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246 Haematologica (ed. esp.), volumen 85, supl. 2, octubre 2000
Figura 4. Imágenes del fenotipo normal en linfocitos B en sangre periférica. 1) Ventana donde se sitúan los linfocitos según sus
características de SSC/FSC. 2) CD5 FITC+ en linfocitos T, CD19 PE+ en linfocitos B de intensidad media (log 10 (2) ). En el cuadrante
3 se observa la imagen de una población que corresponde a linfocitos B normales que coexpresan CD19/CD5. 3) CD22 PE de intensidad
m/i. y CD10 FITC negativo 4) CD23 PE de expresión débil. 5) FMC-7 FITC de intensidad débil. 6) CD79b PE de intensidad media,
7) Coexpresión de CD19 FITC/CD38 PE; los linfocitos CD38 PE corresponden a linfocitos T y los linfocitos CD19 FITC corresponden
a linfocitos B que no expresan CD38. 8) Kappa FITC+, Lambda PE+; expresión policlonal de cadenas de IgS.
lab/B-D), CD10 Fitc (Dako/B-D), CD79b PE (Dako/
Immunotech), FMC-7 Fitc (Serotec), Kappa/Lambda
(B-D), CD25 Fitc (B-D), CD19Fitc/CD38 PE (B-D),
CD11c Fitc (B-D), CD11b PE (B-D). Se utilizan simples
y dobles marcajes.
El análisis se realiza mediante un citómetro FACScan
de B-D ® . Se han utilizado los programas de análisis: Simulset,
Lysis II y Paint-a-gate. Se ha seleccionado la
ventana de linfocitos según su disposición en SSC/FSC.
Como control se ha utilizado anticuerpos monoclonales
marcados con idéntico idiotipo. Se han adquirido
en la ventana a analizar entre 3.000 y 10.000 eventos.
Un antígeno se considera positivo cuando es expresado
en más del 20% de las células B neoplásicas. Las intensidades
de expresión de cada monoclonal las definimos
según la escala logarítmica: débil < 10 (2) y
media/intensa 10 (2) /10 (3) . En figura 4 y 5 se representa
el comportamiento de los linfocitos B normales en sangre
periférica y ganglio respectivamente.
Resultados
En la tabla 1 se muestran los resultados obtenidos
en LCM, LF y LLC atípica expresados en porcentaje
de casos positivos para los distintos marcadores.
Los patrones de intensidad de los mismos se comentan
en el texto.
Los resultados del estudio de 24 casos de LCM son:
la positividad para CD19, CD22 y HLA-DR fue constante;
la coexpresión de CD19/CD5 se detectó en
22/24 (92%) de los casos. La intensidad de expresión
del CD22 fue débil en 9/16 (56%) y media/intensa en
7/16 (44%). El CD10 fue negativo en todos los casos.
El CD79b fue débil en 4/16 (25%) de casos y media en
12/16 (75%). El FMC-7 fue débil en 3/16 (19%) y media
en 13/16 (81 %). La expresión de cadenas de IgS
fue lambda 14/24 (58%) y kappa en 10/24 (42%). La
intensidad de las mismas fue débil en 7/16 (44 %) y
media en 9/16 (56%) de los casos.
La intensidad de expresión de éstos marcadores es
una ayuda muy valiosa para distinguir el LCM de otros
síndromes linfoproliferativos crónicos B (SLPC-B). El
CD23 resultó positivo en 42 % casos y negativo en el
resto (58%). Este es el dato más discordante respecto
a lo que se describe en la mayoría de trabajos que insistentemente
se otorga CD23 negativo al linfoma del
manto. La explicación de esta diferencia esta probablemente
en la técnica utilizada y en la sensibilidad
del CD23 en IHQ. En nuestra experiencia el CD23 discrimina
entre el LCM y la LLC por la intensidad de expresión
y no porque sea positivo/negativo. La expresión
de CD23 por CF es constante en la LLC con intensidad
media/intensa, mientras que en el LCM la
intensidad es débil en los casos positivos. En algunas
series que hemos revisado 14,15 obtienen resultados parecidos
concluyendo que el CD23 no es un marcador
válido para discriminar entre LCM y LLC.
El CD5 es positivo en la mayoría de casos lo que
nos ayuda para diferenciarlo del linfoma folicular que