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Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

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VERWENDUNGSZWECK<br />

200 mg lyophilisiertes Immunobead <strong>Matrix</strong> wird beliefert. Das<br />

Immunobead <strong>Matrix</strong> beinhaltet 0,01% NaN 3 . Die Wiederhydration mit 20<br />

ml destilliertem Wasser stellt eine 10 mg/ml Suspension im empfohlenen<br />

Kupplungspuffer her. Das Produkt nicht nach der Hydration einfrieren.<br />

Bei 4ºC lagern.<br />

Antikörper-Kupplung wird bei einem pH-Wert von 6,3 ausgeführt; aber,<br />

die Kupplung von anderen Arten von Proteinen wird bei einem pH-Wert<br />

ausgeführt, der nahe am isoelektrischen Punkt des Proteins ist. Zum<br />

Beispiel, Human Serum Albumin (isoelektrischer Punkt = 4,8) wird zum<br />

Immunobead <strong>Matrix</strong> in 0,01 M Pyridine-Puffer (pH-Werd 4,8) verkoppelt.<br />

Es ist notwendig, dass die Kupplung bei niedrigem Ionenstärke<br />

(Leitfähigkeit 1.000 µohm) ausgeführt wird.<br />

GEBRAUCHSANWEISUNG<br />

A. Puffer<br />

1. Kupplungspuffer (0,003 M Phosphat, pH-Wert 6,3).<br />

40,8 g KH 2 PO 4 in 1 Liter H 2 O auflösen, um eine 0,3 M Stammlösung<br />

von monobasischem Kaliumphosphat (KH 2 PO 4 wasserfrei,<br />

Molekulargewicht = 136,1) vorzubereiten. 10 ml 0,3 M KH 2 PO 4 mit<br />

800 ml Wasser verdünnen. Den pH-Wert bis zu 6,3 mit 0,1 M KOH<br />

bringen. Das Produkt zu 1,0 Liter verdünnen.<br />

2. Phosphate buffered saline (PBS) (0,01 M KH 2 PO 4 , 0,15 M NaCl,<br />

pH-Wert 7,2 mit KOH).<br />

478 g Natriumchlorid und 0,1 g NaN 3 in 500 mL Wasser auflösen. 33,3<br />

ml einer 0,3 M KH 2 PO 4 Stammlösung hinzufügen. Den pH-Wert bis<br />

zu 7,2 mit 1 M KOH bringen. Bis zu 1,0 Liter mit Wasser verdünnen.<br />

3. 1,4 M Natriumchlorid (NaCl) – PBS.<br />

73,22 g NaCl in 700 ml PBS auflösen. Bis zu 1,0 Liter mit PBS<br />

verdünnen und den pH-Wert bis zu 7,2 bringen.<br />

Deutsch 1/7

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