CONA Bioensayos.pdf - EULA

LOS BIOENSAYOS EN LOS ESTUDIOS
DE LA CONTAMINACIÓN MARINA
Laboratorio de Bioensayos
Depto. de Zoología
Universidad de Concepción

CONTAMINANTES
ECOTOXICOLOGIA
AMBIENTE
MARINO

• TOXICIDAD
ECOTOXICOLOGIA
BIONSAYOS DE ECOTOXICIDAD
TOXICIDAD AGUDA
• Mortalidad – Inmovilidad
CL 50
CE 50
TOXICIDAD CRONICA
• Crecimiento poblacional
• Crecimiento corporal
• Fecundidad
• Comportamiento NOEC
LOEC

PROTOCOLO BASICO PARA DETERMINAR CL50
Organismos
Serie de concentraciones relacionadas
matemáticamente
Mínimo 4 concentraciones en triplicado
Experimentación
Rango apropiado
Concentraciones
Mínima Medias Máxima
Sin efecto Efecto parcial 100 % de efecto
Datos Análisis estadístico CL 50

INDICES DE TOXICIDAD
• CL 50-48 hr : Concentración letal 50 en 48 horas. Expresión
derivada estadísticamente de la concentración (o dosis) de un
agente que pueda esperarse produzca la muerte del 50 % de la
población, después de un determinado periodo de exposición.
• CE 50-x hr : Concentración efectiva 50 en x horas. Expresión
derivada estadísticamente de la concentración (o dosis) de un
agente que se espera cause un efecto agudo, distinto de la
mortalidad, al 50 % de la población expuesta durante un
periodo determinado de tiempo.

INDICES DE TOXICIDAD
• NOEC : Concentración no efectiva o concentración de
efecto no observado (CENO). Es la mayor concentración del
agente tóxico, a la cual los organismos son expuestos durante
todo o parte de su ciclo de vida, que no causa un efecto
adverso observable, estadísticamente significativo, sobre la
sobrevivencia, crecimiento o reproducción de los organismos
tratados en un determinado tiempo de exposición.
• LOEC : Menor concentración efectiva o menor
concentración de efecto observado. Es la menor
concentración del agente tóxico, a la cual los organismos son
expuestos durante todo o parte de su ciclo de vida, que causa
un efecto adverso observable, estadísticamente significativo,
sobre la sobrevivencia, crecimiento o reproducción de los
organismos tratados en un determinado tiempo de exposición.

PROTOCOLO BASICO PARA DETERMINAR
NOEC – LOEC
(Largo del cuerpo en mm)
Control C 1 C 2 C 3 C 4 C 5
20 20 20 15 8 5
NOEC LOEC

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Inhibición del crecimiento poblacional de microalgas
- Isochrysis galbana - Dunaliella tertiolecta
• Exposición de 4 días.
• Inóculo inicial de 10.000 cél./ml
• Control termina con 200.000 cél./ml
• Iluminación continua
• Medio de cultivo EPA

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Toxicidad letal en el copépodo Tisbe longicornis
• Juveniles de 14 días
• Exposición de 48 hrs.
• Aceptabilidad : < de 10 % de muertos en
el control
0.26 mm

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Toxicidad letal en el crustáceo Artemia salina
. Cistos deshidratados
• Larva de 1 día.
• Exposición de 48 hrs.
• Aceptabilidad : < de 10 % de muertos
en el control
0,2 mm

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Toxicidad letal en larva del pejerrey Odontesthes regia
• Exposición de 48 hrs.

POSTURA Y LARVAS RECIEN ECLOSIONADAS
Odontesthes regia

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Toxicidad letal en larva Zoea I de crustáceos decápodos.
- Cancer setosus - Taliepus dentatus
• Exposición de 24 hrs.

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Inhibición de la fecundación en gametos de erizo.
- Arbacia spatuligera
• Exposición de los espermios por 1 hora.
• Aceptabilidad : < de 20 % de óvulos
sin fecundar en el control.

BIOENSAYOS PARA EVALUAR TOXICIDAD EN
MUESTRAS DE AGUA
Toxicidad letal en juvenil de molusco bivalvo.
- Mytilus galloprovincialis - Perumytilus purpuratus
• Exposición de 6 días.
Toxicidad subletal.
• Adherencia al sustrato por fibras del
biso.
• Exposición de 6 días.

BIOENSAYOS CON ORGANISMOS DEL FONDO
MARINO (BENTÓNICOS)
Inhibición de la germinación de esporas en macroalga.
- Mazzaella laminarioides (luga cuchara). Exposición de 27 h.

Esporulación y asentamiento: 3 h agitación, 3 h reposo

BIOENSAYOS PARA TOXICIDAD DE SEDIMENTO
CON ORGANISMOS BENTÓNICOS
Toxicidad letal en juvenil de crustáceo anomuro.
- Emerita analoga
• Exposición de 48 hrs.

BIOENSAYOS PARA TOXICIDAD DE SEDIMENTO
CON ORGANISMOS BENTÓNICOS
Toxicidad letal en juvenil de crustáceo anfípodo.
-Monocorophium insidiosum
Sedimento fino
• Exposición de 48 hrs (Agua)
• Exposición de 10 días (sedimento)
Toxicidad subletal
• Exposición de 10 días (sedimento)
Construcción de guarida
1 mm

BIOENSAYO DE TOXICIDAD EN SEDIMENTO
• Agua intersticial del sedimento
- Centrifugar la muestra y recuperar el sobrenadante.
- Exponer organismos acuáticos (larva de Artemia o gametos
de erizo) a la porción líquida.
• Elutriado del sedimento
- Resuspender el sedimento en agua (1 : 1) y ensayar la
fracción acuosa con organismo acuático (pez, Emerita).

REQUERIMIENTO DE BIOENSAYOS EN CHILE
• Registro de nuevos productos sanitarios (SAG).
• Monitoreo de calidad de efluentes y cuerpo receptor
(SAG, DIRECTEMAR).
• Obras portuarias – extracción de sedimentos, carga y
descarga de material a granel.
• Impacto de la acuicultura (continental y marina).
- Pinturas antifouling
- Tratamientos sanitarios
- Industria procesadora

REQUERIMIENTO DE BIOENSAYOS EN CHILE
• Sistema de evaluación de impacto ambiental (SEIA).
- Actividades con descargas de residuos al mar.

NOTA: El uso de los productos en agua dulce, de mar o en ambas, está otorgado en virtud
de las especies utilizadas en los bioensayos de Toxicidad Aguda y Crónica efectuados.