AC 2005 Vol-1.pdf - Cecmed - Infomed
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148 Trabajo experimental<br />
físico-químicas y microbiológicas [3-4].<br />
En la Tabla 1, se relacionan las<br />
especificaciones físico-químicas y<br />
microbiológicas de las aguas purificadas y<br />
para inyección [5].<br />
Los métodos generales descritos en la<br />
literatura [6-7], son considerados<br />
apropiados para el establecimiento del<br />
número de Unidades Formadoras de<br />
colonias (UFC) observadas durante el<br />
monitoreo microbiológico del agua. Sin<br />
embargo, es reconocido que otras<br />
combinaciones de medio, tiempo y<br />
temperatura de incubación pueden<br />
ocasionalmente, resultar en número<br />
mayores de UFC.<br />
Los períodos de incubación prolongados<br />
que son usualmente requeridos en algunos<br />
métodos alternativos disponibles,<br />
presentan como desventajas, que pueden<br />
sobrestimar los conteos de UFC obtenidas.<br />
Luego, el agua purificada debe ser<br />
evaluada para la verificación de su calidad<br />
microbiológica. Tal verificación puede<br />
realizarse a través de diversos métodos de<br />
ensayo [8-9]. Es recomendable la<br />
utilización de métodos fáciles de<br />
cumplimentar, poco costosos y que<br />
permitan un excelente procesamiento de<br />
muestra como: Tubos múltiples o NMP,<br />
Método por placa vertida, Filtración por<br />
membrana.<br />
La toma de muestra es el primer paso a<br />
realizar para el análisis. Es fundamental<br />
una correcta toma de la misma, ya que aún<br />
disponiendo de recursos y técnicas más<br />
sensibles, si no se realiza una correcta<br />
toma de muestra, se llegarán a resultados<br />
no reales. Deben tenerse en cuenta los<br />
puntos a muestrear en el sistema que<br />
deben ser establecidos durante la<br />
validación [10]. La muestra debe ser<br />
tomada en un frasco estéril y en<br />
condiciones lo más asépticas posible, se<br />
debe dejar drenar de 3 a 5 minutos antes<br />
de tomar la muestra.<br />
El volumen de la muestra a tomar debe ser<br />
representativo, se recomienda un tamaño<br />
de muestra no menor de 150 mL, en caso<br />
de realizar la técnica de filtración por<br />
membrana, el volumen debe ser de 500<br />
mL.<br />
Una vez tomada la muestra, se debe<br />
procesar lo antes posible. Si es necesario,<br />
su conservación no debe exceder las 4<br />
horas a una temperatura de 2-10 0 C [4].<br />
El Método de tubos múltiples para el<br />
análisis de agua potable o agua de entrada,<br />
se recomienda para el análisis de aguas<br />
potables [3-4]. El mismo consiste en la<br />
determinación de la posible presencia de<br />
microorganismos coliformes en la fuente<br />
de abasto, ya que su presencia puede ser<br />
indicador de la existencia de patógenos.<br />
Dicho método consta de dos fases, una<br />
presuntiva y confirmativa. En la primera,<br />
son inoculados una serie de tubos que<br />
pueden ser 5 o 10 (si se quiere obtener<br />
mayor exactitud del estimado de<br />
coliformes en la muestra, debe usarse una<br />
serie de 10 tubos), conteniendo 10 mL de<br />
la muestra. Se incuba a 34-35 0 C de 24-48<br />
horas. Los tubos que presenten<br />
acumulación de gas en la campana durante<br />
este período pasarán a la fase<br />
confirmativa. En ésta se toma una asada de<br />
cada tubo con producción de gas y se<br />
inocula en un tubo conteniendo 10 mL de<br />
caldo Verde Brillante. Se incuba a 34-35<br />
0 C de 24-48 horas. Se observa si hay<br />
producción de gas en algún tubo por<br />
desplazamiento de líquido en la campana<br />
Durhams. Según el número de tubos que<br />
presenten crecimiento con producción de<br />
gas, se busca el resultado en la Tabla 2 de<br />
probabilidades.<br />
De igual forma, existen otros 2 métodos<br />
muy utilizados para realizar el control<br />
microbiológico del agua. Ellos son el