Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

Os tampões devem ser conservados a a 4° C. Uma vez começado
o high salt step, os restantes passos devem ser completados no
mínimo de tempo.
1. Divida o material colocando quantidades iguais em tubos de
centrifuga . Requer-se de um volume de pelo menos 80 mL/200
mg de reagente Immunobead para a lavagem
2. Encha os tubos na sua capacidade e equilibre os mesmos com PBS.
Centrifugue a um mínimo de 1,000 x g pelo menos, por 10 minutos.
3. Imediatamente depois da centrifuga parar, decante e descarte o
sobrenadante mediante a inversão completa dos tubos.
4. Adicione um pequeno volume de PBS a cada tubo. Ressuspenda
o pellet usando um agitador vortex ou agitador vigoroso.
5. Repita os passos 2 e 3.
6. Resuspenda o pellet num pequeno volume de 1.4 M NaCl-PBS.
Encha os tubos na sua capacidade e equilibre com 1.4 M NaCl-PBS.
7. Centrifugue a 1,000 x g por 10 minutos.
8. Imediatamente depois da centrifuga parar, decante o sobrenadante
com uma única e completa inversão dos tubos. Seque brevemente.
9. Repita os passos 6, 7, e 8.
10. Lave duas vezes com PBS. (Repita duas vezes os passos 4, 2, e
3.)
11. Ressuspenda em PBS e deixe repousar sobre gelo (4°C) pelo menos
por 3 horas para permitir completar a renaturação dos anticorpos
de ligação
Português 5/6