</strong> dormancia y no germinanpoco después de su caída, se incorporarán <strong>en</strong> el banco de semillas. De acuerdo a su grado de dormancia, la germinación de estas semillasvariará <strong>en</strong> tiempo y espacio, por lo que se aum<strong>en</strong>tan las posibilidades de traslape de los períodos de floración de la especie OGM con el <strong>arroz</strong>silvestre. Por lo tanto, es importante conocer el grado de dormancia de las semillas a la cosecha y el tiempo que éstas permanec<strong>en</strong> viables <strong>en</strong>el suelo.DESCRIPCION DEL SUBPROYECTOEl objetivo g<strong>en</strong>eral del proyecto fue determinar el efecto del <strong>en</strong>terrami<strong>en</strong>to sobre el porc<strong>en</strong>taje de dormancia, germinación y muerte desemillas de dos variedades comerciales de <strong>arroz</strong>OBJETIVOSDeterminar el grado de dormancia de semillas de dos cultivares comerciales <strong>en</strong> almac<strong>en</strong>ami<strong>en</strong>to posterior a la cosechaDeterminar el efecto del <strong>en</strong>terrami<strong>en</strong>to de semillas de dos variedades comerciales sobre su viabilidad bajo dos sistemas de irrigaciónMÉTODOSEl experim<strong>en</strong>to se estableció <strong>en</strong> una finca comercial de <strong>arroz</strong> <strong>en</strong> la localidad de Cañas, Guanacaste <strong>en</strong> Agosto de 2011. Grupos de 100semillas de las variedades comerciales de <strong>arroz</strong> Palmar 18 y CR5272 se empacaron y se <strong>en</strong>terraron a difer<strong>en</strong>tes profundidades (0, 15, 30cm)<strong>en</strong> el campo <strong>en</strong> bloques de 12 parcelas. El <strong>en</strong>sayo fue colocado <strong>en</strong> un arreglo de bloques completos al azar con 4 repeticiones. Las semillasrestantes se almac<strong>en</strong>aron a 7 o C.El muestreo del material se llevo a cabo cada mes. Las semillas des<strong>en</strong>terradas <strong>en</strong> el campo se llevaron al Laboratorio de Semillas delCIGRAS para ser desinfectadas superficialm<strong>en</strong>te y colocadas sobre papel para germinación a 30 o C. Se realizaron evaluaciones del material alos 8 y 15 días después de la siembra. Las variables evaluadas fueron: porc<strong>en</strong>taje de germinación, porc<strong>en</strong>taje de semillas muertas y porc<strong>en</strong>tajesemillas no germinadas viables (con dormancia). La viabilidad de semillas no germinadas se determinó con una solución al 1% de cloruro detetrazolio. Se consideraron semillas viables <strong>en</strong> las que se observaron embriones teñidos de rojo.
3RESULTADOS Y DISCUSIÓNEl porc<strong>en</strong>taje inicial de germinación, muerte y dormancia de semillas de los lotes de semillasutilizados <strong>en</strong> este experim<strong>en</strong>to se detallan a continuación:Cuadro 1. Determinación inicial de germinación, muerte y dormancia de semillas recién cosechadas de lasvariedades Palmar 18 y CR 5272Variedad Germinación (%) Muerte (%) <strong>Dormancia</strong> (%)Palmar 18 15 3 82CR 5272 25 17 58La germinación, mortalidady dormancia de los lotes de semillas <strong>en</strong> almac<strong>en</strong>ami<strong>en</strong>to varió de acuerdo ala variedad (Fig.1). Para CR 5272 el porc<strong>en</strong>taje de dormancia disminuyó gradualm<strong>en</strong>te <strong>en</strong> el tiempo mi<strong>en</strong>trasque para Palmar 18 éste disminuyó drásticam<strong>en</strong>te <strong>en</strong> los primeros meses y luego aum<strong>en</strong>tó, posiblem<strong>en</strong>te por lainducción de dormancia secundaria (Fig. 1). No se puede explicar el hecho que a partir del mes 8 la dormanciavolvió a disminuir.100Palmar 18100CR-527280806060404020201 2 3 4 5 6 7 8 91 2 3 4 5 6 7 8 9Meses <strong>en</strong> almac<strong>en</strong>ami<strong>en</strong>to% Semillas germinadas% Semillas con dormancia % Semillas muertasFigura 1. Porc<strong>en</strong>taje de semillas germinadas, muertas y con dormancia de dos variedadescomerciales durante nueve meses de almac<strong>en</strong>ami<strong>en</strong>to a 7 o C.Debido a la gran cantidad de lluvia durante los primeros meses luego de establecido el experim<strong>en</strong>to,las parcelas que se iban a mant<strong>en</strong>er <strong>en</strong> secano se inundaron, por lo que se mantuvieron <strong>en</strong> esta condición.
4En las pruebas de campo, la germinación fue mayor <strong>en</strong> semillas colocadas <strong>en</strong> la superficie del suelo, <strong>en</strong>la cual las semillas germinaron, o murieron (Fig 2).10080Palmar 1810080CR-52720 cm60402060402015 cm100806040201008060402030 cm100806040200100806040201 2 3 4 5 6 7 8 91 2 3 4 5 6 7 8 9Meses después de siembra% Semillas germinadas% Semillas con dormancia % Semillas muertasFig 2. Porc<strong>en</strong>taje de semillas germinadas, muertas y con dormancia de dos variedades comerciales <strong>en</strong>terradas a 0, 15 y 30 cmde profundidad <strong>en</strong> un campo comercial de <strong>arroz</strong> durante nueve meses de evaluaciones.Inicialm<strong>en</strong>te la mortalidad fue mayor <strong>en</strong> semillas <strong>en</strong>terradas a 15 y 30 cm, sin embargo, <strong>en</strong> los últimosmeses de evaluaciones, la mortalidad <strong>en</strong> semillas <strong>en</strong> la superficie aum<strong>en</strong>tó y superó a la observada <strong>en</strong> semillas<strong>en</strong>terradas. Los porc<strong>en</strong>tajes promedio de dormanciafueron 0,01 %, 2,1 % y 3,4 % <strong>en</strong> semillas <strong>en</strong>terradas a 0, 15y 30 cm de profundidad, respectivam<strong>en</strong>te (Fig 2).
5CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES- Los resultados de este trabajo indican que la ruptura de dormancia <strong>en</strong> semillas que ca<strong>en</strong> al suelo y permanec<strong>en</strong> <strong>en</strong> la superficie, por lo que lamayoría germina.- La mortalidad de semillas aum<strong>en</strong>ta cuando éstas son <strong>en</strong>terradas, sin embargo, conforme pasa el tiempo la moralidad también aum<strong>en</strong>ta <strong>en</strong>semillas <strong>en</strong> la superficie del suelo.- Un pequeño porc<strong>en</strong>taje de semillas <strong>en</strong>terradas se manti<strong>en</strong>e con dormancia y otro porc<strong>en</strong>taje ti<strong>en</strong>e la capacidad de germinar inmediatam<strong>en</strong>tedespués de des<strong>en</strong>terrada.- Dado que las semillas que ca<strong>en</strong> <strong>en</strong> la superficie germinan o muer<strong>en</strong>, una posible recom<strong>en</strong>dación para los productores (ya sea de <strong>arroz</strong> parasemilla o para consumo humano) es evitar al máximo disturbar el suelo luego de la cosecha. De esta manera las semillas que ca<strong>en</strong> al suelogerminan y las plantas voluntarias pued<strong>en</strong> ser controladas con algún tipo de control químico o cultural.- Luego de nueve meses, mas del 90% de las semillas de las dos variedades <strong>en</strong> estudioya sea <strong>en</strong> la superficie del suelo (0 cm) o <strong>en</strong>terradas a 15cm o 30 cm murieron, por lo que se recomi<strong>en</strong>da continuar el estudio para determinar el mom<strong>en</strong>to <strong>en</strong> el que la mortalidad es del 100%. De estamanera los tomadores de decisiones pued<strong>en</strong> t<strong>en</strong>er una refer<strong>en</strong>cia de cuanto tiempo debe pasar para que las semillas del cultivo anteriormueran.- Se recomi<strong>en</strong>da establecer el experim<strong>en</strong>to <strong>en</strong> otras localidades para poder recopilar la mismas información bajo otras condiciones de suelo,microbiológicas, de manejo y asi poder obt<strong>en</strong>er resultados con mayor infer<strong>en</strong>cia.BIBLIOGRAFÍACh<strong>en</strong>, L.J., D. S. Lee, Z. P. Song, H. S. Suh, and B. Lu. 2004. G<strong>en</strong>e flow from cultivated rice (Oryza sativa) to its weedy and wild relatives.Annals Bot. 93:67-73.Finch-Savage, W.E., and G. Leubner-Metzger. 2006. Seed dormancy and the control of germination. New Phytol. 171:501-523.Finkelstein, R., W. Reeves, T. Ariizumi, and C. Steber. 2008. Molecular aspects of seed dormancy. Annu. Rev. Plant Biol. 59:387-415.J<strong>en</strong>nings, P.R., and J. de Jesus Jr. 1964. Effect of heat on breaking seed dormancy in rice. Crop Sci. 4:530-533.Oard, J., M.A. Cohn, S. Linscombe, D. Gealy, and K. Gravois. 2000. Field evaluation of seed production, shattering, and dormancy in hybridpopulations of transg<strong>en</strong>ic rice (Oryza sativa) and the weed, rid rice (Oryza sativa). Plant Sci. 157:13-22.Rong, J., Z. Song, J. Su, H. Xia, B. Lu, and F. Wang. 2005. Low frequ<strong>en</strong>cy of transg<strong>en</strong>e flow from Bt/CpTl rice to its nontransg<strong>en</strong>iccounterparts planted at close spacing. New Phytol. 168:559-566.Sanchez-Olguin, E.R., G. Arrieta-Espinoza, J.A. Lobo, and A.M. Espinoza-Esquivel. 2009. Assessm<strong>en</strong>t of g<strong>en</strong>e flow from an herbicideresistant indica rice (Oryza sativa L.) to the Costa Rican weedy rice (Oryza sativa) in Tropical America: factors affecting hybridizationrates and characterization of F1 hybrids. Transg<strong>en</strong>ic Res. 18:633-647.
6Área Temática:Investigador Principal: Adriana MurilloInstitución: CIGRAS-UCR2. Cuadro resum<strong>en</strong> avance de actividades subproyectoTítulo Subproyecto: <strong>Dormancia</strong> de semillas de <strong>arroz</strong>Fecha de inicio Fecha de finalización Indicadores de resultados por actividadProgramaProgramada EfectivaEfectiva Comprometidos Obt<strong>en</strong>idos a la fechadaObjetivo 1 . Determinar el grado de dormancia de semillas de dos cultivares comerciales <strong>en</strong> almac<strong>en</strong>ami<strong>en</strong>to posterior a la cosechaActividad 1 a, b, c Mayo 2011Actividad 2 aActividad 3 a, bDiciembre2011Noviembre2011Mayo2011Setiembre2011Junio2011Diciembre2011Noviembre2011Setiembre2011Junio 2011NingunoNingunoNingunoTodos. Las semillas cosechadas no eran debu<strong>en</strong>a calidad por lo que se recurrió a laONS y al INTA para obt<strong>en</strong>er materialfresco nuevam<strong>en</strong>te. La cantidad que fue<strong>en</strong>tregada alcanzóúnicam<strong>en</strong>te para elestablecer el experim<strong>en</strong>to <strong>en</strong> una localidad.Se establecieron pruebas de germinacióncon hipoclorito de sodio y el fungicidaAmistar.Se ti<strong>en</strong>e los resultados de las pruebas degerminación inicial de los lotes de semillasrecién cosechados, asi como el porc<strong>en</strong>tajede semillas muertas y con dormancia.Objetivo 2.Determinar el efecto del <strong>en</strong>terrami<strong>en</strong>to de semillas de dos variedades comerciales sobre su viabilidad bajo dos sistemas de irrigaciónActividad 4aActividad 4 bActividad 5aNoviembre2011Diciembre2011Diciembre2011Junio2011Agosto2011Agosto2011Agosto2011Continuapor 12mesesContinuapor 12mesesNoviembre2011Ninguno, sin embargo hizofalta semillas para establecerel experim<strong>en</strong>to <strong>en</strong> lalocalidad de Parrita.Establecimi<strong>en</strong>to <strong>en</strong> lalocalidad de ParritaEvaluaciones <strong>en</strong> la localidadde Parrita por falta desemillasSe empacó la semilla que se utilizó <strong>en</strong> lalocalidad de CañasEstablecimi<strong>en</strong>to <strong>en</strong> la localidad de CañasEvaluaciones por 8 meses <strong>en</strong> la localidadde Cañas