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IgE TOTALI IEMA WELL REF - Radim S.p.A.

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ENSAYO INMUNOENZIMOMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN CUANTITATIVA<br />

DE LAS <strong>IgE</strong> TOTALES EN SUERO HUMANO.<br />

PARA USO DIAGNÓSTICO “IN VITRO”<br />

1. APLICACIONES CLÍNICAS<br />

Las inmunoglobulinas E (<strong>IgE</strong>) aisladas por primera vez (1968) por Bennich y Johansson<br />

en Uppsala, constituyen la quinta clase de las Inmunoglobulinas. La forma monómera<br />

de las <strong>IgE</strong> está formada por dos cadenas livianas (K, lambda) unidas por puentes de<br />

sulfuro y dos cadenas pesadas (ε) capaces de fijar el complemento. Las <strong>IgE</strong> tienen<br />

peso molecular comprendido entre 188.000 y 196.000, contienen el 12% de<br />

carbohidratos y tienen una constante de sedimentación de 7,925 S.<br />

La actividad reactiva de las <strong>IgE</strong> se debe a la notable afinidad que las cadenas E, tienen<br />

con receptores específicos presentes en la membrana de los mastocitos y de los<br />

polinucleares basófilos. La liberación de mediadores farmacológicos (ejemplo:<br />

Histamina) está determinada por la interacción de las <strong>IgE</strong>, ligadas a los receptores de<br />

membranas, con alérgenos inhalados o absorbidos.<br />

En los sujetos atópicos (alta concentración de <strong>IgE</strong>) los receptores están saturados al<br />

100%. En sujetos no atópicos (bajas concentraciones de <strong>IgE</strong>), la saturación alcanza un<br />

máximo de un 20%. En los sujetos normales la concentración de <strong>IgE</strong> es<br />

extremadamente baja. Sujetos con patologías alérgicas (asma, alergia al polen,<br />

eczemas) presentan elevadas concentraciones de <strong>IgE</strong>. Tal concentración es correlativa<br />

al grado de inmunoestimulación. Cuantos más son los alérgenos a los cuales el<br />

paciente es alérgico y expuesto y cuanto más graves son los síntomas, tanto más<br />

elevado es el nivel de <strong>IgE</strong>. La concentración de las <strong>IgE</strong> puede estar sujeta a variaciones<br />

circadianas además de presentar una notable variación entre un individuo y otro.<br />

Los niveles de <strong>IgE</strong> tienden a aumentar desde el nacimiento hasta los 60-65 años,<br />

después de lo cual pueden sufrir un decrecimiento.<br />

No siempre bajos niveles de <strong>IgE</strong> excluyen una etiología de tipo alérgico. Raras veces,<br />

en efecto, alergias monovalentes (sensibilidad a un solo alérgeno) se caracterizan por<br />

tener bajos niveles de <strong>IgE</strong>. En estos casos el diagnóstico se puede hacer sólo con<br />

ensayos muy sensibles para las <strong>IgE</strong> específicas.<br />

2. PRINCIPIO DEL MÉTODO<br />

El presente kit se basa en el método inmunoenzimométrico (<strong>IEMA</strong>). Se utilizan dos<br />

anticuerpos distintos anti-<strong>IgE</strong>, uno absorbido en los pocillos y el otro conjugado con<br />

peroxidasa de rábano (HRPO). Durante la incubación, las <strong>IgE</strong> presentes en los<br />

calibradores y en las muestras se une al mismo tiempo con ambos anticuerpos,<br />

formando un "sándwich". Al final de la incubación el material que no se haya unido se<br />

elimina mediante aspiración y lavado. La actividad enzimática que quede fijada a la fase<br />

sólida será directamente proporcional a la concentración de <strong>IgE</strong> en los calibradores y en<br />

las muestras, y se manifiesta añadiendo a los pocillos una solución de cromógeno<br />

(tetrametilbencidina, TMB) y un tampón substrato. La intensidad del color desarrollado<br />

se mide mediante un espectrofotómetro a 450 y a 405 nm.<br />

KP21IW – <strong>IgE</strong> Totali Iema Well<br />

M145.es – Rev. 9 – 06/2006 – Pag. 3/14

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