Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific
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3. Incube a 4º C 1hora.<br />
4. Añada 40.0 mg de EDAC (1-etil-3 [3-dimetilaminopropil] carbodiimida-<br />
HCl) a la mezcla de reacción. Agite fuerte y completamente.<br />
5. Mantenga a 4 ºC al menos 3horas. En este punto la mezcla de<br />
reacción se puede guardar toda la noche, pero si su proteína es<br />
inestable, centrifugue y lave al menos una vez con PBS.<br />
6. Prosiga con el protocolo de lavado (Sección D).<br />
C. Preparación de Immunobead con Antisuero<br />
Completo<br />
Nota: Este protocolo da lugar a una actividad específica inferior a la<br />
del protocolo de las globulinas.<br />
1. Centrifugue 200 µL de antisuero a 5000 x g para eliminar cualquier<br />
material insoluble.<br />
2. Centrifugue la suspensión de Immunobead y descarte el<br />
sobrenadante.<br />
3. Añada 100 µL de antisuero y 6.5 mL de tampón de unión al<br />
precipitado de Immunobead del paso 2. Resuspenda y mezcle bien.<br />
4. Incube a 40ºC 1 hora.<br />
5. Añada 20.0 mg de EDAC y mezcle fuertemente. Mantenga a 4º C<br />
al menos 3 horas.<br />
6. Prosiga con la secuencia de lavado (Sección D).<br />
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