evaluación de la actividad antioxidante de extractos orgánicos de ...
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Dilución A Agregar 2.5 mL de solución Buffer de fosfatos (0.2 M, pH 6.6) Agregar 2.5 mL de K 3 Fe(CN) 6 al 1% Incubar a 50 °C por 20 min Aplicar con el resto de las diluciones Agregar 2.5 mL de Cl 3 CCOOH al 10% Centrifugar a 3000 rpm por 10 min Mezclar 2.5 mL del sobrenadante con 2.5 mL de agua destilada Agregar 0.5 mL de FeCl 3 (1%) Reposar por 10 min Leer absorbencia a 700 nm Figura 13. Esquema para la medición de poder reductor 51
Pesar viales Agregar a cada vial 1 mL de DMSO (dilución A) 100 L de la dilución A se mezclan con 900 L de DMSO Figura 14. Preparación de diluciones para el método de DPPH• Añadir 20 μL de extracto Placa de 96 pozos Añadir 20 μL de BHT, 100 μM Añadir 0.2 mL de DPPH•, 125 μM Añadir 20 μL de DMSO Preparar por triplicado Cubrir placa, por 30 min Leer en un espectrofotómetro de Elisa a 545 nm. Figura 15. Esquema del método de DPPH• 52
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Dilución A<br />
Agregar 2.5 mL <strong>de</strong> solución Buffer <strong>de</strong> fosfatos<br />
(0.2 M, pH 6.6)<br />
Agregar 2.5 mL <strong>de</strong> K 3 Fe(CN) 6 al 1%<br />
Incubar a 50 °C por 20 min<br />
Aplicar con el resto <strong>de</strong><br />
<strong>la</strong>s diluciones<br />
Agregar 2.5 mL <strong>de</strong><br />
Cl 3 CCOOH al 10%<br />
Centrifugar a 3000 rpm por 10 min<br />
Mezc<strong>la</strong>r 2.5 mL <strong>de</strong>l sobrenadante con 2.5 mL <strong>de</strong><br />
agua <strong>de</strong>sti<strong>la</strong>da<br />
Agregar 0.5 mL <strong>de</strong> FeCl 3 (1%)<br />
Reposar por 10 min<br />
Leer absorbencia a 700 nm<br />
Figura 13. Esquema para <strong>la</strong> medición <strong>de</strong> po<strong>de</strong>r reductor<br />
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