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eactivos con la boca, y evite el contacto de la piel y de las membranas mucosas con los reactivos y las muestras. Si los reactivos o las
muestras entran en contacto con zonas delicadas, lave éstas con abundante agua. Acuda inmediatamente al médico.
Reduzca al mínimo la contaminación microbiana de los reactivos; de lo contrario, podría producirse un aumento de la tinción no
específica.
Cualquier tiempo o temperatura de incubación que no sean los aquí especificados pueden conducir a resultados erróneos. Cualquier
cambio de tal naturaleza debe ser validado por el usuario.
Control De Calidad
Las diferencias en el procesamiento de los tejidos y en los procedimientos técnicos del laboratorio del usuario pueden producir
una variabilidad significativa en los resultados; por ello, es necesario que éste lleve a cabo regularmente los controles de su propio
laboratorio, además de los siguientes procedimientos.
Los controles deben ser muestras frescas de autopsia, biopsia o quirúrgicas fijadas en formol, procesadas e incluidas en parafina, lo
antes posible, de manera idéntica a la utilizada para la muestra o muestras del paciente o pacientes.
Control Tisular Positivo
Se utiliza para indicar la preparación correcta de los tejidos y las técnicas de tinción adecuadas.
Debe incluirse un control tisular positivo por cada conjunto de condiciones de ensayo en cada tinción o serie de tinciones realizada.
Un tejido con una tinción positiva débil es más adecuado que un tejido con una tinción positiva intensa para lograr un control de calidad
óptimo y para detectar niveles bajos de degradación del reactivo. 2
El tejido de control positivo recomendado es el de placenta.
Si el tejido de control positivo no muestra tinción positiva, los resultados de las muestras analizadas deben considerarse no válidos.
Control Tisular Negativo
Debe examinarse después del control de tejido positivo, a fin de verificar la especificidad del marcado del antígeno diana por el
anticuerpo primario.
El tejido de control negativo recomendado es el de músculo esquelético.
O bien, la variedad de diferentes tipos de células presentes en la mayoría de los cortes de tejido ofrece con frecuencia lugares de
control negativo, pero esto debe ser verificado por el usuario.
Si aparece una tinción no específica, ésta tiene generalmente aspecto difuso. En cortes de tejido fijados excesivamente con formol
puede observarse también una tinción esporádica del tejido conectivo. Utilice células intactas para la interpretación de los resultados de
la tinción. A menudo, las células necróticas o degeneradas quedan teñidas de forma no específica. 3 También pueden observarse falsos
positivos causados por la unión no inmunológica a proteínas o a productos de reacción del sustrato. Estos falsos positivos pueden
estar causados también por enzimas endógenas tales como la pseudoperoxidasa (eritrocitos), la peroxidasa endógena (citocromo C),
o la biotina endógena (por ejemplo, de hígado, mama, cerebro, riñón), en función del tipo de inmunotinción utilizada. Para diferenciar
la actividad de las enzimas endógenas o los enlaces no específicos de las enzimas de la inmunorreactividad específica, pueden
teñirse otros tejidos del paciente exclusivamente con cromógeno sustrato o con complejos enzimáticos (avidina-biotina, estreptavidina,
polímeros marcados) y cromógeno sustrato respectivamente. Si se produce una tinción específica del control tisular negativo, los
resultados de las muestras de los pacientes deben considerarse no válidos.
Control De Reactivo Negativo
Utilice un control de reactivo negativo no específico en lugar del anticuerpo primario con un corte de cada muestra del paciente a fin de
evaluar la tinción no específica y obtener una mejor interpretación de la tinción específica en el lugar en que se encuentra el antígeno.
Tejido Del Paciente
Examine las muestras del paciente o pacientes teñidas con NCL-L-CD163 al final. La intensidad de la tinción positiva debe
valorarse en el contexto de cualquier tinción de fondo no específica del control de reactivo negativo. Como con cualquier prueba
inmunohistocitoquímica, un resultado negativo significa que no se ha detectado antígeno, y no que el antígeno esté ausente en las
células o tejido probados. Si es necesario, use un panel de anticuerpos para identificar falsas reacciones negativas.
Resultados esperados
Tejidos normales
El clon 10D6 detectó la proteína CD163 en la membrana y el citoplasma de monocitos y macrófagos. Se observó tinción sobre todo en
macrófagos de la pulpa roja del bazo, en macrófagos interfoliculares y en histiocitos sinusales del nodo linfático, en células dendríticas
interfoliculares de la amígdala, en macrófagos alveolares del pulmón, en células Kupffer del hígado y en células Hofbauer de la
placenta. Se observó una ligera tinción dentro de los túbulos renales y la granularidad de la fibra nerviosa dentro de la capa molecular
del cerebelo. No se observó tinción en las células dendríticas foliculares de la amígdala y de los nodos linfáticos. (Número total de
casos normales evaluados = 43).
Anormal del tejido
El clon 10D6 demostró cierta tinción ligera en 3/4 tumores de pulmón (incluyendo 1/1 adenocarcinoma, 1/1 carcinoma de células
escamosas, 1/1 carcinoma de células grandes y 0/1 carcinoma de células no pequeñas), 2/2 seminomas testiculares, 1/4 carcinomas
papilares del tiroides, 1/2 carcinomas de células escamosas de la lengua, 1/2 carcinomas de células escamosas del esófago, 1/2
tumores mestastásicos de origen desconocido y 1/1 carcinoma de células escamosas de la laringe. Excepto por los macrófagos
infiltrantes, no se observó tinción en 167 linfomas (incluyendo linfomas difusos de linfocitos B grandes (0/107), linfomas linfocíticos
crónicos (0/12), linfomas foliculares (0/11), enfermedad de Hodgkin (0/11), linfomas de células del manto (0/7), linfomas anaplásicos de
linfocitos T grandes (0/7), linfomas angioinmunoblásticos de linfocitos T (0/4), linfomas de linfocitos T/NK (0/3), un linfoma linfoblástico
agudo de linfocitos B (0/1), un linfoma linfoblástico agudo primitivo de linfocitos B/T (0/1), un linfoma periférico de linfocitos T (0/1), un
linfoma de linfocitos T (0/1), y un linfoma de zona marginal (0/1)). No se observó tinción en tumores hepáticos (0/4), tumores de ovario
(0/4), tumores colorrectales (0/4), tumores de estómago (0/2), tumores cervicales (0/2), tumores de mama (0/2), tumores de piel (0/2),
tumores renales (0/2), tumores cerebrales (0/2), tumores de los tejidos blandos (0/2) y un tumor del timo (0/1). (Número total de casos
anómalos evaluados = 212).
NCL-L-CD163 está recomendado para la evaluación de la expresión de la proteína CD163 en tejidos normales y neoplásicos.
CD163-L-CE
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