Activated Immunobead® Matrix - Irvine Scientific

DESTINAZIONE D’USO
200 mg di matrice Immunobead è fornita liofilizzata e contiene 0,01%
di NaN 3 . La re-idratazione con 20 mL di acqua distillata produce una
sospensione di 10 mg/mL nel tampone di accoppiamento consigliato.
Non congelare dopo l’idratazione. Conservare a 4° C.
L’accoppiamento con l’anticorpo è fatto ad un pH di 6,3; nonostante ciò,
l’accoppiamento di altri tipi di proteine è fatto a un pH vicino al punto
isoelettrico della proteina. Per esempio, la sieroalbumina umana (punto
isoelettrico= 4,8) è accoppiata alla matrice Immunobead in un tampone
di piridina 0,01M, ad un pH di 4,8. E’ essenziale che l’accoppiamento
avvenga ad una forza ionica bassa (conduttività 1000 µohms).
ISTRUZIONI PER L’USO
A. Tamponi
1. Tampone per l’accoppiamento (0,003 M fosfato, pH 6,3).
Preparare una soluzione standard di 0,3 M di fosfato di potassio
monobasico (KH 2 PO 4 anidro, m.w. = 136,1) dissolvendo 40,8 g di
KH 2 PO 4 in un litro di H 2 O. Diluire 10 mL di 0,3 M di KH 2 PO 4 standard
in 800 mL di acqua. Regolare il pH a 6,3 con 0,1 M di KOH. Diluire
a 1,0 litri.
2. Tampone fosfato salino (PBS) (0,1 M di KH 2 PO 4 , 0,15 M di NaCl, ad
un pH di 7,2 con KOH).
Dissolvere 478 g di cloruro di sodio (NaCl) e 0,1 g di NaN 3 in 500
mL di acqua. Aggiungere 33,3 mL di una soluzione standard 0,3 M
di KH 2 PO 4 . Regolare il pH a 7,2 con un M di KOH. Diluire a un litro
con acqua.
3. 1,4 M di cloruro di sodio (NaCl) - PBS.
Dissolvere 73,22 g di NaCl in 700 mL di PBS. Diluire a un litro con
PBS e regolare il pH a 7,2. Se uno sfondo alto diventa un problema
si consiglia il seguente tampone al posto di 1,4 M di NaCl - PBS: 5 M
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