Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

PREPARAZIONE DEL REAGENTE IMMUNOBEAD
CON ANTISIERI INTERI
µL antisieri/200mg
Titolo degli antisieri* del reagente Immunobead
A:1,000 (A)
1:1,000-1:5,000 ............................................ (B)
1:5,000-1:20,000 ......................................... 100
1:20,000-1:40,000 ........................................ 50
1:40,000-1:100,000 ...................................... 25
>1:100,000 (C) ............................................. 10
* Per antisieri usati in procedure di radioimmunoanalisi il titolo è espresso
come la massima diluizione che permette l’uso di un’aliquota di 100 µL e
produce dati quantitativi. Siccome i reagenti Immunobead si depositano
lentamente sui lunghi periodi, i titoli si devono basare su un’incubazione
di 2 ore a risultati ottimi.
A. Il titolo è troppo basso per essere utile per analisi quantitative. Può
essere utile come tracciante isotopico di cellule.
B. Preparazione di IgG Frazione e procedura d’uso nella Sezione B.
C. Aliquote a partire da 50 µg di reagente Immunobead possono essere
separate quantitivamente e sciacquate, anche se la pallottola è
invisibile. L’Immunobead rabbit globulina gamma o goat globulina
gamma possono essere aggiunte come diluenti per portare la totale
quantità dei reagenti Immunobead fino a 100-200 µg per ottenere
una pallottola facilmente visibile.
D. Sequenza di Sciacquo
Questa sequenza rimuoverà completamente il materiale legato non
covalentemente con una perdita di attività minima. Tutte le fasi
sono importanti e devono essere seguite rigorosamente. I tamponi
devono essere conservati a 4°C. Una volta che la fase ricca di sale
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