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148 Trabajo experimental
físico-químicas y microbiológicas [3-4].
En la Tabla 1, se relacionan las
especificaciones físico-químicas y
microbiológicas de las aguas purificadas y
para inyección [5].
Los métodos generales descritos en la
literatura [6-7], son considerados
apropiados para el establecimiento del
número de Unidades Formadoras de
colonias (UFC) observadas durante el
monitoreo microbiológico del agua. Sin
embargo, es reconocido que otras
combinaciones de medio, tiempo y
temperatura de incubación pueden
ocasionalmente, resultar en número
mayores de UFC.
Los períodos de incubación prolongados
que son usualmente requeridos en algunos
métodos alternativos disponibles,
presentan como desventajas, que pueden
sobrestimar los conteos de UFC obtenidas.
Luego, el agua purificada debe ser
evaluada para la verificación de su calidad
microbiológica. Tal verificación puede
realizarse a través de diversos métodos de
ensayo [8-9]. Es recomendable la
utilización de métodos fáciles de
cumplimentar, poco costosos y que
permitan un excelente procesamiento de
muestra como: Tubos múltiples o NMP,
Método por placa vertida, Filtración por
membrana.
La toma de muestra es el primer paso a
realizar para el análisis. Es fundamental
una correcta toma de la misma, ya que aún
disponiendo de recursos y técnicas más
sensibles, si no se realiza una correcta
toma de muestra, se llegarán a resultados
no reales. Deben tenerse en cuenta los
puntos a muestrear en el sistema que
deben ser establecidos durante la
validación [10]. La muestra debe ser
tomada en un frasco estéril y en
condiciones lo más asépticas posible, se
debe dejar drenar de 3 a 5 minutos antes
de tomar la muestra.
El volumen de la muestra a tomar debe ser
representativo, se recomienda un tamaño
de muestra no menor de 150 mL, en caso
de realizar la técnica de filtración por
membrana, el volumen debe ser de 500
mL.
Una vez tomada la muestra, se debe
procesar lo antes posible. Si es necesario,
su conservación no debe exceder las 4
horas a una temperatura de 2-10 0 C [4].
El Método de tubos múltiples para el
análisis de agua potable o agua de entrada,
se recomienda para el análisis de aguas
potables [3-4]. El mismo consiste en la
determinación de la posible presencia de
microorganismos coliformes en la fuente
de abasto, ya que su presencia puede ser
indicador de la existencia de patógenos.
Dicho método consta de dos fases, una
presuntiva y confirmativa. En la primera,
son inoculados una serie de tubos que
pueden ser 5 o 10 (si se quiere obtener
mayor exactitud del estimado de
coliformes en la muestra, debe usarse una
serie de 10 tubos), conteniendo 10 mL de
la muestra. Se incuba a 34-35 0 C de 24-48
horas. Los tubos que presenten
acumulación de gas en la campana durante
este período pasarán a la fase
confirmativa. En ésta se toma una asada de
cada tubo con producción de gas y se
inocula en un tubo conteniendo 10 mL de
caldo Verde Brillante. Se incuba a 34-35
0 C de 24-48 horas. Se observa si hay
producción de gas en algún tubo por
desplazamiento de líquido en la campana
Durhams. Según el número de tubos que
presenten crecimiento con producción de
gas, se busca el resultado en la Tabla 2 de
probabilidades.
De igual forma, existen otros 2 métodos
muy utilizados para realizar el control
microbiológico del agua. Ellos son el