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INTRODUCCIÓN Clostridium perfringens. es una bacteria anaerobia habitante común en el suelo y el intestino del hombre y animales (Cato et al. 1986) El tipo A, (CPA) es responsable de la enfermedad del pasto, la colitis necròtica y la enterotoxemia del caballo (Logan et al., 1991), en humanos del envenenamiento alimentario (Lyristis et al., 1994 & Hauschild et al., 1971), así mismo se ha sugerido la participación de la bacteria y sus toxinas en la patogénesis del síndrome de muerte súbita infantil (SIDS sudden infant death syndrome) (Murrell et al.,1993). El CPA pertenece al grupo de armas biológicas utilizadas en los conflictos bélicos de los últimos años y no se reconoce o acepta la existencia de una vacuna para proteger a los soldados contra la infección por la bacteria (Nicolson et al., 2000). Por su parte la toxina a (TA) se considera el principal mecanismo de infección por el CPA (Ninomiya et al., 1994 & Williamson & Titball, 1993). El toxoide de la TA ha demostra- do estimular protección en animales contra sus efectos letales, sin embargo presenta leves ves- tigios de toxicidad (Kameyama et al., 1972 & Evans, 1943 & Evans, 1943 & Traub et al., 1991). Hasta el momento no se cuenta con una vacuna bien definida contra las enfermedades asociadas al CPA, en humanos o animales. (Schoepe et al., 1997 ) y las antitoxinas comerciales por otra parte, pueden llegar a ser poco efectivas para evitar la gangrena gaseosa ocasionada por el CPA (Traub et al., 1991). El presente trabajo describe las condiciones para atrapar la TA de CPA en liposomas y su aplicación a ratones Balb/c como vacuna. Algunas observaciones del comportamiento de la misma encapsulada en liposomas y la protección que se obtiene ante un desafío de 5 LDso por vía I.V. con la TA. Otro aspecto relevante del presente, es el efecto adyuvante que nos permite desarrollar nuevas opciones en la elaboración de vacunas. Por lo que en este trabajo se buscó información del comportamiento de la TA encapsulada en liposomas (L-TA) y la respuesta de protección ante un desafío por vía intravenosa contra los efectos letales de la TA.
ANTECEDENTES I. La bacteria y la toxina alfa (fosfolipasa C). La bacteria se caracteriza por producir exotoxinas y exoenzimas, las cuales presentan ac- tividades biológicas y bioquímicas tanto ex vivo, (Mitsui et al.,& 1973 Ninomiya et al., 1994) como in vivo (Clarke et aL, 1994). En base a sus principales exotoxinas letales (Tabla 1 ) CL Perfringens se dividió en 5 tipos A, B, C, D y E. (Cato et al.1986). El CPA produce las exotoxinas denominadas alfa (a), theta ( 9 ), kappa ( k ), miu ( \i ), y algunas exoenzimas como la neu- raminidasa, desoxiribonucleasa y la enzima hidrolizante de esfingomielina (Cato et al., 1986 & Clarke et al., 1994 & Mitsui et al., 1973), así como otras proteínas no menos importantes como la sialidasa, hialuronidasa, colagenasa, proteasa, desoxiribonucleasa y hemaglutinina. (Lyristis et al., 1994). En combinación, la bacteria y sus toxinas pueden ocasionar la gangrena gaseosa. Este problema se presenta cuando una herida se contamina por la bacteria, y el tejido lesionado permite que se produzca un nicho anaeróbico con un potencial de oxidación y reducción suficien- temente bajo y un pH ácido que permite el crecimiento de la bacteria. Las formas vegetativas o en algunos casos esporas inician la infección en el tejido desvitalizado (Stevens & Bryant, 1993). Generalmente los organismos son depositados en las capas profundas de los tejidos, donde se inicia la producción de las toxinas y enzimas. Así, la infección se disemina de 1 a 3 días hasta producir crepitación en el tejido subcutáneo, exudación y olor fétido de la zona, ade- más necrosis rápida y progresiva, fiebre y hemólisis hasta llegar a un estado de toxemia, choque y muerte (Boyd et al 1972 & Boyd & Thomson, 1972 &, Cato et al., 1986 & Stevens et al.,1997). Es capaz de contaminar heridas o asociarse con otras especies de clostridios, como el CL nowi tino A ó B y el Cl. septicum y ocasionar la gangrena gaseosa (Boyd & Walker 1972). La TA (Figura 1) desde 1941 ha despertado un particular interés como principal protago- nista de las infecciones por CPA y los efectos que esta puede tener en los tejidos de animales como sustrato de su actividad enzimàtica y letal (Zamecnik et al., 1947).
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