Revista Peruana Biología

Universidad Nacional Mayor de San Marcos 

Facultad de Ciencias Biológicas 

Rev. peru. biol. ISSN 1561-0837 

Revista 

Peruana de 

Biología 

Volumen 20 Marzo, 2014 Número 3 

LIMA, PERÚ

Revista Peruana de Biología 

Publicación científica de la Facultad de Ciencias Biológicas de la 

Universidad Nacional Mayor de San Marcos 

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Instituto de Investigación en Ciencias Biológicas Antonio Raimondi 

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producida por el Instituto de Ciencias Biológicas Antonio Raimondi, 

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Editor Jefe 

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Universidade do Estado do Rio de Janeiro- Brasil 

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Aarhus University- Denmark 

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IRD. Institut de recherche pour le développement, - Francia 

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Institut de Recherche pour le Développement- Francia 

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Universidad Nacional Agraria La Molina - Perú 

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Universidad Nacional Agraria La Molina - Perú 

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Universidad Nacional Mayor de San Marcos- Perú 

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Juan Tarazona 


Armando Yarlequé 


Manuel Tantaleán 

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University of Missouri- USA 

Kenneth Young 

University of Texas at Austin – USA 

Paul Velazco 

American Museum of Natural History, USA 

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Rev. peru. biol. - ISSN-L 1561-0837 

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2

Rev. peru. biol. ISSN-L 1561-0837 



CONTENIDO 

TRABAJOS ORIGINALES 

205 Agrotransformación y evaluación de la resistencia a Phytophthora infestans en Solanum tuberosum L. variedad Désirée 

Agro-transformation and evaluation of resistance to Phytophthora infestans in Solanum tuberosum L. variety Désirée 

Jeanette Orbegozo, María Lupe Román, Cristina Rivera, José Carlos Tovar, Willmer Pérez, Soledad Gamboa, Greg Forbes, Jan Kreuze 

y Marc Ghislain 

211 Identificación de genes relacionados a sequía en papas nativas empleando RNA-Seq 

Identification of genes related to drought in native potatoes using RNA-Seq 

Yerisf Torres, Roberto Lozano, Carlos Merino y Gisella Orjeda 

215 Diversidad genética de papas nativas (Solanum spp.) conservadas en cultivares nativos del Perú 

Genetic diversity of native potatoes (Solanum spp.) conserved in landraces from Peru 

Julián Soto, Tulio Medina, Yeny Aquino, Rolando Estrada 

223 Efecto de Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” en el sistema reproductor masculino del ratón (Mus musculus) 

Effect of Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” in the male system reproductive of mouse (Mus musculus) 

Láyonal G. Acosta, Jonathan Vásquez, Víctor Núñez, José Pino 1 , Betty Shiga 

227 Efecto ahorrativo de la proteína usando niveles altos de energía y obtención de la relación optima energía digestible/proteína digestible en 

dietas para el crecimiento de Oreochromis niloticus (L) 

Protein-sparing effect with high energy levels and obtaining the optimum digestible energy/digestible protein ratio in growth diets to 

Oreochromis niloticus (L.) 

Felix Walter Gutierrez, Máximo Quispe, Luz Valenzuela 

233 Desarrollo reproductivo de Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) en condiciones controladas de luz y temperatura 

Reproductive development of Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) under controlled conditions of light and temperature 

Beatriz Roca, Mery Suni, Asunción Cano 

NOTA CIENTÍFICA 

241 Parámetros reproductivos de Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Anura: Hylidae) en el extremo sur de su área de distribución 

Reproductive parameters of Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Anura: Hylidae) in the south limit of its distribution area 

Carolina E. Antoniazzi, Romina Ghirardi, Javier A. López, Andrea P. Armando 

245 Caracterización citogenética de Caesalpinia spinosa de los distritos de Tarma y Palca (Junín) 

Cytogenetic characterization of Caesalpinia spinosa from Tarma and Palca (Junín) 

Alberto López, María Siles-Vallejos, Diego Orihuela, José Linares, Shary Ríos, Yvette Villafani, Misael Guevara, Olga Bracamonte 

249 Depositorios del material tipo de la especie Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012 (Insecta: Coleoptera: Coccinellidae) 

Depositories of the type material of the species Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012 (Insecta: Coleoptera: Coccinellidae) 

Pedro W. Lozada y Juana Aliaga-Camarena 

203

204

Rev. peru. biol. 20(3): 205 - 210 (Marzo 2014) 

Agrotransformación y resistencia a Phytophthora infestans en Solanum tuberosum 

Facultad de Ciencias Biológicas UNMSM ISSN-L 1561-0837 


Agrotransformación y evaluación de la resistencia a Phytophthora infestans en Solanum 

tuberosum L. variedad Désirée 

Agro-transformation and evaluation of resistance to Phytophthora infestans in Solanum tuberosum L. 

variety Désirée 

Jeanette Orbegozo, María Lupe Román, Cristina Rivera, José Carlos Tovar, Willmer Pérez, Soledad Gamboa, 

Greg Forbes, Jan Kreuze y Marc Ghislain 

Laboratorio de Biotecnología Aplicada, Centro Internacional 

de la Papa (CIP), Apartado 1558, Lima 12, Perú. 

E-mail Jeanette Orbegozo: jorbegozoramirez@gmail.com 

E-mail María Lupe Román : m.roman@cgiar.org 

E-mail Cristina Rivera : c.rivera@cgiar.org 

E-mail José Carlos Tovar : josectovar@gmail.com 

E-mail Willmer Pérez: w.perez@cgiar.org 

E-mail Soledad Gamboa: s.gamboa@cgiar.org 

E-mail Greg Forbes: g.forbes@cgiar.org 

E-mail Jan Kreuze: j.kreuze@cgiar.org 

E-mail Marc Ghislain: m.ghislain@cgiar.org 

Citación: 

Orbegozo J., M.L. Román, C. Rivera, J.C. Tovar, W. 

Pérez, S. Gamboa, G. Forbes, J. Kreuze & M. Ghislain. 

2013. Agrotransformación y evaluación de la resistencia a 

Phytophthora infestans en Solanum tuberosum L. variedad 

Désirée. Rev. peru. biol. 20(3): 205 - 210 (Marzo 2014) 

Resumen 

El Oomiceto Phytophthora infestans (Mont.) de Bary, agente causal de la enfermedad denominada 

tizón tardío, es el principal responsable del déficit en rendimiento y producción en el 

cultivo de papa a nivel mundial; una de las alternativas a considerar en la lucha contra este 

patógeno es la integración de secuencias completas de genes R en el genoma de la papa 

a través de Agrotransformación. El gen Rpi-blb2 (gen R) de la especie silvestre Solanum 

bulbocastanum Dunal, presenta una amplia resistencia a los aislamientos de P. infestans, 

haciéndolo un importante candidato en los estudios de mejoramiento genético en plantas. 

En el presente trabajo se describe la introducción del gen Rpi-blb2 por Agrobacterium tumefaciens 

en el genoma de la papa variedad Désirée, la caracterización molecular de 29 

eventos transformados e infección de plantas completas con el aislamiento POX067 de P. 

infestans obtenido en el Perú. Los eventos Désirée [Rpi-blb2] 4 y Désirée [Rpi-blb2] 30, 

presentaron una resistencia considerable frente a la infección de P. infestans, comprobando 

de esta manera la transferencia del gen Rpi-blb2 de una especie silvestre a una cultivada 

mediante transformación genética. 

Palabras clave: papa; Phytophthora infestans; Agrobacterium tumefaciens; gen Rpi-blb2. 

Abstract 

The Oomycete Phytophthora infestans (Mont.) de Bary, the causal agent of the disease known 

as late blight, is primarily responsible for the decreased in production performance and potato 

crops worldwide. The integration of the complete R genes sequences in the potato genome 

using Agro-transformation appears an alternative to be considered in the fight against this 

pathogen. The Rpi-blb2 gene (R gene) from the wild species Solanum bulbocastanum Dunal 

shows a broad resistance to isolates of P. infestans, making it an important candidate for 

plant breeding studies. This paper reports the integration of the Rpi-blb2 gene into potato 

var. Désirée genome by Agrobacterium tumefaciens - mediated transformation system, the 

molecular characterization of 29 events transformed and whole plant infection with isolate 

POX67 of P. infestans from Peru. Désirée events [Rpi-blb2] 4 and Désirée [Rpi-blb2] 30, 

showed a substantial resistance to P. infestans infection confirming complete transfer of the 

Rpi-blb2 gene from a wild species to a cultivated species by genetic transformation. 

Keywords: potato; Phytophthora infestans; Agrobacterium tumefaciens; Rpi-blb2 gene. 

Presentado: 18/12/2013 

Aceptado: 15/01/2014 

Publicado online: 14/03/2014 

Introducción 

Desde el inicio del uso de la bacteria Agrobacterium tumefaciens en los años 80, se 

revolucionó la obtención de plantas resistentes a diversos patógenos de una manera 

rápida y sencilla, siendo considerado hasta la fecha como un proceso importante en la 

biotecnología vegetal (Petti et al. 2009). Asimismo, la búsqueda de nuevas fuentes de 

resistencia ha impulsado el uso de genes de la misma especie o de una familia cercana 

a la planta que se desee modificar (Storck et al. 2012). Un ejemplo de ello son los 

genes R (genes de resistencia) de la familia de genes NB-LRR (Nucleotide binding and 

leucine-rich repeat), provenientes de la especie silvestre Solanum bulbocastanum (Collinge 

et al. 2008, Jacobs et al. 2010; Pel et al. 2009). Los genes R de S. bulbocastanum más 

© Los autores. Publicado por la Revista Peruana de Biología de la Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Este es un artículo de acceso abierto, 

distribuido bajo los términos de la Licencia de Atribución Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 3.0 de Creative Commons (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/deed. 

es_ES), que permite el uso no comercial, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que la obra original sea debidamente citadas. Para uso comercial, por favor póngase en 

contacto con editor.revperubiol@gmail.com. 

Rev. peru. biol. 20(3): 205 - 210 (March 2014) 

205

Orbegozo et al. 

representativos son Rpi-blb1, Rpi-blb2 y Rpi-blb3, y se encuentran 

localizados en los cromosomas 8, 6 y 4 respectivamente 

(Naess et al. 2000, Song et al. 2003). El interés que se tiene en 

estos genes radica en la resistencia que confieren ante el tizón 

tardío, enfermedad ocasionada por el Oomiceto Phytophthora 

infestans y descrita como la más devastadora en el cultivo de la 

papa (Garelik 2002, Fry 2008). 

La lucha contra P. infestans es continua debido a su elevado 

potencial evolutivo y debido a que en su genoma posee regiones 

altamente repetitivas, las cuales presentan características muy 

dinámicas que les permite secretar proteínas efectoras (AVR) 

facilitando su colonización y patogénesis en la planta hospedera 

(Haas 2009). En consecuencia, la obtención de plantas con resistencia 

a P. infestans es apremiante. Es por este motivo, que el 

estudio de los genes R a tenido gran atención, como es el caso del 

gen Rpi-blb2, el cual presenta un amplio espectro de resistencia 

a P. infestans (van der Vossen et al. 2005). Se ha demostrado que 

este gen evolucionó más recientemente que el gen RB / Rpi-blb1 

y codifica una proteína de 1,267 aminoácidos, cuya secuencia 

génica presenta 82% de similitud con el gen Mi-1 de tomate, 

el cual también confiere resistencia a nematodos, áfidos y a la 

mosca blanca (Nombela et al. 2003, Lokossou et al. 2010). 

En el 2011, el grupo BASF (Alemania) obtuvo el cultivo de 

papa Fortuna, a partir de la introducción de genes Rpi-blb2, así 

como otros genes no reportados de S. bulbocastanum y otras 

especies silvestres. Sin embargo, de estas investigaciones sólo se 

conocen notificaciones de avances, y en la actualidad el grupo 

ha retirado su solicitud de liberación del cultivo en la Unión 

Europea por temas de mercado (Gillund et al. 2013). Debido a 

esta situación poco se conoce acerca de la resistencia que puede 

conferir este gen en cultivos de interés, es por ello que el presente 

trabajo provee de información actual en la generación de plantas 

transgénicas de S. tuberosum var. Désirée con el gen Rpi-blb2, 

así como la evaluación de la resistencia frente la infección con 

el aislado POX067 de P. infestans. 

Materiales y métodos 

Material vegetal.- Las plántulas de papa var. Désirée fueron 

obtenidas del banco de germoplasma del Centro Internacional 

de la Papa (CIP) (CIP800048). Se usaron explantes tipo hojapeciolo 

y entrenudos con cuatro semanas de su propagación invitro. 

El aislamiento POX067 (Oxapampa, Pasco), se obtuvo de 

S. tuberosum var. Amarilis, perteneciente al tipo de apareamiento 

A1 y linaje clonal EC-1 (Pérez et al. 2001). 

Diseño del plásmido pCIP95.- La secuencia completa del 

gen Rpi-blb2 fue obtenida del GenBank (número de accesión 

DQ122125.1), y sintetizado por la empresa Entelechon GmbH 

(Alemania). Posteriormente este gen fue clonado en el plásmido 

pCAMBIA1300 obteniéndose el plásmido pCIP95 (Fig.1). Por 

transformación de shock térmico se introdujo el plásmido en la 

hpt-R 

hpt-F 

Blb2-F 

Blb2-R 

nptII 

Figura 1. Plásmido pCIP95. RB, borde derecho; gen Rpi-blb2; P35S, promotor del virus del mosaico de la coliflor 35S; gen hpt, higromicina 

fosfotransferasa; t35S, terminador del virus del mosaico de la coliflor 35S; LB, borde izquierdo; gene nptII, neomicina fosfotransferasa II; 

pBR322, ori pBR322 origen de replicación; pBR322 bom, pBR322 bases de mobilidad; pVS1 rep, pVS1 función de replicacion; pVS1 Sta, 

función de estabilidad. Posiciones de sitios de amplificación de los cebadores, indicados por flechas en negro. 

Figure 1. Plasmid pCIP95. RB, right border; Rpi-blb2 gene; P35S, promoter of the cauliflower mosaic virus 35S; hpt gene, hygromycin phosphotransferase; 

t35S, terminator of the cauliflower mosaic virus 35S; LB, left border; nptII gene, neomycin phosphotransferase II; pBR322 ori, 

pBR322 origin of replication; bom pBR322, pBR322 bases mobility; pVS1 rep, pVS1 replication function; pVS1 Sta, stability function. Positions 

of sites for amplification primers, indicated by black arrows. 

206 

Rev. peru. biol. 20(3): 205 - 210 (Marzo 2014)


cepa DH5α de E. coli y por electroporación en la cepa EHA105 

de A. tumefaciens (Hood et al. 1993, Sambrok & Russell 2001). 

Evaluación de la sensibilidad de los explantes de S. tuberosum 

var. Désirée al agente selector higromicina.- Por cada 

tipo de explante se usó 30 unidades sin transformar, las cuales 

fueron colocadas en un medio de regeneración semisólido (4.60 

g/L de sales Murashigue & Skoog, 2% de glucosa, 0.02 mg/L de 

ácido giberélico, 0.02 mg/L de ácido naftalen acético, 2 mg/L de 

ribósido de zeatina, pH 5.6 y 0.23% de gelride) complementado 

con una gradiente de concentración del antibiótico higromicina: 

1, 5, 10, 15, 20, 25 y 30 mg/L. El control negativo fue la var. 

Désirée (no transformada) colocada en el medio de propagación 

sin antibiótico. El cambio de placas se realizó cada 15 días. 

Transformación de papa.- La transformación fue vía organogénesis 

directa, siguiendo el protocolo establecido por Medina 

et al. 2003, con modificaciones para la var. Désirée. Las plantas 

fueron propagadas in-vitro en magentas en un medio líquido 

de propagación (4.3 g/L de sales Murashige & Skoog, 0.4 mg/L 

de tiamina, 2 mg/L de glicina, 0.5 mg/L de ácido nicotínico, 

0.5 mg/L de piridoxina, 0.1 mg/L de ácido giberélico, 2% de 

sacarosa y pH 5.6). 

La bacteria A. tumefaciens conteniendo el plásmido pCIP95 

fue sembrada en el medio semisólido Luria-Bertani (LB) (1% 

de bacto-triptona, 0.5% de extracto de levadura, 1% NaCl, 

pH 7.5 y 2.5 g/L de agar) con 100 mg/L de kanamicina, a 28 

°C por 48 horas. 

Los explantes fueron cortados de forma transversal con una 

cuchilla estéril que previamente fue puesta en contacto con una 

colonia de A. tumefaciens. Los explantes tratados fueron transferidos 

a un medio que contenía: 4.60 g/L de sales Murashige 

& Skoog, 2% de sacarosa, 30 mg/L de acetosiringona, pH 5.6 

y 0.23% de gelride, sin antibiótico de selección, a 18 – 22 °C 

por 24 horas en oscuridad. Posteriormente, éstos fueron colocados 

en el medio de regeneración semisólido con el antibiótico 

higromicina y 200 mg/L de carbenicilina. Cada 15 días el material 

vegetal fue transferido a placas conteniendo un medio de 

regeneración nuevo. Una vez obtenidos los regenerantes fueron 

individualizados para su posterior evaluación. Los cálculos de las 

eficiencias de regeneración y transformación fueron obtenidos 

según García et al. (2008) y Luo et al. (2006), respectivamente. 

Caracterización molecular por PCR.- El proceso de extracción 

de DNA se realizó siguiendo lo descrito por Doyle y Doyle 

(1990). Para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se 

usaron los siguientes sets de cebadores: gen Rpi-blb2: Blb2-F: 

5'- AATACGCAAACCGCCTC-3' y Blb2-R: 5'-AGCTTCA- 

GATCCTTGGCC-3' (Vector NT 9.1.0), para el gen hpt: 

hpt-F: 5'-TCCATCACAGTTTGCCAGTGATACA-3' y hpt-R: 

5'-ATGAAAAAGCCTGAACTCACCGCGA-3' (Nishizawa et 

al. 1999). El volumen final de la reacción de PCR fue de 15μL, 

conteniendo 10ng de DNA, 1X PCR buffer (Promega©), 0.4 

µM de cada cebador, 0.5 µM dNTPs y 1 U de la enzima Taq 

DNA polimerasa (Promega © ). El programa de PCR usado fue: 

95 °C por 5 min, la temperatura de hibridación para ambos 

cebadores fue de 56 °C con 34 ciclos de 95 °C por 1 min, 56 

°C por 45 s y 72 °C por 1 min, y una elongación final de 72 °C 

por 5 min. Una vez terminada la amplificación los productos 

de PCR se mezclaron con solución de carga (0.25% azul de 

bromofenol, 40% sacarosa) y separados en geles de agarosa al 


1% en amortiguador TBE 1X (20 mM Tris-borato y 0.5 mM 

EDTA, pH 8.0). Los tamaños del producto de PCR fueron 

comparados con el peso molecular del marcador Lamdda DNA 

previamente digerido con PstI. El gel fue teñido con bromuro de 

etidio para la visualización de los fragmentos de DNA a través 

de la irradiación del gel con luz UV (Sambrok & Russell 2001). 

Imágenes del gel donde se observan los fragmentos de DNA 

obtenidos por PCR fueron capturadas con el equipo EpiChemi3 

Darkroom para su posterior análisis. 

Ensayo de infección con P. infestans.- Se usaron 2 plantas 

por evento de transformación de la segunda propagación vegetativa, 

de un mes y medio de siembra. Los ensayos de infección 

se realizaron en los cubículos de bioseguridad del CIP bajo 

condiciones controladas de temperatura 16 – 18 °C, 12 h /12 

h de exposición de luz/oscuridad y 60 – 75% de humedad relativa. 

La infección se realizó por aspersión de la planta completa 

con una suspensión de 3000 esporangios/mL del aislamiento 

POX067 de P. infestans. Una vez inoculadas las plantas, estas 

fueron colocadas en cámaras con humedad relativa alta (> 

90%) para promover y aumentar el desarrollo del patógeno. 

Las plantas de S. tuberosum var. Désirée (susceptible) y el clon 

CIP 387164.4 (resistente) fueron usadas como control negativo 

y positivo, respectivamente. Las evaluaciones fueron realizadas 

por el Laboratorio de Patología del CIP al quinto día post infección 

(dpi). El daño foliar observado en cada uno de los clones 

se reportó en porcentaje y los valores promedios fueron analizados 

usando la siguiente escala: Altamente resistente= ≤10%, 

resistente= ≥11 – 20%, medianamente resistente = ≥21 – 50%, 

medianamente susceptible =50 – 65%, susceptible =>65 – 80%, 

altamente susceptible =>80%. 

Resultados y Discusión 

Determinación de la dosis letal de higromicina y transformación 

genética.- A través de los ensayos de sensibilidad al 

antibiótico higromicina se determinó que la dosis letal para los 

explantes hoja-peciolo y entrenudos no transformados fue de 5 

mg/L y 10 mg/L, respectivamente. Las soluciones del antibiótico 

en las concentraciones descritas arriba fueron usadas de manera 

directa sobre los explantes, sin necesidad de adicionar un paso 

previo de precultivo, el cual incrementa la aparición de eventos 

considerados “escapes” (Chaudhry y Rashid 2010). Durante 

los ensayos de transformación se obtuvieron 29 regenerantes a 

partir de 898 explantes transformados (364 entrenudos y 534 

hoja-peciolo), reportándose una eficiencia de regeneración de 

1.5% para hoja-peciolo y 5.7% para entrenudos. Así también, 

se registro una eficiencia de transformación de 1.5% en hojapeciolo 

y 5% para entrenudos. 

La caracterización molecular de los 29 regenerantes obtenidos, 

identificó 26 eventos positivos conteniendo el gen de interés. 

De este análisis se concluye que los explantes tipo entrenudos 

presentaron una mejor respuesta de eficiencia de transformación 

(18 eventos positivos) que los explantes hoja-peciolo (8 eventos 

positivos). Esta observación confirma lo descrito por Beaujean 

et al. (1998), quienes al trabajar con las variedades Désirée, 

Bintje y Kaptah Vandel, identificaron que los explantes tipo 

entrenudos presentan una mejor respuesta a las condiciones 

in vitro debido a que son menos sensibles al daño durante los 

pasos de manipulación de transformación y tienen un alto poder 

regenerativo a diferencia de las hojas (Sarker et al. 2009, Soto et 

al. 2007). En relación al uso de higromicina durante el proceso 

207


Figura 2. Electroforesis en gel de agarosa de los amplificados por PCR. Gen Rpi-blb2, 520 pb (A), gen hpt, 500 pb (B). B, agua libre de nucleasas; 

NT, control negativo (DNA genómico de una planta no transformada); C+, control positivo (DNA de pCIP95); M, marcador molecular 

del λ-DNA digerido con PstI; 1-5 DNA genómico de plantas regeneradas. 

Figure 2. Agarose gel electrophoresis of PCR products. Rpi-blb2 gene, 520 bp (A), hpt gene, 500 bp (B). B, nuclease-free water; NT, negative 

control (DNA genomic from an untransformed plant); C +, positive control (DNA of pCIP95); M, molecular marker from λ-DNA digested with 

PstI; 1-5, DNA genomic from regenerants. 

de obtención de transformantes, se concluye que la eficiencia 

en ambos tipos de explantes fueron bajas en el presente trabajo 

esto se determinó al comparar los resultados obtenidos con 

ensayos reportados previamente donde se describe el uso del 

mismo antibiotico (M'Hamdi et al. 2003, Kashani et al. 2012). 

Estas diferencias pueden deberse a múltiples factores asociados 

a las condiciones de transformación o al tipo de explante usado 

(Lagunes 2009). No obstante la principal causa puede deberse a 

que los ensayos de regeneración y transformación son genotipodependiente 

del tipo de cultivo que se use en los experimentos 

a realizar (Cingel et al. 2010). 

Análisis de eventos transformados por reacción en cadena 

de la polimerasa (PCR).- De los 29 eventos obtenidos en el 

primer experimento de transformación, 26 (90%) eventos fueron 

positivos por PCR para las amplificaciones de los genes Rpi-blb2 

y hpt (Fig. 2A y 2B). Los eventos restantes fueron considerados 

como “escapes”, esto se puede deber a una proliferación de 

algunas células no transformadas presentando una resistencia 

o tolerancia natural ante el agente selector (López y Chaparro 

2007). Así también es posible que la superficie de estos explantes 

no haya tenido un contacto perenne con el medio de cultivo 

haciendo favorable su desarrollo (Monserrat et al. 2001). 

Respuesta de resistencia a la infección con P. infestans.- 

Del total de los 26 eventos transformados, solo 13 presentaron 

aclimatación total y produjeron tubérculos en invernadero. Los 

eventos Désirée [Rpi-blb2]: 4 y Désirée [blb2] 30 registraron 

un 42.5% y 37.5% de severidad, respectivamente (Fig. 3). La 

respuesta de hipersensibilidad (HR) inducida por la infección 

en estos dos eventos no estuvo correlacionada con una completa 

resistencia al patógeno, otorgando sólo una resistencia moderada. 

Esto pudo deberse a que el aislamiento POX067 presenta una 

gran variedad de genes Avr (genes de avirulencia de P.infestans) 

incluyendo a los Avr8 y Avr9 identificados previamente en 

infecciones en S.demissum (Villamon et al., 2005). Es probable 

que estos genes Avr incrementen la agresión del aislado 

208 

POX067durante la infección a la var. Désirée. Por lo general, 

la respuesta HR es asociada con otro tipo de respuestas que 

cooperan para restringir el desarrollo del patógeno (Chen & 

Halterman, 2011). Es por ello que la muerte celular y la resistencia 

pueden actuar de manera independiente, indicando 

que múltiples respuestas, así como la presencia de más de un 

gen R por parte de los hospederos, serían necesarias para lograr 

obtener resistencia o inmunidad. La detección de los eventos 

Désirée [Rpi-blb2] 4 y Désirée [Rpi-blb2] 30, muestra el éxito 

logrado en el presente trabajo debido a que las infecciones se 

realizaron en una población pequeña (13 plantas transgénicas) 

y con el aislamiento POX067 el cual es considerado una raza 

compleja y agresiva. 

Agradecimientos 

El presente trabajo fue realizado gracias al financiamiento 

de la Agencia de los Estados Unidos para el Desarrollo Internacional 

(USAID). 

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Figura 3. Infección de plantas completas de la var. Désirée con el aislado POX067 de P. Infestans. Désirée [Rpi-blb2] 4 (A), Désirée [Rpi-blb2] 

30(B), S. tuberosum var. Désirée (C), y el clon CIP 387164.4 (D). El desarrollo de los síntomas fue visualizado 5 dpi. 

Figure 3. Infection of complete plant of var. Désirée with isolated POX067 from P. infestans. Désirée [Rpi-blb2] 30 (A), Désirée [Rpi-blb2] 4 

(B), S. tuberosum var. Désirée (C) and clon CIP 387164.4 (D). Disease symptoms were visuals 5 dpi. 

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210 



Identificación de genes relacionados a sequía en papas nativas empleando RNA-Seq 





Yerisf Torres*, Roberto Lozano, Carlos Merino y Gisella Orjeda 

Unidad de genómica, Laboratorios de Investigación y Desarrollo 

(LID), Universidad Peruana Cayetano Heredia. Av. 

Honorio Delgado 430, Urb. Ingeniería, S.M.P. Lima - Perú. 

Email Yerisf Torres: yerisf.torres.a@upch.pe; 

Email Roberto Lozano: roberto.lozano@upch.pe 

Email Carlos Merino: carlos.merino.m@upch.pe 

Email Gisella Orjeda: gisella.orjeda@upch.pe 

*Autor para Correspondencia 

Citación: 

Torres Y., R. Lozano, C. Merino & G. Orjeda. 2014. Identificación 

de genes relacionados a sequía en papas nativas 

empleando RNA-Seq. Rev. peru. biol. 20(3): 211 - 214 

(Marzo 2014) 

Resumen 

El reciente desarrollo del RNA-Seq, un método de secuenciamiento masivo en paralelo para el 

análisis de transcriptomas permite conocer el perfil de expresión de las plantas en respuesta 

a estrés de tipo abiótico y biótico. En este estudio, se secuenció el mRNA proveniente de 

hojas y raíces de dos variedades de papas nativas expuestas a diferentes niveles de sequía. 

Lecturas o reads de 50 pares de bases provenientes de mRNA se mapearon al genoma de 

papa: 75 – 82% mapearon a posiciones únicas, 6 – 14% mapearon a múltiples posiciones 

y 9 – 12% no mapearon a posición alguna del genoma. Comparando los perfiles de expresión, 

se encontraron entre 887 – 1925 genes inducidos/reprimidos por sequía en la variedad 

sensible y 998 – 1995 en la tolerante. Este estudio generó información de gran valor que 

podrá ser utilizada en futuros estudios para comprender mejor los mecanismos moleculares 

de resistencia a sequía en papa y especies cercanas. 

Palabras clave: RNA-Seq; transcriptoma; sequía; papa; mRNA. 

Abstract 

The recent advent RNA sequencing technology (RNA-Seq), a massively parallel sequencing 

method for transcriptome analysis, provides an opportunity to understand the expression profile 

of plants in response to biotic and abiotic stress. In this study, the mRNA was sequencing from 

leaves and roots of two native potato varieties at different levels of drought. Fifty-base-pair 

reads from whole mRNAs were mapped to the potato genomic sequence: 75 – 82% mapped 

uniquely to the genome, 6 – 14% mapped to several locations in the genome and 9 – 12% 

had no match in the genome. Comparing expression profiles, 887 to 1925 genes were found 

to be induced/repressed by drought in the sensible variety and 998 to 1995 in the tolerant. 

This research provides valuable information for future studies and deeper understanding of 

the molecular mechanism of drought resistance in potato and related species. 

Keywords: RNA-Seq; transcriptome; drought; potato; mRNA. 


Aceptado: 20/01/2014 


Introducción 

La sequía es el estrés medio ambiental más importante en la agricultura, por lo que 

se vienen realizado muchos esfuerzos para mejorar la productividad de los cultivos bajo 

condiciones limitantes de agua. La papa, el tercer cultivo alimentario más importante 

del mundo (FAOSTAT 2008) es muy sensible a la sequía, ya que necesita un riego 

frecuente. A diferencia de Solanum tuberosum subs. tuberosum, las especies nativas de 

los andes, cultivadas a altitudes de 3500 m, están adaptadas a diversas condiciones 

climáticas adversas (Vasquez-Robinet et al., 2008). Esto hace a estas variedades de papa 

los candidatos ideales para estudiar la expresión de genes responsables de la tolerancia 

a la sequía. 

Este trabajo pretende identificar genes relacionados a sequía en papa, empleando la 

tecnología de secuenciamiento de RNA (RNA-Seq), una herramienta revolucionaria 

de la transcriptómica (Mortazavi et al. 2008) que permite secuenciar genes transcritos 

y cuantificarlos de manera precisa. 






211

Torres et al. 


Material vegetal.- Dos variedades de S. tuberosum andigena, 

Negrita 703671 (tolerante a sequía) y Wila-HuakaLajra 703248 

(susceptible a sequía) fueron propagadas in-vitro, enraizadas y 

transferidas a un sistema aeropónico de cultivo en la Estación 

Experimental de INIA- Huancayo. 

Diseño del experimento.- Las plantas recibieron una irrigación 

normal durante aproximadamente 3 meses, tiempo 

después del cual comienza la tuberización, en este momento 

se inició la inducción del estrés por sequía dejando de regar a 

las plantas. 

Se tomaron muestras de hojas y raíces de ambas variedades 

considerando cuatro tiempos de muestreo. Para determinar 

los tiempos de muestreo se realizaron mediciones de la tasa 

fotosintéticas de la variedad tolerante (703671) en condiciones 

normales y de sequía, empleando el equipo CI-340 Handheld 

Photosynthesis System (CID Bio-Science, Inc. USA) que es 

un analizador infrarrojo de CO 2 

/H 2 

O que mide la cantidad 

de CO 2 

asimilada por un área de hoja conocida en un tiempo 

dado. El Tiempo Cero correspondió al control del experimento, 

antes del inicio de la sequía. Los tiempos T1, T2 y T3 correspondieron 

a una disminución de la tasa fotosintética en la 

planta tolerante de 25%, 50 – 60% y una recuperación hasta 

del 80% del valor control respectivamente (Vásquez- Robinet 

et al. 2008). Los tiempos T1, T2 representaron la respuesta 

temprana y tardía de las plantas frente a la sequía, mientras que 

el tiempo T3 represento la recuperación de las plantas luego 

de reiniciado el riego. 

Análisis de expresión.- El RNA fue aislado de aproximadamente 

1 – 2 g de tejido de hojas y raíces usando el método 

fenol-cloroformo (Buell Lab - Michigan State University, comunicación 

personal 2010), y purificado usando el Kit Ambion 

DNA-free (Cat. No. 1906). 

El RNA extraído fue secuenciado empleando un secuenciador 

Illumina Hi-Seq TM 2000. Brevemente consiste en que 

la población de RNA extraído fue convertido a una librería de 

fragmentos de DNA, cada molécula luego fue amplificada, cuantificada 

y secuenciada, con lecturas de 50 pares de bases (bp). 

Tabla 1. Descripción de las 16 librerías secuenciadas. T: tolarante, 

S: susceptible, L: hojas, R: raíces. 

Nivel de sequía Variedad Tejido Librería 

Control 

Respuesta temprana 

Respuesta tardía 

Recuperación 

703671 

703248 

703671 

703248 

703671 

703248 

703671 

703248 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

Hoja 

Raíz 

TLC 

TRC 

SLC 

SRC 

TL1 

TR1 

SL1 

SR1 

TL2 

TR2 

SL2 

SR2 

TL3 

TR3 

SL3 

SR3 

Este procedimiento fue realizado en la Universidad de Michigan 

(Buell Lab, Michigan State University). Se generaron en total 

16 librerías correspondientes a mRNA de hojas y raíces de las 

dos variedades en estudio en los cuatro tiempos de muestreo 

(Tabla 1). 

Para el análisis bioinformático se realizó primero un control 

de calidad de las lecturas empleando el programa FastQC versión 

0.10.0, y dos herramientas de FastX, FASTQ Clipper, que eliminan 

secuencias de adaptadores o linkers y FASTQ Trimmed, que 

permite eliminar bases de mala calidad presentes en las lecturas, 

acortando el tamaño de éstas. 

Las lecturas fueron alineadas al genoma de referencia de papa 

(PGSC. 2011), empleando los programas Bowtie 2.0.0 (Langmead 

et al. 2009) y TopHat (Trapnell et al. 2009). Posteriormente 

se ensamblaron y cuantificaron las lecturas empleando el 

programa Cufflinks 1.3.0 (Trapnell et al., 2010), y se empleó la 

herramienta Cuffdiff para identificar los genes con cambios más 

significativos en el nivel de expresión durante el experimento. 

Resultados y discusión 

Control de calidad.- Con el programa FastQ se determinó 

el Phred Score para los reads de las 32 librerías. Los valores Phred 

varían entre 4 y 60, y asignaron un valor de calidad a cada base 

de una secuencia, siendo más alta la calidad al más alto valor. Se 

consideró como umbral un valor Phred > 28 (considerando que 

un valor de Phred = 30 indica que la probabilidad de tener una 

base incorrecta es de 1 en 1000). En 5 librerías las 50 bases de 

los reads tienes un valor Phred por encima del umbral, 6 librerías 

presentaron las 3 primeras bases con un valor Phred debajo del 

umbral y 5 librerías presentaron las 4 primeras bases con un 

valor Phred debajo del umbral. En estos dos últimos casos se 

empleó la herramienta FastX-Trimmer para cortar las primeras 

3 ó 4 bases de todos los reads de estas librerías y optimizar la 

calidad de los mismos. 

Mapeo de las lecturas.- Una vez realizado el control de 

calidad, se empleó el programa TopHat para mapear todas las 

secuencias obtenidas al genoma de referencia de papa que corresponde 

a S. tuberosum Group Phureja DM1-3 516R44 (PGSC 

2011). En base al alineamiento, las secuencias fueron clasificadas 

en tres clases: reads únicos que son aquellos que mapean con 

una única posición en el genoma, reads que mapean con más 

de una posición en el genoma de referencia y los reads que no 

mapean con región genómica alguna. Empleando el script Perl 

mapping stadisticas se calculó el número y porcentaje de estos 

reads (Tabla 2). 

Del total de reads evaluados por cada librería, el 75 – 83% 

de reads fueron únicos, mientras que el 6 – 14% mapearon a 

múltiples localizaciones en el genoma y 8 – 11% no mapearon 

con el genoma. Estos valores indican un desempeño/ rendimiento 

similar de construcción y secuenciamiento entre las librerías. 

Adicionalmente, como un control de calidad se secuenció una 

librería construida a partir de hojas del individuo de referencia 

DM1-3 516R44, encontrándose valores semejantes. 

Expresión diferencial de genes.- El siguiente paso en el 

análisis de RNA-Seq fue la reconstrucción del transcriptoma y 

su cuantificación El nivel de expresión de todos los transcriptos 

que mapearon en el genoma fue cuantificado como fragmentos 

por kilobase de exón por millón de reads (FPKM). 

212 



Tabla 2. Resumen estadístico del número de reads secuenciados y mapados con TopHat al genoma de referencia. DM hojas: corresponde a 

una librería construida a partir del RNA de hojas de DM, a quien corresponde el genoma de referencia. 

Librería Total reads Único % Múltiple % Unmapped % 

TLC 26304956 21291611 80,94 2758808 10,49 2254537 8,57 

TL1 17079619 14158415 82,9 1535509 8,99 1385695 8,11 

TL2 22260826 18156792 81,56 2257435 10,14 1846599 8,3 

TL3 25424875 20546901 80,81 2214432 8,71 2663542 10,48 

TRC 30840996 25101293 81,39 2153567 6,98 3586136 11,63 

TR1 19780525 16431906 83,07 1478617 7,48 1870002 9,45 

TR2 23292392 19398147 83,28 1475718 6,34 2418527 10,38 

TR3 14717082 12249428 83,23 1047903 7,12 1419751 9,65 

SLC 27976839 21798560 77,92 3250580 11,62 2927699 10,46 

SL1 28223430 21187144 75,07 4139513 14,67 2896773 10,26 

SL2 23408804 18275867 78,07 2455980 10,49 2676957 11,44 

SL3 20067948 15983176 79,65 2002679 9,98 2082093 10,38 

SRC 27993309 22590737 80,7 2129629 7,61 3272943 11,69 

SR1 27415791 22386601 81,66 1945125 7,09 3084065 11,25 

SR2 24620110 20164169 81,9 1711811 6,95 2744130 11,15 

SR3 16975442 13975326 82,33 1162503 6,85 1837613 10,83 

DM Hojas 15983851 12481572 78,09 1513613 9,47 1988666 12,44 

La comparación de niveles de expresión entre diferentes 

muestras es parte clave del secuenciamiento de transcriptoma. 

Empleando el programa Cuffdiff se compararon los perfiles de 

expresión de las variedades susceptible (703248) y tolerante 

(703671) durante la exposición a sequía (respuesta temprana, 

tardía y recuperación) y además entre ambos individuos. 

En la Figura 1 se muestra la comparación del número total 

de transcriptos diferencialmente expresados en hojas y raíces de 

703248 y 703671 bajo los tratamientos de sequía; el número de 

genes diferencialmente expresados entre los tratamientos varía 

entre 887 – 1995 y se encontró un aumento de este número 

conforme avanza el experimento. 

Respecto a la inducción y represión génica, en hojas de 

703248 durante la respuesta temprana se encontró que 364 genes 

fueron inducidos significativamente, mientras que en la sequía 

tardía y en la recuperación 893 y 989 genes respectivamente; 

esta tendencia creciente en la inducción de genes se mantiene 

en hojas y raíces de ambas variedades conforme la sequía avanza. 

Por otra parte, el número de genes reprimidos varió entre 359 

en raíces de 703671 durante la respuesta temprana y 1085 en 

hojas de 703671 también en la respuesta temprana (Fig. 2). 

Comparando el perfil de expresión de ambas variedades, se 

encontró que en la variedad 703671 un mayor número de genes 

mostraron cambios significativos en respuesta a la sequía. En 

la respuesta temprana, 149 genes inducidos y 276 reprimidos 

fueron comunes a hojas de las dos variedades bajo estudio. Se 

1600 

1400 

1386 

Número total de genes 

2500 

2000 

1500 

1000 

500 

0 

1995 

1925 

1853 

1731 1729 

1623 1654 

1506 1450 

887 

998 

918 

Respuesta temprana Respuesta tardía Recuperación 

Tratamientos de sequía 

703248-Hojas 

703248-Raíces 

Número de genes 

1200 

1086 

1000 

989 

956 

1002 

893 

800 

788 

730 

639 

600 

400 364 

421 

382 

200 

0 

-200 

-400 

- 359 

-600 - 523 

- 536 

- 609 

- 662 

-800 - 730 - 740 

- 729 

-1000 

- 897 - 924 - 839 

-1200 

- 1085 

-1400 

703671-Hojas 

703671-Raíces 

Reprimidos 

Inducidos 

Figura 1. Número total de genes diferencialmente expresados en 

hojas y raíces de S. tuberosum andigena, variedad Negrita 703671 

(tolerante a sequía) y Wila-HuakaLajra 703248 (susceptible a sequía) 

durante el estrés por sequía. 

Figura 2. Distribución del número de genes inducidos y reprimidos 

en S. tuberosum andigena, variedad Negrita 703671 (tolerante a 

sequía) y Wila-HuakaLajra 703248 (susceptible a sequía) durante 

el estrés por sequía. 


213

Torres et al. 

HOJAS 


703248 703671 

RAÍCES 


703248 

703671 

HOJAS 


703248 703671 

RAÍCES 


703248 

703671 

215 149 272 

212 170 469 

247 276 809 

435 101 983 


703248 

703671 


703248 

703671 


703248 

703671 


703248 

703671 

455 438 347 

383 347 555 

432 298 356 

656 267 562 

Recuperación 

703248 

703671 

Recuperación 

703248 

703671 

Recuperación 

703248 

703671 

Recuperación 

703248 

703671 

412 577 379 

294 792 594 

393 347 550 

494 345 263 

Figura 3. Número de genes inducidos por sequía (respuesta temprana 

y tardía) y en la recuperación. Se muestra el número de genes 

compartidos por S. tuberosum andigena, variedad Negrita 703671 


y aquellos de expresión única. 

encontró un mayor número de genes específicos y diferencialmente 

expresados en hojas de la variedad 703671 (272 inducidos 

y 809 reprimidos), mientras que se encontraron solo 562 genes 

(215 inducidos y 247 reprimidos) específicos de hojas de la 

variedad 703248 (Figs. 3 y 4). Un patrón similar se encontró en 

raíces, 170 genes inducidos y 101 reprimidos fueron comunes 

en las dos variedades, encontrándose un mayor número de genes 

específicos y diferencialmente expresados en la variedad 703671 

(469 inducidos y 983 reprimidos), mientras que se encontraron 

solo 646 genes (211 inducidos y 435 reprimidos) específicos 

de la variedad 703248 (Figs. 3 y 4). Estos genes específicos de 

la variedad tolerante representan candidatos que deberán ser 

estudiados a mayor profundidad para conocer el rol que estos 

cumplen en la resistencia a sequía. 

Es importante resaltar que, durante la respuesta temprana de 

ambas variedades se encontró un mayor número de genes únicos 

y específicos con expresión diferencial en comparación al de los 

genes comunes, mientras que en la etapa de recuperación es 

mayor el número de genes comunes con expresión diferencial. Lo 

cual podría indicar que los mecanismos de respuesta temprana a 

sequía son específicos de cada variedad, pudiendo ser esta la etapa 

clave para encontrar genes responsables de la resistencia a sequía. 

En este trabajo, el empleo del RNA-Seq permitió generar 400 

millones de reads, que analizados y procesados con herramientas 

bioinformáticas permitieron identificar y cuantificar un gran 

número de genes de papa relacionados a sequía y que podrían 

permitir comprender mejor los mecanismos de resistencia en 

papa y otras especies relacionadas. 

Figura 4. Número de genes reprimidos por sequía (respuesta temprana 

y tardía) y en la recuperación. Se muestra el número de genes 

compartidos por S. tuberosum andigena, variedad Negrita 703671 


y aquellos de expresión única. 

Información adicional 

Contribución de autores.- Gisella Orjeda y Yerisf Torres: 

concepción y diseño de experimento. Yerisf Torres, Roberto 

Lozano: realización del experimento. Yerisf Torres, Roberto Lozano 

y Carlos Merino: análisis de datos. Yerisf Torres, Roberto 

Lozano y Carlos Merino: redacción del artículo. 

Conflicto de interés.- Los autores han declarado no incurrir 

en conflicto de intereses. 

Financiamiento.- Los autores agradecen el financiamiento 

FINCyT (099-FINCyT-EQUIP-2009)/(076-FINCyT- 

PIN-2008). 


FAOSTAT 2008. Potato world: Production and consumption. International 

Year of the Potato. . Acceso: 

08/10/2008. 

Langmead B., C. Trapnell, M. Pop & S. Salzberg. 2009. Ultrafast and memoryefficient 

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Mortazavi A., B. Williams, K. McCue, L. Schaeffer & B. Wold 2008. Mapping 

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Trapnell C., A. Roberts, L. Goff, et al. 2012. Differential gene and transcript 

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Nature Protocols, Vol. 7, Issue 3, pag 562–578 

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molecular adaptations to drought in Andean potato genotypes. 

Journal of Experimental Botany, Vol. 59, No. 8, pp. 2109–2123. 

214 



Diversidad genética de papas nativas en cultivares nativos del Perú 



Diversidad genética de papas nativas (Solanum spp.) conservadas en cultivares nativos 

del Perú 


Julián Soto 3 , Tulio Medina 2 , Yeny Aquino 2 , Rolando Estrada 1 * 

1 Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional 

Mayor de San Marcos, Ciudad Universitaria de San Marcos 

Av. Venezuela s/n. Apartado 110058, Lima 11 – Perú. 

2 Instituto Nacional de Investigación Agraria-INIA, Av. 

La Molina # 1981. Apartado Postal 2791, La Molina, 

Lima - Perú 

3 Centro Internacional de la Papa, CIP-Lima. Av. La Molina 

1895 La Molina Apartado 1558, Lima 12, Perú 

*Autor para correspondencia 

Email Rolando Estrada: restradaj@gmail.com 

Email Julián Soto: julian4881@yahoo.es 

Citación: 

Soto J., T. Medina, Y. Aquino, R. Estrada. 2014. Diversidad 

genética de papas nativas (Solanum spp.) conservadas 

en cultivares nativos del Perú. Rev. peru. biol. 20(3): 215 

- 222 (Marzo 2014) 

Resumen 

El presente trabajo analiza el grado de diversidad genética utilizando 18 marcadores microsatélites, 

de una muestra aleatoria de 79 variedades nominales de papa nativa (Solanum spp.) 

procedentes de cinco regiones políticas del Perú (Ayacucho, Cajamarca, Cusco, Huancavelica 

y Puno), cultivadas en “chacras” de agricultores que colaboraron con el proyecto “Conservación 

in situ de los cultivos nativos y sus parientes silvestres”. De los 18 marcadores, 17 amplificaron 

un solo locus polimórfico, siendo el promedio de alelos por locus de 8.79. Se obtuvo una 

similitud media de 0.62 y rangos de agrupamiento que varíaron desde 0.41 a 0.98. Para los 

19 loci registrados se obtuvo un total de 166 alelos. La región de Cuzco presentó el mayor 

número de alelos (130 alelos). De los 166 alelos caracterizados, 72 alelos (43.37%) fueron 

comunes o compartidos con las 5 regiones de colecta. La región de Puno presento el mayor 

numero de alelos exclusivos (8 alelos). Las 42 variedades nominales de S. tuberosum subsp. 

andigena tuvieron una diversidad promedio de 0.74 y las 18 variedades nominales de S. x 

chaucha una diversidad promedio de 0.70. Los valores de polimorfismo (PIC = 0.55 – 0.85) 

y los índices de diversidad genética obtenidos indicarían que los microsatélites evaluados 

logran identificar altos niveles de diversidad genética, pero a la vez no son suficientes para 

discriminar grupos diferenciados por procedencia o especies. Nuestros análisis indican que 

existe un alto grado de diversidad genética y corroboran los resultados obtenidos de los 

inventarios y caracterizaciones morfológicas realizadas in situ; también podemos concluir 

que existiría un pool de genes común que se encontrarían ampliamente distribuidos entre 

las regiones estudiadas. 

Palabras claves: Conservación in situ; Diversidad genética; papa nativa; microsatélites; SSR. 

Abstract 

This paper analyzes the genetic diversity of 79 accessions of native potato varieties (Solanum 

spp.) using 18 microsatellite markers. A random sample from Ayacucho, Cajamarca, 

Cusco, Huancavelica and Puno from "chacras" of farmers who collaborated with the "In situ 

conservation of native crops and wild relatives" were used. 17 markers amplified one single 

polymorphic locus, the mean number of alleles per locus was 8.79. The mean similarity was 

0.62 and clustering indexes varied between 0.41 and 0.98. 19 loci showed a total of 166 alleles. 

Cuzco had the highest number of alleles (130 alleles). Of the 166 characterized alleles, 

72 alleles (43.37%) were common or shared with 5 sampling sites. Puno had the highest 

number of exclusive alleles (8 alleles). The 42 varieties of S. tuberosum subsp. andigena 

showed a mean diversity of 0.74 and 18 varieties of S. x chaucha an average diversity of 

0.70. Polymorphism (PIC = 0.55 to 0.85) and genetic diversity indices show that microsatellites 

evaluated can identify high levels of genetic diversity, but also are not sufficient to discriminate 

differentiated by origin or species groups. Our analyzes indicate a high genetic diversity and 

are consistent with inventories and morphological characterizations performed in situ, we can 

also conclude that there would be a common pool of genes would be found widely distributed 

among the regions studied. 

Keywords: In situ conservation; genetic diversity; native potato; microsatellites; SSR. 


Aceptado: 14/11/2012 







215

Soto et al. 

Introducción 

El género Solanum tiene más de 300 especies que forman 

tubérculos, entre especies cultivadas y silvestres; sin embargo 

el género, considerado altamente polimórfico y muy complejo 

(Linnaeus 1753 en Ochoa 1990) incluye alrededor de 2400 

especies alrededor del mundo (Ochoa 1999). 

En los Andes, el género está representado por ocho especies 

cultivadas y alrededor de 200 silvestres. La rica diversidad de las 

especies cultivadas está incluida en una serie poliploide (2n = 24, 

36, 48 y 60), que incluye unas 4000 variedades comestibles, con 

alto potencial genético para el rendimiento y amplia adaptabilidad 

a diferentes climas, lo que le ha permitido convertirlo en 

uno de los cultivos de mayor importancia para la alimentación 

mundial (Estrada 2000, Hawkes 1962). A pesar del gran polimorfismo 

que existe entre las ocho especies cultivadas de papa 

(Fig. 1), estas tienen como características comunes el producir 

numerosos tubérculos, de gran tamaño y agradables al paladar 

(Matsubayashi 1991), lo que las distingue de las especies silvestres, 

que poseen gran diversidad de caracteres y que pueden ser 

incorporarlos en las especies cultivadas mediante cruzamientos 

o manipulaciones genéticas. 

La alta variabilidad de caracteres de las especies silvestres 

incluye tolerancias y resistencias a estrés biótico y abiótico, que 

han permitido mejorar las variedades comerciales desde el punto 

de vista nutricional, agronómico, industrial y farmacéutico. Es 

por ello que cada vez se incrementa más el interés por conocer 

las características morfológicas, bioquímicas y moleculares de las 

especies silvestres y cultivadas para prevenir la erosión genética 

de las mismas. 

En el Perú existe una gran diversidad cultural ligada a la 

conservación de la biodiversidad, en este contexto el proyecto 

“Conservación in situ de los cultivos nativos y sus parientes 

silvestres” (“Proyeto in situ”, llevado a cabo entre los años 2001 

- 2006 en el Instituto Nacional de Innovación Agraria, INIA), 

estuvo orientado a reforzar la conservación de los cultivos nativos 

en las chacras, identificar los factores que lo hacen posible 

y elevar el nivel de conciencia sobre su valor biológico, cultural 

y nutricional en el ámbito local y nacional, contando con la 

participación de las comunidades campesinas del país (INIA 

2005 a-e). Los resultados del proyecto permitieron sustentar el 

alto grado de diversidad que presentan estos cultivos y fueron 

la base científica más importante para justificar la necesidad de 

protección que debe ejercer el Estado en los aspectos culturales 

y biológicos sobre los cultivares de papa nativa. 

Dentro de este contexto, se consideró necesario afianzar los 

resultados obtenidos en la caracterización morfológica de las 

papas nativas con el uso de marcadores moleculares. Para el caso 

de la papa, los microsatélites vienen siendo usados hace más de 

18 años para la genotipificación de este cultivo. Provan (1996), 

fue uno de los primeros en estudiar el potencial de los microsatélites 

para el análisis de la diversidad genética de cultivares 

de papa. Por otro lado, Milbourne et al. (1997) compararon la 

eficiencia de tres marcadores basados en PCR para diferenciar 

variedades de papa tetraploide llegando a la conclusión que los 

microsatélites presentaban mayor polimorfismo y mayores ventajas 

que los AFLP y RAPD. En el Perú, Ghislain et al. (2001) en 

el Centro Internacional de la Papa (CIP), lograron seleccionar 

18 iniciadores para secuencias microsatélites de papa, con un 

alto grado informativo y son este grupo de iniciadores los que 

fueron utilizados en el presente trabajo. 


Material Vegetal y Extracción de ADN.- Se colectaron 

al azar tubérculos de 79 variedades nominales de papa nativa 

(Solanum spp.) perteneciente a agricultores colaboradores del 

“Proyecto in situ” y procedentes de cinco regiones politicas: ocho 

variedades del distrito de Luricocha y 17 del distrito de Vinchos 

en la Región Ayacucho, 14 variedades del distrito de Ocongate 

Figura 1: Diagrama de evolución de las especies de papa cultivada, sus relaciones genéticas y sus posibles ancestros silvestres según 

Hawkes (1994). 

Especies 

silvestres 

S. acaule 

(4X) 

S. sparsipilum 

(2X) 

S. leptophytes 

(2X) 

S. megistracolobum 

(2X) 

S. Tuberosum S. stenotomum 

subsp. andigena 

subsp. stenotomum 

(4X) 

(2X) 

S. ajanhuiri 

(2X) 

Especies 

cultivadas 

S. Tuberosum 

subsp. tuberosum 

(4X) 

S. x curtilobum 

(5X) 

S. x chaucha 

(3X) 

S. stenotomum 

subsp. goniocalyx 

(2X) 

S. phureja 

(2X) 

S. x juzepczukii 

(3X) 

216 



en la Región Cusco, 15 variedades del distrito de Pomata en 

la Región Puno, 13 variedades del distrito de Huasmín en la 

Región Cajamarca y 12 variedades del distrito de Yauli en la 

Región Huancavelica. De las 79 variedades, se identificaron 6 

especies de papa cultivada: S. tuberosum subsp. andigena (42 

variedades), S. stenotonum subsp. stenotonum (5 variedades) y S. 

stenotonum subsp. goniacalyx (4 variedades), S. phureja (2 variedades), 

S. ajanhuri (1 variedad), S. x chaucha (19 variedades) y 

S. x curtilobum (6 variedades). El ADN fue aislado a partir de 

hojas jóvenes y frescas mediante el método CTAB modificado 

de Doyle y Doyle (1990). 

Amplificación de microsatélites.- Se utilizaron 18 iniciadores 

microsatélites identificados como altamente informativos 

por Ghislain et al. (2004) y desarrollados por Milbourne et al. 

(1998). Las condiciones de amplificación se llevaron a cabo según 

protocolos del CIP (CIP 1997, Ghislain et al. 2001) adaptados 

de Provan et al. (1996). La mezcla de reacción constó de: 20 

ng de ADN, 0.5 μM de cada iniciador, 2.5 mM de MgCl 2 

, 0.2 

mM de dNTPs, 1X de Taq buffer y 0.5 U de Taq polimerasa 

en un volumen total de 20 L. El programa de amplificación se 

desarrolló de la siguiente manera: 3 min. a 94 °C, dos minutos 

a la temperatura de alineamiento, 1.5 minutos a 72 °C, 30 

ciclos de 1 minuto a 94 °C, dos minutos a la temperatura de 

alineamiento, 1.5 minutos a 72 °C y una elongación final de 5 

minutos a 72 °C, utilizando un termociclador modelo PTC100 

(MJ Reasearch Inc.). La temperatura de alineamiento fue usada 

según los datos reportados por Ghislain et al. (2001, 2004). 

Los productos de amplificación fueron separados en geles 

denaturantes de poliacrilamida (acrilamida 6%, bisacrilamida 

0.3%, Urea 7M y TBE 1X) mediante electroforesis vertical en 

un sistema de secuenciamiento modelo S2-Gibco aplicándole 

un voltaje de 1600 V (40W). Se utilizó como marcador de peso 

la reacción de secuenciamiento del plásmido pUC-18 (Kit de 

secuenciamiento -Promega) y la detección de los fragmentos se 

realizó mediante tinción con nitrato de plata (Promega Corporation 

1996). 

Análisis de datos.- El patrón de bandas obtenido para cada 

iniciador fue registrado en una matriz binaria donde a las bandas 

presentes se les asignó el valor 1 y las ausentes el valor 0. Se calculó 

el índice de similaridad DICE (Dice 1945, Nei y Lei 1979) 

y se realizó un análisis de agrupamiento UPGMA mediante el 

programa NTSYSpc ver 2.0 (Rohlf 1993), además se realizó un 

análisis bootstrap con ayuda del programa WinBoot (Yap 1992). 

Las variedades analizadas se agruparon según su procedencia, 

para determinar la cantidad de alelos que presentaban del total 

registrado, se analizó la presencia de los alelos compartidos entre 

las cinco regiones políticas de colecta y se determinó el rango de 

alelos comunes y exclusivos en cada región. 

Por último, se determinó el índice de diversidad genética 

(Nei 1973) para las especie S. tuberosum subsp. andigena (4x) 

y S. x chaucha (3x), por ser las que poseen mayor número de 

variedades en la muestra analizada. Teniendo en cuenta que su 

valor varía entre 0 a 1, siendo los valores cercanos a 1 los de 

máxima diversidad. 

x i 

= frecuencia del alelo i 

h = 1 – ∑ 

i=1 

q 

xi 

2 

q = Nº de alelos observados en el locus 

h = probabilidad que 2 alelos tomados al azar de la población 

sean diferentes (Nei 1973) 

Resultados 

Número de alelos amplificados por locus e individuos no 

definidos.- De los 18 iniciadores microsatélites utilizados, 17 

amplificaron un solo locus polimórfico mientras que el iniciador 

STM0019 amplificó 2 loci. El rango de alelos encontrados 

por locus, fue desde 5 (STM1049 y STM1053) a 16 alelos 

(STM0019a), siendo el promedio de alelos por locus de 8.79. 

Además los valores superiores a 0.5 encontrados (0.55 – 0.85) 

en el Contenido de Información Polimórfica (PIC) indican que 

los microsatélites evaluados son muy informativos detectando 

variaciones genéticas en el cultivo de papa (Tabla 1). 

De las 79 variedades nominales analizadas, 16 no concordaron 

con el número de alelos esperados para un marcador según 

la especie y ploidia asignada, siendo el iniciador STM2013 el 

que presentó con mayor frecuencia este fenómeno (13 variedades 

nominales). Además, se identificaron 5 variedades nominales (4 

accesiones diploides S. stenotomum subsp stenotomum y 1 accesión 

triploide S. x chaucha) que no concordaron con la especie 

asignada, debido a que el número de alelos para la mayoría de 

iniciadores excedía a lo esperado para cada especie. 

Análisis de agrupamiento.- Se obtuvo una similitud media 

de 0.62 y amplios rangos de agrupamiento que varían desde 0.41 

a 0.98. El agrupamiento fue reforzado por medio del análisis 

de bootstrap para ver la consistencia de los grupos formados. 

Aunque se usaron 18 marcadores microsatélites repartidos por 

todo el genoma de la papa y se analizaron 19 locus muy polimórficos, 

las variedades nominales no lograron diferenciarse 

en grupos homogéneos. Sin embargo, en un rango de similitud 

de 0.51 a 0.72, se logró determinar 18 pequeños grupos en los 

cuales la mayoría guardan alguna relación de nombre, lugar y/o 

especie (Fig. 2). 

De estos 18 grupos, 7 grupos (I, IV, VIII, IX, X, XIII y XVIII) 

presentaron una consistencia de media a alta (46.1 a 83.8%) 

según el análisis bootstrap. Los grupos restantes presentaron 

una consistencia media a baja (39.6 a 10.4%). Con respecto a la 

procedencia del material colectado y a su identidad taxonómica, 

se observaron 5 grupos formados con accesiones pertenecientes 

a la misma región política y con cierta relación de especie (VII, 

VIII, X, XII y XVII). 

Se encontraron 4 variedades, posiblemente duplicadas: a) 

2 accesiones de S. x curtilobum procedente de Cusco y b) 2 

accesiones de S. x chaucha, una procedente de Ayacucho y la 

otra de Cusco. 

Riqueza alélica.- Para los 19 loci registrados se obtuvo un 

total de 166 alelos. La región de Cusco presentó el mayor número 

de alelos (130 alelos), seguido de Puno con 120, Ayacucho 

con 115, Huancavelica con 111 y Cajamarca con 105 alelos. 

Cabe resaltar que se analizó un mayor número de muestras de 

Ayacucho, sin embargo no se encontró un mayor número de 

alelos en esa región; y más aún, solo 4 de los 19 locus analizados 

presentaron un mayor número de alelos en Ayacucho (Tabla 2) 

Alelos comunes y exclusivos.- De los 166 alelos caracterizados, 

72 alelos (43.37%) fueron comunes o compartidos con las 5 

regiones de colecta. Se registraron alelos exclusivos (aquellos que 

solo se encontraron en una de las 5 regiones) en todas las zonas 


217

Soto et al. 

Tabla 1. 19 locus registrados por 18 iniciadores microsatélites, número de alelos, rangos del tamaño de alelos e Índice Polimórfico (PIC) 

registrados para 79 variedades nominales de papa nativa (Solanum spp). 

Iniciador 

(SCRI) 

Motivo Repetitivo 

Secuencia de iniciadores forward - 

Reverse (5´- 3´) 

T° de 

alineamiento 

(°C) 

Cromosoma 

Número Rando de 

de Alelos Alelos 

PIC 

STM1049 (ATA) 6 

CTACCAGTTTGTTGATTGTGGTG 57 I 5 185 - 204 0.5874 

AGGGACTTTAATTTGTTGGACG 

STM2022 (CAA) 3 

…(CAA) 3 

GCGTCAGCGATTTCAGTACTA 53 II 6 184 - 257 0.6713 

TTCAGTCAACTCCTGTTGCG 

STM1053 (TA) 4 

(ATC) 5 

TCTCCCCATCTTAATGTTTC 55 III 5 169 - 179 0.6835 

CAACACAGCATSCAGATCATC 

STM3023 (GA) 9 

,(GA) 8 

,(GA) AAGCTGTTACTTGATTGCTGCA 50 IV 7 167 - 202 0.6849 

GTTCTGGCATTTCCATCTAGAGA 

STM1031 (AT) 13 

TGTGTTTGTTTTTCTGTAT 55 V 7 262 - 298 0.5469 

AATTCTATCCTCATCTCTA 

STPcAo58 (TA) 13 

TTGATGAAAGGAATGCAGCTTGTG 57 V 9 233 - 255 0.7873 

ACGTTAAAGAAGTGAGAGTACGAC 

STM0019a (AT) 7 (GT) 10 (AT) 4 

(GT) 5 

(GC) 4 

(GT) 4 

AATAGGTGTACTGACTCTCAATG 47 VI 16 157 - 214 0.8124 

TTGAAGTAAAAGTCCTAGTATGTG 

STM0019b (AT) 7 (GT) 10 (AT) 4 

(GT) 5 

(GC) 4 

(GT) 4 

AATAGGTGTACTGACTCTCAATG 47 n.d. 6 93 - 106 0.6903 

TTGAAGTAAAAGTCCTAGTATGTG 

STM0031 

(AC) 5 

…(AC) 3 

(GCAC)(AC) 2 

(GCAC) 2 

CATACGCACGCACGTACAC 57 VII 10 148 - 199 0.7091 

TTCAACCTATCATTTTGTGAGTCG 

STM1052 (AT) 14 

GT (AT) 4 

(GT) 6 

CAATTTCGTTTTTTCATGTGACAC Td. 60-50 VII 6 212 - 229 0.7683 

ATGGCGTAATTTGATTTAATACGTAA 

STM2013 (TCTA) 6 

TTCGGAATTACCCTCTGCC 55 VII 11 146 - 171 0.8291 

AAAAAAAGAACGCGCACG 

STM1104 (TCT) 5 

TGATTCTCTTGCCTACTGTAATCG 57 VIII 12 163 - 180 0.8475 

CAAAGTGGTGTGAAGCTGTGA 

STM1016 (TCT) 9 

TTCTGATTTCATGCATGTTTCC 53 VIII 14 236 - 261 0.8405 

ATGCTTGCCATGTGATGTGT 

STGBSS (TCT) 9 

AATCGGTGATAAATGTGAATGC 53 VIII 11 125 - 142 0.8393 

ATGCTTGCCATGTGATGTGT 

STWAX-2 (ACTC) 5 

CCCATAATACTGTCGATGAGCA 53 VIII 7 243 - 218 0.7713 

GAATGTAGGGAAACATGCATGA 

STM3012 (CT) 4 

, (CT) 8 

CAACTCAAACCAGAAGGCAAA 57 IX 7 150 - 212 0.5852 

GAGAAATGGGCACAAAAAACA 

STM1106 (ATT) 13 

TCCAGCTGATTGGTTAGGTTG 55 X 9 132 - 166 0.8276 

ATGCGAATCTACTCGTCATGG 

STM0037 (TC) 5 

(AC) 6 

AA (AC) 7 

(AT) 4 

AATTTAACTTAGAAGATTAGTCTC 53 XI 8 76 - 95 0.7164 

ATTTGGTTGGGTATGATA 

STM0030 Compuesto (GT/GC)(GT) 8 

AGAGATCGATGTAAAACACGT 53 XII 10 130 - 167 0.8434 

GTGGCATTTTGATGGATT 

218 



Figura 2: Dendograma obtenido por el método de agrupamiento UPGMA a partir de una matriz de similitud (DICE) con 79 variedades de papa 

nativa (Solanum spp.) utilizando 18 iniciadores microsatélites. Los números romanos indican los 18 grupos mejor formados y los números 

entre cada brazo indican el grado de consenso según el análisis bootstrap. Abreviaturas: adg = S. tuberosum subsp. andigena, cur = S. x 

curtilobum, cha = S. x chaucha, gon = S. stenotomum subsp. goniacalyx, stm = S. stenotomum subsp. stenotomum, phu = S. phureja, aja = 

S. ajanhuri, AYA = Ayacucho, CUZ = Cuzco, CAJ = Cajamarca, PUN = Puno y HUA = Huancavelica. 

de colecta y para 15 de los 18 iniciadores, siendo los iniciadores 

STWAX-2, STM1049 y STM1106 los que no presentaron 

alelos exclusivos (Tabla 3). La región de Puno presento el mayor 

numero de alelos exclusivos (8 alelos). 

Índice de Diversidad genética. - Para el caso de las 42 

variedades nominales de S. tuberosum subsp. andigena, el valor 

promedio de diversidad fue de 0.74 y para las 18 variedades 

nominales de S. x chaucha, el valor promedio de diversidad fue 

de 0.70, siendo S. tuberosum subsp. andigena ligeramente más 

diversa que S. x chaucha. 

Discusión 

Iniciadores multilocus 

En papas tetraploides, Milbourne el al. (1998) describieron 

la existencia de iniciadores que amplifican varios loci en simultaneo 

(multilocus); como es el caso del iniciador STM0019 que 

presenta dos regiones bien diferenciadas anteriormente reportado 

(Andrade 2001, Ames 2003, Ghislain et al. 2001). El incremento 

del número alelos esperados en el iniciador STM2013 para 13 

accesiones, indicaría la posibilidad de ser un marcador multilocus, 

presentando un locus bien definido y otro con problemas 


219

Soto et al. 

Tabla 2. Número total de alelos presentes para los 19 locus analizados 

y número total de alelos por zona de colecta. AYA = Ayacucho, CUZ 

= Cuzco, CAJ = Cajamarca, PUN = Puno y HUA = Huancavelica. 

Tabla 3. Número de alelos comunes entre las zonas de colecta y número 

de alelos exclusivos para cada zona de colecta. AYA = Ayacucho, 

CUZ = Cuzco, CAJ = Cajamarca, PUN = Puno y HUA = Huancavelica. 

Marcador 

SSR 

Total 

N° alelos 

AYA CUZ PUN CAJ HUA 

Marcador 

SSR 

Alelos 

comunes 

N° alelos exclusivos 

AYA CUZ PUN CAJ HUA 

STWAX-2 7 6 7 6 5 6 

STM3012 7 5 5 3 4 3 

STM1104 12 8 8 9 8 9 

STM1031 7 5 6 3 2 2 

STM0031 10 6 7 5 7 6 

STGBSS 11 6 8 9 7 7 

STM1052 6 4 5 6 5 5 

STPcAo58 9 9 7 7 4 5 

STM2022 6 3 4 5 5 6 

STM1049 5 3 5 5 4 4 

STM1016 14 8 11 10 8 9 

STM0030 10 8 7 7 8 7 

STM3023 7 4 7 3 4 6 

STM1106 9 8 9 6 6 7 

STM1053 5 3 4 4 3 3 

STM0037 8 8 6 7 6 5 

STM0019a 16 9 10 10 6 9 

STM0019b 6 5 6 5 5 4 

STM2013 11 7 8 10 8 8 

Total 166 115 130 120 105 111 

Promedio 8.74 6.05 6.84 6.32 5.53 5.84 

STWAX-2 4 0 0 0 0 0 

STM3012 3 2 1 0 0 0 

STM1104 5 0 0 0 1 0 

STM1031 1 1 0 0 0 0 

STM0031 3 0 0 0 2 0 

STGBSS 6 0 1 2 1 0 

STM1052 4 0 0 1 0 0 

STPcAo58 4 1 0 0 0 0 

STM2022 2 0 0 0 0 1 

STM1049 3 0 0 0 0 0 

STM1016 6 0 1 0 1 0 

STM0030 4 0 0 0 1 1 

STM3023 3 0 0 0 0 0 

STM1106 4 0 0 0 0 0 

STM1053 3 0 1 1 0 0 

STM0037 4 1 0 0 0 0 

STM0019a 3 1 1 2 0 0 

STM0019b 3 0 1 0 0 0 

STM2013 7 0 0 2 0 0 

Total 72 6 6 8 6 2 

de especificidad en la región amplificada, por lo que presentaría 

bandas sobrepuestas y una gran cantidad de alelos nulos, esto 

también fue sugerido por Ghislain (1999) y Andrade (2001). 

Individuos no definidos 

La probable explicación para que 5 variedades nominales no 

concuerden con el número de alelos esperado sería una mala clasificación 

taxonómica in situ y por lo tanto no concuerdan con la 

especie asignada. Aunque también deberíamos tomar en cuenta 

que los campesinos no siembran los cultivos de papa separándolos 

por especie y no tienen cuidado de la hibridación natural 

que puede sufrir este cultivo (Sevilla 2004, Brush et al. 1981, 

Jackson et al. 1978) lo que estaría ayudando a cometer errores 

involuntarios en la caracterización. Esta característica natural de 

la papa de formar híbridos espontáneos interespecíficos podría 

hacer que fenotípicamente un híbrido sea reconocido como 

alguna especie determinada debido a que expresa característica 

de uno de sus progenitores pero que genotípicamente comparte 

regiones genómicas de sus dos especies parentales. 

Análisis de agrupamiento 

La baja similitud media obtenida (0.62) y los amplios rangos 

de agrupamiento nos indican una alta variación genética entre 

las accesiones evaluadas. Si bien existen ciertas relaciones entre 

zonas de procedencia y/o especie, la consistencia de estos grupos 

no es fuerte, por lo que no se puede afirmar grandes relaciones 

genéticas entre las variedades nominales agrupadas. 

Estos resultados sugieren que los 18 iniciadores microsatélites 

no fueron suficientes para lograr una completa diferenciación 

en grupos homogéneos por especies, zona de procedencia 

ni por ploidía. Este fenómeno ya fue observado por Raker y 

Spooner en el 2002, donde encontraron que muchas accesiones 

de S. tuberosum subsp. andigena (tetraploides) se mantenían 

agrupadas junto con sus ancestros diploides sin formar grupos 

definidos. Además debemos tener en cuenta el alto porcentaje 

de hibridación natural presente en las especies de papa nativa y 

que posiblemente los marcadores moleculares evaluados no se 

encuentren ligados a regiones genéticas que puedan diferenciar 

estas especies. 

La presencia de variedades duplicadas indicaría la existencia de 

un pequeño grado de sobreestimación de la diversidad genética, 

específicamente en el caso de las 2 variedades que provienen 

de la misma región. Por otro lado, las 2 variedades duplicadas 

que provienen de lugares diferentes podrían explicarse por los 

mecanismo de intercambio de semillas que se efectúan entre los 

agricultores (trueques, ferias regionales y nacionales) referenciado 

en los informes del Proyecto in situ (INIA 2005a-e). 

Riqueza alélica 

La respuesta más probable para que las cinco regiones presenten 

valores similares de polimorfismo, además de presentar 

cantidades similares de alelos totales, de alelos exclusivos y 

de no formar grupos homogéneos, probablemente se deba a 

la selección realizada por los agricultores (realizado desde los 

220 



primeros pobladores andinos) que tienden a conservar diversos 

cultivares de papa; pero que entre todas ellas comparten las mismas 

características de utilidad comercial y de consumo (sabor, 

tamaño, productividad, etc.) que hace que prevalezca un pool 

de genes específico, además no todos los agricultores mantienen 

las mismas variedades, pero sí todas ellas se encuentran dentro 

de un solo pool de genes utilitarios. 

En el caso de Ayacucho, el tener un mayor número de 

muestras no significó encontrar un mayor número de alelos. 

Por lo que se puede afirmar que conservar el mayor número de 

variedades en una región no necesariamente significará conservar 

la mayor cantidad de variación genética, ya que la diversidad 

genética dentro de una especie no se distribuye homogéneamente 

a través de los ambientes donde se desarrolla (Hodgkin 1995). 

Por otro lado, casi la mitad de alelos caracterizados son comunes 

para las 5 regiones de colecta, lo que indicaría que estos 

alelos son fijos para las especies de papa nativa y se encuentran 

ampliamente distribuidas en la zona andina del Perú. 

Diversidad genética de las especies evaluadas 

Los valores de diversidad genética encontrados para las especies 

analizadas (S. tuberosum subsp. andigena y S. x chaucha) son altos 

y reafirman el alto grado de diversidad genética mantenido en la 

población muestreada. En promedio el valor de diversidad genética 

es más alto en S. tuberosum subsp. andigena (0.74) en comparación 

con el valor obtenido para S. x chaucha (0.70), probablemente esto 

se deba a un menor número de muestras analizadas por parte de la 

especie triploide, pero tampoco podemos descartar la naturaleza 

genética de la misma especie y sus diferencias de ploidía como 

responsables del grado de diversidad. 

Los resultados nos indican que los microsatélites evaluados 

para papa nativa logran identificar altos niveles de diversidad 

genética dado por los valores de polimorfismo (PIC = 0.55 – 

0.85) y los índices de diversidad genética obtenidos, pero a la 

vez no son suficientes para discriminar grupos diferenciados por 

procedencia y/o especies. 

Asimismo, el análisis de agrupamiento, la riqueza alélica y 

los valores de diversidad genética obtenidos indican que existe 

un alto grado de diversidad genética y corrobora los resultados 

obtenidos de los inventarios y caracterizaciones morfológicas 

realizadas en las chacras de los agricultores; también podemos 

concluir que debido a los niveles similares de riqueza alélica, de 

alelos exclusivos y el gran porcentaje de alelos compartidos para 

las cinco regiones de colecta, existiría un pool de genes común 

y fijo para las especies de papa nativa y que se encontrarían 

ampliamente distribuidos entre las chacras de los campesinos. 


El presente trabajo ha sido realizado en el Instituto Nacional 

de Investigación Agraria – INIA de la Dirección de Investigación 

Agraria – DIA en la Sub dirección de Recursos Genéticos y 

Biotecnología – SUDIRGEB, en el Centro Experimental La 

Molina - Lima, dentro del marco del Proyecto “Conservación 

in situ de los cultivos nativos y sus parientes silvestres”, con el 

apoyo financiero del Fondo Mundial para el Medio Ambiente 

– FMAM, la Cooperación Italiana y el Gobierno Peruano. Los 

autores agradecen la colaboración del Centro Internacional de la 

Papa por permitirnos usar los programas informáticos necesarios 

para este trabajo. 


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222 



Efecto del “Chuchuhuasi” Maytenus macrocarpa en el sistema reproductor masculino del ratón 



Efecto de Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” en el sistema reproductor masculino 

del ratón (Mus musculus) 

Effect of Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” in the male system reproductive of mouse 

(Mus musculus) 

Láyonal G. Acosta 1,2 *, Jonathan Vásquez 1 , Víctor Núñez 1 , José Pino 1 , Betty Shiga 1 

1 Laboratorio de Reproducción y Biología del Desarrollo, 

Instituto de Investigación de Ciencias Biológicas Antonio 

Raimondi, Facultad de Ciencias Biológicas Universidad 

Nacional Mayor de San Marcos (UNMSM). Lima – Perú 

2 BIOGENETIC LAB SAC. Chiclayo – Perú. 

Autor para correspondencia: 

Biólogo Genetista. Láyonal Germán Acosta Campos. 

BIOGENETIC LAB SAC. Chiclayo – Perú. Laboratorio 

de Reproducción y Biología del Desarrollo, Facultad de 

Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San 

Marcos, Lima, Perú. Casilla 11-058, Lima 11, Perú. Tel.: +51 

6 197000 – 1529; fax: +51 6 197000 – 1509. 

Email Láyonal Acosta: acostaclg@gmail.com 

Citación: 

Acosta L.G., J. Vásquez, V. Núñez., J. Pino, B. Shiga. 

2014. Efecto de Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” en 

el sistema reproductor masculino del ratón (Mus musculus). 


Resumen 

Maytenus macrocarpa (Chuchuhuasi) es un árbol nativo de la región Amazónica del Perú 

utilizado como planta medicinal para el tratamiento de muchas enfermedades, sin embargo 

su efecto sobre el sistema reproductor masculino aún no ha sido elucidado. El objetivo del 

presente estudio fue evaluar el efecto del extracto acuoso de M. macrocarpa en dosis diarias 

durante 7 días sobre los parámetros reproductivos de ratones machos. Se utilizó machos 

maduros de la cepa C57BL divididos en 2 grupos (n=10), Grupo Control (C): NaCl 0.9% y 

Grupo Tratamiento (T): Extracto acuoso de Chuchuhuasi, ambos suministrado diariamente 

vía sonda esofágica y al octavo día fueron eutanizados. Se registraron el peso corporal y de 

los órganos reproductivos: testículo, epidídimo y conducto deferente, se evaluaron la concentración, 

movilidad y morfología espermática. En nuestros datos observamos diferencias 

significativas (Prueba t- Student P=0.05) en el peso de la cabeza y cuerpo del epidídimo (C: 

19.25±1.1 vs T: 21.26±2.0), el peso del conducto deferente (C: 10.62±0.7 vs T: 11.75±0.5), 

movilidad espermática progresiva (C: 42.16±5.2 vs T: 25.82±8.4) e Inmóviles (C: 36.05±4.9 

vs T: 48.51±7.2). No se observaron diferencias en el recuento espermático entre ambos grupos. 

La morfología espermática normal disminuyó con la ingesta de M. macrocarpa (Prueba 

t-Student p

Acosta et al. 

Sin embargo, algunas plantas pueden afectar negativamente 

distintas funciones fisiológicas normales, entre ellas la función 

reproductiva masculina, cuyos efectos adversos han sido atribuidos 

principalmente a propiedades antiespermatogénicas y 

antiesteroidogénicas de uno o más compuestos activos (Lohiya 

et al. 2002, Ashok & Meenakshi 2004, Gupta et al. 2004). En 

el Perú, aproximadamente 1400 especies de plantas son utilizadas 

con fines medicinales, cuyo uso popular se conoce desde 

épocas prehispánicas. 

Los extractos de las plantas de la familia Celastráceas han sido 

utilizados por siglos como insecticidas y para el tratamiento de 

complicaciones estomacales, fiebre, reumatismo y cáncer (Mejía 

& Reng 1995). El género Maytenus es el más abundante e importante 

de la familia Celastráceas (Santos et al. 2007). 

Se ha demostrado la actividad biológica de varias especies 

de Maytenus: M. ilicifolia como anticonceptivo, antiinflamatorio 

y antioxidante (Jorge et al. 2004, Vellosa et al. 2006); 

M. krukovii presenta actividad antioxidante, antimutagénica y 

antimicrobiana (Bruni et al. 2006); M. aquifolium, propiedades 

analgésicas (Gonzalez et al. 2001); M. senegalensis posee actividad 

antibacteriana, antiviral, antitumoral (Gessler et al. 1995, Otake 

et al. 1995, Matu & Van Staden 2003) y M. macrocarpa actúa 

como citotóxico de células cancerígenas (Chavez et al. 2010) y 

antimicrobiano (Kloucek et al. 2007). 

El género Maytenus contiene compuestos activos como los 

maitansinoides que ejercen actividad insecticida (Madrigal et al. 

1985), triterpenoquinonas y dímeros triterpénicos con actividad 

antimicrobiana (González et al. 1996a) y nortriterpeno metilénquinonas 

con funciones antimicrobianas (González et al. 1996b). 

Existe poca información de los efectos de las plantas de 

Maytenus sobre el sistema reproductor de mamíferos. Montanari 

et al. (1998) proporcionaron dosis diarias de 800 mg/kg 

peso corporal (pc) de M. ilicifolia a ratones machos por 20 días 

y no encontraron efecto alguno sobre la espermatogénesis, sin 

embargo Montanari y Bevilacqua (2002) en dosis diarias de 

1000 mg/kg pc concluyeron que interfiere con la implantación 

embrionaria en ratones. 

Maytenus macrocarpa (Chuchuhuasi) es una planta nativa de 

la región Amazónica del Perú, y es usado como planta medicinal 

desde la época del antiguo Perú. Previos estudios han reportado 

el aislamiento de triterpenos dammarane y triterpenos friedelane 

a partir de la corteza del tallo (Chavez et al. 1997, Chávez 

et al. 1998), poliésteres sesquiterpénicos de las hojas (Chavez 

et al. 1999) y nortriterpenos macrocarpines A-D de las raíces 

de M. macrocarpa (Chavez et al. 2000). Su corteza es utilizada 

generalmente como aguardiente para el tratamiento de reumatismo, 

influenza, enfermedades gastrointestinales y como agente 

antitumoral (Dhingra et al. 2000), sin embargo su efecto sobre 

el sistema reproductor masculino aún no ha sido elucidado. 

El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de la 

ingesta de extracto acuoso de M. macrocarpa (1000 mg/kg pc) 

durante 7 días sobre los parámetros reproductivos de ratones 

machos. 

Material y métodos 

Animales y condiciones éticas.- Los experimentos se llevaron 

a cabo con ratones (Mus musculus) machos (n= 20) de 8 

a 10 semanas de edad de la cepa C57BL. Los animales fueron 

adquiridos en el Bioterio de la Universidad Peruana Cayetano 

Heredia (UPCH), Lima, Perú y aclimatados durante una 

semana previa a los ensayos en el Bioterio de la Facultad de 

Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Mayor de San 

Marcos (UNMSM), Lima, Perú, siguiendo lo indicado en la 

Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio: ratón 

del Instituto Nacional de Salud (Fuentes 2008). 

Los animales fueron mantenidos bajo condiciones estándar 

de bioterio con clima controlado (23±5 ºC, 90±5% humedad) 

fotoperiodo de 14 h luz: 10 h oscuridad, alimentados con dieta 

balanceada para animales (Bedoce) y agua ad libitum un total 

de 15 días mientras duró la aclimatación y los ensayos. 

Los animales fueron eutanizados por dislocación cervical 

siguiendo los lineamientos del Consejo Nacional de Investigación 

para el cuidado y uso de animales de laboratorio (NRC, 

1996). 

Extracto acuoso.- Maytenus macrocarpa fue obtenido de 

PromoAgro Export CC (Lima, Perú; voucher botánico Co-V- 

060-013). El extracto acuoso fue preparado del material seco y 

pulverizado de la corteza. Cien gramos de M. macrocarpa fue 

hervido por 30 minutos en un litro de agua y se dejo enfriar 

durante toda la noche a temperatura ambiente. Al siguiente día 

el sobrenadante fue filtrado dos veces usando papel filtro estéril 

Whatman (40 µm y 20 µm, respectivamente). El extracto resultante 

fue alicuotado en microtubos de 1.5 mL y almacenados 

a 4 °C hasta su uso. 

Diseño experimental.- Los ratones fueron divididos en dos 

grupos; el grupo Tratamiento (T) (n= 10), se le administró el 

extracto acuoso de M. macrocarpa (1000 mg/kg pc) y al grupo 

control (C) (n= 10) solución salina NaCl 0.9%. Al inicio del 

tratamiento se registro su peso corporal. El extracto acuoso de M. 

macrocarpa y la solución salina fueron administrados usando una 

sonda esofágica N°18 (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA, USA). 

Al octavo día después del tratamiento se registró el peso corporal 

final y los animales fueron eutanizados por dislocación cervical. 

Se pesaron: testículos, epidídimos y conductos deferentes. 

Se obtuvieron espermatozoides de la cola del epidídimo para 

registrar la movilidad, concentración y morfología espermática. 

Obtención de epidídimos y espermatozoides.- Cada uno 

de los epidídimos obtenidos fueron lavados con buffer fosfato 

salino (PBS pH 7.4) a 37 °C, se realizaron varios cortes en la 

cola del epidídimo y luego los espermatozoides se liberaron 

permaneciendo durante 10 minutos en 0.5 mL de medio de 

cultivo Flushing (MediCult®, Copenhagen, Dinamarca), el 

contenido espermático se recuperó en su totalidad en tubos de 

polipropileno de 1.5 mL (Axygen Scientific). 

Evaluación de la movilidad espermática.- Muestra espermática 

fue colocada sobre una lámina portaobjetos a 37 °C y 

observada a 400X en un microscopio óptico de contraste de fases 

(Carl Zeiss Jena). Este procedimiento fue repetido dos veces, los 

resultados presentados son el promedio de ambas evaluaciones, 

contabilizándose al menos 100 espermatozoides. Se consideró 

que un espermatozoide presentaba Movilidad Progresiva (MP), 

cuando presentaba desplazamiento, Movilidad No Progresiva 

(MNP) a aquellos que no se desplazaban y sólo tenían un movimiento 

in situ e Inmóviles (IM) los que no presentaban ningún 

tipo de movimiento (WHO, 2010). 

224 


Efecto del “Chuchuhuasi” Maytenus macrocarpa en el sistema reproductor masculino del ratón 

Tabla 1. Efecto del extracto acuoso del “Chuchuhuasi” Maytenus macrocarpa sobre el peso corporal, peso de testículo, epidídimo y conducto 

deferente entre el grupo Control (C) y Tratamiento (T). Los valores son expresados como media ± DS. C=Control peso corporal, T=Tratamiento 

peso corporal. 

Control (NaCl 0.9%) Chuchuhuasi (1000mg/kg pc) P 

Ratones analizados (n) 10 10 

Peso corporal inicial (g) 21.40±0.5 27.30±1.6 C=0.020 

Peso corporal final (g) 23.35±1.2 26.62±1.9 T=0.248 

Peso testículo (mg) 72.99±5.5 78.02±8.2 0.118 

Peso de cabeza + cuerpo del epidídimo (mg) 19.25±1.1 21.26±2.0 0.034 

Peso de la cola del epidídimo (mg) 143.1±2.2 143.3±1.7 0.980 

Peso del conducto deferente (mg) 10.62±0.7 11.75±0.5 0.003 

Medición de la concentración espermática.- La concentración 

espermática se midió usando una dilución 1:20, 10 

µL de la muestra se diluyó con 190 µL solución de fijación 

(WHO, 2010) posteriormente se colocó 10 µL de la dilución 

en la cámara de Neubauer, y se contaron los espermatozoides 

dentro de los campos definidos en la cámara, mediante el uso de 

un microscopio óptico de contraste de fases 400X, la cantidad 

de espermatozoides observados se multiplicó por el factor correspondiente 

(10 6 ). La concentración de espermatozoides fue 

expresada en millones/mL. 

Evaluación de la morfología espermática.- Los espermatozoides 

fueron expandidos mediante un frotis sobre láminas 

portaobjetos, se dejó secar a temperatura ambiente, se fijaron con 

paraformaldehído por 20 minutos y se colorearon con Eosina-Y 

al 5%. Se analizaron 250 espermatozoides por espécimen bajo 

un microscopio óptico (Carl Zeiss Jena, Amplival) de campo 

claro con objetivo de inmersión (1000X). Se consideró como 

anormal, aquel espermatozoide que presentaba alteraciones 

morfológicas en cabeza, pieza intermedia, cola o en presencia de 

más de una alteración. Espermatozoides con gota citoplasmática 

fueron considerados inmaduros. 

Análisis estadísticos.- Los análisis estadísticos fueron realizados 

con el programa SPSS v21 para Windows. Los datos 

cumplieron las premisas de normalidad y homogeneidad de 

varianza (Prueba de Levene) por lo cual todos los resultados se 

analizaron mediante la prueba de T-student. El nivel de significancia 

establecido fue P< 0.05. 

Resultados 

Peso corporal y órganos reproductivos.- En el grupo control 

se observó diferencias significativas en el peso corporal inicial y 

final (P= 0.020). Así mismo se observó diferencias significativas 

entre el grupo control y tratamiento en el peso de la cabeza y el 

cuerpo del epidídimo (P= 0.034) y el peso del conducto deferente 

(P= 0.003). Los resultados se resumen en la Tabla 1. 

Movilidad y concentración espermática.- No se observó 

diferencias significativas en la concentración espermática entre 

ambos grupos (Tabla 2). Respecto a la movilidad espermática 

se observa diferencias significativas (P

Acosta et al. 

Morfología.- Las evaluaciones morfológicas mostraron diferencias 

significativas (prueba t-student, P

Rev. peru. biol. 20(3): 227 - 232 (Marzo 2014) Efecto ahorrativo de la proteína con niveles altos de energía en dietas para Oreochromis niloticus 



Efecto ahorrativo de la proteína usando niveles altos de energía y obtención de la relación optima 

energía digestible/proteína digestible en dietas para el crecimiento de Oreochromis niloticus (L) 

Protein-sparing effect with high energy levels and obtaining the optimum digestible energy/ 

digestible protein ratio in growth diets to Oreochromis niloticus (L.) 

Felix Walter Gutierrez 1, 2 , Máximo Quispe 1 , Luz Valenzuela 1 

1 Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional 

Mayor de San Marcos. 

2 Dirección para correspondencia: 10642 Mallard DR. 

Garden Grove, CA 92843, USA. 

Felix Gutierrez. E mail: gutierrez_romero@sbcglobal.net 

Máximo Quispe Chau. E mail: mquispe@alicorp.com.ec 

Luz Valenzuela. E mail: luzmvalenzuela@yahoo.com 

Citación: 

Gutierrez F.W., M. Quispe, L. Valenzuela. 2014. Efecto 

ahorrativo de la proteína con niveles altos de energía y 

obtención de la relación optima energía digestible/proteína 

digestible en dietas para el crecimiento de Oreochromis niloticus 

(L.). Rev. peru. biol. 20(3): 227 - 232 (Marzo 2014) 

Resumen 

Se evaluó el efecto ahorrativo de la proteína usando dietas altas en energía. Se utilizó un 

diseño factorial para medir la interacción de dos niveles de proteína (30% y 35%) y dos niveles 

de energía digestible (3.3 y 3.7 kcal/g de alimento) sobre la ganancia (GP), conversión alimenticia 

(CA), proteína retenida (PR), energía retenida (ER) y la relación de eficiencia proteica 

(REP) en la tilapia del Nilo todos machos (Oreochromis niloticus). En la composición de las 

dietas se emplearon harina de anchoveta y harina de torta de soya como fuentes de proteína 

y maíz amarillo duro y subproducto de trigo como fuentes de energía. El aceite de pescado 

fue añadido para ajustar los niveles de energía requeridos en las dietas experimentales. Se 

encontraron interacciones altamente significativas (P

Gutierrez et al. 

228 

Introducción 

En general los requerimientos de proteína para el crecimiento 

de tilapia del Nilo han sido establecidos en un rango de 30% y 

40%, dependiendo del tamaño de la especie, relación proteínaenergía 

y otras variables experimentales (Siddiki et al. 1988, 

Stickney 1997, Hafedh 1999). 

La proteína es uno de los más importantes nutrientes para 

el crecimiento de los peces, y a su vez es el componente más 

costoso de la dieta. Por dicha razón el nivel óptimo de proteína 

en las dietas para peces ha sido muy bien estudiado. También el 

nivel de energía en las dietas es crítico para el crecimiento de los 

peces debido a que niveles altos de energía en las dietas reduce 

el consumo de alimento y puede resultar en un crecimiento 

pobre debido a la falta de los nutrientes necesarios. Por otro 

lado, niveles bajos de energía pueden causar que la proteína sea 

usada para satisfacer los requerimientos de energía, importantes 

para el metabolismo basal de los peces, en lugar de ser utilizada 

para el crecimiento. Por lo tanto, el nivel de energía y proteína 

en la dieta debe estar en balance para optimizar la producción 

piscícola. 

Se conoce del uso de dietas bajas en proteínas y altas en energía 

para mejorar la producción de peces (Helland & Grisdale-Helland 

1998, Company et al. 1999; Harpaz et al. 1999, McGoogan 

& Gatlin 1999), también, Watanabe et al. (1987) afirmaron que 

otro beneficio de dietas bajas en proteína y altas en energía es 

la disminución de los desechos nitrogenados que provienen del 

metabolismo de los peces. Sin embargo, otros investigadores 

han reportado efectos no deseables sobre el rendimiento de los 

peces cuando usaron dietas con altos niveles de energía (Davis 

& Arnold 1997, Jover et al. 1999). Estos resultados, probablemente 

se debieron a la disponibilidad de la energía o porque los 

requerimientos para los peces son variables, dependiendo de la 

especie de pez (NRC 1993), contenido de proteína o calidad del 

alimento (Hillestad & Johnsen 1994, Jover et al. 1999, Vergara 

et al. 1999), frecuencia alimenticia (Xie et al. 1997) y tamaño 

del pez (Mangalik 1986). 

No existen muchos estudios acerca de los requerimientos 

de energía dietaría en tilapia. Yong et al. (1989) recomienda 

niveles de energía de 4.0 kcal/g y entre 28 – 30% de proteína 

para juveniles de tilapia. Wang et al. (1985), encontraron un 

crecimiento máximo en juveniles de tilapia del Nilo (Oreochromis 

niloticus) alimentadas con una dieta de 25% de proteína y una 

relación energía/proteína de 14 a 15 kcal/g. Santiago y Laron 

(1991) estudiaron el efecto de cuatro niveles de proteína y cuatro 

niveles de energía digestible sobre el rendimiento de la tilapia 

roja. Encontraron que el mayor rendimiento se obtuvo con 40% 

de proteína y una relación optima de 111 mg de proteína/kcal. 

Cualquiera que sea el método usado para hallar el requerimiento 

óptimo de energía tilapia del nilo se concluye que utiliza mejor la 

energía y la proteína provenientes de insumos de origen animal 

(Hanley 1991). 

El propósito del presente estudio fue analizar el efecto ahorrativo 

de la proteína dietaría, usando dietas con altos niveles de 

energía y obtener la relación optima energía/proteína que exprese 

el mayor efecto sobre el rendimiento productivo de “tilapia del 

nilo todos machos” O. niloticus. 


El experimento se ejecutó en el Laboratorio Húmedo de 

Huachipa bajo el Conveniio IMARPE-Facultad de Ciencias 

Biológicas-Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 

Se utilizaron doce acuarios de vidrio de 50 litros de capacidad. 

La densidad de carga fue de cinco peces por acuario, con 

pesos promedios de 25.33±1.29 g. Siete días antes del inicio del 

experimento los peces fueron acostumbrados al alimento seco y 

peletizado a través de la ingestion de una dieta alta en proteína y 

fortificada con vitaminas y minerales. Los peces se trataron con 

verde de malaquita y oxitetraciclina a fin de evitar la presencia del 

hongo Ichthyopthirius y bacterias patógenas. Asimismo, después 

de cada muestreo se empleó una solución de violeta de genciana 

o azul de metileno diluido en el agua para evitar ataques bacterianos 

y fúngicos. Los acuarios se alimentaron con agua de la 

napa freática almacenada en un tanque elevado de veinte metros 

cúbicos de capacidad. La dureza del agua fue mantenida a una 

concentración de 21.90±0.21 mg/L, considerada como óptima 

para la tilapia del Nilo. Los acuarios se equiparon con aireadores 

y termostatos por lo que factores como la temperatura, el oxígeno 

disuelto y el pH fueron muy estables. La temperatura promedio 

fue de 27.50±0.21 °C, el oxígeno disuelto de 6.83±0.10 mg/L 

y el pH de 8.42±0.04. 

La limpieza diaria de los desechos orgánicos del fondo de 

los acuarios y el recambio diario del agua ayudaron a mantener 

las condiciones ambientales adecuadas para la realización del 

experimento. 

Las dietas fueron formuladas por programación lineal (Programa 

LP88) para representar dos niveles de proteína (30% y 

35%) y dos niveles de energía digestible (3.0 kcal/g y 3.3 kcal/g) 

por cada nivel de proteína. En la preparación de las dietas experimentales 

se utilizaron los insumos alimenticios harina de anchoveta, 

harina de torta de soya, maíz amarillo duro, subproducto 

de trigo, aceite hidrogenado de pescado y los aditivos premezcla 

de vitaminas y minerales, BHT, ácido propiónico y bentonita 

como ligante. La energía digestible de las dietas fue calculada 

a partir de los valores calóricos de 3.5 kcal/g, 8.1 kcal/g y 2.5 

kcal/g para proteína, lípidos y carbohidratos respectivamente 

(Wilson 1977). Los cálculos de las concentraciones de lisina, 

metionina, metionina+cistina, calcio y fósforo disponible se 

hicieron de acuerdo a la NRC (2011), tomando en cuenta los 

requerimientos para esta especie (Stickney 1997). El análisis 

químico proximal (AOAC 1990) se realizó para determinar 

los contenidos de humedad, proteína, lípidos, fibra, ceniza y 

extracto libre de nitrógeno (ELN) en los insumos alimenticios, 

en las dietas experimentales. Los insumos y la composición porcentual 

de las dietas experimentales se observan en la Tabla 1. El 

contenido de nutrientes se muestran en la Tabla 2 y el análisis 

proximal de las dietas experimentales se observan en la Tabla 3. 

La composición química de la carcasa (proteína, lípidos, cenizas 

y humedad) expresadas en base húmeda se determinó al inicio 

y al final del experimento sobre la base de una muestra total de 

6 peces por tratamiento (AOAC 1990). 

Los datos sirvieron para calcular la energía retenida y la 

proteína retenida. El comportamiento productivo de la tilapia 

del Nilo se evaluó a través de la ganancia de peso (Hopkins 

1992), conversión alimenticia, proteína retenida, energía retenida 

(Reinitz & Hitzel 1980) y la razón de eficiencia proteica 

(Hepher 1993). El alimento fue ofrecido ad-libitum, dos veces 

al día (08:00 y 16:00 horas). La duración del experimento fue 

de 45 días. Se empleó un diseño factorial de 2 x 2, con cuatro 


Efecto ahorrativo de la proteína con niveles altos de energía en dietas para Oreochromis niloticus 

Tabla 1. Insumos y composición porcentual de las cuatro dietas experimentales utilizadas para evaluar el crecimiento de tilapia del Nilo todos 

machos (Oreochromis niloticus). 

Dietas experimentales 

Insumos 1 2 3 4 

Harina de Pescado 25.00 27.00 25.00 25.00 

Harina de soya 23.00 21.00 36.90 37.90 

Harina de maíz 44.00 40.00 30.00 27.00 

Subproducto de trigo 2.99 0.99 4.00 1.18 

Aceite compuesto 1.00 7.00 ----- 5.00 

Vitaminas/minerales 1 1.00 1.00 1.00 1.00 

Bentonita 3.00 3.00 3.00 3.00 

BHT 0.01 0.01 0.01 0.01 

1 

Vitaminas (en UI o mg/kg de dietas): A, 5500 UI; D3, 1000 UI; E, 50 UI; K, 10; Colina, 550; Niacina, 100; Riboflavina, 20; Tiamina, 20; D-Pantetonato de 

Calciio, 50; Biotina, 0.10; Folacina, 5; B12, 20; Acido Ascórbico, 200; Inositol,100. Minerales ( en % o mg/kg de dieta): Manganeso, 115; Yodo, 2.80; Cobre, 4.30; 

Zinc, 88; Fierro,44; Cobalto, 0.05; Calcio, 90 %, Fósforo Disponible, 0.45%. 

Tabla 2. Contenido de nutrientes en porcentajes de las cuatro dietas experimentales utilizadas para evaluar el crecimiento de tilapia del Nilo 

todos machos (Oreochromis niloticus). 


Nutrientes 1 2 3 4 

Lisina 1 2.04 1.98 2.41 2.42 

Metionina 1 0.71 0.73 0.79 0.77 

Metionina + Cistina 1 1.11 1.12 1.27 1.24 

Calcio 1 0.95 1.02 0.96 0.97 

Fósforo Disponible 1 0.25 0.30 0.24 0.29 

Energía Bruta (kcal/g) 1 4.01 4.29 4.00 4.24 

Energía Digestible (kcal/g) 1 3.32 3.68 3.34 3.66 

Proteína Cruda (%) 1 30.65 30.44 35.72 35.49 

Proteína Digestible (%) 1 26.76 26.77 31.25 31.22 

Relación ED/PD(kcal/g proteína) 1 12.41 13.75 10.69 11.72 

1 

Los nutrientes y la energía fueron calculados a partir de los valores publicados por el Consejo Nacional de Investigación-USA (NRC 2011). 

Tabla 3. Análisis Proximal (%) de las cuatro dietas experimentales utilizadas para evaluar el crecimiento de la tilapia del Nilo todos machos 

(Oreochromis nmiloticus). 


Parámetros 1 2 3 4 

Humedad 14.89 14.48 14.37 10.82 

Proteína 30.65 30.44 35.72 35.49 

Lípidos 4.21 9.76 3.69 7.71 

Fibra 3.24 2.82 4.03 3.75 

Caniza 5.75 5.76 6.34 6.38 

ELN 1 41.26 36.74 35.85 35.85 

1 

Extracto Libre de Nitrógeno 

tratamientos y tres repeticiones por tratamiento. Los valores 

obtenidos fueron sometidos al análisis de variancia y las diferencias 

entre promedios se determinaron con la prueba de Tuckey, 

empleando el paquete estadístico Statigraphics version 5.1. 

Resultados y discusion 

Se encontraron interacciones altamente significativas 

(P


Tabla 4. Ganancia de peso, conversión alimenticia, proteína retenida, energía retenida y relación de eficiencia proteica de alevinos de tilapia 

del Nilo todos machos (Oreochromis niloticus) alimentados durante 45 días con cuatro dietas experimentales que representaron dos niveles 

de proteína (30 y 35%) y dos niveles de energía digestible (3.3 y 3.7 kcal/g) por cada nivel de proteína. 

30% 35% 

Parámetros 3.3 3.7 3.3 3.7 

PF 1 38.44±1.17 a 48.57±0.06 b 49.09±0.49 b 48.04±1.23 b 

GP 2 51.02±2.04 a 97.73±1.91 b 103.01±0.79 b 90.47±1.38 b 

CA 3 3.3±0.72 a 1.83±0.22 b 1.85±0.03 b 2.00±0.28 b 

PR 4 22.27±4.62 a 34.60±1.96 b 25.54±1.11 b 28.07±0.68 b 

ER 5 14.98±2.99 a 20.83±3.62 b 18.19±1.58 b 19.88±0.79 b 

REP 6 1.04±0.24 a 1.77±0.23 b 1.54±0.05 c 1.40±0.11 c 

a, b, c: 

Letras diferentes dentro filas indican diferencias significativas ( p

Efecto ahorrativo de la proteína con niveles altos de energía en dietas para Oreochromis niloticus 

estadísticamente igual para ambos niveles energéticos (18.19 y 

19.88% respectivamente). Estos resultados permiten establecer 

que la dieta con 30% de proteína y 3.7 kcal/g fue la de mejor 

performance en términos de ER y ahorro proteico. Lo encontrado, 

se explica porque los peces tropicales no solo tienen mejor 

capacidad para la retención de energía proteica, sino también 

son hábiles para la mejor utilización de la energía no proteica, 

ahorrando la proteína para propósito de síntesis de tejidos 

(Lucket & Moreau 1989). La alta energía dietaría de la dieta y la 

adecuada relación ED/PD (13.75 kcal/g de proteína), posibilitó 

una mayor incorporación de insumos energéticos (maíz amarillo 

duro, sub producto de trigo y aceite de pescado) como fuentes 

de energía, ahorrando la proteína para el crecimiento (Kaushik 

& Cowey 1991, Kaushik & Médale 1994, Médale et al. 1995). 

En las dietas con 30% de proteína la relación de eficiencia 

proteica (REP) fue afectada significativamente por los niveles 

de energía, alcanzando el valor más alto con el nivel de 3.7 

kcal/g (Tabla 4). En las dietas con 35% de proteína, los niveles 

de energía dietaría no influenciaron significativamente la REP, 

siendo los valores estadísticamente iguales (Tabla 4). Los valores 

de la REP obtenidos en este estudio son similares a los valores 

reportados por Webster et al. (1992b). La literatura indica que el 

máximo crecimiento de tilapia híbrida se obtuvo con una dieta 

de 24% de proteína y una REP de 2.99 (Shiau & Huang 1989, 

1990). Asimismo con dietas de 20% de proteína en tilapia roja 

se obtuvo una REP de 2.41, lográndose una mejor eficiencia 

de utilización de la proteína, al compararse con dietas de mayor 

nivel de proteína (Clark et al. 1990). Datos similares han sido 

obtenidos en otros estudios con la carpa cabezona Aristichthys 

nobilis (Santiago & Reyes 1991) y en otras especies de tilapia 

(Teshima et al. 1978, Mazid et al. 1979, Jauncey 1982, Teshima 

et al. 1985, Siddiki et al. 1988). No obstante El-Sayed y 

Teshima (1992) encontráron para la tilapia del Nilo el mejor 

valor de la REP con una dieta de 45% de proteína y 3.0 kcal 

de energía bruta/g. 

En los estudios sobre tilapia, la literatura muestra un amplio 

rango de variación en relación a la concentración de proteína 

dietaría, fluctuando entre 20 y 45%. Los resultados encontrados 

en el presente estudio indican que el incremento del 

nivel de energía digestible independiente del nivel de proteína 

dietaría usado, mejoró significativamente la ganancia de peso, 

conversión alimenticia, proteína retenida, energía retenida y la 

eficiencia proteica; por lo que se puede concluir, considerando 

las condiciones del experimento y el costo de la proteína, que la 

mejor respuesta animal se puede obtener con la dieta de 30% de 

proteína, 3.7 kcal/g de energía digestible y la relación óptima energía 

digestible/proteína digestible de 13.75 kcal/g de proteína. 


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232 



Desarrollo reproductivo de Krapfia weberbaueri 



Desarrollo reproductivo de Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) en condiciones 

controladas de luz y temperatura 

Reproductive development of Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) under controlled conditions 

of light and temperature 

Beatriz Roca 1,2 , Mery Suni 1,3 , Asunción Cano 2,3 

1 Laboratorio de Fisiología Vegetal. Facultad de Ciencias 

Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 

Dirección Postal 11-0058. Lima 11, Perú 

2 Laboratorio de Florística, Departamento de Dicotiledóneas, 

Museo de Historia Natural, Universidad Nacional 

Mayor de San Marcos. 

3 Instituto de Investigación de Ciencias Biológicas Antonio 

Raimondi (ICBAR), Facultad de Ciencias Biológicas, 

UNMSM. 

Email Beatriz Roca: beatrizrocaramos@yahoo.com 

Email Mery Suni: msunin@gmail.com 

Email Asunción Cano: ashuco@yahoo.com 

Citación: 

Roca B., M. Suni, A. Cano. 2014. Desarrollo reproductivo 

de Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) en condiciones 

controladas de luz y temperatura. Rev. peru. biol. 20(3): 

233 - 240 (Marzo 2014) 

Resumen 

Krapfia weberbaueri Standl. & J. F. Macbr. es una especie endémica del Perú, categorizada 

como vulnerable y distribuida en los departamentos de Ancash, Huánuco, Junín y San Martín. 

El presente trabajo reporta las observaciones sobre el desarrollo reproductivo de esta especie 

bajo condiciones controladas de luz y temperatura (12 horas de luz/12 horas de oscuridad y 

12 °C día y 8 °C noche). Plantas completas en estado reproductivo fueron recolectadas en 

la Cordillera Blanca (Ancash) donde forma parches entre los 4200 y 4800 m de altitud. Los 

datos morfométricos de los órganos florales fueron registrados cada dos o tres días con un 

vernier y se evaluó la producción de néctar a lo largo del desarrollo de la flor. Asimismo se 

evaluó la viabilidad de los granos de polen y la receptividad del estigma. Krapfia weberbaueri 

tiene flores muy llamativas de 24 a 47 mm de longitud, que desde la antesis hasta el inicio de 

senescencia se mantienen receptivas aunque en mayor medida en la flor madura, etapa en la 

cual la dehiscencia de estambres y liberación de los granos de polen alcanza el 100%. Este 

periodo suma un total de 13 días. La producción del néctar se inicia en la flor madura y continua 

hasta la senescencia total de los pétalos. La viabilidad de los granos de polen varió de 78 a 

97% y el éxito de producción de aquenios fue 38 a 62%. Se puede señalar que la polinización 

es favorecida por la posición final de las anteras sobre los estigmas, producción del néctar, 

moderada presencia y desplazamiento de ácaros y áfidos y la posición pendular de la flor. 

Palabras clave: Perú; Ancash; floración; ginóforo; néctar. 

Abstract 

Krapfia weberbaueri Standl. & J. F. Macbr. is an endemic species from Peru, categorized as 

vulnerable, and distributed in the departments of Ancash, Huanuco, Junin and San Martin. 

This work reports the reproductive development of the species under controlled conditions 

of light and temperature (12 hours light/12 hours darkness, 12 °C during light hrs and 8 °C 

during dark hrs). Entire plants at reproductive stage were collected at Cordillera Blanca (Ancash), 

where it is found forming patches, at an elevation of 4200 to 4800 m. The species has 

large and showy flowers, which from anthesis to the onset of senescence remain responsive, 

however at a greater extent in the mature flower, stage at which the dehiscence of stamens 

and release of pollen grains reaches 100%. This period lasts a total of 13 days. Nectar production 

begins when the flower matures and continues until the total senescence of petals. 

The viability of the pollen grains varied from 78 to 97% and success in achene production 

was 38-62%. It may be noted that pollination is favored by the final position of anthers over 

the stigmas, nectar production, moderate presence and movement of mites and aphids, and 

the pendulous position of the flower. 

Keywords: Peru; Ancash; flowering; gynophore; nectar. 


Aceptado: 18/12/2013 







233

Roca et al. 

234 

Introducción 

La familia Ranunculaceae está representada por alrededor de 

50 géneros y más de 2000 especies, con amplia distribución, 

desde hierbas perennes o anuales, terrestres, acuáticas o semiacuáticas 

(Tamura 1993). En el Perú, la familia Ranunculaceae 

está representada por ocho géneros y 50 especies (Brako & 

Zarucchi 1993; Ulloa et al. 2004), en su mayoría hierbas. Uno 

de los géneros presentes en el Perú y endémico de los Andes de 

Sudamérica es Krapfia DC, que se distribuye encima de los 3500 

m de altitud en Colombia, Ecuador, Perú y Bolivia (Lourteig 

1956). Actualmente se reconoce nueve especies para el género 

(Lourteig 1956, Tamura 1993). Las especies de este género presentes 

en el territorio peruano habitan principalmente laderas 

rocosas con fuerte pendiente de zonas húmedas. Se caracterizan 

por presentar flores globosas que no se abren por completo 

durante su desarrollo, sépalos persistentes generalmente rojizos 

externamente y un ginóforo bien desarrollado (Lourteig 1956, 

Tamura 1993). 

Krapfia weberbaueri Standl. & J. F. Macb. es una especie 

perenne, endémica del Perú y categorizada como vulnerable 

según los criterios de la UICN (León et al. 2007); se distribuye 

en los departamentos de Ancash, Huánuco, Junín y San Martin 

(Macbride 1937). Tiene flores grandes y muy llamativas, por lo 

que es utilizada como planta ornamental, así como también sus 

flores son usadas en medicina tradicional andina, por la creencia 

de que ellas propician el desarrollo del lenguaje en los niños que 

tienen dificultad en el habla; ambos motivos serían los causantes 

de una fuerte depredación por el hombre (información obtenida 

en las zonas de estudio). El presente trabajo describe el desarrollo 

y características florales de Krapfia weberbaueri, en base a 

observaciones en laboratorio bajo condiciones controladas de 

temperatura e iluminación, lo que permite conocer aspectos 

básicos de su biología y usados en su conservación. 

Figura 1. Puntos de muestreo de Krapfia weberbaueri. 1) cerca 

de la Laguna Librón (4800 m de altitud, 09º38.36'S, 077º38.36'W), 

2) cerca de la Laguna Atlante (4700 m de altitud, 09°15’12.19”S, 

077°26’24.068”W). 


Material biológico.- Se recolectaron plantas completas en estado 

reproductivo (con yemas florales que presentaban tonalidad 

rojiza) en el distrito de Chacas, provincia de Asunción (Ancash) 

en el flanco oriental de la Cordillera Blanca, en lo que se conoce 

como Callejón de Conchucos. La primera colecta se realizó en la 

zona de Huichganga, situado arriba de la laguna Librón a pocos 

kilómetros del nevado Copa, a 4800 m de altitud (13 de Agosto 

2008, tres plantas). La segunda y tercera colecta se realizaron en 

la misma zona cerca de la laguna Atlante (18 de mayo, cuatro 

plantas y el 29 de septiembre de 2009, once plantas Figura 1). 

Un total de 18 plantas con su respectivo sustrato fueron 

recolectadas y trasladadas en canastas hasta el Laboratorio de 

Fisiología Vegetal de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad 

Nacional Mayor de San Marcos, Lima, donde fueron 

colocadas en dos recipientes de 0.05 m 2 y dentro de una cámara 

climática (VISION VS-3DS) con fotoperiodo de 12/12 horas 

de luz/oscuridad y termoperíodo de 12/8 ºC día/noche (similar 

a las temperaturas registradas in situ al momento de la colecta). 

Cambios en el desarrollo floral.- Se realizaron observaciones 

y mediciones cada dos o tres días de todas las (18) flores en 

estudio, utilizando un vernier digital (0.01 mm). En cada fecha 

se determinaron: 

• Longitud de la flor (medido desde la base del perianto, 

sin contar el pedúnculo, hasta el extremo distal del 

perianto o del gineceo si esta sobresale). 

• Diámetro de apertura. 

• Momento de la producción de néctar. 

• Momento de la apertura de antera 

• Momento de la liberación de granos de polen. 

• La receptividad del estigma (entendida como la capacidad 

del estigma para sostener la germinación del polen) 

fue evaluada en todos los pistilos de cada flor en estadio 

de antesis, de flor abierta, flor madura y en inicio de 

senescencia usando peróxido de hidrógeno al 3% (método 

de Osborn et al. 1988). El peróxido de hidrógeno 

era aplicado sobre los estigmas de los pistilos con la 

ayuda de una pipeta Pasteur, iniciando con los ubicados 

en la base y terminando con los del ápice del gineceo; 

se evaluaba la intensidad de la reacción observando la 

formación de burbujas. 

• La fertilización efectiva se determinó por la relación 

entre los promedios del número de frutos por flor y el 

número de pistilos por flor. 

• La viabilidad de los granos de polen se evaluó por la 

tinción con orceína y carmín acético 1% (D'Ambrogio 

de Argüeso 1970), para esto se colectaron los granos 

de polen de las flores totalmente abiertas (flor madura) 

con dehiscencia y liberación de los granos de polen al 

cien por ciento, se colectó la mayor cantidad posible de 

granos de polen con la ayuda de un hisopo de algodón y 

fueron depositados en un vial de vidrio al que se agregó 

el colorante y se dejó por 24 horas en refrigeración. Se 

tomó una submuestra en una lámina porta objeto que 

contenía una gota de glicerina líquida al 50% y se procedió 

a la evaluación. Las lecturas se realizaron en más de 



Figura 2. Variabilidad del color de los pétalos de las flores de Krapfia weberbaueri, observadas en lugar de colecta. 

50 campos con la ayuda del microscopio óptico con un 

aumento de 400x, los granos de polen viables se tornan 

de una coloración rojiza y los no viables se mantienen 

de un color amarillo, adicionalmente se tomaron las 

dimensiones de los dos tipos de polen. 

La viabilidad de los granos de polen así como los datos morfométricos 

florales fueron evaluados en las muestras obtenidas 

en las dos primeras colectas, mientras que con la tercera colecta 

se evaluó la receptividad del estigma. 

Para validación de las diferencias entre las medidas se utilizó 

el análisis de varianza de una vía (ANOVA), el nivel de significación 

se consideró 0.05. 

Resultados 

En el periodo de estudio se hicieron viajes en abril, mayo, 

agosto y septiembre a los hábitats de K. weberbaueri observando 

siempre plantas en floración por lo que se podría señalar que 

florece durante todo el año, aunque durante los meses de abril y 

mayo había mayor número de plantas en floración, también se 

observó que el perianto de las flores maduras presentaban variabilidad 

de tonalidades, que se mostraban en tonalidades entre 

verde amarillento a fucsia muy intenso. Así mismo, cada planta 

reproductiva presentaba generalmente una sola flor o yema floral, 

muy raras veces se observaron plantas con dos flores (Fig. 2). 

Características de la flor y desarrollo floral de K. weberbaueri.- 

Al inicio del estudio las yemas florales tuvieron una 

50 

Longitud de la flor (mm) 

45 

40 

35 

30 

25 

20 

Yema 

Antesis 

Flor abierta 

(Fa) 

Flor madura 

(Fm) 

Inicio de senescencia 

Senescencia 

15 

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 

Días después de iniciada la evaluación 

Figura 3. Desarrollo floral de Krapfia weberbaueri. Cada segmento indica la variación de la longitud de la flor y la duración en cada estadio. 


235

Roca et al. 

Figura 4. Encubrimiento de las anteras sobre el gineceo, desde la etapa de flor en antesis (A), flor abierta (B) y flor madura (C) con dehiscencia 

de las anteras y liberación de los granos de polen. 

Figura 5. Vista superficial del ginóforo (A) y en sección longitudinal (B) en una flor en maduración. Glándulas nectaríferas se ubican en la 

base cuneada de la cara interna de cada pétalo, detrás y hacia la base de las escamas de color rojo intenso (Figura 6). Estas producen néctar 

a partir de la etapa de flor madura hasta inicio de flor senescente. El periodo de producción del néctar coincide con receptividad de estigma 

que dura 4 días. 

Figura 6. Detalles de escamas en la base cuneada de los pétalos (A -flecha), se observa la producción del néctar en la etapa de flor madura 

(B) las glándulas nectaríferas, ver flecha (C) y lugar donde se deposita el néctar (D). 

236 



Figura 7. Receptividad del estigma evaluado con H 2 

O 2 

en las diferentes etapas de desarrollo floral: (A) Flor en antesis (B), flor abierta, (C) 

flor madura, (D) flor en inicio de senescencia y (E) flor senescente, de Krapfia weberbaueri. 


237

Roca et al. 

longitud entre 24 y 32 mm, y que se incrementaron hasta 47 

mm al final del estudio. El proceso de desarrollo, desde antesis a 

inicio de la dispersión de frutos, se completó en 21 días, siendo 

13 días el periodo entre la antesis y el inicio de senescencia 

floral (Fig. 3). 

Se observó el desplazamiento de las anteras hacia el ápice 

cubriendo la superficie de la mayoría de los pistilos, paralelo 

con la dehiscencia de las anteras y la liberación de los granos 

de polen (Fig. 4). En la flor con perianto totalmente abierto, 

la longitud de la teca fue de 2.9 mm y del filamento 5.9 mm. 

Las flores presentaron más de 100 anteras de color amarillo 

intenso y pistilo verde oscuro, este último en algunos casos 

presento un color rojo intenso en la parte apical y verde en la 

parte basal. El ginóforo presentaba color rojo intenso y en corte 

longitudinal de la flor se observó como una zona libre entre la 

región estaminal y carpelar (Fig. 5). 

Receptividad del estigma y liberación de los granos de 

polen.- La receptividad del estigma en el estadio de flor en 

antesis fue coincidió con el momento en que se inició la dehiscencia 

de las anteras y liberación de los granos de polen en 

los estambres ubicados en la base del androceo. En cambio, la 

receptividad se incrementó en la flor abierta, siendo máxima 

en estadio de flor madura (con mayor diámetro de apertura 

floral) coincidiendo con la total dehiscencia longitudinal de 

los estambres y la máxima liberación de los granos de polen. 

En el periodo de flor madura los filamentos de las anteras se 

elongaron y cubrieron la mayoría de los estigmas del gineceo 

mientras que en el inicio de la senescencia disminuyo la receptividad 

del estigma. Además, se observó que los pistilos que no 

llegaron a desarrollar aquenios (óvulos abortivos) todavía reaccionaban 

al peróxido de hidrógeno indicando que presentaban 

receptividad (Fig. 7 y 8). 

La dehiscencia y la liberación de los granos de polen de los 

estambres ubicados en la base del androceo se inició en la etapa 

de flor en antesis, cuando sucede también la elongación de los estambres 

sobre la gran mayoría de los estigmas, lo que se incrementa 

en la flor madura. En la flor madura se produce la dehiscencia 

y liberación total de los granos de polen de todos los estambres. 

En la flor madura pudimos observar abundantes ácaros y 

áfidos que se desplazaban por el gineceo dispersando grandes 

cantidades de granos de polen que portan en su cuerpo (Figs. 

9 A, B , C y D). 

Figura 8. Formación de los aquenios (A). En (B) detalle de aquellos 

con desarrollo normal (flecha rojo) y aquenios abortivos (flecha 

celeste). 

La viabilidad de los granos de polen fue la siguiente, en 

agosto 2008, los granos fértiles tuvieron 37.7 µm de diámetro 

en promedio con 78% de viabilidad y para granos no fértiles 36 

µm de diámetro. Mientras para mayo 2009, los granos fértiles 

tuvieron 37.75 µm de diámetro con 97% de viabilidad y los no 

fértiles con 30.3 µm de diámetro. 

Al comparar los diámetros de los granos de polen de 2008 y 

2009, no se encontró diferencias significativas para los granos 

fértiles (ANOVA), pero sí para los granos no fértiles del 2009 

(con diámetro menor) lo cual podría tener relación con el mayor 

Tabla 1. Variables evaluadas durante el estudio del desarrollo reproductivo de Krapfia weberbaueri 

Colecta 

2008 agosto 2009 mayo Sig 0.05%. 

N°de pistilos/flor 442 ±33.33 1015 ±5.07 ** 

N° aquenios/flor 280 ±10.80 769 ±9.22 ** 

Fertilización efectiva % 64.8 75.7 ns 

N°de estambres/flor 300 ±34.71 345 ±16.35 ns 

Long estambre mm 8.9 ±0.19 9.6 ±0.14 ** 

Diámetro fértiles µm 37.7 ±0.69 37.75 ±0.57 ns 

Granos de polen 

Diámetro no fertiles µm 35.95 ±0.90 30.3 ±0.94 ** 

Fértiles % (N°) 78 (2208) 96.7 (4042) ** 

No Fértiles % (N°) 22 (622) 3.3 (136) ** 

238 



Figura 9. Los estambres con dehiscencia (A) y liberación de los granos de polen (B). Se incluye vista ampliada de presencia de ácaros (C y D). 

porcentaje de los granos fértiles para ese año lo cual afectaría el 

tamaño de los no fértiles. 

En las muestra recolectada en agosto 2008, el número promedio 

de estambres por flor fue de 300, con longitud promedio 

de 8.9 mm, y en las muestras de mayo 2009, se tuvo un número 

promedio de 345 estambres por flor, con longitud promedio 

de 9.6 mm. Una observación adicional realizada en septiembre 

2009, cuando las condiciones climáticas mejoraban, determino 

un promedio de 323 estambres por flor con 8.9 mm longitud en 

promedio (Tabla 1). Las anteras fueron de color amarillo intenso, 

bitecadas, basifijas con dehiscencia longitudinal. 

El gineceo es apocárpico con pistilos de color verde oscuro, 

arreglados sobre el ginóforo. El ovario es unilocular y uniovular 

que termina en un estigma sésil. Se encontró para agosto 2008 

un promedio de 442 pistilos por flor. Con pistilos de longitud 

y diámetro en promedio (a nivel del ovario) de los siguiente, 

flor en antesis 1.6 x 0.5 mm, en madura de 2.6 x 1.1 mm y flor 

en senescencia de 2.7 x 1.5 mm. En mayo de 2009 las flores 

tenían un promedio de 1015 pistilos, las diferencias entre las 

dos colectas eran estadísticamente significativas. 

Fruto es un aquenio de color verde oscuro a guinda que 

se dispersa apenas senescen los pétalos. En agosto 2008 los 

aquenios tuvieron en promedio de 2.7 x 1.5 mm de diámetro 

y el número promedio de aquenios por flor y por planta fue 

280 (los restantes fueron abortivas), por lo que la fertilización 


efectiva fue de 63.3%. En mayo de 2009 el número de aquenios 

por flor y planta fue de 769 aquenios equivalente al 75.8% de 

fertilización efectiva. 

En general los valores para las variables evaluadas fueron 

mayores para mayo 2009 excepto para la variable diámetro de 

grano de polen fértil que no presenta diferencia significativa. 

Discusión 

Las diferencias encontradas para la mayoría de los caracteres 

florales entre las dos fechas evaluadas (Tabla 1), mayo 2009 

(término del periodo de lluvias) y agosto de 2008 (estación 

seca sin precipitaciones), podrían estar más relacionados con 

las diferencias en temperatura y humedad en dichas fechas, 

que al efecto de la altitud señalado por Cursach y Rita (2012). 

También, en general las condiciones climáticas tendrían un 

mayor efecto sobre el desarrollo floral y el éxito reproductivo 

de K. weberbaueri, más que las condiciones de fertilidad y de 

contenido de agua del suelo como ocurre con otras especies 

(Timmerman-Erskine & Boyd 1999). 

Cabe resaltar que, aunque los caracteres N° de pistilos/flor 

y N° de frutos/flor muestran diferencias significativas entre las 

fechas, la fertilización efectiva no es significativamente diferente, 

lo cual podría indicar condiciones de estabilidad de su hábitat. 

Se ha señalado que las especies bajo condiciones extremas 

como las altoandinas muestran principalmente mecanismos de 

autopolinización aunque también invierten buena proporción 

239

Roca et al. 

de su energía en la producción de néctar y grandes cantidades de 

polen destinados a la atracción de los polinizadores lo cual podría 

disminuir mucho el recurso energético para la fecundación 

de sus óvulos (Arroyo 1988). En nuestro estudio encontramos 

casos de autopolinización lo que ocurren cuando se desplaza el 

androceo sobre el gineceo durante el periodo de maduración y 

liberación de granos de polen. Además, el hecho de que las flores 

de K. weberbaueri son de gran tamaño, con colores intensos y 

con buena cantidad de polen y néctar, favorece la presencia de 

ácaros y áfidos en la planta (Torres et al. 2007) quienes, con 

su desplazamiento dentro de la flor, donde son frecuentes y de 

moderada abundancia, cumplirían el rol de polinizadores pese a 

cualquier otro impacto negativo que podrían estar ocasionando 

a la planta (Powell et al. 2011). 

Por último, puede observarse que K. weberbaueri puede estar 

en floración en cualquier momento del año y por lo tanto tener 

una importante producción de semillas, aspecto trascendente 

para la especie porque luego de su fructificación sucede la muerte 

del individuo, sin embargo es necesario determinar el éxito de 

las semillas y su real aporte a la probabilidad del establecimiento 

de nuevos individuos. 


Expresamos nuestra gratitud al Consejo Superior de Investigación 

de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 

por el financiamiento parcial del presente estudio a través del 

proyecto de investigación del profesor Asunción Cano (Estudio 

N°0910001161). Así mismo a la Dra. Mónica Arakaki por su 

apoyo y al Blgo. José Roque Gamarra por la elaboración del 

mapa de las localidades del estudio. 


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240 



Parámetros reproductivos de Hypsiboas punctatus en el extremo sur de su área de distribución 



Parámetros reproductivos de Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Anura: Hylidae) en 

el extremo sur de su área de distribución 

Reproductive parameters of Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Anura: Hylidae) in the south 

limit of its distribution area 

Carolina E. Antoniazzi 1 , Romina Ghirardi 1,2 , Javier A. López 1,3 , Andrea P. Armando 1,3 

1 Instituto Nacional de Limnología (CONICET-UNL). 

Ciudad Universitaria, Paraje el Pozo S/N, (3000) Santa 

Fe, Argentina. 

2 Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Católica 

de Santa Fe (UCSF). Echagüe 7151, (S3004JBS) Santa 

Fe, Argentina. 

3 Departamento de Ciencias Naturales, Facultad de Humanidades 

y Ciencias, Universidad Nacional del Litoral 

(UNL). Paraje el Pozo S7N, (3000) Santa Fe, Argentina. 

Correo electrónico de los autores: 

Email Carolina Antoniazzi: caroantoniazzi@gmail.com 

Email Romina Ghirardi: romighirardi@yahoo.com.ar 

Email Javier López: jalopez@inali.unl.edu.ar 

Email Andrea Armando: andre_armando@hotmail.com. 

*Corresponding author: Carolina E. Antoniazzi. caroantoniazzi@gmail.com. 

Instituto Nacional de Limnología 

(CONICET-UNL). Ciudad Universitaria, Paraje el Pozo, 

(3000) Santa Fe, Argentina. 

Citación: 

Antoniazzi C.E., R. Ghirardi, J.A. López, A.P. Armando. 

2014. Parámetros reproductivos de Hypsiboas punctatus 

(Schneider 1799) (Anura: Hylidae) en el extremo sur de 

su área de distribución. Rev. peru. biol. número especial 

20(3): 241 - 244 (Marzo 2014) 

Resumen 

Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) posee una amplia distribución en Sudamérica, a lo 

largo de un gradiente ambiental y latitudinal (tropical/templado), por lo que las condiciones 

que enfrentan sus poblaciones difieren significativamente. Hasta el momento, solamente se 

conocen los parámetros reproductivos de esta especie en regiones tropicales, por lo que en 

el presente trabajo se estudió una población de una región templada para evaluar si existen 

diferencias. Los individuos estudiados resultaron ser de menor tamaño que los de poblaciones 

tropicales. El tamaño y peso de los machos no se correlacionaron con el volumen testicular. En 

cambio, el tamaño y el peso de las hembras se correlacionaron positivamente con su fertilidad. 

No se encontraron cuerpos grasos desarrollados en las hembras pero sí en los machos. Los 

resultados obtenidos sugieren que existe una variabilidad en los parámetros reproductivos 

de H. punctatus que puede estar relacionada tanto a un fenómeno de plasticidad fenotípica 

como de diferenciación genética entre poblaciones distantes. Esto sería una de las claves que 

permitiría a esta especie prosperar en diferentes ecosistemas con distintas características y 

presiones ambientales. 

Palabras clave: Hypsiboas punctatus, parámetros reproductivos; variabilidad de caracteres 

de historia de vida. 

Abstract 

Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) has a wide distribution in South America, throughout 

a latitudinal and environmental gradient (tropical/temperate), thus, supporting significantly 

different pressures among populations. Until now, only tropical populations’ reproductive 

parameters have been recorded. Then, our goal was to study reproductive parameters on a 

population inhabiting a temperate climate region to evaluate differences with those inhabiting 

tropical regions. Studied frogs were smaller than those from tropical regions. There was no 

correlation between weight and size of males and their testicles volume. Conversely, females’ 

weight and size was positively correlated to their fertility. Fat bodies were developed in males 

but absent in females. When compared with other studies, our results showed the variability 

in reproductive parameters of H. punctatus between tropical and temperate regions. This variability 

could be the result of phenotypic plasticity and/or genetic differentiation between distant 

populations. This variability may be one of the keys that allow H. punctatus to thrive in diverse 

ecosystems with different characteristics and environmental pressures. 

Keywords: Hypsiboas punctatus; reproductive parameters; life history traits variability. 


Aceptado: 23/11/2013 


Introducción 

Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Fig. 1) se distribuye desde el océano Atlántico 

hasta la cordillera de los Andes y desde las cuencas de los ríos Orinoco y Amazonas, 

hasta latitudes templadas a través del valle aluvial del río Paraná en Argentina (La 

Marca et al. 2010). Es un depredador generalista que se alimenta principalmente de 

dípteros (López et al. 2002, López 2009) y, en la llanura de inundación del río Paraná 

concentra su actividad entre diciembre y abril, durante la temporada de lluvias y de 

mayores temperaturas (López et al. 2011). 

El modo de reproducción y variables reproductivas de una especie resulta de una 

interacción entre condicionantes de su entorno (clima y otros parámetros ambientales, 

relación con otras especies, etc.) y la herencia de su historia evolutiva (Crump 1982, 






241

Antoniazzi et al. 

transcurso de no más de una hora posterior a la eutanasia. En el 

laboratorio fueron pasados a alcohol 70% para su conservación 

definitiva (McDiarmid 1994, Angulo et al. 2006). Los ejemplares 

se encuentran depositados en la colección de referencia del Laboratorio 

de Herpetología del Instituto Nacional de Limnología 

(Acrónimo: HP1 a HP47). 

Figura 1. Individuo adulto de Hypsiboas punctatus. 

Figure 1. Adult of Hypsiboas punctatus. 

Morrison & Hero 2003). Por lo que los estudios sobre la historia 

natural de los anfibios deben considerar al organismo en relación 

al ambiente donde desarrolla sus actividades (Crump 1982). 

Crump (1974) describió los parámetros reproductivos de 

poblaciones de H. punctatus que habitan en una región tropical, 

al margen de un tributario del río Amazonas, al este de 

Ecuador. El límite sur de la amplia distribución de esta especie 

(11.306.927 km 2 ) se encuentra sobre la planicie de inundación 

del río Paraná en Argentina (Fig. 2), donde el clima es 

templado y de lluvias estacionales (Panigatti et al. 1981); estas 

condiciones son diferentes a las que afrontan las poblaciones 

de la región tropical. Por este motivo, el presente trabajo tiene 

como objetivo estudiar los parámetros reproductivos de una 

población de H. punctatus que habita una región templada, 

en el límite sur de su área de distribución, y discute las diferencias 

respecto a los valores registrados para las poblaciones 

de climas tropicales. 


Durante el 4 y 5 de abril de 2004 se colectaron 47 especímenes 

de H. punctatus (6 machos y 41 hembras) en una 

laguna semipermanente de la llanura aluvial del río Paraná 

Medio, en la isla Sirgadero (31°38’55”S, 60°40’47”W) (Provincia 

de Santa Fe, Argentina). La región presenta un clima 

subhúmedo-húmedo, mesotermal, con una marcada estación 

lluviosa en verano. La temperatura media anual es de 18 °C 

(máximas de 44 °C y mínimas de 7 °C). La precipitación media 

anual oscila entre 900 y 1000 mm (Panigatti et al. 1981). Al 

momento de los muestreos la laguna se encontraba cubierta 

de macrófitas sobre las que se hallaron los anfibios capturados 

(principalmente Eichhornia crassipes, Ludwigia peploides), y 

rodeada por un cortaderal (Cortaderia selloana) y un bosque 

hidrófilo (Salix humboldtiana, Tessaria integrifolia, Enterolobium 

contortisiliquum y Erithrina crista-galli como especies 

arbóreas dominantes). 

Los anfibios se capturaron manualmente, realizando una 

búsqueda activa de ejemplares durante dos horas a partir del 

crepúsculo. Los especímenes capturados fueron inmediatamente 

sacrificados mediante la aplicación de un anestésico de uso humano 

(benzocaína) sobre la piel de la cabeza y vientre, y fijados 

in situ con una solución al 10% de formalina amortiguada en el 

Dentro de las primeras 48 horas de captura, en el laboratorio, 

en todos los especímenes se midió la longitud hocico-cloaca 

(LHC) con un calibre digital (0.01 mm de precisión) y se 

registró el peso (P) con una balanza de precisión (0.00001g). 

En las hembras se pesaron las gónadas (PO) y se determinó 

el complemento ovárico (CO: número de óvulos maduros) 

utilizando un microscopio estereoscópico. El criterio utilizado 

para definir óvulos maduros fue el grado de pigmentación de 

los mismos (Martori et al. 2005), los óvulos inmaduros se observan 

como una masa blanca indiferenciada, mientras que los 

maduros son de color negro. Se midió el diámetro de los óvulos 

maduros (DO), se estimó el factor de tamaño ovárico (FTO= 

CO*DO/LHC; Duellman & Crump 1974) y se calculó el esfuerzo 

reproductivo (ER= PO/(P-PO)*100; Prado & Haddad 

2005). En los machos se midió el largo (L) y ancho (A) de los 

testículos para estimar su volumen (VT) utilizando la fórmula 

del esferoide (VT= 4/3*π*L/2*(A/2) 2 ; Martori et al. 2005). En 

ambos casos las medidas se tomaron bajo lupa con un calibre 

digital (0.01 mm de precisión). 

La energía almacenada en los cuerpos grasos, es utilizada 

durante el periodo reproductivo para el crecimiento de testículos 

y ovarios (Tsiora & Kyriakopoulou-Sklavounou 2002, Martori 

et al. 2005). Por esta razón, cuando estuvieron presentes, se 

Figura 2. Distribución de Hypsiboas punctatus. El triángulo señala la 

ubicación de la población de clima templado aquí analizada y círculo 

la de la población de clima tropical estudiada por Crump (1974). 

Figure 2. Hypsiboas punctatus distribution. Triangle tag the location of 

population of temperate climate herein analyzed while circle mark the 

location of the population of tropical climate studied by Crump (1974). 

242 


Parámetros reproductivos de Hypsiboas punctatus en el extremo sur de su área de distribución 

Tabla 1. Variables reproductivas de Hypsiboas punctatus en la población de clima templado aquí analizada (n♀: 41; n♂: 6) y en la población 

de clima tropical estudiada por Crump (1974) (n♀: 20; n♂: 10); ( * ) : n=15. Entre paréntesis se brinda el rango de las variables. 

Table 1. Reproductive variables of Hypsiboas punctatus population of temperate climate herein analyzed (n♀: 41; n♂: 6) and the population 

of tropical climate studied by Crump (1974) (n♀: 20; n♂: 10); ( * ) : n=15. Variables ranges are presented within parenthesis. 

Variables Antoniazzi et al. Crump (1974) 

LHC♀ 26.14 ± 1.88 mm (22.67 – 31.13) 37.2 (35 – 41) 

LHC♂ 25.50 ± 2.06 mm (23.33 – 29.14) 36.4 (33 – 40) 

P♀ 1.40 ± 0.38 g (0.71 – 2.24) 

P♂ 1.15 ± 0.54 g (0.72 – 2.22) 

PO 0.09 ± 0.07 g (0.01 – 0.3) 

CO 154.51 ± 73.23 (14 – 364) 324.6 (230 – 430) 

DO 0.87 ± 0.14 mm (0.42 – 1.40) ( 

* ) 1.2 (1 – 1.5) 

FTO 7.2 13.09 

ER 106.33 

VT 0.80 ± 0.52 mm 3 (0.29 – 1.72) 

pesaron los cuerpos grasos (PCG) con una balanza de precisión 

(0.00001 g). Finalmente, entre los parámetros medidos se realizaron 

correlaciones lineales de Pearson o Spearman, según las 

características de los datos. 

Resultados y discusión 

En el 46.34% de las hembras se contabilizaron más de 

150 óvulos maduros, en el 48.78% entre 50 y 150 y sólo dos 

ejemplares (4.88%) tuvieron menos de 50. Ninguna presentó 

cuerpos grasos desarrollados. La Tabla 1 resume los valores de las 

variables reproductivas analizadas en este trabajo y se informan 

los datos una población estudiada por Crump (1974) en la Amazonía 

Ecuatoriana (Fig. 2). El tamaño y el peso de las hembras 

se correlacionaron positivamente con la fertilidad (utilizando 

CO, DO y PO como indicadores de la misma) (Tabla 2). En 

Crump (1974) el LHC♀ vs CO también se correlacionaron 

positivamente (r= 0.367; p

Antoniazzi et al. 

La relación inversa entre el tamaño de los cuerpos grasos y el 

tamaño ovárico ha sido reportada para anfibios tanto de regiones 

templadas como tropicales (Martori et al. 2005, Prado & 

Haddad 2005, Quiroga & Sanabria 2012), por lo que el avanzado 

estado reproductivo de las hembras podría ser la causa de 

ausencia de reservas lipídicas en los ejemplares aquí estudiados 

(Tsiora & Kyriakopoulou-Sklavounou 2002). Para los machos se 

ha sugerido una relación inversa al de las hembras, con cuerpos 

grasos crecientes hacia el período reproductivo, debido a que en 

la época de apareamiento los machos se encuentran vocalizando 

y dedican poco tiempo a la alimentación, debiendo poseer sus 

reservas energéticas altas para afrontar esta actividad (Quiroga 

& Sanabria 2012). 

Los resultados obtenidos permiten sugerir que H. punctatus 

posee una variabilidad de sus caracteres de historia de vida a lo 

largo de su amplia área de distribución, que pueden deberse tanto 

a una plasticidad fenotípica como al resultado de una diferenciación 

genética entre poblaciones muy distantes, que habitan desde 

regiones tropicales hasta templadas. Esta variabilidad sería una 

de las claves que permitiría a esta especie prosperar en diferentes 

ecosistemas con distintas características y presiones ambientales. 


Agradecemos a Pablo A. Scarabotti por su colaboración en 

las diferentes etapas del trabajo. Este estudio fue realizado con el 

apoyo de becas del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas 

y Técnicas (CONICET, Argentina) a C. E. Antoniazzi, 

R. Ghirardi y J. A. López. 

Contribución de los autores 

CEA: idea y diseño, análisis e interpretación de los datos, escritura 

del trabajo, aprobación final del trabajo para publicación. 

RG: idea y diseño, adquisición de datos, análisis e interpretación 

de los datos, escritura del trabajo, aprobación final del trabajo 

para publicación. JAL: idea y diseño, análisis e interpretación 

de los datos, escritura del trabajo, aprobación final del trabajo 

para publicación. APA: escritura del trabajo, aprobación final 

del trabajo para publicación. 


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Reptilia. 23: 269-280. 

244 



citogenética de la tara Caesalpinia spinosa 



Caracterización citogenética de Caesalpinia spinosa de los distritos de Tarma y Palca (Junín) 


Alberto López 1 , María Siles-Vallejos 1 , Diego Orihuela 1 , José Linares 1 , Shary Ríos 1 , Yvette Villafani 1 , 

Misael Guevara 2 , Olga Bracamonte 2 

1 Laboratorio de Genética. Facultad de Ciencias Biológicas. 

Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 

Lima, Perú. 

2 Laboratorio de Citogenética, Facultad de Ciencias 

Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 

Apartado 110058, Lima 11, Perú. 

Email Alberto López: alopezs@unmsm.edu.pe 

Email María Siles: mariansi@hotmail.com 

Email Diego Orihuela: diego.orihuela tacuri@hotmail.com 

Email José Linares: jrlinaresgonzales@gmail.com 

Email Shary Ríos: shary49cam@hotmail.com 

Email Yvette Villafani: yv.villafanib@yahoo.es 

Email Misael Guevara: mguevarap@unmsm.edu.pe 

Email Olga Bracamonte: obracamonteg@hotmail.com 

Resumen 

Se analizan los cromosomas somáticos de Caesalpinia spinosa (Feuillée ex Molina) Kuntze 

“Tara”, de poblaciones silvestres de las localidades de Huinco y Palca (Junín). La especie 

es diploide (2n=24). Los cromosomas son de pequeño tamaño. Aunque los cariotipos de 

ambas localidades muestran el mismo número cromosómico, se encontraron diferencias en 

los parámetros morfológicos de los mismos, siendo la fórmula cariotípica para la localidad 

de Huinco: 6m + 6 sm y para la localidad de Palca: 5m + 7 sm. 

Palabras clave: cromosoma; submetacéntrico; metacéntrico; metafase; cariotipo. 

Abstract 

Somatic chromosomes of Caesalpinia spinosa (Feuillée ex Molina) Kuntze, “Tara”, wild populations 

of Huinco and Palca (Junín) regions were studied. The specie were diploid (2n=24). 

Chromosomes were small. The karyotypes showed the same chromosome number, they found 

differences in morphological parameters of the same, with the karyotype formula for the town 

of Huinco: 6m + 6 sm and the town of Palca: 5m + 7 sm. 

Keywords: chromosome; submetacentric; metacentric; metaphase; karyotype. 

Citación: 

López A., M. Siles-Vallejos, D. Orihuela, J. Linares, S. Ríos, 

Y. Villafani, M. Guevara, O. Bracamonte. 2013. Caracterización 

citogenética de Caesalpinia spinosa de los distritos 

de Tarma y Palca (Junín). Rev. peru. biol. número especial 

20(2): 245 - 248 (Marzo 2014) 


Aceptado: 28/09/2013 


Introducción 

La “tara” (Caesalpinia spinosa (Feuillée ex Molina) Kuntze) es una especie nativa 

del Perú, que presenta sustancias útiles en las industrias farmacéutica, alimentaria, 

cosmética entre otras. Sin embargo, a pesar de su importancia no se cuenta aún con 

su caracterización cromosómica. 

La citogenética es una herramienta muy útil para determinar esterilidad, reducción 

de la fertilidad, muerte embrionaria, caracterización de especies, variedades y razas, 

estudios filogenéticos, estudios ecotoxicológicos, entre otros. Asimismo, los análisis 

cariotípicos y citogenéticos han aportado de manera significativa tanto en la clasificación 

taxonómica como en el estudio evolutivo de especies vegetales que se desarrollan 

a diferentes altitudes (Baeza 2009). 

El objetivo del presente trabajo fue analizar y comparar características citogenéticas 

de C. spinosa silvestres de las localidades de Huinco, distrito de Tarma; y Palca, distrito 

de Palca. 


La colecta del material biológico se realizó en poblaciones no cultivadas de C. spinosa 

de la provincia de Tarma, Región Junín, en las localidades de Huinco (3140 m 

de altitud), perteneciente al distrito de Tarma, y Palca (2791 m de altitud), ubicada 

en el distrito de Palca; colectándose vainas de Caesalpinia spinosa de cinco árboles por 

localidad y 8 vainas por árbol. Se entregaron ejemplares al Museo de Historia Natural 

de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos para su identificación y deposito 

(0152-USM-2011). 






245

López et al. 

Figura 1 a y b. Metafases, localidad Palca, 2n= 24 cromosomas. 

Para el análisis citogenético, se escogieron 33 semillas al 

azar por cada localidad, las que se sometieron a un proceso de 

escarificación durante la noche inmediatamente después de la 

recolección. Luego se hicieron germinar las semillas hasta obtener 

raíces de 1 cm de longitud, las cuales se fijaron en etanol-ácido 

acético (3:1), se sumergieron en una solución de HCl 1N para 

limpiar el citoplasma, se ablandaron en una solución Targa (acido 

acético, ácido láctico y agua destilada en proporciones 9:5:6) y, 

finalmente, se tiñeron con orceína lacto acética 2% seguido del 

squash para la obtención de las placas metafásicas mitóticas. Se 

fotografiaron las mejores placas metafásicas, utilizándose un 

microscopio con cámara fotográfica incorporada, a un aumento 

de 1000X. Se realizó el análisis de las microfotografías para 

determinar el número y morfología cromosómica. Para determinar 

el tamaño de los cromosomas se hicieron las mediciones 

relativas de cada uno de ellos y se considero el promedio para 

así poder generalizar. Se utilizaron 15 placas metafasicas de cada 

localidad para el análisis. La clasificación de los cromosomas se 

hizo siguiendo la nomenclatura de Levan (1964). 

Resultados 

El número diploide hallado para Caesalpinia spinosa fue de 

2n=24 para ambas localidades (Figs 1 y 2). Sin embargo, a pesar 

de ser diploides, hemos observado algunas células poliploides 

(Fig 3). Los cromosomas son de pequeño tamaño (Tablas 1 

y 2), con una longitud relativa que varía de 0.46 a 0.87 para 

Huinco y de 0.52 a 1.16 para la localidad de Palca. Se observaron 

diferencias en la morfología de los cromosomas; encontrándose 

que en la localidad de Huinco el complemento presenta 6 pares 

metacéntricos y 6 pares submetacéntricos (6m + 6sm), siendo 

los pares 1, 3, 4, 8, 10 y 12 metacéntricos y los pares 2, 5, 6, 

7, 9 y 11 submetacentricos (Tabla 1, Fig 4); en tanto que en la 

localidad de Palca el complemento tiene 7 pares metacéntricos 

y 5 pares submetacéntricos (7m + 5sm), siendo los pares 1, 2, 

5, 7, 10, 11, 12 metacéntricos y los pares 3, 4, 6, 8 y 9 son 

submetacéntricos (Tabla 2, Fig 5). 

Figura 2. Metafase localidad de Huinco, 2n= 24 cromosomas 

Figura 3. Placas metafásicas evidenciando poliploidía. 

246 


citogenética de la tara Caesalpinia spinosa 

Tabla 1. Morfología cromosómica de la localidad de Huinco. Longitudes 

relativas de xp = longitud del brazo p; xq = longitud del brazo 

q; c = centrómero; IPC = índice de proporcionalidad centromérica. 

PAR xp xq c IPC TIPO 

1 0.34 0.53 0.87 0.39 m 

2 0.25 0.51 0.76 0.32 sm 

3 0.29 0.44 0.73 0.39 m 

4 0.31 0.36 0.67 0.46 m 

5 0.21 0.40 0.61 0.34 sm 

6 0.22 0.37 0.59 0.37 sm 

7 0.18 0.37 0.55 0.32 sm 

8 0.25 0.30 0.55 0.45 m 

9 0.18 0.36 0.54 0.33 sm 

10 0.25 0.28 0.53 0.47 m 

11 0.17 0.32 0.49 0.34 sm 

12 0.18 0.28 0.46 0.39 m 

Tabla 2. Morfología cromosómica de la localidad de Palca. Valores 

relativos, xp = longitud del brazo p; xq = longitud del brazo q; c = 

centrómero; IPC = índice de proporcionalidad centromérica. 

PAR xp xq c IPC TIPO 

1 0.57 0.59 1.16 0.49 m 

2 0.40 0.61 1.01 0.40 m 

3 0.29 0.58 0.87 0.33 sm 

4 0.29 0.54 0.83 0.35 sm 

5 0.36 0.43 0.79 0.40 m 

6 0.29 0.51 0.80 0.36 sm 

7 0.29 0.48 0.77 0.38 m 

8 0.27 0.48 0.75 0.36 sm 

9 0.27 0.47 0.74 0.36 sm 

10 0.28 0.45 0.73 0.38 m 

11 0.28 0.37 0.65 0.43 m 

12 0.24 0.28 0.52 0.46 m 

Figura 4. Cariotipo localidad de Huinco 

Figura5. Cariotipo de la localidad de Palca 


247

López et al. 

Discusión 

Ha sido reportado que las especies de Caesalpinoideae presentan 

una gran variación en el número somático, con 2n=14, 16, 

20, 22, 24, 26 y 28 cromosomas; existiendo series poliploides 

para el caso del género Caesalpinia (2n=12 y 2n=24) (Poggio 

et al. 2008). En nuestro caso, para las localidades de Huinco 

y Palca, hemos encontrado 2n=24 cromosomas, este número 

de cromosomas coincide con el que presenta la mayoría de las 

especies del género las cuales muestran x=12. Silva et al (2012) 

describen la morfologia cromosómica de cinco especies de 

Caesalpinia del Brasil, reportando un numero diploide de 24, 

nuestras observaciones son concordantes con el mismo valor. 

Las especies de Caesalpinia que han sido estudiadas citogenéticamente 

tienen cromosomas pequeños (Cangiano & Bernardello 

2005, Zanin & Cangiano 2001) lo que concuerda con nuestras 

observaciones. La fórmula cariotípica muestra únicamente cromosomas 

metacécntricos y submetacéntricos (m y sm), lo cual 

es muy común dentro de la subfamilia Caesalpinioidae (Souza 

et al, 2004). 

Gómez et al. (2003) señalan que el análisis de cariotipos 

entre poblaciones de plantas de la misma especie, desarrolladas 

en áreas distintas, puede ayudar a entender los aspectos 

evolutivos, ecológicos y de adaptación. En nuestro estudio, el 

análisis citogenético de las dos poblaciones estudiadas revela 

diferencias en el cariotipo; aunque ambas poblaciones presentan 

2n=24 cromosomas y en ambos casos los complementos están 

compuestos por cromosomas metacéntricos y submetacéntricos, 

encontramos diferencias en cuanto al número de metacéntricos 

y submetacéntricos. Así, en la localidad de Huinco la fórmula 

es 6m + 6sm mientras que en Palca la fórmula cariotípica es 

7m + 5sm evidenciando la presencia de dos citotipos diferentes. 

Encontramos que hay polimorfismo interpoblacional en los 

cromosomas 2,3,4,5,7,8 y 11 entre ambas localidades. Nuestras 

observaciones indican que a pesar de poseer el mismo nivel de 

ploidía, existen diferencias en los parámetros morfológicos del 

cariotipo, lo que indica que el cariotipo de C. spinosa no es uniforme 

entre poblaciones. Al respecto, Tapia-Pastrana et al. (2012) 

refieren que la posibilidad de encontrar citotipos con formulas 

cromosomicas diferentes estaría relacionada con la distribución 

ecológica y geográfica de la planta y que la divergencia en los 

genomas ocurriría como una consecuencia adaptativa a condiciones 

ambientales específicas. Esto mismo ha sido observado en 

otras monocotiledoneas como Alstroemeria hookeri L. asi como 

en Crotalaria (Fabaceae) (Baeza et al. 2006). 


El presente trabajo fue financiado por el Vice rectorado de 

Investigación de la UNMSM como parte del Proyecto Multidisciplinario 

PEM 2009B03. 


Baeza C. M., O. Schrader, E. Ruiz. & Negritto M. 2006. Análisis comparativo 

del cariotipo en poblaciones de Alstroemeria ligtu subsp ligtu y 

A. ligtu subs. siimsi (Alstroemeriaceae) de Chile. Darwiniana 44 

(2): 313-318. 

Baeza C., E. Ruiz & M. A. Negritto. 2009. Importancia del cariotipo en 

la taxonomía y evolución del género Chaetanthera (asteraceae): 

evidencias preliminares para especies que crecen en Chile. Gayana 

Bot. 66(1): 50-57, 2009 

Cangiano M. A. and G. Bernardello. 2005. Karyotype analysis in Argentinean 

species of Caesalpinia (Leguminosae). Caryologia, Vol. 58, nº 3:262- 

268. DOI: 10.1080/00087114.2005.10589461 

Gómez-Acevedo S.L. & F. Tapia-Pastrana. 2003. Estudio genecológico en Prosopis 

laevigata, Acacia farnesiana y Acacia schaffneri (leguminosae). 

Darwiniana 41(1-4): 47-54. 

Levan A., K. Fredga & A. Sandberg. 1964. Nomenclature for centromeric 

position on chromosomes. Hereditas, 52: 201–220. DOI: 

10.1111/j.1601-5223.1964.tb01953.x 

Silva P., M. Magalhaes, & R. Xavier. 2012. Karyomorphology of Caesalpinia 

Species (Caesalpinioideae: Fabaceae) from Caatinga and Mata Atlantica 

Biomes of Brazil. Journal of Plant Studies,1: 82-91. DOI: 

10.5539/jps.v1n2p82 

Souza M. G. C. and A. M. Benko-Iseppon. 2004. Cytogenetics and chromosome 

banding patterns in Caesalpinioideae and Papilionioideae 

species of Pará, Amazonas, Brazil. Botanical Journal of the Linnean 

Society, 144, 181-191. DOI: 10.1111/j.1095-8339.2003.00230.x 

Poggio L., S.M. Espert & R.H. Fortunato. 2008. Citogenética evolutiva en 

Leguminosas americanas. Rodriguésia 59 (3): 423-433. 

Tapia-Pastrana F., P. Mercado-Ruaro & S. Gómez-Acevedo. 2012.Contribución 

a la citogenética de Tamarindus indica (Leguminosae: Caesalpinioideae). 

Act. Bot. Mex. 98: 99-110. 

Zanin L. & M. Cangiano. 2001. El cariotipo de Hoffmannseggia glauca (FA- 

BACEAE). Darwiniana 39 (1-2): 11 – 13. 

248 


Rev. peru. biol. 20(3): 249 (Marzo 2014) 

Depositorios de la especie Coccidophilus lozadai 



Depositorios del material tipo de la especie Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012 (Insecta: 

Coleoptera: Coccinellidae) 

Depositories of the type material of the species Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012 (Insecta: 

Coleoptera: Coccinellidae) 

Pedro W. Lozada 1 y Juana Aliaga-Camarena 2 

(1) Laboratorio de Entomología, Centro de Diagnóstico 

de Sanidad Vegetal, SENASA, Av. La Molina 1915, Lima 

12, y Departamento de Entomología, Museo de Historia 

Natural, UNMSM, Av. Arenales 1256, Apartado 14-0434, 

Lima 14, PERU. 

Email Pedro Lozada: plozada@senasa.gob.pe 

plozada57@hotmail.com 

(2) Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional 

Santiago Antúnez de Mayolo, Apartado Postal 75, Huaraz, 

PERU. 

Email Juana Aliaga: jualica@hotmail.com 

Resumen 

Se designan 6 paratipos de la especie Coccidophilus lozadai González, 2012, como depositados 

en la colección del Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA), Lima, Perú. El 

holotipo y demás paratipos están depositados en el Museo de Historia Natural (MUSM) de 

Lima y en el Museo de Historia Natural de Washington D.C. (USNM), EE UU. 

Palabras clave: Depositorio; paratipos; SENASA; Lima; Perú. 

Abstract 

6 paratypes of the species Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012, are deposited in the collection 

of Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA), Lima, Peru. The holotype and remaining 

paratypes are deposited in the Museo de Historia Natural (MUSM), Lima, Peru, and National 

Museum of Natural History (USNM), Washington, D.C., USA. 

Keywords: Depositorie; paratypes; SENASA; Lima; Peru. 

Citación: 

Lozada P.W. & J. Aliaga-Camarena. 2014. Depositorios del 

material tipo de la especie Coccidophilus lozadai Gonzalez, 

2012 (Insecta: Coleoptera: Coccinellidae). Rev. peru. biol. 

20(3): 249 (Marzo 2014) 

El género Coccidophilus fue descrito por Brèthes en el año 1905, con su especie tipo 

C. citrícola Brèthes, 1905, por designación original. Este género se encuentra distribuido 

en América del Norte, el Caribe y América del Sur (González 2012). González (2012) 

describió la especie Coccidophilus lozadai de material proveniente de Lambayeque y 

La Libertad, Perú. En ese artículo, el material tipo fue depositado en la colección del 

Museo de Historia Natural (MUSM), Lima, Perú. En esta nota científica, se asignan 

6 paratipos a la colección del Laboratorio de Entomología del Servicio Nacional de 

Sanidad Agraria (SENASA) de Perú, cuyo acrónimo, SENASA, es designado en esta 

oportunidad, debiendo ser usado en adelante para citar esta colección. Como datos 

complementarios no reportados en la descripción de esta especie, se encontró en un 

fichero elaborado por Juan Wille en la colección de insectos del SENASA información 

biológica referente a observaciones realizadas en el campo, como sigue: los espécimenes 

citados de La Libertad corresponden a la ciudad de Trujillo; un espécimen se cita como 

“predatando queresas de naranjo fuertemente infestados”; dos espécimenes se citan como 

“predatando Lepidosaphes en cítricos. En gran cantidad”; otros cuatro espécimenes se 

citan como “asociado con Orthezia en plantas de sapote silvestre”. 


González G. 2012. Revisión de los géneros Coccidophilus Brèthes y Microweisea Cockerell (Coleoptera: 

Coccinellidae: Microweiseinae) en América del Sur. Bol. SEA 51: 61-88 


Aceptado: 23/12/2013 






Rev. peru. biol. 20(3): 249 (March 2014) 

249

Lozada & Aliaga-Camarena 

250 

Rev. peru. biol. 20(3): 249 (Marzo 2014)

Colofón 

251

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La Revista Peruana de Biología es publicada en abril. agosto y diciembre y esta dedicada a la publicación de los resultados de 

investigaciones originales e inéditas en las áreas de Biodiversidad, Biotecnología, Manejo ambiental, Ecología y Biomédicas. Los 

trabajos recibidos son evaluados por árbitros según criterios internacionales de calidad, creatividad, originalidad y contribución al 

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252

PAUTAS PARA LA PRESENTACIóN DE LOS ARTíCULOS EN LA REVISTA PERUANA DE BIOLOGíA 

Diciembre 2013 

Identidad y propósito 

La Revista Peruana de Biología es una publicación científica arbitrada producida por el Instituto de Investigaciones de 

Ciencias Biológicas Antonio Raimondi, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú; 

es publicada tres veces al año y los números aparecen en abril, agosto y diciembre, tanto en su versión impresa como online. 

La Revista Peruana de Biología publica artículos completos, originales e inéditos que contribuyan al conocimiento 

científico en los temas de biodiversidad, biotecnología, ecología, manejo ambiental y biomedicina elaborados según las 

normas indicadas en las presentes pautas. 

Evaluación de los trabajos 

Los trabajos que cumplan con las pautas solicitadas serán incluidos en el la lista para evaluación. Un editor será encargado 

de conducir el proceso enviando el trabajo a árbitros. El trabajo será evaluado según criterios internacionales de calidad, 

creatividad, originalidad y contribución al conocimiento. El artículo será aceptado luego del proceso de revisión por 

árbitros y de realizadas las modificaciones indicadas. El artículo aceptado será editado y una prueba enviada al autor para 

la aceptación y consentimiento de publicación. 

Sumisión para edición y Licencia de uso 

1. Consideraciones sobre la edición 

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de la Prueba Final del trabajo. 

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acceso libre a su contenido bajo el principio de: hacer disponible gratuitamente la investigación al público fomenta un 

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declaración jurada y debe afirmar que: 

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en las PAUTAS PARA PRESENTACIÓN DE TRABAJOS. 

b. Garantizan que todos los datos contenidos son exactos y todos los hechos declarados proceden de observaciones o 

investigaciones realizadas por los autores. 

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ejecución y análisis y se responsabilizan por el trabajo publicado. 

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253

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Cartas de presentación 

Las coordinaciones se llevaran entre el Editor Jefe y el responsable del trabajo. El trabajo será acompañado de una carta 

del responsable y dirigido al Editor Jefe, indicando haber leído las presentes Pautas para Presentación de Trabajos; 

asegurando la originalidad, carácter inédito y completo del trabajo presentado y su disposición para que sea revisado y 

editado. Esta carta tendrá carácter de declaración jurada según lo estipulan las directivas del Vicerrectorado de Investigación 

de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos referidos a las autorías de trabajos publicados. Cada autor del trabajo 

deberá de enviar por correo electrónico una Carta de Presentación del trabajo dando las garantías mencionadas 

anteriormente. 

Presentación de los trabajos 

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Los trabajos pueden ser presentados en idioma inglés o castellano. 

Los autores deben asegurarse que las ecuaciones matemáticas sean editables, no imágenes. 

El trabajo debe tener tres partes básicas: (a) identificación, (b) cuerpo y (c) literatura citada 

(a) La identificación debe contener: 

• Título (en inglés y castellano), escrito en altas y bajas, con una longitud no mayor a 150 caracteres, incluidos 

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(b) El cuerpo del trabajo. Variará según la sección de la Revista: 

Trabajos originales. Son artículos primarios, inéditos que exponen los resultados de trabajos de investigaciones 

completas y finales, y que constituyen aportes al conocimiento. Aquí también se incluyen las descripciones de 

especies nuevas, que cumplan con las Normas y características de la información en los trabajos (ver abajo). 

El cuerpo está organizado en: Introducción, Material y métodos, Resultados y discusión (Resultados, 

Discusión). Debe abarcar un texto promedio de 30 páginas, las ilustraciones (Tablas y Figuras) deben ser sólo 

las necesarias para una mejor exposición de los resultados. 

La introducción: proporciona el contexto y permite a los lectores que no son del campo comprender el 

propósito y la importancia del estudio. Define el problema abordado y por qué es importante. Presenta 

la literatura mas relevante sobre el problema. Señala las controversias o desacuerdos relevantes en el 

tema. Concluye con una declaración del objetivo general del trabajo y un comentario de los resultados 

y conclusión. 

Material y métodos: debe proporcionar suficiente detalle como para permitir a otros investigadores 

replicar completamente su estudio. Los protocolos de los nuevos métodos deben ser incluidos en detalle. 

Si los materiales, métodos y protocolos están bien establecidos, los autores pueden citar artículos en los 

que esos protocolos se describen en detalle, pero la presentación deberán incluir información suficiente 

para ser entendido independiente de estas referencias. Protocolos detallados de los métodos nuevos o no 

muy conocidos pueden incluirse en Apéndices como información de apoyo. Las investigaciones con 

254

Citas en el texto 

humanos, tejidos humanos, animales de laboratorio deben incluir declaraciones de los procedimientos 

de ética pertinentes y la aprobación de los comités de bioética. En los casos pertinentes, los trabajos con 

colectas deben declarar los permisos de las autoridades correspondientes. 

Resultados y discusión: Esta sección puede presentarse como dos secciones separadas, es decir una sobre 

Resultados y otra sobre Discusión. En general esta sección se pueden dividirse en subsecciones más 

especificas, según sea apropiado. El lenguaje debe ser claro y conciso. En general, estas secciones deben 

describir los resultados de los experimentos, la interpretación de estos resultados, y las conclusiones que 

se pueden extraer. Los autores deben explicar cómo los resultados se refieren a la hipótesis presentada 

como la base del estudio y proporcionar una explicación sucinta de las implicaciones de los resultados, 

y en particular establecer la relación con los estudios previos relacionados y posibles direcciones futuras 

para la investigación. 

Notas científicas. Son artículos primarios, se incluyen aquí: (a) Trabajos de interés taxonómico como reportes 

de distribución, inventarios taxonómicos, notas taxonómicas, con la información necesaria para cubrir los 

estándares de Darwin core. También se incluyen resultados de ensayos de laboratorio, cuya información es de 

interés para la comunidad científica. La extensión del texto no será mayor de 15 páginas. El cuerpo de la Nota 

puede estar organizada: Introducción, Material y métodos, Resultados y Discusión y Agradecimientos. 

Comentarios. Son artículos donde se discute y exponen temas o conceptos de interés para la comunidad científica. Se 

incluyen aquí ensayos de opinión y monografías. Deben contar con las siguientes partes: cuerpo del comentario 

y Agradecimientos. Todo el artículo debe tener un texto promedio de 10 páginas. 

Comentarios de Libros. Son artículos que comentan recientes publicaciones de interés para la comunidad científica. 

Puede solicitarse al Comité Editor la elaboración de un comentario enviando dos copias del libro a la dirección 

postal de la Revista Peruana de Biología. 

Las citas en el texto deben incluir el apellido del autor y año sin comas que los separen. Ejemplos: 

... (Carrillo 1988) o «... de acuerdo a Sánchez (1976) …» 

Cuando dos autores son citados en el texto se usa la conjunción “y”: 

…la concentración de nitrógeno fue medida según Rios y Castro (1998)…. 

Cuando son citados entre paréntesis se usa el símbolo “&”: 

…de nitrógeno se midió por el método colorimétrico (Rios & Castro 1998)…. 

Citas de varias referencias entre paréntesis, van separadas por comas, en secuencia de importancia: 

… la diversidad de especies es considerada elevada (Simoniz 1968, Perez 2012, Aquino 1988). 

Si hay varios trabajos de un autor en un mismo año, se citará con una letra en secuencia adosada al año, ejemplo: 

... Castro (1952a) ... (Rojas 2000a, 2003c) 

Autores institucionales (FAO, MINAM, etc.) se citan con sus siglas o iniciales y las fechas (por ejemplo: FAO 2009, 

MINAM 2012), en las referencias se colocaran estas iniciales y en paréntesis el significado. 

Citas de leyes y normas: se citan indicando su categoría y el número. Por ejemplo: "tal como se indica en la Ley N.° 

26821..." 

Cuando hay más de dos autores se citará al primer autor y se colocará “et al.” sin itálicas: (e.g. Smith et al. 1981) o “… 

según Smith et al. (1981)”). 

Citas directas o literales se deben hacer entre comillas dentro del texto cuando son menos de 40 palabras, idiomas 

diferentes al texto en itálicas, indicar página del extracto: 

… en cambio Robert Francis lo describe equivocadamente “con costillas radiales muy poco insinuadas cruzadas por 

estrías concéntricas de crecimiento muy finas lo que le da aspecto liso” (Francis 1971, p: 234). 

Citas directas o literales de más de 40 palabras, deben separarse del texto en un párrafo sangrado, ejemplo: 

… Accioly (2003), señala que: 

“In many animal groups, early sex identification has enormous biotechnological value 

and is related with management practices that increase production. Moreover, dimorphic 

characters are useful in the taxonomic and ecological aspects. The sexual dimorphism is 

associated with functional structures related to adaptation in this species … Subsequent 

researches based on these data will enable to estimate sexual differentiation during early 

ontogenetic phases subsidizing protocols to obtain monosex stocks with significant impact 

on commercial production” (p: 20). 

(c) La Literatura Citada incluirá todas las referencias citadas en el texto dispuestas solamente en orden alfabético y sin 

numeración. La cita se inicia con el apellido del primer autor a continuación, sin coma, las iniciales del nombre separadas 

255

con puntos y sin espacio. El segundo y tercer autor deben de tener las iniciales de los nombre y a continuación el apellido. 

El último autor se diferenciara por que le antecede el símbolo &. Si hubiesen más de tres autores pueden ser indicados con 

la abreviatura et al. Los nombres de las publicaciones periódicas (revistas) pueden ir en la abreviatura oficial considerada 

según su código ISSN. El código DOI debe ser colocado al final de la referencia. En la literatura citada solamente se usa 

letra tipo normal, no itálica, no versalita. Ejemplos: 

Andrén H., & H. Andren. 1994. Effects of Habitat Fragmentation on Birds and Mammals in Landscapes with 

Different Proportions of Suitable Habitat: A Review. Oikos 71(3):355-366. doi:10.2307/3545823. 

Dormann C., J.M. McPherson, M.B. Araújo, et al. 2007. Methods to Account for Spatial Autocorrelation in 

the Analysis of Species Distributional Data: a Review. Ecography 30(5):609–628. doi:10.1111/j.2007.0906- 

7590.05171.x. 

Buhrnheim C.M. & L.R. Malabarba. 2006. Redescription of the type species of Odontostilbe Cope, 1870 

(Teleostei: Characidae: Cheirodontinae), and description of three new species from the Amazon basin. 

Neotrop. ichthyol. 4 (2): 167-196. http://dx.doi.org/10.1590/S1679-62252006000200004 

Laub B.G. & M.A. Palmer. 2009. Restoration Ecology of Rivers, in: G.E. Likens (Ed.), Encyclopedia of Inland 

Waters. Academic Press, Oxford, pp. 332–341. dx.doi.org/10.1016/B978-012370626-3.00247-7 

Rohde K. 2002. Ecology and biogeography of marine parasites, in: Advances in Marine Biology. Academic Press, 

pp. 1–83. dx.doi.org/10.1016/S0065-2881(02)43002-7, 

McLachlan A. & A.C Brown. 2006. The Ecology of Sandy Shores. Elsevier Science & Technology Books. 373pp. 

Crawford D.J. 1983. Phylogenetic and systematic inferences from electrophoretic studies. In: S.D. Tanksley and 

T.J. Orton, eds. Isozymes in Plant Genetics and Breeding, Part A. Elsevier, Amsterdam. Pp. 257-287. 

Pianka E.R. 1978. Evolutionary ecology. 2nd edn. New York: Harper & Row. 

Carroll S.B. 2005. Evolution at Two Levels: On Genes and Form. PLoS Biol 3(7): e245. . Acceso 31/07/2005. 

FDA (Food and Drug Administrations). 2001. Fish and Fishery Products Hazards and Controls Guidance. 

Third Edition June 2001. (acceso 24/12/07). 

CONAM. 2005. (en línea). Informe nacional del estado del ambiente 2001. . Acceso 31/07/2005. 

IMARPE. 2002. (en línea). Segundo informe del BIC José Olaya Balandra. Paita – Salaverry. 24 febrero- 05 

Marzo 2002. . Acceso 01/07/2005. 

Solari S.A. 2002. Sistemática de Thylamys (mammalia: didelphimorphia: marmosidae). Un estudio de las 

poblaciones asignadas a Thylamys elegans en Perú. Tesis, Magíster en Zoología, mención Sistemática y 

Evolución. Facultad de Ciencias Biológicas Universidad Nacional Mayor de San Marcos. . Acceso 31/07/2005 

Ley N°. 26821. 1997. Ley orgánica para el aprovechamiento sostenible de los recursos naturales. Compendio de 

la legislación ambiental peruana. Volumen I. Marco normativo general. Ministerio del Ambiente –MINAM, 

Editado por la Dirección General de Políticas, Normas e Instrumentos de Gestión Ambiental del Ministerio 

del Ambiente. Actualizado al 30 de junio de 2010. pp: 85-91 

DS N°. 012-2001-PE. 2001. Aprueban el Reglamento de la Ley General de Pesca, Ministerio de la Producción. 

13 de marzo de 2001. El Peruano Normal Legales: 199905-199921 

DS N° .179-2004-EF. 2004. Texto único ordenado de la ley del impuesto a la renta. 08 de diciembre de 2004. 

El Peruano Normas Legales: 281912-281940 

Las citas de artículos en prensa deben incluir el volumen, el año, el nombre de la revista y el DOI respectivo; de lo contrario 

deberán ser omitidos. 

No se aceptan las citas a resúmenes de eventos académicos (congresos y otros). 

Normas y características de la información en los trabajos 

La Revista Peruana de Biología se guía de los conceptos éticos y buenas prácticas de publicación mencionados en 

los lineamientos del Committee on Publication Ethics (COPE - http://publicationethics.org/). Respecto de la autoria, 

la Revista Peruana de Biología asume la veracidad de la carta de presentación y de la carta de consentimiento de 

publicación. 

Cuando el artículo exponga sobre experimentos con humanos y animales, los procedimientos deben de ceñirse a la 

Declaración de Helsinki de 1975 y a las leyes peruanas vigentes (Ley 27265). Deben ser presentadas las declaraciones 

pertinentes y mencionadas explicitamente en el texto. 

Cuando el artículo exponga sobre nuevas especies, nuevos registros, ampliaciones biogeográficas o inventarios taxonómicos 

debe tomarse en cuenta la información requerida en el Darwin Core. También debe indicarse el depósito de los ejemplares 

en una institución taxonómica reconocida, comprometida en la preservación del material, que permita el libre acceso al 

256

material, publique constantemente la relación del material que posee en custodia y que brinde la información necesaria 

sobre los ejemplares cuando sea requerido. No son consideradas las colecciones particulares. 

Los nombres científicos del género y especie irán en cursivas. La primera vez que se cita un organismo deberá hacerse con 

su nombre científico completo (género, especie y autor); posteriormente podrá citarse solamente la inicial del nombre 

genérico y el nombre específico completo. Para el caso de las abreviaturas de autores en nombres botánicos pueden referirse 

al International Plant Names Index (IPNI - http://www.ipni.org/), la base de datos TROPICOS (http://www.tropicos.org/) 

y AlgaeBase (http://www.algaebase.org/). 

Las localidades y puntos de colecta deben ser referenciadas geográficamente, usando coordenadas cartesianas 

sexagesimales, tanto en el texto como en las ilustraciones. 

Deben usarse los símbolos de las unidades del Sistema Internacional de Medidas. Si fuera necesario agregar medidas en otros 

sistemas, las abreviaturas correspondientes deben ser definidas en el texto. 

Debe usarse el punto decimal (ejemplo correcto: 0.5; incorrecto: 0,5). Las cifras deben mantenerse juntas (ejemplo correcto: 

1994, 30302; incorrecto: 1,994; 30 302). 

Ilustraciones 

Las ilustraciones deben ser creación de los autores, en caso contrario deben indicar procedencia y créditos. 

Las Figuras (mapas, esquemas, diagramas, dibujos, gráficos, fotos, etc.) serán numeradas correlativamente con números 

arábigos; de igual manera las Tablas. Las leyendas de las Figuras y Tablas deben presentarse a continuación del texto y ser 

suficientemente explicativas, y con toda la información necesaria para que se puedan entenderse. 

Las fotos y dibujos escaneados deben guardarse en un archivo TIFF, tamaño del original a 300 dpi. Los gráficos estadísticos 

y diagramas deben de enviarse en formato nativo editable (achivo.xls, archivo.svg, archivo.eps), no como imágenes (JPGE, 

TIFF, PNG). Los mapas pueden enviarse en formatos SHP, o imágenes de alta resolución. 

Pueden enviar las fotos de cámaras digitales mayor a 3 Mpixel en su formato de salida. Otros archivos de imágenes en TIFF, 

BMP, JPGE de alta resolución y tamaño, y figuras vectoriales en Ai, EPS. 

Formatos procedentes de software como R, en formatos editables de PDF, EPS (Postscript). Costos por ilustraciones a color 

serán asumidos por el autor. 

Presentación de los archivos 

Los archivos deben presentarse por separado, esto es: 

• Un archivo con el texto y leyendas en formato MS-Word. 

• Otro archivo para las tablas en MS-Excel o como tablas en MS-Word. 

• Otros archivos en formatos nativos, no como imágenes insertadas o pegadas en una hoja de MS-Word o Excel. 

Consentimiento de publicación 

El autor responsable recibirá una prueba del trabajo en formato PDF, el cual deberá revisarlo cuidadosamente, y consultarlo con los 

otros autores. Una vez solucionados errores de edición, el autor responsable enviará una carta o email confirmando que el trabajo 

fue revisado por todos los autores y están conformes, y mencionar explícitamente su consentimiento para la publicación del trabajo 

como artículos de la Revista Peruana de Biología y están de acuerdo con la LICENCIA de uso. 

Este es un requisito para la publicación del trabajo. Con la prueba, el autor responsable recibirá el costo por publicación en los 

casos que corresponda. 

Costo por publicación y ejemplares para el autor responsable 

El costo por publicación se refiere a gastos extras por manipulación, edición extraordinaria (v.g. elaboración de ilustraciones, 

traducciones, etc.) y por impresión de ilustraciones a color. El pago por publicación se realiza en las oficinas de la Facultad de 

Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, o en coordinación con el Editor Jefe. 

El autor principal podrá solicitar cuatro ejemplares de la revista en las oficinas de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad 

Nacional Mayor de San Marcos. 

Comité Editor 

Email: editor.revperubiol@gmail.com 

Correo postal: 

Leonardo Romero (Editor Jefe) 


UNMSM-FCB 

Apartado 11-0058 

Lima 11 

Perú 

257

258

Rev. peru. biol. ISSN 1561-0837 



CONTENIDO 


205 Agrotransformación y evaluación de la resistencia a Phytophthora infestans en Solanum tuberosum L. variedad Désirée 

Agro-transformation and evaluation of resistance to Phytophthora infestans in Solanum tuberosum L. variety Désirée 

Jeanette Orbegozo, María Lupe Román, Cristina Rivera, José Carlos Tovar, Willmer Pérez, Soledad Gamboa, 

Greg Forbes, Jan Kreuze y Marc Ghislain 

211 Identificación de genes relacionados a sequía en papas nativas empleando RNA-Seq 


Yerisf Torres, Roberto Lozano, Carlos Merino y Gisella Orjeda 

215 Diversidad genética de papas nativas (Solanum spp.) conservadas en cultivares nativos del Perú 


Julián Soto, Tulio Medina, Yeny Aquino, Rolando Estrada 

223 Efecto de Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” en el sistema reproductor masculino del ratón (Mus musculus) 

Effect of Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” in the male system reproductive of mouse (Mus musculus) 

Láyonal G. Acosta, Jonathan Vásquez, Víctor Núñez, José Pino 1 , Betty Shiga 

227 Efecto ahorrativo de la proteína usando niveles altos de energía y obtención de la relación optima energía digestible/proteína 

digestible en dietas para el crecimiento de Oreochromis niloticus (L) 

Protein-sparing effect with high energy levels and obtaining the optimum digestible energy/digestible protein ratio in growth 

diets to Oreochromis niloticus (L.) 

Felix Walter Gutierrez, Máximo Quispe, Luz Valenzuela 

233 Desarrollo reproductivo de Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) en condiciones controladas de luz y temperatura 

Reproductive development of Krapfia weberbaueri (Ranunculaceae) under controlled conditions of light and temperature 

Beatriz Roca, Mery Suni, Asunción Cano 


241 Parámetros reproductivos de Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Anura: Hylidae) en el extremo sur de su área de distribución 

Reproductive parameters of Hypsiboas punctatus (Schneider 1799) (Anura: Hylidae) in the south limit of its distribution area 

Carolina E. Antoniazzi, Romina Ghirardi, Javier A. López, Andrea P. Armando 

245 Caracterización citogenética de Caesalpinia spinosa de los distritos de Tarma y Palca (Junín) 


Alberto López, María Siles-Vallejos, Diego Orihuela, José Linares, Shary Ríos, Yvette Villafani, Misael Guevara, Olga 

Bracamonte 

249 Depositorios del material tipo de la especie Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012 (Insecta: Coleoptera: Coccinellidae) 

Depositories of the type material of the species Coccidophilus lozadai Gonzalez, 2012 (Insecta: Coleoptera: Coccinellidae) 

Pedro W. Lozada y Juana Aliaga-Camarena

Revista Peruana Biología

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