ecologia cualitativa - Departamento de Ciencias BiolÃ³gicas

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• Inicialmente es necesario extraer los ácidos nucleicosde la muestra ambiental. Este paso usualmenteconsiste en una exhaustiva purificación para eliminarproteínas, ácidos húmicos, y otros compuestos quepudieran interferir con el posterior análisis de losácidos nucleicos. Se utilizan generalmente dosprocedimientos para la recuperación del RNA o elDNA de la muestra: La extracción de las células microbianas seguida de lalisis celular y purificación de los ácidos nucleicos. Lisis directa de las células en la matriz ambientalseguida de la purificación de los ácidos nucleicos .• Entre las técnicas que permiten generar un perfil deácidos nucleicos las más utilizadas son: ARDRA (Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis) T-RFLP (Terminal Restriction Fragment LengthPolymorphism) DGGE/TGGE (Denaturing Gradient Gel Electrophoresis) .11/09/2006 24
Extracción de ácidos nucleicos de muestras ambientalesConcentraciónLisis indirectaLisis directaMuestrasLisis celularSeparación decomponentes celularesProteínasPolisacáridosDigestión de DNA/RNAPrecipitación de DNA/RNAPurificación de DNA/RNA11/09/2006 25
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