Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

Cette séquence éliminera complètement tout matériel non lié de façon
covalente avec une perte d’activité minimale. Toutes les étapes sont
importantes et doivent être suivies rigoureusement. Les tampons
doivent être maintenus à 4°C. Une fois l’étape de haute concentration
en sels a commencé, le reste des étapes doit être achevé dans un
temps minimum.
1. Diviser le matériel en portions égales dans des tubes à centrifugation.
Un volume de lavage d’au moins 80ml/200mg de réactif immunobead
est requis.
2. Remplier les tubes selon leurs capacités et les équilibrer avec du
PBS. Centrifuger à 1000xg au minimum et pendant au moins 10
minutes.
3. Immédiatement après l’arrêt de la centrifugeuse, décanter et éliminer
le surnageant en renversant complètement les tubes.
4. Ajouter un petit volume de PBS à chaque tube. Resuspendre le culot
en utilisant un Vortex ou en mélangeant vigoureusement.
5. Répéter les étapes 2 et 3.
6. Resuspendre le culot dans un petit volume de tampon NaCl 1,4M
-PBS. Remplier les tubes selon leurs capacités et les équilibrer avec
du NaCl 1,4M -PBS.
7. Centrifuger à 1000xg pendant 10 minutes.
8. Immédiatement après l’arrêt de la centrifugeuse, décanter le
surnageant avec une seule inversion complète des tubes. Assécher
brièvement.
9. Répéter les étapes 6, 7 et 8.
10. Laver deux fois avec du PBS. (Répéter deux fois les étapes 4, 2 et
3).
Français 5/6