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131 Trabajo experimental
Resultados
Evaluación y estandarización de la
Inmunogenicidad en conejos
La Tabla 1, “Desempeño de Vaxem – Hib
por Inmunogenicidad en conejos” refleja
que el método es capaz de detectar
diferentes respuestas ante esquemas
diversos.
Por otra parte, en la Fig. 1, puede
apreciarse que hay diferencias
significativas (por t student), en las
absorbancias medias entre los controles
negativos (definido en el gráfico sobre la
base del valor de corte) y las muestras
positivas de anticuerpo.
Mientras tanto, no hubo diferencia entre el
blanco (diluente de muestra) y el valor de
corte.
Los resultados del estudio de Robustez,
como parte importante del diseño de la
estandarización del método, se exponen a
continuación. La influencia sobre el
método del factor de dilución de los sueros
puede apreciarse en la Tabla 2. De ella, se
deriva que el factor de dilución óptimo de
los sueros de conejos para la
determinación de inmunogenicidad por
seroconversión es 1/50.
En la Tabla 3, se refleja la influencia de la
preparación y composición de algunas
soluciones, particularmente el diluente de
muestra, en los resultados obtenidos por
Inmunogenicidad. Como puede apreciarse,
la no presencia de sal disódica de EDTA o
su presencia en forma de ácido, afecta la
evaluación por ELISA de los sueros Hib
de conejos.
También, en la Tabla 4, se presenta la
influencia de otro factor (el lote de
conjugado y su dilución), sobre los
resultados de la Inmunogenicidad en
conejos:
Del estudio anterior se derivó que podían
utilizarse cualquiera de los 2 lotes de
conjugado, seleccionándose la dilución
1/10000 como óptima.
Por otra parte, la Fig. 2 muestra la
influencia del lote y proveedor del
recubrimiento para el ELISA (PRPalbúmina
de suero humano). Como resulta
evidente de su análisis, no existieron
diferencias entre el recubrimiento
suministrado por el NIBSC (National
Institute for Biological Standards and
Control) y el diseñado en el Centro de
Estudios de Antígenos Sintéticos de la
Universidad de la Habana. La dilución
óptima resultó ser 1 µg/mL.
Por otra parte, la Tabla 5, muestra que no
existen diferencias significativas en los
resultados derivados del estudio de
repetibilidad.
De igual modo, en la Tabla 6, se reflejan
los resultados del estudio de precisión
intermedia, donde tampoco se apreciaron
diferencias en los resultados obtenidos.
Implementación de ensayos para la
liberación de lotes de vacunas Hib
La Fig. 3, representa el comportamiento de
la Inmunogenicidad en conejos
(seroconversión), en ambas instituciones
para los primeros lotes de fabricación de
vacuna Quimi-Hib.
Como es apreciable, no existen diferencias
notables en los resultados de ambas
instituciones, en lo referente a los ensayos
biológicos utilizados para la liberación de
lotes de esta vacuna.
Discusión
Tomando en cuenta que la OMS
recomienda, dentro de las 6 funciones
básicas de un Sistema Regulador de
vacunas eficaz, que los ensayos de calidad
de los productores sean verificados por los
LNC a través de ensayos (antes de la
liberación de lotes), podrá comprenderse la
importancia de desarrollar métodos