Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS IMMUNOBEAD
CON ANTISUERO COMPLETO
µL antisuero/200mg
Título del antisuero* Reactivo Immunobead
A:1,000 ......................................................... (A)
1:1,000-1:5,000 ............................................ (B)
1:5,000-1:20,000 ......................................... 100
1:20,000-1:40,000 ........................................ 50
1:40,000-1:100,000 ...................................... 25
>1:100,000 (C) ............................................. 10
*Para antisueros utilizados en técnicas de radioinmunoensayo el título se
expresa como la mayor dilución que permite el uso de alícuotas de 100
µL dando lugar a datos cuantitativos. Dado que en períodos largos los
reactivos Immunobead tienden a precipitar lentamente, los títulos deben
basarse en incubaciones de 2 horas para obtener resultados óptimos.
A. El título es demasiado bajo para análisis cuantitativos. Puede ser
útil para marcaje celular.
B. Preparación de la Fracción IgG y utilización en Sección B.
C. Alícuotas tan pequeñas como 50 µg de reactivos Immunobead se
pueden separar cuantitativamente y lavar, incluso si el precipitado
es invisible. Las Immunobead gamma globulina de conejo o gamma
globulina de cabra se pueden añadir como diluyentes para completar
la cantidad total de reactivos Immunobead hasta 100-200 µg para
obtener un precipitado fácilmente visible.
D. Secuencia de lavado.
Este protocolo elimina completamente el material unido de forma
no covalente con una pérdida mínima de actividad. Todos los pasos
son importantes y se deben seguir estrictamente. Los tampones se
deben conservar a 4ºC. Una vez se ha empezado el paso de alta
Español 4/6