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7.1.2 Espirulina (Spirulina maxima, Oscillatoriaceae) Figura 11. Fotos de Spirulina maxima. Se utilizó una presentación comercial procesada en la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del IPN, la cual fue donada por el Dr. Germán Chamorro, dicha especie se colecto de manera aleatoria completamente al azar, la identificación taxonómica corrió a cargo de la Dra. Catalina Mendoza González del herbario del Colegio Nacional de Ciencias Biológicas del IPN (número de voucher: 12584). Reino: Eubacteria Filum: Cyanobacteria Clase: Myxophyceae Orden: Hormogonales Sub orden: Homocystineae Familia: Oscillatoriaceae Genero: Spirulina Especie: S. maxima 7.1.3 Líneas Celulares. Los modelos de células en cultivo representan una herramienta muy útil en la evaluación de la eficacia de fármacos y sustancias de distinto origen. En el presente proyecto se utilizaron dos líneas celulares provenientes de tumores humanos: la línea celular de carcinoma mamario (MCF-7, ATCC HTB-22) y cervicouterino (HeLa, ATCC CCL-2), así como la línea celular normal de riñón de mono verde (Vero, 25
ATCC CCL-81), esto para determinar la selectividad de los extractos y compuestos activos. Las líneas tumorales se cultivaron en medio esencial mínimo de Eagle (MEM) suplementados con 10 % de suero fetal de bovino (SFB), mientras que las células Vero se cultivaron en medio M-199 con 4 % de SFB. Se mantuvieron a 37 ºC en frascos de cultivo de poliestireno, en atmósfera húmeda con 5% de CO 2 . En ambos medios se utilizó una mezcla de antibióticos compuesta por penicilina y estreptomicina (200, 000 UI: 0.5 g; 1mL/1L de medio) 7.1.4 Hamsters dorados (Mesocricetus auratus) Se utilizaron animales machos jóvenes de peso entre 80-90 g obtenidos del bioterio del Centro de Investigación Biomédica del Noreste (IMSS), Monterrey- México. Los animales fueron colocados en jaulas de policarbonato, con acceso libre a alimento y agua. Los experimentos fueron realizados siguiendo las guías institucionales sobre el manejo y cuidado de animales de laboratorio establecidas internacionalmente. 7.2 Extracción del Material Vegetal Para H. drummondii se realizó una extracción con metanol (MeOH) por la técnica de maceración a temperatura ambiente con agitación continua. Se extrajo un kilo del material vegetal con tres litros de solvente en un agitador, cambiándose el solvente cada 24 horas durante tres días consecutivos, posteriormente, el extracto se filtró usando papel filtro Whatman No. 1, al filtrado se le eliminó el solvente utilizando un rotavapor con temperatura y presión reducida. Para S. maxima, se siguió la misma metodología descrita anteriormente solo que en esta ocasión, el solvente se separó por centrifugación a 800 rpm, se obtuvieron dos extractos metanólicos, uno convencional y otro más que se desgrasó con éter etílico. 26
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