Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific
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FRANÇAIS<br />
200 mg de matrice Immunobead, fourni lyophilisé et contenant 0,01%<br />
NaN 3 . La réhydratation avec 20 ml d’eau distillée produit une suspension<br />
de 10 mg/mL dans le tampon de couplage recommandé. Ne pas congeler<br />
après réhydratation. Conserver à 4° C.<br />
Le couplage aux anticorps est réalisé à pH 6,3; cependant, le couplage<br />
à d’autres protéines est fait à des pH proches des points isoélectriques<br />
de ces protéines. Par exemple, l’albumine sérique humaine (point<br />
isoélectrique = 4,8) est couplée à la matrice Immunobead dans un tampon<br />
0,01 M pyridine à pH 4,8. Il est très important que le couplage soit fait à<br />
faible force ionique (conductivité 1000 µohms)<br />
INSTRUCTIONS POUR L’EMPLOI<br />
A. Tampons<br />
1. Tampons de couplage (tampon phosphate 0,003M, pH 6,3).<br />
Préparer une solution mère 0,3M de phosphate de potassium<br />
monobasique (KH 2 PO 4 anhydre, poids moléculaire = 136,1) en<br />
dissolvant 40,8g de KH 2 PO 4 dans un litre de H 2 O. Diluer 10 ml de<br />
solution mère KH 2 PO 4 0,3M avec 800 ml d’eau. Ajuster le pH à 6,3<br />
avec du KOH 0,1M. Compléter le volume à 1litre.<br />
2. Tampon phosphate salin (PBS) (0,01M KH 2 PO 4 , 0,15M NaCl, pH 7,2<br />
avec du KOH).<br />
Dissoudre 478g de chlorure de sodium (NaCl) et 0,1g de NaN 3 dans<br />
500 ml d’eau. Ajouter 33,3 ml de solution mère KH 2 PO 4 0,3M. Ajuster<br />
le pH à 7,2 avec du KOH 1M. Compléter le volume à 1,0 litres avec<br />
de l’eau.<br />
3. Chlorure de sodium (NaCl) 1,4M – PBS.<br />
Dissoudre 73,22g de NaCl dans 700 ml PBS. Compléter le volume<br />
à 1,0 litres avec du PBS. Ajuster le pH à 7,2.<br />
Français 1/6