Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

Falls hoher Hintergrund ein Problem ist, der folgende Puffer wird statt
1,4 M NaCl – PBS empfohlen: 5M Guanidinhydrochlorid (GuHCl) –
PBS.
478 g GuHCl und 8,77 g NaCl in 700 ml Wasser auflösen. 33,3 ml
0,3 M KH 2 PO 4 hinzufügen und den pH-Wert bis zu 7,2 bringen. Filtern
(falls nötig) und bis zu 1,0 Liter mit Wasser verdünnen.
4. 0,005 M Phosphatpuffer, pH-Wert 7,2 (Puffer die von niedriger
Ionenstärke sind, und die zum Gebrauch in der Lyophilisierung von
Perlen-Reagenzien bestimmt sind).
16,7 ml 0,3 M KH 2 PO 4 mit 800 ml Wasser verdünnen. Den pH-Wert
bis zu 7,2 mit 1 M KOH bringen. Bis zu 1,0 Liter verdünnen.
5. 0,005 M Phosphatpuffer – 1% BSA (Verhindert unspezifische
Aufsaugung mit endgültige Immunobead-Reagenzien). Falls BSA
nicht wünschenswert ist, ein ähnliches Reagenz soll mit einem
anderen Carrierprotein vorbereitet werden. 5 g eines hochwertigen
BSA (I.S. Katalog # 1092) in 500 ml des vorhergehenden Puffers
auflösen.
B. Vorbereitung des Immunobead Matrix mit Globulin
Fraction Antibody (Globulinbruchteil Antikörper)
1. Globulinbruchteile der Heilsera sollen in PBS total löslich sein.
Zentrifugieren, um unlöslichen Stoff wegzunehmen.
2. Mit einem Wert für OD196 von 14 für Kaninchenglobulin und 13 für
280
Ziegenglobulin, die Konzentration Ihrer Vorbereitung bestimmen.
Ein Volumen (Proteininhalt: 8-10 mg) Ihrer Vorbereitung gegen den
Kupplungspuffer dialysieren.
Die dialysierte Antikörpervorbereitung zu den Immunobead-
Reagenzen hinzufügen, einschliesslich Stoff, der im Kupplungspuffer
präzipitiert.
Deutsch 2/7