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REACTIVOS DEL KIT REACTIVOS CANTIDAD ESTADO FÍSICO K1TG K1TGB MTP 1 x 96 1 x 192 Listo para usar WASH 1 x 50 mL 2 x 50 mL Concentrada DIL 1 x 20 mL 2 x 20 mL Concentrado NEG 1 x 2 mL 1 x 2 mL Listo para usar CAL 1 x 2.5 mL 4 x 1.5 mL 1 x 2.5 mL 4 x 1.5 mL Listo para usar CONJ 1 x 14 mL 2 x 14 mL Listo para usar TMB 2 x 15 mL 2 x 15 mL Listo para usar STOP 1 x 14 mL 2 x 14 mL Listo para usar K3CG/K3CGB –CITOMEGALOVIRUS IgG EIA WELL M44.es – Rev.13 – 07/2008 – Pag. 2/12
ENSAYO INMUNOENZIMÁTICO PARA LA DETERMINACIÓN CUALITATIVA Y/O CUANTITATIVA DE LOS ANTICUERPOS IgG ANTI-CITOMEGALOVIRUS EN SUERO O PLASMA HUMANO PARA USO DIAGNÓSTICO “IN VITRO” 1. APLICACIONES CLÍNICAS El citomegalovirus (CMV) es un virus de estructura icosaédrica con un diámetro de 180 – 250 nm, perteneciente a la familia de los Herpes virus. El virus tiene efectos citopatológicos con engrosamiento de las células huespedes con inclusiones citoplasmáticas y nucleares. El CMV está considerado como uno de los factores biológicos más importantes causantes de anomalias congénitas como consecuencia de infecciones imtrauterinas. Aproximadamente el 2% de las mujeres embarazadas contraen una infección primaria o una reinfección, mientras el 10 –20% de los neonatos con infecciones congénitas causadas por CMV presentan daños significativos en el sistema nervioso central. Estas infecciones congénitas pueden ser también provocadas por una reactivación endógena del virus en la madre. Recientemente se está dando notable importancia al CMV como causa de complicaciones en el transplante de órganos, especialmente de riñón. La incidencia de infecciones por CMV tras un transplante renal de un sujeto CMV positivo a uno CMV negativo se ha estimado alrededor del 52 – 100%. La infección por CMV está muy difundida: anticuerpos anti-CMV se han encontrado en el 50 – 70% de los individuos de más de 35 años. Por otra parte el CMV ha podido aislarse en la cérvix uterina del 10% de las mujeres sanas. La infección por CMV más difundida es normalmente asintomática. Tras una infección primaria por CMV, los anticuerpos IgM, en individuos inmunocompetentes, persisten entre 2 a 9 meses. En los pacientes sometidos a transplantes o inmunodeprimidos, los anticuerpos IgM pueden persistir en el organismo durante más de 2 años. 2. PRINCIPIO DEL MÉTODO El presente kit se basa en el método inmunoenzimático (ELISA) y utiliza como marcador enzimático la peroxidasa. Durante la primera incubación los anticuerpos anti-CMV de la clase IgG eventualmente presentes en la muestra, se unen al antígeno CMV adherido a la superficie de los pocillos. Mediante un lavado se elimina aquel material que no se haya unido; en una posterior incubación se hace reaccionar un segundo anticuerpo (anti-IgG humanas), conjugado con peroxidasa con el complejo ya formado entre antígenos y anticuerpos. Tras un nuevo lavado, se añade tetrametilbencidina (TMB) incolora que, al reaccionar con la peroxidasa, produce un compuesto coloreado. La reacción de desarrollo de color se para añadiendo H2SO4 y la intensidad del color, medida en un espectrofotómetro a 450 nm y a 405 nm, es directamente proporcional a la concentración de los anticuerpos IgG anti-CMV presentes en los calibradores y en las muestras. 3. REACTIVOS SUMINISTRADOS CON EL KIT: PREPARACIÓN Y ESTABILIDAD − Los reactivos son suficientes para 96 pocillos (REF K3CG) o para 192 pocillos (REF K3CGB). − El kit debe conservarse a 2-8°C. − La fecha de caducidad de cada reactivo está indicada en su etiqueta. − Una vez abierto el kit es estable 2 meses a 2-8°C. K3CG/K3CGB –CITOMEGALOVIRUS IgG EIA WELL M44.es – Rev.13 – 07/2008 – Pag. 3/12
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