AC 2005 Vol-1.pdf - Cecmed - Infomed

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Trabajo experimental
En este trabajo se presentan los resultados
obtenidos en la evaluación de los primeros
lotes de vacuna OPV, que fueron liberados
por la Autoridad Reguladora teniendo en
cuenta, además de la revisión de la
documentación presentada por los
fabricantes, los ensayos de control de la
calidad de este producto biológico.
Materiales y Métodos
Se evaluaron tres lotes de vacuna
antipoliomielítica oral, procedentes de la
firma Aventis Pasteur, con las
especificaciones mostradas en la Tabla 1.
Estos lotes se emplearon en las campañas
de vacunación de los años 2003 y 2004,
efectuadas en los meses de febrero y abril,
de acuerdo al esquema de vacunación
cubano.
Como material de referencia se utilizó el
lote U 6408, procedente de la firma
Aventis Pasteur, que fue caracterizado en
el laboratorio. Este material de trabajo fue
calibrado contra el el Primer Patrón
Internacional de Vacuna viva atenuada
contra poliovirus (Sabin) con las
siguientes especificaciones: No de lote:
85/659, codificación: Vpo/60/95. Los
límites establecidos para este lote son para
el componente polio 1 (6.19-6.79), polio 2
(5.41-5.82) y polio 3 (5.94 - 6.28) y en el
caso de la vacuna total (6.60-7.19) y en
termoestabilidad (6.29-6.87). El patrón se
mantuvo almacenado a -70º C hasta su
uso.
Se emplearon las siguientes las mezclas de
anticuerpos monoclonales (AcM): 425
(neutraliza poliovirus tipo 1), 267
(neutraliza poliovirus tipo 2) y 495
(neutraliza poliovirus tipo 3). Los AcMs
fueron diluídos (1/10), en medio MEM
suplementado con suero fetal bovino
(SBF) al 4%. Posteriormente, se
prepararon las mezclas de anticuerpos
(polio 1+ 2, polio 1+ 3 y polio 2+3) a V/V
y se conservaron a -70º C hasta su uso.
Como sistema celular se empleó la línea
celular transformada, de origen tumoral
Hep 2 C, variante Cincinnatti, derivada de
carcinoma laríngeo humano. Esta línea
integra el banco celular de trabajo del
laboratorio y la suspensión fue usada a una
concentración de 200 000 células /ml y en
el rango de 1-15 pases [6].
Las vacuna de referencia, anticuerpos
monoclonales, y la línea celular fueron
suministradas por el Instituto Nacional de
Control y Estándares Biológicos (NIBSC),
Inglaterra.
Para el control de calidad de los tres lotes
de OPV recibidos se realizó el ensayo de
potencia, identidad y termoestabilidad,
según describe la OMS. En este ensayo la
potencia de la vacuna oral contra la polio,
o sea, del contenido total y de los serotipos
individuales, es determinada a través de un
ensayo de neutralización “in vitro”
utilizando un sistema celular sensible para
el crecimiento de los virus. La prueba de
identidad se llevó a cabo para identificar
los serotipos individuales incluídos en la
vacuna, con las mezclas de anticuerpos
monoclonales específicos. Para la prueba
de termoestabilidad se incubaron las
muestras de vacuna durante 48 horas a 37º
C [6].
El cálculo del título viral se determinó
mediante el método de Spearman-Kaerber
y los resultados finales se expresaron
como la dosis que infecta el 50 % de los
pocillos inoculados (DICC 50 ), por dosis
humana de vacuna [6].
Como criterios de validez del ensayo se
tuvieron en cuenta que las monocapas
celulares fuesen confluentes y definidas al
7mo día en los controles celulares, que el
efecto citopático (ECP) del virus fuera
decreciente frente a diluciones crecientes
de la vacuna, que las diluciones de vacuna