Bond™ Ready-to-Use Negative Control Negative (Mouse)
Bond™ Ready-to-Use Negative Control Negative (Mouse)
Bond™ Ready-to-Use Negative Control Negative (Mouse)
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Bond <br />
<strong>Ready</strong>-<strong>to</strong>-<strong>Use</strong> <strong>Negative</strong> <strong>Control</strong><br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Catalog No: PA0996<br />
Leica Biosystems Newcastle Ltd<br />
Balliol Business Park West<br />
Ben<strong>to</strong>n Lane<br />
Newcastle Upon Tyne NE12 8EW<br />
United Kingdom<br />
( +44 191 215 4242<br />
Instructions for <strong>Use</strong><br />
Please read before using this product.<br />
Mode d’emploi<br />
Á lire avant d’utiliser ce produit.<br />
Istruzioni per l’uso<br />
Si prega di leggere, prima di usare il prodot<strong>to</strong>.<br />
Gebrauchsanweisung<br />
Bitte vor der Verwendung dieses Produkts lesen.<br />
Instrucciones de uso<br />
Por favor, leer antes de utilizar este produc<strong>to</strong>.<br />
Instruções de Utilização<br />
Leia estas instruções antes de utilizar este produ<strong>to</strong>.<br />
Bruksanvisning<br />
Var god läs innan ni använder produkten.<br />
Οδηγίες Χρήσης<br />
Παρακαλούμε διαβάστε τις οδηγίες πριν χρησιμοποιήσετε το προϊόν αυτό.<br />
Brugsanvisning<br />
Læs venligst før produktet tages i brug.<br />
Check the integrity of the packaging before use.<br />
Vérifier que le conditionnement est en bon état avant l’emploi.<br />
Prima dell’uso, controllare l’integrità della confezione.<br />
Vor dem Gebrauch die Verpackung auf Unversehrtheit überprüfen.<br />
Comprobar la integridad del envase, antes de usarlo.<br />
Verifique a integridade da embalagem antes de utilizar o produ<strong>to</strong>.<br />
Kontrollera att paketet är obrutet innan användning.<br />
Ελέγξτε την ακεραιότητα της συσκευασίας πριν από τη χρήση.<br />
Kontroller, at pakken er ubeskadiget før brug.<br />
www.leica-microsystems.com<br />
EN FR IT DE ES PT<br />
SV EL DA
PA0996<br />
Page 1
Bond <br />
<strong>Ready</strong>-To-<strong>Use</strong> <strong>Negative</strong> <strong>Control</strong><br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Catalog No: PA0996<br />
Intended <strong>Use</strong><br />
This reagent is for in vitro diagnostic use.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is intended <strong>to</strong> be used as a mouse negative control for qualitative immunohis<strong>to</strong>chemical staining using an au<strong>to</strong>mated<br />
Bond TM<br />
system. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is not directed against a known antigen in human tissue. The clinical interpretation of any staining or<br />
its absence should be complemented by morphological studies and proper controls and should be evaluated within the context of the<br />
patient’s clinical his<strong>to</strong>ry and other diagnostic tests by a qualified pathologist.<br />
Summary and Explanation<br />
Immunohis<strong>to</strong>chemical techniques can be used <strong>to</strong> demonstrate the presence of antigens in tissue and cells (see “Using Bond Reagents”<br />
in your Bond user documentation). <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is a ready <strong>to</strong> use product that has been specifically optimized for use with Bond<br />
Polymer Refine Detection.<br />
In some tissues, non-specific binding may occur, especially in neoplastic or necrotic tissue. The use of <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is<br />
recommended <strong>to</strong> aid in the identification of cells, tissues or tissue components, which may non-specifically bind mouse monoclonal<br />
antibodies and will allow better interpretation of specific staining at the antigenic site.<br />
The demonstration of non-specific staining is achieved by first, allowing the binding of <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) <strong>to</strong> the section, and then<br />
visualizing this binding using the reagents provided in the detection system. The use of these products, in combination with an<br />
au<strong>to</strong>mated Bond system, reduces the possibility of human error and inherent variability resulting from individual reagent dilution, manual<br />
pipetting and reagent application.<br />
Reagents Provided<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is a purified mouse monoclonal antibody supplied in Tris buffered saline with carrier protein, containing 0.35% ProClinTM 950 as a preservative.<br />
Total volume = 7 mL.<br />
Clone<br />
MOPC-21.<br />
Immunogen<br />
Not applicable.<br />
Specificity<br />
Not applicable.<br />
Subclass<br />
IgG1.<br />
Total Protein Concentration<br />
Approx 10 mg/mL.<br />
Antibody Concentration<br />
Greater than or equal <strong>to</strong> 1 mg/L.<br />
Dilution and Mixing<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is optimally diluted for use on a Bond system. Reconstitution, mixing, dilution or titration of this reagent is not required.<br />
Materials Required But Not Provided<br />
Refer <strong>to</strong> “Using Bond Reagents” in your Bond user documentation for a complete list of materials required for specimen treatment and<br />
immunohis<strong>to</strong>chemical staining using a Bond system.<br />
S<strong>to</strong>rage and Stability<br />
S<strong>to</strong>re at 2–8 °C. Do not use after the expiration date indicated on the container label.<br />
The signs indicating contamination and/or instability of <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) are: turbidity of the solution, odor development, and presence<br />
of precipitate.<br />
Return <strong>to</strong> 2–8 °C immediately after use.<br />
S<strong>to</strong>rage conditions other than those specified above must be verified by the user1 .<br />
Precautions<br />
• This product is intended for in vitro diagnostic use.<br />
TM • The concentration of ProClin 950 is 0.35%. It contains the active ingredient 2-methyl-4-isothiazolin-3-one, and may cause irritation <strong>to</strong><br />
the skin, eyes, mucous membranes and upper respira<strong>to</strong>ry tract. Wear disposable gloves when handling reagents.<br />
• To obtain a copy of the Material Safety Data Sheet contact your local distribu<strong>to</strong>r or regional office of Leica Microsystems, or<br />
alternatively, visit the Leica Microsystems’ Web site, www.leica-microsystems.com.<br />
PA0996<br />
Page 2
• Specimens, before and after fixation, and all materials exposed <strong>to</strong> them, should be handled as if capable of transmitting infection and<br />
disposed of with proper precautions2 . Never pipette reagents by mouth and avoid contacting the skin and mucous membranes with<br />
reagents or specimens. If reagents or specimens come in contact with sensitive areas, wash with copious amounts of water. Seek<br />
medical advice.<br />
• Consult Federal, State or local regulations for disposal of any potentially <strong>to</strong>xic components.<br />
• Minimize microbial contamination of reagents or an increase in non-specific staining may occur.<br />
Instructions for <strong>Use</strong><br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) was developed for use on an au<strong>to</strong>mated Bond system in combination with Bond Polymer Refine Detection. The<br />
recommended staining pro<strong>to</strong>col for <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is IHC Pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) should be used in place of the mouse primary<br />
antibody with each patient specimen, a separate section should be stained for each retrieval method employed (including no retrieval).<br />
Results Expected<br />
Normal Tissues<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) gave no staining in a range of normal tissues. (Number of cases stained = 53).<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) is recommended for use as a negative control for Bond <strong>Ready</strong>-<strong>to</strong>-<strong>Use</strong> mouse monoclonal primary antibodies.<br />
Product Specific Limitations<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) has been optimized at Leica Microsystems for use with Bond Polymer Refine Detection and Bond ancillary reagents.<br />
<strong>Use</strong>rs who deviate from recommended test procedures must accept responsibility for interpretation of patient results under these<br />
circumstances. The pro<strong>to</strong>col times may vary, due <strong>to</strong> variation in tissue fixation and the effectiveness of antigen enhancement, and must<br />
be determined empirically. <strong>Negative</strong> reagent controls should be used when optimizing retrieval conditions and pro<strong>to</strong>col times.<br />
Troubleshooting<br />
Refer <strong>to</strong> reference 3 for remedial action.<br />
Contact your local distribu<strong>to</strong>r or the regional office of Leica Microsystems <strong>to</strong> report unusual staining.<br />
Further Information<br />
Further information on immunostaining with Bond reagents, under the headings Principle of the Procedure, Materials Required,<br />
Specimen Preparation, Quality <strong>Control</strong>, Assay Verification, Interpretation of Staining, Key <strong>to</strong> Symbols on Labels, and General Limitations<br />
can be found in “Using Bond Reagents” in your Bond user documentation.<br />
Bibliography<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 is a trademark of Supelco, a part of Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Date of Issue<br />
13 February 2009<br />
PA0996<br />
Page 3
Contrôle Négatif Prêt À L’Emploi Bond <br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Référence : PA0996<br />
Utilisation prévue<br />
Ce réactif est destiné au diagnostic in vitro.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) est conçu pour servir de contrôle souris négatif pour le marquage immunohis<strong>to</strong>chimique qualitatif au<strong>to</strong>matisé<br />
Bond TM<br />
. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) n’est pas dirigé contre un antigène connu du tissu humain. L’interprétation clinique de <strong>to</strong>ut marquage ou de<br />
son absence doit être complétée par des études morphologiques utilisant des contrôles appropriés et évaluée dans le contexte des<br />
antécédents cliniques du patient et des autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifié.<br />
Résumé et explications<br />
Les techniques immunohis<strong>to</strong>chimiques peuvent être utilisées pour la mise en évidence d’antigènes sur tissus ou cellules (voir<br />
« Utilisation des réactifs Bond » dans votre manuel d’utilisation Bond). <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) est prêt à l’emploi et a été spécialement<br />
optimisé pour Bond Polymer Refine Detection.<br />
Dans certains tissus, une liaison non spécifique peut intervenir, notamment dans le tissu néoplasique ou nécrotique. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
est recommandée pour faciliter l’identification des cellules, tissus ou composants tissulaires susceptibles de se lier de façon non<br />
spécifique aux anticorps monoclonaux de souris et permettra une meilleure interprétation du marquage spécifique au site antigénique.<br />
La mise en évidence d’un marquage non spécifique s’obtient en laissant <strong>to</strong>ut d’abord <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) s’hybrider sur la coupe, puis en<br />
visualisant le complexe au moyen des réactifs fournis avec le système de détection. L’utilisation de ces produits, en association avec un<br />
au<strong>to</strong>mate Bond, réduit l’éventualité d’une erreur humaine et la variabilité intrinsèque résultant de la dilution, du pipetage manuel et de<br />
l’application à titre individuel des réactifs.<br />
Réactifs fournis<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) est un anticorps monoclonal purifié de souris, conditionné dans du tampon salin Tris contenant une protéine de<br />
transport et 0,35 % de ProClinTM 950 (conservateur).<br />
Volume <strong>to</strong>tal = 7 ml.<br />
Clone<br />
MOPC-21.<br />
Immunogène<br />
Sans objet.<br />
Spécificité<br />
Sans objet.<br />
Sous-classe<br />
IgG1.<br />
Concentration <strong>to</strong>tale en protéine<br />
Environ 10 mg/ml.<br />
Concentration en anticorps<br />
Supérieure ou égale à 1 mg/l.<br />
Dilution et mélange<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) est à dilution optimale pour utilisation dans l’au<strong>to</strong>mate Bond. Reconstitution, mélange, dilution ou titration de ce réactif<br />
non nécessaire.<br />
Matériel nécessaire mais non fourni<br />
Voir « Utilisation des réactifs Bond » dans votre manuel d’utilisation Bond pour obtenir la liste complète du matériel nécessaire au<br />
traitement des échantillons et au marquage immunohis<strong>to</strong>chimique avec un système Bond.<br />
Conservation et stabilité<br />
Conserver à une température comprise entre 2–8 °C. Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l’étiquette du récipient.<br />
Les signes indicateurs d’une contamination et/ou d’une instabilité de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) sont les suivants : une turbidité de la solution, la<br />
formation d’odeurs et la présence d’un précipité.<br />
Remettre à 2–8 °C immédiatement après usage.<br />
Des conditions de s<strong>to</strong>ckage différentes de celles ci-dessus doivent être contrôlées par l’utilisateur1 .<br />
Précautions<br />
• Ce produit est conçu pour le diagnostic in vitro.<br />
TM • La concentration en ProClin 950 est de 0,35 %. Contient du 2-méthyl-4-isothiazoline-3-one (ingrédient actif) et peut entraîner des<br />
irritations de la peau, des yeux, des muqueuses et des voies aériennes supérieures. Porter des gants jetables lors de la manipulation<br />
des réactifs.<br />
PA0996<br />
Page 4
• Pour obtenir un exemplaire de la fiche technique des substances dangereuses (Material Safety Data Sheet), contactez votre<br />
distributeur local ou le bureau régional de Leica Microsystems, ou consultez le site Web de Leica Microsystems :<br />
www.leica-microsystems.com.<br />
• Les échantillons, avant et après fixation, et <strong>to</strong>us les matériels ayant été en contact avec eux, doivent être manipulés comme s’ils<br />
étaient à risque infectieux et éliminés avec les précautions adéquates2 . Ne jamais pipeter les réactifs à la bouche et éviter le contact<br />
de la peau et des muqueuses avec les réactifs ou les échantillons. Si des réactifs ou des échantillons entrent en contact avec des<br />
zones sensibles, rincer abondamment à l’eau. Consultez un médecin.<br />
• Renseignez-vous sur les règlements fédéraux, nationaux et locaux pour l’élimination des composés potentiellement <strong>to</strong>xiques.<br />
• Éviter une contamination microbienne des réactifs, qui peut favoriser un marquage non spécifique.<br />
Mode d’emploi<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) a été conçu pour être utilisé sur l’au<strong>to</strong>mate Bond conjointement avec Bond Polymer Refine Detection. Le pro<strong>to</strong>cole de<br />
marquage recommandé pour <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) est IHC Pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) doit être utilisé à la place de l’anticorps primaire<br />
de souris avec chaque échantillon de patient ; une coupe distincte doit être marquée pour chaque méthode de démasquage employée<br />
(y compris sans démasquage).<br />
Résultats attendus<br />
Tissus sains<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) n’a produit aucun marquage parmi l’éventail de tissus sains évalués. (Nombre de cas marqués = 53).<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) est recommandé pour servir de contrôle négatif aux anticorps primaires monoclonaux de souris Prêts À L’emploi<br />
Bond.<br />
Limites spécifiques du produit<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) a été optimisé par Leica Microsystems pour une utilisation avec Bond Polymer Refine Detection et les réactifs<br />
auxiliaires Bond. Les utilisateurs qui s’écartent des procédures recommandées prennent la responsabilité de l’interprétation des résultats<br />
des patients dans ces conditions. Les durées du pro<strong>to</strong>cole peuvent varier, en raison des variations de fixation des tissus et de l’efficacité<br />
de la facilitation de l’antigène, et doivent être déterminées empiriquement. Des contrôles réactif négatifs doivent être testés lors de<br />
l’optimisation des conditions de démasquage et des durées du pro<strong>to</strong>cole.<br />
Identification des problèmes<br />
Voir la référence 3 pour connaître les mesures correctives.<br />
Prenez contact avec votre distributeur local ou avec le bureau régional de Leica Microsystems pour signaler <strong>to</strong>ut marquage inattendu.<br />
Informations complémentaires<br />
Des informations complémentaires sur l’immunomarquage avec les réactifs Bond, les principes de la méthode, le matériel nécessaire, la<br />
préparation des échantillons, le contrôle qualité, les vérifications d’analyse, l’interprétation du marquage, les légendes et symboles sur<br />
les étiquettes et les limites générales, peuvent être obtenues dans « Utilisation des réactifs Bond » dans votre manuel d’utilisation Bond.<br />
Bibliographie<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 est une marque commerciale de Supelco, membre du groupe Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Date de publication<br />
13 février 2009<br />
PA0996<br />
Page 5
<strong>Control</strong>lo negativo pron<strong>to</strong> all’uso Bond <br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
N. catalogo: PA0996<br />
Uso previs<strong>to</strong><br />
Reagente per uso diagnostico in vitro.<br />
L’uso del <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è previs<strong>to</strong> come un controllo negativo murino per la colorazione immunois<strong>to</strong>chimica qualitativa, utilizzando<br />
un sistema au<strong>to</strong>matizza<strong>to</strong> Bond TM<br />
. Il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) non è diret<strong>to</strong> contro alcun antigene no<strong>to</strong> nei tessuti umani. L’interpretazione clinica<br />
di un’eventuale colorazione, o della sua assenza, deve avvalersi di studi morfologici e di opportuni controlli ed essere effettuata da<br />
pa<strong>to</strong>logi qualificati, nel contes<strong>to</strong> dell’anamnesi clinica del paziente e di altri test diagnostici.<br />
Sommario e spiegazione<br />
Grazie alle tecniche di immunois<strong>to</strong>chimica è possibile dimostrare la presenza di antigeni nel tessu<strong>to</strong> e nelle cellule (vedere “Uso dei<br />
reagenti Bond” nella documentazione per l’utente Bond). Il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è un prodot<strong>to</strong> pron<strong>to</strong> all’uso che è sta<strong>to</strong> ottimizza<strong>to</strong> in modo<br />
specifico per l’impiego con il Bond Polymer Refine Detection.<br />
In alcuni tessuti può verificarsi un legame non specifico, soprattut<strong>to</strong> nel tessu<strong>to</strong> neoplastico o necrotico. Si raccomanda l’uso del<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) come ausilio all’individuazione di cellule, tessuti o componenti degli stessi, che potrebbero legare anticorpi<br />
monoclonali murini in modo non specifico permettendo una migliore interpretazione della colorazione specifica nella sede dell’antigene.<br />
La dimostrazione della colorazione non specifica si ottiene in primo luogo consentendo il legame del <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) con la sezione,<br />
e quindi visualizzando il legame stesso per mezzo dei reagenti forniti nel sistema di rilevazione. L’impiego di questi prodotti, insieme a<br />
un sistema au<strong>to</strong>matizza<strong>to</strong> Bond, riduce la possibilità di un errore umano e la relativa variabilità che deriva dalla diluizione individuale del<br />
reagente e dal pipettamen<strong>to</strong> e dall’applicazione del reagente eseguiti manualmente.<br />
Reagenti forniti<br />
Il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è un anticorpo monoclonale murino purifica<strong>to</strong> forni<strong>to</strong> in soluzione salina tamponata Tris con proteina carrier,<br />
contenente 0,35% di ProClinTM 950 come conservante.<br />
Volume <strong>to</strong>tale = 7 ml.<br />
Clone<br />
MOPC-21.<br />
Immunogeno<br />
Non pertinente.<br />
Specificità<br />
Non pertinente.<br />
Sot<strong>to</strong>classe<br />
IgG1.<br />
Concentrazione proteica <strong>to</strong>tale<br />
Circa 10 mg/ml.<br />
Concentrazione dell’anticorpo<br />
Uguale o superiore a 1 mg/l.<br />
Diluizione e miscelazione<br />
La diluizione dell’anticorpo <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è stata ottimizzata per l’uso con un sistema Bond. Non è necessario ricostituire, miscelare,<br />
diluire o ti<strong>to</strong>lare il reagente.<br />
Materiale necessario non forni<strong>to</strong><br />
Per un elenco comple<strong>to</strong> dei materiali necessari per il trattamen<strong>to</strong> del campione e la colorazione immunois<strong>to</strong>chimica con il sistema Bond,<br />
consultare l’”Uso dei reagenti Bond” nella documentazione per l’utente Bond.<br />
Conservazione e stabilità<br />
Conservare a 2–8 °C. Non utilizzare dopo la data di scadenza indicata sull’etichetta del conteni<strong>to</strong>re.<br />
I segni di contaminazione e/o instabilità del <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) sono: <strong>to</strong>rbidità della soluzione, formazione di odori e presenza di un<br />
precipita<strong>to</strong>.<br />
Riportare a 2–8 °C immediatamente dopo l’uso.<br />
L’utente deve verificare eventuali condizioni di conservazione diverse da quelle specificate1 .<br />
Precauzioni<br />
• Il prodot<strong>to</strong> è destina<strong>to</strong> all’uso diagnostico in vitro.<br />
TM • La concentrazione del ProClin 950 è 0,35%. Esso contiene il principio attivo 2-metil-4-isotiazolin-3-one e può causare irritazione alla<br />
cute, agli occhi, alle mucose e alle alte vie respira<strong>to</strong>rie. Per la manipolazione dei reagenti usare guanti monouso.<br />
• Una copia della Scheda di sicurezza può essere richiesta al distribu<strong>to</strong>re locale o all’ufficio di zona di Leica Microsystems o, in<br />
alternativa, visitando il si<strong>to</strong> di Leica Microsystems www.leica-microsystems.com.<br />
PA0996<br />
Page 6
• I campioni, prima e dopo la fissazione, e tutti i materiali esposti ad essi devono essere manipolati come potenziali vet<strong>to</strong>ri di infezione<br />
e smaltiti con le opportune precauzioni2 . Non pipettare mai i reagenti con la bocca ed evitare il contat<strong>to</strong> dei reagenti e dei campioni<br />
con la cute e le mucose. Se un reagente o un campione viene a contat<strong>to</strong> con zone sensibili, lavare abbondantemente con acqua.<br />
Consultare un medico.<br />
• Consultare la normativa nazionale, regionale o locale per lo smaltimen<strong>to</strong> dei componenti potenzialmente <strong>to</strong>ssici.<br />
• Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti per non incrementare il rischio di una colorazione non specifica.<br />
Istruzioni per l’uso<br />
Il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è sta<strong>to</strong> sviluppa<strong>to</strong> per essere utilizza<strong>to</strong> con un sistema au<strong>to</strong>matizza<strong>to</strong> Bond in associazione con il Bond Polymer<br />
Refine Detection. Il pro<strong>to</strong>collo di colorazione consiglia<strong>to</strong> per il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è l’IHC Pro<strong>to</strong>col F. Il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) deve essere<br />
utilizza<strong>to</strong> al pos<strong>to</strong> dell’anticorpo primario murino con ciascun campione del paziente, colorando una diversa sezione per ciascun me<strong>to</strong>do<br />
di smascheramen<strong>to</strong> impiega<strong>to</strong> (compresa l’assenza di qualsiasi me<strong>to</strong>do di smascheramen<strong>to</strong>).<br />
Risultati attesi<br />
Tessuti normali<br />
In diversi tessuti normali il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) non ha indot<strong>to</strong> alcuna colorazione. (Numero <strong>to</strong>tale di casi colorati = 53).<br />
Si raccomanda l’uso del <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) come controllo negativo per gli anticorpi monoclonali primari murini pronti all’uso Bond.<br />
Limitazioni specifiche del prodot<strong>to</strong><br />
Il <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) è sta<strong>to</strong> ottimizza<strong>to</strong> da Leica Microsystems per l’uso con il Bond Polymer Refine Detection e con i reagenti ausiliari<br />
Bond. Gli utenti che modificano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilità dell’interpretazione dei risultati relativi ai<br />
pazienti in tali circostanze. I tempi del pro<strong>to</strong>collo possono variare in base alle variazioni nella fissazione del tessu<strong>to</strong> e nell’efficienza del<br />
potenziamen<strong>to</strong> dell’antigene e devono essere definiti in modo empirico. Nell’ottimizzazione delle condizioni di riconoscimen<strong>to</strong> e dei tempi<br />
del pro<strong>to</strong>collo si devono impiegare dei controlli negativi del reagente.<br />
Soluzione problemi<br />
Per le azioni di rimedio consultare il riferimen<strong>to</strong> bibliografico n. 3.<br />
Per riferire una colorazione inusuale rivolgersi al distribu<strong>to</strong>re locale o all’ufficio di zona di Leica Microsystems.<br />
Ulteriori informazioni<br />
Ulteriori informazioni sull’immunocolorazione con i reagenti Bond si trovano in “Uso dei reagenti Bond” nella documentazione per<br />
l’utente Bond, ai ti<strong>to</strong>li Principio della procedura, Materiali necessari, Preparazione del campione, <strong>Control</strong>lo di qualità, Verifica del saggio,<br />
Interpretazione della colorazione, Leggenda dei simboli nelle etichette e Limitazioni generali.<br />
Bibliografia<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 è un marchio di fabbrica di Supelco, società del gruppo Sigma-Aldrich.<br />
Data di pubblicazione<br />
13 febbraio 2009<br />
PA0996<br />
Page 7
Gebrauchsfertige Bond <br />
-Negativkontrolle<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Bestellnr.: PA0996<br />
Verwendungszweck<br />
Dieses Reagenz ist für die In-vitro-Diagnostik bestimmt.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) ist als Negativkontrolle für Maus-Reagenzien bei der qualitativen immunhis<strong>to</strong>chemischen Färbung mit einem<br />
au<strong>to</strong>matischen Bond TM<br />
-System vorgesehen. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) erkennt kein bekanntes Antigen in humanen Geweben. Die klinische<br />
Auswertung der An- oder Abwesenheit einer Färbung sollte durch morphologische Untersuchungen und geeignete Kontrollen ergänzt<br />
werden und sollte im Zusammenhang mit der Krankengeschichte eines Patienten und anderen diagnostischen Tests von einem<br />
qualifizierten Pathologen vorgenommen werden.<br />
Zusammenfassung und Erläuterung<br />
Immunhis<strong>to</strong>chemische Methoden können dazu verwendet werden, die Anwesenheit von Antigenen in Geweben und Zellen zu<br />
demonstrieren (sehen Sie dazu „Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien“ in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch). <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) ist ein<br />
gebrauchsfertiges Produkt, das speziell für den Gebrauch mit dem Bond Polymer Refine Detection optimiert wurde.<br />
In manchen Geweben, insbesondere neoplastischen oder nekrotischen Geweben, kann es zu einer unspezifischen Bindung kommen.<br />
Die Verwendung von <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) wird empfohlen, um bei der Identifikation von Zellen, Geweben oder Gewebekomponenten<br />
zu helfen, die unter Umständen unspezifisch monoklonale Maus-Antikörper binden, und ermöglicht eine bessere Interpretation der<br />
spezifischen Färbung an der Antigenstelle.<br />
Der Nachweis unspezifischer Färbungen erfolgt durch die Bindung von <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) an das Präparat und die anschließende<br />
Sichtbarmachung dieser Bindung mit den Reagenzien, die im Detektionssystem bereitgestellt werden. Die Verwendung dieser<br />
Produkte zusammen mit einem au<strong>to</strong>matischen Bond-System reduziert die Wahrscheinlichkeit menschlicher Fehler und die natürlichen<br />
Schwankungen, die beim individuellen Verdünnen von Reagenzien, dem manuellen Pipettieren und dem Auftragen der Reagenzien<br />
entstehen.<br />
Mitgelieferte Reagenzien<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) ist ein gereinigter monoklonaler Maus-Antikörper, der in Tris-gepufferter Salzlösung mit einem Trägerprotein geliefert<br />
wird und 0,35% ProClinTM 950 als Konservierungsmittel enthält.<br />
Gesamtvolumen = 7 ml.<br />
Klon<br />
MOPC-21.<br />
Immunogen<br />
Nicht zutreffend.<br />
Spezifität<br />
Nicht zutreffend.<br />
Subklasse<br />
IgG1.<br />
Gesamtproteinkonzentration<br />
Ca. 10 mg/ml.<br />
Antikörperkonzentration<br />
Größer als oder gleich 1 mg/l.<br />
Verdünnung und Mischung<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) ist optimal für den Gebrauch mit einem Bond-System verdünnt. Rekonstitution, Mischen, Verdünnen oder Titrieren<br />
dieses Reagenzes ist nicht erforderlich.<br />
Erforderliche, aber nicht mitgelieferte Materialien<br />
Eine vollständige Liste der Materialien, die für die Probenbehandlung und die immunhis<strong>to</strong>chemische Färbung mit dem Bond-System<br />
benötigt werden, befindet sich im Abschnitt „Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien“ in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch.<br />
Lagerung und Stabilität<br />
Bei 2–8 °C lagern. Nach dem Ablauf des auf dem Behälteretikett angegebenen Verfallsdatums nicht mehr verwenden.<br />
Zeichen, die auf eine Kontamination und/oder Instabilität von <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) hinweisen, sind eine Trübung der Lösung,<br />
Geruchsentwicklung und das Vorhandensein von Präzipitat.<br />
Unmittelbar nach Gebrauch wieder bei 2–8 °C aufbewahren.<br />
Andere als die oben angegebenen Lagerungsbedingungen müssen vom Anwender selbst getestet werden1 .<br />
PA0996<br />
Page 8
Vorsichtsmaßnahmen<br />
• Dieses Produkt ist für die In-vitro-Diagnostik bestimmt.<br />
TM • Die Konzentration von ProClin 950 beträgt 0,35%. Es enthält 2-Methyl-4-isothiazolin-3-on als aktiven Bestandteil und kann<br />
Reizungen der Haut, Augen, Schleimhäute und oberen Atemwege verursachen. Tragen Sie beim Umgang mit Reagenzien<br />
Einweghandschuhe.<br />
• Ein Exemplar des Sicherheitsdatenblattes erhalten Sie von Ihrer örtlichen Vertriebsfirma, von der Regionalniederlassung von Leica<br />
Microsystems oder über die Webseite von Leica Microsystems unter www.leica-microsystems.com.<br />
• Behandeln Sie Präparate vor und nach der Fixierung sowie sämtliche damit in Berührung kommenden Materialien so, als ob diese<br />
Infektionen übertragen könnten und entsorgen Sie sie unter Beachtung der entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen2 . Pipettieren Sie<br />
Reagenzien niemals mit dem Mund und vermeiden Sie den Kontakt von Haut und Schleimhäuten mit Reagenzien oder Präparaten.<br />
Falls Reagenzien oder Präparate mit empfindlichen Bereichen in Kontakt gekommen sind, spülen Sie diese mit reichlich Wasser.<br />
Holen Sie anschließend ärztlichen Rat ein.<br />
• Beachten Sie bei der Entsorgung potentiell <strong>to</strong>xischer Bestandteile die behördlichen und örtlichen Vorschriften.<br />
• Mikrobielle Kontaminationen sollten minimiert werden, da es sonst zu einer Zunahme unspezifischer Färbungen kommen kann.<br />
Gebrauchsanleitung<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) wurde für die Verwendung mit einem au<strong>to</strong>matischen Bond-System in Verbindung mit dem Bond Polymer Refine<br />
Detection entwickelt. Das empfohlene Färbeverfahren für <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) ist das IHC Pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) sollte bei jeder<br />
Patientenprobe anstelle des Maus-Primärantikörpers eingesetzt werden, wobei für jede verwendete Retrieval-Methode (einschließlich<br />
ohne Retrieval) ein eigenes Präparat gefärbt werden sollte.<br />
Erwartete Ergebnisse<br />
Normale Gewebe<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) zeigte bei einer Reihe normaler Gewebe keine Färbung. (Gesamtanzahl der gefärbten Fälle = 53).<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) wird zur Verwendung als Negativkontrolle für gebrauchsfertige monoklonale Bond-Maus-Primärantikörper empfohlen.<br />
Produktspezifische Einschränkungen<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) wurde von Leica Microsystems zur Verwendung mit dem Bond Polymer Refine Detection und Bond-Zusatzreagenzien<br />
optimiert. Anwender, die andere als die empfohlenen Testverfahren verwenden, müssen unter diesen Umständen die Verantwortung<br />
für die Auswertung der Patientenergebnisse übernehmen. Die Verfahrenszeiten können aufgrund von Unterschieden in der<br />
Gewebefixierung und der Wirksamkeit der Antigenverstärkung variieren und müssen empirisch bestimmt werden. Bei der Optimierung<br />
der Retrieval-Bedingungen und Verfahrenszeiten sollten negative Reagenzkontrollen eingesetzt werden.<br />
Fehlersuche<br />
Maßnahmen zur Abhilfe beim Auftreten von Fehlern finden Sie in Referenz 3.<br />
Falls Sie ungewöhnliche Färbeergebnisse beobachten, wenden Sie sich an Ihre örtliche Vertriebsfirma oder an die<br />
Regionalniederlassung von Leica Microsystems.<br />
Weitere Informationen<br />
Weitere Informationen zur Immunfärbung mit Bond-Reagenzien finden Sie in den Abschnitten Grundlegende Vorgehensweise,<br />
Erforderliches Material, Probenvorbereitung, Qualitätskontrolle, Assay-Verifizierung, Deutung der Färbung, Schlüssel der Symbole auf<br />
den Etiketten und Allgemeine Einschränkungen in „Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien“ in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch.<br />
Bibliografie<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 ist eine Marke von Supelco, einem Unternehmen der Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Ausgabedatum<br />
13. Februar 2009<br />
PA0996<br />
Page 9
<strong>Control</strong> negativo lis<strong>to</strong> para usar Bond <br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Nº de catálogo: PA0996<br />
Indicaciones de uso<br />
Este reactivo es para uso diagnóstico in vitro.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) está destinado a utilizarse como control negativo de ratón para la tinción cualitativa inmunohis<strong>to</strong>química utilizando<br />
el sistema au<strong>to</strong>matizado Bond TM<br />
. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) no se dirige hacia ningún antígeno conocido en el tejido humano. La interpretación<br />
clínica de cualquier tinción o de la ausencia de ésta debe complementarse con estudios morfológicos y controles adecuados, y debe<br />
evaluarla un patólogo cualificado jun<strong>to</strong> con el his<strong>to</strong>rial clínico del paciente y de otras pruebas diagnósticas.<br />
Resumen y explicación<br />
Pueden utilizarse técnicas inmunohis<strong>to</strong>químicas para demostrar la presencia de antígenos en tejidos y células (consulte “Uso de<br />
reactivos Bond” en la documentación del usuario de Bond). <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) es un produc<strong>to</strong> lis<strong>to</strong> para usar que se ha optimizado<br />
específicamente para su uso con Bond Polymer Refine Detection.<br />
En algunos tejidos puede producirse unión inespecífica, especialmente en tejidos neoplásicos o necróticos. Se recomienda el uso<br />
de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) como ayuda en la identificación de células, tejidos o componentes de tejidos que puedan unirse de manera<br />
inespecífica a anticuerpos de ratón, para permitir una mejor interpretación de la tinción específica en el pun<strong>to</strong> antigénico.<br />
La demostración de la tinción inespecífica se consigue, en primer lugar, permitiendo la unión de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) al corte y, a<br />
continuación, visualizando esta unión con los reactivos que proporciona el sistema de detección. El uso de es<strong>to</strong>s produc<strong>to</strong>s, en<br />
combinación con el sistema au<strong>to</strong>matizado Bond, reduce la posibilidad de errores humanos y la variabilidad inherente resultante de la<br />
dilución de cada reactivo, el pipeteo manual y la aplicación del reactivo.<br />
Reactivos suministrados<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) es un anticuerpo monoclonal purificado de conejo suministrado en solución salina tamponada de Tris con proteína<br />
portadora, que contiene el 0,35% de ProClinTM 950 como conservante.<br />
Volumen <strong>to</strong>tal = 7 mL.<br />
Clon<br />
MOPC-21.<br />
Inmunógeno<br />
No se aplica.<br />
Especificidad<br />
No se aplica.<br />
Subclase<br />
IgG1.<br />
Concentración <strong>to</strong>tal de proteína<br />
Aprox. 10 mg/mL.<br />
Concentración de anticuerpos<br />
Mayor o igual que 1 mg/L.<br />
Dilución y mezcla<br />
El anticuerpo <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) se presenta en dilución óptima para su uso en un sistema Bond. No es necesaria la reconstitución,<br />
mezcla, dilución o titulación de este reactivo.<br />
Material necesario pero no suministrado<br />
Consulte en el apartado “Uso de reactivos Bond” de la documentación de usuario de Bond la lista completa del material necesario para<br />
el tratamien<strong>to</strong> de las muestras y la tinción inmunohis<strong>to</strong>química cuando se utiliza el sistema Bond.<br />
Conservación y estabilidad<br />
Debe conservarse a 2–8 °C. No se debe utilizar después de la fecha de caducidad que aparece en la etiqueta del recipiente.<br />
Los signos que indican contaminación y/o inestabilidad de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) son: turbidez de la solución, aparición de olor y presencia<br />
de precipitado.<br />
Volver a guardar a 2–8 °C inmediatamente después de su uso.<br />
Si las condiciones de conservación son diferentes de las especificadas, el usuario debe realizar las comprobaciones necesarias1 .<br />
Precauciones<br />
• Este produc<strong>to</strong> es para uso diagnóstico in vitro.<br />
TM • La concentración de ProClin 950 es de 0,35%. Contiene el principio activo 2-metil-4-isotiazolin-3-ona, que puede producir irritación<br />
en la piel, ojos, mucosas y trac<strong>to</strong> respira<strong>to</strong>rio superior. Lleve siempre guantes desechables cuando manipule los reactivos.<br />
• Para obtener una copia de la Hoja de da<strong>to</strong>s de seguridad de los materiales, póngase en contac<strong>to</strong> con el distribuidor local o con la<br />
oficina regional de Leica Microsystems, o visite el sitio Web de Leica Microsystems, www.leica-microsystems.com.<br />
PA0996<br />
Page 10
• Las muestras, antes y después de ser fijadas, y cualquier material en contac<strong>to</strong> con ellas, deben ser tratados como sustancias<br />
capaces de transmitir infecciones y deben ser eliminadas con las precauciones correspondientes2 . No pipetee nunca los reactivos<br />
con la boca, y evite el contac<strong>to</strong> de la piel y las mucosas con reactivos o muestras. Si los reactivos o las muestras entran en contac<strong>to</strong><br />
con zonas sensibles, lávelas enseguida con abundante agua. Consulte a un médico.<br />
• Consulte la normativa federal, nacional o local referente a la eliminación de sustancias potencialmente tóxicas.<br />
• Minimice la contaminación microbiana de los reactivos, ya que puede producir un aumen<strong>to</strong> de las tinciones inespecíficas.<br />
Instrucciones de uso<br />
El anticuerpo <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) se ha desarrollado para su uso en el sistema au<strong>to</strong>matizado Bond en combinación con Bond Polymer<br />
Refine Detection. El pro<strong>to</strong>colo de tinción recomendado para <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) es IHC Pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) debe utilizarse<br />
en lugar del anticuerpo primario de ratón con cada muestra del paciente; debe teñirse un corte separado para cada mé<strong>to</strong>do de<br />
recuperación empleado (incluida la ausencia de recuperación).<br />
Resultados esperados<br />
Tejidos normales<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) no produjo ninguna tinción en diversos tejidos normales. (Número <strong>to</strong>tal de casos teñidos = 53).<br />
Se recomienda el uso de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) como control negativo para anticuerpos primarios de ratón lis<strong>to</strong>s para usar Bond.<br />
Limitaciones específicas del produc<strong>to</strong><br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) se ha optimizado en Leica Microsystems para su uso con Bond Polymer Refine Detection y reactivos auxiliares<br />
Bond. Los usuarios que se aparten de los procedimien<strong>to</strong>s de análisis recomendados deben asumir la responsabilidad de interpretar los<br />
resultados del paciente <strong>to</strong>mando en cuenta estas circunstancias. Los tiempos del pro<strong>to</strong>colo pueden diferir debido a las variaciones en la<br />
fijación de los tejidos y en la eficacia de la preservación del antígeno, y deben determinarse empíricamente. Se debe utilizar controles<br />
negativos con reactivos a la hora de optimizar las condiciones de detección y los tiempos de pro<strong>to</strong>colo.<br />
Resolución de problemas<br />
Consulte la referencia 3 para ver las acciones correc<strong>to</strong>ras.<br />
Póngase en contac<strong>to</strong> con su distribuidor local o la oficina regional de Leica Microsystems para informar de cualquier tinción anómala.<br />
Más información<br />
Para obtener más información sobre inmunotinciones con reactivos Bond, consulte los apartados Principio del procedimien<strong>to</strong>, Material<br />
necesario, Preparación de las muestras, <strong>Control</strong> de calidad, Verificación del análisis, Interpretación de la tinción, Clave de símbolos en<br />
las etiquetas y Limitaciones generales de la sección “Utilización de Reactivos Bond” de la documentación de usuario suministrada por<br />
Bond.<br />
Bibliografía<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 es una marca comercial de Supelco, parte de Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Fecha de publicación<br />
13 de febrero de 2009<br />
PA0996<br />
Page 11
<strong>Control</strong>o Negativo Pron<strong>to</strong> A Usar Bond <br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Nº de Catálogo: PA0996<br />
Utilização Prevista<br />
Este reagente destina-se a utilização diagnóstica in vitro.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) destina-se a ser usado como um controlo negativo de ratinho por coloração imunohis<strong>to</strong>química qualitativa utilizando<br />
um sistema Bond TM<br />
au<strong>to</strong>matizado. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) não é dirigido contra um antigénio conhecido no tecido humano. A interpretação<br />
clínica de qualquer coloração ou da sua ausência deve ser complementada por estudos morfológicos utilizando controlos adequados, e<br />
deve ser avaliada no contex<strong>to</strong> da história clínica do doente e de outros testes complementares de diagnóstico por um<br />
aná<strong>to</strong>mo-pa<strong>to</strong>logista qualificado.<br />
Resumo e Explicação<br />
As técnicas de imunohis<strong>to</strong>química podem ser utilizadas para demonstrar a presença de antigénios em tecidos e células (ver “Utilizar os<br />
Reagentes Bond” na documentação do utilizador Bond). <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) consiste num produ<strong>to</strong> pron<strong>to</strong> usar que foi especificamente<br />
optimizado para utilização com Bond Polymer Refine Detection.<br />
Em alguns tecidos, especialmente nos tecidos neoplásicos ou necróticos, pode ocorrer ligação não específica. A utilização de <strong>Negative</strong><br />
(<strong>Mouse</strong>) está recomendada para ajudar na identificação de células, tecidos ou componentes tecidulares que podem ligar, de forma<br />
inespecífica, anticorpos monoclonais de ratinho e irá permitir uma melhor interpretação da coloração específica no local antigénico.<br />
A demonstração de coloração inespecífica é obtida por, primeiro, permitindo a ligação de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) à secção e visualizando-a<br />
posteriormente utilizando os reagentes fornecidos no sistema de detecção. A utilização destes produ<strong>to</strong>s, em combinação com um<br />
sistema Bond au<strong>to</strong>matizado, reduz a possibilidade de erro humano e da variabilidade inerente resultante da diluição do reagente<br />
individual, pipetagem manual e aplicação de reagente.<br />
Reagentes Fornecidos<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) é um anticorpo monoclonal de ratinho purificado, fornecido em solução salina com tampão Tris com proteína<br />
transportadora, contendo 0,35% de ProClinTM 950 como conservante.<br />
Volume <strong>to</strong>tal = 7 mL.<br />
Clone<br />
MOPC-21.<br />
Imunogénio<br />
Não aplicável.<br />
Especificidade<br />
Não aplicável.<br />
Subclasse<br />
IgG1.<br />
Concentração de Proteínas Totais<br />
Aproximadamente 10 mg/mL.<br />
Concentração de Anticorpos<br />
Superior ou igual a 1 mg/L.<br />
Diluição e Mistura<br />
O anticorpo <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) apresenta-se com uma diluição ideal para utilização num sistema Bond. Não é necessária reconstituição,<br />
mistura, diluição ou titulação deste reagente.<br />
Material Necessário Mas Não Fornecidos<br />
Consultar “Usar os reagentes Bond” na sua documentação do utilizador Bond para uma lista completa de materiais necessários para<br />
tratamen<strong>to</strong> de amostras e coloração imunohis<strong>to</strong>química usando um sistema Bond.<br />
Armazenamen<strong>to</strong> e Estabilidade<br />
Conservar entre 2–8 °C. Não utilize após o fim do prazo de validade referido no rótulo do recipiente.<br />
Os sinais que indicam contaminação e/ou instabilidade de <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) são: turvação da solução, desenvolvimen<strong>to</strong> de odor e<br />
presença de precipitado.<br />
Coloque entre 2–8 °C imediatamente depois de utilizar.<br />
Condições de armazenamen<strong>to</strong> diferentes das acima especificadas devem ser confirmadas pelo utilizador1 .<br />
Precauções<br />
• Este produ<strong>to</strong> destina-se a utilização diagnóstica in vitro.<br />
TM • A concentração de ProClin 950 é 0,35%. Contém o ingrediente activo 2-metil-4-isotiazolina-3-a e pode provocar irritação da pele,<br />
olhos, membranas mucosas e vias aéreas superiores. <strong>Use</strong> luvas descartáveis quando manipular os reagentes.<br />
PA0996<br />
Page 12
• Para obter uma cópia da Ficha de Dados de Segurança do Material, entre em contac<strong>to</strong> com o seu distribuidor local ou sucursal<br />
regional da Leica Microsystems ou, em alternativa, visite o site da Leica Microsystems na internet, www.leica-microsystems.com.<br />
• As amostras, antes e depois da fixação, e <strong>to</strong>do o material que a elas seja expos<strong>to</strong>, devem ser manipulados como se fossem capazes<br />
de transmitir infecção e eliminados usando as precauções adequadas2 . Nunca pipete reagentes com a boca e evite o contac<strong>to</strong> entre<br />
a pele e membranas mucosas com reagentes ou amostras. Se reagentes ou amostras entrarem em contac<strong>to</strong> com áreas sensíveis,<br />
lave com uma quantidade abundante de água. Consulte um médico.<br />
• Consulte os regulamen<strong>to</strong>s federais, estatais e locais relativamente à eliminação de quaisquer componentes potencialmente tóxicos.<br />
• Minimize a contaminação microbiana dos reagentes ou poderá ocorrer um aumen<strong>to</strong> da coloração inespecífica.<br />
Instruções de Utilização<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) foi desenvolvido para utilização num sistema Bond au<strong>to</strong>matizado em combinação com Bond Polymer Refine<br />
Detection. O pro<strong>to</strong>colo de coloração indicado para o <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) é o IHC Pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) deve ser usado em vez do<br />
anticorpo primário de ratinho com cada amostra do doente, e uma secção separada deve ser corada para cada mé<strong>to</strong>do de recuperação<br />
utilizado (incluindo a ausência de recuperação).<br />
Resultados Esperados<br />
Tecidos normais<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) não produziu qualquer coloração numa ampla variedade de tecidos normais. (número de casos corados = 53).<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) está recomendado para utilização como um controlo negativo para anticorpos primários monoclonais de ratinho do<br />
Bond Pron<strong>to</strong> a Usar.<br />
Limitações Específicas do Produ<strong>to</strong><br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) foi optimizado na Leica Microsystems para utilização com Bond Polymer Refine Detection e reagentes auxiliares<br />
Bond. Os utilizadores que se desviem dos procedimen<strong>to</strong>s de teste recomendados devem assumir a responsabilidade pela interpretação<br />
dos resultados dos doentes nestas circunstâncias. Os tempos de pro<strong>to</strong>colo podem variar, devido a variações na fixação tecidular e<br />
na eficácia da valorização com antigénios, devendo ser determinados de forma empírica. Devem ser utilizados controlos de reagente<br />
negativos quando se optimizam as condições de recuperação e os tempos do pro<strong>to</strong>colo.<br />
Resolução de Problemas<br />
Consulte a referência 3 para acções de resolução.<br />
Entre em contac<strong>to</strong> com o seu distribuidor local ou com a sucursal regional da Leica Microsystems para notificar qualquer coloração<br />
pouco habitual.<br />
Informações Adicionais<br />
Poderá encontrar informações adicionais sobre imunocoloração com reagentes Bond nas secções de Princípios do Procedimen<strong>to</strong>,<br />
Material Necessário, Preparação da Amostra, <strong>Control</strong>o de Qualidade, Verificação do Ensaio, Interpretação da Coloração, Significado<br />
dos Símbolos nos Rótulos e Limitações Gerais em “Utilizar os Reagentes Bond” na documentação do utilizador Bond.<br />
Bibliografia<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 é uma marca comercial de Supelco, parte da Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Data de Emissão<br />
13 de Fevereiro de 2009<br />
PA0996<br />
Page 13
Bond <br />
bruksfärdig negativ kontroll<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Katalognr: PA0996<br />
Användningsområde<br />
Reagenset är avsett för in vitro-diagnostik.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är avsett att användas som en mus-negativ kontroll för kvalitativ immunhis<strong>to</strong>kemisk infärgning med användning av det<br />
au<strong>to</strong>matiska systemet Bond TM<br />
. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är inte riktad mot någon känd antigen i human vävnad. Den kliniska <strong>to</strong>lkningen av varje<br />
infärgning, eller utebliven infärgning, måste alltid kompletteras med morfologiska studier och lämpliga kontroller. Utvärderingen bör göras<br />
av kvalificerad pa<strong>to</strong>log och inkludera patientens anamnes och övriga diagnostiktester.<br />
Förklaring och sammanfattning<br />
Med immunhis<strong>to</strong>kemiska me<strong>to</strong>der kan man påvisa förekomsten av antigener i vävnad och celler (se ”Använda Bond-reagens” i<br />
användardokumentationen från Bond). Den primära antikroppen <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är en bruksfärdig produkt som speciellt optimerats för<br />
användning med Bond Polymer Define Detection.<br />
I vissa vävnader kan icke-specifik bindning inträffa, särskilt i neoplastisk eller nekrotisk vävnad. Användningen av <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
rekommenderas som hjälp vid identifiering av celler, vävnader eller vävnadskomponenter, som icke-specifikt kan binda monoklonala<br />
antikroppar från mus och möjliggör bättre <strong>to</strong>lkning av specifik infärgning på antigen-platsen.<br />
Påvisande av icke-specifik infärgning uppnås genom att man först låter <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) binda till snittet och därefter visualiserar denna<br />
bindning med hjälp av de reagens som ingår i detektionssystemet. Användning av dessa produkter tillsammans med det au<strong>to</strong>matiska<br />
Bond-systemet reducerar risken för mänskliga misstag och för den inherenta spridning som orsakas av individuell reagensutspädning,<br />
manuell pipettering och manuell reagenstillsättning.<br />
Ingående reagenser<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är en renad monoklonal antikropp från mus. Den levereras i trisbuffrad koksaltlösning med bärarprotein. Lösningen<br />
innehåller 0,35 % ProClinTM 950 som konserveringsmedel.<br />
Total volym = 7 ml.<br />
Klon<br />
MOPC-21.<br />
Immunogen<br />
Ej tillämpligt.<br />
Specificitet<br />
Ej tillämpligt.<br />
Undergrupp<br />
IgG1.<br />
Total proteinkoncentration<br />
Omkring 10 mg/ml.<br />
Antikroppskoncentration<br />
Större än eller lika med 1 mg/L<br />
Spädning och blandning<br />
Den antikroppen <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är optimalt utspädd för användning på ett Bond-system. Detta reagens behöver varken<br />
rekonstitueras, blandas, spädas eller titreras.<br />
Nödvändig materiel som ej medföljer<br />
I ”Använda Bond-reagens” i Bond-användardokumentationen finns en fullständig lista med den materiel du behöver för att behandla ett<br />
prov och för immunhis<strong>to</strong>kemisk infärgning med ett Bond-system.<br />
Förvaring och stabilitet<br />
Förvaras vid 2–8 °C. Använd inte efter det utgångsdatum som anges på behållarens etikett.<br />
Tecken som indikerar kontaminering och/eller instabilitet för <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är: grumling i lösningen, luktutveckling och förekomst av<br />
fällning.<br />
Ställ tillbaka i 2–8 °C omedelbart efter bruk.<br />
Andra förvaringsbetingelser än de ovan angivna måste verifieras av användaren1 .<br />
Säkerhetsföreskrifter<br />
• Produkten är avsedd för in vitro-diagnostik.<br />
TM • Koncentrationen av ProClin 950 är 0,35 %. Den aktiva ingrediensen 2-metyl-4-isotiazolin-3-on kan orsaka irritationer i hud, ögon,<br />
slemhinnor och de övre luftvägarna. Använd engångshandskar när du hanterar reagens.<br />
• Du kan få tag på ett säkerhetsdatablad genom att kontakta en lokal distributör eller Leica Microsystems regionkon<strong>to</strong>r, eller besöka<br />
Leica Microsystems webbplats www.leica-microsystems.com.<br />
PA0996<br />
Page 14
• Prover, både före och efter fixering, samt all materiel som exponeras för dem, bör behandlas och avfallshanteras som potentiellt<br />
smittbärande material2 . Munpipettera aldrig reagens och undvik att hud eller slemhinnor kommer i kontakt med reagens eller prover.<br />
Om reagens eller prover skulle komma i kontakt med känsliga områden bör du tvätta dig med rikliga mängder vatten. Kontakta<br />
läkare.<br />
• Angående avfallshantering av potentiellt <strong>to</strong>xiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser och<br />
förordningar.<br />
• Minimera mikrobiologisk kontamination av reagens. Om detta inte görs kan det leda till en ökad icke-specifik infärgning.<br />
Bruksanvisning<br />
Den antikroppen <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) har utvecklats för användning på det au<strong>to</strong>matiserade Bond-systemet i kombination med Bond<br />
Polymer Refine Detection. Rekommenderat färgningspro<strong>to</strong>koll för <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) är IHC Pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) bör användas<br />
i stället för den primära antikroppen från mus med varje patientprov; ett separat snitt bör infärgas för varje retrieval-me<strong>to</strong>d som tillämpas<br />
(inklusive ingen retrieval).<br />
Förväntade resultat<br />
Normala vävnader<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) gav ingen infärgning i en uppsättning normala vävnader. (Total antal fall färgade = 53).<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) rekommenderas för användning som en negativ kontroll för Bonds bruksfärdiga primära antikroppar från mus.<br />
Produktspecifika begränsningar<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) har optimerats vid Leica Microsystems för användning med Bond Polymer Refine Detection och Bond hjälpreagenser.<br />
Användare som inte följer rekommenderade testpro<strong>to</strong>koll måste ta på sig ansvaret för att korrekt <strong>to</strong>lka patientresultat under dessa<br />
förhållanden. Som följd av variationer i vävnadsfixering och effektivitet hos antigensförstärkningen kan pro<strong>to</strong>kollets tider variera och de<br />
måste fastställas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas när man optimerar retrievalbetingelser och pro<strong>to</strong>kolltider.<br />
Felsökning<br />
Se referens 3 för förslag till åtgärder.<br />
Kontakta en lokal distributör eller Leica Microsystems regionkon<strong>to</strong>r för att rapportera onormal infärgning.<br />
Mer information<br />
Mer information om immunfärgning med Bond-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till me<strong>to</strong>den, Nödvändig materiel, Förbereda<br />
provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i<br />
”Använda Bond-reagens” i Bonds användardokumentation.<br />
Litteraturförteckning<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 är ett varumärke för Supelco som ingår i Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Utgivningsdatum<br />
13 februari 2009<br />
PA0996<br />
Page 15
Αρνητικός Μάρτυρας Έτοιμου Για Χρήση Bond <br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Αρ. Καταλόγου: PA0996<br />
Σκοπός Χρήσης<br />
Αυτό το αντιδραστήριο είναι για διαγνωστική χρήση in vitro.<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) προορίζεται για χρήση ως υλικό αρνητικού ελέγχου ποντικιού για την ποιοτική ανοσοϊστοχημική χρώση,<br />
χρησιμοποιώντας ένα αυτοματοποιημένο σύστημα Bond TM<br />
. Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) δεν οδηγείται σε γνωστό αντιγόνο στον ανθρώπινο ιστό.<br />
Η κλινική ερμηνεία της παρουσίας ή απουσίας χρώσης θα πρέπει να συμπληρώνεται με μελέτες μορφολογίας και κατάλληλα δείγματα<br />
ελέγχου και θα πρέπει να αξιολογείται από έναν ειδικευμένο παθολόγο, στα πλαίσια του κλινικού ιστορικού του ασθενούς και άλλων<br />
διαγνωστικών εξετάσεων.<br />
Περίληψη και Επεξήγηση<br />
Μπορούν να χρησιμοποιηθούν ανοσοϊστοχημικές μέθοδοι για την κατάδειξη της παρουσίας αντιγόνων στον ιστό και τα κύτταρα (δείτε<br />
“Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στην τεκμηρίωση χρήσης του Bond). Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) είναι ένα έτοιμο για χρήση προϊόν που έχει<br />
ειδικά βελτιστοποιηθεί για χρήση με το Bond Polymer Refine Detection.<br />
Σε μερικούς ιστούς, μπορεί να υπάρξει μη ειδική δέσμευση, ιδιαίτερα σε νεοπλαστικό ή νεκρωτικό ιστό. Η χρήση του <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
συνιστάται για βοήθεια στην ταυτοποίηση κυττάρων, ιστών ή συστατικών ιστών, τα οποία μπορεί να μη δεσμεύουν ειδικά τα αντισώματα<br />
του κουνελιού, καθώς και για καλύτερη ερμηνεία της ειδικής χρώσης στη θέση του αντιγόνου<br />
Η κατάδειξη της ανθρώπινης τυροσινάσης επιτυγχάνεται πρώτα επιτρέποντας τη δέσμευση του <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) στην τομή, και μετά<br />
οπτικοποιώντας αυτή τη δέσμευση με τη χρήση των αντιδραστηρίων που παρέχονται στο σύστημα ανίχνευσης. Η χρήση αυτών των<br />
προϊόντων, σε συνδυασμό με ένα αυτοματοποιημένο σύστημα Bond, μειώνει την πιθανότητα του ανθρώπινου σφάλματος και την<br />
εγγενή ποικιλότητα που προκαλείται από αραίωση συγκεκριμένου αντιδραστηρίου, χειροκίνητη αναρρόφηση με πιπέτα και εφαρμογή<br />
αντιδραστηρίου.<br />
Αντιδραστήρια που Παρέχονται<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) είναι ένα κεκαθαρμένο μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικιού που παρέχεται σε αλατούχο ρυθμιστικό διάλυμα Tris με<br />
πρωτεΐνη φορέα που περιέχει 0,35% ProClinTM 950 ως συντηρητικό.<br />
Συνολικός όγκος = 7 mL.<br />
Κλώνος<br />
MOPC-21.<br />
Ανοσογόνο<br />
Δεν ισχύει.<br />
Ειδικότητα<br />
Δεν ισχύει.<br />
Υποκατηγορία<br />
IgG1.<br />
Συνολική Συγκέντρωση Πρωτεΐνης<br />
Περίπου 10 mg/mL.<br />
Συγκέντρωση Αντισώματος<br />
Μεγαλύτερη ή ίση με 1 mg/L.<br />
Αραίωση και Ανάμειξη<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) αραιώνεται βέλτιστα για χρήση σε σύστημα Bond. Δεν απαιτείται ανασύσταση, ανάμιξη, αραίωση ή τιτλοδότηση<br />
αυτού του αντιδραστηρίου.<br />
Υλικά Που Απαιτούνται Αλλά Δεν Παρέχονται<br />
Για μια πλήρη λίστα των υλικών που απαιτούνται για την επεξεργασία δειγμάτων και την ανοσοϊστοχημική χρώση με τη χρήση του<br />
συστήματος Bond, ανατρέξτε στην ενότητα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό τεκμηρίωσης χρήσης της Bond.<br />
Φύλαξη και Σταθερότητα<br />
Αποθηκεύστε το προϊόν στους 2–8 °C. Μην το χρησιμοποιήσετε μετά την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα του δοχείου.<br />
Οι ενδείξεις που υποδηλώνουν μόλυνση ή/και αστάθεια του <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) είναι: θολότητα του διαλύματος, δημιουργία οσμής και<br />
παρουσία ιζήματος.<br />
Επαναφέρετε το προϊόν στους 2–8 °C αμέσως μετά τη χρήση.<br />
Οποιεσδήποτε άλλες συνθήκες αποθήκευσης εκτός από αυτές που καθορίζονται παραπάνω πρέπει να ελέγχονται από τον χρήστη1 .<br />
Προφυλάξεις<br />
• Αυτό το προϊόν προορίζεται για διαγνωστική χρήση in vitro.<br />
TM • Η συγκέντρωση του ProClin 950 είναι 0,35%. Περιέχει το ενεργό συστατικό 2-methyl-4-isothiazolin-3-one και μπορεί να προκαλέσει<br />
ερεθισμό του δέρματος, των ματιών, των βλεννογόνων μεμβρανών και της ανώτερης αναπνευστικής οδού. Φοράτε γάντια μίας<br />
χρήσης όταν χειρίζεστε αντιδραστήρια.<br />
PA0996<br />
Page 16
• Αν θέλετε ένα αντίγραφο του Material Safety Data Sheet [Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας Υλικού], επικοινωνήστε με τον αντιπρόσωπο<br />
ή το περιφερειακό γραφείο της Leica Microsystems, ή εναλλακτικά, επισκεφθείτε τον ιστότοπο της Leica Microsystems,<br />
www.leica-microsystems.com.<br />
• Ο χειρισμός των δειγμάτων, πριν και μετά τη μονιμοποίηση και όλων των υλικών που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να γίνεται ως<br />
εάν ήταν ικανά να μεταδώσουν μόλυνση και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις2 . Μην κάνετε<br />
ποτέ αναρρόφηση αντιδραστηρίων με πιπέτα με το στόμα και αποφύγετε να έρθει σε επαφή το δέρμα και οι βλεννογόνοι με τα<br />
αντιδραστήρια ή τα δείγματα. Αν αντιδραστήρια ή δείγματα έρθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετέ τις με άφθονο νερό.<br />
Ζητήστε ιατρική συμβουλή.<br />
• Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, κρατικούς και τοπικούς κανονισμούς σχετικά με την απόρριψη οποιωνδήποτε δυνητικά<br />
τοξικών συστατικών.<br />
• Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή επιμόλυνση των αντιδραστηρίων, γιατί διαφορετικά ενδέχεται να αυξηθεί η μη ειδική χρώση.<br />
Οδηγίες Χρήσης<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) αναπτύχθηκε για χρήση σε αυτοματοποιημένο σύστημα Bond, σε συνδυασμό με το Bond Polymer Refine<br />
Detection. Το συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης για το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) είναι το IHC Pro<strong>to</strong>col F. Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) θα πρέπει<br />
να χρησιμοποιείται στη θέση του πρωτογενούς αντισώματος κουνελιού με κάθε δείγμα ασθενή, και θα πρέπει να γίνεται χρώση σε<br />
ξεχωριστή τομή για κάθε μέθοδο ανάκτησης που χρησιμοποιείται (συμπεριλαμβάνεται και η μη ανάκτηση).<br />
Αναμενόμενα Αποτελέσματα<br />
Φυσιολογικοί Ιστοί<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) δεν δημιούργησε καμία χρώση σε μια ποικιλία φυσιολογικών ιστών. (Συνολικός αριθμός περιπτώσεων<br />
χρώσης = 53).<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) συνιστάται για χρήση ως υλικό αρνητικού ελέγχου για μονοκλωνικά πρωτογενή αντισώματα ποντικιού Έτοιμου Για<br />
Χρήση Bond.<br />
Ειδικοί Περιορισμοί του Προϊόντος<br />
Το <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) έχει βελτιστοποιηθεί στη Leica Microsystems για χρήση με το Bond Polymer Refine Detection και βοηθητικά<br />
αντιδραστήρια. Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις συνιστώμενες διαδικασίες εξέτασης, πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη για<br />
την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω<br />
της διαφοροποίησης στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και συνεπώς πρέπει<br />
να προσδιορίζονται εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να<br />
χρησιμοποιούνται δείγματα αντιδραστηρίου αρνητικού ελέγχου.<br />
Αντιμετώπιση Προβλημάτων<br />
Σχετικά με τις διορθωτικές ενέργειες, δείτε την παραπομπή 3.<br />
Επικοινωνήστε με τον αντιπρόσωπο ή το περιφερειακό γραφείο της Leica Microsystems για να αναφέρετε ασυνήθιστη χρώση.<br />
Πρόσθετες Πληροφορίες<br />
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες πάνω στην ανοσοχρώση με αντιδραστήρια Bond, υπό τους τίτλους “Αρχή της<br />
Διαδικασίας”, “Απαιτούμενα Υλικά”, “Προετοιμασία Δείγματος”, “Ποιοτικός Έλεγχος”, “Επαλήθευση Προσδιορισμού”, “Ερμηνεία της<br />
Χρώσης”, “Υπόμνημα για τα Σύμβολα στις Ετικέτες” και “Γενικοί Περιορισμοί” στο τμήμα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στην τεκμηρίωση<br />
χρήσης του Bond.<br />
Βιβλιογραφία<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
Το ProClin 950 είναι εμπορικό σήμα της Supelco, τμήμα της Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Ημερομηνία Έκδοσης<br />
13 Φεβρουαρίου 2009<br />
PA0996<br />
Page 17
Bond <br />
Brugsklar Negativ Kontrol<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
Katalognummer: PA0996<br />
Tilsigtet anvendelse<br />
Dette reagens er beregnet til brug ved in vitro-diagnostik.<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er beregnet til brug som murin negativ kontrol til kvalitativ immunhis<strong>to</strong>kemisk farvning med et au<strong>to</strong>matisk Bond TM<br />
-<br />
system. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er ikke rettet mod kendte antigener i humant væv. Den kliniske for<strong>to</strong>lkning af enhver farvning eller fravær af<br />
samme skal ledsages af morfologiske undersøgelser og egnede kontroller samt evalueres af en uddannet pa<strong>to</strong>log, som ser for<strong>to</strong>lkningen<br />
i kontekst med patientens anamnese samt andre diagnostiske prøver.<br />
Resumé og forklaring<br />
Immunhis<strong>to</strong>kemiske teknikker kan anvendes til at påvise tilstedeværelsen af antigener i væv og celler (se ”Anvendelse af Bondreagenser”<br />
i Bond-brugervejledningen). <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er et brugsklart produkt, som er optimeret specielt til brug med Bond Polymer<br />
Refine Detection.<br />
I nogle væv kan der forekomme uspecifik binding, især i neoplastiske eller nekrotiske væv. Det anbefales at anvende <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>)<br />
som en hjælp til identifikation af celler, væv eller vævskomponenter, som kan binde murine monoklonale antis<strong>to</strong>ffer uspecifikt. Det kan<br />
bidrage til en bedre <strong>to</strong>lkning af den specifikke farvning på antigenstederne.<br />
Påvisningen af uspecifik farvning opnås ved først at lade <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) binde sig til præparatet, og derefter visualisere denne<br />
binding ved hjælp af de reagenser, der leveres med detektionssystemet. Brugen af disse produkter sammen med et au<strong>to</strong>matisk<br />
Bond-system reducerer risikoen for menneskelige fejl og variabilitet som følge af individuel reagensfortynding, manuel pipettering og<br />
reagenspåførsel.<br />
Leverede reagenser<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er et oprenset murint monoklonalt antis<strong>to</strong>f leveret i en Tris-bufferjusteret saltvandsopløsning med bærerprotein,<br />
indeholder 0,35% ProClinTM 950 som konserveringsmiddel.<br />
Volumen i alt = 7 mL.<br />
Klon<br />
MOPC-21.<br />
Immunogen<br />
Ikke relevant.<br />
Specificitet<br />
Ikke relevant.<br />
Underklasse<br />
IgG1.<br />
Total proteinkoncentration<br />
Ca. 10 mg/mL.<br />
Antis<strong>to</strong>fkoncentration<br />
Større end eller lig med 1 mg/L.<br />
Fortynding og blanding<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>), antis<strong>to</strong>f, er optimalt fortyndet til brug på et Bond-system. Rekonstitution, blanding, fortynding eller titrering af dette<br />
reagens er ikke påkrævet.<br />
Nødvendige materialer, der ikke medfølger<br />
Der henvises til ”Anvendelse af Bond-reagenser” i Bond-brugervejledningen for en komplet liste over materialer, der er nødvendige til<br />
præparatbehandling og immunhis<strong>to</strong>kemisk farvning ved hjælp af et Bond-system.<br />
Opbevaring og stabilitet<br />
Opbevares ved 2–8 °C. Må ikke anvendes efter udløbsda<strong>to</strong>en, der er angivet på etiketten på beholderen.<br />
De tegn, der indikerer, at <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er kontamineret og/eller ustabilt, omfatter: turbiditet af opløsningen, lugtudvikling og<br />
forekomst af præcipitat.<br />
Sættes tilbage til opbevaring ved 2–8 °C umiddelbart efter brug.<br />
Opbevaringsbetingelser, der adskiller sig fra de oven for specificerede, skal verificeres af brugeren1 .<br />
Forholdsregler<br />
• Dette produkt er beregnet til brug ved in vitro-diagnostik.<br />
TM • Koncentrationen af ProClin 950 er 0,35 %. Det indeholder den aktive ingrediens 2-methyl-4-isothiazolin-3-one og kan give anledning<br />
til irritation af hud, øjne, slimhinder og øvre luftveje. Der skal anvendes engangshandsker ved håndtering af reagenserne.<br />
• En kopi af sikkerhedsdatabladet, Material Safety Data Sheet, kan fås ved henvendelse til den lokale distributør eller til Leica<br />
Microsystems’ regionale kon<strong>to</strong>r. Det kan tillige hentes på Leica Microsystems’ hjemmeside: www.leica-microsystems.com.<br />
PA0996<br />
Page 18
• Præparater, både før og efter fiksering, samt alle materialer eksponeret for præparater, skal håndteres som værende i stand til at<br />
overføre infektion og skal bortskaffes med passende forholdsregler2 . Afpipettér ikke reagenser med munden, og undgå at reagenser<br />
og præparater kommer i kontakt med hud og slimhinder. Hvis reagenser eller præparater kommer i kontakt med følsomme områder,<br />
skal disse områder vaskes med rigelige mængder vand. Søg læge.<br />
• Bortskaffelse af potentielt <strong>to</strong>ksiske komponenter skal ske i overensstemmelse med gældende statslig eller lokal lovgivning.<br />
• Mikrobiel kontaminering af reagenser skal minimeres for at undgå øget uspecifik farvning.<br />
Brugsanvisning<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er udviklet til brug på et au<strong>to</strong>matisk Bond-system sammen med Bond Polymer Refine Detection. Den anbefalede<br />
farvningspro<strong>to</strong>kol for <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er IHC pro<strong>to</strong>col F. <strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) bør anvendes i stedet for det murine primære antis<strong>to</strong>f med<br />
hvert patientpræparat. Der bør farves et separat vævssnit for hver genfindingsme<strong>to</strong>de, der benyttes (inkl. ingen genfinding).<br />
Forventede resultater<br />
Normale væv<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) gav ingen farvning i en række normale væv. (Antal farvede cases i alt = 53).<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) anbefales til brug som en negativ kontrol til Bond brugsklare murine monoklonale primære antis<strong>to</strong>ffer.<br />
Produktspecifikke begrænsninger<br />
<strong>Negative</strong> (<strong>Mouse</strong>) er optimeret hos Leica Microsystems til brug med Bond Polymer Refine Detection og Bond hjælpereagenser.<br />
Brugere, som afviger fra de anbefalede testprocedurer, må under disse forhold selv tage ansvaret for for<strong>to</strong>lkningen af patientresultater.<br />
Pro<strong>to</strong>koltiderne kan variere på grund af variationer i vævsfiksering og effektiviteten i antigenfremhævning og skal bestemmes empirisk.<br />
Der skal anvendes negative reagenskontroller under optimering af genfindingsbetingelser og pro<strong>to</strong>koltider.<br />
Fejlfinding<br />
Der henvises til reference 3 for afhjælpende foranstaltninger.<br />
Kontakt venligst den lokale distributør eller Leica Microsystems’ regionale kon<strong>to</strong>r for at rapportere usædvanlig farvning.<br />
Yderligere oplysninger<br />
Yderligere oplysninger om immunfarvning med Bond-reagenser kan findes i ”Anvendelse af Bond-reagenser” i Bond- brugervejledningen<br />
under overskrifterne Proceduremæssige principper, Nødvendige materialer, Præparatklargøring, Kvalitetskontrol, Analyseverifikation,<br />
For<strong>to</strong>lkning af farvning, Nøgle til symboler på etiketter og Generelle begrænsninger.<br />
Bibliografi<br />
1. Clinical Labora<strong>to</strong>ry Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.<br />
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Labora<strong>to</strong>ry Standards (NCCLS). Protection of labora<strong>to</strong>ry workers from infectious<br />
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.<br />
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of His<strong>to</strong>logical Techniques. 4th Edition. Churchill Livings<strong>to</strong>ne, New York. 1996.<br />
ProClin 950 er et varemærke tilhørende Supelco, en del af Sigma-Aldrich Corporation.<br />
Udgivelsesda<strong>to</strong><br />
13. februar 2009<br />
PA0996<br />
Page 19
PA0996<br />
Page 20
PA0996<br />
Page 21
PA0996<br />
Page 22
Leica Biosystems Newcastle Ltd<br />
Balliol Business Park West<br />
Ben<strong>to</strong>n Lane<br />
Newcastle Upon Tyne NE12 8EW<br />
United Kingdom<br />
( +44 191 215 4242<br />
13 February 2009<br />
© Leica Microsystems GmbH • HRB 5187 • 95.7947 Rev B • PA0996