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Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

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6. Laver selon la séquence de lavage décrite dans la section D.<br />

PRÉPARATION DU RÉACTIF IMMUNOBEAD<br />

AVEC DU SÉRUM ENTIER<br />

µL d’antisérum/200mg<br />

Titre d’antisérum* de réactif Immunobead<br />

A:1,000 ......................................................... (A)<br />

1:1,000-1:5,000 ............................................ (B)<br />

1:5,000-1:20,000 ......................................... 100<br />

1:20,000-1:40,000 ........................................ 50<br />

1:40,000-1:100,000 ...................................... 25<br />

>1:100,000 (C) ............................................. 10<br />

**Pour les antisérums utilisés dans les techniques RIA (radioimmunoassay)<br />

le titre est défini comme étant la plus grande dilution permettant l’utilisation<br />

d’une aliquote de 100 µl pour produire un résultat quantitatif. Comme le<br />

réactif Immunobead se fixe sur une longue période de temps, le titre doit<br />

être basé sur une incubation de deux heures pour un résultat optimal.<br />

A. Titre trop bas pour être utilisé pour une analyse quantitative. Pourrait<br />

être utilisé pour un marquage cellulaire.<br />

B. Préparer une fraction IgG et utiliser le protocole<br />

décrit dans la section B.<br />

C. Des aliquotes aussi petit que 50 µg de réactif Immunobead peuvent<br />

être séparées de façon quantitative et lavées bien que le culot soit<br />

invisible. Les Immunobead-gamma globulines de lapin ou de chèvre<br />

pourraient être rajoutés comme diluants pour amener la quantité<br />

totale du réactif immunobead à 100-200 µg et donner un culot<br />

facilement visible.<br />

D. Séquence de lavage<br />

Français 4/6

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