Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

FRANÇAIS
200 mg de matrice Immunobead, fourni lyophilisé et contenant 0,01%
NaN 3 . La réhydratation avec 20 ml d’eau distillée produit une suspension
de 10 mg/mL dans le tampon de couplage recommandé. Ne pas congeler
après réhydratation. Conserver à 4° C.
Le couplage aux anticorps est réalisé à pH 6,3; cependant, le couplage
à d’autres protéines est fait à des pH proches des points isoélectriques
de ces protéines. Par exemple, l’albumine sérique humaine (point
isoélectrique = 4,8) est couplée à la matrice Immunobead dans un tampon
0,01 M pyridine à pH 4,8. Il est très important que le couplage soit fait à
faible force ionique (conductivité 1000 µohms)
INSTRUCTIONS POUR L’EMPLOI
A. Tampons
1. Tampons de couplage (tampon phosphate 0,003M, pH 6,3).
Préparer une solution mère 0,3M de phosphate de potassium
monobasique (KH 2 PO 4 anhydre, poids moléculaire = 136,1) en
dissolvant 40,8g de KH 2 PO 4 dans un litre de H 2 O. Diluer 10 ml de
solution mère KH 2 PO 4 0,3M avec 800 ml d’eau. Ajuster le pH à 6,3
avec du KOH 0,1M. Compléter le volume à 1litre.
2. Tampon phosphate salin (PBS) (0,01M KH 2 PO 4 , 0,15M NaCl, pH 7,2
avec du KOH).
Dissoudre 478g de chlorure de sodium (NaCl) et 0,1g de NaN 3 dans
500 ml d’eau. Ajouter 33,3 ml de solution mère KH 2 PO 4 0,3M. Ajuster
le pH à 7,2 avec du KOH 1M. Compléter le volume à 1,0 litres avec
de l’eau.
3. Chlorure de sodium (NaCl) 1,4M – PBS.
Dissoudre 73,22g de NaCl dans 700 ml PBS. Compléter le volume
à 1,0 litres avec du PBS. Ajuster le pH à 7,2.
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