Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific
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concentración de sales, los pasos siguientes deben llevarse a cabo<br />
hasta el final en el mínimo tiempo posible.<br />
1. Divida el material en partes iguales en tubos de centrífuga. Se<br />
necesita un volumen de lavado de al menos 80mL/200mg de<br />
reactivos Immunobead.<br />
2. Llene los tubos al máximo y equilíbrelos con PBS. Centrifugue<br />
mínimo a 1000 x g durante al menos 10 minutos.<br />
3. Inmediatamente después de la parada de la centrífuga, decante y<br />
descarte el sobrenadante invirtiendo los tubos completamente.<br />
4. Añada un volumen pequeño de PBS a cada tubo. Resuspenda el<br />
precipitado utilizando un vórtex o agitando fuertemente.<br />
5. Repita los pasos 2 y 3.<br />
6. Resuspenda el precipitado en un volumen pequeño de 1.4M NaCl-<br />
PBS. Llene los tubos al máximo y equilibre con 1.4M NaCl-PBS.<br />
7. Centrifugue a 1000 x g 10 minutos.<br />
8. Inmediatamente después de la parada de la centrífuga, el<br />
sobrenadante invirtiendo los tubos una sola vez. Secar ligeramente.<br />
9. Repita los pasos 6, 7 y 8.<br />
10. Lave dos veces con PBS. (Repita dos veces los pasos 4, 2 y 3).<br />
11. Resuspenda en PBS y mantenga en hielo (4ºC) al menos 3 horas<br />
para permitir la renaturalización completa del anticuerpo unido.<br />
12. a) En este punto, el reactivo puede ser utilizado. Lave dos veces<br />
como se indica arriba y combine hasta un volumen final de 20 mL<br />
(10mg/mL de reactivos Immunobead).<br />
O:<br />
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