Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific
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Cette séquence éliminera complètement tout matériel non lié de façon<br />
covalente avec une perte d’activité minimale. Toutes les étapes sont<br />
importantes et doivent être suivies rigoureusement. Les tampons<br />
doivent être maintenus à 4°C. Une fois l’étape de haute concentration<br />
en sels a commencé, le reste des étapes doit être achevé dans un<br />
temps minimum.<br />
1. Diviser le matériel en portions égales dans des tubes à centrifugation.<br />
Un volume de lavage d’au moins 80ml/200mg de réactif immunobead<br />
est requis.<br />
2. Remplier les tubes selon leurs capacités et les équilibrer avec du<br />
PBS. Centrifuger à 1000xg au minimum et pendant au moins 10<br />
minutes.<br />
3. Immédiatement après l’arrêt de la centrifugeuse, décanter et éliminer<br />
le surnageant en renversant complètement les tubes.<br />
4. Ajouter un petit volume de PBS à chaque tube. Resuspendre le culot<br />
en utilisant un Vortex ou en mélangeant vigoureusement.<br />
5. Répéter les étapes 2 et 3.<br />
6. Resuspendre le culot dans un petit volume de tampon NaCl 1,4M<br />
-PBS. Remplier les tubes selon leurs capacités et les équilibrer avec<br />
du NaCl 1,4M -PBS.<br />
7. Centrifuger à 1000xg pendant 10 minutes.<br />
8. Immédiatement après l’arrêt de la centrifugeuse, décanter le<br />
surnageant avec une seule inversion complète des tubes. Assécher<br />
brièvement.<br />
9. Répéter les étapes 6, 7 et 8.<br />
10. Laver deux fois avec du PBS. (Répéter deux fois les étapes 4, 2 et<br />
3).<br />
Français 5/6